SAPROBIO 2021 Libro-De-Resumenes

Universidad Nacional de Misiones
SAPROBIO 2021 6º Simposio Argentino de Procesos Biotecnológicos:

transfiriendo biotecnología para el desarrollo : libro de resúmenes / compilación
de Pedro Darío Zapata ; Adriana Elizabeth Alvarenga. - 1a ed. - Posadas: Uni-
versidad Nacional de Misiones, 2021.
Libro digital, PDF
Archivo Digital: descarga y online

ISBN 978-950-766-183-9
1. Biotecnología. 2. Biotecnología Ambiental. 3. Tecnologías. I. Zapata, Pedro

Darío, comp. II. Alvarenga, Adriana Elizabeth, comp. III. Título.
CDD 570.15
Sitio Web:
www.saprobio.com
Diseño y composición general / Responsables sitio Web:

Lic. Adrian Cassetai - ASC. Gustavo Escalante
Diseño gráfico y editorial:

DG. Lourdes Andrea Benitez
Compilación:
Dr. Pedro Darío Zapata - Dra. Adriana Elizabeth Alvarenga
D
el 4 al 6 de agosto de 2021 se llevó
a cabo el 6º Simposio Argentino
de Procesos Biotecnológicos (SA-
PROBIO 2021) organizado por la
UNIVERSIDAD NACIONAL DE MISIONES a través
del Instituto de Biotecnología Misiones, FCEQyN
(UNaM) – PTMi y de la Facultad de Ciencias Exac-
tas, Químicas y Naturales – UNaM.
El Simposio abordó un conjunto de temáticas
complejas e interrelacionadas y su relevancia es
clave para el incremento de los procesos de for-
mación, investigación y desarrollo vinculados al
campo de los procesos biotecnológicos. El lema
de esta edición 2021 ha sido: “Transfiriendo
biotecnología para el desarrollo” dándole una
relevancia especial a los proyectos referidos a
la transferencia de tecnología. Contó con con-
ferencias plenarias ofrecidas por investigado-
res de prestigio internacional, sesiones orales
de los trabajos presentados y exhibiciones de
poster (linkeados en el sitio del evento). Estos
últimos fueron agrupados según las siguientes
áreas temáticas propuestas según el programa
preliminar:
AUSPICIANTES: 1.Tecnología de cultivo celular
-Agencia I+D+i (Agencia Nacional de Promoción 2.Fermentación microbiana y biotransformaciones
de la Investigación, el Desarrollo Tecnológico y la In-
novación) 3.Diseño de biorreactores y Escalado de procesos
biotecnológicos
-Biofábrica de Misiones S.A.
4.Procesos de recuperación y purificación de
-Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas de
la Universidad Nacional del Litoral
macromoléculas
-ConBiotec (Consorcio de Unidades Académicas 5.Bioprocesos en la industria alimentaria y re-
con carreras de Biotecnología pertenecientes a Uni- mediación ambiental
versidades Nacionales de la República Argentina) 6.Enseñanza de los procesos biotecnológicos
-Consejo Interuniversitario Nacional (CIN) 7.Biotecnología Animal y Vegetal
-Municipalidad de Posadas
8.Sesión especial: BioStart Ups
COORDINACIÓN GENERAL:
Dr. Pedro Darío ZAPATA - Dra. Adriana ALVARENGA - Lic. Adrian CASSETAI
COMITÉ ORGANIZADOR
• Dr. Pedro Darío ZAPATA (Secretario de Ciencia y Tecnología - UNaM)
• Dra. Laura L. VILLALBA (UNaM – FCEQyN – INBIOMIS)
• Dra. María Isabel FONSECA (UNaM – FCEQyN – INBIOMIS)
• Mgter. Verónica TEZA (UNaM – FCEQyN – INBIOMIS)
• Dra. Marina QUIROGA (UNaM – FCEQyN – INBIOMIS)
• Dra. Eleonora CAMPOS (INTA - CONICET)
• Dra. María Victoria BUSI (UNR - CONICET)
• Dra. Laura LEVIN (UBA - CONICET)
• Dr. Alejandro BECCARIA (UNL)
• Dr. Javier LOTTESBERGUER (UNL)
• Dra. Julia FARIÑA (PROIMI - CONICET)
• Dr. Osvaldo DELGADO (PROIMI - CONICET)
• Dra. Alicia MARTOS (UNaM – FCEQyN)
• Dra. Adriana ALVARENGA (UNaM – FCEQyN – INBIOMIS)
• Dra. Lucrecia BARCHUK (UNaM – FCEQyN – INBIOMIS)
• Dra. Romina CONIGLIO (UNaM – FCEQyN – INBIOMIS)
• Dra. María KOLMAN (UNaM – FCEQyN – INBIOMIS)
• Dra. Daniela RODRIGUEZ (UNaM – FCEQyN – INBIOMIS)
• Dra. Lorena CASTRILLO (UNaM – FCEQyN – INBIOMIS)
• Dra. Marcela SADAÑOSKI (UNaM – FCEQyN – INBIOMIS)
• Dra. Gabriela DIAZ (UNaM – FCEQyN – INBIOMIS)
• Dr. Martin GIORGIO (UNaM – FCEQyN – INBIOMIS)
• Dr. Gustavo BICH (UNaM – FCEQyN – INBIOMIS)
• Lic. Agostina LE VRAUX (UNaM – FCEQyN)
• Dr. Alejandro TROMBERT (UNL)
• Dra. Diana ROMANINI (UNR)
• Dr. Cristian FERRI (UNaM – FCEQyN – INBIOMIS)
• Dr. Juan Ernesto VELAZQUEZ (UNaM – FCEQyN – INBIOMIS)
• Dr. Diego GÓMEZ CASATI (CEFOBI-CONICET)
• Dra. Marta POLTI (PROIMI – CONICET – UNT)
• Dr. Matías ASENCIÓN DIEZ (UNL-CONICET)
• Dra. Agustina GUGLIOTTA (FBCB – UNL)
• Dra. Marianela MASIN (FBCB – UNL)
• Dra. Milagros BÜRGI (FBCB – UNL)
• Dra. Natalia CEALGLIO (FBCB – UNL)
• Dra. Andrea Micaela DALLAGNOL (FCEQyN, UNaM)
• Dra. Paula BUTIUK (FCEQyN, UNaM)
• Dra. Silvana MAIDANA (FCEQyN UNaM)
• Dra. Karina Beatriz ACOSTA (INBIOMIS - UNaM)
• Dra. Ana Clara LÓPEZ (INBIOMIS - FCEQyN - UNaM)
• Dra. Florencia BRUERA (INBIOMIS - FCEQyN - UNaM)
• Dr. Gustavo KRAMER (IMAM - FCEQyN - UNaM)
• Lic. Sebastian CHILALICHE (INBIOMIS - FCEQyN - UNaM)
• Lic. Manuela VERESCHUK (INBIOMIS - FCEQyN - UNaM)
• Farm. Gabriela ACOSTA (INBIOMIS - FCEQyN - UNaM)
• TUAC. Gislena BRONDANI (UNaM)
• Lic. Adrian CASSETAI (UNaM)
• Lic. Vanesa LETREÑIUK (UNaM)
• ASC Gustavo ESCALANTE (UNaM)
• Dra. Daniela MOREIRA KUBIAK (Biofábrica de Misiones)
APOYOS FINANCIEROS: RC-RPN-2020-00062 (AGENCIA NACIONAL DE PROMOCIÓN DE

LA INVESTIGACIÓN, EL DESARROLLO TECNOLÓGICO Y LA INNOVACIÓN).
4
ÍNDICE GRAL
PROGRAMA ...................................................................................................... 6
CONFERENCIA APERTURA
PRODUCTS AND PROCESSES TOWARDS A SUSTAINABLE BIOBASED
ECONOMY ......................................................................................................... 9
SESIÓN 1
TECNOLOGÍA DE CULTIVO CELULAR ........................................................ 10
SESIÓN 2
FERMENTACIÓN MICROBIANA Y BIOTRANSFORMACIONES ............ 19
SESIÓN 3
DISEÑO DE BIORREACTORES Y ESCALADO DE PROCESOS
BIOTECNOLÓGICOS ......................................................................................... 82
SESIÓN 4
PROCESOS DE RECUPERACIÓN Y PURIFICACIÓN DE
MACROMOLÉCULAS ....................................................................................... 92
SESIÓN 5
BIOPROCESOS EN LA INDUSTRIA ALIMENTARIA Y REMEDIACIÓN
AMBIENTAL ..................................................................................................... 113
SESIÓN 6
ENSEÑANZA DE LOS PROCESOS BIOTECNOLÓGICOS ............................ 174
SESIÓN 7
BIOTECNOLOGÍA ANIMAL Y VEGETAL ................................................... 178
SESIÓN ESPECIAL: BIO – START UP .............................................................. 207
ÍNDICE DE AUTORES ........................................................................................ 213
5
PROGRAMA
PROGRAMA
6
7
8
SESIÓN 1
Conferencia Apertura
Products and processes

towards a sustainable
biobased economy
Prof. Dr. Ing. JOCHEN SCHMID, Institute of Molecular
Microbiology and Biotechnology, University of Münster,
Germany
6º Simposio Argentino de Procesos Biotecnológicos-Agosto 2021
Abstract
The talk will deal with various aspects of products and pro-
cesses towards a biobased economy. Several process routes,
such as biotransformation, fermentation as well as biocatalytic
approaches will be discussed and compared concerning their
suitability for the utilization of renewable resources. The main
scope will be the production of tailored biobased and biode-
gradable biopolymers, which can replace fossil-based polymers, to
realize more sustainable products. The importance of structure
function-relationship will be highlighted to obtain intensified
insights in novel material applications. In sum, the talk will give
an overview of the promising perspectives of the key biotech-
nology as tool for the future bioeconomy.
9
SESIÓN 1
CONFERENCIA PLENARIA SESION 1

La glicoingeniería de
proteínas en el camino de
novedosos bioterapéuticos
OGGERO, Marcos R.
Laboratorio de Cultivos Celulares. Centro Bio-
tecnológico del Litoral. Facultad de Bioquímica
y Ciencias Biológicas. Universidad Nacional del
Litoral.
CONICET
[email protected]
La glicosilación de proteínas es la forma

predominante de modificación postraduc-
SESIÓN 1 cional que, con determinadas variantes, es
TECNOLOGÍA común a las células eucariotas. La glicosila-

ción enzimática implica una compleja red
DE CULTIVO metabólica y diferentes tipos de vías que or-

questan la amplificación del proteoma para
producir distintas proteoformas y funciones
CELULAR biológicas. La gran diversidad estructural de
los glicanos plantea desafíos que conducen
a la exploración de sus funciones específicas
y a nuevas funciones que pueden ser otor-
gadas en el contexto del diseño de nuevas
biomoléculas.
En la actualidad existen cientos de proteí-
nas y péptidos terapéuticos aprobados por
las agencias internacionales de evaluación
de medicamentos para una amplia variedad
de indicaciones. Muchas de estas proteínas
y péptidos carecen de propiedades farma-
cocinéticas adecuadas, a menudo porque
son más pequeñas que el límite de filtración
renal de alrededor de 70 kDa y/o están su-
jetos a renovación metabólica por peptida-
sas, que limitan significativamente su vida
media in vivo. Para subsanar este inconve-
niente surgen los productos biomejorados
o biobetters, que se definen como nuevas
versiones de los biofarmacéuticos que son
desarrollados mediante la incorporación de
10
SESIÓN 1
cambios en su perfil molecular y/o funcional otro lado, la obtención de una versión nove-
a través de modificaciones químicas o mo- dosa de eritropoyetina para la cual, dado su
leculares. Sumado a estas particularidades natural comportamiento hematopoyético y
farmacocinéticas, el aspecto farmacodiná- neuroprotector, se priorizó esta última fun-
mico también se hace presente mediante la ción biológica en detrimento de la primera.
generación de nuevos fármacos basados en En particular, el segundo caso dio lugar a
proteínas que puedan desplegar funciones la creación de una empresa de base tecnoló-
innovadoras. gica y a fases de nacionalización de patentes
En este sentido, en nuestro laboratorio como hitos imprescindibles para avanzar ha-
hemos utilizado a la glicoingeniería como cia un nuevo y eficaz bioterapéutico.
recurso para conferir mejoras a proteínas de
relevancia terapéutica generando productos
Palabras claves: GLICOSILACIÓN; GLICOIN-
biomejorados e innovadores en cultivos de GENIERÍA; BIOTERAPÉUTICOS; INTERFERÓN;
células animales. ERITROPOYETINA
La glicoingeniería se presenta como una
estrategia basada en la modificación del
contenido y/o la estructura de los glicanos

de una proteína mediante la aplicación de
modificaciones genéticas que dan lugar a
protocolos para modificar proteínas y célu- 1TCC
las. En un sentido amplio la glicoingeniería Vacunas multipropósito
incluye la optimización y remodelación de
glicanos que naturalmente se expresan en desarrolladas a partir de
una dada proteína, la eliminación de los mis- una plataforma generadora
mos o la incorporación de nuevos, todo ello
con el objetivo de generar entidades con
de VLPs Quiméricas
propiedades novedosas o mejoradas, que GARAY, Ernesto S. a, b; FONTANA, Diego S. a, b
;
en el caso de bioterapéuticos se traduzca en KRATJE, Ricardo B.b; PRIETO, Claudio C. a
el incremento de la potencia biológica y la a) Laboratorio de Desarrollo Biotecnológico.
disminución de los efectos adversos. Centro Biotecnológico del Litoral. Facultad de
En esta presentación se mostrarán dos Bioquímica y Ciencias Biológicas. Universidad
Nacional del Litoral.
proteínas desarrolladas en nuestro laborato-
rio en las que la adición de glicanos median- b) CONICET
te glicoingeniería contribuyó a perfilar molé- [email protected]
culas de interés terapéutico. La primera, una
molécula de interferón-alfa2b (IFN-α2b) en
su versión híper-N-glicosilada e híper-O-gli- Las partículas pseudovirales (VLPs) son
cosilada y, la segunda, una molécula de eri- estructuras supramacromolecularesautoen-
tropoyetina híper-N-glicosilada. Si bien la samblables constituidas por proteínas vira-
glicoingeniería se llevó a cabo para ambas les, que a diferencia de los virus son biose-
entidades moleculares, la concepción de su guras debido a no poseer material genético
aplicación tuvo distintos objetivos. Por un en su interior. Además, debido a su naturale-
lado, la mejora de las propiedades farmaco- za particulada y multivalente son capaces de
cinéticas y biológicas del IFN natural y, por el generar respuestas inmunes robustas, sien-
11
SESIÓN 1
do candidatos interesantes para el desarro- regiones aptas para tal fin, una en el extre-
llo de vacunas de nueva generación. Asimis- mo N-terminal y dos dentro de la secuencia
mo, es posible fusionar epitopes o dominios en zonas de loops. Luego, se insertó en for-
heterólogos en ciertas proteínas virales que ma independiente la secuencia heteróloga
al ser expresadas en forma recombinante en cada región, obteniéndose tres variantes
permiten la formación de VLPs quiméricas diferentes de proteínas de fusión de RVG
(qVLPs), siendo capaces de generar respues- con el loop G-H.
tas inmunes hacia dicho dominio heterólo- Posteriormente, se expresaron dichas
go. Sin embargo, puede ocurrir que luego de proteínas en células HEK293 y se compro-
la introducción de la secuencia heteróloga bó su correcta localización en la membrana
el plegamiento de la proteína carrier se vea plasmática por inmunomarcación con anti-
alterado. Por este motivo, resulta esencial cuerpos anti-RVG, mediante citometría de
identificar regiones en la misma que sean flujo y microscopía láser confocal. A su vez,
apropiadas para estos fines. se comprobó que el epitopeheterólogo se
En nuestro laboratorio desarrollamos y encuentra expuesto y con una conformación
caracterizamos previamente VLPs del virus antigénica correcta al ser reconocido por an-

de la rabia (RV-VLP), las cuales se genera- ticuerpos específicos anti-FMDV. Finalmen-
ron por expresión recombinante en células te, se verificó por ELISA sándwich específico
HEK293 de la glicoproteína G (RVG) del virus hacia RVG y FMDV, la formación de qVLPs en
de la rabia, una proteína de envoltura que el sobrenadante de cultivo de las variantes
es el principal blanco de anticuerpos neu- diseñadas, verificando a su vez que el epi-
tralizantes (AN). Éstas RV-VLPs son capaces topeheterólogo se encuentra expuesto en la
de generar AN en animales y de protegerlos superficie de las partículas.
frente a desafíos con el virus de la rabia acti- Estos resultados son prometedores y po-
vo, volviéndose un candidato vacunal atrac- drían sentar la base para la generación de
tivo frente a las vacunas tradicionales a virus una nueva plataforma de presentación anti-
inactivado que requieren la manipulación génica basada en RV-VLPs.
del virus para su producción.
El objetivo de este trabajo fue evaluar
la capacidad de la RVG para generar qVLPs,
de manera de establecer una plataforma de
presentación antigénica basada en RV-VLPs. Palabras claves: PARTÍCULA PSEUDOVIRAL;
Como modelo de estudio utilizamos un epi- RABIA; AFTOSA; HEK293; VACUNA.
tope de importancia antigénica del virus de
la Fiebre Aftosa (FMDV), denominado loop
G-H (AA 140-160 de la proteína de cápside
VP1). Esta secuencia representa el sitio blan-
co de AN ya que es la responsable de la inte-
racción con el receptor celular durante una
infección. Para esto se identificaron posibles
sitios de inserción dentro de la secuencia de
aminoácidos de RVG mediante un análisis
bioinformático en el cual se seleccionaron
regiones con elevada flexibilidad estructural
y expuestas al solvente. Se identificaron tres
12
SESIÓN 1
2TCC estas razones, el uso de promotores endó-

genos que se encuentren activos durante las
Nuevos promotores fases del ciclo celular asociadas a la produc-
endógenos, identificados ción, constituye una alternativa interesante.
mediante RNA-SEQ de En este trabajo, se llevó a cabo la secuen-
células CHO-k1, para la ciación del transcriptoma (RNA-seq) de cé-
lulas CHOK1 adaptadas al cultivo en suspen-
expresión de proteínas sión. La comparación entre los perfiles de
recombinantes expresión génica obtenidos en las diferentes
etapas de cultivo permitió seleccionar cier-
tos genes con elevada actividad transcrip-
TOSSOLINI, Ileanaa b; GUGLIOTTA Agustinaa b;
LOPEZ DÍAZ, Fernandod;KRATJE, Ricardo B.a b; cional, con el fin de utilizar sus promotores
PRIETO, Claudioa c. para generar nuevos vectores de expresión.
a) Laboratorio de Cultivos Celulares, Facultad de Se realizaron tres réplicas biológicas del
Bioquímica y Ciencias Biológicas, Universidad cultivo de células CHOK1 en biorreactores
Nacional del Litoral, Santa Fe, Argentina. operados en modo perfusión, empleando
b) CONICET, Santa Fe, Argentina. medio de cultivo libre de suero fetal bovino.
Se obtuvieron muestras de ARN durante la
c)Cellargen Biotech S.R.L., Santa Fe, Argentina.
fase exponencial y estacionaria. Luego de la
d) Regulatory Biology Laboratory, Salk Institute secuenciación mediante la plataforma Illu-
for Biological Studies, 10010 N. Torrey Pines mina y el análisis bioinformático de los datos,
Road, La Jolla, CA 92037. se seleccionaron 6 genes con elevada expre-
[email protected] sión en ambas etapas de cultivo. La región
promotora de cada gen (aproximadamente
1 kb) fue amplificada mediante PCR. Estos
Las células derivadas de ovario de hám- promotores (que denominamos P1-P6) fue-
ster chino (chinesehamsterovary, CHO) ron clonados en el vector de expresión pZs-
constituyen el sistema huésped de elección Green1-1 para evaluar la actividad transcrip-
para la producción industrial de proteínas cional de los mismos de manera transitoria y
recombinantes terapéuticas. La expresión estable, no solo en células CHO-K1 sino tam-
de proteínas heterólogas en células de ma- bién en células HEK293 y BHK-21, amplia-
mífero requiere de la optimización de di- mente usadas para la producción de proteí-
versos parámetros, entre ellos, el diseño nas recombinantes terapéuticas y vacunas.
del vector de expresión. Actualmente, el Los nuevos promotores fueron evaluados y
empleo de promotores virales (como CMV) comparados en función del promotor CMV,
constituye la alternativa más usada, ya que el cual contiene la secuencia mínima del
proporcionan niveles altos de expresión de promotor, antecedido por un enhancer y
la proteína recombinante de interés. Sin seguido por un intrón quimérico. La expre-
embargo, los promotores virales muchas ve- sión de la proteína reportera fue analizada
ces se encuentran sujetos a silenciamiento mediante microscopía de fluorescencia y ci-
epigenético. Además, imponen a las células tometría de flujo. También, se evaluó la ex-
cierto estrés, pudiendo interrumpir su cre- presión estable del gen reportero luego de
cimiento y afectar diversos procesos celula- un descenso de la temperatura del cultivo
res. Idealmente la función promotora debe de células CHO-K1 (37 °C a 32 °C). La ma-
coordinarse con el proceso productivo. Por yoría de los promotores endógenos mostró
13
SESIÓN 1
una actividad transcripcional comparable o la provincia de Buenos Aires, Junín, Buenos

superior al promotor viral CMV, evidencian- Aires, Argentina.
do altos niveles de actividad y estabilidad de [email protected]
expresión a largo plazo.
En resumen, se obtuvieron promotores
endógenos de células CHOK1 que consti- La degradación y contaminación del sue-
lo por metales pesados (MP) se han conver-
tuyen una alternativa promisoria al uso de
promotores virales, para la producción detido en una gran preocupación en todo el
proteínas recombinantes de interés biote-mundo. La fitorremediación representa una
rapéutico. Además, los mismos responden solución tecnológica eficaz para disminuir la
a las condiciones de cultivo habitualmen-contaminación. En esta técnica se pueden
te implementadas en la escala productiva utilizar plantas para la fitoestabilización y
revegetación de suelos degradados, como
(alta densidad en cultivos en perfusión). Es-
Sesbaniapunicea y Sesbaniavirgata, ambas
tos promotores constituyen un panel inicial
especies nativas de la Región Pampeana (Ar-
para diseñar estrategias de ingeniería celu-
gentina). En el presente estudio se evaluó la
lar y promotores sintéticos, así como para el

germinación y regeneración in vitro a partir
desarrollo de líneas celulares industriales.
de callos de estas especies con el objeto de
producir un protocolo eficiente para su pos-
Palabras claves: CÉLULAS CHO; PROMOTORES terior uso como especies fitorremediadoras
ENDÓGENOS; RNA-SEQ; CÉLULAS DE MAMÍFE-
RO; ACTIVIDAD TRANSCRIPCIONAL. y brindar información que permita generar
variabilidad para aumentar la tolerancia a
MP.
Las semillas de ambas especies se some-
tieron a tratamientos pregerminativos (con-
trol, escarificación química con H2SO4 (90%),
3TCC
lavado con H2O 24 horas y escarificación me-
Germinación y cánica), en placas de Petri con papel de fil-
regeneración in vitro de tro humedecido con agua destilada, en una
cámara de germinación (28°C y oscuridad).
Sesbaniapunicea y Una vez seleccionado el mejor tratamiento
Sesbaniavirgata pregerminativo, las semillas se desinfecta-
ron superficialmente con alcohol (70%) 1
VALENTI Melina a; GONZALEZ Matías b; RUSCIT- minuto y NaClO (40%) 30 minutos. Dentro
TI Marcela b,c del flujo laminar, se enjuagaron tres veces
a) Centro Experimental de Propagación Vegeta- con agua esterilizada. Se sembraron 40
tiva (CEPROVE), Facultad de Ciencias Agrarias y semillas de cada especie en tubos de 90
Forestales, Universidad Nacional de La Plata, La cm3 que contenían un medio de cultivo de
Plata, Buenos Aires, Argentina
aislamiento. El pH de todos los medios de
b) Instituto de Fisiología Vegetal (INFIVE - UNLP - cultivo se ajustó entre 5,8 y 6,2, antes de
CONICET), Facultad de Ciencias Agrarias y Fores- esterilizarse en autoclave a 1,05 kg.cm-2
tales, Universidad Nacional de La Plata, La Plata, y 120 °C durante 20 minutos. Las condi-
Buenos Aires, Argentina.
ciones de cultivo fueron 25 °C ± 2 °C y 16
c) Departamento de Ciencias Básicas y Experi- horas de luz, con una irradiancia de 100
mentales, Universidad Nacional del Noroeste de µmoles.m-2.s-1.
14
SESIÓN 1
Las plántulas de ambas especies obteni- 4TCC

das in vitro se cortaron y separaron en sec-
ciones de cotiledones, epicotilo e hipocótilo.
Hongos del género
Estos explantes se sembraron en un medio Ophiostomade los bosques
basal de Murashige y Skoog (1962), con au-
xinas y citocininas en partes iguales para
andino-patagónicos para
evaluar la capacidad de inducción de callos. la obtención de lipasas
Se sembraron cotiledones, secciones de hi-
AQUINO M. D. a b c; PILDAIN M. B. a b e; SAPARRAT
pocótilo y secciones de epicótilo de cada M. C. N.b d
especie, con ocho repeticiones de cada uno.
a) Centro de Investigación y Extensión Forestal
Treinta días después, los explantes se sub-
Andino Patagonico (CIEFAP)
cultivaron en un medio similar, en idénticas
condiciones ambientales, sin la adición de b) CONICET
reguladores de crecimiento. Los callos que c)McyTeIP-Chubut
mostraron un crecimiento significativo y sig-
nos de morfogénesis se subcultivaron en un d) Instituto de Fisiología Vegetal (INFIVE), Uni-
versidad Nacional de La Plata
medio de proliferación de brotes y los brotes

formados en esta etapa se subcultivaron en e) UNPSJB
un medio para su posterior enraizamiento. [email protected]
El porcentaje de germinación de semillas
que no tuvieron ningún tratamiento preger-
minativo fue escaso, sin embargo, tanto la El mercado de enzimas industriales se
escarificación mecánica como la química in- encuentra en constante crecimiento debido
crementaron significativamente la germina- a las mejoras en las tecnologías de produc-
ción en ambas especies. Es posible la rege- ción, la ingeniería de las proteínas en sus
neración in vitro a partir de callos, utilizando
propiedades funcionales y los nuevos cam-
secciones de epicotilo como explante, que pos de aplicación. Los hongos productores
tienen capacidad caulogénica. Sin embargo, de enzimas extracelulares presentan ven-
la respuesta en la etapa de enraizamiento no tajas sobre las fuentes bacterianas, siendo
fue la misma para las dos especies, siendo una de las más importantes su menor costo
mejor en S. virgata. La capacidad de regene- dado la facilidad relativa de obtención. Las
rar estas especies mediante el cultivo de ca- lipasas son enzimas que hidrolizan esteres
llos aporta nueva información para avanzar de diferentes compuestos como los acilgli-
en los estudios de transformación genética y ceroles, incluyendo las triacilglicerolacil hi-
generar variabilidad para incrementar la to- drolasas (EC 3.1.1.3), catalizadores claves
lerancia a la contaminación por MP y poder en reacciones de esterificación y transeste-
utilizar estas especies para planes de fitorre-rificación necesarias por ejemplo en la in-
mediación o revegetación de ecosistemas dustria del biodiesel. El género Ophiostoma
degradados. incluye hongos que están asociados a esca-
rabajos fitófagos y al floema de la madera,
ocasionando manchas en el albura, conoci-
Palabras claves: CULTIVO IN VITRO; MILTIPLICA-
das como mancha azul o mancha de albu-
CIÓN POR SEMILLAS; SESBANIA.
ra (blue-stain o sap-stain). Dentro de este
género, existen especies altamente produc-
toras de lipasas. El objetivo de este trabajo
15
SESIÓN 1
es evaluar la capacidad de aislamientos de 5TCC

diferentes especies de Ophiostomaobteni-
das de árboles de los bosques patagónicos
Desarrollo de un proceso
para sintetizar lipasas y su respuesta al su- de producción de
plemento de aditivos que puedan maximi- gonadotrofina coriónica
zar su producción. Para ello, se utilizaron
5 aislamientos, OphiostomapiliferumCIE- equina recombinante
FAPcc 475, OphiostomaperegrinumCIEFAPcc
464, Ophiostomanovae-zelandieCIEFAPcc VILLARRAZA, Carlos J.a,d; ANTUÑA, Sebastiánf;
TARDIVO, Belénf; RODRIGUEZ, María Ca,d;
423, OphiostomanothofaguiCIEFAPcc 446 CATTANEO, Lucianoc; BÓ, Gabrielg; CEAGLIO,
y OphiostomapatagonicumCIEFAPcc 449. Nataliab,d; PRIETO, Claudioa,e,f
Se evaluó en placa su habilidad para sinte- a) Laboratorio de Desarrollo Biotecnológico.
tizar enzimas hidrolíticas utilizando Tween Centro Biotecnológico del Litoral. Facultad de
20 y Tween 80 como sustrato; en cultivo Bioquímica y Ciencias Biológicas. Universidad
líquido se evaluará el efecto de diferentes Nacional del Litoral.
aditivos, como aceite de oliva, aserrín de
b) Laboratorio de Cultivos Celulares. Centro Bio-

Nothofagussp. y de Pinussp., sobre la acti- tecnológico del Litoral. Facultad de Bioquímica
vidad lipasa extracelular utilizando 1,2-o-di- y Ciencias Biológicas. Universidad Nacional del
lauril-rac-glicero-3-ácido glutárico-(6-meti- Litoral.
lresofurina)-éster como sustrato. Aunque
c) Facultad de Ciencias Veterinarias. Universidad
en placa todos los aislamientos mostraron Nacional del Litoral.
actividad lipasa extracelular, la relación en-
tre la hidrólisis enzimática y el crecimiento d) CONICET
miceliar mostró diferencias según el tipo de e) CellargenBiotech S.R.L.
sustrato utilizado, siendo mayor en presen-
f) Biotecnofe S.A., PTLC.
cia de Tween 20, y el aislamiento. Entre és-
tos, los niveles más altos fueron detectados g) Instituto de Reproducción Animal Córdoba
para O. piliferumCIEFAPcc 475, mientras que (IRAC)
los más bajos se obtuvieron en el caso de [email protected]
O nothofagiCIEFAPcc 446. Estos resultados
serán comparados con los datos obtenidos
en cultivo líquido para la optimización de La gonadotropina coriónica equina (eCG)
la producción de sus lipasas extracelulares. es una hormona utilizada en medicina vete-
Ophiostomapiliferum es una especie ya re- rinaria para controlar la actividad reproduc-
portada por su alta producción de lipasas. tiva en diferentes tipos de ganadoFSH and
No hay reportes de producción enzimática thyroid-stimulating hormone. In non-equid
para O. nothofagi, por lo que se espera me- species, eCG shows high LH- and FSH-like ac-
jorar la producción optimizando la relación tivities and has a high affinity for both FSH
actividad/crecimiento. and LH receptors in the ovaries. On the gra-
nulosa and thecal cells of the follicle, eCG
has long-lasting LH- and FSH-like effects that
Palabras claves: LÍPIDOS; PATAGONIA; HIDRÓLI-
SIS; ENZIMAS FÚNGICAS. stimulate oestradiol and progesterone se-
cretion. Thus, eCG administration in dairy
cattle results in fewer atretic follicles, the re-
cruitment of more small follicles showing an
elevated growth rate, the sustained growth
16
SESIÓN 1
of medium and large follicles and improved recuperación de aproximadamente 70%. La

development of the dominant and pre-ovu- potencia biológica in vivo de la reCG parcial-
latory follicle. In consequence, the quality mente purificada se evaluó en ratas hembras
of the ensuing CL is improved, and thereby mediante el ensayo descripto por Steelman
progesterone secretion increased. Based on y Pohley, obteniéndose un valor de 7200 ±
these characteristics, eCG treatment is uti- 100 UI.ml-1, lo cual permitió demostrar la ac-
lized in veterinary medicine to control the tividad biológica de la hormona producida
reproductive activity of the cow by i. Actual- en animales de experimentación. Finalmen-
mente, el único producto comercial dispo- te, se evaluó la eficacia de diferentes dosis
nible para este fin consiste en una prepara- de reCG en un protocolo de inseminación
ción parcialmente purificada de plasma de artificial a tiempo fijo (IATF) sobre la tasa de
yeguas preñadas (PMSG), que no solo cons- preñez en animales de destino. Para ello, 82
tituye un riesgo para la salud por los posi- vacas BosindicusxBostaurus en anestro fue-
bles contaminantes presentes en el plasma, ron distribuidas en cuatro grupos, los cua-
sino que también plantea algunas cuestio- les recibieron 100 (n=21), 140 (n= 20) y 200
nes bioéticas. Se han descripto diversos in- (n=20) UI de reCG o 400 UI de PMSG (n= 21).
tentos para producir la eCG recombinante Las tasas de preñez obtenidas fueron 33,3%
(reCG) en diferentes huéspedes. No obstan- (7/21), 45,0% (9/20) y 30,0% (6/20) para las
te, en todos los casos, la hormona no mostró vacas que recibieron 100, 140 y 200 UI de
bioactividadin vivo significativa en modelos reCG, respectivamente, y 42,9% (9/21) para
de rata, o fue producida en cantidades insu- aquellas que recibieron 400 UI de PMSG. De
ficientes para fines comerciales. esta manera, se pudo concluir que la reCG
El objetivo del presente trabajo fue desa- no solo demostró actividad biológica en el
rrollar un proceso de producción de la reCG ganado vacuno, sino que además una dosis
mediante la expresión de la proteína a partir de 140 UI de reCG ejerció el mismo efecto
del cultivo de células animales modificadas biológico que una dosis de 400 UI de PMSG,
por ingeniería genética, utilizando medio de lo que podría indicar una mayor bioactivi-
cultivo libre de suero fetal bovino (SFM). dad de la hormona recombinante.
Se generó una línea celular productora Los resultados obtenidos demuestran

de reCG mediante transducción lentiviral de que la estrategia desarrollada representa
células CHO-K1 adaptadas a crecimiento en una opción atractiva para la producción de
suspensión (sCHO-K1). Dicha línea celular reCG y constituye una alternativa auspiciosa
fue clonada mediante técnica de dilución para el reemplazo de animales como fuente
límite, obteniéndose el clon celular P5C3 de PMSG.
con una productividad de 20 UI.106 cel-1.d-1,
el cual fue cultivado en un biorreactor de 1 Palabras claves: GONADOTROFINA CORIÓNI-
L de volumen de trabajo, operado en modo CA EQUINA; PMSG; PARTÍCULAS LENTIVIRA-
de perfusión en SFM. El clon P5C3 presen- LES; CHO-K1
tó una velocidad específica de crecimiento
de 0,013 h-1, con una producción cercana a
1,8x105 UI de reCG por día. La reCG fue par-
cialmente purificada del sobrenadante de
cultivo mediante cromatografía de pseudo-
afinidad a colorantes, empleando la resina
CaptoBlue-Sepharose FF, obteniéndose una
17
SESIÓN 1
6TCC La adaptación directa al MLS mantuvo la

tasa de crecimiento y la productividad de la
Optimización de la condición inicial; sin embargo, el protocolo
producción in vitro de secuencial redujo la productividad en un
mabs mediante design of 96%. El clon adaptado a MLS de forma di-
recta fue empleado para la producción del
experiments mAb 2B2 en cultivos batch,obteniendo un
rendimiento de 200 mg de mAb (concentra-
WANDEL PETERSEN, Valentina ; KRATJE, Ricar- ción promedio 120 µg/ml) con una pureza
a, b
do B. a, b; OGGERO, Marcos R.a, b; BÜRGI, María superior al 98%.

M.a, b
Dado el elevado costo de los reactivos que

a) Laboratorio de Cultivos Celulares. Centro componen el MLS y la necesidad de producir
Biotecnológico del Litoral. Facultad de Bio- grandes masas del mAb 2B2, se optimizó la
química y Ciencias Biológicas. Universidad formulación del medio de cultivo mediante
Nacional del Litoral. un diseño de experimentos (DOE) de mez-
b) CONICET clas D-optimal. El diseño constó de 13 ex-

[email protected]
perimentos realizados en un mismo bloque,
empleando las siguientes mezclas de los me-
dios DMEM/Ham’s F12:EXCELL-620 50:50,
En nuestro laboratorio, los procesos de
56:44, 63:37, 75:25, 81:19, 87:13, 94:6, sin
purificación y caracterización de rhEPO y de
el agregado de lípidos.
análogos N-hiperglicosilados de la citoquina,
requieren del empleo de un anticuerpo mono- El DOE permitió eliminar el SFB y el coles-
clonal anti-rhEPO (mAb 2B2) que, hasta el mo- terol como suplementos nutricionales, arro-
mento, era producido in vivo en líquido ascíti- jando dos soluciones como óptimos simul-
co. Debido a preocupaciones éticas, científicas táneos: las mezclas 67:33 y 94:6 de DMEM/
y de seguridad inherentes al uso de animales, Ham’s F12:EXCELL-620, las cuales estable-
se adaptó el hibridoma productor a un medio cen una reducción de los costos del medio
de cultivo libre de suero fetal bovino (MLS) de cultivo de 10,4 y 40,5 veces, respectiva-
compuesto por la mezcla 50:50 de los medios mente, en relación al medio de cultivo ini-
comerciales DMEM/Ham’s F12 y EXCELL-620, cial. Ambas condiciones lograron mantener
suplementado con colesterol. la tasa de crecimiento de la condición inicial
(valor medio de 0,04 h-1), así como la CE50 e
El proceso de adaptación consistió en una
incrementaron la productividad del clon 1,7
primera etapa de reducción gradual de la
y 1,5 veces, respectivamente.
concentración de suero fetal bovino (SFB) en
el medio de cultivo, operado en condiciones En conclusión, la adaptación del hibridoma
estáticas, y una segunda etapa de adapta- productor al MLS permitió incrementar 1,3 ve-
ción a MLS en agitación, procedimiento que ces la pureza del mAb, conservar su afinidad
se realizó mediante un protocolo directo y aparente y mantener los parámetros de creci-
otro secuencial. Se compararon los cultivos miento y producción. De este modo se reem-
adaptados mediante la determinación de los plazará su producción in vivo por un proceso
parámetros específicos: velocidad de creci- económico, reproducible, escalable, libre del
miento, velocidad de muerte, productividad empleo de animales y de sus derivados, que
y concentración efectiva 50 (CE50) del mAb permitirá disponer del reactivo en grandes
producido en cada condición. cantidades para diferentes propósitos.
18
SESIÓN 2
Como perspectiva futura, se emplearán

ambas condiciones óptimas para producir
el mAb a mayor escala mediante un proceso
bifásico en un biorreactor, en el cual, la mez-
cla 67:33 se utilizará como medio de cultivo
de crecimiento y la mezcla 94:6 como medio
de cultivo para perfusión.
Palabras claves: ANTICUERPOS MONOCLONA-

LES; DISEÑO DE EXPERIMENTOS; MEDIO DE CUL-
TIVO LIBRE DE SUERO.
SESIÓN 2
FERMENTACIÓN
MICROBIANA Y
BIOTRANSFOR-
MACIONES
19
SESIÓN 2
Conferencia Sesión 2: Fermentación producir PHB en A. vinelandii. Se presentan

microbiana y biotransformaciones los principales resultados de nuestro grupo,
Aspectos moleculares y con énfasis en el desarrollo de cultivos de
A. vinelandii para producir PHB y el escala-
tecnológicos para la miento de su producción.
producción de polihidroxi-
alcanoatos: plásticos de
origen bacteriano
Perspectivas alimentarias
DÍAZ-BARRERA, Alvaro de seleno-aminoácidos y
Escuela de Ingeniería Bioquímica, Pontificia
Universidad Católica de Valparaíso, Chile
seleno-nanopartículas
[email protected]
producidas por bacterias
lácticas

El desarrollo de técnicas de biología mo- PESCUMA, Micaela
lecular en conjunto con estrategias de in-
Centro de Investigación y Extensión Forestal An-
geniería son necesarias para optimizar la dino Patagónico (CIEFAP)-CONICET. Ruta 259 Km
producción de productos biotecnológicos. 16,24 - CC 14 (9200) Esquel,Chubut, Argentina.
Un tipo de producto biotecnológico son los
polímeros de origen bacteriano. Entre estos [email protected]
bioproductos se encuentra el poli(3-hidroxi-
butirato) (PHB), el cual es un poliéster que
El selenio (Se) es un micronutriente esen-
se acumula intracelularmente. Un microor-
cial para todos los organismos vivos. La de-
ganismo productor de PHB es Azotobacter
ficiencia de Se está asociada con pérdida de
vinelandii, la cual es una bacteria Gram-ne-
fertilidad, enfermedades cardiovasculares
gativa, aerobia estricta que puede fijar ni-
y baja resistencia a enfermedades virales y
trógeno atmosférico. El PHB tiene diferentes
bacterianas. Se ha sugerido que la ingesta
aplicaciones, destacándose como reemplazo
de cantidades mayores a las recomendadas
del plástico en diversas aplicaciones indus-
(200 µg/día) podría proteger contra el cán-
triales y como material usado en biomedici-
cer y algunas enfermedades degenerativas
na. Desde hace décadas se está estudiando
relacionadas con la edad. Esto se debe a que
el metabolismo de síntesis de PHB y se sabe
el Se se encuentra como SeCys en el centro
que se encuentra bajo un complejo control
activo de selenoproteínas con actividad an-
genético. Así, el uso de mutantes de A. vine-
tioxidante (glutatión peroxidasa, iodotiro-
landii para producir PHB ofrece una herra-
nina deiodinasa y tioredoxina reductasa).
mienta para sintetizar polímeros de calidad
El Se en la naturaleza se encuentra princi-
definida. Asimismo, el control de variables
palmente como sales inorgánicas (SeO4,
del bioproceso tal como el oxígeno del culti-
SeO5) en el suelo o como selenometionina
vo, permite producir PHB con pesos molecu-
(SeMet) o selenometilcisteina (SeMetCys)
lares específicos. En esta ponencia, se abor-
en nueces, cebolla, ajo, repollo, mostaza y
dan los principales aspectos de ingeniería de
hongos. Sin embargo su concentración en
bioprocesos y de biología molecular que de
los vegetales dependerá de la concentración
manera integrada se están utilizando para
20
SESIÓN 2
de sales de Se en el suelo. Las bacterias lác- Introducción: En la actualidad, los biosur-

ticas (BAL) son ampliamente utilizadas en la factantes (BS) son utilizados en diferentes
industria alimentaria en la elaboración de áreas de interés industrial como la alimenti-
diversos alimentos y bebidas fermentadas. cia, cosmética, farmacéutica y biorremedia-
Estas bacterias son capaces de unir, incor- ción. Los BS poseen múltiples ventajas sobre
porar y bio-transformar Se en SeCys, SeMet los surfactantes sintéticos, sin embargo, aún
y selenonanopartículas (SeNPs). Reciente- existen desventajas en su comercialización
mente, se encontraron selenoproteínas en masiva asociadas a los elevados costos de
el proteoma extracelular de BAL por lo que producción y recuperación. El precio final
el huésped podría recibir SeCys al ingerir de estos productos está relacionado con la
alimentos fermentados suplementados con composición del medio de cultivo, pero es-
Se o incluso durante la permanencia del mi- pecíficamente, con la elección de la fuente
croorganismo en el intestino. Por otro lado, de carbono. Para afrontar este conocido
se sabe que las SeNPs tienen capacidad an- problema, muchos autores han centrado sus
timicrobiana y anti-carcinogénica. La capa- investigaciones en el empleo de residuos o
cidad de las BAL de biotransformar Se abre sub-productos industriales. Una alternativa
nuevas perspectivas para la elaboración de que viene siendo muy explorada es utilizar
productos fermentados y/o probióticos enri- residuos hidrofóbicos parcialmente inmisci-
quecidos en Se (SeNPs y/o Se-aminoácidos) bles en los medios líquidos. En este sentido,
con propiedades benéficas sobre la salud. se ha reportado que la presencia de éstos
compuestos incrementa la producción mi-
crobiana de BS resultando en rendimientos
mayores a los encontrados para fuentes de
carbono tradicionales.
Objetivo:Estudiar la producción de BS
empleando Pseudomonas syringae pv. ta-
2FMB baci como microorganismo productor, uti-
Producción de lizando un residuo hidrofóbico y sustratos
hidrofílicos convencionales en los medios de
biosurfactantes en cultivos cultivo.
sumergidos: evaluación de Metodología: Se utilizaron Erlenmeyer
distintas fuentes de con 100 mL de medio fresco conteniendo
las siguientes fuentes de carbono (10 g/L):
carbono aceite de fritura usado (AFU), glicerol, saca-
rosa, fructosa, glucosa y una mezcla AFU/
HAIDAR, Carla N.a; LÓPEZ, Débora N. a; NERLI, glicerol proporción 1:1. Luego de inocular
Bibiana B. a y P. MALPIEDI, Luciana a.
los medios, el crecimiento bacteriano y pro-
a) Laboratorio de Sistemas Autoensamblados. ducción de BS fue monitoreado por medidas
Instituto de Procesos Biotecnológicos y Quími-
de DO600nm y metodologías de detección/
cos (IPROBYQ). Universidad Nacional de Rosario
(UNR) - CONICET. Suipacha 531, 1er piso, Rosario cuantificación (actividades superficiales/in-
– Santa Fe. CP:2000. terfaciales y HPLC), respectivamente. Des-
pués de realizar estudios comparativos me-
[email protected]
[email protected] diante un análisis estadístico y seleccionar la
condición que incremente la producción de
BS, el extracto obtenido fue caracterizado
21
SESIÓN 2
químicamente por FT-IR y LC-ESI-MS. Poste- Palabras claves: ACEITE DE FRITURA USADO; CA-
riormente, se exploraron algunas propieda- PACIDAD EMULSIONANTE; DILUCIÓN MICELAR
CRÍTICA; PSEUDOMONAS SYRNGAE PV. TABACI.
des fisicoquímicas que incluyeron estudios
de capacidad emulsionante con diversos
solventes orgánicos, dilución micelar crítica
(CMD) y estabilidad frente a diferentes con-
diciones experimentales.
Resultados: Concluida la evaluación y 3FMB
comparaciones estadísticas correspondien- Control óptimo de la
tes, los mejores resultados se observaron al
usar la combinación AFU/glicerol. Esta con-
producción de lípidos en
dición, permitió obtener un título de pro- microalgas mediante
ducción de BS de 1,730 ± 0,033 g/L luego de
72 horas de crecimiento a 28 °C. La caracte-
modelado metabólico
rización química reveló que la muestra esta- VITALE, Ignacioa; MÁRQUEZ, Vaninab; BECCA-
ba compuesta principalmente por una mez- RIA, Alejandrob; DONDO, Rodolfoa,b

cla de lipopéptidos cíclicos (siringopeptinas,
a) Instituto de Desarrollo Tecnológico para la In-
siringomicinas y atrofactinas) y glicolípidos dustria Química (INTEC; CONICET – UNL). Santa
(mono/di-ramnolípidos). Según los estudios Fe, Argentina.
de propiedades fisicoquímicas, el extracto
b) Laboratorio de Fermentaciones. Facultad de
de BS logró reducir la tensión superficial del
Bioquímica y Ciencias Biológicas, Universidad
agua desde 74,37 ± 0,28 mN/m hasta 40,07 Nacional del Litoral. Santa Fe, Argentina.
± 0,43 mN/m. Además, la muestra presentó
una CMD elevada (1:128) en comparación a [email protected]
datos reportados en bibliografía y fue capaz
de emulsionar una variedad de compues-
Los aceites unicelulares son productos
tos hidrófobos. En particular, se observaron
biotecnológicos muy promisorios, utilizados
índices de emulsificación del 83 % y 78 %
principalmente en la alimentación y en la
en presencia de tolueno y aceite de motor
síntesis de biocombustibles. En este trabajo
usado, respectivamente. Por otro lado, el
se desarrolló un modelo matemático ma-
extracto retuvo la mayor parte de su capa-
croscópico aplicado a datos bibliográficos de
cidad emulsionante después de haber sido
producción de lípidos en la microalga oleagi-
expuesto a condiciones extremas de tempe-
nosa Tisochrysis lutea. Para esto, se simuló
raturas, pH y fuerza iónica.
un proceso de cultivo en modo fed–batch
Conclusiones: Estos hallazgos indican la repetido, desarrollado en un biorreactor
posibilidad de utilizar un residuo hidrofó- abierto tipo raceway pond. Se aplicaron con-
bico altamente contaminante en el diseño diciones fotoautotróficas, con ciclos de luz y
de medios de cultivos para la producción oscuridad. Se tomaron dos conjuntos de es-
de BS empleando a P. syringae pv. tabaci. tados iniciales diferentes, representados por
Adicionalmente, los resultados muestran la sendas condiciones fisiológicas del inóculo.
versatilidad de la mezcla obtenida dado sus El modelo se basó en una red metabólica re-
atractivas y prometedoras propiedades fisi- ducida que incluyó la excreción de acetato
coquímicas. como mecanismo de disipación de energía
frente a un exceso de iluminación y un ba-
lance macroscópico correspondiente al tipo
22
SESIÓN 2
de cultivo indicado. En dicha red, cada fun- 4FMB

ción metabólica (fotosíntesis, glicólisis, sín-
tesis de carbohidratos, síntesis de lípidos y
Optimización de la
síntesis de biomasa) se caracterizó mediante secreción de enzimas
una estequiometría propia y una cinética de micolíticas en escovopsis
pseudoprimer orden. La producción de lípi-
dos se indujo simulando un agotamiento de primorosea HMP9
la fuente de nitrógeno, para lo cual se ma-
nipuló tanto la composición de la corriente BARENGO, Marcela P.a,b; AMERIO, Natalia S.a,b;
de entrada al biorreactor, como el flujo de BICH, Gustavo A. a,b; ZAPATA, Pedro D. a,b;
CASTRILLO, María L.a,b
la misma. El objetivo consiste en maximizar
el contenido de lípidos en la cosecha, plan- a) Universidad Nacional de Misiones. Facultad
teándose así un problema de control óp- de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales. Ins-
tituto de Biotecnología Misiones “Dra.María Ebe
timo. El modelo macroscópico se expresó
Reca” (InBioMis). Laboratorio de Biotecnología
como un sistema de ecuaciones algebraico– Molecular. Posadas, Misiones, Argentina.
diferenciales con 9 variables de estado y 3
b) CONICET (Consejo Nacional de Investigacio-
variables de control. El problema se resolvió

utilizando el software GPOPS. nes Científicas y Técnicas). Posadas, Misiones,
Argentina.
Su resolución permitió establecer políti-
[email protected]
cas óptimas de alimentación y de cosecha
del biorreactor como así también optimizar
la concentración de la fuente de nitrógeno
En la provincia de Misiones, una de las
en el mismo. Además, se pudo determinar
principales plagas que afecta el sector fo-
que las diferentes cosechas resultaron cuali-
restal primario, son las hormigas cortadoras
tativamente similares para las dos condicio-
de hojas. Su actividad forrajera consiste en
nes fisiológicas iniciales del inóculo. De esta
cortar y transportar hasta su nido material
manera, mediante el modelado metabólico,
vegetal fresco, sobre el cual crece el hongo
se pudieron resolver diferentes cuestiones
Leucoagaricus gongylophorus(Basidiomy-
operativas para el cultivo de esta microalga
cota: Agaricales), que es su principal fuen-
oleaginosa. Tal herramienta teórica se con-
te de alimento. Por su parte, los hongos del
solida así en este campo biotecnológico,
género Escovopsis (Ascomycota: Hipocrea-
demostrando su potencial utilidad para co-
les), se consideran parásitos especialistas
laborar en el establecimiento de un proceso
de L. gongylophorus. Estos micoparásitos,
industrial de producción de aceite unicelular
secretan enzimas micolíticas extracelulares,
de microalgas.
principalmente quitinasas, β-1,3-glucanasas
y proteasas, las cuales son capaces de hidro-
Palabras claves: BIORREACTOR FED-BATCH RE- lizar los componentes de las paredes celula-
PETIDO; TISOCHRYSIS LUTEA; ACEITE UNICELU- res de su hospedador. Por tanto, Escovopsis
LAR; OPEN RACEWAY POND. se presenta como un potencial biocontrola-
dor indirecto de las hormigas cortadoras de
hojas. Un camino eficaz para su aplicación
biotecnológica es inducir su actividad mico-
lítica, lo que implica la optimización experi-
mental de sus condiciones de fermentación,
como la concentración inicial de los compo-
23
SESIÓN 2
nentes del medio de cultivo, entre otras va- tración de componentes nitrogenados fue,
riables importantes. Por tanto, el objetivo deurea (0,1 g/L), extracto de levadura (1,86
este trabajo fue optimizar fuentes nitrógeno g/L) y sulfato de amonio (0,21 g/L). La acti-
para la secreción de enzimas micolíticas, en vidad proteasas se incrementó en un 59,3%,
una cepa de Escovopsis nativa de Misiones. β-1,3-glucanasas en un 87% y quitinasas en
Se trabajó con una cepa promisoria de un 86,35%.
Escovopsis primorosea HMP9, y fuentes de Estos resultados permitieron optimizar
carbono (paredes celulares de L. gongylo- un medio de fermentación líquido adecua-
phorus) y nitrógeno (complejo nitrogenado para maximizar la secreción micolítica
do Mandels) previamente seleccionadas. de la cepa Escovopsis primorosea HMP9 lo
Se procedió a la optimización de los com- que permitirá sentar las bases bioquímicas
ponentes nitrogenados del medio Mandels en la generación de un biofungicida contra
(urea, extracto de levadura y sulfato de L. gongylophorus, que pueda ser aplicado
amonio). Se empleó un diseño de superficie en el control biológico indirecto de hormigas
de respuesta (RSM), Box-Behnken, en el cual cortadoras de hojas.
se ensayó el efecto de tres concentraciones

para cada fuente de nitrógeno. Se realizaron
17 ensayos en fermentación líquida. Para Palabras claves: MANDELS; SUPERFICIE DE RES-
PUESTA; PROTEASAS; QUITINASAS; β-1,3-GLU-
cuantificar la actividad proteasa, se utilizó CANASAS; BIOCONTROL.
el método de azocaseína; y para las activi-
dades β-1,3-glucanasas y quitinasas, se em-
pleó el método del ácido dinitrosalicílico y
los resultados fueron analizados mediante el
programa estadístico Statgraphics centurión
XVI. 5FMB
Se realizó un análisis de varianza de RSM Producción de enzimas

en el cual se observó, un efecto positivo esta- para la síntesis de
dísticamente significativo por parte de todas
las fuentes de nitrógeno (p<0,05) en la ac- prebióticos utilizando
tividad proteasas. Con respecto a β-1,3-glu- descartes de zanahoria
canasas y quitinasas, se observó un efecto
significativo positivo por parte de extracto GUERRA, Laureana; CLEMENTZ, Adriana;
de levadura y negativo por parte de sulfato ROMANINI, Diana.
de amonio (p<0,05), con un nivel de 95,0% Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuti-
de confianza. A partir de la optimización de cas. Universidad Nacional de Rosario. IPROBYQ
múltiples respuestas se pudieron predecir - CONICET
las concentraciones de cada componente [email protected]
nitrogenado para optimizar las actividades
enzimáticas. Estas condiciones fueron va-
lidadas experimentalmente, obteniéndose Introducción: En Argentina se descartan
valores mayores a los predichos. Por tanto, anualmente 84.000 toneladas de zanahorias
a partir del diseño experimental RSM en (Daucus Carota), durante los procesos de
fermentación líquida, fue posible optimizar selección por no cumplir con los estándares
la actividad de las tres enzimas micolíticas, de calidad, tamaño y forma impuestos por el
empleando medio Mandels cuya concen- mercado. Este hecho, además de significar
24
SESIÓN 2
una importante pérdida económica para los un inóculo de 1x106 conidios/mL. El extracto
productores, tiene consecuencias negativas enzimático obtenido es capaz de catalizar la
sobre el medio ambiente dado que gran par- síntesis de fructooligosacáridos.
te del descarte se descompone a cielo abier- Conclusiones: Es posible producir inver-
to en campos generando proliferación de tasa con actividad transfructosilasa capaz
plagas, malos olores y alteración de los estra-
de sintetizar fructooligosacáridos a partir de
tos del suelo. En base a este contexto, este descartes de zanahoria, utilizando A. niger
trabajo propone reutilizar dichos descartes como productor. La revalorización de estas
como materia prima para la producción de zanahorias no solo contribuiría a mitigar los
enzimas generadoras de fructooligosacári- efectos negativos que conlleva su descarte,
dos (FOS), ingredientes con características sino que además tendría el beneficio de ge-
prebióticas, ampliamente utilizados en la nerar productos de valor agregado, abrien-
producción de alimentos funcionales y que do la posibilidad de producir FOS en el país,
en Argentina se importan en su totalidad. los cuales actualmente se importan en su
Objetivo: Producir invertasa, enzima con totalidad.
actividad transfructosilasa capaz de generar
fructooligosacáridos, a partir de descartes

