ESTRUCTURA Y FUNCIÓN DE BIOMOLÉCULAS - Curso 2022-23

TEMA 9.
MEMBRANAS BIOLÓGICAS Y TRANSPORTE A TRAVÉS DE MEMBRANAS
 Composición y propiedades físico-químicas de las membranas biológicas.
 Modelos de membranas biológicas. Microdominios lipídicos.
Transportes pasivo, facilitado y activo.

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Ana M. Mata Durán
COMPOSICIÓN Y PROPIEDADES FISICO-QUÍMICAS DE LAS MEMBRANAS
BIOLÓGICAS

Funciones:
- Delimitan células y orgánulos subcelulares. Mantienen diferencias
composición entre el citosol y el medio extracelular (membrana
plasmática) o entre el citosol y el interior del orgánulo (membrana
intracelular)
- Funciones esenciales interacción célula-célula.
- Funciones en mecanismos de transducción de señales.

5 nm espesor

Molecular Biology of the cell (Garland Science)

Biochemistry with Clinical Correlations, Devlin 7ed 2011 John Wiley & Sons, Inc.

 Componentes similares en todas las membranas (plasmática e intracelulares).

 Tres clases de componentes: lípidos, proteínas y glúcidos.
2
 LÍPIDOS DE LAS MEMBRANAS BIOLÓGICAS
 Lípidos polares (parte hidrofílica y parte hidrofóbica)
 Fosfolípidos: fosfatidilcolina (PC), fosfatidiletanolamina (PE), fosfatidilserina (PS),
fosfatidilinositol (PI)
 Esfingolípidos (esfingomielina (SM) y glucoesfingolípidos o glucolípidos)
 Colesterol y ésteres del colesterol.

Fosfolípidos Colesterol Glucolípidos

3
LÍPIDOS DE LAS MEMBRANAS BIOLÓGICAS

Biophysical Journal 2019 116, 2235-2236DOI: (10.1016/j.bpj.2019.05.003)

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 ORDENACIÓN DE LOS LÍPIDOS
Se comportan de forma distinta atendiendo a su concentración:
Concentración micelar crítica (cmc).
A conc. de lípidos menores que la cmc:
se disuelve una pequeña fracción.
A conc. de lípidos mayores que la cmc:
las moléculas de lípido se asocian formando:
micelas, monocapas, bicapas, liposomas.

5
Bioquímica 3e James R. Mckee
 Movimiento de los lípidos en las membranas
La membrana plasmática no es una estructura estática, sus componentes tienen
posibilidades de movimiento, lo que le proporciona una cierta fluidez.

 De rotación: muy frecuente.

 De difusión lateral: movimiento del lípido
dentro de la misma capa. Es el más frecuente.
 Flip-flop : movimiento del lípido de una
monocapa a la otra (catalizada por flipasas).
Es el menos frecuente, por ser
energéticamente desfavorable.
 De flexión: producidos por las colas
hidrófobas de los fosfolípidos.
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 Lípidos de membrana: cambios en la ordenación espacial de sus cadenas
hidrocarbonadas por factores intrínsecos y extrínsecos

 Factores intrínsecos (inherentes al lípido): tipo de lípido, longitud, nº insaturaciones.

Aumento fluidez: con el nº de lípidos insaturados y con disminución longitud
cadenas carbonadas.
 Disminución fluidez y permeabilidad: por la presencia de colesterol.

Factores extrínsecos: TEMPERATURA. Afecta la fluidez de la membrana:

↑temperatura = ↑ fluidez

Transiciones de fases gel-cristal líquido: Temperatura crítica (TC).

Fase gel: tª inferior a la TC
• Grupos polares muy empaquetados
Gel Cristal líquido • Lípidos dispuestos en forma ordenada
• Poca movilidad y poca fluidez
• Colas hidrofóbicas regulares
Calor • Mas gruesa

Fase cristal líquido: tª superior a la TC

Frio • Grupos polares débilmente empaquetados
• Colas hidrofóbicas desordenadas
• Mayor movilidad y fluidez
A tª fisiológica: lípidos en fase cristal líquido • Mas fina 7
 PROTEÍNAS DE LAS MEMBRANAS BIOLÓGICAS

Proteínas de membranas: El 30% de las proteínas codificadas

en el genoma se encuentra en la membrana celular

Intrínsecas Extrínsecas 8
Localización de los residuos de Tyr y Trp de las
proteínas intrínsecas de membranas

