MATERIALES DE REFERENCIA CERTIFICADOS E INTERNOS

APLICACIONES
Ing. Gladys Chamorro Montes
L/O/G/O

Diciembre 2012

MATERIALES DE REFERENCIA (MR) Las referencias son la base de la metrologa. Medir es comparar y para ello es necesario disponer de referencias o patrones a los cuales recurrir para realizar las medidas. Cualquier medida debe, por tanto, tener su referencia. Este principio metrolgico general es vlido tambin en el mbito de los laboratorios analticos, aunque haya que reconocer que en ocasiones es difcil disponer de las referencias apropiadas.

MATERIALES DE REFERENCIA Uno de los principales parmetros a verificar en la validacin de un Mtodo analtico es la exactitud de los resultados proporcionados por dicho mtodo. La exactitud, suma de la veracidad y la precisin, se comprueba asegurando la trazabilidad de los resultados proporcionados por el mtodo analtico a una referencia. Por lo tanto, un elemento clave en el aseguramiento de la trazabilidad de los resultados es la utilizacin de una correcta referencia.

MATERIALES DE REFERENCIA

Un material de referencia, es el material o sustancia en el que uno o ms valores de sus propiedades son suficientemente homogneos y se encuentran suficientemente bien definidos como para permitir emplearlos en la calibracin de un instrumento, en la validacin de un mtodo analtico, o asignar valores a un material o sistema.
Gua ISO 30

MATERIAL DE REFERENCIA CERTIFICADO Material de Referencia, acompaado de un certificado, en el cual uno o ms valores de sus propiedades estn certificados por un procedimiento que establece su trazabilidad a una realizacin exacta de la unidad en la que se expresan los valores de la propiedad y para lo cul cada valor certificado se acompaa de una incertidumbre con la indicacin del nivel de confianza.

PATRON Material empleado como referencia para calibrar equipos de medida o contrastar la trazabilidad de las medidas.

Clasificacin Jerarquizada de los Patrones o Referencias

Kg MOL AMPERIO SEGUNDO

Masa de C-12

Nro. Avogadro
Faraday

Pesos atmicos Plata Met. Ultrapura

MAT. DE REF. PAT. PRIMARIOS

Patrones Operacionales SUSTANCIAS PURAS

PATRONES SECUNDARIOS

MRC-Puros MRC-Sintticos MRC-Matrz

MATERIALES DE REFERENCIA CERTIFICADOS (MRC)

MATERIALES DE REFERENCIA INTERNOS

Clasificacin Jerarquizada de los Patrones o Referencias

Desde el punto de vista de los laboratorios analticos, se pueden considerar 3 grandes grupos. - Patrones bsicos - Patrones qumicos - Patrones analticos Patrones bsicos y Patrones Qumicos Generales
Los patrones bsicos se corresponden con unidades bsicas del SI

Kg como unidad de masa Mol que se define en funcin del Kg como la cantidad de sustancia de un sistema que contiene tantas entidades elementales como tomos hay en 0.012 Kg de C-12. Amperio Unidad de intensidad de corriente elctrica. Segundo como la unidad de tiempo

Clasificacin Jerarquizada de los Patrones o Referencias

Los patrones qumicos son ampliamente aceptadas en el mundo qumico. El istopo C-12 sirve actualmente de referencia para establecer la escala de los pesos atmicos de la Tabla Peridica, que a su vez son referencias para numerosos clculos qumicos. Por otra parte , el nmero de unidades igual al nmero de tomos contenidos en 0.012 Kg de C-12 define exactamente al Numero de Avogadro. ( )

Clasificacin Jerarquizada de los Patrones o Referencias

Aunque estas referencias son muy tiles, su papel es ms bien general y su utilidad est habitualmente en los clculos. En cambio, son inadecuados como patrn de trabajo en los anlisis qumicos. Para ello, es mucho ms til utilizar los denominados patrones operacionales que es la plata metlica ultrapura y el faraday. Una plata de alta pureza (> 99.999 % ) que se utiliza para evaluar la pureza de otras sustancias y estandarizar disoluciones de reactivos qumicos. El faraday constituye una base ms estricta para un patrn operacional .