Palabras claves: INVERTASA; FRUCTOOLIGOSA-
de zanahoria. CÁRIDOS; DESCARTES DE ZANAHORIA.
Materiales y Métodos:Las zanahorias
fueron procesadas a los fines de obtener
jugo y bagazo, siendo este último utiliza-
do como soporte de la fermentación sólida
para la producción de la enzima de interés,
utilizando Aspergillus niger como microor- 6FMB
ganismo productor. Se evaluó el efecto de Producción de ácido
la suplementación del bagazo con medios
enriquecidos en nitrógeno orgánico (urea,
láctico a partir de efluentes
extracto de levadura y (NH4)2SO4) e inorgá- industriales de bebidas
nico (medio Czapeck) y sin fuente de car-
bono. Por otra parte, se evaluó el volumen
gaseosas
del medio de suplementación agregado, la
concentración del inóculo y el tiempo de in- GUZMÁN, Victoria M.a, b; TOMASSI, Ariel H.a, b;
ZURBRIGGEN, Abrila ; BENZZO, María T.a ; SE-
cubación. La actividad transfructosilasa de LUY, Lisandro G.a, b; COMELLI, Raúl N.a, b
la enzima invertasa obtenida a partir de los a) Grupo de Procesos Biológicos en Ingeniería
extractos crudos fue determinada sobre una Ambiental. Depto. de Medio Ambiente. Facultad
solución concentrada de sacarosa (400 g/L) de Ingeniería y Ciencias Hídricas – Univ. Nacional
mediante cromatografía en capa fina. del Litoral (FICH-UNL). Ciudad Universitaria, CP
3000 - Santa Fe, Argentina.
Resultados: Se encontró que la suple- b) Consejo Nacional de Investigaciones Científi-
mentación del bagazo con fuentes orgánicas cas y Técnicas (CONICET).
de nitrógeno y elementos trazas aumenta [email protected]
notablemente la producción de invertasa
(145,51 U/mL) y para que ésta sea máxima El ácido láctico (AL) es de amplio uso en
se requiere un volumen de 5 mL de dicho la industria alimenticia, química, cosmética
medio, un tiempo de incubación de 96 h y y farmacéutica. Alrededor del 90% del AL
25
SESIÓN 2
disponible en el mercado se produce me- de azúcares entre el 65 y 90%, dependiendo

diante fermentación empleando bacterias de la cepa evaluada. El mejor desempeño
ácido lácticas (BAL) y aproximadamente un de las cepas en los controles en medio MRS
40% del costo global del proceso deriva del indica posibles inhibidores en los efluentes
costo de la materia prima seleccionada (glu- (por ej., conservantes). Sin embargo, se ha
cosa, sacarosa, jarabe de maíz y otros azúca- demostrado, a escala de laboratorio, que es
res simples). En este sentido, resulta de grantécnicamente factible producir ácido láctico
interés la identificación de fuentes alternati-
a partir de efluentes de la industria de bebi-
vas y económicas para su producción. das gaseosas empleando bacterias del géne-
El objetivo general del presente trabajo ro Lactobacillus.
fue evaluar y optimizar procesos para la pro-
ducción biológica de ácido láctico emplean- Palabras claves: ÁCIDO LÁCTICO; EFLUENTES IN-
do materias primas sustentables, en par- DUSTRIALES; LACTOBACILLUS.
ticular, los efluentes líquidos de industrias
de bebidas azucaradas generados por “ope-
raciones de descarte” (por ej, producto re-

chazado durante el proceso de elaboración 7FMB
por políticas de calidad y producto devuelto Obtención de extractos de
desde góndola). Estos efluentes, una opción
muy atractiva debido a su alta disponibilidad polifenoles mediante
y bajo costo, representan además una op- fermentación en estado
ción novedosa para el tratamiento conven-
cional de los mismos previo a su descarga en
sólido de Aspergillus niger
el medioambiente. y Aspergillus oryzae sobre
Se realizó un screening y se selecciona- orujo de uva y cascarilla
ron BAL del género Lactobacillus (L. casei, L.
plantarum y L. coryniformis) capaces de fer-
de soja
mentar los azúcares presentes en los efluen-
tes (glucosa, fructosa y/o sacarosa) sin pro- MEINI, María R.a; CABEZUDO, I.b; GALETTO,
Cecilia S.a; ROMAINI, Dianaa
ducción de CO2 y crecer en condiciones de
microaerobiosis con velocidades y rendi- a) Instituto de Procesos Biotecnológicos y Quími-
miento en ácido láctico compatibles con una cos de Rosario-IPROBYQ-CONICET
escala industrial. Los ensayos de fermenta- b) Facultad de Cs. Bioquímicas y Farmacéuticas,
ción se realizaron en reactores de 150 mL, UNR; CONICET
operados en forma discontinua teniendo [email protected]
en cuenta diferentes variables: agitación,
temperatura, concentración inicial de inó-
culo y pH regulado con soluciones de NaOH El orujo de uva es un subproducto de la
(variable de control fundamental durante el industria alimenticia que contiene una alta
proceso para evitar inhibición por producto proporción de polifenoles con potenciales
debido a la elevada concentración de azú- aplicaciones en alimentos funcionales. Sin
car en el efluente). En las condiciones selec- embargo, los métodos de extracción clási-
cionadas se obtuvieron rendimientos entre cos basados en solvente orgánicos no per-
0.50 ± 0.05 y 0.75 ± 0.05 gláctico/gazúcar consumido miten extraer la fracción de polifenoles que
luego de 72 hs de ensayo, con un consumo se encuentran unidos a la matriz lignocelu-
26
SESIÓN 2
lósica. Además, son poco amigables con el Los resultados obtenidos permiten con-
medio ambiente y suelen llevar a la perdida tar con información para la elaboración de
de actividad antioxidante ya que requieren cócteles enzimáticos ad-hoc destinados al
grandes cantidades de solventes orgánicos y tratamiento de distintas biomasas que con-
elevadas temperaturas. tengan en su matriz bioactivos de interés.
La extracción de esta fracción de polife-
noles unidos o acomplejados puede facili- Palabras claves: FERMENTACIÓN EN ESTADO
tarse a través del empleo de enzimas hidrolí- SÓLIDO; ORUJO DE UVA; CASCARILLA DE SOJA;
ticas que degradan la matriz lignocelulósica. POLIFENOLES; ANTIOXIDANTES.
En forma más directa, puede tratarse la bio-
masa con un microorganismo que produzca
las enzimas in situ. En este trabajo se ensa-
yo el empleo de la técnica de fermentación 8FMB
en estado sólido (FES) utilizando hongos de
Aspergillus niger y Aspergillus oryzae. Estos
Fermentación en sustrato
hongos son considerados seguros (Genera- sólido: bioinsumo de
lly Recognized as Safe, GRAS) y son produc- Trichoderma para aplicar

tores típicos de enzimas industriales como
celulasa, pectinasa, α-amilasa, proteasas, en yerba mate
tanasa, entre otras. La enzima tanasa es par-
ticularmente importante en el tratamiento LÓPEZ, Ana C. a, b, ALVARENGA, Adriana E.a, b,
de orujo de uva, ya que permite disminuir ZAPATA, Pedro D.a, b, LUNA, María F.c,d, VILLALBA,
Laura L. a, b.
la complejidad de los polifenoles poliméri-
a) Universidad Nacional de Misiones. Facultad
cos (taninos condensados). El orujo de uva de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales. Insti-
se utilizó como sustrato y soporte en com- tuto de Biotecnología Misiones “Dra. María Ebe
binación con ác. tánico, inductor de enzima Reca” (INBIOMIS). Laboratorio de Biotecnología
tanasa, y también en combinación con otro Molecular (BIOTECMOL). Misiones, Argentina.
desecho, cascarilla de soja, que induce la b) CONICET. Buenos Aires, Argentina.
producción de celulasas, pectinasas, amila-
sas, etc. c) Centro de Investigación y Desarrollo en Fer-
mentaciones Industriales (CINDEFI). Facultad
Al tratar la biomasa mediante FES y realizar de Ciencias Exactas. Universidad Nacional de La
luego extracciones acuosas de los polifenoles, Plata.
se encontraron aumentos en el rendimiento
b) Comisión de Investigaciones Científicas. Bue-
de recuperación de los polifenoles, y especial- nos Aires, Argentina.
mente, un aumento de su actividad antioxi-
dante. Se pudo correlacionar este efecto con [email protected]
la acción de las enzimas producidas. En el caso
de A. niger, se encontró que el mismo produce
Argentina es el principal productor y ex-
enzimas celulasa, pectinasa y tanasa en forma
portador de yerba mate, siendo Misiones la
balanceada; mientras que en iguales condicio-
provincia de mayor producción. Para el óp-
nes A. oryzae produce preferencialmente ta-
timo desarrollo de las plantas y para prote-
nasa. A. oryzae resultó ser más eficiente, tanto
gerlas del ataque de plagas y patógenos, se
en la producción de enzima tanasa, como en
utilizan productos de síntesis química. Una
la liberación de polifenoles e incremento de la
estrategia biotecnológica para disminuir el
actividad antioxidante.
27
SESIÓN 2
uso de estos productos –que contaminan 106 UFC/g para T. asperelloides LBM 193 y
el medio ambiente y son perjudiciales para Trichoderma sp. LBM 202, respectivamente,
la salud de todos los seres vivos– es la apli- después de 6 meses de almacenamiento.
cación de bioinsumos a base de Microor- Con estos ensayos, se logró la selección de
ganismos Promotores del Crecimiento Ve- un protocolo sencillo para la producción en
getal o PGPM (de sus siglas en inglés). Con FSS de un bioinsumo a base de T. asperelloi-
el objetivo potencial de una producción de des LBM 193y Trichoderma sp. LBM 202, de
yerba mate sustentable, se realizaron ensa- fácil manipulación y con parámetros de ca-
yos para obtener un formulado a base de lidad aceptables (≥ 2.106 UFC/g formulado)
especies de Trichoderma –aisladas de la enpara ser aplicados en plantas de yerba mate.
dorizosfera de yerba mate y caracterizadas Este trabajo contribuye a la búsqueda de
como PGPM in vitro– cultivadas en Fermen- soluciones amigables con el ambiente que
tación en Sustrato Sólido (FSS). Se evaluó la permite el mejoramiento del cultivo de yer-
producción de T. asperelloides LBM 193 y ba mate, una actividad agroeconómica muy
Trichoderma sp. LBM 202 en FSS utilizando importante en la región misionera.
dos protocolos diferentes: 1. con arroz pre-

cocido y 2. arroz (sin cocción) con agua. Lue-
go, el proceso fue igual en ambos: se este- Palabras claves: BIOINSUMO; FERMENTACIÓN
EN SUSTRATO SÓLIDO; TRICHODERMA; YERBA
rilizó, se inoculó, se incubó a 28 °C por 7-10 MATE.
días hasta que todo el sustrato fue consumi-
do. Posteriormente, se secó a 40 °C durante
4-10 días, se realizó la molienda y el envasa-
do. El formulado con el primer protocolo se
secó en 4 días y presentó una consistencia
muy fina, tipo “polvo” de fácil manipulación.
Con el segundo, tardó 10 días en secarse y 9FMB
luego de la molienda se obtuvo un formu-
lado pastoso de difícil manipulación y pro- Producción biológica de
penso a la contaminación. Se seleccionó el ácido acético a partir de
primer protocolo para obtener los formula-
dos de ambos microorganismos y así evaluar melaza
su calidad en relación a los siguientes pará-
metros: concentración total de conidios (por KHAWAM, Jorge N, BENZZO, María T, SELUY, Li-
recuento en cámara de Neubauer), conidios sandro G, COMELLI, Raúl N
viables en PDA al 2 % y presencia de conta- a) Laboratorio de Ingeniería ambiental. Facultad
minantes en el formulado. Cada formulado de Ingeniería y Ciencias hídricas. Universidad
se hizo por triplicado y su calidad se evaluó Nacional del Litoral.
a diferentes tiempos de almacenamiento: b) ANPCyT
0, 1, 2 y 6 meses. Para ambos formulados,
[email protected]
se obtuvo una elevada concentración de co-
nidios totales (1010 conidios/g formulado) y
también de viables al inicio del ensayo (109 El presente trabajo se enfoca en la pro-
UFC/g formulado). La viabilidad disminu- ducción biológica y optimización a escala de
yó con el tiempo –por falta de nutrientes, laboratorio de la producción de ácido acéti-
desecación o acumulación de metabolitos co empleando melaza de caña como materia
tóxicos– pero se mantuvo un título de 107y
28
SESIÓN 2
prima. La melaza representa un subproduc- Se evaluaron distintas condiciones de

to de la producción de azúcar, que debido a cultivo utilizando melaza líquida (inóculo,
su elevada carga orgánica debe ser tratado, fuente de nitrógeno, agregado de agente os-
en caso de no ser comercializado, previo a moprotectores, modo de operación) sobre
su vertido en un curso receptor. El proceso la producción de etanol con 3 cepas de Sac-
propuesto permitiría obtener ácido acético, charomyces. El desempeño de las cepas fue
agregando valor a este subproducto. muy similar, alcanzando concentraciones de
El objetivo del presente trabajo fue la etanol de 100 g/L, con rendimientos (getanol/
obtención de ácido acético mediante una gazícares reductores consumidos) de 0,43, lo que repre-
fermentación alcohólica mediada por leva- senta un 85% del valor teórico. Se observó
duras, de soluciones de melaza en distintas además que el agregado de fuentes de ni-
proporciones, seguida de una fermentación trógeno, no sólo incrementa la velocidad de
acética en cultivo sumergido. Se evaluaron consumo de azúcares, si no que permite que
como materia prima 2 tipos de melaza, me- el consumo sea completo.
laza en polvo y melaza líquida o tal cual se Luego de la fermentación alcohólica,
obtiene del proceso de producción de azú- las levaduras fueron separadas por centri-
car. fugación, y el mosto utilizado para la fer-

Inicialmente se caracterizaron las ma- mentación acética. Previamente, el mosto
terias primas determinando pH, azúcares alcohólico fue diluido para obtener una con-
reductores y totales, contenido de glucosa, centración de etanol del 5% m/v, y se utilizó
perfil de carbohidratos, y compuestos nitro- como sustrato en un proceso semicontinuo,
genados con un extremo alfa-amino libre donde el medio fue reemplazado por mita-
(FAN). des. El rendimiento de ácido acético obser-
vado fue aproximadamente 1 gac. acético/getanol-
Las soluciones de melaza en polvo, en di- , lo que representa un 80% del valor
consumido
ferentes concentraciones, no presentaron la teórico. Es factible producir ácido acético a
concentración de carbohidratos esperados, partir de melaza de caña por fermentación
según la composición declarada, sí la propor- alcohólica y fermentación acética sucesivas.
ción de los mismos, lo que permite suponer
que no todos los sólidos correspondieron a
melaza deshidratada, pudiendo existir algu-
na impureza. Por el contrario, las soluciones
de la melaza líquida o tal cual sale del proce-
so de producción de azúcar, sí presentaron Palabras claves: FERMENTACIÓN, ACÉTICO,
la concentración y perfil de carbohidratos ETANOL, EFLUENTE, MELAZA.
esperado. Además, el pH de ambas melazas,
en solución al 10% m/v, fue completamen-
te diferente. Mientras que la melaza líquida
presentó un pH ligeramente ácido, en torno
a 5, la solución de melaza en polvo, mostró
un pH entre 9 y 10, el que al ser neutralizado
con H2SO4, generó abundante formación de
espuma y un precipitado blanquecino simi-
lar al CaSO4, sugiriendo la posible presencia
de CaCO3 en el polvo.
29
SESIÓN 2
10FMB de pretratamiento -1 y 1.5 h- utilizando una

carga de sólidos de 15 % (p/p). La mezcla ob-
Producción de Bioetanol a tenida del BC pretratado fue sometida a un
partir de bagazo cervecero proceso secuencial de hidrólisis enzimática
aprovechando pentosas y y fermentación -sin separar los sólidos del lí-
quido-, con el fin de evaluar la producción y
hexosas rendimiento de bioetanol.
Cuando se evaluó el efecto del tiempo
WAGNER Evelyna, SIERRA-IBARRA Estefaníab,
MARTINEZ JIMÉNEZ Alfredob y ROJAS Natalia L. a
de incubación del pretratamiento sobre la
desestabilización de BC se observó que el
a) Universidad Nacional de Quilmes, CONI- mejor rendimiento de azúcares se alcanzó
CET, Departamento de Ciencia y Tecnología, LI-
luego de pretratar este residuo durante 1.5
GBCM-AVI. IMBA., Roque Sáenz Peña 352, Quil-
mes (1876), Argentina. h, obteniendo 41.97 g/L de azúcares (com-
puestos principalmente por glucosa, xilosa y
b) Departamento de Ingeniería Celular y Bioca- arabinosa), 27.57 % más de azúcares que los
tálisis, Instituto de Biotecnología, Universidad
obtenidos con el pretratamiento a 1 h. Lue-

Nacional Autónoma de México, Avenida Univer-
go de la etapa de sacarificación, se observó
sidad 2001, Cuernavaca, Morelos 62210, México.
que la concentración de glucosa liberada
[email protected] aumentó rápidamente durante las primeras
[email protected]
12 h. Al final de esta etapa, la concentración
de azúcares totales aumentó un 47,46%, con
El bagazo cervecero (BC) es un residuo respecto a la obtenida durante el pretrata-
sólido generado en grandes cantidades (20 miento. Esto representó una concentración
kg/100 L de cerveza producida), represen- total de 60 g azúcares/L disponible para la
tando cerca del 85% (p/p) de los subproduc- etapa de fermentación cuya producción de
tos de la industria cervecera. Debido a esto, etanol alcanzó 29,47 g/L en 30 h. Este re-
y a su naturaleza lignocelulósica, el BC tiene sultado significa una productividad de 0,98
el potencial de ser usado como materia pri- gEtOH/Lh y un rendimiento de conversión a
ma de bajo costo para la producción de eta- etanol del 90% del teórico basado en el con-
nol de segunda generación. Para ello, es ne- sumo de los tres azúcares.
cesario convertir el material lignocelulósico Los resultados obtenidos en este estudio
en azúcares fermentables, que en el caso del indican que los carbohidratos contenidos en
BC está compuesto por hexosas y pentosas. el BC pueden transformarse eficientemente
Debido a que la mayoría de los microor- en pentosas y hexosas mediante un pretrata-
ganismos fermentadores sólo consumen miento adecuado. Estos monosacáridos fue-
glucosa para producir etanol, en este traba- ron consumidos por la bacteria etanógenica E.
jo, se estudió la producción de bioetanol a coli MS04 y convertidos en etanol, resultando
partir de BC utilizando la cepa etanologénica en un rendimiento global equivalente a 207 LE-
recombinante Escherichia coli MS04. Inicial- tOH por tonelada de BC. El proceso propuesto
mente, se caracterizó bioquímicamente el en este trabajo se desarrolló de forma secuen-
BC (glucano 20.47 %, xilano 15.67 % y ara- cial, lo que implica una ventaja operativa para
binano 7.48 %) encontrándolo adecuado explotar este subproducto lignocelulósico,
como sustrato potencial para la producción destacando al BC como un recurso renovable
de bioetanol. Luego, el BC se pretrató con para la producción de bioetanol.
ácido sulfúrico diluido a diferentes tiempos
30
SESIÓN 2
Palabras claves: BAGAZO CERVECERO; BIOE- de micelio de Fusarium sp. en medio líquido
TANOL; SACARIFICACIÓN-FERMENTACIÓN SE- compuesto por: glucosa 0,5 % y extracto de
CUENCIAL; ESCHERICHIA COLI ETANOLOGÉNICA.
malta al 1,27 % como fuente de carbono, y
Mandels como fuente de nitrógeno. Se in-
cubaron 14 días a 28 ± 1°C con luz continua,
con el fin de obtener gran cantidad de mi-
celio. Éste se recogió mediante filtración a
11FMB través de papel de filtro Whatman No. 1, se
Secreción de enzimas lavó con agua destilada y se dejó reposar
en ClNa 0,85 % durante 2 horas, se hirvió
micolíticas en Trichoderma en SDS 2 % durante 5 minutos y centrifugó
koningiopsis inducida por (4500 x g) durante 10 minutos. El micelio re-
colectado se lavó con cloroformo:metanol
paredes celulares fúngicas (1:1) y acetona, se dejó secar a temperatura
ambiente por 24 horas, se trituró en un mor-
AMERIO Natalia Sa,b; BARENGO Marcela P.a,b; tero y se almacenó en freezer. Las concen-
BICH Gustavo A. a,b ; ZAPATA Pedro D. a,b ;-
CASTRILLO María L.a,b y VILLALBA Laura L.a traciones de paredes celulares tratadas de
Fusarium sp. ensayadas fueron: 0,5 %; 1 %; 2
a. Universidad Nacional de Misiones. Facultad
de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales. Ins-
%, 3 %, 5 %, 7 % y 9 %. Como complejo nitro-
tituto de Biotecnología Misiones “Dra.María Ebe genado se utilizó extracto de levadura 0,25
Reca” (InBioMis). Laboratorio de Biotecnología % adicionado con KH2PO4 (2g/L), CaCl2.2H2O
Molecular. Posadas, Misiones, Argentina. (0,4 g/L), MgSO4.4H2O (0,3 g/L), FeSO4.7H2O
(0,005 g/L) y MnSO4.4H2O (0.002 g/L). Cada
b. CONICET (Centro Nacional de Investigaciones
Científicas y Tecnológicas).Posadas, Misiones, medio se realizó por duplicado en Erlenme-
Argentina. yer de 250 ml con 60 ml de medio de culti-
vo. Se esterilizaron en autoclave durante 15
[email protected]
min a 121 °C y 1 atm de presión superior a
la normal. El inóculo consistió en 2,5 mL de
Las enzimas micolíticas como ser qui- una suspensión (1-2 x 107esporas/mL) de T.
tinasas, β-1,3 glucanasas y proteasas, son koningiopsis POS7. El ensayo se llevó a cabo
esenciales para la acción micoparasítica de en agitación continua a 100 rpm a 28 ± 1 ºC
diversas especies de Trichoderma contra por 14 días. Cada 2 días se tomó una alícuo-
hongos fitopatógenos. En el presente trata para realizar las determinaciones enzimá-
bajo se propuso potenciar la actividad enzi- ticas cuantitativas.
mática micolítica de la cepa Trichoderma ko- Los ensayos que contenían 7 % de pa-
ningiopsis POS7, previamente seleccionada redes celulares tratadas de Fusarium sp.
por nuestro grupo de trabajo por presentar presentaron actividades máximas para las
elevada actividad biocontroladora. Se reali- tres enzimas. En relación al tiempo de in-
zó un diseño experimental factorial, utilizan- cubación, para quitinasas se obtuvo el valor
do medio de cultivo líquido con diferentes máximo el día 10 (111,47 U/L), para β-1,3
concentraciones de paredes celulares tra- glucanasas y proteasas el valor máximo se
tadas de Fusarium sp. como fuente de car- observó el día 12 (2671,21 U/L y 700,26 U/L,
bono, el cual es un factor determinante en respectivamente).
la secreción enzimática. Para el tratamiento A partir de dichos resultados se logró se-
de las paredes fúngicas, se inocularon tacos leccionar la concentración de 7 % de paredes
31
SESIÓN 2
celulares tratadas de Fusarium sp., como la mundo toneladas de un residuo lignocelu-

fuente de carbono que mostró efectos esta- lósico llamado bagazo cervecero (BC), cuyo
dísticamente significativos y positivos sobre uso y revalorización se incrementó en los
la secreción enzimática de quitinasas, β-1,3 últimos años. Debido a su naturaleza, el BC
glucanasas y proteasas de T. koningiopsis debe ser degradado a azúcares aprovecha-
POS7. Los resultados obtenidos permitieron bles, lo que implica la aplicación de uno o
optimizar la secreción de enzimas micolíti- más pretratamientos seguido de hidrólisis
cas bajo condiciones controladas en fermen- enzimática.
tación líquida por T. koningiopsis POS7, lo En este trabajo, el BC se sometió a dife-
cual continua potenciando la utilización de
rentes estrategias de pretratamientos para
enzimas fúngicas de Trichoderma en controlpotenciar su revalorización. Se realizaron
biológico. dos pretratamientos (ácido diluido y peróxi-
do de hidrógeno - pH 5.0-) y se estudiaron
Palabras claves: QUITINASAS, β-1,3 GLUCA- los cambios en los grupos funcionales, com-
NASAS, PROTEASAS Y FUENTE DE CARBONO, portamiento térmico y alteraciones morfoló-
FUSARIUM SP.
gicas mediante espectroscopiaFT-IR, análisis

termogravimétrico y microscopia electróni-
ca de barrido, respectivamente. La fracción
sólida recuperada de cada pretratamiento,
se sometió a una etapa de sacarificación uti-
12FMB lizando un cóctel de enzimas producido me-
diante fermentación en sustrato sólido (FSS)
Revalorizacón del bagazo por Trichoderma reesei, utilizando el mismo
cervecero: estrategías de BC como sustrato.
pretratamiento e hidrólisis Inicialmente, el BC sin tratar presentó
un alto contenido de celulosa (23.44 %) y
enzimática lignina (24.44 %), seguido de hemicelulosa
(16.66 %), siendo glucosa y xilosa los azúca-
WAGNER Evelyna, PERÍA Mara E. a, ORTÍZ Gas- res predominantes.
tón E. y ROJAS Natalia L.
b a
Luego de los pretratamientos, la mayor

a) Universidad Nacional de Quilmes, CONI-
CET, Departamento de Ciencia y Tecnología, LI- variación en la composición del BC se encon-
GBCM-AVI. IMBA., Roque Sáenz Peña 352, Quil- tró luego del pretratamiento ácido -celulosa
mes (1876), Argentina. (56.41 %), lignina (41.57 %) y hemicelulosa
(2.27 %)-, observándose que la proporción
b) Centro de Investigación y Desarrollo en Fer-
mentaciones Industriales, CONICET. Calle 50 y
de hemicelulosa se redujo significativamen-
115, La Plata (1900), Argentina. te, consistente con el mecanismo de acción
de dicho pretratamiento. La recuperación
[email protected]
[email protected]
de biomasa y los rendimientos de azúcares
luego de los pretratamientos fueron consis-
tentes con las alteraciones estructurales ob-
Los residuos lignocelulósicos industriales servadas por FTIR, TGA y microscopía.
tienen el potencial de ser utilizados como
La concentración enzimática del cóctel
materiales renovables para obtener produc-
(0.53 UI/ml actividad filtro de papel, 1.37
tos de mayor valor agregado. La industria
UI/ml de endoglucanasas y 120 UI/ml de xi-
cervecera genera anualmente en todo el
32
SESIÓN 2
lanasas) generado mediante FSS por T. ree- 13FMB

sei -usando BC como sustrato- fue adecuada
para utilizarlo en la hidrólisis enzimática del
Producción de conidios
BC pretratado. de beauveria bassiana en
Si bien el pretratamiento con H2O2 no dispositivo para
produjo cambios composicionales relevan-
tes, los valores de azúcares recuperados du-
utilización en campo
rante la etapa de sacarificación fueron los
FETTER, Isabelaa;ALVES, Luis F. A.b; SCHAPOVA-
más elevados (193.35 mg azúcares / g de LOFF, Maria E.c; FERREIRA, Tiago T.d
BC), 1.75 veces mayor que el BC pretratado
con ácido diluido. Este resultado sugiere que a) Laboratorio de Biotecnología Agrícola - Cen-
tro de Ciências Biológicas e da Saúde, Universi-
el pretratamiento con H2O2 es prometedor e
dade Estadual do Oeste do Paraná.
interesante si se lo combina con una etapa
de sacarificación utilizando enzimas produ- b) Laboratorio de Biotecnología Agrícola - Cen-
cidas a partir del mismo BC. Además, su im- tro de Ciências Biológicas e da Saúde, Universi-
dade Estadual do Oeste do Paraná.
plementación reduce el uso de equipos y se
desarrolla en condiciones compatibles con c) Instituto Nacional de Tecnología Agropecua-

la sacarificación, por lo que es posible con- ria, Estación Experimental Agropecuaria Monte-
siderar su realización en forma simultánea. carlo.
El BC resultó ser adecuado para la pro- d) SparcBio, Laboratorio de Biología dos Insetos
ducción de enzimas lignocelulolíticas y – Departamento de Entomología e Acarologia,
USP/ESAQL.
como fuente de monosacáridos, ambos con
el potencial de generar productos de ma- [email protected]
yor valor agregado. Las técnicas FTIR, TGA
y SEM utilizadas, ayudaron a relacionar los
cambios estructurales provocados en el BC Este trabajo tuvo como objetivo testar un
por los pretratamientos y el rendimiento dispositivo para la producción y utilización
del hongo Beauveria bassiana (Bals-Criv.)
de azúcares obtenido tras la sacarificación.
La combinación de estrategias de pretrata- Vuill. Unioeste 44 (Hypocreales: Cordicipi-
miento y sacarificación propuestas resulta taceae) en el control del “rulo de la yerba
prometedora para mejorar la explotación de mate” Gyropsylla spegazziniana (Hemip-
este residuo mediante un proceso económi- tera: Aphalaridae). El dispositivo consto de
co y ambientalmente seguro. un soporte plástico amarillo (2,5 × 2,5 cm)
con 12 pocillos. El inóculo (blastoporas del
hongo) fueron producidas en frascos Erlen-
meyer con medio de cultivo líquido (41,7g
extracto de levadura, 52g de sacarosa, 1g de
KCl, 0,36g de KH2PO4 e 0,6 g de MgSO4 por
Palabras claves: BAGAZO CERVECERO; BIOMASA
litro de agua destilada). Después de 4 días
PRETRATADA; ENZIMAS LIGNOCELULOLÍTICAS.
de incubación en Shaker (200 RPM; 26 ± 1º
C, HR 70 ± 10%), 185 µL del inóculo fueron
transferidos para cada uno de los pocillos
del soporte (volumen suficiente para llenar
el pocillo y estar contenido en función de la
tensión superficial resultante del formato
33
SESIÓN 2
especial de los pocitos). Los dispositivos Palabras claves: HONGOS ENTOMOPATÓGE-

fueron colocados en placas de Petri sobre NOS; BLASTOSPORAS; AUTO-DIFUSIÓN.
una capa de agar-agua 2% en el fondo. Las
placas fueron cerradas e incubadas durante
cuatro días (26 ± 1º C, HR 70 ± 10%).
Después del crecimiento y producción de los
conidios, los dispositivos fueron colocados
14FMB
en tubos de vidrio e inmersos en una
solución acuosa esterilizada demonooleato Producción de Beauveria
de sorbitán polioxietilenado 0,01%. Luego bassiana en bolsas con aire
de la agitación en vórtex, la concentración
de conidios fue estimada en cámara de filtrado y fermentación
Neubauer. También, se estimó la viabilidad bifásica
de los conidios, aplicándose 130 μl de la
suspensión de conidios en la superficie del
FERREIRA, Tiago T.a; ALVES, Luis F. A.b; FETTER,
medio de cultivo PDA en placas del tipo RO- Isabelac

DAC®. Después de la incubación (16 a 24 h a
a) SparcBio, Laboratorio de Biología de Insectos
26 ± 1º C, HR 70 ± 10%), se procedió a contar – Departamento de Entomología y Acarología,
los conidios germinados y no germinados en USP/ESAQL.
microscopio óptico (400×), siendo conside-
rados viables los conidios que presentaban b) Laboratorio de Biotecnología Agrícola - Cen-
tro de Ciencias Biológicas e da Saúde, Universi-
el tubo germinativo con el largo igual o ma-
dade Estadual do Oeste de Paraná.
yor que el diámetro. Fueron obtenidos 3,7
× 1010 conidios/dispositivo, equivalente a c) Laboratorio de Biotecnología Agrícola - Centro
1,48 × 1010 conidios/cm2, con viabilidad ini- de Ciencias Biológicas e da Saúde, Universidade
Estadual do Oeste de Paraná.
cial de aproximadamente 90%. La alta con-
centración de conidios obtenida convierte al [email protected]
dispositivo en una alternativa prometedora
para la producción del hongo, con miras a su
uso en el control del rulo de la yerba mate. Para la producción de hongos entomopa-
Esto se debe a que, en estudios anteriores, tógenos en Brasil, predominan técnicas uti-
las trampas amarillas impregnadas con coni- lizadas desde la década de 1960. El método
dios del hongo fueron eficientes para atraer de la fermentación sólida es utilizado con
e infectar a los adultos del rulo de la yerba sustrato de arroz cocido y en bolsas de po-
mate en el campo. Sin embargo, el dispositi- lipropileno sin aireación. Sin embargo, con
vo tiene la ventaja de una alta producción de la creciente demanda de hongos entomo-
conidios viables en menos tiempo (8 días) patógenos para el control de plagas, ha au-
en comparación con el método convencio- mentado el interés por nuevos métodos de
nal en medio sólido (medio de cultivo de producción. El presente trabajo tuvo como
arroz) que tarda aproximadamente 30 días. objetivo evaluar el uso de bolsas de polipro-
El siguiente paso de la investigación consis- pileno con aireación, fermentación sólida y
tirá en probar la capacidad de atractivo e in- bifásica para la producción de conidios del
fección del dispositivo para controlar el rulo hongo Beauveria bassiana (Bals.-Criv.) Vui-
de la yerba mate. ll. (Hypocreales: Cordycipitaceae) Unioeste
88. Para la fermentación sólida, el inóculo se
obtuvo multiplicando el hongo en cajas Pe-
34
SESIÓN 2
tri con medio PDA (papa-dextrosa-agar) y se 76% de mortalidad). La fermentación bifási-

incubó durante 7 días (26±2 °C y fotoperío- ca y el uso de bolsas con filtro de aireación
do de 12 horas); los conidios se recogieron fueron más eficientes para la producción del
raspando la superficie del medio. El inócu- hongo B. bassiana Unioeste 88, con mayor
lo para la fermentación bifásica fue obteni- rendimiento de conidios en menos tiempo.
do en un Erlenmeyer con un medio líquido
específico para el crecimiento B. bassiana
(41,7 g de extracto de levadura, 52 g de sa- Palabras claves: FERMENTACIÓN BIFÁSICA;
MUSHROOM SPAWN BAGS; HONGOS ENTO-
carosa, 1 g de KCl, 0,36 g de KH2PO4, 0,6 g de MOPATÓGENOS; BEAUVERIA BASSIANA.
MgSO4 y 1L de agua destilada), en cámara
de incubación con agitación (Shaker) a 200
rpm durante 4 días (25±2 ºC y oscuridad por
24 h). Ambos inóculos se estandarizaron en
una suspensión fúngica 1 × 107 de conidios/
mL o blastosporas/mL. Las bolsas recibieron 15FMB
200g de arroz parboilizado en remojo (50 Búsqueda y producción de
minutos en agua fría y escurrido) y se este-

rilizaron en un autoclave (1 atm y 120 °C, 20 enzimas lignocelulósicas
min). Una vez frio, se inyectaron 10 ml del fúngicas mediante
inóculo, constituyendo un total de 4 trata-
mientos: 1) fermentación sólida (conidios) fermentaciones sobre
en bolsas con aireación = CA; 2) fermenta- bagazo cervecero
ción sólida (conidios) en bolsas sin aireación
= CN; 3) fermentación bifásica (blastospo- PERÍA, Mara E.a; WAGNER, Evelyna; ORTÍZ Gas-
ras) en bolsas con aireación = BA y 4) fer- tón E.b; CERIANI-NAKAMURAKARE, Esteban D.c;
mentación bifásica (blastosporas) en bolsas CARMARÁN Cecilia C.d; ROJAS, Natalia L.a
sin aireación = BN. A los 4, 7 y 10 días desde a) Laboratorio de Ingeniería Genética y Biología
el inicio de la fermentación, se evaluaron Molecular-AVI, Departamento de Ciencia y Tec-
para cada tratamiento: la concentración de nología, CONICET, Universidad Nacional de Quil-
conidios en el sustrato (arroz + hongo); pro- mes, Bernal.
ducción de conidios (g); la concentración de b) Centro de Investigación y Desarrollo en Fer-
conidios; la viabilidad y la actividad del hon- mentaciones Industriales, CONICET, La Plata, Ar-
go contra el ácaro Dermanyssus gallinae (De gentina.
Geer, 1778) (Acari: Dermanyssidae). En las c) Laboratorio de Fitopatología, Departamento
bolsas aireadas la producción de conidios en de Tecnología, Universidad Nacional de Lujan,
el sustrato fue significativamente mayor: CA Buenos aires, Argentina
7° y 10° día: 2,5 y 3,4 × 109 conidios/g, res-
d) Laboratorio de Micología, Fitopatología y Li-
pectivamente; BA 7° y 10° día: 2,1 y 2,7 × 109
quenología, Facultad de Ciencias Exactas y Na-
conidios/g. La mayor producción de conidios turales, Universidad de Buenos Aires, Argentina.
(g) se obtuvo con CA (4,2 g en el 7° día y 5,3 g
[email protected]
en el 10° día). La concentración de conidios
en el 10° día fue mayor en las bolsas con
aireación (CA y BA) (1,7 × 1011 conidios/g y La búsqueda de fuentes novedosas de
1,5 × 1011 conidios/g, respectivamente). No enzimas es un área de constante desarrollo,
hubo efecto sobre la viabilidad y actividad debido a la necesidad de contar con bioca-
acaricida (promedio de 86% de viabilidad y
35
SESIÓN 2
talizadores estables, de producción econó- para actividad papel de filtro (FPA), 1.55
mica y aplicables en procesos industriales1. y 2.55 para endoglucanasas (EGA), 48.4 y
Los residuos lignocelulósicos -recursos reno- 67.79 para XYL, y 0.62 y 1.89 para AMI, en
vables y abundantes- representan una alter- BC y ST respectivamente. Estos resultados
nativa viable para la generación de enzimas. demuestran el potencial del BC como sus-
Tal es el caso de la revalorización del bagazo trato para la producción de enzimas, logran-
cervecero (BC), principal desecho sólido de do productividades enzimáticas mayores en
esta industria2. comparación con otros residuos lignoceluló-
El objetivo de este trabajo consiste en sicos8,9,10.
desarrollar procesos para la producción de Una vez establecidas las condiciones de
enzimas lignocelulósicas fúngicas utilizando FSS y a partir de los resultados del screening
BC como sustrato. Inicialmente, se realizó inicial, se seleccionó a Filobasidium sp.pa-
un screening sobre los hongos Chaetomium ra continuar con la producción de enzimas
sp, Daldinia sp, Filobasidium sp, Fusarium a partir de BC por presentar valores de EPI
oxysporum y Raffaelea arxii, asociados a elevados del conjunto de enzimas de interés
Megaplatypus mutatus (plaga forestal nati- y un perfil enzimático poco explorado.

va de Sudamérica perteneciente a los “co- Finalmente, se observó que las produc-
leópteros de la ambrosia”)3,4. Se realizaron tividades obtenidas en las FSS con BC de
cultivos en placas de Petri utilizando medios Filobasidium sp. fueron mayores en compa-
mínimos sólidos con fuentes de carbono es- ración con T. reesei -exceptuando la activi-
pecíficas: carboximetilcelulosa, almidón y dad FPA-, reportándose valores (UI/gs*d) de
xilano para evaluar las actividades celulasas; 0.58 para FPA, 2.98 para EGA, 56.31 para XYL
amilasas, AMI y xilanasas, XYL, respectiva- y 1.02 para AMI.
mente. Se determinó el índice de produc-
tividad enzimática (EPI) -cociente entre los La combinación del screening de orga-
diámetros de las zonas de hidrólisis y de cre- nismos fúngicos provenientes de coleccio-
cimiento por el tiempo de incubación-. nes biológicas reconocidas -BAFC, FCEyN,
UBA- que permite una búsqueda eficiente
Paralelamente, para diseñar el proceso de fuentes enzimáticas novedosas y la FSS
de producción, se evaluó el potencial del BC sobre el BC representa una alternativa via-
como sustrato de fermentaciones en sus- ble para la producción de enzimas lignocelu-
trato sólido (FSS). Se realizaron cultivos a lósicas fúngicas en procesos biotecnológicos
28 °C durante 14 días de Trichoderma ree- viables.
sei – productor conocido de enzimas ligno-
celulósicas- en BC y salvado de trigo (ST). 5
gramos de sustrato se acondicionaron con Palabras claves: HONGOS DE AMBROSIA; BA-
5 ml de NaOH 0.2M, se esterilizaron por 15 GAZO CERVECERO; FERMENTACIÓN EN SUS-
TRATO SÓLIDO.
min a 121 °C, y se inocularon con 2.5x106
esporas/gramo de sustrato. Luego de 2, 4, 7,
9, 11 y 14 días, se recuperó el cóctel enzi-
mático generado mediante la adición de 100
ml de NaCl 0.1M con Tween 80 0.1% (v/v),
y se determinaron las actividades enzimáti-
cas5,6,7. La mayor productividad -expresa-
da como UI/gs*d- se obtuvo a los 4 días de
cultivo, alcanzándose valores de 1.52 y 1.28
36
SESIÓN 2
16FMB monitoreado mediante determinación de

densidad óptica (600nm) y la producción
Medios de cultivo de bajo de BS mediante el índice de emulsificación
costo para la producción (IE) y peso seco. Los cultivos se realizaron en
de biosurfactantes un volumen final de 100mL, se incubaron a
28°C y 150rpm por 72hs. Se extrajeron los
bacterianos BS por precipitación ácida y luego se re-sus-
pendieron en agua carbonatada a pH 7,4.
TADDIA, Antonelaa; HAIDAR, Carla N.a; A esta solución se la llamó extracto crudo. La
PELLEGRINI MALPIEDI, Lucianaa metodología para determinar el IE consistió en
a) Instituto de Procesos Biotecnológicos y Quí- mezclar iguales volúmenes de extracto crudo y
micos (IPROBYQ), CONICET/UNR, Suipacha 570
kerosene. Dicha mezcla se dejó en reposo has-
(2000), Rosario, Argentina.
ta lograr el equilibrio y se midió el porcentaje
[email protected] del volumen total ocupado por la emulsión.
La determinación del peso seco de BS consis-
tió en realizar una extracción con acetato de
Introducción: Los biosurfactantes (BS)
etilo sobre el extracto crudo en una relación

son moléculas tensoactivas producidas por
2:1, luego 24hs de incubación en agitación se
una gran variedad de microorganismos, los
retira la fase orgánica, se la coloca en un reci-
cuales poseen varias ventajas respecto a los
piente de vidrio para completar la evaporación
surfactantes de origen sintético. Pseudomo-
del acetato de etilo. Posteriormente, se vuel-
nas syringae, es un bacilo Gram-negativo
ve a colocar un volumen de acetato de etilo
productor de BS, secreta poderosos lipo-
al extracto crudo remanente, repitiendo el
péptidos con propiedades fisicoquímicas
procedimiento descripto tres veces y logrando
prometedoras en distintos campos de apli-
una masa constante de BS. La selección de las
cación. Por otro lado, las formulaciones de
mejores condiciones de producción se realizó
BS son relativamente costosas, una posible
con ayuda del programa estadístico Minitab
solución a dicha problemática, se ha cen-
17, empleando un nivel de confianza del 95%.
trado en el reemplazo total o parcial de las
Resultados: Se determinó que el medio com-
fuentes de carbono/nitrógeno incorporan-
puesto por una relación de 0,9g aceite/0,1g
do desechos recalcitrantes y/o sub-produc-
glicerol, concentración de NaNO3 10g/L y sin
tos de bajo costo en los medios de cultivo
vitaminas agregadas sería el medio de culti-
de producción. El objetivo de este trabajo
vo más adecuado para la producción de BS a
fue realizar la selección del medio de cultivo
partir de P. syringae pv tabaci. En estas condi-
óptimo para producir BS por parte de Pseu-
ciones se obtuvo el mayor valor de peso seco
domona syringae pv tabaci, utilizando como
de BS, 180mg cada 100mL de cultivo. Además,
fuente de carbono desechos, tales como
se trata de un medio de cultivo formado por
aceite de cocina residual provenientes de
aceites de cocina residual proveniente de
locales gastronómicos y glicerol proveniente
locales gastronómica, glicerol refinado y
de la industria del biodiesel.
sales, lo cual disminuiría el costo del pro-
Metodología: Se evaluó la mayor capa- ducto final. Conclusiones: Se logró hallar
cidad productiva de biosurfactante, utili- un medio de cultivo de bajo costo para la
zando un diseño factorial con tres factores: producción de BS a partir de P. syringae pv
relación de la cantidad de aceite y glicerol, tabaci, empleando aceite de cocina residual,
concentración de NaNO3 y concentración glicerol y sales.
de vitaminas. El crecimiento bacteriano fue
37
SESIÓN 2
Palabras claves: BIOSURFACTANTES; PSEUDO- terísticas sensoriales del producto final. Los
MONAS SYRINGAE PV TABACI; ANÁLISIS ESTA- bajos contenidos de nitrógeno en los mostos
DÍSTICO.
pueden ocasionar paradas de fermentación.
Así, una de las prácticas comunes para evitar
este problema es suplementar los mostos
con amonio. El objetivo de este trabajo fue
evaluar el comportamiento fermentativo de
17FMB una cepa comercial de Saccharomyces cere-
Dinámica de fermentación visiae en la elaboración de sidras a escala pi-
loto mediante el agregado de amonio. Para
en Saccharomyces obtener el mosto, se empleó el equipamien-
cerevisiae para la to para la producción de sidra de la Planta
Piloto de Alimentos Sociales de la UNRN. Se
obtención de sidra a empleó la variedad de manzana Pink Lady.
escala piloto Las fermentaciones se llevaron a cabo a 23°C
en fermentadores de 20 L de capacidad con

BONGIOVANI, Nataliaa; ROCHA PARRA, Andres un volumen de mosto de 15 L y una duración
F.a,b; ITURMENDI, Facundoa; LAIGLECIA, Juan I.a; de 10 días. El inóculo fue 3,75 g/L de S. cere-
COLETTO, Mauricioa; COLIN, Ivanaa; CARDOSO visiae. Se determinaron el pH, la acidez total,
SCHWINDT, Virginiaa,b; UTHURRY, Carlosa; VO- los grados Brix (°Br), los azúcares reductores
GET, Claudioc
y la densidad del mosto obtenido en la mo-
a) Universidad Nacional de Río Negro, CIT – Río lienda. Se comparó un mosto con agregado
Negro, Río Negro, Argentina. de fosfato de amonio (N+, concentración fi-
b) Centro de Investigaciones y Transferencia de nal de 250 mg/L) frente a un mosto sin agre-
Río Negro, CIT Río Negro (CONICET-UNRN), Villa gado de este nutriente (N-). Los parámetros
Regina, Río Negro, Argentina. fermentativos evaluados fueron °Br, grados
c) Centro de Investigación y Desarrollo en Fer- Baumé (°Bé), grado alcohólico (etanol) y
mentaciones Industriales (CINDEFI), UNLP-CO- densidad. El valor inicial fue 14 °B para am-
NICET, Facultad de Ciencias Exactas, Universidad bos mostos, mientras que los finales fueron
Nacional de La Plata, Argentina. de 10 y 6 para N- y N+, respectivamente. La
[email protected] tasa de disminución de °Brix de N+ fue más
rápida que la de N-, con valores de 0,8 y 0,4
°B/día, respectivamente, evidenciando una
La elaboración de sidra es una de las prin- cinética de consumo de sustrato mayor bajo
cipales actividades económicas dentro de la N+. La cinética de grados Baumé fue similar
producción de manzanas del Alto Valle de en ambas fermentaciones hasta el día 5, con
Río Negro en la Patagonia Norte. Así, uno valores iniciales de 8 °Bé para cada mosto. A
de los principales desafíos es obtener sidras partir del día 5, las fermentaciones N+ evi-
de calidad con alto valor agregado y una im- denciaron una disminución pronunciada de
pronta regional. La calidad de las sidras de- 6 °Bé a 1 °Bé, mientras que en las N-, el valor
pende de factores como la cepa de levadura final alcanzado fue de 4 °Bé. La acumulación
empleada, la variedad de manzanas usada de etanol medida como grado alcohólico
como materia prima, las condiciones de fer- mostró la misma tendencia que los grados
mentación, entre otros. El nitrógeno es un Baumé hasta el día 5. A partir de este día,
nutriente clave que no sólo afecta la cinética los mostos incrementaron su contenido de
de la fermentación sino también las carac- etanol desde 1% v/v para N+ y 4% v/v para
38
SESIÓN 2
N-, llegando a valores finales de 5,6% v/v y El objetivo de este trabajo es desarrollar
a 5,1% v/v para N+ y N-, respectivamente, una plataforma biológica de producción de
en el día 10. Los resultados obtenidos in- p(3HP) a partir de materias primas reno-
dican que el agregado de amonio permitió vables, mediante la combinación de herra-
una tasa de fermentación más alta de S. ce- mientas de ingeniería genética y técnicas de
revisiae favoreciendo un mayor contenido y diseño de bioprocesos.
producción de alcohol. El sistema de producción se diseñó con-
siderando la expresión en Pichia pastoris de
las enzimas (glicerol deshidratasa y su re-
activasa; propionaldehído deshidrogenasa
y PHA sintasa) implicadas en la ruta biosin-
18FMB tética del polímero [Wang et al, 2013]. Para
constituir un sistema estable, se decidió ex-
Estrategias para la presar todas las enzimas desde de un único
producción de bioplásticos gen integrado en el genoma de la levadura,
mediante el uso de péptidos auto-procesa-
a partir de recursos
bles T2A [Geier et al., 2015]. Las secuencias

naturales renovables codificantes se realizaron de forma sintética,
y se llevaron a cabo 7 etapas de clonado en
FRESCURA, Julieta M.; ROJAS, Natalia L. Escherichia coli Top10 para generar las cons-
trucciones finales de un sistema inducible
Universidad Nacional de Quilmes, CONICET, Dep-
(bajo promotor pAOX) y un sistema cons-
to de Ciencia y Tecnología, IMBA, R. Sáenz Peña
352, Quilmes (1876), Argentina. titutivo (bajo promotor pGAP). Las cons-
trucciones se verificaron por secuenciación
[email protected] (Macrogen, República de Corea). Mediante
protocolos estándar (Invitrogen, EEUU) se
transfirieron las construcciones finales a
Los plásticos son materiales indispen- P. pastoris y se seleccionaron clones según
sables de la vida cotidiana, sin embargo, la la inserción de los genes correspondientes
demanda actual de plásticos de un solo uso mediante colony PCR con primers específi-
no biodegradables representa una proble- cos. Finalmente, se plantearon diferentes
mática ambiental a nivel mundial. Se estima estrategias de cultivo e inducción con meta-
que en 2015 el 86% (141 millones de tonela- nol (hasta 120 hs de inducción), analizando
das) de los plásticos utilizados para envases tanto el pellet como el sobrenadante de las
-packaging- fueron descartados en rellenos muestras obtenidas, en términos de expre-
sanitarios, en el medioambiente o incinera- sión de las enzimas de la ruta biosintética de
dos [UNEP, 2018; Geyer et al, 2017]. Frente p(3HP). Esto se llevó a cabo mediante téc-
a esto, los polihidroxialcanoatos (PHAs), bio- nicas de Bradford, SDS-PAGE, y determina-
plásticos biodegradables y de base biológica ciones de actividad específicas para las enzi-
se presentan como una alternativa. En parti- mas implicadas en la ruta biosintética [Leal,
cular el poli 3-hidroxipropionato (p(3HP)), es 2003; Sankaranarayanan, 2017].
un termoplástico biocompatible que presen-
ta propiedades físicas y mecánicas promete- Mediante estrategias de ingeniería gené-
doras, por lo que podría utilizarse como re- tica adecuadas fue posible construir una ruta
emplazo de plásticos convencionales y en el de biosíntesis heteróloga de p(3HP). Como
área biomédica [Aduhene et al, 2021]. resultado se obtuvieron diversos sistemas
39
SESIÓN 2
de expresión de las enzimas implicadas en (FBCB), Universidad Nacional del Litoral (UNL),
dicha ruta. Se desarrollaron cultivos a escala Ciudad Universitaria (Paraje El Pozo), Santa Fe,
frascos agitados notándose un crecimiento Argentina.
diferencial entre los clones conteniendo o [email protected]
no los genes de interés. Si bien en el sistema
bajo promotor pAOX la inducción es inhibida
en presencia de glicerol, sustrato para la bio- Se conoce como ‘extracto’ a la fracción
síntesis de p(3HP), esto es soslayable si se soluble resultante de un proceso de lisis ce-
combinan estrategias de cultivo adecuadas. lular (destrucción de la pared celular). Parti-
cularmente, los extractos de levadura con-
En resumen, se propone una estrategia
tienen enzimas, vitaminas, antioxidantes,
novedosa, que reúne la expresión de varias
proteínas, aminoácidos, carbohidratos, áci-
proteínas en tándem mediante péptidos 2A;
dos nucleicos, minerales, etc. Estos extractos
así como competitiva desde el punto de vis-
son de gran interés por sus diversas aplica-
ta ambiental y económico por la integración
ciones y usos, principalmente como fuente
del proceso a una biorrefinería de glicerol
de nutrientes (nitrógeno) para la formula-
crudo, una fuente renovable y con costo

ción de medios de cultivos en microbiología,
muy bajo.
y suplemento nutricional en la producción
de cerveza (agregados durante la genera-
Palabras claves: BIOPLÁSTICOS; PICHIA PASTO- ción de inóculos y en la fermentación). De
RIS; PÉPTIDOS 2A; GLICEROL. todos los procesos de lisis abordados en la
industria, mecánicos (molino de células, tra-
tamiento a alta presión, ruptura ultrasónica,
etc.), y no mecánicos (autolisis, hidrólisis,
termólisis, plasmólisis (con sales, ej. NaCl),
choque osmótico, disolventes orgánicos,
19FMB
mix de enzimas exógenas agregadas, etc.), la
Estudio del efecto del pH y autolisis es uno de los más utilizados, dado
que permite obtener buenos rendimientos
la temperatura sobre la evitando un gasto excesivo de energía. La
generación de extractos de autolisis de levaduras es un proceso irrever-
levadura líquidos sible que consiste en la degradación de las
estructuras intracelulares y su contenido,
obtenidos por autolisis causado por una alteración en la regulación
de la actividad enzimática endógena de un
LEONARDI, Rodrigo J. a, b; CABALARO, Ludmila microorganismo. Para fines industriales, la
M.L. c; COMELLI, Raúl N. a, b. autolisis debe acelerarse y controlarse, por lo
a) Grupo de Procesos Biológicos en Ingeniería que el proceso se induce a través de métodos
Ambiental (GPBIA), Facultad de Ingeniería y físicos (temperatura), químicos (pH, sales) y
Ciencias Hídricas (FICH), Universidad Nacional biológicos. Es relevante destacar que la pro-
del Litoral (UNL), Ciudad Universitaria (Paraje El ducción de extractos de levadura líquidos me-
Pozo), Santa Fe, Argentina.
diante autolisis, para la generación de medios
b) Consejo Nacional de Investigaciones Científi- de cultivos utilizados en microbiología, es una
cas y Técnicas (CONICET). forma de revalorizar las corrientes de levadu-
c) Grupo de Ingeniería de Bioprocesos (GiiB), ras residuales acondicionadas de muchas in-
Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas dustrias (ej. cervecera artesanal).
40
SESIÓN 2
Aquí presentamos un estudio preliminar 20FMB

sobre el efecto del pH (3-4-5-6-7-8), la tem-
peratura (40-50-60 y 70°C), y la presencia de
Surfactantes derivados de
sal (NaCl, 1 gr L-1, a 40-50 °C) sobre la com- aminoácidos: obtención
posición de los extractos líquidos obtenidos mediante biocatálisis y
por autolisis de levaduras liofilizadas comer-
ciales (Saccharomyces cerevisiae, Safale S‐04 propiedades
de Fermentis). Como medio de autolisis se
utilizaron buffers compuestos de acetato, ci- GRILLO, Patricia D.a,c; PRAT, Agustinaa; HERMET,
trato y fosfato, con el fin de mantener el pH Melisaa,b; SABATIÉ, Alejandroa; DI SANTO MEZT-
LER, Gabriela P.a,b; FAIT, MARÍA E.a,b; MORCELLE,
durante el proceso. Se prepararon suspen- Susana R.a, b
siones de 100 gr L-1 en tubos DQO (10 ml por
a) Centro de Investigación de Proteínas Vegeta-
tubo), las cuales fueron incubadas sin agita-
les (CIProVe-UNLP-Centro Asociado CICPBA). Fa-
ción en un baño termostatizado durante 48 cultad de Ciencias Exactas. Universidad Nacional
hs. Se tomaron muestras de la suspensión de La Plata, La Plata, Buenos Aires Argentina.
homogénea cada 12 hs, con el fin de analizar
b) Consejo Nacional de Investigaciones Científi-
en el sobrenadante el contenido de sólidos

cas y Técnicas (CONICET)
suspendidos totales (SST), la concentración
de compuestos tipo FAN, azúcares totales y c) Comisión de Investigaciones Científicas de la
proteínas. Provincia de Buenos Aires (CICPBA)
Se pudo observar que el contenido de [email protected]