Tyr: naranja
Trp: rojo
Residuos cargados (Lys, Arg, Glu, Asp):
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GLÚCIDOS DE LAS MEMBRANAS BIOLÓGICAS

Oligosacáridos o polisacáridos.
•Se encuentran sobre la superficie externa de la membrana y
pueden estar unidos a moléculas de lípidos (gluocolípidos) o a
roteínas (glucoproteínas).
Funciones:
•Protección química (dificulta el acceso de proteasas) y
•Protección mecánica, asegurando flexibilidad de membrana.
•Sitios de reconocimiento (grupos sanguíneos determinados por glúcidos de membrana
capacidad respuesta inmune) y de unión (de patógenos, virus).

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Molecular Biology of the Cell (© Garland Science)
 ESTRUCTURA DE LAS MEMBRANAS BIOLÓGICAS:
MODELO DEL MOSAICO FLUIDO DE SINGER Y NICHOLSON (1972)
Estructura continua de bicapa lipídica polar fluida (lípidos en fase cristal líquido a tª
fisiológica).
Membrana asimétrica.
Proteínas de membrana: funciones enzimáticas, recepción de mensajeros químicos, etc.
Lípidos de membrana: función estructural.

Composición diferente lípidos-proteínas: Lípido (20-80%): Proteínas (80-20%)

Células animales: [lípido]=[proteína]
Membrana mitocondrial: 20% lípido, 80% proteína 11
Membrana mielina cerebro: 80% lípido, 20% proteína
 ESTRUCTURA DE LAS MEMBRANAS BIOLÓGICAS:
Microdominios lipídicos ó RAFTS (Kay Simmons, 2000)
 Las membranas biológicas contienen regiones o microdominios altamente ordenados (rafts o
balsas lipídicas). Desempeñan papeles esenciales para el funcionamiento de la célula.

RAFTS:
 Microdominios de la membrana, contienen altas concentraciones de colesterol (32%) y
esfingolípidos (14%).
 Estado líquido ordenado (fuerte empaquetamiento)
 Resistencia a extracción con detergentes y flotabilidad tras ultracentrifugación en gradiente de
densidad.
 Proteínas localizadas en los rafts: Implicadas en señalización celular, infección de patógenos,
enfermedades neurodegenerativas.
② ①

Adaptado de Molecular Biology of the cell (Garland Science)

A

B
③ ④
A = espacio extracelular; B = espacio intracelular o citosol;
1 = membrana sin balsa lipídica; 2 = balsa o raft lipídicode membrana;
3 = proteína transmembrana asociada al raft; 4 = proteína fuera del raft
5 = restos glucídicos (en glicoproteínas o glicolípidos)
6 = proteína con anclaje (de glicosilfosfatidilinositol o GPI)
7 = colesterol; 8 = glicolípido.
 ESTRUCTURA DE LAS MEMBRANAS BIOLÓGICAS:
Microdominios lipídicos ó RAFTS

RAFT LIPÍDICO

Caveolas: se forman en rafts.

Contienen caveolinas.
La estructura de las caveolinas
fuerza a una curvatura de la
membrana.

Babina et al. 2011

Dímero de caveolina
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 MECANISMOS DE TRANSPORTE
1. NO MEDIADO: Por difusión simple (sin
proteína transportadora): gases, moléculas
lipofílicas, hidrofóbicas, sin carga y de pequeño
tamaño.

2. MEDIADO o facilitado: transporte de iones,

moléculas polares con carga, o sin carga, pero de
gran tamaño.
2.1. TRANSPORTE PASIVO: A favor de gradiente
Difusión facilitada por:
- Transportadores
- Canales iónicos
- Ionóforos
2.2. TRANSPORTE ACTIVO: En contra de
gradiente.
-Primario: ATP como fuente de energía
-Secundario: emplean el flujo de una molécula Lehninger. Principios de Bioquímica - 6ª Ed. Omega

o ion a favor de gradiente para impulsar el

transporte de otra molécula o ion distintos en
contra de gradiente.