Clasificacin Jerarquizada de los Patrones o Referencias

Patrones analticos
Los patrones analticos. Son materiales empleados con mucha frecuencia en los laboratorios analticos. Existen 2 categoras especiales: - Patrones primarios - Patrones Secundarios

Patrones Primarios son materiales caracterizados por su homogeneidad, estabilidad. Las sustancias qumicas usadas como patrones primarios deben poseer una alta pureza y una composicin perfectamente definida.

Clasificacin Jerarquizada de los Patrones o Referencias

Patrones Primarios Estos materiales son importantes para establecer la trazabilidad de muchos resultados analticos y deben de reunir una serie de requisitos: - Obtenerse con facilidad, purificarse, secarse y conservarse en estado puro. - No alterarse en contacto con el aire (hidratacin, carbonatacin, oxidacin) al ser pesados o manipulados. - Su nivel de impurezas se podr comprobar con relativa facilidad, y no debe exceder generalmente del 0.02 % en peso. - Poseer preferiblemente un alto peso molecular, a fin de minimizar los errores de pesada. - Ser fcilmente solubles en agua o en el disolvente apropiado en las condiciones de trabajo.

Clasificacin Jerarquizada de los Patrones o Referencias

Patrones Secundarios Los MRC-matrz, en los que se certifican determinados componentes en matrices concretas (ya sea totalmente naturales o con los analitos aadidos), caen dentro de la categora de patrones secundarios, ya que la certificacin supone su contraste (generalmente mediante un ejercicio interlaboratorio). El objetivo es certificar el contenido de ciertos componentes de estos materiales Hay que reconocer que aunque se trate de patrones secundarios, su importancia metrolgica en los laboratorios analticos es muy grande e importante. ()

Clasificacin Jerarquizada de los Patrones o Referencias

Cuando sus magnitudes son avaladas internamente en un laboratorio, se tiene los materiales de referencia internos (MRI), que constituyen otro tipo de patrones analticos secundarios.

Requerimiento Normativo ISO 17025

En el apartado 5.6 de dicha norma, referente a la trazabilidad de las medidas, se constata claramente que la trazabilidad se asegura fundamentalmente a travs de la calibracin de los equipos y que para esto, es imprescindible el empleo de patrones certificados, Esto es para los laboratorios de calibracin. En el caso de los laboratorios de ensayo, en el punto 5.6.2.2.2 de la Norma se indica que cuando sea posible o aplicable la trazabilidad de las medidas a unidades de medida del SI, tienen que cumplirse los mismos requisitos de trazabilidad con relacin a, por ejemplo los MRC, mtodos acordados y/o normas consensuadas.

Requerimiento Normativo ISO 17025

En el punto 5.6.3 de la Norma se refiere exclusivamente a patrones y MR, insistiendo que se debe asegurar su trazabilidad a unidades de medida del SI o a MRC. Por lo tanto el mensaje para los laboratorios analticos es bastante claro, en el sentido que siempre deben asegurar la trazabilidad de los patrones que adquieren para su trabajo analtico. Tambin se indica que el laboratorio debe de disponer de procedimientos para la manipulacin segura, el transporte, la conservacin y el uso de los patrones y MR.

Materiales de Referencia Certificados

Un material de referencia Certificado es el que tiene certificado uno o varios de sus valores de una o ms de sus propiedades por procedimientos tcnicamente vlidos llevados a cabo por un organismo competente. Por lo tanto un MRC, es un material, parecido a las muestras reales que estamos analizando en nuestro laboratorio, del cual un organismo competente certifica la cantidad de mesurando (por ejemplo concentracin de un determinado analito), que queremos analizar con nuestro mtodo analtico. Para verificar la trazabilidad, analizaremos el MRC y compararemos los resultados obtenidos con el valor asignado por el organismo competente al MRC.

Materiales de Referencia Certificados

Los MRC matriz, en los que se certifican determinados componentes en matrices concretas, la certificacin se realiza mediante su contraste, generalmente mediante un ejercicio interlaboratorios. ()

Materiales de Referencia Certificados

Estos patrones, que se han clasificado como primarios (MRC-puros y MRC-sintticos) o secundarios (MRC-matriz) juegan un papel muy importante en el mbito de los laboratorios analticos. Especial relevancia adquieren los MRC tipo matriz, en cuya preparacin se intenta imitar a la matriz de ciertas muestras (si son sintticos) o se preparan directamente a partir de muestras naturales. El empleo de patrones con una matriz idntica o muy similar a la de las muestras que se analizan es imprescindible en la validacin de los mtodos de medida, en el control interno de la calidad y en calibrado de ciertas tcnicas analticas. El problema estriba en que no existen MRC para todos los analitos y todos los tipos de muestras.