SST, para todos los pH, disminuye a medida
que se incrementa la T de autolisis (recupe-
raciones a las 24 hs de aprox. 50% a T=40 °C),Los surfactantes o tensioactivos son
que la conc. de compuestos de FAN disminu- compuestos anfifílicos con capacidad para
reducir la tensión superficial en sistemas
ye con la T y la liberación es siempre mayor
a pH=5. En lo que respecta a azúcares, no inmiscibles. Tradicionalmente vinculados
existe una tendencia marcada en relación ala los productos de limpieza, estos agentes
pH y la T. Las mayores liberaciones de azú-poseen en la actualidad una amplia gama
de aplicaciones que van desde detergentes
cares totales ocurren a 50 y 70 °C. El efecto
del NaCl se ensayó a 40 y 50 °C, observán- (como el SDS) hasta biocidas (ej.: el dodine).
dose que no hubo diferencias significativasEn particular, aquellos catiónicos basados
respecto a los ensayos sin sal. en aminoácidos han demostrado excelen-
tes propiedades de adsorción y agregación,
alta biodegradabilidad, baja ecotoxicidad y
actividad antimicrobiana de amplio espec-
tro. Estas características los han posicionado
como una alternativa interesante a los ha-
Palabras claves: LEVADURAS; AUTOLISIS, EX-
TRACTOS CELULARES. luros de amonio cuaternario, cuestionados
por su toxicidad intrínseca y dudosa biode-
gradabilidad.
En el marco de los paradigmas de la quí-
mica verde, numerosas investigaciones han
descripto la obtención de surfactantes deri-
vados de aminoácidos mediante estrategias
41
SESIÓN 2
biocatalíticas, empleando enzimas en uno o a los tensioactivos catiónicos comerciales,

más pasos de su elaboración. Nuestro grupo especialmente para su empleo como aditi-
se ha dedicado a la obtención de tensioac- vos en formulaciones tópicas. Considerando
tivos derivados de aminoácidos (en particu- esto, recientemente hemos evaluado el uso
lar de arginina) monocatenarios emplean- de Bz-Arg-NHCn como activadores de borde
do peptidasas vegetales adsorbidas sobre para la obtención de liposomas ultradefor-
poliamida como biocatalizadores, siendo mables empleando fosfatidilcolina de soja
papaína (una endopeptidasa del látex de como fosfolípido, logrando formulaciones
frutos de Carica papaya) la que demostró con estas características para el derivado de
mejor desempeño. Biocatalizadores basa- 10 carbonos.
dos en lipasas inmovilizadas fueron también Asimismo, se están efectuando estudios
ensayados en dichas reacciones, sin obtener relacionados al efecto de estos tensioactivos
los resultados esperados. sobre etapas tempranas de la formación de
Se ha comprobado la actividad tensioac- biofilms de bacterias y levaduras. Los ensa-
tiva de los productos obtenidos (Nα-ben- yos preliminares mostraron la capacidad de
zoil-arginina alquilamidas, Bz-Arg-NHCn, n = Bz-Arg-NHCn de inhibir la adhesión de le-

10 ó 12), y se han determinado sus concen- vaduras en superficies pre-tratadas con los
traciones micelares críticas (CMC) tanto en mismos.
agua como en medios salinos, así como tam- En resumen, la obtención de tensioac-
bién la morfología de sus agregados. tivos derivados de aminoácidos mediante
Por otro lado, los productos Bz-Arg-NHCn estrategias quimioenzimáticas constituye
estudiados han demostrado una actividad una alternativa prometedora a las sales de
antimicrobiana de amplio espectro compa- amonio cuaternario como aditivos multifun-
rable e incluso superior a la del surfactante cionales con potencial aplicación en formu-
comercial Cetrimide, manifestando una efi- laciones de interés en la industria farmacéu-
cacia de hasta el 99,99% en la reducción de tica y biomédica.
la carga de bacterias y levaduras viables en
cultivos planctónicos. A su vez, la evaluación
del efecto citotóxico in vitro sobre eritrocitos
y cultivos celulares, puso en evidencia una
menor actividad hemolítica y citotoxicidad, Palabras Claves: SURFACTANTES DERIVADOS
demostrando incluso un efecto protector en DE AMINOÁCIDOS, ACTIVIDAD ANTIMICRO-
glóbulos rojos contra la lisis hipotónica a ba- BIANA, INTERACCIÓN CON MEMBRANAS, LI-
jas concentraciones. Para la caracterización POSOMAS ULTRADEFORMABLES.
del mecanismo de interacción con membra-
nas biológicas, hemos empleado diferen-
tes sistemas modelo de membrana lipídica
compuestas por DPPC. Los resultados ponen
en evidencia que la presencia del grupo ben-
zoilo sería responsable de la gran actividad
antimicrobiana en comparación a la de otros
compuestos similares.
Todas estas propiedades convierten a Bz-
Arg-NHCn en una alternativa prometedora
42
SESIÓN 2
21FMB cas se determinaron en el lixiviado obtenido

(extracto enzimático) luego de la fermenta-
Produccion de coctel ción. Las EC y EA fue determinada por el mé-
enzimatico mediante todo colorimétrico del acido dinitrosalicílico,
consorcios fungicos las EL por el método colorimétrico basado
en la degradación del p-nitrofenil butirato y
de las EP por el método de la azocaseína. To-
MORILLA, Esteban A; MUTTI STEGMANN, Paula;
PELLEGRINI MALPIEDI, Luciana; TUBIO, Gisela. dos los sustratos lignocelulósicos resultaron
ser propicios para la producción de estas en-
Laboratorio de Diseño de Extractos Enzimáticos.
zimas, pero la mejor producción se obtuvo
Instituto de Procesos Biotecnológicos y Químicos
Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Far- con una combinación de afrechillo de trigo
macéuticas. Universidad Nacional de Rosario. y cascarilla de soja tanto para FS como FSm.
CONICET Ambas resultaron apropiadas tanto para el
crecimiento fúngico como para la produc-
[email protected]
ción de enzimas, sin embargo FS fue más
adecuada cuando los extractos enzimáti-
Con el objetivo de generar procesos acor- cos fueron extraídos con buffer fosfato y 20
des al nuevo paradigma de economía cir- minutos de agitación a 200 R.P.M debido a
cular, se evaluó la producción de enzimas que se observaron las mayores actividades
de interés comercial, mediante un proceso enzimáticas en estas condiciones La FS de
más sustentable respecto a los convencio- un consorcio fúngico inoculado con 1x106
nales. Se centro especial atención, en la conidios/mL, simultáneamente con A. niger
producción de un coctel conformado por y A. oryzae, luego de 4 días de crecimiento
los complejos enzimáticos de celulasas (EC), a 30 °C produjo un coctel enzimático rico en
amilasas (EA), lipasas (EL) y proteasas (EP), EC (20,5 UI/g de sustrato), EA (2.000 UI/g
para ser utilizadas en la formulación de de- de sustrato, EL (1,5 UI/g de sustrato) y EP
tergentes enzimáticos. Estas enzimas son (20.000 UI/g de sustrato). Las actividades
producidas principalmente por los hongos enzimáticas fueron potenciadas en la fer-
filamentosos Aspergillus niger y oryzae y se mentación mixta respecto a las obtenidas en
evaluó la fermentación fúngica mixta de am- los monocultivos de los respectivos hongos,
bos ascomicetos. Esta revolucionaria estra- debido a que se observaron como máximo
tegia permitió la producción de un coctel de las siguientes actividades en monocultivos
enzimas específicas en una única operación EC 7 UI/g de sustrato, EA 1500 UI/g de sus-
unitaria reduciendo costos y tiempos de trato, EL 0,95 UI/g de sustrato, EP 7.000 UI/g
producción. Para cumplir con los objetivos de sustrato. La importancia de este trabajo
se evaluaron diferentes fuentes de sustratos fue que logro producir un coctel enzimático,
(residuos agroindustriales de alto contenido enriquecido en las enzimas necesarias para
lignocelulósico); estrategias de inoculación la formulación de detergentes enzimáticos,
de ambas especies fúngicas, compatibili- mediante la utilización de residuos de esca-
dad para integrar una misma fermentación; so valor generando la revalorización de los
parámetros fermentativos, los cuales de- mismos, evitando utilizar sustratos purifi-
mostraron ser fundamentales el estado de cados, reduciendo costos y tiempos de pro-
la misma (solido (FS) o sumergido (FSm); ducción al emplear una única fermentación.
tiempo y temperatura de fermentación; y Este desarrollo se engloba dentro de las
el método de recuperación de las enzimas nuevas tendencias de generar procesos más
post fermentación. Las actividades enzimáti- sustentables de manera de migrar nuestra
43
SESIÓN 2
economía actual hacia una circular, generan- fines sin alterar la biomasa fermentada, po-
do un impacto positivo tanto en lo económi- lisacáridos parcialmente degradados por la
co como ambiental. acción enzimática facilitando su digestión
cuando son ingeridos por animales.
Palabras claves: CONSORCIO FUNGICO; COCTEL En este trabajo se emplearon residuos de las
ENZIMATICO; HONGOS FILAMENTOSOS; ECO- industrias de trigo, afrechillo de trigo (AT),
NOMIA CIRCULAR. soja, cascarilla de soja (CS), y de la manufac-
tura de la cebada, bagazo cervecero (BC);
que mediante la fermentación de Asper-
gillus niger y oryzae, permitieron obtener
22FMB biomasa fermentada para elaboración de un
alimento funcional para animales y enzimas
Evaluación de hidrolíticas.
combinación de sustratos La preparación de los sistemas fermen-
lignocelulósicos para la tativos se realizó mezclando diferentes
producción de cocteles combinaciones de sustratos en proporcio-

nes específicas a 4g de sustrato. El BC fue
enzimáticos secado en entufa a 45°C por 24 hr y todos
fueron molidos en molinillo y tamizados a
MUTTI STEGMANN Paula a,b, MORILLA, Esteban 40mesh. En el sistema 1, se mezclaron 3g
A.a,b; TUBIO, Gisela a,b. de (AT) y 1g (CS), en el segundo se mezcla-
a) Laboratorio de Diseño de Extractos Enzimáti- ron 1,5g de AT, 0,5g de CS y 2g de BC, en
cos. Instituto de Procesos Biotecnológicos y Quí- el tercero se mezclaron 2,25g de AT, 0,75g
micos Rosario (IPROByQ) – CONICET. de CS y 1g de BC mientras que en el cuarto
b) Departamento de Tecnología, Facultad de sistema solo BC. Se adicionó 10 mL de agua
Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Universi- destilada y autoclavó a 121°C durante 20
dad Nacional de Rosario (UNR). minutos. Se inocularon simultáneamente
[email protected] con A. niger y A. oryzae (1x106 conidios/
mL) en una fermentación mixta 4 días. La
extracción de enzimas se realizó con bu-
El incremento en la demanda de alimen- ffer fosfato 50 mM pH 6 y centrifugación a
tos a causa del crecimiento poblacional, 6000 rpm (10 minutos) para remover mi-
conlleva a un aumento en la generación de celio remanente. Se determinó por méto-
agro-biomasa residual, cuya mala disposi- dos colorimétricos actividad Celulasa (C),
ción ocasiona serios problemas ambientales. Amilasa (A), Xilanasa (X) del ácido dinitro-
La fermentación fúngica de la agro-biomasa salicílico y de Lipasa (L) por la degradación
residual permite obtener una biomasa fer- del p-nitrofenil butirato.
mentada reducida en factores antifisiológi- En todos los sistemas fermentativos
cos, con incrementada calidad nutricional al conteniendo BC combinado con otros sus-
mejorar la biodisponibilidad de compuestos tratos, la actividad A y X fue superior res-
benéficos siendo su composición adecuada pecto de los sistemas en ausencia de BC
para ser utilizada como alimento animal, y o conteniendo solo BC. Los sistemas con
concomitantemente se producen metabo- un agregado 2g de BC presentaron mayor
litos de gran interés como las enzimas que actividad. Por otra parte, la actividad C no
pueden ser extraídas y utilizadas con otros se ve afectada significativamente por el
44
SESIÓN 2
agregado de BC al sistema. Sin embargo, al El creciente consumo de hongos comesti-

trabajar solo con BC como sustrato la ac- bles se vincula al actual interés por acceder
tividad C disminuyó. La actividad L mostró a alimentos naturales y nutritivos. Fistulina
un aumento significativo de la actividad antarctica es un hongo comestible de cose-
en aquellos sistemas formados por mez- cha otoñal exclusiva que se consume fresco
clas entre los sustratos AT, CS y BC, contra- o procesado fuera de temporada. La vida
riamente en el sistema 3 disminuyo ya que útilde los hongos puede prolongarse por
al agregar más BC la presencia de azucares deshidratado, enlatado, escaldado y conge-
podría estar inhibiendo el crecimiento. lado. Una alternativa, es la elaboración de
Se concluye que es posible utilizar escabeches en los cuales la materia prima
agro-biomasa residual en fermentaciones es fermentada por levaduras y bacterias lác-
fúngicas para producir enzimas con activi- ticas (BAL) indígenas. Sin embargo, las fer-
dades superiores a los obtenidos al emplear mentaciones libres pueden dar lugar a ca-
sustratos purificados. El agregado de BC al racterísticas organolépticas no deseadas o al
sustrato en FES, mejoro la producción de A, desarrollo de microorganismos deterioran-
X y L por A. niger y oryzae cuando estos cre- tes. El objetivo de este trabajo fue evaluar
cen en una única fermentación mixta. la capacidad distintas cepas de BAL (aisladas
de flores y frutas de la Patagonia y de gránu-
los de kéfir) de fermentar los cuerpos fruc-
Palabras claves: ALIMENTO ANIMAL, FERMEN- tíferos de Fistulina antarctica, prolongar su
TACION FUNGICA; COCTEL ENZIMATICO; RESI- vida de estante y aumentar la concentración
DUOS AGROINDUSTRIALES.
de compuestos fenólicos. Los hongos fueron
lavados, cortados (4 cm aproximadamente),
blanqueados o no (frescos) y sumergidos en
una solución estéril de sacarosa (2%, p/v)
23FMB y NaCl (2%, p/v). Los hongos blanqueados
fueron inoculados al 2% (v/v) con Lactoca-
Fermentación láctica del seibacillus paracasei GB6 (frutos) y K4 (kéfir)
hongo silvestre o Leuconostoc citreum F4 (flores), fermenta-
dos a 20°C durante 7 días y conservados a
andinopatagónico 4°C durante 30 días. Como control se usaron
Fistulina antárctica como hongos frescos y blanqueados. El pH inicial
(4,9) disminuyó luego de la fermentación
alternativa de preservación (3,5-3,7) y se mantuvo constante durante
poscosecha y agregado de la vida de estante. Si bien el blanqueado
valor redujo el recuento de BAL inicial (2 U log),
luego de la fermentación los valores fueron
similares a los observados en los hongos
GONZÁLEZ, Gabriela C.ab; SEDE LUCENA, Bren-
daab; PESCUMA, Micaelaab; PILDAIN, M Belénab; frescos (8,4-8,1 log ufc/ml, respectivamen-
BARROETAVEÑA, Carolinaab te). Las BAL inoculadas crecieron entre 1,0
a) Consejo Nacional de Investigaciones Científi- y 1,7 U log luego de 7 días de incubación,
cas y Técnicas (CONICET) siendo mayores los recuentos para GB6 (9,1
b) Centro de Investigación y Extensión Forestal log ufc/ml). Luego de 30 días de almacena-
Andino Patagónico (CIEFAP) miento los recuentos de BAL disminuyeron
[email protected] principalmente en los hongos frescos y blan-
queados (6,6 y 7,2 log ufc/ml, respectiva-
45
SESIÓN 2
mente), observándose una mayor sobrevida b) Consejo Nacional de Investigaciones Científi-

en el caso de los hongos inoculados con GB6 cas y Técnicas (CONICET)
(8,9 log ufc/ml). En todos los casos se obser- [email protected]
vó la presencia de levaduras (4,3 log ufc/ml),
aunque sólo en los hongos frescos crecieron
luego de 15 días de almacenamiento (1,1 U Actualmente los biocombustibles de pri-
log), disminuyendo a los 30 días y alcanzan- mera generación (1G) son foco de debate y
do valores similares a los de los hongos blan- cuestionamientos éticos, asociados al uso
queados e inoculados. La concentración de de recursos capaces de ser utilizados como
compuestos fenólicos disminuyó luego de la alimento para la población, y los impactos
fermentación en los hongos frescos e inocu- ambientales que derivan de su producción
lados con K4 (24 y 11 %, respectivamente), (involucran monocultivos extensivos, cam-
mientras que no se observaron diferencias bio de uso de la tierra, avance sobre eco-
significativas con los otros tratamientos. En sistemas naturales, etc). En este contexto,
cuanto al color y apariencia, los hongos ino- los biocombustibles de segunda generación
culados mostraron mejores características (2G) aparecen como una alternativa viable

(colores más claros y menor turbidez); mien- para alcanzar la seguridad energética, mejo-
tras que la textura fue mejor cuando fueron rando el desempeño ambiental de la indus-
fermentados con GB6. En cuanto al sabor las tria de los biocombustibles.
mejores valoraciones fueron obtenidas para
El bioetanol es el biocombustible más
los hongos fermentados con GB6 y F4. L. pa-
utilizado a nivel mundial y local. Para la pro-
racasei GB6 podría ser utilizada como cultivo
ducción de bioetanol 2G, se recurre a pro-
iniciador para aumentar la vida de estante y
cesos que permitan aprovechar el potencial
mejorar las características organolépticas de
de materiales lignocelulósicos residuales.
Fistulina antarctica.
Estos procesos involucran una serie de ope-
raciones físicas, químicas y biológicas, desti-
nadas a romper y/o alterar los polímeros de
carbohidratos que constituyen los materia-
les (hemicelulosas y celulosa), y solubilizar
monómeros fermentables, para finalmente
bio-convertirlos en etanol.
24FMB El presente trabajo tiene como objetivo
Producción de Bioetanol estudiar los efectos de diferentes condicio-
nes de un tratamiento termoquímico sobre
de segunda generación a cascarilla de soja, seguido de un tratamiento
partir de cascarillas de enzimático en medio líquido con un com-
plejo enzimático comercial con actividad
soja celulasa (Novozyme, Cellic CTec2®), sobre
GIL ROLÓN, Martín E. a, b; LEONARDI, Rodrigo J.
la solubilización de azúcares fermentables
a, b
; SELUY, Lisandro G. a, b; COMELLI, Raúl N. a, b. para una posterior fermentación alcohóli-
ca. Para esto, se utilizó un diseño factorial
a) Grupo de Procesos Biológicos en Ingeniería
Ambiental (GPBIA), Facultad de Ingeniería y tipo central compuesto (2k+2k+nc), con los
Ciencias Hídricas (FICH), Universidad Nacional factores tiempo (30 - 180 min), tempera-
del Litoral (UNL), Ciudad Universitaria (Paraje El tura (80 - 125°C) y concentración de ácido
Pozo), Santa Fe, Argentina. sulfúrico (0,5 - 2,5% m/v). Los resultados se
46
SESIÓN 2
analizaron mediante métodos de regresión, Palabras claves: BIOETANOL; PRE-TRATAMIEN-

construyendo modelos predictivos de tipo TO; LIGNOCELULOSA; FERMENTACIÓN.
superficies de respuesta, evaluando como
variables dependientes las concentraciones
alcanzadas de pentosas y glucosa.
25FMB
Posteriormente, se escogieron aquellos
hidrolizados con mayor concentración de Optimización de la
glucosa para llevar adelante una fermenta-
ción alcohólica con una cepa de Saccharomy-
producción de
ces cerevisiae. Los medios se inocularon con biosurfactantes empleando
una concentración inicial de biomasa de 1
gr/L y se mantuvieron a 30°C con agitación
Bacillus amyloliquefaciens
constante durante 24 h. Se realizó un mues- y subproductos de la
treo periódico para evaluar el consumo de industria local
glucosa y la producción de etanol.
De los resultados, se observó que el au-
BENEDETTI, Gonzaloa; HAIDAR, Carla N.a; TU-

mento de la temperatura y la concentración BIO, Giselaa; PELLEGRINI MALPIEDI, Lucianaa
de ácido sulfúrico en el tratamiento termo- a) Instituto de Procesos Biotecnológicos
químico están directamente relacionadas y Químicos Rosario (IPROBYQ), Facultad
con la solubilización de pentosas, esto es, de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas,
con la hidrólisis de las hemicelulosas, y con Universidad Nacional de Rosario, CP 2000,
la liberación de glucosa durante la posterior Rosario, Argentina
sacarificación enzimática de la celulosa. El [email protected]
rango de experimentación incluyó condicio-
nes que permitieron liberar más de un 80%
de las pentosas y alcanzar una liberación del Introducción: A partir de 1965, las leyes
80% de la glucosa a las 24 h de sacarificación de protección del medioambiente comen-
enzimática. zaron a limitar el empleo de algunos tipos
de surfactantes sintéticos debido a proble-
Durante la fermentación, se consumió el
mas de biodegradabilidad y toxicidad. En
100% de la glucosa presente en los hidroliza-
este contexto surge una nueva alternativa
dos, obteniéndose rendimientos de etanol
al empleo de surfactantes sintéticos: los
entre 0,45-0,49 gr etanol/gr glucosa. Estos
biosurfactantes (BS). Además de su biode-
valores, son cercanos al rendimiento teórico
gradabilidad, estos compuestos presentan
sugerido para fermentaciones sobre medios
la ventaja adicional de ser producidos por
enriquecidos con glucosa (0,51 gr etanol/gr
microorganismos que pueden ser cultiva-
glucosa) y similares a los obtenidos en in-
dos en fuentes renovables de nutrientes.
dustrias alcoholeras convencionales (0,40-
Los microorganismos del género Bacillus y
0,45 gr etanol/gr glucosa).
el lipopéptido que producen, la Surfactina,
Los resultados obtenidos sugieren que constituyen uno de los sistemas con mayor
el proceso planteado para la producción de potencial comercial.Actualmente, la princi-
bioetanol a partir de cascarilla de soja tiene pal limitante de su aplicación a gran escala
el potencial para ser factible desde el punto comercial radica en los elevados costos de
de vista tecnológico. producción que tienen aparejados. En este
sentido, la utilización de sustratos de bajo
47
SESIÓN 2
costo y la optimización de los recursos utili- el medio (18 g/L) y presencia máxima de ex-
zados en la producción representan estrate- tracto de levadura (1,5 g/L).
gias prometedoras para aumentar la compe- Se comprobó la producción de BS por
titividad comercial de los BS. De esta forma, parte del microorganismo utilizado en pre-
el objetivo del presente trabajo radica en sencia de diversas fuentes de carbono. Se
optimizar la producción de BS empleando comprobó la producción de surfactina por
a Bacillus amyloliquefaciens como sistema parte del mismo y se infiere la presencia de
biológico y subproductos de la industria lo- BS de otra naturaleza. Se optimizaron de for-
cal como sustratos en la composición de los ma preliminar las condiciones de cultivo y la
medios de cultivo. composición del medio para maximizar la
Materiales y metodología: Se empleó producción de BS, utilizando un subproduc-
un aislamiento de Bacillus amyloliquefa- to hidrofóbico proveniente de la industria
ciens proveniente de un nicho petrolífero local (ACU). Esto representa un primer paso
de la ciudad de Aracaju, Brasil. Se realizó hacia la producción comercial de BS a partir
un screening preliminar de crecimiento y de sustratos de bajo costo.
producción de BS empleando medios de

cultivo con distintas fuentes de carbono
Palabras claves: OPTIMIZACIÓN; BIOSURFAC-
(Glucosa, LB, Kerosene, Glicerol prove- TANTES; BACILLUS; SURFACTINA.
niente de la industria del biodiesel, Acei-
te de cocina usado). Se realizó luego un
diseño experimental de respuesta de su-
perficie, evaluando como factores la tem-
peratura de cultivo, la composición de la 26FMB
fuente de carbono, y la concentración de
extracto de levadura presente en el medio Comparación de
de cultivo. Las respuestas analizadas con- biocatalizadores y
sistieron en la medición del crecimiento
celular, ensayo de actividad de superficie catalizadores en la
(test de Parafilm M), producción de BS y producción de carbonato
concentración de Surfactina en extractos
de BS.
de glicerina por
Resultados y discusión: En los ensayos
transcarbonatación
preliminares, la mayor tasa de crecimiento
así como también la mayor producción de ÁLVAREZ SERAFINI, M.S.a, SNOUSSI, Y.b,
PEDREGAL, Tc., BOLÍVAR, J.M.c, BESBES, N.b,
BS (1,1-1,3 g/L) y concentración de surfac- TONETTO, G.a, GARCÍA-OCHOA, F.c, LADERO,
tina en los extractos de BS (84,47 mg/L) M.c
se produjo en los medios de cultivo que a) Departamento de Ingeniería Química, Univer-
contenían aceite de cocina usado (ACU). sidad Nacional del Sur (UNS) y Planta Piloto de
En el diseño experimental se evaluó la Ingeniería Química – PLAPIQUI (UNS-CONICET),
composición óptima del medio de cultivo Bahía Blanca, Argentina
así como también la temperatura que per- b) Laboratoire Matériaux Composites et Miné-
mita la mayor producción de BS. Se obtu- raux Argileux, Centre National de Recherches en
vieron condiciones óptimas de producción Sciences des Matériaux, Technopole Borj Cédria,
a temperaturas de cultivo de ~30°C, con una Soliman 8027, TunisieFaculté des Sciences Ma-
thématiques, Physiques et Naturelles de Tunis
concentración máxima de ACU presente en
48
SESIÓN 2
c) Departamento de Ingeniería Química y de los del medio se analiza por HPLC de exclusión
Materiales, Universidad Complutense de Ma- iónica con columnas Rezex™ ROA-Organic
drid, Madrid, España. Acid H+ (Phenomenex). El análisis de los da-
[email protected] tos obtenidos mediante Aspen Custom Mo-
deler permite seleccionar los modelos ciné-
ticos más adecuados.
La producción de biodiesel por transes-
A primera vista, los procesos con cataliza-
terificación de ácidos grasos a partir de
dor homogéneo (estearato de Zn) y hetero-
diversos aceites con alto contenido en tri-
géneo (Smectita) transcurren rápidamente,
glicéridos supone la coproducción de gli-
en condiciones de 80 ºC, 2% catalizador y
cerina en una notable cantidad (un 10% de
relación molar 3:1 carbonato:glicerina, las
la masa inicial de aceite). De esta forma, la
conversiones de glicerina rondan el 61% en
mayor parte de la glicerina en el mercado
4 h para la smectita, y un 70% para el es-
proviene de este proceso (entre un 64 y
tearato de zinc, mientras que los procesos
un 70% del total de glicerina) y los usos
con un 3% de lipasa (Eversa Transform 2.0,
de este compuesto se han diversificado. La
Lipozyme TL-100L, o Lipozyme CALB-L) a
transcarbonatación a carbonato de glice-

temperatura ligeramente inferior (70 ºC) y
rina es un proceso que despierta mucho
en condiciones similares de concentración
interés por el potencial de este produc-
de reactivos, precisan de unas 60 horas para
to como disolvente verde, monómero y
alcanzar un 90% de conversión. Sin embar-
fuente de diversos compuestos químicos.
go, en términos de frecuencia de reposición
Este proceso es simple, tiene bajo impac-
(s-1), relativa a la actividad de cada centro
to ambiental y permite el uso de diversos
activo, las lipasas presentan unos valores
catalizadores: lipasas, carbonatos, arcillas,
entre 5,6 y 12 s-1 frente a 1,1-1,4·10-3 s-1 de
hidrotalcitas, etc., muchos de ellos con un
los catalizadores alcalinos, mostrando una
carácter débil.
actividad mucho mayor por centro activo. El
Este trabajo se centra en comparar catalizador más activo, en estos términos, es
diversos biocatalizadores (lipasas) y cala lipasa B de Candida antarctica.
talizadores básicos heterogéneos y ho-
Respecto a los modelos cinéticos para
mogéneos (smectita y estearato de zinc)
describir la velocidad de los procesos, se
en términos de actividad (frecuencia de
obtienen buenos resultados con modelos
reposición) y considerando diversos mo-
potenciales para el estearato de zinc y la
delos cinéticos para los catalizadores más
smectita: primer orden parcial respecto de
activos. La reacción estudiada ha sido la
cada reactivo, pero se obtiene un valor de
transcarbonatación de carbonato de etile-
velocidad máximo asintótico según aumen-
no y glicerina, que rinde carbonato de gli-
ta la concentración de catalizador. El modelo
cerina y etilenglicol, ambos productos de
cinético para la enzima Eversa Transform 2.0
interés en industria química y cosmética.
es también de tipo potencial tanto para la
Las condiciones de operación son suaves:
trans-carbonatación como para la polimeri-
temperaturas de 70 a 80 ºC, en ausencia de
zación, reacción que se encuentra en equi-
disolvente o con una ligera concentración
librio.
de tert-butanol para estabilizar las lipasas y
con concentraciones relativamente bajas de
los catalizadores (1-4% en masa respecto de Palabras claves: GLYCEROL, CARBONATE, ACTI-
la glicerina). La evolución de la composición VITY, KINETICS, LIPASE.
49
SESIÓN 2
27FMB g/l). A baja concentración de glicerol, 2,5 y

15 g/l, se observó una velocidad específica
Biosíntesis de de crecimiento (µ) de 0,13 y 0,098 h-1 respec-
polihidroxibutirato en tivamente, con acumulación de PHB máxima
biorreactor por la bacteria de 10 y 30%. A concentraciones de 30 y 40
g/l, si bien la µ fue menor (0,07 y 0,06 h-1
Halofila Halomonas respectivamente), los porcentajes de acu-
titanicae KHS3 mulación máximos fueron mucho mayores
(83,5 y 77,6 %). En base a estos resultados,
se seleccionó la concentración de glicerol de
RODRÍGUEZ, Ailén Nb; PIDHIRNYJ, María Ia;
PERETTI CANALE, María Va; HERRERA SEITZ, 30 g/l a fin de obtener una alta acumulación
María Kc; BECCARIA, Alejandro Ja; STUDDERT, sin afectar demasiado la velocidad de creci-
Claudia Ab. miento y para realizar cultivos batch en un
a) Laboratorio de Fermentaciones. Facultad de biorreactor tanque agitado de 1,5 litros. En
Bioquímica y Ciencias Biológicas. Universidad éstos, se trabajó a pH y tensión de oxígeno
Nacional del Litoral. disuelto constantes (7 unidades y 20 %, res-

b) Instituto de Agrobiotecnologia del Litoral. pectivamente), empleando una solución de
CCT-Santa Fe. NaOH (2M) y control en cascada (flujo de
aire y velocidad de agitación) para el man-
c) Instituto de Investigaciones Biologicas. CON-
tenimiento de las variables mencionadas. El
ICET. Universidad Nacional de Mar del Plata.
seguimiento de la evolución de la biomasa
[email protected] se realizó determinando la densidad óptica
(600 nm) y la masa seca al final del cultivo
(60 °C). El cultivo se desarrolló mostrando
Los polihidroxialcanoatos son polímeros una típica fase de crecimiento exponencial
biodegradables y renovables, considerados (µ= 0,09 h-1) seguida de otra estacionaria.
potenciales sustitutos de los plásticos con- Se registró un elevado consumo de álcali y
vencionales derivados del petróleo. Sin em- demanda de oxígeno en la primera de las fa-
bargo, la producción es muy costosa debido ses, lo que se relaciona con el desarrollo de
principalmente a las condiciones de esteri- la biomasa. La acumulación de PHB al finali-
lidad requeridas y a las fuentes de carbono zar la fase exponencial fue del 7%, valor que
utilizadas. Halomonas titanicae KHS3 es una se incrementó hasta el 71% al final de la fase
bacteria moderadamente halófila, aislada estacionaria.
del puerto de Mar del Plata, que posee una
amplia versatilidad metabólica que le permi- De esta manera, fue posible desarrollar
te crecer en diversas condiciones nutriciona- un cultivo en un sistema escalable tal como
les. En este trabajo se estudió la capacidad un biorreactor tanque agitado, usando una
de H. titanicae KHS3 de crecer y/o acumu- fuente de carbono económica y sustentable
lar polihidroxibutirato (PHB) a expensas de y obteniendo resultados alentadores para
glicerol como única fuente de carbono, sus- profundizar el estudio.
trato de relevancia por su creciente oferta Finalmente, el polímero acumulado se
relacionada al proceso de elaboración de extrajo por dos métodos basados en el tra-
biodiésel. En una primera instancia se rea- tamiento con hipoclorito de sodio o con clo-
lizaron experimentos en frascos Erlenmeyer roformo, previa liofilización de la biomasa.
empleando un medio mínimo con diferentes Actualmente se está realizando una carac-
concentraciones de glicerol (2,5; 15; 30; 40 terización preliminar del polímero extraído
50
SESIÓN 2
por ambas metodologías para determinar si histamina, la cual está estrictamente regu-
el procedimiento de extracción afecta signi- lada por países importadores. Actualmente,
ficativamente alguna de las propiedades del el control de la microbiota alterante en la
material producido. industria se realiza únicamente con dióxido
Se prevé desarrollar nuevos cultivos en el de azufre, sin embargo este agente quími-
biorreactor, evaluando otros modos de ope- co puede producir alergias e intolerancia en
ración tales como el fed-batch y la perfusión. personas sensibles. Los compuestos fenóli-
cos (CF) presentes en vinos inhiben el creci-
miento de las BL. El proceso de añejamiento
Palabras claves: BIOPLÁSTICO; POLIHIDROXIAL- en barrica de roble libera una mayor canti-
CANOATOS; GLICEROL CRUDO; BIORREACTOR dad CF al vino. El objetivo de este trabajo es
TANQUE AGITADO.
investigar el efecto de la fracción fenólica de
bajo peso molecular (FF) extraída de un vino
joven o añejado sobre el crecimiento de tres
cepas de L. hilgardii (5w, 6F y X1B), aisladas
de vino y con documentada capacidad para
28FMB producir aminas biogénicas. La FF se obtie-

ne de vino tinto varietal Tannat joven (J) y
Efecto de fracciones añejado (A) producidos en Colalao del Valle
fenólicas de vinos tintos (Tucumán) mediante extracciones sucesivas
con acetato de etilo. Los microorganismos
regionales sobre bacterias se cultivan en medio sintético-símil vino
deteriorantes (MVS) pH: 4,5 a 20°C suplementado con FF
a idéntica concentración que la presente en
STIVALA, Maria G.a,b; VILLECCO, Margarita B. a; el vino (1X) y dos (2X) veces concentrada.
AREDES FERNÁNDEZ, Pedro A. a,b La actividad antibacteriana se evalúa deter-
a) Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia – minando la diferencia entre viabilidad final
Universidad Nacional de Tucumán e inicial (A= N-N0 Log ufc/mL) a las 72 h de
incubación, con respecto al medio control.
cas y Técnicas (CONICET). El contenido de CF, determinado por el mé-
todo de Folin, en la FFJ y FFA es de 268,9 y
[email protected] 940,8 GAE/L, respectivamente. En MVS, sin
la adición de FF, las tres cepas de L. hilgar-
dii incrementan su viabilidad en 1,83, 1,51 y
El vino es una de las bebidas alcohólicas
1,33 ciclos Log, respectivamente (72 h). En
más conocidas, consumidas e investigadas
presencia de FFJ 1X, todas las cepas estudia-
a nivel mundial. Es producido a partir de la
das muestran una detención del crecimien-
fermentación alcohólica del mosto de uva
to respecto al control, manteniendo valores
fresca y atraviesa diferentes controles con el
de viabilidad similares al del inóculo durante
fin de asegurar su calidad y sanidad. Duran-
todo el periodo de incubación (A=0 Log ufc/
te la vinificación pueden ocurrir alteraciones
mL). Al duplicar la concentración de FFJ se
organolépticas e higiénico-sanitarias produ-
observa, en todos los casos, una disminu-
cidas por Bacterias lácticas (BL) indeseables,
ción en la concentración de células viables
especialmente del género Lactobacillus. Esta
con respecto al inóculo, alcanzando valores
especie de BL está relacionada a la presen-
de A entre -0,22 y -0,45 Log ufc/mL. La incor-
cia de aminas biogénicas, principalmente de
poración al MVS de las FFA 1X y 2X provo-
51
SESIÓN 2
có una notable disminución en la viabilidad rol inmunomodulador, entre otros. Limo-

microbiana con respecto al inóculo, siendo silactobacillus fermentum Lf2 (Lf2) es una
L. hilgardii X1B la bacteria más sensible, ob- cepa autóctona capaz de producir EPS con
servándose a 2X un brusco descenso de la propiedades funcionales interesantes de-
concentración celular (A=-2,62 Log ufc/mL). mostradas tanto en modelos in vivo como
Los CF presentes en las FF de los vinos es- in vitro. En el presente trabajo se propuso
tudiados producen la interrupción y pérdida estudiar el rol preventivo de la cepa como
de viabilidad en bacterias alterantes de vino. de sus EPS en un modelo murino de colitis
Los CF de vino podrían ser propuestos como crónica inducida con TNBS (ácido sulfónico
alternativa natural al uso de los agentes quí- 2,4,6-trinitrobenceno). Para esto, ratones
micos usados actualmente. BALB/c fueron tratados por vía intrarectal
con dosis crecientes de TNBS resuspendido
en etanol 50% a lo largo del ensayo (25, 37,5
Palabras claves: VINO; POLIFENOLES; BACTE-
RIAS LÁCTICAS; ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA. y 80 mg/kg a los días 0, 7 y 14, respectiva-
mente). Paralelamente, los ratones recibie-
ron por intubación intragástrica distintos

tratamientos durante 15 días: Lf2 liofilizada
y resuspendida en agua estéril (dosis final
de 108 UFC/día/ratón, grupo Lf2), EPS puri-
29FMB ficado y resuspendido en lactosa 10% (0,6
mg/día/ratón, grupo EPS), y el grupo control
Rol de Limosilactobacillus (C) recibió lactosa 10%, ya que fue la matriz
fermentum LF2 y sus utilizada para liofilizar la cepa. Además, se
exopolisacáridos (EPS) sumó otro grupo control (saludable, S) que
fue tratado con alcohol 50% sin TNBS y que
en la prevención de colitis también recibió lactosa 10%. Luego de cada
crónica tratamiento, los ratones fueron anestesia-
dos y sacrificados por dislocación cervical
para obtener muestras de intestino delgado
ALE, Elisa C.; ROJAS, M. Florencia; CORREA OLI-
VAR, Gabriela; PERALTA, Guillermo H.; BURNS, (lavado con 5 mL de PBS frío con 1% de inhi-
Patricia; BERGAMINI, Carina; BINETTI, Ana G. bidor de proteasas- Sigma Aldrich), intestino
Instituto de Lactología Industrial (INLAIN, grueso y contenido de ciego. A partir de los
UNL-CONICET), Santiago del Estero 2829, Santa homogenatos de intestinos se midieron dis-
Fe (3000), Argentina. tintas citoquinas por ELISA (BD Biosciences)
y se determinó IgA en fluido intestinal por el
[email protected]
mismo método. Asimismo, se determinaron
los niveles de ácidos grasos de cadena corta
Muchas bacterias ácido lácticas son pro- (SCFA) en el contenido de ciego por HPLC.
ductoras de exopolisacáridos (EPS), los cua- En intestino delgado, se observó un incre-
les son polímeros de carbohidratos comple- mento significativo de IgA para el grupo EPS,
jos que se liberan al medio. Estas moléculas una disminución de la citoquina proinflama-
han sido relacionadas con numerosos efec- toria IL-2 para los grupos EPS y Lf2, un au-
tos beneficiosos para la salud, como la re- mento de IL-12 para EPS y una disminución
gulación de la microbiota intestinal, la de IFN-γ para Lf2, mientras que no se vieron
prevención de distintas enfermedades, el cambios significativos para IL-6 ni TNF-α. Por
otro lado, en intestino grueso, IL-2 e IFN- γ
52
SESIÓN 2
presentaron menores niveles para los grupos La agricultura busca actualmente un

EPS y Lf2 en comparación con los grupos C y cambio hacia el manejo sustentable de
S, mientras que las diferencias observadas plagas con un uso preponderante de los
para las citoquinas IL-10 e IL-12 no fueron sig-
biopesticidas frente a los pesticidas quími-
nificativas entre los tratamientos. También se
cos. La evaluación, producción, aplicación
apreciaron diferencias para los SCFA, ya que y comercialización de cualquier biopesti-
los niveles de los ácidos acético y propiónico
cida requiere la disponibilidad de grandes
fueron mayores para el grupo Lf2 en compara- cantidades de propágulos del agente de
ción con el resto de los tratamientos, mientras
biocontrol. Algunos hongos microscópicos
que los niveles de ácido butírico de este grupo
poseen capacidades únicas de biocontrol
fueron comparables a los del grupo S. A par- por sus mecanismos de persistencia, propa-
tir de estos resultados, se pone en manifiesto
gación e invasión y por los tipos de propá-
la potencialidad tanto de la cepa como de susgulos producidos. Algunas cepas de hongos
EPS para ser aplicados como ingredientes fun-biocontroladores pueden producir conidias,
cionales, y, al mismo tiempo, se puede sugerir
blastosporas, microesclerocios y micelio
una correlación entre los efectos de la cepa y
(biomasa) como propágulos para aplicar en
su capacidad de producir estas moléculas. control biológico. La fermentación en estado

líquido (LSF) se presenta como un proceso
biotecnológico promisorio en la producción
Palabras claves: COLITIS CRÓNICA, EXOPOLISA- masiva de micopesticidas. Sin embargo la in-
CÁRIDOS, LACTOBACILO, PREVENCIÓN.
fluencia de diferentes factores como medios
de cultivos líquidos, fotoperiodo, agitación
o cepas fúngicas biocontroladoras aún res-
ta por conocer. Los objetivos de este trabajo
30FMB fueron evaluar la influencia de tres medios
de cultivos líquidos, fotoperiodo y agitación
Produccion masiva de en la producción masiva líquida del hongo
conidias, blastosporas y biocontrolador Metarhizium anisopliae.
microesclerocios de En la producción de propágulos de agen-
tes biocontroladores se evaluaron dos aisla-
Metarhizium anisopliae mientos de M. anisopliae codificados como
en LSF LBM 217 y LBM 218, que están depositados
en cepario del Instituto de Biotecnología
BICH Gustavo A.a,b; CASTRILLO María L.a,b; Misiones. Ambos aislados se cultivaron en
KRAMER Luis F. a; VILLALBA Laura L.a y ZAPATA tres medios de cultivo líquidos: extracto de
Pedro D.a,b malta 1,27% p/v, extracto de levadura 0,3%
a. Universidad Nacional de Misiones. Facultad p/v adicionado con dextrosa al 1% p/v y un
de Ciencias Exactas Químicas y Naturales. Insti- medio de cultivo natural compuesto por ex-
tuto de Biotecnología Misiones “Dra. María Ebe tracto de levadura comercial al 0,3% p/v adi-
Reca” (INBIOMIS). Laboratorio de Biotecnología cionado con melaza de caña de azúcar al 3%
Molecular (BIOTECMOL). Misiones, Argentina.
p/v. La incubación se realizó a 28 ± 1 ° C en
b. CONICET (Centro Nacional de Investigaciones tres condiciones de fotoperíodo: 24 h de luz;
Científicas y Tecnológicas).Buenos Aires, Argen- 12 h de luz seguidas de 12 h de oscuridad;
tina. o 24 h de oscuridad. Además se evaluaron
[email protected] tres condiciones de agitación (aireación):
53
SESIÓN 2
condiciones estáticas, 10 rpm o 200 rpm. La 31FMB

producción de propágulos se evaluó cada 48
h durante seis días.
Evaluación de la capacidad
Ambos aislamientos produjeron conidias,
fermentativa de probióticos
blastosporas, así como un tipo de propágu- para formular geles ácidos
lo compacto melanizado de tamaño de 70
a 270 µm llamado microesclerocio que se
de proteínas del lactosuero
presenta sólo en algunas cepas de hongos
LOYEAU, Paula A.a; SÁNCHEZ CARNERO, María
biocontroladores. Con base en estas condi- A.a; FIORAMONTI, Silvanaa; SPOTTI, Maríaa;
ciones experimentales, los rendimientos de VINDEROLA, Gabriel C.b; CARRARA, Carlos R.a
propágulos líquidos (conidias, blastosporas
a) Área de estudios Fisicoquímicos de Alimentos,
y microesclerocios) tuvieron diferencias es- Instituto de Tecnología de Alimentos, Facultad
tadísticas entre las condiciones evaluadas de Ingeniería Química, Universidad Nacional del
y fueron dependientes de la cepa. Para la Litoral (UNL). Santa Fe (3000), Argentina.
cepa M. anisopliae LBM 217 la mayor pro-
b) Instituto de Lactología Industrial (INLAIN),
ducción de propágulos, entre 2,4 y 2,8 × 106 UNL - CONICET. Santa Fe (3000), Argentina.