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 G (Variación de energía libre) ASOCIADO AL TRANSPORTE
a) Molécula no cargada pasa desde una concentración C1 a una concentración
C2 al otro lado de la membrana: potencial químico (∆G )

[C2] [C2] Si C1 > C2  ∆G < 0 proceso ESPONTANEO

∆G = RT ln = 2,3 RT log Si C1 < C2 ∆G > 0necesita suministro energía
1 2 [C1] [C1]

b) Molécula cargada: considerar además un componente eléctrico: potencial de

membrana. En este caso ∆G es el potencial electroquímico (∆µ)

[C2] Z= carga
∆G = ∆µ= 2,3 RT log + Z F ∆Ψ F= cte Faraday=23,062 Kcal.V-1.mol-1
1 2 1 2 [C1]
∆Ψ= diferencia potencial eléctrico, en V, a través de la mb

Transporte pasivo= ∆G<0 movimiento espontáneo del ++ -

- - A- A-
1
+
soluto a través de la mb. A- + A- - A- -
A- + - - A- A A- A
+ - A- - A - A- A-
A -
+ - A- A A -
Transporte activo= ∆G>0 se requiere un suministro de + - A- A- - A A-
A-
energía para el transporte del soluto a través de la mb A-
+ - A- A- A 2
+ - A- A-
+ + - A-
TRANSPORTE MEDIADO
Los transportadores (y canales) disminuyen la energía de activación necesaria para
el paso del soluto por la membrana (equivalen a los catalizadores enzimáticos, pero
no lo son).
a) El paso de solutos polares o
cargados por difusión simple
requiere eliminar la capa de
hidratación (proceso muy
endergónico). Por tanto, la energía
de activación (G) para la difusión
Cambios de energía en
el paso de un soluto
a través de la bicapa es muy alta.
hidrofílico a través de
la bicapa lipídica de
Las bicapas lipídicas puras son
una membrana prácticamente impermeables a los
solutos polares o cargados
biológica

b) Una proteína transportadora

reduce la G para que el soluto
atraviese la membrana (lo hace
estableciendo interacciones no
covalentes con el soluto des-
hidratado, proporcionando una vía
de paso hidrofílica transmembrana)
Lehninger. Principios de Bioquímica - 6ª Ed. Omega
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COMPARACION DEL TRANSPORTE MEDIADO CON LA CINETICA ENZIMATICA

La difusión sucede por toda la membrana y aumenta con la concentración de soluto externa.
El transporte mediado es saturable, aumenta hasta llegar a un máximo a alta concentración de soluto
SATURACION: A mas [soluto], el flujo ([Sol]/tiempo) aumenta hasta un máximo, cuando todos los sitios
del transportador están ocupados por soluto. La ecuación del flujo es análoga a la Michaelis-Menten:

Jm ax J= [Sol]/tiempo: Flujo en sentido 1  2

Jmax= Flujo máximo en condiciones de saturación
TR A N S PO R T E [Sol]= Concentración de soluto en el sitio 1
Kt= Concentración para la que J=1/2 Jmax
M ED IA D O
 Similitud entre transportadores y enzimas: ambos son
Jmax [Sol]
J= proteínas que se unen a solutos.
1/ 2 J ma x  Diferencias entre transportadores y enzimas: no
12 Kt + [Sol]
cambian la naturaleza del soluto sólo su posición
respecto a las membranas, es decir, no catalizan
D IFU SIO N S IM PL E
reacciones, sólo translocan solutos a ambos lados de
las membranas celulares.
Kt Concentración de soluto
ESPECIFICIDAD Transportador de Glucosa de eritrocitos
– Por solutos (estereoespecificidad): ≠ afinidad Azúcar Kt (mM)
hacia solutos parecidos.
D-glucosa 1,5
– Análogos se unen al transportador y son inhibidores D-manosa 20
competitivos, sin ser transportados. D-galactosa 30
– Se inactivan al bloquear residuos esenciales. L-glucosa 3.000
 TRANSPORTE PASIVO FACILITADO
Transportador de glucosa (GLUT) en eritrocitos

Lehninger. Principios de Bioquímica - 6ª Ed. Omega Regulación por insulina del transporte de glucosa por 18
GLUT4 a una célula de tejido muscular
 CANALES IONICOS
Canales, poros:
-proteínas intrínsecas.
-Estructura cuaternaria: orificio acuoso: permiten el movimiento rápido de moléculas
de un lado a otro de la membrana (ambos sentidos).
-Difieren de transportadores en: 1) Mayor velocidad de flujo, 2) No se saturan,
3) Responden a una señal celular.
-Regulados por voltaje (dependientes de voltaje): canal de Na+ (a)
-Regulados por agonista (dependiente de ligando): receptor de acetilcolina (b)
-Regulados por cAMP: canal de Cl-

