BRITASHEEP B0360860 B0360884 B0360885

SANGRE OVINA
DESFIBRINADA ESTÉRIL

USO INSTRUCCIONES
La sangre ovina desfibrinada estéril es un suplemento que al Una vez que el medio de cultivo al cual se adicionará la sangre
ser incorporado a los medios de cultivo favorece el desarrollo de ovina se encuentra esterilizado, fundido y enfriado a 45-50 ºC,
microorganismos exigentes en sus requerimientos nutricionales proceder de la siguiente manera:
y permite la clara visualización de las reacciones de hemólisis. Es Preparación de Agar Sangre: agregar 5-10 % de sangre ovina
utilizado en la preparación de Agar Sangre, Agar Mueller Hinton desfibrinada estéril. Homogeneizar y distribuir en placas de Petri
Sangre y Agar Chocolate. estériles. Si se utilizará para el aislamiento de bacterias anaero-
bias, se recomienda suplementar además el medio con extracto
FUNDAMENTO de levadura, vitamina K y hemina.
El agregado de sangre a los medios de cultivo permite el desa- Preparación de Agar Mueller Hinton Sangre: agregar 5 % de
rrollo de una amplia variedad de microorganismos debido a que sangre ovina desfibrinada estéril. Homogeneizar y distribuir en
aporta factores de crecimiento y neutraliza efectos tóxicos de placas de Petri estériles.
metabolitos y radicales libres por las enzimas catalasa, superóxido Preparación de Agar Chocolate: agregar 5-10 % de sangre
dismutasa y peroxidasa presentes en los glóbulos rojos. Estos ovina desfibrinada estéril. Calentar a 80ºC durante 10 minutos
compuestos tóxicos pueden ser generados durante el tratamiento mezclando frecuentemente. Dejar enfriar y distribuir en placas de
térmico de los medios de cultivo. Petri estériles.
En microbiología se utiliza sangre ovina desfibrinada estéril
obtenida de animales sanos sin el uso de anticoagulantes ya que CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
estos pueden interferir en el desarrollo microbiano afectando la Sangre ovina desfibrinada estéril obtenida de animales sanos por
disponibilidad de nutrientes. personal especializado. No contiene anticoagulantes. Color rojo y
No se recomienda el uso de sangre humana debido a las posibles hematocrito mayor o igual a 30%.
interferencias en el diagnóstico al procesar muestras clínicas por
la presencia de factores inmunológicos. ALMACENAMIENTO
En la preparación de agar sangre, se agrega sangre ovina en concen- A 2-8 ºC.
tración 5-10 %. Los medios recomendados para visualizar reacciones
de hemólisis son: Columbia Agar Base, Tripteína Soya Agar, Sangre PROCEDIMIENTO
Agar Base, Sangre Agar Base con Azida y Nutritivo Agar. Siembra
Para la realización de la prueba de sensibilidad a los antimicrobia- Dependerá de la prueba a realizar:
nos en especies de estreptococos mediante la técnica de difusión • Directa, estriando la superficie del medio de cultivo.
en agar, se debe utilizar Mueller Hinton Agar suplementado con • Hisopado en superficie (fundamentalmente para la prueba de
5% de sangre ovina. sensibilidad a los antimicrobianos).
En el Agar Chocolate se agrega sangre ovina desfibrinada estéril
en concentación 5-10% al medio Columbia Agar Base o al GC Incubación
Agar Base. En caso que se requiera preparar Agar Chocola- El tiempo, la temperatura y la atmósfera de incubación, depende-
te enriquecido, agregar también Britalex con Solvente. (REF rán del microorganismo que se quiera recuperar.
B0360021).
El Agar Chocolate se utiliza especialmente para el crecimiento de En general se recomienda:
Haemophilus spp. y Neisseria spp. Bacterias de fácil crecimiento: en aerobiosis, a 33-37 º C durante
La sangre ovina desfibrinada estéril ha sido empleada como 18 a 24 horas.
crioprotector para la conservación de cepas a temperatura de Bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales: en
congelación. En este caso es necesario realizar envasado aséptico atmósfera con 5 % de CO2 , a 33-37 ºC durante 24-48 horas.
utilizando material e insumos estériles.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
CONTENIDO Observar las características de las colonias.
Código B0360860: envase x 10 ml. Para el medio de cultivo conteniendo sangre, observar las reaccio-
Código B0360884: envase x 50 ml. nes de hemólisis:
Código B0360885: envase x 100 ml. Hemólisis alfa: lisis parcial de los glóbulos rojos. Se observa un
halo de color verdoso alrededor de la colonia en estudio.

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SANGRE OVINA DESFIBRINADA ESTÉRIL

Es debido a la oxidación de la hemoglobina a metahemoglobina rioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
(compuesto de color verdoso) por el peróxido de hidrógeno gene- • Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto.
rado por los microorganismos. • Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y ma-
Hemólisis beta: lisis total de los glóbulos rojos. Se observa un nipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
halo claro, brillante alrededor de la colonia en estudio. establecidas por el laboratorio.
Hemólisis gamma: ausencia de lisis de los glóbulos rojos. El • Las características del producto pueden alterarse si no se con-
medio de cultivo no presenta modificaciones de color y aspecto serva apropiadamente.
alrededor de la colonia en estudio. • Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
En el caso de Agar Mueller Hinton sangre: medir el diámetro mismo según reglamentaciones vigentes.
de los halos de inhibición del desarrollo bacteriano frente a diver-
sos antimicrobianos. REFERENCIAS
• MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification
CONTROL DE CALIDAD maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Balti-
more, Md.
MEDIO DE CULTIVO: AGAR SANGRE • Isenberg (ed.). 1992. Clinical microbiology procedures handbook,
Crecimiento Hemólisis
vol. 1. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
Microorganismos
• Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of
Streptococcus pyogenes Satisfactorio Beta clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
ATCC 19615
Washington, D.C.
Streptococcus pneumoniae Satisfactorio Alfa • Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing,
ATCC 6305 M100, versión vigente. Clinical and Laboratory Standards Institute
Satisfactorio Alfa
(CLSI, ex NCCLS).
Streptococcus pneumoniae
ATCC 49619
INDICACIONES AL CONSUMIDOR
Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
MEDIO DE CULTIVO: AGAR CHOCOLATE
Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
Microorganismos Crecimiento No congelar
Neisseria gonorrhoeae Satisfactorio
ATCC 49226 AUTORIZACIÓN ANMAT
Códigos: B0360860, B0360884, B0360885
Haemophilus influenzae Satisfactorio
PM 1292-27
ATCC 49247
Dir Técnico Bioq. Alejandro Rossi

Control de esterilidad Resultado

SIMBOLOS UTILIZADOS
Medio sin inocular Sin Cambios

LIMITACIONES
• Conservar a 2-8 ºC. No congelar el producto.
• Dejar que alcance temperatura ambiente previo a su utilización.
• Los medios de cultivo detallados previamente son específicos y
son los de elección para la visualización de las reacciones hemolí-
ticas. Si se adiciona sangre ovina a medios con alto contenido de
glucosa, no se logra la adecuada visualización de la hemolísis.

MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS

Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de
calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requerimiento.
11/2022 - REV.08 - 31631

PRECAUCIONES
• Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclusivo.
• No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o
dañado.
•No utilizar el producto si existen signos de contaminación o dete-

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