propágulos / ml, se obtuvo en medio de ex-
tracto de levadura adicionado con dextrosa, [email protected]
a 200 rpm, e inclusión de luz al sexto día de
incubación. En el caso de M. anisopliae LBM
Los probióticos como cultivos iniciadores
218 la mayor producción de propágulos, en-
en la fermentación de alimentos han des-
tre 2,3 y 2,6 × 106 propágulos / ml, se obtuvo
pertado interés en los tecnólogos del área
en medio de extracto de levadura comercial
para el diseño de nuevas formulaciones en
adicionado con melaza de caña de azúcar, a
la producción de alimentos funcionales -
200 rpm, y 24 h de luz al sexto día de incu-
aquellos que aportan efectos beneficiosos
bación.
más allá de su valor nutritivo. Los aislados
Los ensayos de cultivo en matraces eva- de proteínas del lactosuero (WPI) también
luados nos permitieron seleccionar el medio constituyen un ingrediente de interés para
de cultivo y las condiciones óptimas para el el desarrollo de nuevos alimentos, por su
cultivo de cepas de M. anisopliae en fermen- elevado valor biológico y excelentes propie-
tación líquida enfocadas en la producción dades funcionales.
masiva de propágulos para micopesticidas.
Objetivo: Evaluar la capacidad de fer-
mentación de probióticos para la obtención
Palabras claves: METARHIZIUM, BIOPESTICI- de geles ácidos de WPI.
DAS, FERMENTACIÓN EN ESTADO LÍQUIDO,
CONDICIONES DE CULTIVO. Metodología: Se prepararon (i) solucio-
nes de WPI 6%, tratadas térmicamente 2h a
68.5°C para promover la desnaturalización
proteica, (ii) soluciones de glucosa (0.2, 1 y
2%) esterilizadas en autoclave, como fuente
de carbono para la fermentación bacteriana,
y (iii) un cultivo de Bifidobacterium anima-
lis subsp. lactis INL1 de 109 UFC/mL (cepa
autóctona aislada por el INLAIN). Las solu-
ciones de glucosa y WPI se mezclaron para
54
SESIÓN 2
lograr concentraciones de 0.1, 0.5 y 1% de Conclusión: Se lograron sintetizar geles

glucosa y 3% WPI, y se inocularon con las de WPI con buenas propiedades tecnológi-
suspensiones de bacterias de manera de ob- cas a partir de la fermentación de bacterias
tener una concentración de 108 UFC/g. Estas probióticas.
mezclas se incubaron (42°C - 5h), para pro-
mover la acidificación y gelificación de los Palabras claves: ALIMENTOS FUNCIONALES;
sistemas, a la vez que se registraba el pH en PROBIÓTICOS; LACTOSUERO; FERMENTACIÓN
función del tiempo para construir curvas de LÁCTICA; GELIFICACIÓN.
acidificación. Para cada sistema gelificado se
determinó: (i) El pH al final de la incubación
y luego de almacenado el gel durante 1 mes
a 4°C, (ii) la cantidad de glucosa remanen- 32FMB
te, usando un kit enzimático, (iii) la sinéresis
inicial, midiendo el volumen de líquido exu-
Mejora del desempeño de
dado, (iv) la capacidad de retención de agua la lipasa metagenómica
(CRA), luego de centrifugar los geles (1 min, LipC12 en la esterificación
1000 rpm), y (vi) los recuentos semanales

de probióticos durante el almacenamiento a de ácido oleico mediante
4°C durante un mes. estrategias de inmovilización
Resultados: Todos los sistemas partieron y bioimpinting
de un pH cercano a 7 al inicio de la fermenta-
ción y aquellos con mayor contenido de glu-
SÁNCHEZ, Daniel A.a, ALNOCH, Robson C.b,c,
cosa alcanzaron menores valores de pH fina- TONETTO, Gabriela M.a, KRIEGER, Nadiad,
les (fermentación más rápida). Los geles con FERREIRA, María L.e
0.1% de glucosa presentaron una estructura a) Departamento de Ingeniería Química, Univer-
más laxa que los demás y en estos sistemas sidad Nacional del Sur (UNS), Planta Piloto de
las bacterias consumieron alrededor el 90% Ingeniería Química - PLAPIQUI (UNS-CONICET),
de la glucosa inicial. Por otro lado, los geles Bahía Blanca 8000, Argentina.
con 0.5 y 1% de glucosa presentaron estruc-
b) Departamento de Biologia, Faculdade de Filo-
turas más firmes y en ambos se alcanzó un sofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto, Univer-
límite en el consumo de glucosa, que no su- sidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 14040-901,
peró la concentración de 0.25%. Respecto a São Paul, Brazil.
la interacción con el agua, los geles con me-
c)Departamento de Bioquímica e Biologia Mo-
nor contenido de glucosa presentaron los lecular, Universidade Federal do Paraná, Cx. P.
menores valores de sinéresis. Sin embargo, 19046 Centro Politécnico, Curitiba 81531-980,
no se observaron diferencias en la CRA de Paraná, Brazil.
los sistemas. Durante el almacenamiento, (i)
d)Departamento de Química, Universidade Fe-
el valor de pH de todos los geles permaneció
deral do Paraná, Cx. P. 19081 Centro Politécnico,
sin variaciones, por lo que la bacteria no se- Curitiba 81531-980, Paraná, Brazil.
guiría fermentando los restos de glucosa, (ii)
los recuentos bacterianos cayeron 2 órdenes e)Departamento de Química, Universidad Na-
cional del Sur (UNS), Planta Piloto de Ingeniería
de magnitud en los geles con 0.1% de gluco-
Química - PLAPIQUI (UNS-CONICET), Bahía Blan-
sa y casi 3 órdenes en los restantes, lo que ca 8000, Argentina.
podría estar indicando una influencia del pH
en la supervivencia de los probióticos. [email protected]
55
SESIÓN 2
Se llevó a cabo la inmovilización de la li- polipropileno en polvo e Immobead, alcan-

pasa LipC12 sobre diferentes soportes com- zando conversiones de ácido superiores al
binada con la técnica de bioimprinting en 90% para la lipasa inmovilizada sobre Immo-
una sola etapa. Los soportes seleccionados bead. En todos los casos se encontraron di-
fueron quitosano, Accurel MP-1000, pellets ferencias estadísticamente significativas con
de polipropileno, polipropileno en polvo, un nivel de confianza superior al 95% entre
Nanomer I.44P e Immobead 150. La lipasa la conversión lograda con y sin bioimprinting
inmovilizada se aplicó en la síntesis de pentil para todos los biocatalizadores. Este hecho
oleato, compuesto con aplicación como bio- permite verificar el efecto beneficioso del
lubricante. bioimprinting sobre la actividad de los bio-
Se estableció un protocolo estándar para catalizadores en la reacción de esterificación
la inmovilización de LipC12 en todos los so- del ácido oleico con 1-pentanol. Las con-
portes. Para ello, se preparó una solución versiones más altas se lograron utilizando
acuosa del extracto crudo de la lipasa utili- LipC12 inmovilizada sobre soportes con ca-
zando 8 mg de extracto liofilizado por cada racterísticas hidrófobas. Las preparaciones
mililitro de agua destilada pH 6,5 y luego se inmovilizadas con mejor desempeño se uti-

añadió el soporte en una proporción de 20 lizaron en ocho reacciones de esterificación
mg del sólido por mililitro de la solución. La sucesivas y los mejores resultados se obtu-
inmovilización se realizó durante 6 h en via- vieron para la lipasa LipC12 inmovilizada en
les cerrados con agitación magnética a 700 Immobead 150 y quitosano, que mantuvie-
rpm. La preparación inmovilizada se recupe- ron 95 y 85% de la actividad inicial, respec-
ró por filtración, se lavó dos veces con agua tivamente.
destilada y se secó en estufa a 35 °C durante La inmovilización combinada con el tra-
12 h. El bioimprinting de la lipasa LipC12 se tamiento de bioimprinting, en un solo paso,
realizó con ácido oleico y en combinación permitió obtener preparaciones enzimáticas
con el procedimiento de inmovilización, en con mayor actividad a través de un proce-
un solo paso. El contenido de moléculas de so simple, en menos tiempo y sin el uso de
bioimprinting fue de 30 µmol por cada 100 disolventes orgánicos. Los biocatalizadores
mg de extracto liofilizado. mostraron un buen desempeño en la este-
Las preparaciones de LipC12 inmoviliza- rificación de ácido oleico y 1-pentanol. El
da, con y sin tratamiento de bioimprinting, bioimprinting incrementó la actividad cata-
fueron evaluadas en la esterificación de áci- lítica para todos los biocatalizadores obteni-
do oleico y 1-pentanol. Para ello, 2 mmol de dos, los mayores incrementos de actividad
1-pentanol, 1 mmol de ácido oleico y 1 ml de se observaron para los biocatalizadores ob-
n-heptano se colocaron en viales de 10 ml. tenidos utilizando soportes con característi-
La reacción se llevó a cabo por 5 horas a 40 cas hidrofóbicas.
°C, 600 rpm y empleando 15% (p/p) de lipa-
sa inmovilizada respecto a la masa de ácido
oleico.
La reutilización de los biocatalizadores
fue estudiada bajo las mismas condiciones
de reacción descritas anteriormente.
Los mejores resultados se obtuvieron
para la lipasa inmovilizada sobre Nanomer,
56
SESIÓN 2
33FMB aceite de soja para la obtención de ácidos

grasos libres en un sistema bifásico.
Inmovilización combinada
Se estableció un protocolo estándar para
con bioimprinting para la inmovilización de LipC12 en todos los so-
mejorar el desempeño de portes. Para ello, se preparó una solución
la lipasa metagenómica acuosa del extracto crudo de la lipasa utili-
zando 8 mg de extracto liofilizado por cada
LipC12 en la hidrólisis de mililitro de agua destilada pH 6,5 y luego se
aceite de soja en un añadió el soporte en una proporción de 20
mg del sólido por mililitro de la solución. La
sistema bifásico inmovilización se realizó durante 6 h en via-
les cerrados con agitación magnética a 700
SÁNCHEZ, Daniel A.a, ALNOCH, Robson C.b,c, rpm. La preparación inmovilizada se recupe-
TONETTO, Gabriela M.a, KRIEGER, Nadiad, ró por filtración, se lavó dos veces con agua
FERREIRA, María L.e
destilada y se secó en estufa a 35 °C durante
a) Departamento de Ingeniería Química, Univer- 12 h. El tratamiento de bioimprinting de la
sidad Nacional del Sur (UNS), Planta Piloto de lipasa LipC12 se realizó con ácido oleico y en
Ingeniería Química - PLAPIQUI (UNS-CONICET),
combinación con el procedimiento de inmo-
Bahía Blanca 8000, Argentina.
vilización, en un solo paso. El contenido de
b) Departamento de Biologia, Faculdade de Filo- moléculas de bioimprinting fue de 30 µmol
sofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto, Univer- por cada 100 mg de extracto liofilizado.
sidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 14040-901,
São Paul, Brazil. Las preparaciones de LipC12 inmoviliza-
da, con y sin tratamiento de bioimprinting,
c)Departamento de Bioquímica e Biologia Mo-
lecular, Universidade Federal do Paraná, Cx. P.
fueron evaluadas en la hidrólisis de aceite de
19046 Centro Politécnico, Curitiba 81531-980, soja. Para ello, 1 mmol de aceite, 10 mmol
Paraná, Brazil. de agua y 1 ml de n-heptano se colocaron en
viales de 10 ml. La reacción se llevó a cabo
d)Departamento de Química, Universidade Fe-
por 5 horas a 40 °C, 600 rpm y empleando
deral do Paraná, Cx. P. 19081 Centro Politécnico,
Curitiba 81531-980, Paraná, Brazil. 15% (p/p) de lipasa inmovilizada respecto a
la masa de aceite.
e)Departamento de Química, Universidad Nacio-
nal del Sur (UNS), Planta Piloto de Ingeniería El efecto positivo del bioimprinting sobre
el rendimiento a ácidos grasos libres durante
Química - PLAPIQUI (UNS-CONICET), Bahía Blan- la hidrólisis de aceite de soja se encontró solo
ca 8000, Argentina.
para los soportes a base de polipropileno. El
[email protected] rendimiento a ácidos grasos libres aumentó
un 129% para los pellets, un 70% para Accurel
y un 50% para el polvo de polipropileno. Para
Se llevó a cabo la inmovilización de la li-
la lipasa inmovilizada sobre Nanomer e Immo-
pasa LipC12 sobre diferentes soportes com-
bead, se obtuvieron rendimientos superiores
binada con la técnica de bioimprinting en
al 65%, sin ningún efecto asociado al bioim-
una sola etapa. Los soportes seleccionados
printing. Las preparaciones inmovilizadas que
fueron quitosano, Accurel MP-1000, pellets
respondieron positivamente al tratamiento de
de polipropileno, polipropileno en polvo,
bioimprinting corresponden a las obtenidas
Nanomer I.44P e Immobead 150. La lipa-
utilizando soportes puramente hidrófobos.
sa inmovilizada se aplicó en la hidrólisis de
57
SESIÓN 2
Las preparaciones enzimáticas obteni- d)Departamento de Química, Universidade Fe-

das mostraron alta actividad hidrolítica. Se deral do Paraná, Cx. P. 19081 Centro Politécnico,
obtuvieron rendimientos de ácidos grasos Curitiba 81531-980, Paraná, Brazil.
libres superiores al 80% con varios de los e)Departamento de Química, Universidad Nacio-
biocatalizadores sintetizados. El tratamiento nal del Sur (UNS), Planta Piloto de Ingeniería
de bioimprinting generó cambios importan-
Química - PLAPIQUI (UNS-CONICET), Bahía Blan-
tes en la actividad solo cuando se utilizaron ca 8000, Argentina.
soportes puramente hidrófobos, probable-
[email protected]
mente debido a la combinación del bioim-
printing propiamente dicho, la naturaleza
tensioactiva de la molécula de bioimprinting Se llevó a cabo la inmovilización de la li-
que mejoró el contacto entre los soportes y pasa LipC12 sobre diferentes soportes com-
la solución de lipasa y la activación interfa- binada con la técnica de bioimprinting en
cial de la lipasa debido a la naturaleza hidro- una sola etapa. Los soportes seleccionados
fóbica de los soportes. fueron quitosano, Accurel MP-1000, pellets
de polipropileno, polipropileno en polvo,

Nanomer I.44P e Immobead 150. La lipasa
inmovilizada se aplicó en la hidrólisis de tri-
34FMB caprilina para evaluar la actividad y selectivi-
Inmovilización de la dad de las preparaciones inmovilizadas con
LipC12.
lipasa metagenómica Se estableció un protocolo estándar para
LipC12 combinada con la inmovilización de LipC12 combinada con
bioimprinting para la bioimprinting,en una única etapa, para to-
dos los soportes. Para ello, se preparó una
obtención de solución acuosa del extracto crudo de la li-
biocatalizadores aplicados pasa utilizando 8 mg de extracto liofilizado
por cada mililitro de agua destilada pH 6,5,
a la hidrólisis de triglicéridos como agente de bioimprinting se adiciona-
ron 30 µmol de ácido oleico por cada 100
SÁNCHEZ, Daniel A.a, ALNOCH, Robson C.b,c, mg de extracto liofilizado y luego se añadió
TONETTO, Gabriela M.a, KRIEGER, Nadiad,
FERREIRA, María L.e el soporte en una proporción de 20 mg del
sólido por cada mililitro de la solución. La
a) Departamento de Ingeniería Química, Univer-
inmovilización se realizó durante 6 h en via-
sidad Nacional del Sur (UNS), Planta Piloto de
Ingeniería Química - PLAPIQUI (UNS-CONICET),
les cerrados con agitación magnética a 700
Bahía Blanca 8000, Argentina. rpm. La preparación inmovilizada se recupe-
ró por filtración, se lavó dos veces con agua
b) Departamento de Biologia, Faculdade de Filo- destilada y se secó en estufa a 35 °C durante
sofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto, Univer-
12 h.
sidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 14040-901,
São Paul, Brazil. Las preparaciones de LipC12 inmoviliza-
c)Departamento de Bioquímica e Biologia Mo- da con tratamiento de bioimprinting, fue-
lecular, Universidade Federal do Paraná, Cx. P. ron evaluadas en la hidrólisis de tricaprilina.
19046 Centro Politécnico, Curitiba 81531-980, Para ello, 1 mmol de tricaprilina, 10 mmol
Paraná, Brazil. de agua y 1 ml de n-heptano se colocaron en
58
SESIÓN 2
viales de 10 ml. La reacción se llevó a cabo La actividad y selectividad de la lipasa está

por 90 min a 40 °C, 600 rpm y empleando relacionada con su conformación y la misma
15% (p/p) de lipasa inmovilizada respecto a puede estar influenciada por el soporte de la
la masa del triglicérido. Se tomaron mues- inmovilización y el agente de bioimprinting.
tras de reacción a los 30, 60 y 90 min de re-
acción y se determinó su composición por
cromatografía de gases.
Se observaron altas actividades hidro-
líticas en tiempos tan cortos como 30 min 35FMB
para LipC12 inmovilizada sobre soportes
hidrófobos (polipropileno en polvo, Accu-
La fermentación en
rel y Nanomer). Para estas preparaciones sustrato sólido mejora la
se detectó una importante generación de
ácidos grasos libres, sin acumulación de
secreción enzimática de
glicéridos parciales, para los diferentes Trichoderma SPP
tiempos de reacción analizados.Los bio-
catalizadores obtenidos usando quitosano CASTRILLO María L.a,b; BARENGO Marcela P. a,b;
generaron niveles significativos de diglicé- AMERIO Natalia S. a,b; BICH Gustavo A.a,b;
ridos incluso en tiempos tan cortos como ZAPATA Pedro D.a,b y VILLALBA Laura L.a
30 min. Se observó un comportamiento
de Ciencias Exactas Químicas y Naturales. Insti-
similar para LipC12 inmovilizada en Immo- tuto de Biotecnología Misiones “Dra. María Ebe
bead. Reca” (INBIOMIS). Laboratorio de Biotecnología
Las altas actividades hidrolíticas para Molecular (BIOTECMOL). Misiones, Argentina.
tiempos de reacción cortos encontradas b) CONICET (Centro Nacional de Investigaciones
para preparaciones inmovilizadas basadas Científicas y Tecnológicas).Buenos Aires, Argen-
en soportes con características hidrofóbi- tina.
cas pueden asociarse con una alta eficien- [email protected]
cia de inmovilización combinada con la acti-
vación de lipasa debido a inmovilización en
una interfase y con el tratamiento de bioim- El género fúngico Trichoderma presen-
printing. ta gran potencial biotecnológico debido a
Los biocatalizadores con la mayor activi- la amplia diversidad metabólica y a la ca-
dad hidrolítica también generaron las mayores pacidad de secretar un diverso complejo
fracciones de acilglicéridos inespecíficos. La enzimático, que le permite mostrar gran
fracción de 1-monocaprilina es considerable- plasticidad ecológica. La secreción enzi-
mente más alta que la fracción de 2-monoca- mática puede estar influida por el tipo
prilina para biocatalizadores basados en so- de fermentación utilizado en el cultivo de
portes hidrófobos. Un comportamiento similar los microorganismos. La mayoría de las
fue observado para el caso de los diglicéridos, enzimas disponibles en el mercado son
LipC12 inmovilizada sobre soportes hidrófobos producidas por fermentación sumergida
generó niveles importantes de 1,3-dicaprilina, (SMF), sin embargo la fermentación en
mientras que inmovilizada sobre Immobead y cultivo sólido (SSF), ha generado gran in-
quitosano permitió la generación de 1,2-dica- terés para la secreción enzimática debido
prilina en proporciones cercanas al 90%. a varias ventajas de importancia econó-
mica y ecológica que ofrece en compa-
59
SESIÓN 2
ración con SMF: soporte sólido para mi- ferencias estadísticamente significativas
croorganismos, baja demanda de agua, entre ellos. En todos los casos, se obser-
utilización de fuentes de carbono de vó que los factores no presentaron di-
otro modo inutilizables, fácil aireación, ferencias significativas para los ensayos
alta productividad, alta concentración SMF. En cambio, en los ensayos SSF se
de producto final, represión catabólica observó que los factores eran extrema-
significativamente más baja o ausente y damente significativos (p<0,05) a un ni-
mejor estabilidad enzimática. Por lo tan- vel de 95,0% de confianza. A partir de
to, el presente trabajo tuvo como obje- una metodología de fermentación ade-
tivo general determinar la influencia del cuada y un diseño experimental eficaz,
tipo de fermentación (SMF o SSF) sobre se detectó que el aislamiento POS7 in-
la secreción enzimática de tres cepas del crementa la actividad enzimática en SSF
género Trichoderma. utilizando como fuente de carbono ba-
Se realizó un diseño experimental de gazo de caña de azúcar y como fuente de
dos factores a 3 y 4 niveles tanto para nitrógeno el medio Mandels, y los aisla-
SMF como SSF. Para cada aislamiento, mientos NAN13 y TEYU14 incrementan

cada ensayo se diseñó en función de la la actividad enzimática en SSF utilizan-
combinación de los niveles de cada fac- do como fuente de carbono cascarilla
tor. Para el factor fuente de carbono se de arroz y como fuente de nitrógeno el
consideraron tres niveles: bagazo de medio Mandels. Esta metodología per-
caña de azúcar, cascarilla de arroz y ase- mitió detectar un comportamiento me-
rrín de pino; y para el factor fuente de tabólico diferencial de acuerdo al tipo
nitrógeno se consideraron cuatro nive- de fermentación utilizado y de acuerdo
les: urea, extracto de levadura, sulfato al aislamiento con respecto a las fuentes
de amonio y Mandels. Todos los ensayos de carbono y nitrógeno.
se realizaron por duplicado.
Se preparó una suspensión de espo-
ras a una concentración de 10 7 espo-
ras/mL de los aislamientos Trichoderma
POS7, NAN13 y TEYU14. Se inocularon 5
mL de cada suspensión en frascos erlen- Palabras claves: Trichoderma spp., SSF, SMF, DI-
meyer de 250 mL conteniendo 50 mL de SEÑO EXPERIMENTAL, CONDICIONES DE CULTI-
los distintos tipos de SMF ensayados y VO.
en recipientes cerrados de 625 mL, con-
teniendo los distintos tipos de SSF ensa-
yados. Los cultivos se incubaron durante
5 días a 29 ± 1°C con luz continua, extra-
yéndose una alícuota cada 24 h para de-
terminación de la cinética de secreción
enzimática.
Para analizar los ensayos realizados,
se procedió a realizar un ANOVA a par-
tir de los días con mayor actividad en-
zimática media que no presentaron di-
60
SESIÓN 2
36FMB car la expresión diferencial de enzimas se-

cretadas en presencia de paredes celulares
Secretoma producido por del hongo fitopatógeno. Se pudieron iden-
Trichoderma sp.LBM193 tificar proteasas tipo serina (A0A2T3ZPY4;
en presencia del A0A2T3Z4G1), metaloproteasas (A0A2T3Z-
DP6; A0A2T3Z2D6; A0A2T3Z179), una pep-
fitopatógeno tidasa aspártica (A0A2T3ZI84) y una aspar-
Colletotrichum sp. til aminopeptidasa putativa (A0A2T3ZN62),
proteínas involucradas durante el proceso
LBM229 micoparasitario de Trichoderma sp., produ-
ciendo el debilitamiento e hidrólisis de las
GONZALEZ HOLC, Victoria G. a, b; CHELALICHE, paredes celulares del patógeno. Además,
Aníbal S. a, b; ZAPATA, Pedro D. a, b; ALVARENGA se identificaron enzimas endo-β-1,3-gluco-
Adriana E. a, b
sidasas (A0A2T3ZLZ4), β-manosidasa (A0A-
a) Universidad Nacional de Misiones. Facultad 2T3YSU1), α-1,2-manosidasa (A0A2T3ZIB4),
α-manosidasa (A0A2T3ZPW4), α-l-ramno-
tuto de Biotecnología Misiones. Laboratorio de
Biotecnología Molecular. sidasa (A0A2T3YZN9) relacionadas con la

degradación de las paredes de micelios de
b) CONICET Colletotrichum sp., específicamente. Asimis-
[email protected] mo, se obtuvo la presencia de una enzima
glucanasa (A0A2T3ZL91) y la presencia ex-
clusiva de quitinasas (A0A2T3ZF98, A0A2T-
Trichoderma es un género fúngico am- 3ZHH8, A0A2T3ZNX9, A0A2T3YVT0) que ac-
pliamente estudiado por su papel como túan en la digestión enzimática de la pared
biocontrolador. En suelos contaminados con celular del patógeno, y la presencia de lac-
fitopatógenos, especies de este género me- tamasas (A0A2T3ZAX6, A0A2T3ZNZ0) que
joran el desarrollo de las plantas e inhiben el estarían implicadas en la hidrólisis de com-
crecimiento de los patógenos a través de va- puestos xenobióticos, y el desarrollo de me-
rios mecanismos antagonistas. Los hongos canismos de resistencia a antibióticos, como
del género Colletotrichum causan antracno- la degradación enzimática de compuestos
sis y son reconocidos por afectar a cultivos que contienen β-lactámicos. Los resultados
de interés económico, como por ejemplo el de este trabajo sugieren que la utilización de
cultivo de yerba mate en el noreste argenti- Trichoderma sp. LBM193 en estrategias de
no. El objetivo del trabajo consistió en carac- biocontrol de Colletotrichum sp. es promiso-
terizar la expresión de proteínas secretadas ria en plantas de yerba mate.
por la cepa de Trichoderma sp.LBM193en
presencia de paredes celulares de Colleto-
trichum sp. LBM229. La cepa antagonista se Palabras claves: CONTROL BIOLÓGICO; ENZI-
MAS; MICOPARASITISMO.
desarrolló en medio mínimo Mandels, con y
sin paredes celulares del patógeno, durante
15 días. Posteriormente se procedió a ex-
traer, reducir, alquilar y precipitar las proteí-
nas. La identificación del extracto de proteí-
nas se realizó a través de espectrometría de
masas. El análisis del perfil secretómico de
Trichoderma sp. LBM193 permitió identifi-
61
SESIÓN 2
37FMB La cepa de A. niger AKU 3302 fue culti-

vada en frascos Erlenmeyers conteniendo
Crecimiento de hongos con medio Czapek líquido a 30°C, durante 48
actividad clorogenato h, con agitación. El contenido total de cada
hidrolasa sobre sustratos Erlenmeyer, compuesto por pellets y medio
de cultivo semi-agotado, fue utilizado para
sólidosde yerba mate inocular bandejas de madera (29x44x5 cm)
conteniendo residuos de yerba mate estéril.
BUTIUK, Ana P.a; MAIDANA, Silvana A.a; Las bandejas fueron incubadas a 25°C hasta
ADACHI O.b; MARTOS, María A.a
que el micelio fúngico se desarrolló. El koji
de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales (FCE- de yerba mate obtenido fue almacenado
QyN). Laboratorio de Microbiología de Alimen- bajo refrigeración hasta su utilización como
tos y Biotecnología “Dr. Fernando O. Benassi”. fuente de enzima CHasa. La actividad CHa-
Posadas, Argentina. sa asociada al koji fue evaluada de manera
b) Departamento de Química Biológica, Facultad semi-cuantitativa mediante TLC. La reacción
de Agricultura, Universidad de Yamaguchi, Ya- enzima-sustrato se realizó mezclando canti-

maguchi 753-8515, Japón. dades crecientes de koji (5 a 25 mg) con una
solución de ACG en buffer (pH 6,5) y se in-
[email protected]
cubó a 30 °C, 10-15 min, con agitación. Los
productos de la hidrólisis del ACG se evalua-
El proceso de fermentación sobre sustra- ron por TLC, utilizando como solvente de co-
tos sólidos (FSS) ha sido muy utilizado para rrida n-butanol: ácido acético: agua (4:2:1 v/
la obtención de enzimas microbianas y otras v/v). La desaparición del ACG y la aparición
sustancias de interés industrial. La FSS además de AC fueron examinadas bajo luz UV. El ACG
de ser de bajo costo y simplicidad, permite y el AC presentan valores de Rf de 0,88-0,89
el aprovechamiento de subproductos de la y 0,72-0,74, respectivamente, bajo las con-
agro-industria. diciones de ensayo.
La clorogenato hidrolasa (CHasa, EC Se observó el crecimiento del micelio fún-

3.1.1.42) cataliza la hidrólisis de ácido cloro- gico sobre el soporte sólido a partir de los 2
génico (ACG) liberando ácidos quínico (AQ) y días de incubación. El crecimiento del hongo
cafeico (AC), químicos finos que no se produ- se mejoró mediante el mezclado del cultivo
cen en nuestro país. CHasa es producida por 2 veces al día, a fin de mejorar la aireación
diferentes especies del género Aspergillus, en y mantener una temperatura uniforme. El
forma intracelular, cuando son cultivados en cultivo se mantuvo humedecido mediante
medios suplementados con materiales vege- el agregado de agua cuando fuera necesa-
tales ricos en ACG. La yerba mate contiene al- rio. La FSS se dio por finalizada cuando se
tos niveles de ACG y puede ser utilizada como observó una buena germinación del hongo
sustrato e inductor de la actividad CHasa. y el color del koji de yerba mate cambió de
marrón claro a marrón oscuro (⁓7 días). El
El objetivo del presente trabajo fue pro- análisis por TLC demostró que el koji de yer-
ducir un material sólido con actividad CHasa ba mate tenía actividad CHasa. Al incremen-
(koji de yerba mate), mediante el crecimien- tar la cantidad de koji en la mezcla de reac-
to de cepas de Aspergillus sobre residuos de ción, se observaron claramente sobre el TLC
yerba mate y posteriormente, evaluar la ac- manchas de ACG con intensidad decreciente
tividad enzimática del biocatalizador. y manchas de AC con intensidad creciente.
62
SESIÓN 2
Se preparó un koji de yerba mate median- den causar daño, y el sistema de eliminación
te el crecimiento de cepas de Aspergillus so- del cuerpo humano no siempre es eficaz
bre residuos de yerba mate y se confirmó su contra ello. Elevados niveles provocan efec-
efectividad como biocatalizador con activi- tos tóxicos como peroxidación de lípidos,
dad CHasa. daños en los ácidos nucleicos, inactivación
de enzimas, degradación de proteínas, en-
tre otros. Existen reportes que demuestran
Palabras claves: CLOROGENATO HIDROLASA; que el consumo externo de antioxidantes,
ASPERGILLUS NIGER; FERMENTACIÓN ENSUS-
TRATO SOLIDO; YERBA MAYE. ya sea a través de alimentos o fortificación
de los mismos, no satisface esta demanda,
por lo que se promueve la búsqueda de mi-
croorganismos con función antioxidante.
Los probióticos son microorganismos que
consumidos vivos y en concentraciones ade-
38FMB cuadas aportan beneficios en la salud del
Evaluación de la actividad consumidor. Nuestro grupo de trabajo ha
seleccionado 15 levaduras nativas aisladas

antioxidante en levaduras de ambientes vitivinícolas. Las mismas son
con aptitudes probióticas bioseguras, tolerantes a las condiciones del
tracto gastrointestinal y con propiedades de
adhesión a las mucosas intestinales. El obje-
LEIVA ALANIZ María J.a,b; VERGARA Silvia C.a,b;
PETRIGNANI Diego B.a.; MESTRE María V.a,b,c; tivo del presente trabajo es determinar si las
VAZQUEZ Fabio a,c; MANCHA AGRESTI Pamela.d; levaduras nativas seleccionadas presentan
MATURANO Yolanda P.a,b,c actividad antioxidante. Metodología: se tra-
a) Instituto de Biotecnología, Facultad de Inge- bajó con 15 levaduras de los géneros: Candi-
niería, Universidad Nacional de San Juan. da (Pb3, Pb7), Hanseniaspora (Pb15, Pb18),
b) CONICET Pichia (Pb48, Pb50, Pb51, Pb52, Pb53, Pb54,
Pb56, Pb57, Pb58), Torulaspora (Pb91) y
c) Departamento de Ingeniería Agronómica, Fa- Wickeranomyces (Pb97), Control: levadura
cultad de Ingeniería, Universidad Nacional de comercial Saccharomycesboullardii CNCM
San Juan.
I-745. Se activaron en medio YEPD a 100rpm
d) Faminas-BH, Facultad de Medicina, Belo Hori- y 28°C. Actividad Catalasa: el peróxido de
zonte, Minas Gerais, Brasil. hidrógeno al 3% se añadió directamente a
[email protected] las colonias de levadura inoculadas 48 ho-
ras antes, la actividad de la catalasa se evi-
denció por la formación de burbujas. Ensayo
Durante el metabolismo aeróbico de las DPPH: 1x108cel/ml de cultivo de levadura
células de organismos superiores se forman en caldo YPD fue cosechado por centrifuga-
especies reactivas con presencia de un radi- ción, lavado dos veces con una solución fi-
cal libre. Estos compuestos cumplen un pa- siológica y el sedimento se resuspendió en
pel esencial en el sistema inmunitario, como 1ml de la misma solución, la suspensión ce-
matar algunos organismos infecciosos, con- lular se transfirió a un nuevo tubo, con 1ml
tener el sistema inmunitario para que no se de DPPH, la mezcla homogenizada se incubó
active en exceso, particularmente el oxígeno 30min a temperatura ambiente en la oscuri-
actúa en el musculo durante la actividad físi- dad, los tubos de reacción se centrifugaron
ca. El exceso de estas especies reactivas pue- y se determinó espectrofotométricamen-
63
SESIÓN 2
te a 520nm. Resultados: todas las levadu- b) Consejo Nacional de Investigaciones Científi-

ras registraron actividad positiva catalasa, cas y Técnicas (CONICET)
destacándose Pb3, Pb7, Pb 48, Pb52, Pb56 [email protected]
y Pb97, por reaccionar en menor tiempo.
Las 15 levaduras mostraron actividad DPPH,
destacándose 7 de ellas, con resultados ma- En Argentina la actividad cervecera ar-
yor al 60%: PB7, PB50, PB51, PB52, PB56, tesanal ha presentado un rápido proceso
PB57, PB58. Algunos autores reportaron de expansión, con un incremento de 20
que la actividad antioxidante de las levadu- a 30 % anual en los últimos 5 años. Según
ras puede estar relacionada con componen- los últimos reportes, la producción estima-
tes de la pared celular ((1→3)-β-D-glucano da durante el año 2018 fue de 300000 hL.
y otros β-glucanos), como así también a la Este hecho genera un aporte significativo a
presencia de algunas enzimas antioxidantes la economía del país, mediante el flujo co-
(superóxido dismutasa, glutatión peroxidasa mercial de insumos y generación de empleo
y catalasa). Por lo tanto, se concluye que las directo e indirecto. De igual modo, en la pro-
levaduras Pb7, Pb52, Pb56 y Pb57 son las vincia de San Juan la elaboración y consumo

principales captadoras de especies reactivas de cerveza artesanal (CA), presentó un cre-
en el presente estudio. Estos resultados sir- cimiento acelerado y sostenido. La produc-
ven de base para próximos estudios in vivo: ción varió de 100 litros/mes en el año 2010
Determinación de la actividad de las enzi- a 38000 litros/mes durante el año 2018, lo
mas Mieloperoxidasa, Peroxidasa Eosinofíli- cual generó un significativo impacto socioe-
ca y Medida de la actividad de N-acetilglico- conómico local. En conjunto con el creci-
saminidasa en ratones. miento del sector, la demanda por parte de
los consumidores ha evolucionado hacia la
búsqueda de productos con mayor comple-
Palabras claves: LEVADURAS; PROBIÓTICOS, AC-
TIVIDAD ANTIOXIDANTE; CATALASA; DPPH. jidad organoléptica. Estos hechos incentivan
a los elaboradores a establecer alternativas
para diferenciar sus productos y posicionar-
se en un mercado cada vez más competitivo
y dinámico. Para incrementar la complejidad
organoléptica, agregar valor y diferenciar los
39FMB productos elaborados, una estrategia atrac-
Diferenciación productiva tiva, escasamente explotada, es el empleo
de levaduras nativas no convencionales (no
del sector cervecero -Saccharomyces NS). En el presente trabajo
artesanal mediante se evaluaron 82 aislamientos de levaduras
NS pertenecientes a 9 géneros diferentes
bioprospección de levaduras (Hanseniaspora, Starmerella, Candida, Pi-
no-convencionales chia, Metschnikowia, Torulaspora, Debar-
yomyces, Issatchenkia, Zygosaccharomy-
MESTRE Victoriaa,b; MATURANO Paolaa,b; VAR- ces). Los aislamientos fueron obtenidos de
GAS Mercedesa; PETRIGNANI Diegoa; VERGARA ambientes enológicos de la región de Cuyo.
Cristinaa,b; LEIVA María Joséa,b; VAZQUEZ Fabioa Para determinar el potencial uso en mosto
a) Instituto de Biotecnología, Facultad de Inge- de cerveza artesanal como agentes fermen-
niería, Universidad Nacional de San Juan tativos se evaluó: capacidad de metabolizar
aerobia y anaerobiamente azúcares propios
64
SESIÓN 2
del mosto de cerveza (sacarosa, maltosa, 40FMB

fructosa, glucosa), tolerancia a distintos
factores de estrés presentes en el proce-
Producción de
so (alta concentración de alcohol (7% v/v), lipasas de Penicillium
lúpulo (35 IBU) y densidad inicial (1096)) y rubens LBM081
capacidad de producción de compuestos
como etil fenoles y sulfuro de hidrogeno, ORTELLADO, L. E. a,b, Villalba, LL.a,b, ZAPATA, P.
que puedan perjudicar organolépticamente D. a,b, FONSECA,M. I.a,b
el producto elaborado. De los 82 aislamien- a)Universidad Nacional de Misiones. Facultad de
tos evaluados, 6 (4 M. pulcherrima (BMp4, Ciencias Exactas Químicas y Naturales. Instituto
BMp5 y BMp18), 1 T. delbrueckii (BTb 3) y de Biotecnología Misiones “Dra. María EbeReca”
1 Starm. Bacillaris (BSb4)) presentaron ca- (INBIOMIS). Laboratorio de Biotecnología Mole-
racterísticas positivas para ser evaluadas en cular (BIOTECMOL). Misiones, Argentina.
condiciones fermentativas a escala labora- b) CONICET.Buenos Aires, Argentina.
torio. Se condujeron fermentaciones en 150
[email protected]
ml de mostos en condiciones asépticas con
cultivos iniciadores puros en una concen-

tración de 1*107 cel/mL. Se empleó como
El empleo de enzimas en diversos secto-
control la levadura comercial S. cerevisiae
res industriales está en auge, debido a que
US04 (Fermentis). Los resultados obtenidos
su capacidad catalítica ha sido superior a
indicaron que 4 aislamientos (BMp4, BMp5,
la de numerosos catalizadores químicos o
Tb3 y Sb4) presentaron buena performance
la necesidad cada vez mayor de emplear
fermentativa respecto a densidad final, pH y
métodos que sean menos perjudiciales al
velocidad fermentativa, comparados con el
ambiente. Estas enzimas se han obtenido
control. Se puede concluir sobre la base de
de distintas fuentes: plantas, animales y mi-
los resultados obtenidos que los aislamien-
croorganismos. Siendo estos últimos los de
tos de levaduras no convencionales (no- Sa-
mayor importancia. Las lipasas son una de
ccharomyces) presentan potencial para ser
las tantas enzimas que son muy demandas
empleados en fermentaciones de mosto de
por diferentes industrias, lo que ha llevado
cerveza y de esta manera lograr obtener una
a buscar nuevas fuentes de esta que puedan
diferenciación del producto elaborado.
cubrir dicha demanda. Teniendo en cuenta
este contexto actual, el objetivo del presen-
Palabras claves: LEVADURAS NATIVAS; BIOPROS- te trabajo fue producir lipasas utilizando
PECCIÓN; CERVEZA ARTESANAL Penicillium rubens LBM 081 un aislamiento
proveniente de la selva Paranaense.
En primera instancia se partió de un me-
dio de cultivo líquido compuesto por pepto-
na 2 %, aceite de oliva 4 %, suplementado
con una suspensión de esporas 1x 106, culti-
vado a una temperatura de 30°C y agitación
constante a 140 rpm, en dos volúmenes di-
ferentes de 100, 300 mL por duplicado.
La actividad enzimática de las lipasas pre-
sente se cuantifico con el método de p-ni-
65
SESIÓN 2
trofenol palmitato a 405 nm en los días 6, 41FMB

10 y 16.Todos los resultados se analizaron
con Statgraphics plus de Windows 5.1, Pris-
Estudio de FES de residuos
ma 5.0. (ANOVA simple). También se analizó agroindustriales para su
el perfil enzimático de ambos ensayos en utilización en alimentos
un gel de poliacrilamida con duodecilsulfa-
to sódico SDS-PAGE al 12% (p/v); la corrida animales
electroforética se realizó durante 2 h, adicio-
nando 1 g/L de SDS al buffer de corrida. Des- GIL, Rocio M.a, b, RODRÍGUEZ, Laura A.a;
PAROLDI, Emilio H.a, KUCHEN, Benjamína, b
pués de concluida la corrida electroforética,
se eliminó el SDS de los geles sumergiéndo- a) Instituto de Biotecnología. Facultad de Inge-
niería. Universidad Nacional de San Juan.
los en Triton X-100 al 2,5% a temperatura
ambiente por 30 min. Los geles se lavaron b) CONICET
brevemente en buffer fosfato 50 mM, pH 7,0 [email protected]
y se cubrieron con una solución de butirato
de 4-metilumbeliferilo (MUF) 100 µM

Se compararon los ensayos realizados En la provincia de San Juan, la actividad
y se observó que en 100 mL producía una agroindustrial genera grandes cantidades
actividad enzimática de 2782 U/mL a los 6 de residuos o subproductos como: Orujo
días de incubación. De la misma forma se de Uva (OU), Escobajo de Uva (EU), Orujo
evaluó la actividad enzimática lipasa del de Tomate (OT) y Alperujo de Aceituna (AL),
ensayo realizado a 300 mL en este caso se siendo este último el mayoritario. En cuanto
observó que la actividad enzimática decayó a su composición se destacan la presencia
un 40% (1670 U/mL) a los 6 días mientras de celulosa, hemicelulosa, lignina, minerales
que al día 10 se observó que se incrementó y azúcares, además de agua. El AL además
la actividad llegando a 2086 U/mL quedan- presenta alta concentración de compuestos
do estable en días posteriores hasta el día fenólicos y extracto etéreo (EE). Por otro
16 que se concluyó el ensayo. El análisis del lado, debido a la expansión de la frontera
zimograma reveló la presencia de una enzi- agrícola, San Juan se corresponde como una
ma lipasa en todos los ensayos con un peso de las nuevas áreas geográficas para la pro-
aproximado de 42 Kda. ducción animal, cuyos requerimientos nu-
tricionales podrían ser suplementados, de
Mediante el empleo de volúmenes dife- manera parcial, con la utilización de estos
rentes se evidencio una buena capacidad subproductos. Para mejorar las condiciones
en el mantenimiento de la producción de la fisicoquímicas y nutricionales un pre-trata-
enzima lipasa en el hongo Penicillium rubens miento y reformulación (a partir de mezclas
LBM 081. de los mismos) son requeridos. La Fermen-
tación en Estado Sólido (FES) del AL con hon-
gos filamentosos ha mostrado disminuir el
CF del AL, y la mezcla de subproductos con
Palabras claves: LIPASA, ACTIVIDAD ENZIMÁTI- aquellos con contenido reducido de EE po-
CA, PENICILLIUM RUBENS LBM 081. dría mejorar la actividad ruminal. Más aún,
se mejoraría el contenido proteico y nutri-
cional del alimento debido a la incorpora-
ción de los microorganismos provenientes
de la FES. El objetivo del presente trabajo es
66
SESIÓN 2
aplicar una FES a mezclas de subproductos 42FMB

agroindustriales para aumentar el valor nu-
tricional de los mismos y a futuro utilizarlos
Propuesta de modificación
como alimento para animales. Para el desa- de la ecuación de
rrollo experimental, se estudiaron en OU, OT Luedeking y Piret para
y AL, los volúmenes generados, la estaciona-
lidad y valores nutricionales como Proteína bioproducción fúngica
Bruta (PB), Fibra Bruta (FB), Lípidos (L) y Va- de Ácido Láctico
lor Energético (VE). Se hicieron FES en batch
de 5 Kg con 3 mezclas FES1: AL (50%) + OU GROFF, María C.a, b, SCAGLIA, Gustavo b, c, ORTIZ,
(50%), FES2: AL (60%) + EU (40%) y FES3: ALP Oscar A b, NORIEGA, Sandra E.
(60%) + OT (40%). Se cultivó por 25 días a a) Instituto de Investigaciones en Ciencias Quí-
25 °C, 50% de humedad y pH 5. Se utilizó un micas. Facultad de Ciencias Químicas y Tecnoló-
inóculo microbiano “J2” (5% p/p) desarrolla- gicas, Universidad Católica de Cuyo, San Juan,
do previamente. Se monitoreo temperatura, Argentina.
humedad y pérdida de peso. Al finalizar, se b) Consejo Nacional de Investigaciones Científi-
determinó el valor nutritivo resultante. La cas y Técnicas (CONICET).

FES3 obtuvo significativamente menor fibra
c) Instituto de Ingeniería Química, Universidad
bruta (14,49%), relevante para monogástri-
Nacional de San Juan, San Juan, Argentina.
cos. Por otro lado, la FES1 obtuvo significa-
tivamente menor cantidad de lípidos totales mcgroffccuyo.edu.ar
(1,81%), lo que la convierte en la más apta
para los rumiantes. La FES2 resulta significa-
El ácido Láctico (AL) es un bioproducto
tivamente más alta en VE (127.21 Kcal/100g),
con aplicaciones en la industria farmacéu-
posiblemente debido a la mayor concentra-
tica, cosmética, química y alimentaria, y se
ción de lípidos totales de la misma (4,14%).
usa como monómero en la producción de
Con relación a Proteínas los tratamientos no
ácido poliláctico (polímero biodegradable).
tuvieron diferencias significativas, situación
El AL tiene una alta demanda mundial (1.220
que se podría resolver con el agregado de
kilotoneladas en 2016), y en Argentina se im-
levaduras provenientes de la fermentación
porta totalmente ya que no hay producción
enológica y/o cervecera, incorporando al
local. El uso de hongos en sistemas fermen-
estudio un nuevo subproducto de diferente
tativos líquidos o sólidos, presenta varias
industria. A futuro se realizará una optimiza-
ventajas (no son estrictos a nivel nutricio-
ción de las mezclas FES para mejorar los va-
nal, son capaces de producir el enantióme-
lores nutricionales obtenidos, y en función
ro puro Levógiro-(+)-AL y poseen enzimas
del tipo de animal que se quiera producir.
hidrolíticas capaces de degradar estructuras
lignocelulósicas). El escalado de los procesos
fermentativos es complejo, por existir una
variabilidad de los parámetros al aumentar
Palabras claves: FES, NUTRICIÓN, ALIMENTO. de escala, por lo que el modelado matemáti-
co sirve para conseguir un escalado adecua-
do del bioproceso. Los submodelos que des-
criben las ecuaciones cinéticas involucradas
en el crecimiento de la biomasa microbiana
y la producción de AL son los primeros y más
67
SESIÓN 2
importantes a desarrollar. Los modelos más evidencia un fenómeno no tenido en cuenta

utilizados son, en la cinética de crecimiento hasta ahora en la etapa de fermentación.
microbiano el Modelo Logístico (L); y en la
producción de AL el Modelo de Luedeking y
Piret (LP). También se puede aplicar el Mo- Palabras claves: ÁCIDO LÁCTICO; MODELADO
MATEMÁTICO; FERMENTACIÓN.
delo de Primer Orden con Retardo (POCR),
ampliamente utilizado en el campo del con-
trol de procesos debido a su simplicidad y
reproducibilidad. Este modelo presenta dos
parámetros importantes y sencillos de cal-
cular, el Tp [h] que proporciona información 43FMB
sobre la velocidad de crecimiento, y el T0 [h]
que permite conocer la duración aproxima- Producción de xilanasas
da de la fase de latencia. En este trabajo se extracelulares de
analizan y comparan las cinéticas del creci-
miento microbiano y la producción de AL de
Paenibacillusxylanivorans

nuestro trabajo experimental (producción
TOPALIAN, Juliana a; GARRIDO, Mercedes a;
de AL a partir de escobajo de uva (EU) usan- LEGISA, Danilo b; CAMPOS, Eleonora a; BLASCO,
do R. oryzae en un sistema de crecimiento Martín b
sobre membrana a 30ºC, 50%HR por 5 días); a) Instituto de Agrobiotecnología y Biología Mo-
y el trabajo de Jin et al. (2005) (producción lecular (IABIMO), INTA-CONICET, Buenos Aires,
de AL a partir de residuos agroindustriales Argentina.
en fermentación líquida con agitación utili- b) Departamento de Bioprocesos, INTI, Buenos
zando R. oryzae, a 30ºC por 5 días). Al apli- Aires, Argentina.
car el modelo POCR, en el trabajo de Jin et [email protected]
al (2005), se observó un tiempo de retardo [email protected]
(TR) entre la curva de cinética microbiana y
la curva de producción de AL, lo que moti-
La bioconversión de lignocelulosa en
vó a agregar un término que involucra el TR
oligosacáridos prebióticos y azúcares fer-
en la ecuación de LP, mejorando conside-
mentables es un proceso de gran impor-
rablemente el ajuste de las curvas. En nues-
tancia para la valorización de la biomasa
tro experimento, TR = 0, lo que sugiere una
vegetal residual. Para ello, es necesaria la
influencia positiva del EU que permite una
producción de extractos enzimáticos efi-
producción de AL casi en simultáneo con la
cientes en la deconstrucción de los poli-
generación de biomasa fúngica. Obtuvimos
sacáridos estructurales que componen la
los parámetros cinéticos de crecimiento
pared celular vegetal, celulosa y hemice-
microbiano. El ajuste del Modelo POCR es
lulosa. La celulosa es un polímero lineal
comparable e incluso superior al Modelo L.
de moléculas de glucosa mientras que la
Para la producción de LA, el parámetro TR
hemicelulosa es un heteropolímero ra-
añadido al Modelo LP consiguió una mejora
mificado de composición variable, cuya
significativa de los R2. El crecimiento fúngico
cadena principal está compuesta por xila-
y la producción de AL presentaron el mismo
no. La bacteria Gram positiva Paenibaci-
valor de Tp, pero difieren en el T0. El TR no ha
llusxylanivorans secreta enzimas xilanasas
sido definido en otros trabajos, lo cual es un
en condiciones apropiadas de cultivo. El
aporte novedoso y supone un avance en la
objetivo de este trabajo fue la optimiza-
modelización matemática del proceso, que
68
SESIÓN 2
ción de la actividad xilanasa extracelular 44FMB

de P.xylanivorans por cultivo en salvado
de trigo (WB), un sustrato de bajo costo.
Selección de levaduras
En base a los antecedentes, se ensayaron nativas: valoración
diferentes condiciones de cultivo, logran- microbiológica de zona
do la mayor actividad xilanasa por cultivo
de 48 a 72 hs, en frasco agitado con de- vitivinícola de San Juan
flectores, a 28°C, con 1% de sustrato en un
medio salino. Se determinó la estabilidad PETRIGNANI, Diego B.a; VERGARA, Silvia C.a,b;
del extracto enzimático a distintas tempe- LEIVA ALANIZ, María J.a,b; VAZQUEZ, Fabioa,c;
MESTRE FURLANI, María V.a,b,c ; MATURANO,
raturas. El extracto mantuvo más del 85 % Yolanda P.a,b,c
de actividad hasta 4 semanas tanto a 4°C
a) Instituto De Biotecnología- Facultad de Inge-
como a -20°C y -80°C. A su vez, fue posible
niería- Universidad Nacional de San Juan
concentrar la actividad enzimáticas hasta
10X, por liofilización del sobrenadante de b) Consejo Nacional Investigación Científicas y
cultivo, sin aditivos. Finalmente, se reali- técnicas – CONICET
zó el escalado del cultivo en un reactor de c) Departamento de Ingeniería agronómica-

tipo tanque agitado de escala laboratorio Facultad de Ingeniería- Universidad Nacional de
(2 L). Durante el cultivo se determinó el San Juan
consumo volumétrico de oxígeno del culti- [email protected]
vo como indicador de la actividad metabó-
lica de las bacterias y la actividad xilanasa.
Los resultados obtenidos demuestran la San Juan es la segunda provincia produc-
factibilidad de obtener extractos enzimá- tora de vinos en Argentina, donde la comer-
ticos de P. xylanivorans utilizando fuentes cialización y consumo demanda más calidad
de carbono económicas como sustrato y y tipicidad de los mismos. Una alternativa es
abren la posibilidad de su aplicación en tener levaduras nativas seleccionadas del vi-
bioprocesos para la degradación del xilano ñedo para aumentar el potencial de los mos-
presente en biomasa lignocelulósica. tos y dar originalidad a los vinos. Pozos de los
Algarrobos es una región vitivinícola reco-
nocida, de características particulares para
el cultivo de la vid. Luego de estudios pre-
Palabras claves: XILANSAS; PAENIBACILLUS; BIO- sentados de suelo, clima, flora, fauna y ante-
REACTOR; LIGNOCELULOSA. cedentes históricos de la localidad, el I.N.V.
aprobó mediante la Resolución C 30/15 la
Indicación Geográfica (I.G.) de la región. Hoy
están instaladas bodegas con tecnologías de
última generación y con viñedos propios;
apuntando a tener su propio pull microbiano
para realzar las características excepcionales
de la zona. El objetivo del presente trabajo
fue seleccionar levaduras nativas Saccha-
romyces cerevisiae de Pozo de los Algarro-
bos- Caucete - San Juan con aptitudes para
llevar a cabo la fermentación de variedades
69
SESIÓN 2
blancas de interés enológico. Las levaduras bodegas de la Región) con los aislamientos
fueron aisladas de fermentaciones espontá- del presente trabajo para corroborar que
neas de mostos de uvas cosechadas alea- las mismas sean levaduras propias de la
toriamente de los viñedos de Vitis vinifera zona vitivinícola.
var. Viognier y Chardonnay. Se tomaron
muestras al comienzo, mitad y final de la
fermentación alcohólica y se sembraron
Palabras claves: SACCHAROMYCES CEREVISIAE
en placas de petri con medio diferencial NATIVAS, FERMENTACIÓN, VINO, DIFERENCIA-
WLN. Este medio permitió seleccionar por CIÓN PRODUCTIVA.
su morfología específica a las unidades
formadoras de colonias (UFC) correspon-
dientes a la especie Saccharomyces cere-
visiae. Las levaduras seleccionadas fueron
sometidas a las siguientes caracterizacio-
45FMB
nes: resistencia a etanol (14% v/v), a las
dosis de SO2 agregadas al inicio del pro- Producción in vitro y

ceso (200ppm), capacidad de comenzar a
fermentar en mostos con altos niveles de
caracterización de
azúcares (28°Brix), producción de SH2. La pigmentos producidos por
identificación molecular intraespecífica se Neocosmospora lichenicola
realizó mediante la metodología de PCR
interdelta con el fin de diferenciar poli-
MELNICHUK, Natashaab; MEINI, María R.ac;
morfismos y aleatoriedad en la distribu- CASTELLI María V.d; LOPEZ Silvia N.d; ROMANI-
ción de las cepas seleccionadas. Se realizó NI, Dianaab
la extracción mecánica del ADN total de a)Instituto de Procesos Biotecnológicos y Quími-
las levaduras utilizando la metodología de cos, IPROBYQ-CONICET, Suipacha 570, Rosario,
Hoffman y Winston (1987) modificada y se 2000. Argentina
amplificaron las secuencias Delta con los b) Área Procesos Biotecnológicos, Facultad de
cebadores δ12 y δ21 mediante el proto- Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, UNR, Sui-
colo de Legras y Karst (2003) Resultados: pacha 531, Rosario, 2000. Argentina.
se aislaron 37 levaduras provenientes de c) Área Biofísica, Facultad de Ciencias Bioquími-
la vinificación de Viognier y 30 de la vinicas y Farmacéuticas, UNR, Suipacha 531, Rosa-
ficación de Chardonnay. Se seleccionaron rio, 2000. Argentina
30 aislamientos provenientes del varietal
d) Área Farmacognosia, Facultad de Ciencias Bio-
Viognier y 20 del Chardonnay capaces de químicas y Farmacéuticas, Universidad Nacional
comenzar a fermentar a altas concentra- de Rosario; CONICET, Suipacha 531, S2002LRK,
ciones de azúcares, SO2, etanol y, además, Rosario, Argentina
presentaron baja producción de SH2. La [email protected]
identificación molecular a nivel de cepa
indicó que estuvieron presentes 17 cepas
diferentes en las vinificaciones de Viognier Los pigmentos son moléculas de origen
y 14 cepas en Chardonnay. En la próxima natural o sintético altamente demandadas
etapa se compararán los patrones mole- por industrias de alimentos, medicamentos,
culares de diferentes cepas comerciales textiles, cosméticas, entre otras (1). Dentro
(2 comúnmente empleadas por los bode- de los pigmentos naturales, se encuentran
gueros de la zona y 10 empleadas en otras
70
SESIÓN 2
los inorgánicos y los orgánicos, estos últi- Se obtuvieron extractos en acetato de

mos derivan principalmente de vegetales y etilo a partir del sobrenadante de cultivos
animales. Los pigmentos de origen animal incubados durante 2 días utilizando el medio
como el carmín (obtenido de la cochinilla), seleccionado, los cuales fueron analizados
presentan baja aceptación por parte de cier- mediante diferentes técnicas (TLC, HPLC-
tos sectores de consumidores (2). Por otra DAD, HPLC-MS, RMN1H mono y bidimensio-
parte, los pigmentos vegetales presentan nal). Los resultados obtenidos indican que
desventajas como la dependencia estacio- se trata de una mezcla de pigmentos, algu-
nal de la producción, costos elevados y va- nos de ellos compatibles con los que pro-
riaciones en la intensidad del color (3). En ducen hongos del género Monascus, como
la búsqueda de nuevos pigmentos, los de los compuestos 7-(2-hydroxyethyl)-monas-
origen microbiano, específicamente los de corubramine, mitorrubrina y ankaflavina.
origen fúngico, han surgido como una alter- Sin embargo, se observaron al menos 3 pi-
nativa (3). Entre los pigmentos producidos cos mayoritarios con tiempos de retención
por hongos filamentosos encontramos una 7; 9,3 y 11 minutos y máximos de absorción
gran variedad de estructuras químicas, tales de 305,61 y 497; 491,82 y 540,68 respecti-
como melaninas, carotenoides, flavinas, fe- vamente, (HPLC-DAD: columna C-18 100 x
nazinas, quinonas, etc. 2.1 mm, 3 um tamaño de partícula; gradien-
A partir de un estudio de bioprospección te H2O/ 0,1% ácido acético y ACN, 0.35mL/
para obtener cepas de hongos filamentosos min, en gradiente), tanto en el filtrado del
productoras de metabolitos de interés in- cultivo como en el extracto en acetato de
dustrial, se realizó el aislamiento de hongos etilo, cuya caracterización química se está
desde muestras de semillas de algodón y realizando.
de barbecho de soja en descomposición en El mercado de pigmentos requiere de la
campos aledaños a la localidad de Alcorta, búsqueda de nuevas especies fúngicas pro-
Santa Fe (Resol. Pcial 232/19). Se aisló una ductoras y N. lichenicola se presenta como
cepa productora de un pigmento rojo en me- una fuente promisoria de moléculas pig-
dio agar papa dextrosa que fue identificada mentadas útiles en la industria. Actualmen-
como Neocosmospora lichenicola mediante te se realiza el escalado del cultivo con el
amplificación utilizando los primers ITS: objetivo de aumentar la masa de extracto y
V9G y LS266; EF: EF1 y EF2; RPB2: RPB2- así caracterizar los pigmentos producidos de
5F2 y RPB2-7CR, seguido de secuenciación manera inequívoca.
y comparación de las secuencias en bases
de datos, en el Westerdijk Fungal Biodiver-
sity Institute, Holanda. El objetivo de este
trabajo fue producir y caracterizar el ex-
tracto pigmentado rojo desde cultivos de
N. lichenicola. Se evaluaron distintos me-
dios de cultivo siguiendo la absorbancia a
470 y 500 nm del sobrenadante del culti-
vo. El medio líquido seleccionado contiene
glucosa (20g/L) como fuente de carbono,
sulfato de amonio (2g/L) como fuente de
nitrógeno, 0,01g/l FeSO4; 0,5g/L Mg-
SO₄·7H₂O y 1g/L KH2PO4.
71
SESIÓN 2
46FMB ción backward (p<0,05) y validados estadís-

ticamente por la prueba de ANOVA y LACK-
Permeado de suero como OF-FIT. Mediante el método de superficie de
medio de cultivo para la respuesta y la función deseabilidad se de-
producción de fermentos terminaron los niveles de los factores para
lograr la mayor biomasa posible al menor
costo. Para la validación del medio optimiza-
BATISTELA, Mara E.a; PERALTA, Guillermo H. a,b;
HYNES Erica R. a; BERGAMINI Carina V.a do se incluyeron otras 10 cepas de lactoba-
cilos de interés tecnológico además de L73.
a) Instituto de Lactología Industrial (CONICET),
Finalmente, también se evaluó el efecto de
Facultad de Ingeniería Química (FIQ-UNL), Santa
Fe, Argentina. la temperatura de incubación (30 ºC, 34 ºC
y 37 ºC) y el pH inicial del medio (6,5, 7,0 y
b) Facultad de Ciencias Agrarias (FCA-UNL), Es- 7,5) en la producción de biomasa de L73.
peranza, Argentina
El modelo seleccionado para cada res-
[email protected]
puesta de biomasa reveló un ajuste sig-
nificativo (p<0,05) y parámetros de falta