REQUISITOS DE LOS MATERIALES DE REFERENCIA

Debido a la importancia metrolgica que tienen estos materiales en la evaluacin de la exactitud y la trazabilidad de los resultados analticos y la comparabilidad de los mismos entre diferentes laboratorios, en su preparacin y certificacin deben exigirse unos requisitos estrictos que aseguren la calidad metrolgica de los mismos. La Gua ISO 34 se refiere precisamente a los requisitos para la produccin de materiales de referencia, que se comenta a continuacin.

REQUISITOS DE LOS MATERIALES DE REFERENCIA

A)Representatividad Ms que un requisito es una cuestin de coherencia, el material debe de responder a necesidades reales de los laboratorios. Existe por lo tanto, una labor inicial de identificar tipos de matrices caractersticas de muestras con una alta demanda de anlisis en laboratorios de rutina. Adems de la matriz, hay que identificar los analitos de inters, que sern objeto de posterior certificacin. En algunos casos se puede abordar la preparacin de 2 3 materiales con la misma matriz y los mismos analitos pero con diferentes niveles de concentracin.

REQUISITOS DE LOS MATERIALES DE REFERENCIA

B) Homogeneidad

Significa que para un mismo material, no deben existir diferencias en los valores certificados ni en la matriz entre y dentro de las diferentes unidades (frascos, sobres etc.). Estrictamente, este requisito slo se cumple para las sustancias ultra puras, por lo que en los dems casos siempre hay que admitir un cierto grado de heterogeneidad. Sin embargo, el lote de material a partir del cual se preparan las unidades del material de referencia se califica como homogneo si las diferencias entre muestras de un determinado tamao es despreciable en relacin con la precisin de los mtodos empleados para la certificacin o para el trabajo analtico ordinario.

REQUISITOS DE LOS MATERIALES DE REFERENCIA

Es obvio que son los materiales slidos los que presentan mayores problemas de falta de homogeneidad. As, si el material contiene partculas de distinta forma y densidad (por ejemplo suelos o sedimentos), existe el riesgo de estratificacin a causa del proceso de segregacin durante el transporte y el almacenamiento. El fabricante debe avisar de este riesgo y proponer procedimientos para restaurar la homogeneidad inicial.

REQUISITOS DE LOS MATERIALES DE REFERENCIA

Habida cuenta de que cada da los anlisis requieren menor cantidad de muestra (con lo que es ms difcil asegurar la representatividad), y al mismo tiempo, el nmero de componentes a determinar aumenta, las dificultades de los fabricantes de MR para satisfacer el requisito de homogeneidad son cada vez mayores. Por otra parte, una adecuada homogeneidad de la matriz para una determinada masa de material no implica necesariamente la homogeneidad de los elementos traza que se quieren certificar.

REQUISITOS DE LOS MATERIALES DE REFERENCIA

C) Estabilidad El material preparado debe ser estable en el tiempo y en las condiciones de envo. El usuario conocer durante cuanto tiempo permanece estable desde su recepcin (debe constar fecha de caducidad) y desde que se abre el recipiente. Esta estabilidad se extiende a los parmetros certificados y a la matriz. Mientras que la homogeneidad presenta mayores problemas en materiales slidos, la estabilidad afecta ms acusadamente a los materiales en estado lquido y a las mezclas de gases. Ciertos materiales deben de ser envasados en condiciones de esterilidad (luz UV, por ejemplo) o adicionarles algn estabilizante (azida sdica, por ejemplo) para preservarlo de la degradacin microbiana.

