Splicing

El transcrito primario o precursor del RNA es la molécula de RNA que resulta
directamente del proceso de transcripción.

En el RNA eucariótico y procariotico, el transcrito primario es diferente
La formación de mRNA eucariótico maduro a partir del pre-mRNA constituye un modelo ideal para
el procesamiento postranscripcional.
Sufre transformaciones como
• Adición de nucleótidos al extremo 5’

• Metilación
• Alargamiento de la cadena en el extremo
3’
• Eliminación de intrones en unión de
exones (Splicing)
Procesamiento del RNA mensajero
• Modificación del extremo 5’

• Metilación de la caperuza 5’
Los tres primeros nucleótidos son modificados por metiltransferasas (metilasas), que emplean S-adenosil-L-
metionina como coenzima donadora del grupo metilo.
Modificación del extremo 3’
Splicing
Las transcripciones primarias de los genes que

contienen intrones deben ser eliminados antes
de que puedan traducirse en proteínas.
El proceso por el cual los intrones se eliminan y

los exones se unen se llama corte y empalme (en
ingles splicing), convirtiendo el pre-ARNm en
ARNm maduro.
Secuencias que delimitan el intrón
La eliminación de un intrón está determinada por su secuencia, y no por su longitud.
Sólo intervienen tres secuencias específicas conocidas en su conjunto como sitios o centros de ayuste.
sitio de empalme 5’ sitio de ramificación sitio de empalme 3’

Spliceosome
Complejo macromolecular del tamaño

aproximado de un ribosoma denominada
ayustosoma (en ingles spliceosome).
Formado por asociación del pre-mRNA

con varias ribonucleoproteínas nucleares
pequeñas (snRNP, denominadas U1, U2,
U4, U5 y U6), constituidas cada una de
ellas a su vez por un RNA nuclear
pequeño (snRNA) y cerca de 10
proteínas.
Mecanismo de la reacción
• La primera reacción es desencadenada por el 2’-OH del
sitio de ramificación, actúa como un nucleófilo para
atacar al grupo fosforilo en sitio de empalme 5’.
• Como consecuencia de esta primera reacción, se

escinde el enlace fosfodiéster entre el azúcar y el
fosfato en la unión 5’ entre el intrón y el exón.
• El extremo 5’ liberado del intrón se une a la A dentro del

sitio de ramificación; un tercer fosfodiéster se extiende
desde el 2’-OH de ese A para crear una unión de tres
vías.
• En la segunda reacción, el exón 5’ invierte su función y

se convierte en un nucleófilo que ataca al grupo fosforilo
en el sitio de corte y empalme 3’
• Se unen los exones 5’ y 3’ y libera al intrón formando un

lazo (en inglés lariat).
Rutas del empalme (Splicing)
• El sitio de empalme 5’ es reconocido por el snRNP

de U1. U2AF está formado por dos subunidades:
(65) se une al tracto Py y (35) se une al sitio de
empalme 3’. La primera subunidad interactúa con
BBP (SF1) y ayuda a que la proteína se una al sitio.
• U2 snRNP luego se une al sitio de la rama, ayudado

por U2AF y desplazando BBP (SF1). Esta disposición
se llama complejo A.
• Reorganización del complejo A para reunir los tres

sitios de empalme: los snRNPs U4 y U6, junto con el
snRNP U5, se unen al complejo. En conjunto, estos
tres snRNP se denominan partículas tri-snRNP.
• U1 abandona el complejo y U6 lo reemplaza en el
sitio de empalme 5’.
• U4 se libera del complejo, permitiendo que U6

interactúe con U2. esta disposición, llamada el
complejo C, produce el sitio activo.
• La formación del sitio activo yuxtapone el sitio de
corte y empalme del pre-ARNm y el sitio de la
rama, facilitando la primera reacción de
transesterificación.
• La segunda reacción, entre los sitios de empalme

5’ y 3’, es asistida por el snRNP U5, que ayuda a
unir los dos exones.
• El último paso implica la liberación el producto de

ARN y los snRNP. Los snRNPs están unidos al lazo,
pero se reciclan después de la rápida degradación
de ese trozo de ARN.
Splicing alternativo
Permite obtener a partir de un transcrito primario de mRNA o pre-ARNm de manera alternativa para generar
dos o mas mRNA diferentes
Este proceso ocurre principalmente en eucariotas.

Pero en muchos casos, el proceso está regulado para garantizar que se fabriquen diferentes productos
proteínicos en diferentes tipos de células o en respuesta a diferentes condiciones.
Para un caso splicing alternativo, considere el gen de la troponina T de la proteína del músculo del
mamífero.

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El transcrito primario o precursor del RNA es la molécula de RNA que resulta

directamente del proceso de transcripción.

Sufre transformaciones como

• Adición de nucleótidos al extremo 5’

• Modificación del extremo 5’

Las transcripciones primarias de los genes que

El proceso por el cual los intrones se eliminan y

sitio de empalme 5’ sitio de ramificación sitio de empalme 3’

Complejo macromolecular del tamaño

Formado por asociación del pre-mRNA

• Como consecuencia de esta primera reacción, se

• El extremo 5’ liberado del intrón se une a la A dentro del

• En la segunda reacción, el exón 5’ invierte su función y

• Se unen los exones 5’ y 3’ y libera al intrón formando un

• El sitio de empalme 5’ es reconocido por el snRNP

• U2 snRNP luego se une al sitio de la rama, ayudado

• Reorganización del complejo A para reunir los tres

• U4 se libera del complejo, permitiendo que U6

• La segunda reacción, entre los sitios de empalme

• El último paso implica la liberación el producto de

Este proceso ocurre principalmente en eucariotas.

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