El uso de residuos y subproductos de la de ajuste no significativos. Las gráficas de
industria de alimentos como fuentes de nu- superficies de respuestas mostraron que
trientes para la producción de fermentos ha los niveles máximos de recuentos micro-
recibido una gran atención en los últimos biológicos y DO se lograron con los niveles
años debido a su gran disponibilidad, bajo más elevados de permeado de suero y ex-
costo y alto valor nutricional. El objetivo del tracto de levadura, mientras que el aporte
presente trabajo fue optimizar la producción de MnSO4 y MgSO4 no fue significativo. La
de biomasa de Lacticaseibacillus rhamnosus función deseabilidad permitió determinar
73 (L73) en un medio de cultivo a base de la concentración necesaria de permeado
permeado de suero, y evaluar su uso para de suero (12,876 g/100 mL) y extracto de
la producción de biomasa de otras diez ce- levadura (0,3529 g/100 mL) para lograr la
pas de lactobacilos mesófilos de interés in- máxima producción de biomasa de L73.
dustrial. Para la optimización se aplicó un Durante la validación se obtuvieron re-
diseño central compuesto, constituido por cuentos microbiológicos elevados para
21 puntos experimentales, 5 de los cuales L73 (log ufc/mL=9,37±0,07), confirmando
eran repeticiones del punto central. En el di- así la respuesta teórica; estos niveles fue-
seño se evaluaron cuatro factores: permea- ron similares a los obtenidos en el medio
do de suero, extracto de levadura, MnSO4 y comercial MRS. Altos niveles (entre 8,63
MgSO4. La cepa L73 fue inoculada en cada -9,19 log ufc/mL) también fueron obteni-
medio al 2% v/v e incubada a 37ºC durante dos para 8 de las otras 10 cepas de lac-
24h. Al finalizar la incubación se realizaron tobacilos estudiadas. Por otro lado, la DO
las determinaciones de recuentos microbio- alcanzada por la cepa L73 fue un poco me-
lógicos en placa (MRS, 37ºC, 48h) y densi- nor que la teórica. Finalmente, la tempe-
dad óptica (DO) a 600nm como medida de ratura de incubación y el pH inicial evalua-
biomasa. Los resultados experimentales se dos no tuvieron un impacto significativo
procesaron en el programa Design-Expert® en la biomasa de L73.
7.0.0 para asignar modelos matemáticos de En conclusión, el medio de cultivo op-
ajuste. Los coeficientes fueron obtenidos timizado, formulado a partir de permeado
mediante regresión múltiple con elimina- de suero, resultó adecuado para la produc-
72
SESIÓN 2
ción de biomasa de varias cepas de lacto- 3N suplementado con lixiviado (0; 0,1; 1; 5;
bacilos mesófilos en los niveles requeridos 10 y 25 % v/v). Tales cepas corresponden a
en las industrias de fermentos. clorofitas, grupo al que pertenecen diversas
especies descriptas como buenas produc-
toras de aceite apto para biodiésel. Como
Palabras claves: MEDIO DE CULTIVO; PERMEA-
DO DE SUERO; FERMENTOS; LACTOBACILOS. control se empleó una cepa de Chlorella
sp. Luego de 20 d de cultivo, se determinó
la concentración celular en cámara de Neu-
bauer y la cantidad de aceite unicelular por
el método de Sulfo-Fosfo-Vainillina. Sobre la
47FMB base de los rendimientos de biomasa (1.107
céls./mL) y aceite (21 pg/cél.), se seleccionó
Desarrollo de un proceso una de las cepas, identificada como Scene-
de cultivo optimizado para desmus rubescens, en base a la secuencia-
microalgas oleaginosas ción de las regiones ITS, en el locus riboso-
mal. Posteriormente, se desarrolló un medio
de cultivo óptimo para esta cepa aplicando

MODINI, Laura B a,b; BECCARIA, Alejandro J b;
MÁRQUEZ, Vanina E b
un diseño central compuesto. En este se
consideraron 3 factores (% Bold 3N, % lixivia-
a) Cátedra Tratamiento de Efluentes. Facultad do y % fosfato) y dos respuestas (rendimiento
de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Universidad
celular y de aceite). La formulación resultante
produjo 4.106 céls./mL y 36 pg aceite/cél., ade-
b) Laboratorio de Fermentaciones. Facultad de más de reemplazar una proporción de medio
Bioquímica y Ciencias Biológicas. Universidad de cultivo base (Bold 3N) por lixiviado en un 85
%, y reducir la concentración de fosfatos en un
[email protected] 50 %, respecto de tal medio base.
De esta manera, fue posible seleccionar
La producción de biomasa microalgal se una cepa de microalga oleaginosa a partir de
usa para obtener una amplia gama de produc- asilamientos locales. También se pudo encon-
tos biotecnológicos, tales como aceite para la trar una formulación optimizada de medio
producción de biodiésel. Por otro lado, el em- para cultivos batch, teniendo en cuenta as-
pleo de efluentes en el diseño de medios de pectos positivos para los bioprocesos, como el
cultivo impacta en los costos de producción de incremento de la concentración celular y del
esa biomasa y el consumo de agua, sumando producto (aceite), y reducción de insumos que
valor agregado a los desechos. mejoran la economía y sustentabilidad.
El objetivo de este trabajo fue seleccionar Finalmente, a fin de profundizar el conoci-

una cepa de microalga en base a su potencial miento del desempeño biotecnológico de esta
oleaginoso y optimizar un medio de cultivo microalga, el conjunto cepa–medio de cultivo
para la misma, contemplando el uso de lixivia- se evaluará en un fotobiorreactor air–lift de
do generado en el relleno sanitario de la ciudad 400 ml. Además, se caracterizará el perfil de
de Santa Fe (Argentina). Para esto se partió de ácidos grasos del aceite obtenido.
8 cepas de microalgas aisladas de la planta
de tratamiento de efluentes líquidos de di- Palabras claves: ACEITE UNICELULAR; BIODIÉ-
cho relleno sanitario, las que se cultivaron SEL; LIXIVIADO.
en condiciones mixotróficas en medio Bold
73
SESIÓN 2
48FMB KH2PO4 0.60, CaCl2 0.11, KCl 0.37, pepsina

0.0133 (g/L), pH=2.0) y pancreátio (JP-sales
Supervivencia a biliares 3.0, pancreatina 0.1, Na2HPO4 26.9
simulación del tracto y NaCl 8.5 (g/L), pH= 7). Las cepas previa-
gastro-intestinal de mente activadas se centrifugaron, lavaron 2
veces con PBS y resuspendieron (108-107cél/
levaduras vinicas con mL) en 7 ml de JG. Se incubaron 2,5 h a 37°C
aptitudes probióticas con agitación constante (100 rpm) para simu-
lar los movimientos peristálticos. Las células
recolectadas del paso anterior se centrifuga-
VERGARA Silvia C.a,b, LEIVA María J.a,b, PETRIG-
NANI Diego B. b, MESTRE María V.a,b,c, NALLY ron, lavaron dos veces con PBS y resuspen-
María C.a,b,c, KUCHEN Benjamína,b, MANCHA dieron en 7 ml de JD e incubó por 3h a 37ºC
AGRESTI Pamelad, MATURANO Yolanda P.a,b,c con agitación constante (100 rpm). Median-
a) CONICET, Argentina te siembra en placa (medio YEPD-agar) al
principio, medio y final de cada simulación
b) IBT, Facultad de Ingeniería UNSJ, Argentina
digestiva se evaluó la viabilidad celular. Los

c) Dpto de Ing. Agronómica UNSJ,Argentina resultados indican que en general hubo una
d) Universidade Fedeal de Minas Geris, Belo disminución significativa en la supervivencia
Horizonte, Minas Gerais, Brasil (p< 0.05) tanto en la fase gástrica como la
duodenal (p< 0.05), sin embargo, no supero
[email protected]
el 30%. Las cepas con mayor porcentaje de
supervivencia al final de la etapa duodenal
La selección de levaduras probióticas re- respecto a la inoculación inicial en la etapa
quiere un examen preliminar basado en va- gástrica fueron C. sake (PB7 80.77%), Pichia
rias actividades funcionales. La resistencia kudriadzevii (PB48 85.64%, PB51 89.63%,
a los jugos gástricos y pancreáticos es una PB53 83%) P. occidentalis (PB56 89.66%,
propiedad muy importante de las cepas de PB58 81.75 %), Torulaspora delbrueckii
levadura probiótica, así se garantiza el pasa- (PB91 94.76%) y Wickerhamomyces ano-
je a través del tracto digestivo humano. El malus (PB97 80.30%). Cabe destacar que
objetivo de este estudio fue evaluar la su- la cepa probiótica control Saccharomyces
pervivencia de levaduras de origen vinícola a cerevisiae CNCM I745 registro superviven-
condiciones del tracto gastrointestinal (TGI) cia de 76.78%. Si bien la bibliografía sugie-
simuladas. Las 15 levaduras empleadas en re que la principal barrera que encuentran
este estudio fueron preseleccionadas por los microorganismos tras la ingestión es el
ser bioseguras, presentar tolerancia a ran- jugo gástrico, cuyo efecto inhibidor está es-
gos de temperatura, bilis y acidez presentes trictamente relacionado con el pH y la con-
en el TGI, propiedades de adhesión y antimi- centración de ácido clorhídrico, en nuestros
crobianas. Las cepa nativas fueron Candida resultados se evidencia que, si bien hay una
intermedia (PB3), C. sake (PB7), Hansenias- diminución durante todo el proceso, la re-
pora guillermondii (PB15), H. uvarum (PB18) ducción más significativa se evidenció al fi-
Pichia kudriadzevii (PB48, PB50, PB51, PB52, nal de la fase duodenal (supervivencia entre
PB53) P. masmurika (PB54), P. occidentalis 65-90%). Puede inferirse que las levaduras
(PB56, PB57, PB58), Torulaspora delbruec- vínicas del presente trabajo registraron pro-
kii (PB91) y Wickerhamomyces anomalus porciones de supervivencia elevados debido
(PB97) Para la simulación del pasaje por el a que están adaptadas a condiciones de pH
TGI se preparó jugo gástrico (JG-NaCl 2.05, bajos presentes durante el proceso de vini-
74
SESIÓN 2
ficación. Estos resultados demuestran la po- ubicados en el departamento Monteros. El

tencialidad de las levaduras vínicas para ser aislamiento OCG1 presentó el gen nifD invo-
empleadas como probióticas. La resistencia lucrado en la fijación biológica de nitrógeno,
al pasaje por el TGI resulta sumamente rele- la cual constituye una característica promo-
vante con el fin de asegurar la concentración tora del crecimiento vegetal de las bacterias
adecuada de microorganismos en el intesti- PGPB (Plant Growth Promoting Bacteria). En
no y de este modo garantizar la ejecución de bioensayos realizados en invernáculo, OCG1
los efectos deseados. fue capaz de colonizar el sistema radicular
de plántulas de caña de azúcar (TUC 95-10) e
Palabras claves: LEVADURAS; PROBIOTICOS; incrementó el peso fresco y seco del sistema
RESISTENCIA TRACTO GASTROINTESTINAL. aéreo y radicular. A fin de obtener grandes
cantidades de células metabólicamente ac-
tivas para la formulación de un biofertilizan-
te, OCG1 se inoculó en un medio de cultivo
formulado con subproductos de la industria
49FMB sucroalcoholera cuya composición en g/l es:
melaza 235,8; nitrógeno total de Torulopsis

Crecimiento de utilis 0,73; (NH4)2HPO4 1,32; pH 5,5 - 6. Los
G. diazotrophicus OCG1 cultivos se incubaron 7 días a 30 ºC y 180
rpm. Como control se utilizó la cepa PAL5,
en medio de cultivo usada en formulaciones comerciales. Para
de bajo costo evaluar el crecimiento de OCG1 en el me-
dio de producción, se determinaron las uni-
ALDERETE, Micaela E. J.a; NUÑEZ, María A.a; dades formadoras de colonias (UFC/ml) en
ROMERO, Eduardo R.a; TORTORA, María L.a el medio de cultivo LGI-P sólido a los 7 días
Estación Experimental Agroindustrial Obispo Co- de incubación. La viabilidad y estabilidad se
lombres (EEAOC), Las Talitas, Tucumán, Argen- determinó a los 14 y 30 días de almacena-
tina. miento mediante recuentos en el medio de
[email protected]
cultivo LGI-P semisólidoy mediante obser-
vaciones en microscopio óptico. Nuestros
resultados demuestran que OCG1 fue capaz
Los biofertilizantes constituidos por bac- de crecer hasta alcanzar un valor promedio
terias promotoras del crecimiento vegetal, de 9,33 x 107 UFC/ml, adaptándose al medio
son una alternativa sustentable para el ma- de producción que utiliza un sustrato com-
nejo integral de los cañaverales. El objetivo plejo como la melaza como única fuente de
de este trabajo fue evaluar la viabilidad y C, en comparación con PAL5 que sólo alcan-
estabilidad de una cepa endofítica de Gluco- zó un valor de 1,50 x 104 UFC/ml. Al evaluar
nacetobacter aislada de caña de azúcar, en la estabilidad de los cultivos a temperatura
un medio de cultivo formulado a partir de ambiente, observamos que la cantidad de
subproductos de la industria azucarera, a fin bacterias viables para OCG1 se mantuvo en
de lograr su propagación a gran escala. En el orden de 107 UFC/ml hasta los 30 días, a
trabajos previos realizados por nuestro gru- pesar de que se observó una leve disminu-
po de trabajo, se aisló una cepa endofítica ción en la movilidad bacilar por microscopía
identificada como Gluconacetobacterdiazo- óptica. Durante el crecimiento de OCG1 en
trophicus OCG1, a partir de tallos de caña el medio de producción, presentó la forma-
de azúcar provenientes de lotes comerciales ción de una película de biofilm adherida a la
75
SESIÓN 2
pared del erlenmeyer. Los exopolisacáridos Es fundamental, en dicha explotación, el

(EPS) producidos y excretados por OCG1 po- efecto que los factores químicos y físicos tie-
drían proteger a las células en condiciones nen sobre la actividad lipasa.
de estrés y favorecer el proceso de coloni- El objetivo de este trabajo fue estudiar la
zación bacteriana. De esta forma, el medio influencia de dichos factores sobre la activi-
de cultivo formulado a partir de subproduc- dad lipolítica del sobrenadante de Burkhol-
tos de bajo costo podría ser utilizado para la deria ambifaria– S19. La cepa se recuperó
propagación a gran escala de OCG1, la cual en agar Columbia por el método de aisla-
según los resultados preliminares obtenidos miento a 30°C por 24 h, para corroborar pu-
por nuestro grupo de trabajo, tiene poten- reza y viabilidad. De este cultivo, se realizó
cial para ser utilizada como biofertilizante en una suspensión correspondiente a al 0,5 en
caña de azúcar. la Escala de McFarland (DO600) para inocu-
lar el medio, en cada ensayo. Se partió de las
Palabras claves: SUSTENTABILIDAD; CAÑAVE- condiciones propuestas por Mobarak, 2011.
RAL; FIJACION BIOLOGICA DE NITROGENO. Se fueron ensayando una por una las varia-
bles: cloruro de calcio dihidratado (0,04% y

ausente); fuente de carbono (aceite de oli-
va, tributirina y glucosa, todos al 0,5%, 1%,
2% y sin fuente de carbono); fuente de ni-
trógeno (se combinaron fosfato monoamó-
50FMB
nico (0,1%, 0,5% y 1% y ausente) y peptona
Optimización sobre de carne (0,2%, 1% y 2% y sin agregar); pH
la actividad lipasa de (5,11; 5,50; 6,00; 6,50; 7,00; 7,50 y 8,00);
tween 80 (0,075%, 0,15%, 0,30%, 0,5% y sin
Burkholderia agregar); sulfato de magnesio heptahidra-
ambifaria- S19 tado (0,02%, 0,04% 0,08% y sin adicionar),
cloruro de sodio (0,062%, 0,125%, 0,25%,
0,375% y sin agregar); inóculo (1%, 2%, 3%,
QUIROGA ZINGARETTI, Adriana E. a,b; FONSECA,
María I. a,b; ZAPATA, Pedro D. a,b, QUIROGA, 4%, 5% y 6%), temperatura (25, 30, 35 y 40
Marinaa °C) y agitación (120, 150, 180 y 210 r.p.m.,
a) Universidad Nacional de Misiones, Facultad sin agitación). Los extractos libres de células
de Ciencias Exactas Químicas y Naturales, Insti- se obtuvieron según metodología optimi-
tuto de Biotecnología Misiones “Dra. María Ebe zada por nuestro laboratorio. La actividad
Reca” (INBIOMIS). Laboratorio de Biotecnología enzimática se determinó espectrofotométri-
Molecular (BIOTECMOL). Misiones. Argentina. camente (410 nm) midiendo el p-nitrofenol
b) CONICET.Buenos Aires, Argentina producido por la hidrólisis del palmitato del
p-nitrofenol.
[email protected]
Se partió de una actividad lipasa de
1454,40 UI/mL. Luego de ajustar una a una
Las lipasas (E.C. 3.1.1.3) son uno de los las variables del medio y condiciones cultivo
grupos de enzimas más importantes en biose obtuvo una actividad de 28155,71 UI/mL
catálisis, con variadas aplicaciones nivel in- (p <0,001). La composición del medio opti-
dustrial. Si bien son enzimas ubicuoas, las mizado fue: aceite de oliva 1% (v/v), fosfato
producidas por los microorganismos pueden monoamónico 0,1% (p/v), 0,5% y peptona
ser optimizadas para su aprovechamiento. de carne 0,2% (p/v), tween 80 0,15% (v/v),
76
SESIÓN 2
sulfato de magnesio heptahidratado 0,04% 53% a la producción manzana. La principal

(p/v), cloruro de sodio 0,125%(p/v); ajus- actividad agroindustrial asociada a la fruti-
tado a pH 7,00 con NaOH 1N. El inoculó en cultura es la elaboración de caldos de sidra y
suspensión agregado fue 5% del volumen jugos (concentrado y/o natural).
del medio. Las condiciones de cultivo fueron En la última década, las exigencias de
las mejores a 30°C y 180 r.p.m. los consumidores obligaron a la industria
En base a nuestros resultados podemos sidrera a invertir en innovación y desarrollo
concluir que este trabajo culmina la etapa de productos de mayor calidad con una im-
de optimización del medio para la cepa Bur- pronta regional característica. Dentro de los
kholderia ambifaria– S19. Lo que da paso factores que condicionan la calidad de las si-
para comenzar la caracterización bioquímica dras pueden destacarse la cepa de levaduras
de dicha cepa promisoria para futuras apli- empleada, la variedad de manzana utilizada
caciones biotecnológicas. y las condiciones operativas del proceso de
fermentación. Por otro lado, la utilización de
jugo concentrado a nivel internacional, para
Palabras claves: BURKHOLDERIA AMBIFARIA–
S19; LIPASAS; BIOTECNOLOGÍA. complementar la elaboración de sidra, pre-
senta innumerables beneficios que actual-

mente en el mercado nacional no se pueden
explotar debido a las limitaciones del Código
Alimentario Argentino.
El objetivo del trabajo fue comparar el
51FMB proceso de fermentación, la calidad micro-
Estudio fisicoquímico, biológica final y el contenido de polifenoles
totales en los caldos de sidra obtenidos a
contenido de polifenoles y partir de diferentes variedades de manzana,
análisis microbiológico en así como también, de un jugo concentrado
adquirido en una empresa juguera de la re-
diferentes caldos de gión. El proceso de elaboración a partir de
sidranorpatagónicas las variedades Red Delicious (RD), Pink Lady
(PL), Fuji (F), Granny Smith (GS) y Jugo Con-
ROCHA PARRA, Diego F. ; BONGIOVANI, Nata- centrado (JC) fue llevado a cabo en la Planta
a,b
lia S.a; TARIFA, María C.a,b; ROCHA PARRA, An- Piloto de Alimentos Sociales de la Universi-
drés F.a,b; COLIN, Ivanaa,b; LAIGLECIA, Juan I.a; dad Nacional de Río Negro (UNRN).
ITURMENDI, Facundo . a
a) Universidad Nacional de Río Negro. CIT Río Se realizaron las determinaciones de pH,
Negro. Río Negro. Argentina. acidez total, °Brix, extracto seco, sólidos
centrifugables, cenizas y densidad de todos
b) Centro de Investigaciones y Transferencia de los jugos obtenidos. Las fermentaciones se
Río Negro, CIT Río Negro (CONICET-UNRN), Villa
llevaron a cabo a una temperatura contro-
Regina, Río Negro, Argentina.
lada de 23 ± 1°C en fermentadores de 60
[email protected] L de capacidad, inoculados con 25 g/100 L
Saccharomyces cerevisiae, y se evalúo la
evolución de la cinética de grados Baumé
El Alto Valle de Río Negro en la Patagonia
(°Bé). El contenido de polifenoles totales se
Norte es la principal zona productora de fru-
determinó mediante el método de Folin Cia-
tas de pepita del país, correspondiendo el
77
SESIÓN 2
calteau y el recuento final de levaduras se (IIBIO), Universidad Nacional de San

realizó mediante recuento en placa en me- Martín (UNSAM)-Consejo Nacional de Investi-
dio glucosa-cloranfenicol agar. Las fermen- gaciones Científicas y Técnicas (CONICET), San
taciones duraron entre 8 (JC) y 15 (PL) días Martín, Buenos Aires, Argentina.
con un recuento final de levaduras de entre
c) Instituto de Micología y Botánica (INMIBO-CO-
2,76 Log Unidades Formadoras de Colonias
NICET), Facultad de Ciencias Exactas y Naturales,
(UFC)/mL (GS) y 3,63 Log UFC/mL (F). La tasa Universidad de Buenos Aires, Pabellón II, Ciudad
de disminución de °Bé se encontró entre los Universitaria, CABA, Argentina.
0,93 (JC) y 0,35 (PL) °Bé/día. El JC registró el
[email protected]
menor contenido polifenólico (316,3 mg/L)
comparado con los obtenidos para las otras
variedades de manzana: GS (586,4 mg/L), F El Yacón, Smallanthus sonchifolius (As-
(446,5 mg/L), RD (402,21 mg/L) y PL (369,3 teraceae) es un cultivo tradicional andino
mg/L). Las diferencias en los parámetros fi- pre-incaico extendido desde Colombia hasta
sicoquímicos finales entre el JC y las diferen- el norte de Argentina. En sus raíces reservan-
tes variedades, se deben posiblemente a la tes acumula hasta un 70% del peso en fruc-

tecnología de proceso utilizada (tratamiento tooligosacáridos (FOS, oligómeros de fructo-
térmico y enzimático), que podría modificar sa unidos por enlaces (2→1)-β-glicosídicos),
la composición fisicoquímica del jugo de par- sacarosa y fructosa. En 1981 la FAO declaró
tida. Por esta razón existe un gran potencial al yacón en estado de emergencia promo-
para producir sidras a partir de diferentes viendo su conservación y uso sostenible. En
variedades de manzanas con características los alimentos para animales, elaborados en
diferenciadas que sean atractivas e innova- base a cereales el 80% del fósforo se encuen-
doras para el consumidor. tra en forma de ácido fítico (hexakis[dihi-
drogeno(fosfato)] de (1r,2R,3S,4s,5R,6S)-ci-
clohexano-1,2,3,4,5,6-hexailo). El ácido
fítico actúa como antinutriente al ser que-
52FMB lante de micronutrientes, Zn y Fe. Debido
Valorización de un cultivo a su degradación incompleta en animales
monogástricos deficientes en actividad de
andino (Yacón) mediante fitasa el fósforo no puede ser asimilado por
la producción de una fitasa lo que pasa al medio ambiente con el corres-
pondiente aumento de la DBO produciendo
de levadura asociada a la también eutrofización Por lo tanto las dietas
célula mediante un proceso deben ser suplementadas con el agregado
de fitasa.
estadísticamente optimizado
En este trabajo se propone valorizar al ya-
cón mediante la utilización de sus azúcares y
CONDE MOLINA, Deboraa; Novelli Poisson Gui-
dob; IANNONE Leopoldo J.c; GALVAGNO Miguel estudiar la capacidad de la levadura Debar-
Ab,c yomyces occidentalis para producir actividad
a) Laboratorio de Biotecnología, Departamento fitasa en un medio basado en extracto de S.
de Ingeniería Química, Facultad Regional Delta, sonchifolius (yacón) (YM).
Universidad Tecnológica Nacional, Campana, Utilizando un diseño de optimización
Box-Behnken, y analizado por metodología
b) Instituto de Investigaciones Biotecnológicas de superficie de respuesta se evaluaron las
78
SESIÓN 2
condiciones óptimas para la producción de 53FMB

fitasa en YM optimizando la concentración
de YM, temperatura, pH, inóculo, concentra-
Queso cremoso elaborado
ción de (NH4)2SO4 y tiempo de fermentación con leche adicionada
en matraces agitados. Los máximos títulos de leche en polvo
de actividad fitasa se obtuvieron median-
te cultivo a 28 ° C y pH 5,5, con un inóculo
GIMÉNEZ, Paulaa; PEROTTI María C.a,b; GEOR-
de 107 células/mL en medio con 0,11% p/v GE, Guillermo A.a,b; SPOTTI Maríac; QUINTERO,
azúcares reductores de yacón, 0,65% p/v de Juan P c; CABALLERO María. Sa,b; HYNES Erica R
(NH4)2SO4 y 16 horas de fermentación. La lo- a,b
; BERGAMINI Carina V. a,b.
calización de la fitasa se determinó mediante a) Instituto de Lactología Industrial (UNL/CONI-
fraccionamiento subcelular y formación de CET)
protoplastos. La actividad máxima de fitasa
b) Facultad de Ingeniería Química, Universidad
alcanzada en estas condiciones fue más de Nacional del Litoral, UNL
6 veces mayor que en medio no optimizado.
El escalado en un biorreactor de tipo STR, O2 c) Laboratorio de Estudios Fisicoquímicos de Ali-
mentos. ITA – FIQ , UNL
disuelto 30% saturación, aumentó aún más

la productividad de la fitasa en 1,5 veces.La [email protected]
fitasa producida se asoció a la fracción de la
pared celular y su actividad óptima se obtu-
vo entre valores de rango de temperatura y El agregado de polvos lácteos a la leche
pH de 75-80 ° C y 4.0-5.0, respectivamente, de quesería es una estrategia para estanda-
reteniendo el 80% de su actividad a 80 ° C rizar el nivel proteico y/o aportar propieda-
durante 40 min. Los valores de Km y Vmax des tecnofuncionales como la mejora de la
para fitato de la fitasa calculados a partir de textura y la retención de agua. Sin embar-
gráficos de Lineawever Burk fueron 2,5 mM go, también aportan lactosa, la cual puede
y 357 mU/mg de proteína, respectivamente. favorecer el desarrollo de defectos. El obje-
Los cationes Fe 2+, Cu2+ y Zn 2+ inhibieron la tivo del presente trabajo fue determinar el
actividad enzimática en un 87, 48 y 35%, res- impacto del uso de leche enriquecida con
pectivamente. Progresivamente el aumento Leche en Polvo Descremada (LPD) en la ela-
de la concentración de fósforo en el medio boración y maduración de queso Cremoso.
inhibió la producción de enzimas, hasta 60% Se elaboraron por triplicado cinco tipos de
con 0,1% p/v H2KPO4. queso: un control y cuatro experimentales.
Los quesos control (C) se elaboraron con le-
En conclusión, la biomasa de levadu- che sin adición de LPD, mientras que los ex-
ra, la producción de fitasa y la cinética de perimentales (E) fueron elaborados con le-
producción en YM fueron similares a los che adicionada de LPD (de bajo tratamiento
producidos en un medio a base de melaza térmico) a dos niveles de proteína (1-4g% y
de caña. El yacón resultó ser un sustrato 2-4,7g% de proteína), con la inclusión (E1L y
nutritivo alternativo y prometedor para E2L) o no (E1 y E2) de un lavado de la cuajada
producir una fitasa unida a levadura como (20%) durante la elaboración, con el objeti-
aditivo nutricional potencialmente aplica- vo de disminuir el nivel de lactosa que se in-
ble en la industria de piensos. crementa por la adición del polvo. Se analizó
la composición global (humedad, materia
grasa y proteínas) y pH mediante métodos
normalizados y se determinaron los niveles
79
SESIÓN 2
del starter y NSLAB (bacterias lácticas no Palabras claves: QUESO CREMOSO; LECHE EN
pertenecientes al fermento) por recuentos POLVO; MADURACIÓN.
en placa. Además, se analizaron los niveles
de ácidos orgánicos y azúcares (HPLC), el
perfil de textura (por compresión al 30%)
y la capacidad de fusión de los quesos (in-
cremento de área de un cilindro de queso 54FMB
por calentamiento en estufa). Los resulta-
dos se analizaron mediante ANOVA de una
Evaluación de estrategias
vía (p=0,05). Las diferencias entre medias se de cultivo de actinobacterias
determinaron mediante el test de Tukey.
para optimizar su monitoreo
Los quesos E tuvieron una composición
similar (p>0,05) al C en cuanto al nivel de hu-
y manipulación
medad, proteína y pH, mientras que el nivel
de grasa fue menor (p<0,05) en E1L y E2 con BAZÁN, Lucas A.a; ADET, Cyntiaa; FUENTES, M.
Soledada y BENIMELI, Claudia S.a,b
respecto al C. En relación al nivel de lacto-

sa, galactosa y ácido cítrico, se observó una a) Planta Piloto de Procesos Industriales Micro-
biológicos (PROIMI)- CONICET. San Miguel de
tendencia de mayores niveles en los quesos
Tucumán
E y una leve disminución debido al lavado de
la cuajada; las diferencias para la lactosa y b) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Uni-
cítrico fueron significativas entre los quesos versidad Nacional de Catamarca.
C y los quesos E1, E2 y E2L. Los niveles de [email protected]
ácido láctico fueron similares en todos los
quesos. El recuento del starter se encontró
dentro del orden esperado (109 UFC/g que- Las actinobacterias tienen gran versatili-
so), mientras que el de NSLAB fue menor dad metabólica, por lo que son importantes
que 103 UFC/g queso en todos los quesos. El herramientas para aplicaciones biotecno-
análisis de textura reveló que los quesos E1, lógicas, tales como la biorremediación. Sin
E2 y E2L presentaron una dureza levemente embargo, su manejo en el laboratorio re-
superior al C y E1L, observándose diferen- quiere cierto cuidado, por lo que se deben
cias significativas entre C y E2L, E1 y E1L, y desarrollar estrategias que permitan un mo-
E1L y E2L. La masticabilidad se incrementó nitoreo rápido y confiable de su fisiología y
en los quesos E, pero la diferencia fue signi- crecimiento celular.
ficativa solo entre C y E2L. Los parámetros El objetivo del trabajo fue estudiar com-
de recuperación elástica, cohesividad, resi- parativamente el crecimiento microbiano
liencia, adhesividad y capacidad de fusión de Streptomyces sp. M7, en diferentes con-
fueron similares en todos los quesos. diciones, incluyendo cultivo tradicional o
El uso de leche enriquecida con LPD para adicionado con Tween 80, en presencia o
la elaboración de queso Cremoso no tuvo en ausencia de resortes de acero inoxidable,
general un gran impacto en la composición, inoculando diferentes concentraciones ini-
propiedades de textura y fusión de los que- ciales del microorganismo.
sos, ya que sólo produjo leves modificacio- Se utilizó como modelo de estudio Strep-
nes en algunos parámetros dependiendo de tomyces sp. M7, una actinobacteria capaz de
las condiciones de elaboración. degradar diversos plaguicidas. Se realizaron
cultivos inoculando diferentes concentracio-
80
SESIÓN 2
nes iniciales de células vegetativas (1, 2, 4, 8 tectándose un consumo total de esta fuente
g L-1) en medio mínimo adicionado con glu- de carbono a las 168 y 144 h para inóculos
cosa como fuente de carbono (10 g L-1), en de 1 y 2 g L-1 y a las 120 h para los inóculos
presencia o ausencia de Tween 80 (0,01 N) y de 4 y 8 g L-1.
de resortes de acero inoxidable, en el fondo Teniendo en cuenta estos resultados y la
del Erlenmeyer. Los cultivos se incubaron 7 producción de exopolisacárido en los dos
días a 30 °C y 150 rpm. Se tomaron muestras cultivos con mayor concentración inicial de
diarias para determinar crecimiento micro- inóculo, incluso en presencia de Tween 80,
biano (peso seco, recuento de UFC, espec- se seleccionó la concentración de 2 g L-1 para
trofotometría) y concentración de glucosa posteriores ensayos de biorremediación. El
residual (kit enzimático). empleo de resortes y la técnica espectro-
En los cultivos tradicionales, en ausencia fotométrica para la determinación de cre-
de Tween 80 y resortes, no se observaron cimiento microbiano resultaron más apro-
diferencias significativas en el crecimiento piadas, por su rapidez y sencillez, desde el
microbiano al cabo de 7 días de incubación, punto de vista operativo.
cuando se emplearon las dos concentracio-
nes de inóculo menores, determinado tanto Palabras claves: CULTIVO; ACTINOBACTERIAS;

por peso seco como por recuento de UFC. Sin INÓCULOS; PELLETS.
embargo, a mayor concentración de inóculo
inicial se obtuvo mayor crecimiento micro-
biano, lo cual fue corroborado empleando
ambas técnicas analíticas. La biomasa final
fue 1,58x107; 1,47x107; 2,65x109 y 1,27x1010
UFC mL-1 para los inóculos de 1, 2, 4 y 8 g
L-1, respectivamente. Para esta técnica de
cultivo no se determinó el crecimiento por
espectrofotometría debido a que las hifas
microbianas formaron agrupaciones de fi-
lamentos de diferentes tamaños, los cua-
les se adhirieron a las paredes de vidrio de
los Erlenmeyers, debido a la producción de
exopolisacáridos.
En los cultivos realizados empleando
resortes y Tween 80 se determinó el creci-
miento microbiano mediante espectrofo-
tometría, observándose al final del ensayo
mayor biomasa al inocular mayor concen-
tración inicial de microorganismo. La DO
(505 nm) final obtenida para los inóculos de
1, 2, 4 y 8 g L-1, fue 1,16; 0,23; 0,51 y 0,55,
respectivamente.
En ambos ensayos se observó mayor ve-
locidad de consumo de glucosa al incremen-
tar la concentración inicial de inóculo, de-
81
SESIÓN 3
1DBEP
Transporte y consumo de
oxígeno en biprocesos aero-
bios: stress hidrodinámico
VERGARA, Priscilla b; GOMEZ, Emilio a;
VILLAR, Juan C.b; GARCIA-OCHOA, Félixa
a) Dpto. Ingeniería Química y de Materiales.
Facultad CC. Químicas. Universidad Compluten-
se de Madrid, España
b) Dpto. Celulosa y Papel. Instituto Nacional de
Investigaciones Agrarias, Madrid, España
SESIÓN 3 El oxígeno es un nutriente esencial en

DISEÑO DE

los bioprocesos aerobios que, debido a su
baja solubilidad en los caldos de cultivo, es
BIORREACTORES necesario suministrar continuamente para
mantener la concentración adecuada en el
Y ESCALADO DE bioproceso.
La disponibilidad del oxígeno depende
PROCESOS del balance de velocidad de dos fenómenos
en serie: el transporte desde la fase gaseosa
BIOTECNOLÓGICOS y el consumo en el cultivo.
La velocidad del transporte de oxígeno
(OTR) depende de diversas variables (Gar-
cia-Ochoa y Gomez, 2009):
-Tipo y geometría del biorreactor, princi-
palmente el tipo de contactor y las rela-
ciones geométricas.
-Tipo de agitación y de distribución del
gas: diseño y dimensiones.
-La velocidad de agitación y el caudal de
gas: la energía suministrada por unidad
de volumen.
-Las propiedades del cultivo: viscosidad y
tensión superficial, básicamente.
La velocidad de consumo de oxígeno
(OUR) depende del bioproceso en cuestión.
El mayor consumo se produce por el creci-
miento celular y, en menor medida, por el
mantenimiento del cultivo y, en algunas oca-
82
SESIÓN 3
siones, por la síntesis del producto y de los apropiado en cada caso. Para ello, el mejor
subproductos (Garcia-Ochoa y col. 2010). criterio de cambio de escala se ha demostra-
Un suministro suficiente de oxígeno es do ser la constancia del valor del coeficiente
fundamental para el progreso de cultivos de transporte (kLa), en lugar del criterio más
aerobios (bacterias, levaduras, células de utilizado de conservar la potencia suminis-
mamíferos y plantas). La concentración trada por unidad de volumen (P/V).
de oxígeno disuelto en el medio de cultivo
depende del balance de las dos velocida-
des citadas; si la velocidad de consumo es
potencialmente mayor que la velocidad de
transporte, caso frecuente, la concentración 2DBEP
de oxígeno disminuirá, incluso llegando a un
valor próximo a cero; en caso contrario, la Metodología rápida para
disponibilidad de oxígeno será mayor y su calcular la transferencia de
concentración en el líquido alcanzará un va-
lor determinado. Esta situación cambia con
CO2 en medios acuosos
el tiempo durante el transcurso del proceso.

IBAÑEZ, Manuel V. a, b; LEONARDI, Rodrigo J. c;
Normalmente, se busca una OTR alta, PALMIER, Maximiliano a; HEINRICH, Josué M. a, b
para satisfacer la OUR demandada por el cul-
a) Grupo de Innovación en Ingeniería de Biopro-
tivo. Esto se consigue aumentando la veloci- cesos, Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológi-
dad de agitación (la variable que más influye cas, Ciudad Universitaria (Paraje El Pozo), Santa
en OTR). El aumento de dicha velocidad de Fe, Argentina.
agitación puede llevar consigo la aparición
b) Instituto de Desarrollo Tecnológico para la
de stress hidrodinámico, con daño celular, Industria Química (INTEC), Consejo Nacional de
modificando la velocidad de crecimiento y Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET),
de producción (Garcia-Ochoa y col. 2020). Universidad Nacional del
Por otro lado, si se utiliza una OTR ele- Litoral (UNL), Güemes 3450 (S3000GLN), Santa
vada y la concentración de oxígeno en el Fe, Argentina.
líquido aumenta mucho, puede originarse
c) Grupo de Procesos Biológicos en Ingeniería
un cambio en las rutas metabólicas y pue- Ambiental, Departamento de Medio Ambiente
de cambiar drásticamente la distribución de (DMA), Facultad de Ingeniería y Ciencias Hídri-
metabolitos o productos (Garcia-Ochoa y cas, Ciudad Universitaria (Paraje El Pozo), Santa
col. 2020). Fe, Argentina.
Para un correcto desarrollo de un biopro- [email protected]
ceso aerobio, es necesario estudiar estos
aspectos (OTR, OUR y posible stress) a nivel
de laboratorio. Recientemente, se ha pues- En los reactores biológicos destinados a
to de manifiesto la posibilidad de un cam- la propagación autotrófica de microalgas,
bio en las rutas metabólicas, como se ha colas concentraciones de Oxígeno y de Dióxido
mentado, por lo que el cambio de escala a de Carbono en la solución juegan un papel
mayores tamaños debe hacerse teniendo en muy importante. El CO2 es la única fuente de
cuenta los tres fenómenos: transporte, con- carbono durante el crecimiento fotosintéti-
sumo y posibilidad de stress hidrodinámico, co siendo su principal reservorio la fase ga-
pero asegurando el nivel de oxígeno disuelto seosa en contacto con la suspensión acuosa.
83
SESIÓN 3
Entre la fase gaseosa y el sitio donde se da la puedan cubrir las necesidades de un proce-
fotosíntesis existen numerosas barreras que so particular.
el CO2 debe sortear antes de la fijación bio- Adicionalmente, de los resultados se de-
lógica, siendo el proceso de disolución gas – muestra que cada paso que ocurre en si-
líquido, y la hidratación de las moléculas de multáneo es acoplado, y que la reacción de
CO2 disueltas, las etapas más importantes. hidratación de CO2 disuelto es la etapa de-
En este trabajo, se aplica una perspec- terminante del proceso de transferencia gas
tiva de trabajo sistemática, derivada de la - líquido. Esto último, sustenta las observa-
termodinámica irreversible, que permitió la ciones experimentales de diversos autores
cuantificación de las constantes cinéticas de sobre que el enriquecimiento de CO2 en la
disolución gas – líquido e hidratación del CO2 fase gaseosa puede causar pérdidas eco-
en un medio de cultivo para algas. La meto- nómicas, debido a que no todo el carbono
dología implicó el diseño de un estado inicial suministrado será empleado para la produc-
de equilibrio en el medio líquido presente en ción de biomasa, y como predice el modelo
un bioreactor en el que burbujeaba una co- presentado en este trabajo, parte de dicho
rriente de aire filtrado, y que es perturbado nutriente retorna a la fase gas y se pierde

por el agregado de una concentración arbi- del sistema de cultivo (proceso de desorción
traria de hidróxido de Sodio (NaOH). Con la de CO2). Finalmente, un aporte adicional de
ayuda de un trazador coloreado, Rojo Cresol, este trabajo es que se puede extender el uso
se cuantificó el cambio en la absorbancia de del método al estudio de la transferencia de
la solución hasta alcanzar un nuevo estado materia de O2 generado durante la fotosín-
de equilibrio, debido a la incorporación de tesis (principal inhibidor del desarrollo de
CO2 proveniente de la fase gaseosa en con- cultivos fotosintéticos).
tacto con el líquido. Bajo las mismas condi-
ciones de Temperatura, Agitación y Caudal
Palabras claves: DIÓXIDO DE CARBONO;
de Aire, se estudió la cinética de nueve con- TRANSFERENCIA DE MATERIA; MICROALGAS;
diciones iniciales diferentes, obteniéndose FOTOBIOREACTOR.
para cada una de ellas, las mismas constan-
tes cinéticas para el modelo de absorción
propuesto.
Colectivamente, los resultados de este
trabajo sugieren que el modelo fisicoquími- 3DBEP
co desarrollado puede ser implementado a
otros sistemas de cultivo, permitiendo de Cálculo rápido de la
manera sencilla la incorporación de la trans- productividad
ferencia de materia de CO2 en las expre-
siones cinéticas para el crecimiento de mi- fotoautotrófica de
croorganismos fotosintéticos. De lo anterior fotobioreactores tubulares
se desprende también que una herramienta
de cálculo rápido y sencillo de constantes
horizontales
cinéticas permite, entre otras cosas, la com-
paración rápida entre la eficiencia de dife- IBAÑEZ, Manuel V. a, b; LEONARDI, Rodrigo J. c;
HEINRICH, Josué M. a, b
rentes bioreactores para la transferencia de
materia y su consecuente optimización para a) Grupo de Innovación en Ingeniería de Biopro-
el diseño de unidades más eficientes y que cesos, Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológi-
84
SESIÓN 3
cas, Ciudad Universitaria (Paraje El Pozo), Santa sico-químicos del sistema podrían alterar las
Fe, Argentina. propiedades de radiación de la suspensión,
b) Instituto de Desarrollo Tecnológico para la a través de variaciones en la composición de
Industria Química (INTEC), Consejo Nacional de la biomasa y morfología de las células, alte-
Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), rando directamente el crecimiento.
Universidad Nacional del
Aquí presentamos un enfoque para cuan-
Litoral (UNL), Güemes 3450 (S3000GLN), Santa tificar las propiedades ópticas de las suspen-
Fe, Argentina. siones de microalgas y luego utilizar a las
c) Grupo de Procesos Biológicos en Ingeniería mismas para calcular la productividad de un
Ambiental, Departamento de Medio Ambiente fotobioreactor tubular horizontal pertene-
(DMA), Facultad de Ingeniería y Ciencias Hídri- ciente a la compañía MINT EngineeringGm-
cas, Ciudad Universitaria (Paraje El Pozo), Santa bH (Dresden, Alemania). Se empleó con éxi-
Fe, Argentina. to una metodología sencilla, consistente en
[email protected] iluminar una suspensión de microalgas con
una fuente de radiación policromática ca-
racterizada y evaluar cómo se modifican las
Los fotobiorreactores (PBR) son las uni- direcciones y la cantidad de energía trans-
dades preferidas para el cultivo de microor- portada por los haces de luz tras atravesar
ganismos fotosintéticos. Incluso si el cultivo la suspensión. Posteriormente, mediante un
es mixotrófico o autótrofo, la luz debe llegar programa de optimización, los datos expe-
a la suspensión atravesando las paredes de rimentales del cultivo fueron usados para
la unidad. En consecuencia, la optimización determinar los coeficientes espectrales de
y el control de la transferencia de luz en los absorción y de dispersión de los fotones, y la
PBR están ligados a la estrecha relación en- función de fase de dispersión de la suspen-
tre las características de la Fuente de Luz, sión. Por último, la combinación de la infor-
la Geometría del Sistema y las Propiedades mación geométrica de la unidad, junto con
Radiativas de los microorganismos depen- el conocimiento de la composición espectral
dientes del estado fisiológico de la célula y direccional de la Luz suministrada a la sus-
en un momento dado. La combinación de pensión, y una expresión cinética derivada
estas tres características en la ecuación de de la fase dependiente de la luz de la foto-
Transferencia Radiativa permite el acceso síntesis, permitieron resolver el conjunto de
al Campo de Energía Radiante en un PBR y, ecuaciones diferenciales que caracterizan al
posteriormente, el conocimiento de la dis- bioproceso y así calcular la performance de
ponibilidad de luz dentro de la unidad y las las unidades productivas involucradas.
tasas volumétricas locales de absorción de
Para seis cultivos batch de A. platensis
luz en el rango espectral de trabajo. Las ta-
(Spirulina), se analizaron muestras diarias
sas de absorción se pueden traducir luego
correspondientes a un tiempo de proceso
en valores de tasa de crecimiento vinculados
de una semana, utilizando con éxito un ba-
a una expresión cinética de crecimiento y,
lance energético que es independiente de
además, la productividad de una configura-
la concentración de biomasa o pigmento.
ción particular. No obstante, durante la pro-
En conjunto, los resultados aquí presenta-
gresión de un cultivo, el campo de energía
dos sugieren que esta metodología podría
radiante y la composición del medio líquido
adaptarse a otras suspensiones, geometrías
cambian dinámica y significativamente. Así,
de reactores y fuente de luz involucradas,
los procesos biológicos foto-adaptativos y fí-
permitiendo formas accesibles de evaluar
85
SESIÓN 3
las características radiativas de los microor- tioxidantes más poderosos de la naturaleza.

ganismos fototróficos y su productividad en Los mercados más importantes del carote-
el contexto complejo de la evolución en el noide son las áreas relacionadas a la acui-
tiempo del campo de energía radiante den- cultura, y la producción de nutracéuticos y
tro de un fotobiorreactor. fármacos.
Con fines de producción de biomasa y
Astaxantina de H. pluvialis en condiciones
outdoor, a escala de planta piloto o indus-
Palabras claves: PROPIEDADES RADIATIVAS,
DISPONIBILIDAD DE LUZ, FOTOBIOREACTOR, trial, es necesario la elección de un Foto-
MICROALGA, PRODUCTIVIDAD. bioreactor (FBR), las condiciones de culti-
vo y las de operación. En estos sistemas,
la luz juega un rol importante en el creci-
miento de la biomasa, en la acumulación
4DBEP de carotenoides, y en la regulación del
ciclo celular. En los sistemas de produc-
Evaluación del ción a gran escala se observan notables

crecimiento de diferencias mensuales en la productividad
de la biomasa, de la Astaxantina, y en la
Haematococcuspluvialis duración del ciclo de producción, debido
en un simulador de principalmente a las fluctuaciones de luz
(calidad, cantidad y tiempo).
condiciones outdoor
Para evaluar rápidamente la perfor-
IBAÑEZ, Manuel V. a, b; LEONARDI, Rodrigo J. c; mance de un FBR puede recurrirse a meto-
PALMIER, Maximiliano a; HEINRICH, Josué M. a, b dologías experimentales, las cuales persi-
a) Grupo de Innovación en Ingeniería de Biopro- guen reproducir las condiciones de cultivo
cesos, Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológi- outdoor en el laboratorio. El potencial de
cas, Ciudad Universitaria (Paraje El Pozo), Santa estas técnicas radica en la obtención de in-
Fe, Argentina. formación para la elección del Fotobiore-
actor, la cepa, y las condiciones de cultivo,
b) Instituto de Desarrollo Tecnológico para la
Industria Química (INTEC), Consejo Nacional de en un tiempo relativamente corto respec-
Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), to al de instalación de un FBR, su puesta
Universidad Nacional del Litoral (UNL), Güemes en funcionamiento y entrada en régimen.
3450 (S3000GLN), Santa Fe, Argentina. Otra ventaja potencial es la reducción de
c) Grupo de Procesos Biológicos en Ingeniería los costos de construcción y de operación
Ambiental, Departamento de Medio Ambiente de un sistema de cultivo que no satisface
(DMA), Facultad de Ingeniería y Ciencias Hídri- las necesidades del proceso.
cas, Ciudad Universitaria (Paraje El Pozo), Santa
En el presente trabajo se utilizó una
Fe, Argentina.
metodología experimental para evaluar la
[email protected] conducta de crecimiento de una cepa local
de H. pluvialis en un reactor columna de
burbujeo de 30 L en condiciones de ilumi-
Haematococcuspluvialis es una microalga nación natural de días típicos de verano,
verde de interés comercial e industrial por otoño e invierno de Santa Fe (Argentina),
su capacidad de acumular grandes cantida- operando el dispositivo en forma batch, y
des de Astaxantina,uno de los pigmentos an-
86
SESIÓN 3
dejando libremente variar la composición 5DBEP

del medio de cultivo y el pH. La ilumina-
ción se reprodujo en términos de la canti-
Modelo para predecir la
dad de luz que llega al reactor por unidad producción de biogás del
de tiempo y volumen [µmol s-1 L-1], en un escalado en DAS
reactor de laboratorio comercial marca In-
fors HT, y con un módulo de iluminación
GIL, Rocio M. a, b; RODRÍGUEZ, Laura A. a;
LED de amplio espectro blanco frío. MARTIN, María L a; SANTANA Anelise a,
De los resultados experimentales se KUCHEN, Benjamina, b
a) Instituto de Biotecnología. Facultad de Inge-
observa que el perfil de iluminación tiene
un gran impacto sobre la productividad
de la biomasa y de carotenoides totales, b) CONICET
la duración del ciclo de vida, la cantidad [email protected]
de biomasa producida y el contenido de
pigmentos. Cuanto más grande es la radia-
ción diaria que recibe el FBR, menor es la Últimamente, los bioprocesos son
cantidad de biomasa producida, y el con- usados para la transformación de residuos

tenido de pigmentos es mayor. Finalmen- agroindustriales en productos reutilizables
te, se destaca que, si bien en este trabajo
en cadenas de producción amigables con
se focalizó en analizar el impacto de la luz
el medio ambiente. Un ejemplo de ello
sobre los cultivos de una cepa nativa de H.
es la digestión anaerobia, la cual puede
pluvialis, a partir de la técnica empleada
ser llevada a cabo por dos vías, el proceso
se pueden encontrar las condiciones ópti-húmedo (DAH) y el seco, denominado como
mas que permitan el desarrollo de la cepadigestión anaerobia seca (DAS). Existen
a nivel industrial (Temperatura y pH, prin-
modelos desarrollados para las DAH, como
cipalmente), tomando como base los flu- el ADM1, pero no se encontraron modelos
jos de radiación aquí presentados en la se-
para las DASS. En este trabajo se simuló
lección de nuevos parámetros operativos. de manera computacional el proceso de
DAS para el Alperujo (ALP), residuo de
la extracción de aceite de oliva por dos
fases, en una escala de laboratorio con el
Palabras claves: HAEMATOCOCCUSPLUVIALIS, fin de evaluar la producción de biogás y el
ASTAXANTINA, REPRODUCCIÓN DE ILUMINA-
CIÓN OUTDOOR, LEDS, FOTOBIORREACTO- empleo de sus resultados para un cambio
RES. de escala del proceso. Las pruebas de DAS
se realizaron a 37°C en reactores de 60 mL,
alimentando con el 60% p / p de TS en un
modo de alimentación por lotes. Se ajustó
un modelo cinético basado en la ecuación
de Gomperz que predice la producción
de biogás a lo largo del tiempo con
pocas entradas. Los parámetros de dicho
modelo se ajustaron a partir de los datos
experimentales. Al modelo ajustado con los
parámetros de laboratorio se utilizó como
herramienta de control durante las pruebas
87
SESIÓN 3
posteriores realizadas a escala piloto en escalas (laboratorio y banco). Los residuos

un digestor de 200 L alimentado en modo agrícolas se presentan en grandes volúme-
discontinuo. Se obtuvieron rendimientos de nes y es por ello que se requiere un estu-
biogás entre 0.5 y 0.9 Nm3 / kgVS, y conteni- dio del escalado del proceso, manteniendo
dos de metano de 40-53% v/v en ambas es- los aspectos biotecnológicos que aseguren
calas. El modelo derivado de los resultados la degradación del mismo. En las FES, los
del procedimiento propuesto es adecuado principales problemas en los cambios de es-
para una evaluación del cambio de escala cala son: remoción de calor metabólico, su-
del proceso de DAS. ministro de aire y mezclado. El objetivo de
este trabajo fue realizar un escalado hasta
un reactor de 20000 L, mediante pruebas
Palabras claves: ESCALADO, BIOGAS, ALPERUJO experimentales con aumentos progresivos
de escalas (reactores de banco) y aplican-
do criterios de escalado para la última etapa
(reactor de escala piloto). El porcentaje de
6DBEP degradación de contenido fenólico (% CF) y
Escalado de un reactor

el tiempo necesario para alcanzarlo (t), fue-
ron variables indicativas de los resultados
FES en la detoxificación alcanzados en cada etapa del escalado. Las
del alperujo. Del laboratorio pruebas comenzaron en cajas de Petri (CP)
con 20 g de medio de cultivo y luego se con-
a una planta piloto tinuaron en un reactor de lecho fijo (RLF) de
10 L, con 2000 g de medio de cultivo (Re-
RODRÍGUEZ, Laura A. a; ANDREOLLI, Lucianaa lación de Escala 1:100). El % CF alcanzado
GIL Rocío M. a, b; KUCHEN, Benjamina,b
fue 80%, porcentaje importante teniendo en
a) Instituto de Biotecnología. Facultad de Inge- cuenta la rapidez con la que lo alcanzo, pero
niería. Universidad Nacional de San Juan. el cultivo no se pudo prolongar más allá de
b) CONICET los 7 días debido a la falta de humedad del
lecho. En ambas escalas la ausencia de re-
[email protected]
moción de calor fue notable, por lo que se
decidió, optar por un reactor con agitación
El alperujo (AL) es un subproducto del y aireación forzada para la siguiente etapa.
proceso de extracción de aceite de oliva en En un reactor de tambor agitado (RTA) de
sistemas de dos fases. Es semisólido, está 35 L con 20 Kg de medio de cultivo (Escala
compuesto por azúcares, proteínas, ácidos 1:10), el % de CF fue de 80 %, pero el cultivo
orgánicos, lípidos, pectinas y compuestos se prolongó hasta los 30 días, algo favorable
fenólicos (CF). Debido al contenido de CF, ya que permitió entre otras cosas estudiar
frecuentemente, es inhibitorio para el desa- actividades enzimáticas relacionadas con la
rrollo de microorganismos (se lo considera degradación de los CF. La siguiente etapa fue
nocivo para el suelo) y, legalmente requiere una FES con 50 Kg de medio de cultivo, en
un tratamiento previo a su disposición final. un reactor de tambor rotatorio (RTR) de 400
La Fermentación en Estado Sólido (FES) es L, con agitación pero sin aireación forzada.
un tratamiento que posibilita la detoxifica- Se logró mantener el contenido de agua en
ción y valorización del AL, sin embargo las un rango aceptable para la fermentación y el
investigaciones existentes son en pequeñas porcentaje de disminución de CF fue de 65%
en 30 días. Para la última etapa, el objetivo
88
SESIÓN 3
es fermentar 250 Kg en un RTR de 20000 L. de CO2. En este sentido, los fotobiorreac-