REQUISITOS DE LOS MATERIALES DE REFERENCIA

D) Trazabilidad de los valores certificados

Los MRC se usan mayoritariamente para validad mtodos analticos, verificar los resultados o calibrar instrumentos. El MRC debe ser trazable a MR nacionales o internacionales. Desde un punto de vista prctico, no existe un procedimiento normalizado para asegurar la trazabilidad de los parmetros de inters en un MRC, y cada organismo de certificacin tiene sus propios mtodos de trabajo. Sin embargo, la trazabilidad de un MRC exige la utilizacin de varios mtodos independientes, es decir, que se encuentre el valor de la propiedad que se desee certificar (por ejemplo la concentracin de Zinc en concentrado de Zinc) utilizando diversos mtodos analticos cuyos principios de medidas sean completamente distintos

REQUISITOS DE LOS MATERIALES DE REFERENCIA

Algunos organismos productores realizan los anlisis en sus propios laboratorios mientras que otros recurren a laboratorios externos de reconocido prestigio. En ambos casos, el valor certificado de la propiedad deseada del MRC se determina en un ejercicio interlaboratorio, como el valor consenso de los resultados obtenidos mediante los diferentes laboratorios participantes.

REQUISITOS DE LOS MATERIALES DE REFERENCIA

E) Incertidumbre de los valores Certificados

Cualquier valor de referencia metrolgica debe ir acompaado de su nivel de variabilidad. Por lo tanto, es un requisito bsico que en los certificados que acompaan a los MRC aparezcan las incertidumbres correspondientes a cada parmetro.
La incertidumbre asociada a un MRC se propaga al valor final de la incertidumbre del resultado analtico en el laboratorio que est utilizando dicho MRC. Por lo tanto, no se puede obtener incertidumbres menores que las incertidumbres de los MRC utilizados.

Seleccin del MRC en el laboratorio

La seleccin correcta de los MRC es una labor importante que, suponiendo que exista disponibilidad, se va a efectuar sobre la base de tres consideraciones fundamentales: 1- Que la matriz del MRC sea lo ms parecida posible a las de las muestras que se van a analizar. A menudo no hay materiales con matrices idnticas a las de las muestras y hay que recurrir a materiales con matrices parecidas. En estos casos, hay que tener cuidado con que exista cierta representatividad respecto a los componentes mayoritarios de las muestras y aquellos otros minoritarios que generalmente acompaan a los analitos de inters y que pudieron originar interferencias en el proceso analtico. ()

Seleccin del MRC en el laboratorio

2- Que exista similitud respecto a la concentracin de los analitos. Carece de sentido elegir un MRC para componentes mayoritarios cuando en las muestras se van a determinar trazas, y viceversa. Los niveles de concentracin deben ser los ms parecidos posibles. En algunas ocasiones se dispone de materiales con la misma matriz y con parmetros certificados a diferentes niveles de concentracin (por ejemplo, bajo, normal y alto). Esta situacin sera la ideal, pero no se presenta con frecuencia.

3- Las incertidumbres de los MRC son diferentes y dependen del tipo de material y delos niveles de las concentraciones del parmetro certificado

Empleo de MRC en el laboratorio analtico A la vista de los requisitos que deben cumplir los materiales de referencia y del proceso generalmente largo y complicado de su preparacin y certificacin final, fcilmente se induce que son materiales de calidad y, en consecuencia, caros. Son materiales con un alto valor aadido. Su precio no esta en el material en s, metales, minerales, suelos, cenizas, etc, sino en la informacin que proporciona.

Empleo de MRC en el laboratorio analtico

Por lo tanto, generalmente no se utilizarn de forma rutinaria para el control de la calidad en el laboratorio. Su uso se restringe, generalmente, a los siguientes aspectos puntuales (pero decisivos, en un sistema de garanta de calidad):

- Validacin de un mtodo. - Comprobacin de la equivalencia de mtodos - Calibracin de equipos. - Demostracin de la trazabilidad de los resultados. - Deteccin de errores al aplicar mtodos normalizados.

