Expométodos

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Clasificacin de proteasas

Clase

Familia

Serina-proteasas

Serina-proteasas I

Cistenaproteasas

Serina-proteasas II
Cistena-proteasas

AsparticoAsparticoproteasas
proteasas
Metalo-proteasas Metalo-proteasas I
Metalo-proteasas II

Proteasa
representativa
Quimotripsina
Tripsina
Elastasa
Calicrena
(pncreas)
Subtilisina
Papana
Actinidina
Catepsinas A, B y H
del hgado de rata
Penicilopepsina
Renina
Carboxipeptidasa A
Bovina
Termolisina

Mtodos
espectrofotomtricos

Absorcin

Partes bsicas de un espectrofotmetro de absorcin.

Mtodos utilizados

Mtodo de Anson o mtodo de


hemoglobina.
Mtodo de Kunitz

Mtodo de Anson
Se hidroliza hemoglobina
desnaturalizada con la proteasa
deseada. La hemoglobina que no se
hidroliz se precipita con cido
tricloroactico (TCA).
A sobrenadante se le aade reactivo
fenlico de Folin-Ciocalteu.
Absorbancia se mide a 750 nm.

Fluorescencia

Esquema de un espectrofluormetro.

Bibliografa
Manjabacas Tendero Carmen, Anlisis
cintico de la activacin de
zimgenos (1995), Castilla, Espaa.
Universidad de Castilla- La mancha.

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