Aplicando criterios de similitud geométrica y tores neumáticos resultan aptos y cuentan
dinámica, más precisamente agitación (velo- con dichas propiedades. El objetivo de este
cidad de rotación critica (Nc) y n° de rotacio- trabajo fue evaluar los efectos de la veloci-
nes del tambor () y porcentaje de llenado) dad de aireación y del diseño del aireador
y aireación, se determinó que es necesario sobre el crecimiento y la composición bio-
un reactor de D=1.05 m, H= 2.10 m, Nc=14 química de cultivos de A. platensis en foto-
r.p.m, =0.2 m-1 con un volumen de trabajo biorreactores neumáticos. Para ello, se uti-
del 30 %. lizaron fotobiorreactores neumáticos tipo
columnas de burbujeo conteniendo 200 mL
de medio de cultivo Zarrouk, aplicando di-
ferentes velocidades de aireación (0,008,
0,012, 0,019 y 0,034 vvm) y utilizando ai-
readores con o sin difusores microporosos.
7DBEP
Todos los cultivos se realizaron a 28°C bajo
Efectos de la aireación una intensidad lumínica de 60 µmol s-1 m-2
y un fotoperíodo de 12 hs/12 hs (luz/oscu-

sobre cultivos de arthrospira ridad).El crecimiento fue seguido mediante
platensis en densidad óptica a 560 nm y correlacionado
fotobiorreactores con la biomasa en base seca (g PS). A los 21
días de cultivo se determinaron los conte-
neumáticos nidos de proteínas y ficocianina. Se estima-
ron parámetros cinéticos como la velocidad
ARGUMEDO MOIX, Maximiliano C. J.a; específica de crecimiento (μ) y el índice de
GUTIÉRREZ, María del C.a; GIULIETTI, Ana M.a,b; crecimiento (IC). Además, se determinaron
BUSTO, Víctor D.a,b
el coeficiente volumétrico de transferencia
a) Centro de Tecnologías Químicas, Facultad Re-
gional Buenos Aires, Universidad Tecnológica de masa referido al CO2 (kLaCO2) y volumen
Nacional total de la fase gaseosa retenida (hold-up).
El incremento paulatino de la velocidad de
b) Instituto NANOBIOTEC (UBA-CONICET), Facul-
aireación condujo a un aumento en el valor
tad de Farmacia y Bioquímica, Universidad de
Buenos Aires del kLaCO2 y del hold-up de hasta 2,6 y 4,2 ve-
ces en relación con los obtenidos a la menor
[email protected] velocidad de aireación (0,008 vvm), respec-
tivamente. Esto tuvo un efecto positivo so-
bre los cultivos de A. platensis incrementan-
Arthrospira (Spirulina) platensis es una
do la µ desde 0,203 ± 0,016 hasta 0,295 ±
cianobacteria verde azulada que puede ser
0,024 d-1. La producción de biomasa y los IC
utilizada como suplemento en alimentación
de A. platensis se incrementaron un 43% y
humana y animal, como producto nutracéu-
un 45% a las velocidades de aireación más
tico, para el tratamiento de aguas residua-
elevadas (0,019 y 0,034 vvm) en relación a
les, en industria de cosméticos y en agri-
las más bajas (0,008 y 0,012 vvm), respecti-
cultura como biofertilizante. En el diseño y
vamente. Si bien no se observaron diferen-
selección de un fotobiorreactor adecuado
cias significativas, la utilización de difusores
para el cultivo de A. platensis debe conside-
microporosos incrementó aproximadamen-
rarse no solo un adecuado suministro de luz
te un 5% la producción de biomasa. La pro-
sino un eficiente mezclado y transferencia
ducción máxima de biomasa fue de 1,27 ±
89
SESIÓN 3
0,11 g PS/L a los 21 días de cultivo utilizando Los ácidos grasos (AG) son esenciales en
difusores microporosos a una velocidad de la dieta. Los AG ω-3 (eicosapentaenoico, EPA
aireación de 0,019 vvm. Por otra parte, no y docosahexaenoico, DHA) tienen rol vasodi-
se hallaron diferencias significativas en tor- latador, desinflamatorio y de desarrollo. Los
no a los contenidos proteico y de ficociani- AG ω-3 se producen en plantas y microalgas
na de los cultivos de A. platensis bajo todas marinas. El DHA de microalgas es un pro-
las condiciones estudiadas Sin embargo, el ducto sin contaminantes, con bajo costo y
contenido proteico tendió a aumentar con el reducido impacto ambiental. Argentina im-
descenso de las velocidades de aireación. Se porta 50 ton/año de aceite de algas con 40%
puede concluir que la µ y la producción de p/p DHA. La Provincia de Santa Fe dispone
biomasa de A. platensis pueden incremen- de subproductos agroindustriales (glicerol,
tarse con el aumento de la velocidad de ai- soja) y descartes hortícolas (zanahoria, ba-
reación en fotobiorreactores neumáticos, y tata) con potencial como materias primas
que el uso de difusores microporosos podría abundantes y económicas.
redundar en un incremento significativo de El objetivo será formular medios de culti-
la biomasa controlando posiblemente el diá- vo económicos empleando subproductos y

metro de las burbujas generadas. descartes regionales como fuente de carbo-
no y nitrógeno (FCN) para producir DHA con
microalgas. Se pretende escalar el proceso,
maximizando crecimiento (XC) y rendimien-
Palabras claves: ARTHROSPIRA PLATENSIS; FO-
TOBIORREACTORES NEUMÁTICOS; AIREACIÓN; to (RC) celular, velocidad específica de creci-
AIREADOR; BIOMASA. miento (μ) y producción DHA (PD).
Se evaluó la cepa Aurantiochytriumsp.
en cultivo batch de 0,1L por 120 h (aerobio,
30°C, 150 rpm) con medio: GLC* (extracto
levadura 5 gL-1; peptona carne 5 gL-1; gluco-
8DBEP sa 35 gL-1), GLC (GLC* sin extracto levadura),
GRO (GLC sin glucosa y con glicerol 60 gL-1) y
Factibilidad de escalado MZA (GLC sin glucosa y con melaza zanaho-
para producción de ácidos ria 120 gL-1). También se evaluó en biorreac-
torbatch alimentado de 1L y 10L por 100 h
grasos ω-3 empleando (aerobio, 30°C, 300 rpm) con medios GRO y
microalgas marinas GLC. Los cultivos se cosecharon y determinó
gravimétricamente concentración de bio-
HINTERMEISTER, Emilia ; SANCHEZ, Esteban masa y aceites. La biomasa de biorreactores
a
A.a; MANUALE, DeboraL.a; TORRESI, Pablo A.a; se utilizó en procesos extractivos (sonica-
YORI, Juan C.a; BECCARIA, Alejandro J.b ción, centrifugación y/o destilación al vacío)
a) Grupo de Valorización de Descartes Agroin- y perfil de AG (cromatografía gaseosa).
dustriales (GVDA) - INCAPE, Facultad de Inge-
Para cultivos batch (0,1L) con GLC*, GLC y
niería Química, Universidad Nacional del Litoral
- CONICET.
GRO, XC fue idéntico, con similar μ (0,70-0,72
h-1) y RC (10,50-11,00 gL-1). Aunque μ fue si-
b) Laboratorio de Fermentaciones, Facultad Bio- milar (0,68 h-1) en cultivo batch con MZA, X
C
química y Ciencias Biológicas, Universidad Na- fue menor y R 3 veces inferior, denotando
C
cional del Litoral.
dificultad del microalga para incorporar FCN
[email protected]
90
SESIÓN 3
desde melaza zanahoria. La mayor PDHA se

obtuvo con GLC (2,62 gL-1) y GRO (1,84 gL-1),
siendo 4 y 10 veces menor para GLC* y MZA,
respectivamente, comparando con GLC.
En biorreactoresbatch alimentado con
GRO, μ fueron idénticas (0,20 h-1), mientras
RC para 1L (27,87 gL-1) fue más del doble que
RC para 10L (12,15 gL-1). El aumento de esca-
la 10 veces disminuyó XC y generó 3,3 veces
menos PDHA (2,14 gL-1). Esto podría mejorarse
incrementando las inyecciones de sustrato.
Para biorreactoresbatch alimentado con
GLC, el aumento de escala 10 veces mejoró μ
(0,22 a 0,74 h-1, respectivamente) y RC (4,68
a 22,63 gL-1, respectivamente). El escalado
aumentó XC e incrementó 4,6 veces la PDHA
(4,17 gL-1). Esto fue posiblemente debido a

mayor cantidad de inyecciones de sustrato.
El cultivo batch alimentado deAurantio-
chytriumsp. es promisorio. La ausencia de
extracto de levadura no afecta los paráme-
tros de cultivo y supone ahorro para el esca-
lado. Se propone hidrolizar la melaza de za-
nahoria para disponer monosacáridos libres.
El contenido de DHA superó 40% p/p de los
AG totales del microalga, siendo promisorio
para optimizar el escalado a 100L. Se evalua-
rá la PDHA para medios con otros descartes
regionales (soja, papa, batata), previa hidró-
lisis para biodisponer azucares simples.
Palabras claves: SUBPRODUCTOS;DESCARTES;

SCHIZOCHYTRIUM SP.; BATCH ALIMENTADO;
ÁCIDOS GRASOS ω-3.
91
SESIÓN 4
Conferencia Sesión 4: Procesos de

recuperación y purificación de
macromoléculas
Continuous recovery and
purification of bioproducts
on the basis of adsorption
technology
FERNÁNDEZ LAHORE, Marcelo
Department of Life Sciences and Chemistry,
Jacobs University, Bremen, Germany
Environmental and Industrial Biotechnolo-
gies, Luxembourg Institute of Technology.

SESIÓN 4 The recovery and purification of various
types of byproducts, including, but not limi-
PROCESOS DE ted to, proteins of biotherapeutic interest,
RECUPERACIÓN Y has been highly dependent on adsorption

and chromatography. Different chromato-
PURIFICACIÓN DE graphic modes are implemented for that
purpose, depending on the properties of
MACROMOLÉCULAS the target macromolecule as opposed to the
properties of the significant contaminating
species.
The traditional way of recovering and pu-
rifying bioproducts on the basis of chroma-
tography has been in batch mode. However,
in the last two decades there has been a ten-
dency to improve their base situation.
The concept of “process integration” has
been applied to chromatographic separa-
tions through the implementation of fluidi-
zed / classified beds that allowed the use
of raw raw material, even in the case of the
presence of suspended particles (cells, cellu-
lar debris, etc. .). This particular way of run-
ning a chromatographic separation presents
particular challenges, for which solutions
can be proposed today.
The concept of “process intensification”
has been applied to chromatographic se-
92
SESIÓN 4
parations by implementing sophisticated Introducción: Los tocoferoles (vitamina

schemes such as simulating motion chroma- E), potentes antioxidantes naturales, están
tography. This has allowed for continuous recibiendo una atención creciente en apli-
separations to occur. However, the proces- caciones industriales, que van desde la in-
sing of unclear raw materials is not possible dustria alimenticia, farmacéutica y hasta la
in this case. cosmética. Una de las grandes fuentes na-
Its objective is to synergize the advanta- turales de los tocoferoles (TF) es el desodo-
ges of the integration and intensification of rizado de soja (SODD), el cual se obtiene del
processes in a single operating unit, which último paso del proceso de refinación del
allows a simplified, robust and CONTI- aceite de soja crudo. Hoy en día, el consu-
NUOUS mode of operation. To do this, we mo creciente de aceite de soja está con-
are currently working on a modified version duciendo a una mayor producción de este
of fluidized beds and fibrous adsorbents, subproducto, por lo que su valorización es
which allow unconventional processing fundamental. En este trabajo se evaluó la
schemes. Our work reveals the challenges conveniencia de acoplar el proceso de sa-
that lie ahead and suggests some possible ponificación a una extracción con sistemas
avenues of research to alleviate the current micelares mixtos de bajo impacto forma-
limitations of environmental processing in dos por el surfactante no iónico Tergitol
industrial settings. 15-S-7 (Tg7) y el biosurfactanteaniónico-
ramnolípido (RL), en la recuperación de
TFs de SODD.
Metodología: 50 mg de SODD fueron
sometidos a un proceso de saponificación
con base fuerte y en caliente, en presen-
2PRPM
cia de Tg7 al 12% p/p. Luego de enfriar
Revalorización del la muestra, se adicionaron 2,00 g de so-
destilado desodorizante de lución de Tg7 al 9% p/p disuelta en NaCit
200 mM pH 5,00, y RL (0,25% p/p finales).
soja mediante la Dicha mezcla se incubó tres horas a 65 ºC,
recuperación de tocoferoles dando como resultado la formación de un
sistema micelar de dos fases acuosas. Des-
pués de la incubación, se determinaron vi-
MARTINI,Georginaa; BUSTILLO, Soledadb;
NERLI, Bibiana B.a; P. MALPIEDI, Lucianaa sualmente los volúmenes de las fases y se
a) Laboratorio de Sistemas Autoensamblados. tomaron muestras de las fases superior e
Instituto de Procesos Biotecnológicos y Quími- inferior para estimar la actividad antioxi-
cos (IPROBYQ). Universidad Nacional de Rosario dante (AA) medida por ABTS, el conteni-
(UNR) - CONICET. Suipacha 531, 1er piso, Rosario do recuperado de TFs (HPLC), y eficiencia
– Santa Fe. CP: 2000. de encapsulado, mediante una centrifu-
b) Grupo de Investigaciones Bioquímicas y Mo- gación con filtros de 10 KDa, y posterior
leculares (GIBYM), IQUIBA-NEA CONICET, Univer- análisis de AA y HPLC. Para fines compara-
sidad Nacional del Nordeste, Corrientes, Argentina tivos, también se llevó a cabo la reacción
[email protected] de saponificación seguida de extracción
convencional con solventes, a la cual se le
realizaron los mismos análisis que los des-
criptos previamente.
93
SESIÓN 4
Resultados:La comparación entre am- 3PRPM

bos protocolos de saponificación (conven-
cional y acoplada a extracción con mice-
Purificación de una nueva
las mixtas) se realizó empleando del Test enzima fibrinolítica
de Fisher, basado en la diferencia mínima secretada por
significativa (LSD). Dicho análisis mostró
que los valores de AA obtenidos para las Hornodermoporusmartius
muestras de fase micelar superior (FS) LBM 224
(2,83 mmoles ET/g SODD) fueron signi-
ficativamente superiores los obtenidos
ACOSTA, Gabriela A.a,b; FONSECA, María I.a,b;
para las muestras correspondientes a la FARIÑA, Julia I.c; ZAPATA, Pedro D.a,b
saponificación convencional (1,65 mmo-
les ET/g SODD). Asimismo, se observó que de Ciencias Exactas Químicas y Naturales. Insti-
prácticamente toda la AA fue recuperada tuto de Biotecnología Misiones “Dra. María Ebe-
en dicha fase, dado que el rendimiento de Reca” (INBIOMIS). Laboratorio de Biotecnología
extracción fue superior al 95%. También Molecular. Misiones, Argentina.

se corroboró que, con un valor de signifi-
b) CONICET. Buenos Aires, Argentina
cancia del 5%, la extracción individual de
cada TF fue superior en la FS del sistema c) Laboratorio de Micodiversidad&Micoprospec-
micelar, con rendimientos superiores al ción. PROIMI-CONICET. Tucumán, Argentina.
92%. Finalmente, los análisis de eficiencia [email protected]
de encapsulado demostraron que el 93%
de los tocoferoles recuperados en la FS se
encontraban asociados a las micelas. Con- Las enzimas fibrinolíticas producidas por
clusiones:Los resultados obtenidos permi- hongos han cobrado gran importancia para
ten concluir sobre la factibilidad de usar el tratamiento de enfermedades del sistema
sistemas micelares mixtos como método cardiovascular. Nuestro grupo de trabajo ha
extractivo alternativo a la recuperación de evaluado la capacidad Hornodermoporus-
TFs de SODD. Dicho método tiene como martius LBM 224 de producir enzimas ex-
ventaja adicional el hecho de que la ma- tracelulares con actividad fibrinolítica (Fb),
yoría de los TFs se encuentran encapsu- lo cual ofrece una ventaja a la hora de su
lados en las micelas, lo cual contribuye a recuperación y purificación, y ha optimizado
su estabilización y mejora en la capacidad los parámetros de cultivo para la producción
antioxidante. enzimática de interés. El objetivo de este
trabajo fue purificar la enzima fibrinolítica
producida por H. martius LBM 224.
Palabras claves: SISTEMAS MICELARES MIXTOS; La purificación de la enzima fibrinolítica

EXTRACCIÓN; TOCOFEROLES. se realizó a partir del sobrenadante de culti-
vo en medio líquido optimizado (contenien-
do en g/L: glucosa, 35; extracto de carne,
5; NaCl, 2; KH2PO4, 0,5 y MgSO4·7H2O, 0,5)
a los 21 días de incubación a 28 °C, el cual
se separó del micelio por centrifugación a
4.400 x g durante 10 min a temperatura am-
biente. El sobrenadante obtenido se filtró
94
SESIÓN 4
utilizando un filtro de jeringa (Biofil™) con de purificación de 3,9 y un rendimiento del

una membrana de fluoruro de polivinilide- 35,47 %. Este método de purificación resultó
no de 0,22 µm obteniéndose un sobrena- ser sencillo, económico y rápido, ya que no
dante enzimático libre de micelio y esporas. requiere equipos complejos y utiliza bajas
A continuación, se realizó una precipita- proporciones de solvente, siendo una buena
ción en dos etapas. En la primera etapa al alternativa para la purificación de la enzima
sobrenadante se le adicionó 1 volumen de fibrinolítica secretada por H. martius LBM
acetona fría (-18 °C) y se incubó con agita- 224.
ción constante en baño de hielo durante 1
h. Se centrifugó a 10.000 x g a 4 °C durante Palabras claves: ENZIMAS FIBRINOLÍTICAS; PU-
30 min y los precipitados obtenidos en RIFICACIÓN; AGARICOMICETE; HORNODERMO-
esta primera etapa se resuspendieron en PORUS MARTIUS.
agua destilada (P1) para su evaluación. Por
otro lado, a los sobrenadantes obtenidos
de la primera precipitación se les adicionó
nuevamente 1 volumen de acetona fría bajo
las condiciones anteriormente descriptas.

4PRPM
Los precipitados obtenidos en esta segunda
etapa se resuspendieron en agua destilada Producción de la enzima
(P2) para su evaluación, mientras que los
sobrenadantes se descartaron. La fracción
recombinante Lactato
P2 se separó mediante ultrafiltración Oxidasa a escala de
(MWCO 30 kDa) utilizando columnas Pierce laboratorio
Concentrator (ThermoScientificTM). Las dife-
rentes fracciones obtenidas: sobrenadante
MANASSERO, Agustinaa; AMARANTO, Marillaa;
y cada etapa de recuperación/purificación PERNIGOTTI, Martínb; BARRA, José La; GODINO,
parcial, se evaluaron mediante SDS-PAGE Agustinaa.
y la determinación de la cantidad de pro- a) CIQUIBIC–CONICET, DQBRC, FCQ, UNC, Córdoba,
teínas se realizó utilizando el reactivo de Argentina
Bradford (Sigma Aldrich®) con albúmina de
suero bovino como estándar. La actividad b) Wiener Laboratorios SAIC, Riobamba 2944,
Rosario, Argentina
Fb se determinó mediante el método de de-
gradación de fibrina de Wang et al. (2011) [email protected]
midiendo la absorbancia del producto de
degradación de la fibrina a 275 nm. Las uni-
dades de actividad enzimática, expresadas La enzima Lactato Oxidas (LOX) es am-
como unidades de degradación de fibrina pliamente utilizada en la formulación de
(FU), se definen como el incremento de 0,01 kits, biosensores y reactivos diagnósticos
unidades de absorbancia a 275 nm por min destinados a medir la concentración de lac-
de reacción. tato en muestras biológicas. El lactato es un
biomarcador importante para el diagnóstico
Como resultado se obtuvo una enzima clínico. La concentración de lactato en san-
fibrinolítica purificada a homogeneidad, evi- gre fuera del rango normal puede ser indica-
denciada por la presencia de una sola ban- tiva de acidosis láctica causada por hipoxia
da de 29 kDa en SDS-PAGE, con actividad tisular u otras enfermedades subyacentes
Fb específica de 531,69 FU/mg, un factor como enfermedades hepáticas, anemia o
95
SESIÓN 4
sepsis. En este trabajo, se propuso desarro- proteína durante el proceso de liofilizado.

llar el proceso biotecnológico a escala de Los excipientes analizados fueron diferentes
laboratorio para la producción de la enzima azúcares en distintas concentraciones y en
LOX de Aerococcusviridans recombinante. algunos casos, combinados con un políme-
Diseñamos un vector de expresión para soro. Se midió la funcionalidad de la proteína
breexpresar la LOX fusionada a una etiqueta antes y después del proceso de liofilizado. La
de afinidad en Escherichiacoli. En principio, funcionalidad permaneció prácticamente in-
con el objetivo de optimizar las condiciones tacta en una de las formulaciones probadas
de expresión se analizaron dos inductores, luego de la liofilización. Además, se observó
IPTG (0,4mM) o Lactosa (0,17% o 0,34%). que luego de 5 meses de haberse liofilizado
La proteína fue sobreexpresada con ambos la proteína y habiéndose almacenado a -20
inductores y los niveles de expresión obte- sin exposición a la luz, la funcionalidad de la
nidos con lactosa 0,34% fueron mayores a proteína se mantuvo inalterable. Además, la
los obtenidos con IPTG, permitiendo el rem- formulación a base de la enzima liofilizada
plazo de este último por un inductor más fue analizada por Wiener Laboratorios SAIC
económico como la lactosa. Posteriormen- de acuerdo a sus propios parámetros de ca-

te, la LOX recombinante fue purificada exi- lidad mostrando resultados alentadores. En
tosamente mediante cromatografía de afini- conclusión, la optimización de las condicio-
dad, obteniéndose aproximadamente 30-35 nes de crecimiento, inducción, purificación
mg/L de cultivo, con un alto grado de pureza. y formulación nos permitió producir una en-
Con la finalidad de caracterizar la LOX pro- zima LOX funcional en nuestro laboratorio.
ducida en nuestro laboratorio, analizamos la
funcionalidad y estabilidad de la misma en
el kit diagnóstico Lactate (cód. 1999795) de
Wiener Laboratorios SAIC. Los ensayos fue-
ron realizados utilizando la enzima LOX co- Palabras claves: PROTEÍNAS RECOMBINANTES;
ENZIMAS DE USO DIAGNÓSTICO; LACTATO OXI-
mercial provista por el kit como referencia. DASA; PROCESO BIOTECNOLÓGICO.
Los resultados obtenidos en el ensayo de
funcionalidad mostraron que la reactividad
del sistema utilizando la LOX producida en
nuestro laboratorio es equivalente a la del
kit comercial. En los ensayos de estabilidad
(estabilidad acelerada a 37°C), se observó 5PRPM
que la reactividad del kit utilizando la LOX Cultivo celular de alta
producida en nuestro laboratorio fue com-
parable con la comercial hasta el día 10. Lue-
densidad para producir la
go, la perdida de funcionalidad del kit for- enzima Lactato Oxidasa
mulado con nuestra LOX fue más acelerada
que la del kit formulado con la proteína co-
recombinante
mercial. La pérdida de funcionalidad fue del
AMARANTO, Marilla; GODINO, Agustina;
16,8% para la LOX recombinante y del 1,5% BARRA, José L.
para la comercial luego de tres semanas de CIQUIBIC–CONICET, DQBRC, FCQ, UNC, Córdoba,
incubación. Finalmente, nos propusimos ob- Argentina
tener un formulado a base de la enzima lio- [email protected]
filizada. Se analizaron varias formulaciones
conteniendo excipientes para estabilizar la
96
SESIÓN 4
Las técnicas de cultivo de alta densidad la etapa de alimentación, etapa durante la

celular (HCDC) son de relevancia para la cual la glucosa se mantuvo a una concen-
producción de proteínas recombinantes. tración menor que 1gr/L. En las etapas de
La productividad global de una proteína re- batch y batch-alimentado la densidad ce-
combinante depende tanto de la densidad lular aumentó exponencialmente. La dis-
celular como del rendimiento del producto minución de la temperatura a 30°C en la
celular específico. Los HCDCs permiten al- etapa batch-alimentado permitió una dis-
canzar altas concentraciones de biomasa minución en la tasa de crecimiento con el
maximizando la cantidad de producto en fin de evitar limitaciones en el oxígeno dis-
un volumen dado dentro de un tiempo de- ponible. Al finalizar el proceso, una bioma-
terminado. El objetivo de este trabajo fue sa final de 26 g/l (DO600=60) fue alcanzada.
utilizar la tecnología de HCDCpara producir Luego de la inducción, se tomaron mues-
en Escherichiacolila enzima Lactato Oxidasa tras cada 2 horas para analizar el nivel de
(LOX) recombinante, la cual es ampliamente expresión de proteína, alcanzando un va-
utilizada en la formulación de biosensores lor de 290 mg/L luego de 8 horas post-in-
y kits de diagnóstico humano. Para llevar a ducción. Al finalizar el cultivo las células
cabo este objetivo, se realizó un cultivo en fueron cosechadas y la enzimaLOX recom-

batch-alimentado utilizando un biorreactor binante fue purificada mediante croma-
con capacidad para 2 L de cultivo (BIOSTAT tografía de afinidad con un alto grado de
A, Sartorius). El procedimiento consistió en pureza y en forma activa. En conclusión, se
tres etapas: 1. Etapa batch: la cepa de E. co- logró producir la enzima recombinante de
liproductora de la LOX fue inoculada en el uso diagnóstico LOX, realizando un cultivo
biorreactor a una densidad celular (DO600) de en batch-alimentado llegando a densida-
0,1. El batch se realizó en medio mínimo M9 des celulares considerables. Optimizando
modificado con glucosa (10g/L) a 37°C du- las condiciones tanto en las etapas de cre-
rante 8,5 horas. 2. Etapa batch-alimentado: cimiento como de inducción esperamos
una vez que la glucosa en el medio de cultivo lograr mayores rendimientos de biomasa
fue consumida, se suministró una solución y de producto final.
de alimentación con glucosa (700g/L) a una
tasa constante. Esta etapa fue realizada a 30
°C durante12,5 horas. 3. Etapa de inducción:
la expresión de LOX fue inducida con lacto-
sa (0,34%) a 22°C durante 8 horas. Duran-
te todo el proceso el pH fue controlado a
6,8 a través de la adición de soluciones de Palabras claves: CULTIVO CELULAR DE ALTA
DENSIDAD; PROTEÍNAS RECOMBINANTES; LAC-
NH4OH al 25% (p / v) o H3PO4 3 M. Los TATO OXIDASA.
niveles de oxígeno disuelto fueron contro-
lados al 20% mediante el control tanto de
la velocidad de agitación como del ingreso
de aire. Se tomaron muestras del cultivo
periódicamente, analizando la concentra-
ción de glucosa, la densidad celular (DO600)
y el peso celular seco. La glucosa fue con-
sumida completamente a las 8,5 horas de
cultivo en batch lo que indicó el fin de la
fase en sistema cerrado y el comienzo de
97
SESIÓN 4
6PRPM dad S2 que asiste en la fusión a membrana.

La producción de la proteína S se logra en
Proceso biotecnológico líneas celulares de mamíferos (CHO y HEK)
innovador para escalar pero con bajos rendimientos y altos costos.
la producción de proteína Nuestro grupo de investigación viene tra-
Spike de SARS-CoV-2 bajando intensamente en el desarrollo de
una nueva plataforma biotecnológica basa-
da en el sistema baculovirus-larvas de insec-
SMITH, Ignacio a, b; Mc CALLUM, Gregorio J.a,b;
BIRENBAUM, Joaquín a,b; TARGOVNIK, Alexan-
to y atractiva porque no requiere del uso de
dra M.a,b; WOLMAN, Federico J. a,b; ALONSO, grandes cantidades de medios de cultivo ni
Leonardo G.a,b; MIRANDA, María V.a,b de sofisticados equipos (biorreactores). Las
a) Instituto de Nanobiotecnología (NANOBIO- larvas de lepidópteros, considerados plagas
TEC), UBA-CONICET Junín 956 6ª piso (1113) de la región, actúan como eficientes “biofá-
CABA, Argentina bricas” de proteínas.
b) Cátedra de Biotecnología, Facultad de Farma- El objetivo de este trabajo fue desarrollar
cia y Bioquímica, Universidad de Buenos Aires, un proceso para la producción de proteína S

Junín 956 6º piso (1113) CABA, Argentina en su estado prefusión y trimérica en larvas
[email protected] de Rachiplusianu para su fácil escalado y uso
en diferentes aplicaciones en el marco de la
pandemia.
A partir del primer caso informado en
Para esto se construyó un baculovirus re-
Wuhan, China en diciembre de 2019, gran
combinante basado en Autographacaliforni-
parte de la comunidad científica mundial se
ca, (AcMNPV-S) con la secuencia codificante
ha enfocado en aportar soluciones frente a
para S en su forma prefusión clonada bajo
la pandemia que hoy sigue vigente. La se-
el promotor de poliedrina y tras el péptido
cuencia genética del SARS-CoV-2 se publicó
señal gp64. La secuencia no poseía el sitio
en enero de 2020 y ha permitido acelerar el
de clivaje para furina y contenía una etique-
desarrollo de métodos de diagnóstico, tra-
ta de 6xHis para facilitar su purificación por
tamientos y vacunas. Se ha puesto especial
IMAC. Una vez obtenido el inóculo en culti-
foco en la proteína Spike (S) expuesta en la
vo celular Sf9, se infectaron larvas con 5x105
superficie del SARS-CoV-2, el virus causante
UFP/larva y la cosecha de la proteína S se
de COVID-19, ya que es clave en la unión del
realizó al día 4 post infección. Los extractos
virus al receptor celular y la progresión de la
se obtuvieron usando un homogenizador
infección se frena si nuestro sistema inmune
de paletas y se clarificó a 4ºC por filtración
reacciona contra esta proteína. En el último
(125 um y 3 um). Luego de probar diferentes
año uno de los desafíos para la Biotecnolo-
condiciones se optimizó el proceso donde se
gía fue brindar métodos que permitan dis-
equilibró la matriz cromatográfica en buffer
poner de alta cantidad y calidad de proteí-
conteniendo 80 mM de imidazol y se eluyó la
nas de SARS-Cov-2.
proteína S con 500 mM de imidazol. Se reali-
La proteína S es estructuralmente com- zaron 15 lotes productivos y se estableció un
pleja, constituye una glicoproteína de 500 rendimiento de 15 ug/g de larva. La proteína
kDa aprox., homotrimérica y cada monóme- S producida en R. nu resultó ser altamente
ro está compuesto por una cabeza globular, inmunorreactiva y con ella se logró producir
una subunidad S1 donde se encuentra el do- sueros equinos hiperinmunes de alto título
minio de unión al receptor (RBD) y la subuni-
98
SESIÓN 4
neutralizante. Además, se utilizó como único nas, debido al alto rendimiento que presen-
antígeno para el desarrollo de kits de ELISA. tan. Pero todo producto natural puede ser
Finalmente, esta tecnología fue transferida y una fuente potencial de pectinas. Opuntia
escalada con éxito en la empresa (Start Up) ficus indica es un arbustoperteneciente a la
TREBE BIOTECH instalada en Pergamino, Bs. familia de las Cactáceas, que se desarrolla
As., donde actualmente se concentra su pro- en regiones áridas y semiáridas. Esta espe-
ducción. cie está ampliamente distribuida en el norte
argentino, siendo notable en la región del
sudoeste chaqueño, donde crece de forma
silvestre. A pesar de ser un recurso abun-
Palabras claves: SARS-COV-2; SPIKE;
BACULOVIRUS; LARVAS DE LEPIDÓPTEROS. dante en la zona, se encuentra subexplota-
do. En esta oportunidad, centramos nuestro
interés en los frutos de O. ficus indica como
una potencial fuente de pectinas. Dado que
son muchos los factores que afectan a las ca-
racterísticas de las pectinas obtenidas, como
ser: tipo de materia prima, factores ambien-

7PRPM tales, estado de la materia prima, procesos
Evaluación de pectina de extracción; el objetivo de este trabajo fue
evaluar si el proceso de deshidratación de
obtenida a partir de las la cáscara de estos frutos afecta a la pectina
cáscaras de tunas obtenida. Para ello se trabajó con la cáscara
de frutos frescos y la cáscara deshidratada.
SILVA, Fernanda M.a; MICHALUK, Ariela; PÉREZ La deshidratación se llevó a cabo en estufa
ZAMORA, Cristinab con circulación de aire (24h, 60 °C). La ex-
a) Universidad Nacional del Chaco Austral (UN- tracción se realizó mediante hidrólisis ácida,
CAUS). Comandante Fernández N°755. P. R. Sáe- a pH 2, con calentamiento (85 °C) durante
nz Peña, Chaco, Argentina. 40 minutos y se precipitó con etanol 96% en
b) Instituto de Investigaciones en Procesos Tec- una relación 1:4. Para la caracterización se
nológicos Avanzados (INIPTA). Comandante determinó el rendimiento de extracción en
Fernández N°755, primer piso. P. R. Sáenz Peña, base seca, el peso equivalente (PE), acidez
Chaco, Argentina. libre (AL), porcentaje de metoxilo (%MET),
[email protected] grado de esterificación (GE) y porcentaje de
ácido anhidro galacturónico (AAG). El ren-
dimiento obtenido a partir de las cáscaras
Las pectinas son polisacáridos que for- deshidratadas y de las cascaras frescas fue
man parte de la pared celular y la laminilla del 14%, mientras que para las cascaras fres-
media de las células vegetales, aportando cas fue de 8%. Las pectinas obtenidas de la
rigidez y cohesión a los tejidos. Estas macro- cáscara deshidratada, presentaron un mayor
moléculas presentan una gran variedad de PE, igual AL y valores menores de %MET, GE
aplicaciones, en la industria de alimentos y AAG.El análisis estadístico (ANOVA) refleja
como gelificante y espesante, y en la indus- que no hay diferencias significativas para los
tria farmacéutica como prebiótico, agente parámetros analizados, excepto en el rendi-
antioxidante, anticanceroso y antimicro- miento de extracción, donde a partir de la
biano. Actualmente la principal fuente de cáscara deshidratada se obtiene alrededor
extracción es la cascara de cítricos y manza- de un 75% más de pectina que empleando
99
SESIÓN 4
la cáscara fresca. Se puede concluir que el tó rendimientos de polisacáridos superiores

proceso de deshidratación de las cáscaras a los de otras cepas de Ganodermaspp. (Vi-
no afecta las propiedades fisicoquímicas de ceconte y col. 2021) así como tiempos de
la pectina obtenida, obteniendo mejor ren- cultivo menores. Los objetivos de este tra-
dimiento. bajo fueron la extracción y purificación de
los polisacáridos de esta cepa a los fines de
caracterizar el producto y compararlo con
los polisacáridos de las cepas medicinales G.
Palabras claves: OPUNTIA FICUS INDICA; PRO- lucidum y G. lingzhi.
CESO DE EXTRACCIÓN; PECTINA DE FRUTA.
Los polisacáridos de G. sessile E47 se ais-
laron del sobrenadante del cultivo líquido
mediante precipitación con el agregado de
4 volúmenes de etanol y posterior centrifu-
gación. Luego de su liofilización, el extracto
crudo fue sometido a desengrasado en frío
8PRPM con acetona. Las proteínas se eliminaron del

extracto por precipitación con ácido triclo-
Aislamiento y purificación roacético 24% p/v (1:1). Posteriormente, el
de polisacaridos del cultivo sobrenadante fue dializado contra agua co-
rriente y destilada en membrana de diálisis
líquido de Ganoderma (cut-off 14000 Da). El perfil de polisacáridos
Sessile se obtuvo mediante separación del extrac-
to en una columna cromatográfica de inter-
VICECONTE, Fátima R.a, b; VELA GUROVIC, María cambio aniónico (DEAE-celulosa, fase móvil:
S.a, b agua destilada y NaCl 0.05 a 0.5 M). Las frac-
a) Centro de Recursos Renovables de la Zona Se- ciones obtenidas se concentraron, dializa-
miárida (CERZOS-UNS-CONICET). Bahía Blanca ron y liofilizaron para obtener su peso seco,
y finalmente se sometieron a purificación
b) Departamento de Biología, Bioquímica y Far-
en cromatografía de exclusión por tamaños
macia, Universidad Nacional del Sur (BByF UNS).
Bahía Blanca. (Sephadex G-200, fase móvil: NaCl 0.2 M). El
monitoreo de la presencia de carbohidratos
[email protected] en las alícuotas recolectadas se realizó en
todos los casos mediante reacción con fe-
nol- ácido sulfúrico y posterior medición de
El género Ganoderma incluye a una va-
la absorbancia a 490 nm.
riedad de especies de hongos basidiomi-
cetes mundialmente apreciados por sus El perfil de elución obtenido en la colum-
numerosas propiedades medicinales, entre na de DEAE-celulosa mostró la presencia de
las cuales se destaca la inmunomodulación, al menos tres tipos diferentes de polisacári-
actividad principalmente atribuida a los po- dos, similar a lo reportado para G. lucidum
lisacáridos. Entre los métodos de cultivo de (Li y col., 2016), con un rendimiento total de
hongos, la fermentación en estado líquido 53.3% de polisacáridos purificados respecto
resulta efectiva para la producción de estas al extracto crudo determinado por gravime-
macromoléculas debido a su rapidez y bue- tría. Las fracciones evidenciaron la presen-
nos rendimientos (Zhou y col., 2012). En es- cia de polisacáridos de alto peso molecular
tudios previos, la cepa G. sessile E47 presen- mediante cromatografía de filtración en gel.
100
SESIÓN 4
Los resultados obtenidos demuestran que emplea PEG homo-bifuncional de 2 KDa en

exceso, conduciendo a un bioconjugado muy
el perfil de polisacáridos de G. sessile E47,
heterogéneo, en el que las subunidades de
resultó similar a los perfiles de las especies
medicinales. la enzima se encuentran entrecruzadas de
forma covalente. El objetivo de este trabajo
Palabras claves: POLISACARIDOS; GANODERMA es estudiar la conjugación de rhα-Gal pro-
SESSILE; CULTIVO LIQUIDO; PURIFICACION. ducida en células CHO-K1 empleando mPEG
mono-funcional de elevado peso molecular
que no conduce al entrecruzamiento de las
subunidades enzimáticas.
Para ello, en primer lugar se determinó la
9PRPM actividad enzimática (AE) de la enzima pura,
la que se empleó como producto de partida,
Pegilacion de obteniendo un valor de 1,01E+06 (U.mg-1).
alfa-galactosidasa Luego se llevaron a cabo las reacciones de
PEGilación con mPEG-NHS butirato de 30
recombinante humana
KDa (mPEG-SBA), en PBS pH 8,0 a 25 °C,

(rha-Gal) empleando en una relación molar rhα-Gal:mPEG 1:10.
Tanto la enzima como las reacciones de
mPEG-butirato de NHS conjugación se evaluaron por SEC-HPLC con
detección a 280 nm y por SDS-PAGE. Con el
MENEGON, Malena,b, VAILLARD, Victoria A.a, objetivo de optimizar la reacción de conju-
RODRIGUEZ, María C.b, CEAGLIO, Natalia A.b,
VAILLARD, Santiago E.a.
gación se tomaron alícuotas a distintos tiem-
pos y se analizaron por SDS-PAGE. Además,
a) Instituto de Desarrollo Tecnológico para la se midió la AE remanente en el crudo de
Industria Química (INTEC), UNL-CONICET, Santa
reacción,sin observar cambios en su valor.
Fe, 3000, Argentina.
En estas condiciones, se alcanzó conversión
b) Centro Biotecnólogico del Litoral (CBL, FBCB), completa de rhα-Gal luego de 6 h de reac-
UNL, Santa Fe, 3000, Argentina. ción a expensas de la formación de un 60%
[email protected] de productos diPEGilados. La formación de
productos monoPEGilados, que otorgan ho-
mogeneidad al producto, alcanzó un máxi-
La bioconjugación con metoxi-polieti- mo del 40% luego de 20 min. A partir de ese
lenglicol (mPEG), o PEGilación, puede corre- momento, sólo se observó el incremento de
gir varios inconvenientes asociados al uso productos de sobre-PEGilación, por lo que
terapéutico de proteínas recombinantes yde se estableció como tiempo óptimo un pe-
otros biofármacos. Las drogas conjugadas a ríodo de 20 min.Luego de la conjugación, se
mPEGexhiben mejoras en sus propiedades comenzó la puesta a punto de la purificación
químicas, bioquímicas y farmacológicas y un del conjugado. La optimización se basó en el
comportamiento in vivo mucho más favora- uso de la metodología empleada para puri-
ble. ficar rhα-Gal a partir de sobrenadantes de
En la actualidad se encuentra en estu- cultivo teniendo en cuenta los cambios es-
dio clínico de fase III una versión PEGilada perados en las propiedades de la proteína,
de rhα-Gal producida en células de tabaco principalmente carga e hidrofobicidad. En
(PRX-102, PEGunigalsidasa alfa®), donde se primer lugar, se realizó una cromatografía de
101
SESIÓN 4
intercambio aniónico (IEX), en la que se logró La economía circular tiene por objeto
separar la proteína libre y la fracción conju- promover una gestión integral de residuos
gada del exceso de mPEG-SBA remanente en como estrategia sustentable para el apro-
el crudo de reacción, que podría interferir vechamiento de desechos de un proceso
en la siguiente etapa5. Como segundo paso productivo. En este sentido, la industria
de purificación, se empleó una resina de in- cervecera es una actividad económica que
teracción hidrofóbica (HIC), observándose se caracteriza por la generación de gran-
un enriquecimiento de la proteína PEGilada des volúmenes de subproductos que pue-
en relación a la proteína no PEGilada en las den ser aprovechados. De acuerdo a resul-
primeras fracciones de elución. Si bien hasta tados de una encuesta realizada a plantas
el momento aún no se han podido separar cerveceras, el excedente de levaduras
completamente ambas especies, estudios constituye el segundo residuo más impor-
preliminares indicarían que la AE de la pro- tante que genera inconvenientes para su
teína conjugada no diferiría con respecto disposición final. La pared de las levaduras
al producto de referencia ni a la versión en Saccharomycescerevisiae contiene un 40%
evaluación clínica, aunque exhibiría un ca- de 𝛽-glucanos, polímeros con alto poten-

rácter más homogéneo, lo que resulta una cial para ser utilizados como aditivo fun-
propiedad altamente deseable en un desa- cional en alimentos. La actividad biológica
rrollo de tecnología de PEGilación. de estos polímeros está siendo estudiada
ya que hay indicios de que tienen activi-
dad prebiótica.
Palabras claves: PEGILACIÓN; BIOCONJUGA- El objetivo de este trabajo fue caracte-
CIÓN; GALACTOSIDASA A; ENFERMEDAD DE rizar mediante espectroscopia infrarroja
FABRY. de reflectancia total atenuada (ATR-FTIR)
el extracto de 𝛽-glucanos obtenido a par-
tir de paredes de levaduras cerveceras. Se
partió del descarte de crema de levadura
proveniente de una planta cervecera de
10PRPM la Ciudad de La Plata (S. cerevisiae SafeA-
leS05, Fermentis, estilo Golden Ale). La ex-
Caracterización tracción de los 𝛽-glucanos se realizó me-
estructural por ATR-FTIR diante autolisis (pH 5.0, 50°C durante 48h
y 80°C, 15 min en agitación), incubación
de 𝛽-glucanos obtenidos de con NaOH (1M, 80ºC, 2h en agitación),
paredes de levaduras centrifugación, incubación con ácido acé-
tico (1M, 2h, 80ºC), lavado y secado. Se
cerveceras verificó la ausencia de azúcares simples
por cromatografía en capa fina y se cuan-
PIERMARIA J., RIVERO S., MEDRANO M. tificó el rendimiento mediante el método
Centro de Investigación y Desarrollo en Crio- de antrona. El polímero obtenido se ana-
tecnología de los Alimentos, CIDCA (CONI- lizó mediante ATR-FTIR a fin de identificar
CET - UNLP - CIC ) Calle 47 y 116 s/n La Plata, sus principales grupos funcionales.
A partir de las etapas descritas se obtu-
[email protected] vo un polímero con un rendimiento de 800
mg de polvo seco cada 100 ml de levadura.
102
SESIÓN 4
Del análisis espectral obtenido por ATR- 11PRPM

FTIR se comprobó que los espectros de los
β-glucanos obtenidos son compatibles con
Método para la extracción
los de β-glucanos comerciales descritos en de RNA basado en el uso
bibliografía. Se identificaron los picos ca- nanopartículas
racterísticos en la región comprendida en-
tre 4000-3000 cm−1 (adscrito a los modos magnéticas
vibracionales de estiramiento simétrico y
asimétrico de los grupos O-H característi- CAPRIOTTI, Nataliaa,b; ONS, Sheilaa,b; TRAVER-
cos del polímero), 3000-2840 cm−1 (asig- SO, Lucilaa,b; ROMANOWSKI, Víctor b,c; PIDRE,
Matiasb,c; FERRELLI, M. Leticiab,c; LOPEZ, M. Flo-
nado a los modos de vibración simétricos rencia b,c; AMORÓS, Leslieb,c; MENDOZA ZELIS,
y antisimétricos de los grupos CH); región Pedrob,d; JUNCAL, Lucianab,d; DE SOUSA, Elisa-
1285-800 cm−1 (1040), correspondiente a b,e
; SCHILARDI, Patriciab,e; LILLIO, Cristianb,e;
las uniones C-O-C y C-O de los anillos de LAVORATO, Gabrielb,e; VERICAT, Carolinab,e; y
FONTICELLI, Marianob,e; RODRIGUEZ TORRES,
D-glucosa y de las uniones glicosídicas. Claudiab,d
Estos resultados permitieron concluir a) Centro Regional de Estudios Genómicos (Fa-
que es factible obtener un polímero com- cultad de Ciencias Exactas-UNLP)

patible con 𝛽-glucanos con un grado de
pureza aceptable a partir del descarte de cas y Técnicas
crema de levaduras proveniente de una
cepa comercial utilizada para la elabora- c) Instituto de Biotecnología y Biología Molecu-
ción de cerveza. El método de extracción lar (CONICET/UNLP)
y purificación no exhibió complejidades, si d) Instituto de Física de La Plata (CONICET/UNLP)
bien se debería adaptar su producción a
e) Instituto de Investigaciones Fisicoquímicas
mayor escala empleando tecnologías eco Teóricas y Aplicadas (CONICET/UNLP)
compatibles. La relevancia de este trabajo
reside en la importancia de encontrar apli- [email protected]
caciones alternativas a este subproducto
que incrementen su valor agregado y mi-
El aislamiento y purificación de RNA de
nimicen el impacto ambiental de su dispo-
calidad es un paso fundamental para asegu-
sición al ambiente.
rar una alta especificidad y sensibilidad en
la detección, cuantificación y diagnóstico de
enfermedades por RT-qPCR. Los métodos
Palabras claves: 𝛽-GLUCANOS, LEVADURAS, de obtención de ácidos ribonucleicos de-
ATR-FTIR. ben ser robustos y de alto rendimiento con
alta capacidad de fabricación y distribución.
En la actualidad, la mayoría de los kits co-
merciales utilizados son costosos, poseen a
menudo múltiples componentes que no son
fácilmente reemplazables y su suministro no
se puede garantizar dado que son impor-
tados. Además, algunos de ellos requieren
de equipamiento sofisticado, no siempre
disponibles en los laboratorios de investiga-
ción y diagnóstico. Por ende, la metodología
103
SESIÓN 4
disponible no ofrece suficiente flexibilidad y 12PRPM

disponibilidad cuando se trata de una gran
epidemia o una pandemia, como lo es la de
Purificación e
COVID-19. El objetivo del trabajo es propor- identificación de péptidos
cionar un protocolo de extracción de RNA de chañar con actividad
basado en perlas magnéticas de sílice de
bajo costo, independiente de equipamiento antioxidante y
sofisticado y de producción nacional. El pro- anticoagulante
cedimiento de extracción por este método
incluye etapas de inmovilización rápida y
OZÓN, Brenda; GEIER, Florencia; SAMAN,
eficiente de las moléculas de RNA sobre la Candela; ROSSOTTI, Martina; CLAVER, Santiago;
superficie de las nanopartículas y la poste- OBREGÓN, Walter D.; COTABARREN, Juliana
rior aplicación de campos magnéticos lo cual Centro de Investigación de Proteínas Vegetales
permite separar de forma rápida y eficiente (CIPROVE), Facultad de Ciencias Exactas, Univer-
los ácidos nucleicos evitando pasos de cen- sidad Nacional de La Plata, La Plata, Buenos Ai-
trifugación. El cambio en la concentración res, Argentina.