Principales organismos suministradores de MRC

Productores de MRC NIST Nombre National Institute of Standards and Technology (EEUU)

SRM IRMM
IAEA NRC LGC ROCKLABS CAMMET NFA NIES NIOH

Standard Reference materials Institute for Reference Materials and Measurements

International Atomic Energy Agency (Austria) National Research Council (Canad) Laboratory of the Government Chemist (Gran Bretaa)

National Food Administration (Suecia) National Institute for Enviromental Studies (Japn) National Institute of Occupational Healtth (Noruega)

MATERIALES DE REFERENCIA: normas aplicables

MATERIAL DE REFERENCIA INTERNO (MRI) Y SU PREPARACION

Es aquel material preparado por el laboratorio para su propio uso. Para la Preparacin del MRI es muy importante asegurar que este material nos entregue valores de concentracin confiables y con un nivel de confianza. El material seleccionado deber de ser sometido a las etapas de:

Secado

Chancado

Pulverizado Homogenizado

MATERIAL DE REFERENCIA INTERNO (MRI) Y SU PREPARACION

La chancadora deber de estar perfectamente limpia y que entregue partculas hasta tamao de malla #10 Ty. Se debe tener cuidado con la constitucin de las piezas en contacto con las partculas de material a preparar, ya que puede producirse una contaminacin por efecto del desgaste de las piezas mviles.
El pulverizado, que procesa la muestra por sublotes pequeos, entre 0.5 y 2.5 Kg. El pulverizado se efecta hasta pasar el 100% del material bajo #150 Ty. En esta etapa, tambin debe considerarse la posible contaminacin por desgaste. Se debe adems cuidar el efecto del aumento de temperatura por friccin, lo que acarreara una alteracin de algunas porciones de la muestra.

(MRI) - PREPARACION
Secar la muestra hasta peso constante.

Chancar bajo malla 10 Tyler .

Tamizar 100 % el mineral bajo malla 10 Tyler. Descartar el sobre tamao.

(MRI) - PREPARACION
Mezclar las muestras usando para ello un divisor de rifle.
Pulverizar la muestra considerando un tiempo de 2 a 3 minutos. Realizar test de granulometra, si la muestra est un 99,5 % bajo 150 mallas Tyler, entonces pulverizar el resto de las muestras durante el tiempo establecido. De lo contrario aumentar el tiempo de pulverizado hasta lograr la granulometra sobre 99,5 % bajo 150 mallas Tyler. Enseguida es necesario homogenizar el material procesado para luego proceder a su envasado.

MRI - ENVASADO
Luego de homogenizar, se debe proceder al envasado en un equipo divisor rotatorio, que permite preparar en forma simultanea 20 frascos de aproximadamente 2.5 Kg cada uno. Posteriormente estos frascos a su vez son mezclados entre s, para asegurar una mejor homogenizacin, alternando secuencialmente los frascos. A modo de ejemplo se puede realizar la secuencia:

Porcin 1
Porcin 2 Porcin 3 Porcin 4 Porcin 5

Mezclado de los frascos

Mezclado de los frascos Mezclado de los frascos Mezclado de los frascos Mezclado de los frascos

1
2 3 4

6 11 16
7 12 17 8 13 18 9 14 19

5 10 15 20

Y as sucesivamente se va dividiendo y homogeneizando hasta obtener la cantidad final deseada

EVALUACION DEL MRI

Prueba de homogeneidad La homogeneidad del material preparado, se deben efectuar pruebas que demuestren que el material es adecuado para ser distribuido en diferentes laboratorios. Para cumplir con este objetivo, se deben seleccionar 20 frascos finales para medir el grado de homogeneidad. En forma prctica, se debe medir la dispersin existente dentro de los frascos, tambin la dispersin encontrada entre los frascos y compararlas entre si mediante un anlisis de varianza de un factor. El procedimiento en este caso es: a) Escoger al menos 20 frascos al azar. b) Obtener de cada uno de estos frascos, 4 porciones que sern medidas en forma independiente. c) Medir usando las mejores condiciones instrumentales seleccionadas para el rango de concentracin. d) Registrar los valores independientes para cada porcin en una tabla. e) Efectuar un anlisis de varianza de 1 factor, considerando como factor de variacin la utilizacin de frascos diferentes, comparando la varianza contra la varianza entre las muestras dentro de los frascos.

EVALUACION DEL MRI

Fuente de variacin Entre frascos Dentro de los frascos Suma de Grados de Cuadrado medio Cuadrados Libertad esperado Test F de Fisher

Totales

Para efectos de interpretacin, se entender que la muestra es homognea si la dispersin dentro de los frascos es menor a la variacin entre los frascos de acuerdo al Test de hiptesis siguiente: Si Fexperimental Ftabla Se acepta que el material es homogneo Si Fexperimental > Ftabla Se rechaza que el material sea homogneo

Thank You!
L/O/G/O