Subunidad α del canal de Na+

(a) Lehninger. Principios de Bioquímica - 6ª Ed. Omega (b) 19
Análisis de canales iónicos: PATCH CLAMP (pinzamiento de membrana)
Erwin Neher and Bert Sakmann . Nobel en fisiología y Medicina 1991

 Permite medir flujos de corrientes de canales iónicos aislados de la membrana.

 Se aplica un potencial eléctrico a la membrana con una pipeta de vidrio.

Lehninger. Principios de Bioquímica - 6ª Ed. Omega

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 IONOFOROS

-Péptidos, de origen bacteriano.

-Aumentan la permeabilidad de las membranas a iones.
-Ionóforos transportadores: unen el ion a un lado de la membrana, difunden por ella
y lo liberan al otro lado. Ej. Valinomicina (a): transporta 104 iones K+/molécula/s
-Ionóforos formadores de canales: forman canales o poros a través de los cuales
pasa el ion. Ej. Gramicidina (b) 107 iones K+/molécula/s

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 TRANSPORTE ACTIVO PRIMARIO:
Utilizan ATP como fuente de energía: ATPasas (tipos P, V y F)
1. tipo P: (Ca2+-ATPasas, Na+K+-ATPasa, H+K+-ATPasa): se fosforilan y desfosforilan
2. tipo V: (por vacuola), acidifican compartimentos intracelulares, no se fosforilan y
desfosforilan
3. Tipo F: (factores acoplantes de energía): bombas de protones, impulsan flujo H+ a través
de mb produciendo ADP+Pi, y también pueden funcionar en sentido contrario sintetizando
ATP: FoF1ATPasa/ATPsintasa

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ATPasas tipo P: se fosforilan y desfosforilan durante su ciclo catalítico

Na+K+-ATPasa (no es cotransporte porque primero sale el sodio

y después entra el potasio)

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LAS ATPasas TRANSPORTADORAS DE CALCIO
Ca2+ Citosol
ATP
E1 E1 Ca2+ E1 Ca2+ ATP

E2 E2 P E2 P Ca2+
Pi Ca2+ Espacio extracelular
o lumen

Ca2+-ATPasa de retículo sarco(endo)plásmico (SERCA)

Ca2+-ATPasa de membrana plasmática (PMCA)
Ca2+-ATPasa de vías secretoras (SPCA)
 TRANSPORTE ACTIVO SECUNDARIO (COTRANSPORTE)
- Un gradiente de iones proporcionan la energía para el transporte activo secundario
Sistemas de cotransporte (simultáneo) impulsados por gradientes de Na+ o H+

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Lehninger. Principios de Bioquímica -Ed. Omega
TRANSPORTE DE GLUCOSA EN EL EPITELIO INTESTINAL: Transportador de
sodio-glucosa (SGLT): Entrada de glucosa al interior celular mediante entrada simultánea de Na+. Este
Na+ sale nuevamente al exterior mediante transporte activo mediado por la Na+-K+-ATPasa. La fuerza impulsora no
proviene del ATP sino de otra molécula impulsora (en este caso el sodio).

Microvellosidad
 RESUMEN
Mecanismo de transportesecundario) Proteína Produce Depende Ejemplo
transpor gradiente de de
-tadora concentración Energía

Difusión simple No No No H2O, O2

Facilitado pasivo: Si No No -Transportador uniporte de

Difusión facilitada por glucosa en mayoría de tejidos
transportadores -Antiporte pasivo de cloruro y
bicarbonato en eritrocitos y
riñón
Facilitado pasivo: Si No No Receptores de acetilcolina
Mediado por canales iónicos

Facilitado activo primario: Si Si Si ATPasas

Activo primario impulsado por
ATP

Facilitado activo secundario: Si Si Si Cotransporte de glucosa con

Uso del gradiente electroquímico de sodio en intestino delgado
Na+ o H+ (a favor de gradiente) para (simporte)
impulsar transporte de azúcares o
aminoácidos (contra gradiente)

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Devlin. Ed. Reverté

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