de sales en el medio permite una elución [email protected]
eficiente para los posteriores pasos de am-
plificación por el método de elección. Se han
realizado pruebas de extracción en distintas
Las especies reactivas de oxígeno y los ra-
muestras biológicas: tejidos provenientes de
dicales libres tienen efectos en muchas mo-
insectos, línea celular de pulmón y muestras
léculas en el cuerpo humano, como el ADN,
de hisopado oro- y nasofaríngeos de pa-
los ácidos grasos y las proteínas. En este sen-
cientes sospechados de tener coronavirus;
tido, los compuestos antioxidantes han ga-
se obtuvieron niveles de rendimiento y ca-
nado interés debido a su posible aplicación
lidad de RNA similares a los kits disponibles
terapéutica en múltiples patologías, desde
comercialmente y además hemos logradoel cáncer hasta la malaria, hipertensión y
niveles de Ct (-Cyclethreshold-) igualables
trastornos de la sangre. Además, la búsque-
por RT-qPCR. En esta presentación se descri-
da de péptidos de origen alimentario con
birán los antecedentes de esta metodología,
actividad anticoagulante ha ganado interés
el estado actual del proyecto y las perspec-
debido a su actividad biológica, baja toxici-
tivas de implementación en laboratorios de
dad y facilidad para ser metabolizados por el
diagnóstico y de biología molecular. cuerpo humano. G. decorticans es un árbol
caducifolio xerófilo (conocido como chañar)
generalmente utilizado en la medicina tra-
dicional aunque escasamente explorado en
Palabras claves: ÁCIDO RIBONUCLEICO; cuanto a su contenido proteico. El presente
DIAGNÓSTICO; PURIFICACIÓN; NPM.
estudio informa del aislamiento, purificación
e identificación de péptidos antioxidantes y
anticoagulantes de chañar (GdAPs).
Se preparó un extracto crudo procesan-
do 10 g de semillas de chañar con 100 ml
de buffer Tris-HCl 0,1 M (pH 7,5) y se incu-
bó durante 120 min a 4ºC en agitación. La
suspensión fue filtrada, centrifugada y lue-
104
SESIÓN 4
go se recolectó el sobrenadante (al que lla- te, los GdAPs presentaron actividad anticoa-
mamos GdEC). Se realizó una purificación gulante frente a la vía intrínseca de coagula-
parcial de los péptidos antioxidantes de ción, produciendo una inhibición completa
chañar por tratamiento térmico durante 30 en la coagulación a una concentración de
min a 90°C (GdTT90). Luego una alícuota de 172 µg/mL. Los resultados de nuestra inves-
2 ml de GdTT90 (80 µg/mL) se sembró en tigación fomentan futuros estudios sobre el
una columna de exclusión molecular con re- uso potencial de los GdAP en la biomedicina
lleno de Sephacryl S-100 HR. La elución se y/o la industria alimentaria.
realizó con buffer Tris-HCl 0,1 M (pH 7,5), se
evaluó la actividad antioxidante de las frac-
ciones colectadas mediante DPPH y ABTS,
Palabras claves: GEOFFROEA DECORTICANS;
y aquellas fracciones que presentaron ac- PÉPTIDOS BIOACTIVOS; ANTIOXIDANTES; ANTI-
tividad antioxidante fueron seleccionadas COAGULANTES.
como GdAPs (péptidos antioxidantes de
Geoffroeadecorticans). Se evaluó la concen-
tración a la cual los GdAPs producen 50%
de actividad antioxidante (IC50) por ambas

metodologías. Por espectrometría de masas
13PRPM
MALDI-TOF se evaluó el peso molecular de
los péptidos presentes en dicha fracción y Desarrollo de una
se evaluó su composición aminoacídica. Fi-
nalmente se realizaron ensayos de actividad
estrategia de purificación
anticoagulante frente a las vías intrínseca y de proteínas utilizando un
extrínseca de coagulación por las metodolo- péptido bifuncional
gías de aPTT y PT respectivamente.
El análisis por MALDI-TOF/MS reveló LEOPOLD, María J. ; OGGERO, Marcos
a, b a, b
;
la presencia de tres picos predominan- CEAGLIO, Natalia a, b
tes de bajo peso molecular: 2.257,199 Da, a) Centro Biotecnológico del Litoral, Facultad de
2.717,165 Da y 5.422,002 Da. La secuencia Bioquímica y Ciencias Biológicas. Universidad
aminoacídica parcial de los GdAPs reveló Nacional del Litoral.
sus características estructurales únicas, ex- b) CONICET
hibiendo homología con diversas regiones
encontradas en proteínas hipotéticas obte- [email protected]
nidas del genoma de Arachishypogaea. Los
resultados de la actividad antioxidante mos-
Entre las técnicas que permiten la obten-
traron que la concentración de IC50 para
ción de proteínas puras en un único paso
DPPH fue de 35,5 ± 0,3 µg/mL y para ABTS
se puede mencionar a la cromatografía de
fue de 95,1 ± 0,6 µg/mL. Estos resultados in-
inmunoafinidad que emplea etiquetas pep-
dican que los potenciales usos de los GdAPs
tídicas que contienen epitopes lineales re-
son comparables a los de hidrolizados pro-
conocidos por anticuerpos monoclonales
teicos con propiedades antioxidantes obte-
(mAb). Esta interacción suele presentar alta
nidos por tecnología enzimática, pero con la
afinidad y especificidad, lo que minimiza el
ventaja esencial, en el caso de los GdAPs, de
riesgo de uniones inespecíficas. En nuestro
que no necesitan tal proceso, generando un
laboratorio hemos diseñado un péptido de
producto con mayor rentabilidad. Finalmen-
15 aminoácidos denominado mGMOP como
105
SESIÓN 4
etiqueta para la preparación de proteínas Las condiciones seleccionadas se evaluaron

de fusión. Esta etiqueta deriva de la región como estrategias de unión en el proceso de
N-terminal del factor estimulante de colo- purificación cromatográfico. Para ello, se
nias de granulocitos y macrófagos humano analizó la capacidad dinámica de la matriz
(hGM-CSF) y se caracteriza por exhibir dos Sepharose-CC1H7 mediante acondiciona-
propiedades. Por un lado, presenta una ele- miento de la siembra (sobrenadante conte-
vada probabilidad de O-glicosilación, con 6 niendo mGMOP-IFN) con las diferentes sales
sitios potenciales para la unión de O-glica- al pH correspondiente, comparando los re-
nos. Por otra parte, contiene la secuencia sultados con el mismo proceso realizado en
APAR, que constituye un epitope lineal reco- ausencia de sal. La capacidad dinámica a C/
nocido por un mAb (CC1H7) obtenido tam- C0=0,1 fue superior para la condición Na2SO4
bién en nuestro laboratorio. Ambas carac- 1 M pH 8 con respecto a la siembra en au-
terísticas determinan la bifuncionalidad del sencia de sal (3,2 veces), mientras que para
péptido mGMOP, que puede ser utilizado el resto de las sales fue similar a esta últi-
simultáneamente para conferir propiedades ma condición. No obstante, a relaciones C/
biológicas mejoradas a las proteínas de fu- C0>0,1 se observaron diferencias para todas

sión debido a su capacidad de híper-O-glico- las sales con respecto a la unión en ausen-
silación y como un sistema para la cuantifi- cia de sal, indicando que la condición de alta
cación y/o purificación de las mismas. fuerza iónica permite incrementar la masa
Trabajos previos permitieron fusionar de mGMOP-IFN a sembrar y resulta así, una
la etiqueta mGMOP a la región N-terminal estrategia eficaz para optimizar el proceso
del interferón-α2b recombinante humano de purificación de proteínas de fusión al no-
(rhIFN-α2b), demostrando la quimera mG- vedoso péptido.
MOP-IFN una mejora significativa en sus
propiedades farmacocinéticas con respec- Palabras claves: ETIQUETA; PURIFICACIÓN;
to al rhIFN-α2b no modificado (Sales y col., INMUNOAFINIDAD.
2021).
En el presente trabajo se propuso ex-
plotar el potencial de la etiqueta mGMOP
para ser utilizada para la purificación de 14PRPM
mGMOP-IFN a partir de sobrenadantes de Preformulación de un
cultivo de células CHO-K1 recombinantes
mediante cromatografía de inmunoafinidad. nuevo producto
Teniendo en cuenta que se ha demostrado recombinante de interés en
un aumento de la afinidad de unión entre el
epitope APAR-paratope CC1H7 en un entor-
medicina veterinaria
no de alta fuerza iónica (Perotti y col., 2013),
MUSSIO Pablo E.a; RODRÍGUEZ María C.a;
se llevó a cabo un diseño de experimentos PRIETO, César C.b
con el fin de estudiar el efecto de diferen- a)
Laboratorio de Desarrollo Biotecnológico. Cen-
tes sales a distintos pH mediante ELISA. De tro Biotecnológico del Litoral.FBCB. UNL. CONI-
esta manera, se establecieron tres condicio- CET.
nes (KCl 3,75 M pH 7,5; NaCl 4,5 M pH 7,5; b)
Laboratorio de Desarrollo Biotecnológico. Cen-
Na2SO4 1 M pH 8) observándose el máximo tro Biotecnológico del Litoral.FBCB. UNL.
incremento de la afinidad aparente con res-
[email protected]
pecto al control en ausencia de sal a pH 7.
106
SESIÓN 4
El uso de la gonadotrofina coriónica equi- pureza. Como estándar se utilizaron dos

na (eCG) se ha convertido en una terapia marcas comerciales de PMSG, purificadas
hormonal clave para mejorar la actividad mediante RP-HPLC.
reproductiva en diferentes tipos de ganado. El análisis densitométrico por SDS-PAGE,
Actualmente, la metodología para la ob- permitió estimar la masa molecular aparen-
tención de PMSG (gonadotrofina sérica de te y la pureza de las variantes. La identidad
yeguas preñadas), involucra un inadecuado de las moléculas fue confirmada por wes-
uso de animales, lo que genera serios cues- tern blot, empleando anticuerpos anti-re-
tionamientos bioéticos. Asimismo, PMSG CG. Mediante cromatografía de exclusión
podría contener contaminantes con poten- molecular fue posible determinar la pureza
ciales riesgos sanitarios como virus o prio- de las muestras (reCG RP-HPLC=89%; reCG
nes y presenta una gran variabilidad en su HIC=55%; PMSG RP-HPLC=73%) y estimar la
perfil de glicosilación entre distintos lotes, lo masa molecular aparente de las variantes
que repercute en su potencia biológica. estudiadas (reCG=45 KDa; PMSG=66 KDa).
Con el fin de resolver esta problemática, Tras el análisis por RP-HPLC, se eviden-
en nuestro laboratorio hemos desarrollado ció que PMSG (tr=12,95 minutos) presen-
una tecnología basada en el cultivo de cé- tó un menor tiempo de retención (tr) que
lulas de mamíferos para obtener un nuevo reCG RP-HPLC (tr=13,58 minutos) y reCG HIC
producto veterinario: la eCG recombinante (tr=13,74 minutos), debido a diferencias en
(reCG). la polaridad de las moléculas.
Durante su producción y almacenamien- Mediante isoelectroenfoque se determi-
to, las proteínas recombinantes son some- nó que ambas variantes poseen un elevado
tidas a diferentes condiciones de estrés. En número de isoformas. Sin embargo, PMSG
este sentido, los estudios de preformulación exhibió un mayor número de isoformas con-
resultan clave en el desarrollo de un bio- centradas en la región más ácida, debido a
fármaco. La caracterización del compuesto su mayor contenido de ácido siálico (Neu-
activo, permitirá desarrollar un producto 5Ac). Esto fue confirmado mediante croma-
seguro y eficaz que, además, mantiene su tografía de intercambio iónico a pH eleva-
estabilidad en el tiempo. do con detección amperométrica pulsada
En el presente trabajo nos propusimos (HPAEC-PAD) (18 ± 3 y 7 ± 2 mol Neu5Ac/mol
como objetivo diseñar estrategias de prefor- eCG, para PMSG y reCG, respectivamente;
mulación para reCG a partir del uso de dife- p<0,05). El análisis del perfil de N-glicanos
rentes técnicas analíticas. cargados mediante cromatografía de inter-
La proteína recombinante, sintetizada cambio aniónico débil evidenció un mayor
por células CHOK1 adaptadas a crecer en contenido de glicanos neutros y tetrasialila-
suspensión, fue purificada mediante cro- dos en las formas recombinantes.
matografía de pseudoafinidad a colorantes. Así, en este trabajo fue posible purificar
Posteriormente, se propusieron dos princi- reCG para la posterior caracterización fisico-
pios de purificación: cromatografía líquida química en su forma nativa, mediante el uso
de alta resolución en fase reversa (RP-HPLC) de diferentes técnicas analíticas simples. A
y cromatografía de interacción hidrofóbi- su vez, se realizó un estudio comparativo
ca (HIC), permitiendo así obtener muestras con PMSG, demostrando diferencias en el
(denominadas reCG RP-HPLC y reCG HIC, perfil de glicosilación de ambas moléculas.
respectivamente) con un mayor grado de
107
SESIÓN 4
Palabras claves: PREFORMULACIÓN, PROTEÍ- tos convulsa. Actualmente existe una vacu-
NA RECOMBINANTE, MEDICINA VETERINA- nación a gran escala a nivel local y mundial
RIA.
contra esta bacteria; sin embargo, siguen
registrándose brotes de la enfermedad que
ocurren cada 4 a 5 años. Esta condición de
prevalencia y la alta incidencia condujo a la
15PRPM Organización Mundial de la Salud (OMS) a
Diagnóstico de considerarla como enfermedad reemergen-
te. Cada año se informan más de 60 millones
bordetellapertussis de casos y más de medio millón de muertes
mediante PCR-Tip, una por tos convulsa en todo el mundo. En nues-
tro país, como en el resto del mundo, se re-
novedosa plataforma para gistra un aumento significativo en el número
la liberación de reactivos de casos registrados. Por lo que se requiere
para PCR un relevamiento epidemiológico muy activo.
Actualmente se hace un diagnóstico mole-

cular mediante PCR. Este patógeno se puede
SÁNCHEZ Mirna L. a, VALDEZ Hugo A. b,
GIMÉNEZ Claudia Y.a, RODRÍGUEZ María E.b, identificar de otros mediante la amplifica-
GRASSELLI Marianoa ción de elementos insercionales caracterís-
a-Laboratorio de Materiales Biotecnológicos (La- ticos del genoma de esta bacteria.
MaBio), Departamento de Ciencia y Tecnología,
Universidad Nacional de Quilmes, IMBICE-CONI-
La estandarización en los procesos de
CET, Bernal, Argentina. identificación es un nicho de vacancia inte-
resante a desarrollar y en este trabajo ha-
b- Laboratorio de microbiología celular e inmu- cemos una aproximación en este sentido
nomecanismos. CINDEFI | Centro de Investiga-
usando como modelo de optimización el
ción y Desarrollo en Fermentaciones Industriales
Facultad de Ciencias Exactas (UNLP) diagnostico molecular de Bordetellapertus-
sis.
La tecnología protegida previamente se
La generación de nuevos materiales abre basa en el recubrimiento de las paredes in-
un abanico de posibilidades a la generación ternas de un tip de micropipeta descartable
de múltiples productos con funciones y apli- con un compositehidrofílico-agente estabi-
caciones en diversas áreas de los bioproce- lizante (alcohol polivinílico-trehalosa) que
sos. tiene la capacidad de absorber de forma re-
En trabajos previos hemos reportado el versible reactivos de alto costo.
desarrollo de una plataforma tecnológica Se estudio la absorción de dos tipos de
basada en la funcionalización de tips de mi- compuestos claves en la reacción de PCR
cropipetas como dispositivos para la purifi- para el diagnostico molecular: oligonucleó-
cación de biomoléculas o dispensación de tidos y deoxinucleósidostrifosfato (dNTPs).
reactivos de alto costo (Sánchez, 2015; Sán- Se generaron dos dispositivos: uno con oli-
chez, 2020). gonucleótidos absorbidos en la pared in-
En este trabajo ajustamos la plataforma terna del tip y otro con oligonucleótidos +
de dispensación con un objetivo específi- dNTPs. A estos dispositivos los denomina-
co: el diagnóstico del patógeno humano mos PCR-tip1 y PCR-tip2, respectivamente.
Bordetellapertussis, el agente causal de la Se determinaron los porcentajes de libera-
108
SESIÓN 4
ción de las biomoléculas de interés en cada Los anticuerpos (Abs) constituyen el gru-
uno de ellos y se realizaron las reacciones po de biológicos de mayor precio y deman-
correspondientes a fin de evaluar su funcio- da. Su proceso downstream emplea rellenos
nalidad. La capacidad de liberación para los cromatográficos que contienen proteína A
oligonucleótidos fue del 70% y 72% para los que son de los más onerosos del mercado. El
oligonucleótidos + dNTPs. desarrollo de procesos más económicos es
La identificación del patógeno emplean- de sumo interés y la precipitación selectiva
do los PCR-tips en los protocolos de identi- constituye una buena alternativa. El objetivo
ficación molecular de Bordetellapertussis, de este trabajo fue la construcción, síntesis
demuestra la potencialidad de la invención y caracterización de moléculas que puedan
en la optimización de la metodología para ser utilizadas en precipitaciones selectivas
identificación esta bacteria. Los descubri- de Abs de diferentes especies. Estas molé-
mientos realizados sientan las bases para culas están compuestas por dos partes. Por
continuar desarrollando un dispositivo ca- un lado, los dominios Y que reconocen espe-
paz de absorber todos los reactivos de la re- cíficamente Abs. Se emplearon la proteína
acción de diagnóstico. Al mismo tiempo, son A de Staphylococcusaureus(A), la proteína
el puntapié inicial para desarrollar una gama G de Streptococcus(G) o un dímero del do-
de productos optimizados con perspectiva minio Z (derivado de A). Por otro lado, los
diagnóstica para diferentes patógenos de polipéptidos similares a elastina (ELP, elas-
interés. tinlikepolypeptide) que son polímeros artifi-
ciales formados por repeticiones de un pen-
tapéptido (VPGXG)n, donde X es cualquier
Palabras claves: PCR-TIP PCR, DIAGNÓSTICO. aminoácido excepto prolina, y n la cantidad
de repeticiones del pentapeptido. Los ELP
poseen la característica de sufrir transicio-
nes térmicas tornándose insolubles a una
16PRPM temperatura superior a la Tt (temperatura
Desarrollo de un método de transición) lo que permite su separación
de otras proteínas que permanecen solubles
para purificar anticuerpos por no sufrir transiciones. La Tt depende del
basado en el empleo de aminoácido X y del n. En este trabajo se uti-
lizaron ELP con X=Valina y n= 40 (ELP40), 80
fusiones de dominios de (ELP80) o 120 (ELP120). Los genes codifi-
unión a inmunoglobulinas cantes para ambas partes fueron multime-
rizados para obtener los ELP40-ZZ, ELP40-G,
a polímeros similares a ELP40-A, ELP80-ZZ, ELP80-G, ELP120-ZZ, y
elastina ELP120-A. Estas fusiones fueron subclona-
das en el vector de expresión pET200 y sin-
RESTUCCI, Fernando. E.; PETRUCCELLI, Silvana tetizadas en E.coli BL21. Los rendimientos de
producción fueron 4 mg/ml para los ELP40 y
Laboratorio de Biología Molecular. Centro de In-
vestigación y Desarrollo en Criotecnología de Ali- aproximadamente 2 mg/ml para los ELP80 y
mentos CIDCA)-CONICET-CIC- Facultad de Cien- ELP120. Los distintos ELP fueron purificados
cias Exactas. Universidad Nacional de La Plata. por ITC (inversetransitioncycling), emplean-
[email protected]
do concentraciones de NaCl 3M, 2M y 1M
para los ELP40, 80 y 120, respectivamen-
te. Las temperaturas utilizadas fueron 55°C
109
SESIÓN 4
para ELP40 y 45°C para los ELP80 y 120 y los ssARN envuelto por una nucleocápside pro-
rendimientos obtenidos fueron del 90% con teica. Las proteínas de la cápside tienen la
una única ITC. Los ELP-Y fueron utilizados en capacidad de generar una respuesta humo-
la purificación de sueros de caballo, cone- ral de anticuerpos IgG/IgM, que pueden ser
jo y cabra y ascitis. La unión a los Abs a los utilizados para detectar personas infectadas.
ELP-Y se realizó por incubación pH 7,4. a 4°C. En particular, se destaca la proteína Np dado
Posteriormente se adicionó NaCl, se aumen- que presenta escasa homología con nucleo-
tó la temperatura, y los complejos ELP-Y-Abs proteínas de otros coronavirus, siendo un
fueron separados por centrifugación. El pre- blanco ideal para el desarrollo de sistemas
cipitado se resuspendió a buffer pH 2,7 y los diagnósticos que permitan la detección de
ELP-Y fueron separados de los Abs por ITC. La anticuerpos IgG/IgM anti-Np en muestras
fracción soluble se neutralizó con buffer pH 9. serológicas. Por otro lado, nuestro grupo ha
Todos los ELP-Y mostraron capacidad de unión desarrollado y patentado un novedoso sis-
a IgGs pero los mayores rendimientos y grados tema de etiquetado llamado FasTAG, que
de pureza se obtuvieron con los ELP80-G. Los permite la purificación e inmovilización de
ELP-Y fueron producidos y purificados utilizan- proteínas recombinantes sobre la superfi-

do procedimientos de bajo costo y constituyen cie de bacterias Gram +. En este sistema,
un método alternativo costo efectivo para la las proteínas recombinantes expresadas
purificación de anticuerpos. en sistemas heterólogos son fusionadas al
dominio C-terminal de las proteínas de Ca-
pa-S de Lactobacillussp (FasTAG). Luego,
se emplea la afinidad intrínseca que posee
17PRPM dicho dominio por las membranas de las
bacterias Gram + para la purificación de las
Purificación de la proteína proteínas recombinantes de interés. Sobre
Np de SARS-CoV-2 la base de lo expuesto, el objetivo de este
empleando el Sistema trabajo fue evaluar la funcionalidad del sis-
tema para purificar la proteína Np fusiona-
FasTAG y su aplicación da al FasTAG, y su posterior aplicación en
para uso diagnóstico tiras reactivas para uso diagnóstico. Para
ello, la secuencia de la proteína Np fue
clonada en marco con el FasTAG en el vec-
HARGUINDEGUY, Inés b; BEZUS, Brenda a;
BRACHO, Juan P.a; RAMÍREZ, Andreaa; CAVALITTO, tor pBam (BambooBiotech®) y expresada
Sebastián F.a,b; ORTIZ, Gastón E.a,b en Escherichiacoli BL21 CodonPlus. La pro-
ducción se realizó a 37ºC y 250 rpm, en
a) Centro de Investigación y Desarrollo en Fer-
Erlenmeyer conteniendo medio LB e IPTG
mentaciones Industriales (CINDEFI), UNLP, CCT
La Plata-CONICET, Calle 47 y 115, 1900 La Plata, 1 mM como inductor. Posteriormente, se
Provincia de Buenos Aires, Argentina. obtuvo un lisado celular en el cual se en-
cuentra presente la proteína recombinan-
b) BambooBiotech SAS, RomuloNaón 3237, 1430 te Np-FasTAG. Dicho lisado se incubó en
CABA, Provincia de Buenos Aires, Argentina. batch durante 2 horas a 25ºC con una ma-
[email protected] triz constituida por B. subtilisinactivado
con formol 3%. A continuación, la suspen-
sión se centrifugó y el precipitado se lavó
El coronavirus SARS-CoV-2, causante del
para eliminar las proteínas no retenidas o
síndrome respiratorio COVID-19, posee un
retenidas en la matriz de forma inespecífi-
110
SESIÓN 4
ca. Luego, la proteína de interés fue eluida 18PRPM

durante 1 hora a 25°C empleando LiCl 5M,
y cada una de las fracciones fueron anali-
Caracterizacion de una
zadas mediante gel de SDS-PAGE. El ensa- Nanored de celulosa
yo demostró la potencialidad de este siste- bacteriana obtenida del
ma para la purificación de la proteína Np,
logrando purificar 7,2 µg de proteína por residuo de la Kombucha
mg de resina. Posteriormente, la proteína
purificada se utilizó para evaluar su poten- BERGOTTINI Verónica M.a; BERNHARDT Dana C.a,b
cial uso como antígeno de captura en un a) Instituto de Tecnología-INTEC, Universidad
sistema de inmunoensayo de flujo lateral. Argentina de la Empresa.
El mismo cuenta con un diseño sándwich,
b) Departamento de Industrias-ITAPROQ, Fac. de
en donde los anticuerpos humanos IgG/
Cs. Exactas y Naturales, Universidad de Buenos
IgM anti-Np reaccionan con el oro coloi- Aires.
dal conjugado a anticuerpos anti-humano
[email protected]
(cabra), y luego son capturados por el an-
tígeno recombinante Np dispensado en la

línea de testeo. Como control se dispensó La celulosa bacteriana (CB) está emer-
anticuerpo anti-cabra (conejo) en la líneagiendo como una fuente de celulosa al-
ternativa debido a que sus microfibrillas
de control. Las tiras reactivas resultantes
se ensayaron empleando sueros reactivos son 100 veces más pequeñas que en las
plantas y se sintetizan como una red tri-
y no reactivos para SARS-CoV-2, y se regis-
dimensional de nanofibras con propieda-
tró la intensidad de color (señal) obtenida
des promisorias como un alta cristalinidad
en la línea de testeo. Se logró la detección
de anticuerpos IgG/IgM en muestras sero- (70% –80%), alta porosidad, alta resisten-
lógicas empleando un panel de 20 sueros cia mecánica, capacidad para absorber
positivos y negativos. Como resultado, se agua, termoestabilidad y biocompatibi-
logró aplicar el sistema FasTAG en la pu- lidad. Estas propiedades hacen a la CB
rificación de la proteína Np, y la misma una materia prima versátil con múltiples
fue empleada con éxito en la detección aplicaciones que van desde el packaging,
de anticuerpos IgG/IgM reactivos para materiales conductores, biomateriales
SARS-CoV-2, revelando la potencialidad y para la moda, vendajes para heridas hasta
funcionalidad de este sistema para su uso carriers de fármacos o sustancias bioacti-
vas. La kombucha es una bebida probióti-
en la purificación de Np con fines diagnós-
ticos. ca que se obtiene de la fermentación de
té negro y sacarosa mediante el cultivo de
una colonia simbiótica de bacterias y le-
vaduras (SCOBY). Un producto de desecho
Palabras claves: COVID-19; SARS-COV-2; B. de la kombucha es el SCOBY en el que las
SUBTILIS; SISTEMA FASTAG; INMUNOENSAYO bacterias sintetizan celulosa en la interfa-
DE FLUJO LATERAL (IFL).
se aire-líquido del cultivo el cual puede ser
empleado como una fuente para la obten-
ción de este polímero.
Con el objetivo de revalorizar el residuo
de la kombucha en un modelo de produc-
111
SESIÓN 4
ción circular, se exploró un protocolo de 19PRPM

purificación, seguido de hidrolisis ácida
yliofilización para la obtención de nanore-
Purificación de proteínas
des de celulosa con diferentes caracterís- de amaranto con
ticas estructurales. La microestructura de nanopartículas
la red y el tamaño de las fibras se anali-
zaron por microscopia electrónica de ba- funcionalizadas
rrido (SEM), el grado de cristalinidad por
difracción de rayos-X y la composición por Ripetta, Sol; Barrio, Daniel A.
un análisis elemental (EDS). Las microfo- Universidad Nacional de Río Negro. CIT Río
tografias de SEM demostraron diferencias Negro – CONICET.
en las microestructura de las nanoredes
[email protected]
de BC observandose una mayor porosidad
y un tamaño de fibra más pequeño en la
nanored tratada con acido sulfúrico y clor- La purificación de proteínas es un proceso
hídrico en comparación con la nanored no que puede llevar diversos pasos complejos

hidrolizada. El grado de cristalinidad de y costosos. La utilización de nanopartículas
la CB fue del 90% y el análisis elemental ferromagnéticas funcionalizadas contribuye
demostró que los tratamientos químicos a disminuir estos procesos dado que se se-
no dejaron residuos coprecipitados en la paran de soluciones proteicas utilizando un
nanored. imán. La purificación de lectinas puede reali-
Estos resultados iniciales muestran la zarse con este método, sin embargo hay que
potencialidad de los tratamientos combi- seleccionar los azúcares adecuados para
nados para purificar y obtener una nano- derivatizar las partículas dado que le otor-
red de celulosa a partir de un residuo como ga selectividad al sistema. El objetivo del
el SCOBY en la producción de kombucha. presente trabajo fue purificar proteínas, en
La potencialidad de la CB bioensamblada particular lectinas de Amaranthuscruentus y
en forma de nanored es uno de los nuevas evaluar el rendimiento de adsorción a par-
promesas en el desarrollo de biomateria- tículas ferromagnéticas funcionalizadas con
les con propiedades estructurales superio- lactosa y galactosa. Para ello, se partió de
res así como también funcionales. una suspensión de proteínas de amaranto
(2,2 mg/ml) extraída de harina desgrasada a
pH: 9,0 y nanopartículas. Alícuotas de 500 ul
del concentrado proteico se mezclaron con
500 ul de nanopartículas ferromagnéticas
Palabras claves: SCOBY, NANORED, CELULOSA recubiertas con tetraetilortosilicato (TEOS),
BACTERIANA, HIDRÓLISIS ACIDA.
funcionalizadas con aminopropiltrietoxisila-
no (APTES) y derivatizadas con los azúcares
ya mencionados durante 2 horas, pH: 7,0 a
37 °C. A continuación se retiró el sobrena-
dante, se lavaron las partículas con buffer
fosfato 0,1 M pH: 7,0 y se expusieron a Urea
8 M como agente desorbente. Por otro lado,
se repitió el ensayo con concentraciones de-
crecientes de proteína, a saber: 1,26 mg/ml,
112
SESIÓN 4
0,69 mg/ml, 0,51 mg/ml para determinar

la capacidad y saturación de las partículas.
La concentración de lectinas se evaluó por
un ensayo de hemoaglutinación (50 ul de
muestra + 50 ul de sangre por well, 1 hora,
37ºC) En los sobrenadantes de adsorción se
determinó el contenido de proteínas por el
método de Bradford. Partiendo de una so-
lución de 2,2 mg/ml de proteína, la adsor-
ción a las partículas fue del 62,6% con galac-
tosa y del 61,1% con lactosa, mientras que
las desorciones fueron del 54,6% y 60,23%
respectivamente. Con concentraciones de
proteína decrecientes las adsorciones fue-
ron del 79,3%, 83,8% 91,3% para la galacto-
sa con concentraciones de 1,26 mg/ml, 0,69 SESIÓN 5
mg/ml, 0,51 mg/ml de proteína, y de 82,8%,

86,5% 91,5% para la lactosa en mismas con- BIOPROCESOS EN
diciones respectivamente. Los ensayos de
hemoaglutinación revelaron que mediante LA INDUSTRIA
este proceso de purificación es posible con-
centrar las lectinas de la muestra proteica ALIMENTARIA
unas 3.63 veces para las partículas deriva-
tizadas con galactosa y 3.17 veces para las
Y REMEDIACIÓN
de lactosa. En conclusión, las nanopartículas
ferromagnéticas derivatizadas con lactosa
AMBIENTAL
y galactosa fueron efectivas para separar
proteínas de amaranto y no se observaron
diferencias significativas para ambos azúca-
res, siendo la concentración de lectinas fina-
les mayor en las partículas derivatizadas con
galactosa.
113
SESIÓN 5
Conferencia Sesión 5: Bioprocesos en la En la actualidad existe un único produc-

industria alimentaria y remediación tor de importancia a nivel mundial, Quorn
ambiental Foods Inc., del conglemerado filipino Mon-
Biomasa fúngica para de Nissin. Sin embargo, en los últimos cinco
años aparecieron varias empresas utilizando
alimentación humana: diferentes tecnologías para la producción de
una vieja historia con BIF. Por ejemplo, Nature’s Fynd Inc., Enough
(3FBio), Kernel Mycofoods Inc. con sistema
nueva perspectiva de producción en estado sólido, cultivo uti-
lizando efluente de producción de etanol y
BLASCO, Martin aprovechando una variedad de fuentes de
Centro de Investigación y Desarrollo en Biotec- carbono y energía.
nología Industrial, INTI Instituto Nacional de Tec-
En INTI, se desarrolló para Enyetech S.A.,
nología Industrial.
luego denominada Kernel Mycofoods Inc.,
un procedimiento de producción de BIF,
La biomasa inactivada de “Fusarium ve- que complementado con trabajos de otras

nenatum” (BIF) para alimentación humana, instituciones como VTT de Finlandia y Lesa-
generalmente denominada “mycoprotein” o ffre permitieron delinear una estrategia de
“micoproteína”, ha recorrido un camino de producción competitiva para este producto.
más de 30 años en el mercado de la alimen- En esta presentación se tratarán los desafíos
tación humana. Sin embargo, este produc- y resultados relacionados con la producción
to cubre una porción marginal del mercado de este tipo de productos y sus derivados.
alimenticio mundial. Ante los desafíos del
aumento de la demanda de proteínas de
alta calidad para alimentación con menor
impacto ambiental, la micoproteína comen- 1BIAR
zó a ser revalorizada como una alternativa Remocion de especies
a alimentos basados en animales y plantas,
tanto por sus características nutricionales nitrogenadas en humedales
excelentes como por el potencial de produc- bioeletroquímicos
ción altamente controlada y descentralizada
en bioreactores. RODRIGUEZ SIMÓN, Carlos N;BUSALEM, Juan;
La BIF, presenta una composición de pro- GIUNTA, Valeria; BONANNI, Pablo S.
teínas, lípidos y fibra soportada en una es- Instituto de Investigaciones en Ciencia y Tecnolo-
tructura filamentosa, diferenciándola de las gia de Materiales (ITEMA)
proteínas unicelulares obtenidas a partir de [email protected]
levaduras. Dicha estructura está soporta-
da con el andamiaje de quitina de la pared
celular del hongo que se conserva luego de Los humedales de tratamiento son un sis-
los tratamientos requeridos para su inacti- tema de depuración biológico de aguas resi-
vación, permitiendo la separación de la por- duales visualmente atractivo y que no genera
ción estructurada del material conteniendo olores, lo cual permite su integración en las ur-
bases nitrogenadas, inconvenientes en ex- banizaciones y su aplicación como sistema de
ceso para alimentación humana. tratamiento descentralizado (desconectado
de la red central) de aguas residuales. Su prin-
114
SESIÓN 5
cipal desventaja es la gran área que requieren Se midió en continuo la corriente eléctrica ge-
para su implementación. nerada por el sistema, lo cual permitió un se-
Buscando disminuir el requerimiento de guimiento en tiempo real de la velocidad de
espacio, recientemente ha comenzado a es- toma de electrones por parte de los microor-
tudiarse la aplicación de microorganismos ganismos. Mediante la técnica electroquímica
electro-activos en humedales de tratamiento, de voltametría cíclica se pudieron evaluar los
dando lugar a los humedales bioelectroquími- potenciales electroquímicos para la toma de
cos. En este sistema se favorece el crecimiento electrones. Se obtuvieron corrientes en pro-
de bacterias denominadas electro-activas que medio de 0,07A/m para los reactores aeró-
2
tienen una gran velocidad de degradación de bicos, 0,02 A/m para los anaeróbicos y 0,03
2
especies carbonadas, generando un aumento A/m para Thiobacillus denitrificans, con un

2
en la eficiencia de remoción de demanda quí- comportamiento voltamétrico compatible con

mica de oxígeno, parámetro utilizado común- el proceso evaluado, quetuvieron una remo-
mente para evaluar la calidad de un efluente. ción de nitrato atractiva para la implementa-
ción de este concepto en humedales bioelec-
Sin embargo, la alta velocidad de degra- troquímicos de entre 0,7 y 1,3 mM NO3/día.
dación de compuestos carbonados genera li-
mitaciones en la remoción de otras especies

contaminantes como el nitrato, por provocar Palabras claves: ELECTROQUÍMICA; BIOREME-
una escasez de fuentes electronesapropiadas DIACIÓN; MICROORGANISMOS ELECTROACTI-
para los microorganismos encargados de su VOS.
remoción.
Existen microorganismos capaces de uti-
lizar electrodos polarizados como fuente de
2BIAR
electrones. La limitación en la remoción de
nitratos puede ser paliada suministrando a los Tratamiento en biorreactor
microorganismos los electrones para su me-
tabolismo directamente desde un electrodo
del colorante negro reactivo
polarizado. 5 con Apiotrichum
En este trabajo se determinaron las condi- porosum MM-4029
ciones de operación óptimas para esta inten-
sificación, evaluando por medio de técnicas VIEJOBUENO, Josefinaa; GAROLERA, Betsabéb;
electroquímicas la capacidad de remoción de FERNÁNDEZ, Pablo Mb,c; PAJOT, Hipólito Fb,c
especies nitrogenadas de un consorcio aisla-
a) Instituto Nacional De Tecnología Agropecua-
do de humedales bioelectroquímicos com-
ria (INTA – Estación Experimental Agropecuaria
parando el comportamiento de éstos contra Famaillá.
Thiobacillus Denitrificans, una cepa modelo
de remoción de nitratos con electrones pro- b) Planta Piloto de Procesos Industriales Micro-
venientes de electrodos. Para crecer los con- biológicos (PROIMI – CONICET). c) Facultad de
Ciencias Exactas y Naturales, Universidad Nacio-
sorcios se utilizaron reactores electroquímicos
nal de Catamarca.
con barras de grafito polarizadas como dador
[email protected]
de electrones y se estudió la influencia de la
concentración de oxígeno utilizando el medio
de cultivo típico de bacterias denitrificantes La contaminación ambiental produci-
privado del compuesto dador de electrones. da en los cuerpos de agua por la descarga
115
SESIÓN 5
efluentes textiles es un problema amplia- posterior de la biomasa producida para la

mente distribuido a nivel mundial. El trata- obtención de otros bioproductos.
miento biológico de estos efluentes es una
estrategia interesante por su versatilidad y Palabras Claves: LEVADURAS; COLORANTES
su bajo impacto ambiental. Sin embargo, a TEXTILES; BIORREMEDIACIÓN; BIORREACTO-
pesar del número de sistemas de tratamien- RES; APIOTRICHUM POROSUM.
to propuestos, estos bioprocesos siguen
siendo costosos y difíciles de escalar. En este
trabajo se evaluó la decoloración de Negro
Reactivo 5 (un colorante modelo) con la le- 3BIAR
vadura oleaginosa Apiotrichum porosum
MM-4029, aislada de las Yungas (Tucumán –
Biorremediación de
Argentina). Los ensayos se realizaron en bio- efluentes porcinos en
rreactor instrumentado LH Series 210 (Incel-
tech, France), equipado con un vaso de 1,5 L
biorrecator de capa fina
(volumen de trabajo 1L). Los ensayos se rea- empleando Nannochloropsis
gaditana

lizaron a 25°C, en medio NDM optimizado
con una concentración inicial de 200 mg/L
del colorante. Se compararon 2 regímenes
JIMÉNEZ VEUTHEY, Mariana a,b; MORILLAS
de aireación (200 rpm y 2vvm vs 400 rpm y ESPAÑA, Ainoac; SÁNCHEZ ZURANO, Anac; FLO-
4 vvm) y 3 temperaturas de trabajo (20, 25 y RES, María Ld; ACIÉN FERNÁNDEZ, Francisco Gc.
30ºC). Se midieron el porcentaje de decolo- a) Facultad de Ciencias de la Alimentación,
ración a las 24 h, la biomasa por peso seco, UNER, CP 3200, Concordia, Entre Ríos, Argenti-
pH y la glucosa residual. El crecimiento de la na.
levadura y la decoloración fueron óptimos a
b) CONICET, Consejo Nacional de Investigaciones
400 rpm y 4 vvm y a 25°C, condiciones en las Científicas y Técnicas, Buenos Aires, Argentina.
que se obtuvo un porcentaje de decolora-
ción final del 88%, con un pH de 1,5, 3,8 g/L c) Departamento de Ingeniería Química, Facul-
de peso seco y 1,5 g/L de glucosa residual. A tad de Ciencias Experimentales, UAL, CP E04120,
Almería, España.
30°C, sin embargo, el proceso fue poco efi-
ciente, con una decoloración final 24,92%, d) CRIDECIT, Centro Regional de Investigación
pH 2,25, peso seco 0,65 g/L y glucosa resi- y Desarrollo Científico Tecnológico, Facultad de
dual de 6,8 g/L. Ciencias Naturales y Ciencias de la Salud, UNPS-
JB, CP 9000, Comodoro Rivadavia, Chubut, Ar-
Los resultados obtenidos demuestran gentina.
que el proceso pudo escalarse satisfactoria-
[email protected]
mente hasta volúmenes de 1 L. El proceso
de decoloración demostró una marcada de-
pendencia de las condiciones de aireación y Los efluentes de la actividad porcina pre-
temperatura, lo que sugiere la necesidad de sentan elevados niveles de contaminantes,
evaluar el uso de otro tipo de reactores para principalmente materia orgánica, fósforo,
obtener procesos más económicos. Se com- nitrógeno y bacterias, los cuales deben ser
probó que la levaduras oleaginosa Apiotri- removidos, previo vertido, para prevenir la
chum porosum MM-4039 también es efec- contaminación de los recursos naturales.
tiva en procesos de biodecoloración, lo que Actualmente, los procesos tecnológicos para
plantea la posibilidad de aprovechamiento remover nitrógeno y fósforo de los efluentes
116
SESIÓN 5
son muy costosos,con baja eficiencia y poca Los resultados sugieren que el acople
sustentabilidad, por lo que resulta indispen- del tratamiento de efluentes porcinos con
sable el desarrollo de nuevas tecnologías. En la producción de N. gaditana conduce a la
este contexto, la biorremediación de aguas recuperación de nutrientes y a la obtención
contaminadas empleando microalgas resul- de una biomasa valiosa para fines acuícola
ta ser prometedora. Empleando esta tecno- por su elevado contenido en ácidos grasos
logía es posible lograr un doble beneficio; (6 g/100 g biomasa seca). De esta forma, los
por un lado, dado que las microalgas utilizan resultados alcanzados apoyan el desarrollo
los contaminantes (N, P, CO2) como fuente de procesos más sostenibles y sustentables
de nutrientes, generar biomasa de interés como lo es la biotecnología de microalgas.
industrial; por otro, reducir los niveles de Esta investigación fue financiada por el
contaminación ambiental. En este sentido, proyecto SABANA del Programa de Inves-
el objetivo del presente trabajo fue evaluar tigación e Innovación Horizonte 2020 de la
la capacidad de la microalga Nannochlorop- Unión Europea (subvención 727874) y el
sis gaditana de biorremediar los contami- Proyecto AL4BIO, financiado por el Ministe-
nantes presentes en efluentes porcinos, em- rio de Ciencia, Innovación y Universidades
pleando biorreactor externo de capa fina. de España (RTI2018-099495-A-C22).Jiménez

Los experimentos fueron llevados a cabo en Veuthey M. contó con una beca AUIP a tra-
las instalaciones del Instituto de Investiga- vés de la UNPSJB.
ción y Formación Agraria y Pesquera (IFAPA,
Almería, España) durante la estación otoño.
Se empleó un biorreactor externo de capa Palabras claves: BIORREACTOR; BIORREME-
fina de 63 m2, conteniendo agua salada y DIACIÓN; CAPA FINA; EFLUENTE PORCINO;-
NANNOCHLOROPSIS GADITANA.
10% de efluente porcino como medio de cul-
tivo e inoculado con un 20% de la microalga
Nannochloropsis gaditana. Inicialmente, el
biorreactor fue operado en modo batch du-
rante 7 días para lograr la aclimatación de la 4BIAR
cepa y luego en modo continuo a una tasa de Protocolo de obtención de
dilución de 0,40 d-1. Durante los experimen-
tos, la radiación solar máxima registrada fue
Biodiésel a partir de
de 760 W/m2, con un valor medio de tem- aceites comestibles
peratura de 25 ºC y una producción máxima
de oxígeno disuelto (OD) de 65% Sat. Los pa-
utilizados
rámetros evaluados a la entrada y salida del
LUCAS, Laura B.a; REBAGLIATI, Inés R.a,b
proceso fueron nitrógeno total (NT), fósforo
total (PT), coliformes totales, bacterias he- a) Laboratorio de Biotecnología y Microbiología
terótrofas y Clostridium spp. En condiciones Industrial. Escuela Superior de Ciencias Exactas y
de estado estacionario, la productividad de Naturales. Universidad de Morón
biomasa (Pb) y la concentración de biomasa b) Hospital de Clínicas Gral. San Martín, Ciudad
(Xb) fueron 9,14 g/m2 d y 0,60 g/L, respec- Autónoma de Buenos Aires, Argentina
tivamente. La eficiencia de remoción de NT [email protected]
excedió el 90% y la de PT el 50%. Asimismo,
se logró una reducción de coliformes totales,
bacterias heterótrofas y Clostridium spp. supe- El carácter no renovable de los combusti-
rior al 40, 70 y 90 %, respectivamente. bles fósiles y las perspectivas de agotamien-
117
SESIÓN 5
to de las reservas a mediano plazo, unidos (CH3OH), y el catalizador seleccionado, te-

al crecimiento permanente y sostenido de la niendo en consideración, trabajar bajo una
demanda, generan una situación indudable- relación molar de alcohol/aceite 14:1, un
mente problemática, lo que ha impulsado rango de temperatura de 60 °C, un margen
la investigación de fuentes de energía reno- de concentración de 10% del catalizador1. Se
vables. Una de ellas, la de los combustibles propone realizar la comparación de técnicas
ecológicos. Frente a esto, Argentina tiene de transesterificación química y biotecnoló-
ventajas comparativas para el desarrollo gicas, estableciendo ventajas y desventajas
de fuentes alternativas de energía, en par- en sus respectivas aplicaciones y con las ma-
ticular provenientes de productos agrícolas, terias primas utilizadas. Asimismo, se deter-
como el biodiésel, por ser un país altamente minará cualitativamente las propiedades del
competitivo no sólo en la producción de soja biodiésel obtenido y, cuantitativamente las
y maíz y sus derivados, sino que también en cantidades de reactivos a utilizar para opti-
su industrialización, y en el consiguiente mizar su producción y obtener rendimien-
mercado de combustibles, lo que permite tos significativos. Por último, con la realiza-
abrir oportunidades para la participación ción del proceso de conversión del aceite

de los biocombustibles. El biodiésel es un se determinará en qué condiciones resulta
producto energético, ecológico, renovable y conveniente llevar a cabo las reacciones de
de alto rendimiento, constituido por ésteres transesterificación. Esto permitirá la optimi-
metílicos, obtenidos mediante transesterifi- zación de los tiempos necesarios y el ahorro
cación. Este último es un proceso basado en de reactivos y materia prima, logrando me-
la reacción de triglicéridos provenientes de jores rendimientos productivos.
los aceites vegetales y/o de grasas animales
nuevos o usados, un alcohol de bajo peso
Palabras claves: BIOCOMBUSTIBLES; BIOENER-
molecular y un catalizador. En este proyecto, GÍA; ACEITES COMESTIBLES UTILIZADOS.
hemos elaborado un programa de recolec-
ción de aceites comestibles de domicilios y
comercios de la localidad de Morón. El plan
contempla una campaña de concientización
en la población a fin de lograr incrementar 5BIAR
la donación de aceite y que se comprenda
que tal acción permite una correcta gestión
Temperatura óptima de
del residuo, dado su elevado potencial como crecimiento de cepas del
contaminante ambiental. Por otra parte, de-
sarrollamos un método para la obtención
genero Pleurotus nativas
biodiésel por medio de transesterificación de Misiones
ácida o básica. Así, una vez recolectado el
aceite, se lo someterá a un pretratamiento RESTELLI, María F. a; CONIGLIO, Romina O. b;
físico con el fin de eliminar sólidos suspen- GRASSI, Emanuel M. a
didos y sustancias químicas que puedan a) Instituto Misionero de Biodiversidad- Gobierno
afectar las reacciones de transesterificación. de la Provincia de Misiones
Luego se procederá a realizar experiencias b) Universidad Nacional de Misiones. Facultad
para determinar la preferencia del catali- de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales.
Instituto de Biotecnología Misiones “María Ebe
zador a emplear y, finalmente, se llevará a
Reca”.Laboratorio de Biotecnología Molecular.
cabo el proceso de transesterificación em- [email protected]
pleando el aceite limpio y seco, metanol
118
SESIÓN 5
La alta tasa demográfica mundial tiene de Petri a los 8 y 12 días de incubación

como consecuencia la necesidad de una respectivamente. Las demás cepas IMi-
gran producción de alimento, la cual está li- Bio-cult #148 y #191 colonizaron las cajas
gada, principalmente, a la agricultura. Esta de Petri en un rango de 14-21 días después
actividad se encuentra íntimamente ligada de la inoculación en el rango de 25-30°C.
con el cambio de uso del suelo, y la utiliza- Por otra parte, las cepas IMiBio-cult #279
ción de pesticidas y fertilizantes que afectan e IMiBio-cult #283 tuvieron crecimientos
la microbiodiversidad. En consecuencia, se lentos en comparación con las demás, ya
desarrollan modelos productivos que se lle- que sus crecimientos a los 30 días de la
ven a cabo en equilibrio con en el ambiente, inoculación no completaban los 9,5 cm de
de bajo impacto y que produzcan alimentos las cajas en todas las temperaturas testea-
de un gran valor nutricional. das. La cepa IMiBio-cult #51 presentó una
El cultivo de hongos comestibles es velocidad de crecimiento constante en el
una alternativa productiva, que articula rango de 25-30°C, colonizando las cajas de
de manera óptima la producción amigable Petri a los 8 días de la inoculación. Ningu-
con el medio ambiente y la reutilización na de las cepas tuvo un crecimiento óp-
de residuos, generando un alimento rico timo a la temperatura de 35°C, siendo la

en proteínas. cepa comercial la única de sobrepasar el
centímetro de diámetro a los 30 días. Esta
Dado este contexto es necesario rele- diferencia de temperatura puede estar de-
var y estudiar cepas nativas de hongos co- terminada por la adaptación al ambiente
mestibles de Misiones que tengan un cre- en el que se desarrollan las cepas en estu-
cimiento óptimo cercano a la temperatura dio, siendo que P. ostreatus es una espe-
promedio de la región. cie de climas templados. Estos resultados
Para ello se llevó a cabo un estudio con reflejan la importancia de estudios sobre
el fin de determinar la temperatura óptima la fisiología de crecimiento de la funga na-
de crecimiento de seis cepas de Pleurotus tiva y la adecuación de los parámetros de
sp. nativas de la provincia de Misiones. Se cultivo, como es la temperatura de incu-
cultivaron en medio agar malta (extracto bación, para los hongos lignocelulósicos
de malta 12.7 g/L; agar 20g/L) cuatro ce- nativos de la Selva Paranaense.
pas de P. djamor (IMiBio-cult #148; #191;
#278; #283), una cepa de P. albidus (IMi-
Bio-cult #117) y una cepa de Pleurotus
sp. (IMiBio-cult #279) aisladas de Misio- Palabras claves: PLEUROTUS SP.; TEMPERATU-
RA ÓPTIMA; CRECIMIENTO; CEPAS NATIVAS;
nes, además de una cepa comercial de P. MISIONES.
ostreatus (IMiBio-cult #51). Las mismas
fueron sometidas a temperaturas de 25,
28, 30, 32 y 35°C. Cada cepa fue replica-
da cinco veces por tratamiento. Se midió
el diámetro de crecimiento cada 48 horas
durante 30 días o hasta la colonización to-
tal de las cajas (9,5 cm de diámetro). Las
cepas IMiBio-cult #117 y IMiBio-cult #278
obtuvieron la mayor velocidad de creci-
miento a los 30°C, colonizando las cajas
119
SESIÓN 5
6BIAR querido para piensos acuícolas comerciales

(21–55%). No obstante, el valor nutricional
Aspergillus sp. V1 como del alimento no solo depende de la cantidad
potencial alimento acuícola: de proteína sino también de su composición
evaluación de la composición en términos de aminoácidos esenciales. Por
otro lado, algunas especies del género As-
proteica y la toxicidad de pergillus son productoras de aflatoxinas (mi-
la biomasa obtenida a partir cotoxinas). Estos metabolitos secundarios
con potente actividad carcinogénica pueden
de vinaza causar un deterioro crecimiento de los pe-
ces, provocando mayor tasa de enfermedad
DEL GOBBO Luciana M; COLIN Verónica L y mortalidad. En base a estos antecedentes,
Planta Piloto de Procesos Industriales Microbio- el objetivo del presente trabajo fue evaluar
lógicos (PROIMI-CONICET), Tucumán, Argentina. el perfil de aminoácidos esenciales para pe-
[email protected] ces y el contenido de aflatoxinas totales (B1,
B2, G1 y G2) en micelio de Aspergillus sp. V1

cultivado en vinaza. Para esto, se determi-
La acuicultura (conjunto de actividades naron los diez aminoácidos esenciales para
humanas orientadas al cultivo de organis- peces por HPLC/FLD en la biomasa liofiliza-
mos acuáticos, incluyendo peces, moluscos, da; mientras que el contenido de aflatoxinas
crustáceos, etc.) es el sector de producción totales se cuantificó empleando un kit de
de alimento de origen animal con mayor inmuno-absorción ligado a enzimas(ELISA,
crecimiento en los últimos años, aumentan- AgraQuant® Total Aflatoxin, 1–20 ppb). Los
do en un promedio de 5,3% por año entre resultados obtenidos demostraron que el
2001 y 2018. Con este rápido crecimien- micelio contenía los diez aminoácidos esen-
to, las harinas de pescado y soja utilizadas ciales para peces cuyos valores, en g/100g
como principales ingredientes proteicos en de micelio liofilizado, fueron: histidina 2,0;
alimentos piscícolas (rama de la acuicultu- treonina 2,6; arginina 5,2; metionina 0,6; va-
ra referida específicamente a la producción lina 4,5; fenilalanina 1,4; isoleucina 3,3; leu-
de peces) se han vuelto menos disponibles cina 5,6; lisina 3,5 y triptófano < 0,1. Cabe
y más costosas. Por lo tanto, para que esta destacar que la mayoría de los aminoácidos
industria sea sostenible, es necesario buscar estuvieron en cantidades similares o incluso
ingredientes alternativos económicamente mayor a los niveles encontrados en harina
viables y nutricionalmente similares a las de pescado y soja; y que solo metionina, fe-
fuentes de proteína tradicionales. Se han nilalanina y triptófano fueron ligeramente
probado diversos ingredientes para reem- más bajos que en estos ingredientes. Final-
plazarlas, incluyendo el micelio de diversos mente, el contenido de aflatoxinas totales
hongos filamentosos producidos a partir de fue de 31,02 ppb. En base a la legislación
residuos agroindustriales. En efecto, en un chilena (resolución exenta de SAG, Chile
estudio previo realizado por nuestro grupo 1966), ingredientes con hasta 50 ppb po-
se demostró que el micelio del hongo Asper- drían emplearse en la formulación de pien-
gillus sp. V1cultivado en vinaza de caña de sos acuícolas. Por lo tanto, nuestros hallaz-
azúcar suplementada con urea (2 g/L) pre- gos sugieren que el micelio de Aspergillus
sentaba un contenido de proteínas totales sp. V1 producido a partir de vinaza podría
del 41%, el cual estuvo dentro del rango re- emplearse como un ingrediente seguro para
la formulación de dietas acuícolas, propor-
120
SESIÓN 5
cionando una fuente adecuada de proteínas Streptomyces spp., son capaces de sobrevi-
en términos de cantidad y calidad. vir en estos sustratos y transformarlos en la
naturaleza. No obstante, los bioprocesos in-
volucrados en la transformación del sustrato
Palabras claves: VINAZA; AMINOÁCIDOS ESEN-
CIALES; AFLATOXINAS; PIENSOS ACUICOLAS; aún no han sido esclarecidos.
BIOMASA FUNGICA. Los microorganismos celulolíticos secre-
tan un conjunto de enzimas que les permi-
ten degradar los polisacáridos estructurales
del material lignocelulósico (celulosa y he-
micelulosas) para utilizarlos como fuente
7BIAR
de carbono. Estas enzimas forman parte de
Potencial genómico de S. las llamadas Enzimas Activas sobre Carbohi-
Albus para la degradación dratos (CAZymes, Carbohydrate Active Enzy-
mes), ampliamente estudiadas y valoradas
de celulosa en sustratos por su potencial aplicación en el aprovecha-
lignocelulósicos miento de biomasa no alimenticia, como
son los residuos agro-foresto industriales,

principalmente para la obtención de bio-
DIETRICH Juliana,b; VELA GUROVIC María S.a,b
combustibles y alimento animal.
a) CERZOS, UNS-CONICET, Bahía Blanca.
En trabajos recientes Streptomyces al-
b) Departamento de Biología, Bioquímica y Far- bus CAS922 fue aislada a partir de cáscara
macia, Universidad Nacional del Sur (BBF UNS), de girasol desechada de la industria aceitera
Bahía Blanca.
(Tippelt et al. 2020). La secuenciación de su
[email protected] genoma completo evidenció la capacidad de
esta cepa para producir metabolitos de alto
valor (Dietrich et al. 2020). En este trabajo
La valorización de residuos agroindustria- nos propusimos analizar la presencia de en-
les cobra mayor interés a medida que los zimas degradadoras de celulosa en el geno-
países reconocen la necesidad de cambiar ma de S. albus y su capacidad para crecer en
el rumbo de la economía global, desde una el agroresiduo en su estado natural.
economía lineal a una economía circular. En
Argentina la cáscara de girasol es un residuo A los fines de identificar los factores críti-
agroindustrial muy abundante, especial- cos para el crecimiento de esta cepa en es-
mente en el sudoeste bonaerense. La mayor tado sólido, se estudió el crecimiento de S.
parte del girasol es utilizado para la produc- albus en cáscara de girasol residual a 37ºC
ción de aceite, lo que genera enormes can- y 45ºC, a tres valores de pH inicial con 65%
tidades de cáscara de girasol como residuo. de humedad inicial. Los resultados demos-
Dentro del concepto de biorrefinería, una de traron un crecimiento óptimo de la cepa a
las estrategias para la revalorización de es- 45°C y a pH inicial neutro.
tos residuos agroindustriales es la utilización Con el fin de conocer el potencial de la
de microorganismos descomponedores del cepa para degradar biomasa lignocelulósica,
material lignocelulósico para la producción se realizó una caracterización de las CAZy-
de moléculas de interés comercial y sani- mes empleando herramientas bioinformá-
tario. Los microorganismos filamentosos, ticas. Para ello, se utilizó dbCAN2, un meta
como las actinobacterias, especialmente servidor integrado que incluye tres herra-
121
SESIÓN 5
mientas diferentes usadas para la anotación para el crecimiento de organismos a fin de

del CAZome: (i) HMMER, (ii) DIAMOND y (iii) maximizar la secreción de enzimas para apli-
Hotpep. carse en bioprocesos como la clarificación
Como resultado se detectaron 143 genes de jugos. Nuestro trabajo se enfocó en el
asociados a CAZymes, representando un uso de Aspergillusniger LBM 134 para pro-
2.23% del proteoma de la cepa. Entre sus ducir enzimas hidrolíticas y emplearlas en el
productos génicos se detectaron enzimas proceso de clarificación de jugo y pulpa de
relacionadas filogenéticamente con enzimas manzana. Este hongo se aisló de un ambien-
celulolíticas de actinobacterias. Entre ellas, te natural y se cultivó en residuos lignocelu-
se puede mencionar enzimas celulolíticas de lósicos de nuestra provincia.
las familias GH1, GH6 y AA10. A. niger LBM 134 se reactivó en medio
En base a la información obtenida duran- agar papa dextrosa 39 gL-1 e incubó a 28 ±
te el crecimiento en estado sólido y a partir 2 °C durante 5 días. A partir de este culti-
de los datos obtenidos in-silico, se concluye vo se obtuvo una suspensión de esporas a
que esta cepa presenta un gran potencial una concentración de 107 esporas mL-1. Se
biotecnológico para la bioconversión del re- tomó 1 mL de esta suspensión y se inoculó

siduo agroindustrial en su estado natural en en frascos Erlenmeyer de 100 mL contenien-
productos con valor agregado. do 25 mL de medios líquidos previamente
optimizados a condiciones estandarizadas
(Díaz et al., 2019). Luego, se filtraron y se
centrifugaron a 10.000 g, 4 ºC durante 15
min para obtener los sobrenadantes en los
cuales se determinaron las siguientes acti-
8BIAR vidades enzimáticas (sobre papel de filtro,
endoxilanasa, β-xilosidasa, celobiohidrola-
Clarificación de jugo y sa, β-glucosidasa, amilasa y pectinasa). Es-
pulpa de manzana por tos sobrenadantes se aplicaron en ensayos
de clarificación de jugo y pulpa de manzana
enzimas hidrolíticas (Malus domestica) en una proporción 1:1.
naturales de Aspergillus Como controles, el jugo y la pulpa se incu-
niger de Misiones baron con agua. Los ensayos se incubaron a
45 ºC durante 120 min y a 50 ºC por 60 min.
Luego, se centrifugaron a 10.000 g durante
BORDAQUIEVICH, Mayra F.a, CONIGLIO, Romina
O.a,b, FONSECA María I.a,b, DÍAZ Gabriela V.a,b. 15 min y la absorbancia de los sobrenadan-
tes se evaluó a 650 nm.
de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales. Ins- Los niveles de las actividades (UmL-1) en-
tituto de Biotecnología Misiones “María Ebe doxilanasa (144 ± 5,65), sobre papel de fil-
Reca”. Laboratorio de Biotecnología Molecular.
tro (0,381 ± 0,00), endoglucanasa (0,372 ±
b) CONICET 0,25), β-glucosidasa (0,28 ± 0,00), celobiohi-
drolasa (0,43 ± 0,00), amilasa (8,64 ± 0,47)
[email protected]
y pectinasa (10,51 ± 0,40) fueron mayores
(p<0.05) en el sobrenadante proveniente
Los bagazos de caña de azúcar y de man- del cultivo conteniendo bagazo de mandio-
dioca son residuos lignocelulósicos que pue- ca. La actividad β-xilosidasa fue mayor (0,74
den utilizarse como sustratos económicos ± 0,05 UmL-1) en el sobrenadante del cultivo
122
SESIÓN 5
con bagazo de caña de azúcar (p<0.05). riksenii, Y. kristensenii y Y. intermedia,han

Las enzimas de los sobrenadantes prove- sido reportadas como productoras de bac-
nientes del bagazo de mandioca lograron el teriocinas por varios autores. Las bacterio-
mayor porcentaje de clarificación en el jugo cinas son péptidos extracelulares de origen
y en la pulpa de manzana (p<0.05). Se obtu- ribosomal, capaces de inhibir el crecimiento
vo un 60,15 ± 5,63 % de clarificación de la o matar bacterias estrechamente relaciona-
pulpa cuando estas enzimas se incubaron a das. Su aplicación en la industria alimentaria
45 ºC durante 120 min y un 36,66 ± 4,01 % representa una alternativa a los tratamien-
de clarificación del jugo cuando se incuba- tos basados en el uso de conservantes quí-
ron a 50 °C durante 60 min. La clarificación micos, antimicrobianos o térmicos, para evi-
se debe a la hidrólisis del material hemice- tar la contaminación y preservar la calidad
lulósico. Las enzimas que utilizamos demos- sensorial y nutricional de los alimentos. En
traron ser efectivas para dicha hidrólisis, por este trabajo se evaluó la producción de bac-
lo que pueden utilizarse como catalizadores teriocinas por cepas deYersiniaaisladas de
naturales para este bioproceso. muestras de alimentos, animales, medioam-
biente, en nuestra región. Se ensayaron 80
cepas de Y. enterocolitica biotipo (B) 1A per-

Palabras claves: CLARIFICACIÓN; BAGAZO DE tenecientes a diferentes serotipos (O),Y.in-
CAÑA DE AZÚCAR; BAGAZO DE MANDIOCA; termedia,Y. frederiksenii y Y. kristensenipara
ENIZMAS HEMICELULOLÍTICAS; SOBRENADAN-
la producción de bacteriocinas. Cepas de re-
TES.
ferencia de Y. enterocolitica B2, B3 y B4, aso-
ciadas a enfermedades transmitidas por ali-
mentos (ETA), fueron utilizadas como cepas
indicadoras para evaluar el efecto antimicro-
9BIAR
biano de las primeras. Previo al ensayo, to-
Bacteriocinas de Yersinia dos los microorganismos fueron cultivados
en caldo Luria Bertani por 18 h a 28°C, con
sp: obtención y evaluación agitación. La producción de bacteriocinas
de su efecto antimicrobiano fue evaluada mediante la técnica de “pun-
teado en césped”. Brevemente, se colocaron
PASCUAL, Lourdes I.; FAVIER, Gabriela I.; inóculos de 10 µl de la suspensión de la cepa
IRIARTE, Hebe J.; ARISMENDI SOSA, Andrea C.; a ensayar en concentración de 1,5x108 ufc/
MATTAR DOMINGUEZ María A. ml, sobre placas de Petri que contenían una
Área de Microbiología e Inmunología. Facultad
capa de agar semisólido inoculado con la
de Química, Bioquímica y Farmacia. Universidad
Nacional de San Luis. cepa indicadora en concentración de 1x106
ufc/ml. Como controles positivo y negativo
[email protected] se utilizaron nisina (bacteriocina aprobada
por FDA como GRAS) y solución fisiológica,
respectivamente. Las placas fueron incuba-
Yersinia enterocoliticaes una enterobac-
das por 18 h a 25°C. La producción de bac-
teria patógena para humanos que se trans-
teriocinas se determinó por la presencia de
mite por agua o alimentos contaminados y
halos de inhibición sobre el crecimiento de
puede causar manifestaciones clínicas como
las cepas indicadoras alrededor de los inó-
enteritis y trastornos inmunológicos cróni-
culos. Se realizaron 3 réplicas de cada ensa-
cos. Ésta y otras especies del mismo género
yo. Se identificaron 38 cepas productoras de
consideradas no patógenas, comoY. frede-
bacteriocinas, entre ellas: 10 de Y. interme-
123
SESIÓN 5
dia, 1 de Y. frederiksenii y 3 de Y. enterocolí- Los pesticidas son compuestos químicos

tica B1A, que mostraron inhibición sobre Y. utilizados en la agricultura para el control de
enterocolitica B2 O:9, B3 O:3 y B4 O:3. Las plagas y enfermedades que afectan a los cul-
bacteriocinas producidas por Y. intermedia tivos y, si bien permiten importantes mejo-
B1 O:35-37-40, Y. enterocolitica B1A O:5 y Y. ras en la agricultura, su uso continuo plantea
intermedia B1 O:4,32-4,33/16-16,29 produ- una preocupación sobre su impacto en el
jeron los mayores halos, con diámetros de medio ambiente y la salud pública. En parti-
14,83±0,29 mm para las dos primeras y de cular, los pesticidas organofosforados (OPs)
14,00±0,50 mm para la última. Los medios son altamente tóxicosy pueden afectar a la
de cultivo que presentaron los halos de inhi- población a través de sus remanentes en ali-
bición más visibles y definidos fueron: Trip- mentos y agua. En este marco, el desarrollo
teína Soya Agar, Agar para Recuento en Pla- de sistemas biológicos para la eliminación
ca y Agar Sabouraud (sin antibiótico). Estos de estas sustancias tóxicas -tales como en-
resultados demuestran la capacidad de pro- zimas capaces de degradar pesticidas OPs,
ducción de bacteriocinas por cepas locales OP hidrolasas- surgen como una alternativa
de Yersinia y su interesante potencial para económica y ambientalmente amigable en

ser aplicadas como inhibidores de cepas pa- comparación con los métodos convenciona-
tógenas de Y. enterocolitica sobre alimentos. les para su remediación.
En este trabajo se estudiaron cuatro bio-
Palabras claves: YERSINIA; BACTERIOCINAS; catalizadores fúngicos categoría GRAS como
INHIBICIÓN. fuente de OP hidrolasas para la eliminación
de residuos de pesticidas de frutas. Aspergi-
llus niger, Fusarium sp., Penicillium chryso-
genum y Penicillium nalgiovense permitieron
obtener entre un 65% y un 92% de degrada-
10BIAR
ción de 500 mg L-1 de metil paraoxon tras 30
Biocatalizadores fúngicos días de reacción en medio ácido (pH 2 y 5).
para la remediación de Estos resultados son plausibles de destacar
ya que son pocas las OPs hidrolasas reporta-
pesticidas organofosforados das activas en estas condiciones, lo que con-
en frutas y verduras lleva a su potencial aplicación en la industria
alimenticia. A partir de extractos extracelu-
lares, parcialmente purificados y liofilizados,
SANTILLAN, Julia Y.a, b; LEWKOWICZ, Elizabeth
S.a; IRIBARREN, Adolfo M.a; ROJAS, Natalia L.b. se destacó el de P. chrysogenum que per-
mitió la degradación de 50 mg L-1 de metil
a) Laboratorio de Biocatálisis y Biotransforma-
ciones. Departamento de Ciencia y Tecnología. paraoxon en 5 días. Este extracto enzimático
CONICET. Universidad Nacional de Quilmes. fue aplicado en el lavado de manzanas con-
taminadas con metil paraoxón alcanzándose
b) Laboratorio de Ingeniería Genética y Biolo- su degradación completa tras 47 h. Además,
gía Celular y Molecular-Área virosis de insectos.
Instituto de Microbiología Básica y Aplicada. De-
considerando las condiciones de lavado de
partamento de Ciencia y Tecnología. CONICET. frutas a nivel industrial, las manzanas tam-
Universidad Nacional de Quilmes. bién fueron tratadas con el biocatalizador
en presencia de SDS y pH 5.0, observándo-
[email protected]
se la degradación completa tras 27 h. Estos
resultados y las ventajas que ofrecen estos
124
SESIÓN 5
biocatalizadores como la fácil manipulación, cona volátil incrementando así el aroma del
conservación y aplicabilidad, indican que vino. Si bien el uso de estas enzimas en la
podrían incluirse en las soluciones de lavado industria del vino es potencialmente intere-
de frutas y vegetales para la eliminación de sante, una gran limitante que presentan las
residuos de pesticidas OPs. enzimas endógenas presentes en el mosto
en el proceso de producción del vino, es que
son poco estables o inactivas en condiciones
enológicas. Es por ello que, en los últimos
11BIAR años, se ha estudiado el efecto de enzimas
β-glucosidasas exógenas sobre estos precur-
Influencia de una sores, buscando producir vinos más aromá-
B-glucosidasa antartica ticos. En este trabajo se estudió el efecto de
una β-glucosidasa Antártica, producida por
sobre precursores la levadura Mrakia sp. LP 7.1.2016, en un
glicosídicos presentes en vino rosado Moscatel joven. Se estudió el
efecto de las siguientes condiciones enoló-
vino moscatel
gicas en la actividad de la enzima: azúcares,

pH, etanol y metabisulfito. Para evaluar el
BEZUS Brendaa; CAVELLO Ivana A.a; efecto sobre los precursores aromáticos, se
DE OVALLE Stefanib; GONZALEZ-POMBO Paulab;
CAVALITTO Sebastián F.a incubó durante 14 días un vino Moscatel ro-
sado joven (pH 4.0) con la enzima pura (1 U
a) Centro de Investigación y Desarrollo en Fer-
mentaciones Industriales, CINDEFI (CONICET -La l-1) y un control sin tratamiento. Para la cap-
Plata, UNLP). Calle 47 y 115. (B1900ASH) La Pla- tación de los compuestos volátiles se empleó
ta, Argentina. fibra 50/30 µm DBV/CAR/PDMS (Stableflex,
SUPELCO, Bellefonte, PA). La naturaleza de
b) Área Bioquímica, Departamento de Biocien- los volátiles se determinó mediante GC-MS
cias, Facultad de Química, Universidad de la Re-
pública, Montevideo (11800), Uruguay.
(cromatografía de gases-espectrometría de
masas), utilizando una columna cromatográ-
[email protected]
fica Carbowax. Se relativizaron las áreas de
los compuestos obtenidos en cada muestra
con estándar interno 30 ppm de n-heptanol.
Los aromas se encuentran entre las prin-
La enzima demostró ser activa en presencia
cipales características del vino y dentro de
de 0-25% v v-1 etanol (entre 96-113% de ac-
estos se encuentran los aromas varietales
tividad relativa) pero sensible a la presencia
que son aquellos que provienen de molécu-
de 2% p v-1 glucosa (6% de actividad relati-
las volátiles de la propia uva y confieren tipi-
va). Por otro lado, la fructosa (10% p v-1) de-
cidad aromática. Gran parte de estas molé-
mostró un efecto estimulante sobre la activi-
culas se encuentran, además de sus formas
dad enzimática (245% de actividad relativa).
libres volátiles, ligadas a glucósidos (pre-
La actividad enzimática no se vio afectada
cursores glicosídicos) o conjugados cisteíni-
por metabisulfito de potasio (60 mg l-1). La
lados, siendo los glucósidos los más abun-
enzima fue inestable a pH 3.0, con una vida
dantes. Estos precursores glicosídicos (no
media de 4,2 h a 20 °C. A pH 4.0, la actividad
odorantes) están presentes en mostos, jugos
se retuvo en un 100% luego de 14 días a la
de frutas y vinos jóvenes. Las β-glucosidasas
misma temperatura. Se observaron diferen-
catalizan la escisión de estos enlaces-gluco-
cias significativas en el contenido total de
sídicos promoviendo la liberación de la agli-
terpenos en el vino tratado respecto al con-
125
SESIÓN 5
trol. Los terpenos alfa terpineno, linalool, sicas similares a los plásticos derivados del
alfa terpineol, oxido de trans y cis linalool, petróleo siendo, además, termoestables y
nerol y geraniol se encontraron en mayor biodegradables, lo que supone una ventaja
concentración en el vino tratado respecto al ecológica frente a los plásticos tradicionales.
control. Particularmente, nerol y geraniol se Algunas especies de bacterias son produc-
incrementaron 10 y 7 veces, respectivamen- toras de estos polímeros. La bioprospección
te, respecto al vino control. Estos terpenos de la microbiota propia de estos residuos,
son típicos de esta variedad de vino, conoci- aparece entonces como solución para su
dos por otorgar notas florales y cítricas. Los biorremediación.Representa a la vez, un
resultados de este trabajo demuestran que enfoque basado en la innovación tecnológi-
la β-glucosidasa Antártica producida por la ca para la economía circular y el desarrollo
levadura Mrakia sp. LP 7.1.2016 posee po- sostenible de la agroindustria en la región.
tencial en esta área de aplicación. Cuatro cepas de los morfotipos bacterianos
aislados de residuos olivícolas producidos
Palabras Claves: AROMA DEL VINO; ENZIMAS en La Rioja, Argentina, presentaron poten-
PSICRÓFILAS; VINO MOSCATEL; MONOTERPENOS. cial para producir biopolímeros intracelula-

res polihidroxialcanoatos (PHA) y extracelu-
lares (EPS). El objetivo del presente trabajo
es caracterizar a nivel molecular y biológico
12BIAR funcional para la producción de PHA, a las
bacterias aisladas en residuos olivícolas de
Bioprospección de cepas La Rioja. Para ello se realizó un análisis filo-
bacterianas nativas genético de las secuencias de ADNr 16S con
MEGA 7.0. La producción de PHA se deter-
productoras de biopolímeros minó mediante microscopía óptica de cam-
aisladas de desechos po claro y epifluorescencia con tinciones
olivícolas lipofílicas, a priori con Sudan Black y poste-
riormente con Azul Nilo. La producción de
EPS se determinó por la capacidad de for-
SOLOAGA, María A.a; ASSAD, Foddaa ;
ROSSO, María C.a; SPANO CRUZ, María A.a; mar biopelículas in vitro, según lo descripto
CORDOBA, Patricia A. a; ROJAS, Laura N.b; por O´Toole y Kolter con modificaciones, y la
GHIRINGUELLI, Pablo D.b intensidad de la producción se realizó según
a) Laboratorio de Microbiología. DACEFyN – el análisis estadístico propuesto por Stepa-
(UNLaR) Universidad Nacional de La Rioja novic. Las cepas se criopreservan en medio
b) Instituto de Microbiología Básica y Aplicada LB y glicerol al 10% a -80°C, en el cepario del
(IMBA) – Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología General de la
(UNQ) Universidad Nacional de Quilmes UNLaR para análisis posteriores. El análisis
[email protected] filogenético de secuencias de ADNr 16S in-
dicó que las cepas pertenecen a las especies
Enterobacter cloacae, Acinetobacter iwo-
La industria olivícola genera gran cantidad
ffii, Pseudomonas aeruginosa y Aerococcus
de residuos líquidos, sólidos y semisólidos
viridans (GenBank PopSet: 1418575285).
en sus procesos de transformación, aptos
Todas las cepas estudiadas fueron positivas
para ser utilizados como fuente de carbono
para las tinciones, Sudan Black y Azul Nilo,
de bajo costo para la biosíntesis de políme-
y fueron capaces de formar biopelículas in
ros naturales que presentan propiedades fí-
vitro aunque con diferente intensidad. La
126
SESIÓN 5
cepa E. cloacae se determinó como forma- subproducto representa aproximadamente

dora fuerte de biopelículas mientras que P. el 85-95% del volumen de leche y a su vez
aeruginosa como moderada. En conclusión, retiene el 55% de los nutrientes, por lo que
las bacterias aisladas del residuo olivícola se puede aprovechar como fuente de valio-
riojano Enterobacter cloacae, Acinetobacter sos productos finales. Los sólidos totales del
iwoffii, Pseudomonas aeruginosa y Aerococ- lactosuero están formados principalmente
cus viridans, son todas productoras de PHA y por lactosa, la cual representa un 4,8% m/v,
EPS con diferente intensidad. El conocimien- además de 0,9% m/v de proteína, 0,8% m/v
to básico generado, ofrece una perspectiva de minerales y menos de 0,05% m/v de gra-
de futuros temas de investigación sobre la sa. La mayoría del lactosuero se desecha en
producción de biopolímeros de interés in- muchos países en todo el mundo y es la cau-
dustrialproducidos por estas cepas, para ge- sa de varios problemas de contaminación
nerar valor agregado a la industria olivícola debido a su alta demanda bioquímica de
regional y la posible biorremediación de los oxígeno (DBO), la cual es de 30.000-60.000
residuos que origina. mg/L, valor el cual va a depender del proce-
so específico que se utilice a la hora de ela-
borar quesos y también mayoritariamente

Palabras claves: BIOPOLÍMEROS; RESIDUOS OLI-
VÍCOLAS; BIOPROSPECCIÓN; CEPAS AUTÓCTO- del contenido de lactosa que posea la leche.
NAS. El cultivo aeróbico de microorganismos en
lactosuero propone una alternativa al pro-
blema de la disposición del mismo. Dicho
proceso permite reducir en un 90-95% su
13BIAR DBO y a la par, generar biomasa y derivados
Bioprocesamiento de de valor agregado. La levadura Kluyveromy-
ces marxianusha mostrado un gran poten-
efluentes de la industria cial para el cultivo en lactosuero debido a su
del queso capacidad de degradar lactosa.Además,po-
see otras características biotecnológicas
ERMILIO, Alejo E.; MORELLI, Matías N.
deseables para su utilización en procesos
fermentativos a nivel industrial, como los es
Laboratorio de Operaciones y Procesos Biotec-
una tasa de crecimiento extremadamente
nológicos. Facultad de Bioquímica y de Ciencias
Biológicas. Universidad Nacional del litoral.
alta, termotolerancia, una alta capacidad se-
cretora de enzimas y crecimiento en un alto
[email protected] rango de pH.
Para estudiar el crecimiento de la leva-
Dentro de nuestros consumos de ali- dura en lactosuero crudo, sin acondicio-
mentos, los derivados de animales ocupan namiento previo, se propuso un diseño de
una gran proporción de la dieta habitual de experimental donde se evaluaron diferentes
nuestra sociedad. La producción de dichos condiciones de pH inicial (4; 7), temperatura
alimentos genera una enorme cantidad de (25ºC; 35ºC; 45ºC) y la influencia de la can-
productos secundarios, cualquiera sea el tidad de inóculo(Sin inóculo; Con inóculo de
origen, de forma constante y, normalmente, levadura: 5×108UFC/ml y 1× 109UFC/ml). Las
creciente, siendo el lactosuero uno de ellos. variables respuesta analizadas fueron: pH,
El lactosuero es un remanente de la precipi- biomasa seca y concentraciones de azúcares
tación y eliminación de la caseína de la le- reductores, α-aminoácidos y proteínas tota-
che durante la elaboración del queso. Este
127
SESIÓN 5
les. El cultivo se llevó a cabo con agitación dad, ha permitido la selección de aislamien-
orbital (130rpm).El análisis de las respues- tos, con acción inhibitoria sobre especies de
tas se realizó a tiempo final, equivalente a Aspergillus y con capacidad de secuestro de
16hs de cultivo. Se observó que, inoculan- aflatoxina AFB1. En este trabajo se profun-
do el lactosuero con levaduras, sin importar diza su estudio, evaluando sus propiedades
el pH o la temperatura, la concentración de probióticas y posibles rasgos patogénicos,
lactosa se redujo en un 95% y también se con el objetivo final de ser utilizados como
registró mayor crecimiento de biomasa en posibles agentes de biocontrol en alimentos.
los tratamientos con inóculo respecto de los En el análisis se emplearon 8 aislamien-
que no fueron inoculados. A 35ºC, indepen- tos, pertenecientes a las especies Pichia
dientemente de la presencia de levaduras o membranifaciens, P. kudriavzevii, Geotri-
del pH, la concentración de α-aminoácidos, chum candidum y Saccharomyces cerevi-
proteínas totales se redujeron un 75% y un siae, y se analizó su potencial probiótico de-
48%, respectivamente. En función de los re- terminando su supervivencia a condiciones
sultados obtenidos se concluye que la cepa gastrointestinales in vitro. Preliminarmente,
es capaz de crecer en lactosuero sin la nece- se analizó la supervivencia en buffer PBS al

sidad de hacer un acondicionamiento previo pH correspondiente a cada etapa (pH=2,5
del mismo, en un amplio rango de tempera- para la fase gástrica y pH=8 para la fase in-
tura y de pH. testinal) con lavados y recuentos en placa al
finalizar cada etapa. Los recuentos no dis-
Palabras claves: LACTOSUERO; BIOPROCESA- minuyeron significativamente para casi la
MIENTO; KLUYVEROMYCES MARXIANUS. totalidad de los aislamientos, excepto para
P. membranifaciens, el cual disminuyó en
un orden de magnitud luego de la etapa in-
testinal. Se procedió a analizar la resistencia
al pasaje gastrointestinal, en donde la fase
14BIAR gástrica consistió en una solución de sales
Caracterización de y el agregado de pepsina 0,3%p/v a pH 2,5
y la intestinal en una solución de sales con
levaduras de Kefir para su pancreatina 0,1%p/v y sales biliares 7%p/v.
aplicación en alimentos Los resultados obtenidos fueron similares a
los del ensayo en PBS, siendo el aislamiento
como biopreservantes de P. membranifaciens el más afectado lue-
go de la etapa intestinal. En relación con la
MOURE, M. Candelaa,b; ALCONADA, Teresaa; virulencia, se analizó la capacidad de adhe-
LEÓN PELÁEZ, Ángelab
sión al modelo de células intestinales Caco-2
a) CINDEFI- CONICET, Universidad Nacional de (Pérez-Torrado et al., 2012), el crecimiento a
La Plata, La Plata, Argentina.
temperaturas 37 y 42°C y la presencia de ac-
b) Cátedra de Microbiología, Facultad de Cien- tividad proteolítica y lipolítica (se cuantificó
cias Exactas, UNLP. La Plata, Argentina. en los casos positivos segúnMacedo, 1997).
[email protected] Todos ellos son atributos relacionados a le-
vaduras patogénicas, por lo que la presencia
El kefir es una bebida probiótica que pre- simultánea de varios de ellos podrían ser un
senta varias propiedades entre las que se indicio de virulencia de la cepa. La capaci-
encuentra su capacidad antifúngica. El estu- dad de adhesión a células intestinales se
dio del rol de las levaduras en dicha capaci-
128
SESIÓN 5
cuantificó entre 0,4 y 2,2%; valores conside- El suero es el subproducto más impor-
rablemente inferiores a los obtenidos para tante en la industria láctea, obteniéndose
Candidaalbicans SC5314, patógeno emplea- a partir de la producción de quesos u otros
do como control positivo, cuya adhesión fue productos coagulados. Este subproducto re-
del 62%. Únicamente los aislamientos de presenta alrededor del 85% del volumen de
G. candidum presentaron actividades enzi- leche utilizado y retiene aproximadamente
máticas positivas y su actividad lipolítica se el 55% de los nutrientes de la leche, princi-
cuantificó entre 32,5 y 96,3 μmoles de ácido palmente proteínas. En los últimos años la
graso liberado/ml.h. De los 8 aislamientos, 3 producción de péptidos derivados de proteí-
pertenecientes a las especies S. cerevisiae y nas alimenticias ha tenido una gran impor-
P. kudriavzevii, crecieron a altas temperatu- tancia industrial debido a que tienen asocia-
ras, y sólo P. kudriavzevii creció a 42°C. das propiedades beneficiosas para la salud,
En base a los resultados obtenidos los ais- como antihipertensiva y antioxidante.
lamientos podrían aplicarse potencialmente En este trabajo, se llevó a cabo la hi-
a alimentos; ya que además de su actividad drólisis enzimática de un concentrado de
antifúngica (biocontrol), sobreviven a las proteínas de suero utilizando tres aspartil
condiciones del pasaje gastrointestinal y proteasas: dos purificadas de Solanum tube-

ninguno presenta más de un atributo ligado rosum, StAP1 y StAP3, y StAP3 expresada en
a la patogenicidad. el sistema heterólogo Kluyveromyces lactis
(StAP3r). Los objetivos planteados fueron:
Palabras claves: LEVADURAS; KEFIR; BIOCON- 1. Comparar la hidrólisis del suero entre las
TROL; PROBIÓTICO. distintas enzimas y 2. Obtener las condicio-
nes óptimas de pH y temperatura para llevar
a cabo la hidrólisis. En ambos casos, la eva-
luación de la eficacia de la hidrólisis se llevó
a cabo determinando el grado de hidrólisis
15BIAR (%DH) por medio de ensayos con o-ftalalde-
Hidrólisis enzimática de hído.
proteínas de suero lácteo La hidrólisis del lactosuero con las StAPs

se llevó a cabo a valores de pH 4, 7 y 9 y
utilizando proteinasas de temperaturas de 20, 37 y 50 ºC. Se incubó
Solanum tuberosum durante 18 hs y se utilizó para cada enzima
una concentración final de 0,33 UCA /g pro-
teína. Para evaluar el %DH se utilizó un di-
TITO, Florencia R. a; PEPE, Alfonso b; GUEVARA,
María G. a seño factorial de 3 niveles con dos variables
numéricas (pH y temperatura) y una variable
a) Laboratorio de Bioquímica Vegetal. Instituto
categórica (enzima). A partir de los resulta-
de Investigaciones Biológicas (IIB). Facultad de
Ciencias Exactas y Naturales. CONICET-UNMdP. dos obtenidos se pudo determinar que, para
las 3 enzimas, el factor pH resultó ser signi-
b) División de Polímeros Biomédicos. Instituto de ficativamente importante en las hidrólisis, a
Investigaciones en Ciencia y Tecnología de Ma-
diferencia de los valores de temperatura. En
teriales (INTEMA). Facultad de Ingenieria. CONI-
CET-UNMdP todos los casos, los %DH más altos se deter-
minaron para las incubaciones realizadas a
[email protected] valores de pH 7. En cuanto a la naturaleza de
[email protected]
la enzima, tanto la StAP3 como StAP3r mos-
129
SESIÓN 5
traron los valores más altos de %DH (2,6 y carga ambiental y su bajo valor agregado,
2,3 % respectivamente) en el modelo predi- este suero representa un riesgo ambiental.
cho respecto a la StAP1 (1,6 %). Sin embar- En este contexto, se propuso su utilización
go, todos los valores obtenidos se encontra- para el cultivo de la microalga Chlorella vul-
ron dentro del rango reportado para otras garis. En ensayos previos se optimizaron las
enzimas vegetales, siendo entre 0,5 y 4 % de condiciones de pretratamiento del suero,
grado de hidrólisis. ajuste del pH y concentración inicial del inó-
Los resultados obtenidos resultan alen- culo. El objetivo de este trabajo fue estable-
tadores para seguir adelante en el estudio cer el efecto de las condiciones lumínicas en
de posibles péptidos bioactivos generados la cinética de crecimiento de C. vulgaris en
a partir de proteínas alimenticias hidroliza- un medio de cultivo mixótrofo, empleando
das con enzimas de S. tuberosum. Ensayos suero de ricota microfiltrado como sustrato.
posteriores de la composición peptídica de Para ello se construyeron sistemas de ilumi-
los hidrolizados nos permitirán evaluar sus nación LED tubulares, provistos con un kit
potenciales actividades biológicas. ArduinoTM para la configuración de ciclos,
intensidades lumínicas y coloración de las

luces. Los sistemas se prepararon con 45 mL
Palabras claves: LACTOSUERO; HIDRÓLISIS; de suero de ricota microfiltrado en Erlenme-
PÉPTIDOS BIOACTIVOS; ENZIMAS VEGETALES.
yers de 250 mL y fueron inoculados con 5
mL de una suspensión de C. vulgaris en me-
dio BG11. Se evaluó el crecimiento microal-
gal en condiciones de exposición a luz LED
16BIAR y luz Fluorescente, ambas blancas. Se apli-
caron fotoperiodos de 12/12 h de luz/oscu-
Optimización de ridad, una radiación PAR aproximada de 50
condiciones lumínicas µmol.m-2.s-1, una agitación orbital continua
de 100 rpm y un tiempo de cultivo de 96 h.
para el cultivo mixótrofo El seguimiento del crecimiento se realizó por
de Chlorella Vulgaris recuento celular en cámara de Neubauer
(Recuento) y densidad óptica (DO) mediante
CASÁ, Nahuela; OLMOS, Nahuela; espectrofotómetro. Los datos obtenidos en
LOIS-MILEVICICH, Julietaa; ÁLVAREZ Paolaa; este ensayo fueron ajustados al Modelo de
MATEUCCI, Ricardoa; ESCALADA PLÁ Marinab; Gompertz Modificado. Los sistemas se rea-
GUTIÉRREZ, María del Carmena lizaron por duplicado y se tomaron nueve
a) Centro de Tecnologías Químicas (CTQ), De-
puntos a lo largo del periodo de incubación
partamento de Ingeniería Química, UTN-FRBA,
Argentina. para el ajuste. Los resultados mostraron el
máximo cambio registrado (C ) = 2,90 ± 0,05,
b) Instituto de Tecnología de Alimentos y Proce- velocidad específica de crecimiento (µ) =
sos Químicos (ITAPROQ), UBA-CONICET FCEyN,
0,21 ± 0,01 día-1 y fase lag o de retardo (λ)
CABA, Argentina.
= 5 ± 1 h, para DO y C = 2,4 ± 0,1, µ = 0,5 ±
[email protected] 0,2 día-1 y λ = 31 ± 2 h, para Recuento en los
sistemas expuestos a luz LED. Mientras que
El suero de ricota es el coproducto de la para los sistemas expuestos a luz Fluorescen-
fabricación de queso ricota. Dado su gran te los valores fueron C = 2,74 ± 0,03, µ = 0,18
volumen de generación, sus altos niveles de ± 0,01 día-1 y λ = 6 ± 1 h, para DO y C = 1,8 ±
0,2, µ = 0,5 ± 0,3 día-1 y λ = 33 ± 3 h, para Re-
130
SESIÓN 5
cuento. Mayores periodos de retardo y ve- tubérculos, frutas y hortalizas, y un 20% de

locidades específicas de crecimiento se re- semillas oleaginosas. La molienda abrasiva
gistraron mediante el recuento en cámara. de granos genera una pérdida considerable
Los sistemas expuestos a luz LED blanca pre- de nutrientes, como minerales, fibra dieta-
sentaron una tendencia no significativa (p > ria y otros compuestos bioactivos. El salva-
0.05) a mayores valores de C y m y menores do de avena, subproducto de la molienda
periodos de retardo. Desde el punto de vista de este cereal se destina principalmente a
del proceso productivo, considerando estos la elaboración de piensos y alimentos balan-
resultados y teniendo en cuenta que el con- ceados. El objetivo del siguiente trabajo fue
sumo energético de las luces LED es menor evaluar el salvado de avena como sustrato/
que el de las Fluorescentes, se concluye que soporte de Lactobacillus acidophilus (ATCC
es conveniente trabajar con las primeras con 4356). Para ello, se empleó la metodología
el fin de aumentar la eficiencia energética de fermentación en estado sólido. Sistemas
del cultivo. Resulta necesario profundizar en conteniendo 1 gramo de salvado de avena
el estudio de condiciones lumínicas de este fueron hidratados, esterilizados e inocula-
cultivo mixotrófico, con el fin de mejorar las dos ≈ 2.104 UFC de L. acidophilus/g salvado
condiciones de crecimiento y la productivi- de avena. Los sistemas se incubaron a 37ºC,

dad celular de C. vulgaris. posteriormente fueron lavados, centrifuga-
dos y sometidos a deshidratación y poste-
rior envasado al vacío. Los efectos del nivel
Palabras claves: MICROALGAS, CHLORELLA
VULGARIS, CONDICIONES LUMÍNICAS, SUE- de hidratación y del tiempo de incubación
RO DE RICOTA, MICROFILTRACIÓN. fueron analizados empleando un diseño fac-
torial completo en tres niveles (24, 48 y 72
hs; 5, 12,5 y 20 mL/g salvado de avena) con
el punto central medido por cuadruplicado.
17BIAR Las variables de respuesta analizadas fueron
Aprovechamiento de el recuento celular y pH del sobrenadante
luego de la incubación, por otro lado se mi-
salvado de avena como dió el rendimiento de producto final y el de-
sustrato y soporte de caimiento celular debido a la deshidratación
y almacenamiento de 7 días a 25°C. Se ob-
Lactobacillus acidophilus servó un efecto lineal significativo (p<0,05)
del tiempo tanto para el recuento como para
SILVA Noelia E. a, b; FLORES Silvia K. a, b;
DE ESCALADA PLA Marina F. a, b el pH, siendo positivo y negativo respectiva-
a) Universidad de Buenos Aires, Facultad de mente. Además, hubo un efecto cuadrático
Ciencias Exactas y Naturales, Departamento de negativo (p=0,0071) del tiempo sobre el re-
Industrias. Buenos Aires. Argentina. cuento celular, que indicaría que en el rango
b) CONICET-Universidad de Buenos Aires. Institu- estudiado se ha superado la etapa de creci-
to de Tecnología de Alimentos y Procesos Quími- miento exponencial en las condiciones ensa-
cos (ITAPROQ). Buenos Aires, Argentina yadas. El nivel de hidratación tuvo un efecto
[email protected] significativo y positivo sobre el rendimiento
del producto final, mostrando además un
efecto cuadrático negativo que indicaría
Cada año se pierden y desperdician alre- que en el rango estudiado hay un nivel de
dedor de un 30% de cereales, un 40–50% de hidratación que optimiza esta variable. Ni el
nivel de hidratación ni el tiempo de incuba-
131
SESIÓN 5
ción tuvieron efectos sobre el decaimiento La economía circular (EC) está ganando
celular posterior a la deshidratación; sin em- cada vez más interés en la sociedad debido
bargo, se observó una correlación momento a todos los beneficios que puede ofrecer,
de Pearson con el recuento celular y el pH desde el aprovechamiento de residuos, has-
(0,8488, p=0,0005 y -0,8269, p=0,0009, res- ta la reducción del impacto negativo en el
pectivamente). Estos resultados muestran medioambiente que tienen los procesos de
la factibilidad de utilizar el salvado de avena manera individual. La digestión anaerobia
como sustrato/soporte de este probiótico, (DA) es un bioproceso importante en la EC
sin embargo, las condiciones de hidratación debido a su versatilidad para el tratamien-
y tiempos adecuados de incubación deben to de sustratos de diversa naturaleza. Los
ser optimizados a fin de maximizar el re- modelos matemáticos que describen a los
cuento celular y su estabilidad final. bioprocesos de DA son de gran utilidad, dado
que mediante diferentes tipos de ajustes en-
tre datos experimentales y aquellos teóricos,
Palabras claves: SALVADO DE AVENA; LACTO-
BACILLUS ACIDOPHILUS; INGREDIENTE FUNCIO- permiten conocer parámetros cinéticos que
NAL. pueden ayudar a una mejor comprensión

de los fenómenos presentes en la DA, como
así también a la optimización del bioproce-
so. Actualmente, el modelo matemático de
referencia corresponde al Modelo de Diges-
18BIAR tión Anaerobia N.º 1 (ADM1). De este mode-
lo se derivan otros modelos, como es el caso
Mejora del modelo del Modelo de reacción Acidogénica-meta-
matemático BNRM2: nogénica 2 (AM2), el cual intenta simplificar
el planteo de ADM1, para generar un mo-
incorporación de delo sencillo que se ajuste a realizar tareas
microorganismos de control de procesos. También se derivan
otros modelos que incluyen la incorporación
Lignocelulolíticos y de cosustratos a la DA, como puede ser el
Metanótrofos Modelo de simulación de referencia N.º 2
(BSM2). De particular interés nos resulta el
ASTORGA, Marcos ; GATTI, Marcela ;
a b Modelo de Remoción de Nutrientes N.º 2
CAMACHO, Alberto . a,c
(BNRM2), ya que fue elaborado con el ob-
a) Laboratorio de Bioprocesos. Facultad jetivo de ser utilizado en plantas de trata-
Regional del Neuquén. Universidad Tecnológica mientos de aguas residuales, y también fue
Nacional. Plaza Huincul, Neuquén, Argentina.
CP: 8318.
utilizado para ajustar parámetros cinéticos
empleando resultados de la determinación
b) Centro de Investigaciones en Toxicología de Potencial Bioquímico Metanogénico, ob-
Ambiental y Agrobiotecnología del Comahue. tenidos en nuestro laboratorio. Estos mode-
CONICET. Universidad Nacional del Comahue.
los matemáticos mencionados, consideran
Neuquén, Argentina. CP:8300.
globalmente las etapas hidrolíticas, acido-
c) Facultad de Ingeniería. Universidad Nacional génicas, acetogénicas y metanogénicas. No
del Comahue. Neuquén, Argentina. CP: 8300. obstante, si bien estos modelos también
[email protected] consideran la materia orgánica lentamente
biodegradable, carecen de la inclusión ex-
plícita de cosustratos lignocelulósicos y mi-
132
SESIÓN 5
croorganismos que los hidrolicen, como así 19BIAR

también de microorganismos metanótrofos,
siendo éstos últimos reportados en estudios
Actividad antioxidante en
recientes de DA. Ambos parámetros son im- hidrolizados de aislado de
portantes para evaluar el rendimiento meta- soja obtenidos con
nogénico de bioprocesos de DA.
En el presente trabajo se propone como
Bromelia hieronymi
objetivo general, mejorar el modelo mate-
SALESE, Lucíaa,b; LIGGIERI, Constanza S.a,c ;
mático BNRM2, incluyendo las etapas hidro- BRUNO, Mariela A.a,b
líticas de sustratos lignocelulósicos, junto a a) Centro de Investigación de Proteínas Vegeta-
microorganismos que los hidrolicen, como les (CIPROVE), Facultad de Ciencias Exactas, Uni-
así también la inclusión de microorganis- versidad Nacional de La Plata (UNLP)
mos metanótrofos. Para ello, se plantea el
b) CONICET
desarrollo de funciones moduladoras, las
cuales incorporan diversos parámetros ciné- c) CIC-PBA
ticos. Para el caso de los compuestos ligno- [email protected]
celulósicos, se consideró agregar constan-

tes cinéticas correspondientes a hidrólisis
de algas y residuos de la agroindustria. Los Las moléculas conocidas como ROS o es-
microorganismos metanótrofos considera- pecies reactivas del oxígeno son generadas
dos, corresponden tanto al dominio de las como productos metabólicos en los pro-
bacterias como al dominio de las arqueas, cesos fisiológicos normales y su presencia
en donde principalmente se consideran dos en exceso puede ocasionar estrés oxidati-
reacciones: la oxidación de metano a meta- vo ocasionando numerosas enfermedades
nol, y la oxidación de metano a dióxido de metabólicas, ya que provocan daño en las
carbono. biomoléculas. En los sistemas alimenticios,
Las mejoras realizadas al modelo BNRM2, la presencia de ROS puede provocar reac-
permiten llevar a cabo simulaciones que ciones indeseables, causando deterioro
contemplen más fenómenos que tienen lu- por la aparición de sabores desagradables
gar durante los bioprocesos de DA. Además, y carcinógenos. Industrialmente se utilizan
se pueden explicar más eficientemente los antioxidantes sintéticos para neutralizar sus
resultados experimentales que emplean, efectos, aunque son cuestionados por su
principalmente, sustratos de diferente con- posible toxicidad. Por esta razón existe un
tenido lignocelulósico. interés general en reemplazarlos por otros
de origen biológico, más adecuados para ser
incluidos en la alimentación humana. El em-
pleo de hidrolizados proteicos en la indus-
Palabras claves: DIGESTION ANAEROBIA; SIMU- tria alimentaria ha ganado relevancia en los
LACIÓN; BNRM2; METANÓTROFOS; LIGNOCELU-
LOSA. últimos tiempos ya que tienen la capacidad
de modificar las propiedades de los alimen-
tos. Si bien para su preparación suelen utili-
zarse enzimas comerciales de origen animal
o microbiano, también pueden emplearse
fitoproteasas. El objetivo del presente tra-
bajo fue obtener un hidrolizado de aislado
133
SESIÓN 5
proteico de soja (Glicine max (L.) Merr.) con pliamente utilizados en la industria. Por otra
actividad antioxidante (AA) y fraccionarlo parte, los hidrolizados podrían ser empleados
por exclusión molecular. Se prepararon hi- directamente en la formulación de alimentos,
drolizados empleando un extracto enzimáti- aportando a la conservación y mejorando la
co parcialmente purificado por precipitación calidad de los productos.
etanólica (PER; 7,41±0,31 Ucas/mg) prepa-
rado a partir de frutos inmaduros de Bro- Palabras claves: FITOPROTEASAS; HIDROLIZA-
melia hieronymi Mez, una planta nativa del DOS PROTEICOS; ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE.
noroeste argentino. Se hidrolizó el sustrato
(S) (5,545 mg/mL) durante 5, 10, 30, 60, 90 y
180 min a 45 y 55 ºC, utilizando una propor-
ción 1:10 de PER:S; la reacción se detuvo por 20BIAR
shock térmico (10 min, 100 ºC). Se realiza-
ron dos controles correspondientes al tiem- Producción de pectina a
po 0 de hidrólisis o blanco de sustrato (BS) y partir de orujo de
al blanco de enzima (BE). El seguimiento de
manzana

hidrólisis se llevó a cabo mediante SDS-PA-
GE con tricina, observándose en todos los
casos una elevada degradación de las pro- PÉREZ, María de los Ángeles; RAMÍREZ, Noelia
S.; FILIPPI, Marcela V.
teínas principales. Se determinó el grado de
hidrólisis (TNBS) obteniéndose los mayores Escuela de Producción, Tecnología y Medio
porcentajes en los hidrolizados de 180 min Ambiente. Universidad Nacional de Río Negro.
(25,84±2,14 % y 26,88±0,17 %, para los hi- [email protected]
drolizados de 45 y 55 ºC, respectivamente).
Empleando el método del ABTS se determi-
nó que la AA fue más elevada respecto del Argentina es un país productor y expor-
BS en el hidrolizado de 180 min de 45 ºC tador de una gran variedad de frutas, entre
(1,86±0,016 mg/ml de Trólox), el cual fue se- ellas las manzanas, cuya producción prome-
leccionado para posteriores estudios. La AA dia las 900 mil toneladas anuales, donde Río
se midió también por el método de inhibi- Negro y Neuquén representan el 85% de di-
ción del β-caroteno, sin obtener resultados cha producción. Aproximadamente el 43%
concluyentes. Con el objetivo de identificar de producción de manzanas se envía para
las fracciones más activas, el hidrolizado fue ser procesada en la industria con destino
separado por cromatografía de exclusión principal el jugo, donde hasta el año 2013 se
molecular empleando una columna Super- registró alrededor de 45.000 toneladas de
dex Peptide 10/300 GL (GE). Se midió la AA manzana destinadas a tal producto (Jorge o.
de las distintas alícuotas por el método del Toranzo, Producción mundial de manzanas y
ABTS, resultando más activa la correspon- peras, Estación Experimental Agropecuaria
diente a 27-33 min de retención (0,32±0,04 Alto Valle, Río Negro, Argentina 2016). En
mg/ml de Trólox) la cual será analizada a futu- este procesamiento industrial se generan
ro por MALDI MS/MS con el objetivo de identi- grandes volúmenes de bagazo, los cuales se
ficar los péptidos responsables de la actividad vuelven inestables y permiten la prolifera-
biológica. Consideramos relevante el estudio ción de insectos, hongos, bacterias y olores
de nuevos antioxidantes de origen vegetal que por descomposición, constituyendo así una
sean más adecuados para su uso en alimenta- fuente de contaminación para la región del
ción humana y reemplacen a los sintéticos am- Alto Valle de Río Negro y Neuquén.
134
SESIÓN 5
Este bagazo, que se concentra mayorita- traída fue identificada como pectina de Alto
riamente de Marzo a Septiembre, se genera Metoxilo con un grado de esterificación del
en el proceso de producción de jugo concen- 64%, convirtiendo esto a la pectina extraída
trado, sidra y mermeladas. Es un material en una de las más cotizadas en el mercado.
residual sólido o semisólido (pasta) y está
conformado por agua (80%), pectina, glúci-
dos, fibras y otros compuestos minoritarios. Palabras claves: BAGAZO; PECTINA; HIDRÓLISIS
ÁCIDA; ALTO METÓXILO.
Las pectinas se encuentran catalogadas den-
tro del Código Alimentario Argentino como
un Aditivo Alimentario, con poder gelifican-
te y espesante y de amplio uso en la indus-
tria Alimenticia y Farmacéutica. Actualmen- 21BIAR
te este insumo se importa desde diferentes Efecto de atrazina sobre
partes del mundo, principalmente Brasil.
recuentos de poblaciones
De acuerdo al método planteado por Za-
rei, M y col. “Effect of microwave-assisted microbianas en biomezclas
extraction on the yield and quality of apple bioaumentadas con

pomace and lemon peel pectins“(Año 2017)
es posible extraer pectina a partir del oru-
actinobacterias
jo de manzana, ofreciendo de esta manera
una alternativa sustentable para solucio- GONZALEZ, Samanta K.a; OCANTE, Teresa A.a;
BENIMELI, Claudia S.a,b y SAEZ, Juliana M.a,c
nar problemáticas que afectan a la región,
generando un producto versátil, de amplia a) Planta Piloto de Procesos Industriales Micro-
aplicación, con un precio muy por encima biológicos (PROIMI)- CONICET. San Miguel de
Tucumán
comparado con el precio del orujo, y que po-
dría competir en el mercado con productos b) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.
extranjeros. Universidad Nacional de Catamarca.
Para ello se optó por utilizar un méto- c) Facultad de Ciencias Naturales e Instituto Mi-
do químico para la extracción de pectinas, guel Lillo. Universidad Nacional de Tucumán
donde inicialmente se procedió a una inac- [email protected]
tivación enzimática, donde se combinó ba-
gazo y agua a 100°C (relación 1 en 2) y se
dejó actuar durante 10 min. Luego se realizó La atrazina (ATZ) es un herbicida utiliza-
una hidrolisis acida, agregándole HCl 1N a la do para el control de malezas en cultivos de
mezcla de bagazo y agua. El tiempo de esta maíz, trigo, caña de azúcar, entre otros. Po-
hidrólisis fue de 60 minutos a 80°C. Poste- see baja afinidad por los componentes del
riormente se filtró la mezcla, obteniéndose suelo, moderada persistencia y solubilidad
una masa liquida a la cual se le adicionó eta- en agua. La contaminación puntual por pla-
nol al 96% en una proporción 2 a 1. Nueva- guicidas ha sido abordada en las últimas dé-
mente se filtró la mezcla, obteniéndose pec- cadas a través de la aplicación de sistemas
tina húmeda la cual se sometió a secado en de biopurificación (SBP).
estufa a 40°C durante 12 horas. Como resul- El objetivo de este trabajo fue evaluar el
tado se obtuvieron 5,33 gr de pectina seca efecto de la ATZ sobre diferentes poblacio-
en 200 gr de orujo, obteniéndose un rendi- nes microbianas en biomezclas, componen-
miento de 2,665%. Además, la pectina ex- te principal de los SBP, y su bioaumentación
135
SESIÓN 5
con Streptomyces sp. M7 (S. M7), una acti- taminada con ATZ el desarrollo bacteriano
nobacteria con capacidad para degradar di- fue similar al del control, con una biomasa
versos plaguicidas. de 2 x 109 UFC/g a los 28 días de incubación.
Para la preparación del inóculo, S. M7 Esta biomezcla presentó los mayores re-
se cultivó en caldo tripteína de soja (72 h, cuentos para todos los grupos microbianos
30°C, 150 rpm). Las células se cosecharon estudiados. Además, se evidenció que la
por centrifugación (10 min, 10.000 rpm) y se inoculación con S. M7 en los sistemas conta-
lavaron 3 veces con agua destilada estéril. minados mejoró el desarrollo de actinobac-
Se prepararon biomezclas (BM) combinando terias y hongos respecto a la BM contamina-
suelo, turba y un residuo/subproducto de da con ATZ.
la industria azucarera (1:1:2): BM1, bagazo; La BM3 contaminadaybioaumentada con
BM2, cachaza; y BM3, residuo agrícola de S. M7 presentó un mayor recuento bacteria-
cosecha. Las biomezclas se estabilizaron (30 no al final del ensayo (4 x 108 UFC/g) respec-
días) y luego se realizaron los siguientes to al inicio, mientras que la BM3 contamina-
tratamientos: BM + ATZ (50 mg kg-1); BM da con ATZ mostró un marcado descenso en
+ S. M7 (2 g kg-1); BM + ATZ + S. M7; y BM el desarrollo bacteriano.

control (sin inocular ni contaminar). Las Se destaca la BM2 por su mayor proli-
biomezclas se incubaron por 28 días (30°C, feración microbiana, como así también el
60% de la capacidad de retención de agua) potencial de Streptomyces sp. M7 para la
y se tomaron muestras periódicamente. bioaumentación de BM en el tratamiento de
Se realizó el recuento de microorganismos atrazina.
en medios de cultivo diferenciales: para
hongos, Diclorán Rosa de Bengala-Cloran-
fenicol (25°C, 72 h); para bacterias culti- Palabras claves: ATRAZINA; BIOMEZCLA; ACTI-
vables totales, Agar de Recuento en Placa NOBACTERIAS; BIOAUMENTACIÓN.
con cicloheximida (100 µg/mL) (30°C, 48
h); para actinobacterias, Caseína Almidón
Agar con cicloheximida (100 µg/mL) y áci-
do nalidíxico (25 µg/mL) (30°C, 120 h). 22BIAR
La población fúngica mostró mayor sen- Tratamiento de efluente

sibilidad a la ATZ que los demás microorga- textil real mediante la
nismos estudiados en todas las biomezclas.
Las actinobacterias presentaron recuentos levadura antártica
variables en las distintas biomezclas y tra- Candida sake 41E
tamientos; sin embargo, en BM2 y BM3 los
recuentos de actinobacterias fueron signifi- RUSCASSO, Florencia a; ARTURI, Tatiana b;
cativamente mayores en los sistemas bioau- CAVELLO, Ivana a; CURUTCHET, Gustavo c;
mentados con S. M7 respecto a los sistemas CAVALITTO, Sebastian a
sin bioaumentar, al final del ensayo. a) Centro de Investigación y Desarrollo en Fer-
mentaciones Industriales (CINDEFI), UNLP, CCT
En la BM1 se observó un perfil ascen- La Plata-CONICET, Calle 47 y 115, 1900-La Plata,
dente en el recuento de bacterias totales en Provincia de Buenos Aires, Argentina.
todos los tratamientos, alcanzando una bio-
b) Facultad de Ingeniería. Universidad Nacional
masa de aproximadamente 2 x 107 UFC/g al de La Plata, Calle 1 y 47, 1900-La Plata, Provincia
final del ensayo. En la BM2 inoculada y conde Buenos Aires, Argentina.
136
SESIÓN 5
c) Instituto de Investigación e Ingeniería Ambien- Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO) del

tal -IIIA, UNSAM, CONICET, Campus Miguelete, efluente textil real en el ecualizador excedie-
25 de mayo y Francia, 1650-San Martín, Provin- ron los valores permisibles, 4793.8 y 1488.7
cia de Buenos Aires, Argentina. Escuela de Cien-
mg/l respectivamente, ya que los límites de
cia y Tecnología e Instituto de Investigación e In-
geniería Ambiental, UNASM, CONICET, Av. 25 de descarga a agua superficial no deberían su-
Mayo y Francia, 1650-San Martín, Provincia de perar los 250 mg/l (DQO) y 50 mg/l (DBO)
Buenos Aires, Argentina. (Resolución Nº 336/03, Autoridad del Agua).
El efluente tuvo un valor de pH de 8.76,
[email protected]
coincidiendo con los valores característicos
reportado comprendidos entre 5.6-11.8 (Ih-
La industria textil es una de las mayores sanullah et al., 2020). Este valor se encuen-
generadoras de efluentes líquidos, fuerte- tra dentro del límite permitido por la Auto-
mente coloreados, que contienen altas con- ridad del Agua (entre 6.5-10, Resolución Nº
centraciones de sales, y gran variedad de 336/03).
productos químicos de difícil degradación A las 48 horas de cultivo se pudo observar
(Ihsanullah et al., 2020). Por lo tanto, estos una marcada reducción en la absorbancia en
efluentes son uno de los más difíciles de tra- el visible y una reducción de los picos a 220
tar y requieren un tratamiento antes de que y 260 nm, correspondientes a los anillos de
dichas aguas sean vertidas encuerpos recep- benceno y benceno sustituido, respectiva-
tores. El objetivo de este trabajo fue carac- mente (Feng et al., 2000). No se observó la
terizar fisicoquímicamente un efluente de aparición de nuevos picos de absorbancia,
una industria textil ubicada enla localidad de asociados a nuevos metabolitos. El porcen-
Lanús (Pcia Bs As) la cual vierte sus efluen- taje de decoloración total obtenido a las 48
tes tratados a la Cuenca Matanza Riachuelo. hs fue del 74,1%, calculado de acuerdo a lo
Además, se estudió la capacidad de decolo- reportado por Martorell et al. (2018). El va-
ración de la levadura antártica Candida sake lor del pH no se vió modificado a lo largo del
41E al estar en contacto con dicho efluente. tiempo de cultivo. En cuanto a la cinética de
El punto de toma de muestra se encontraba crecimiento de la levadura, se pudo ver un
en el ecualizador de la industria. Para los en- comportamiento diaúxico, probablemente
sayos de decoloración se utilizó al efluente el primer sustrato consumido fue la glucosa
textil real sin dilución, al cual se le adiciona- y luego alguna fuente de carbono presente
ron (en g l-1): 5.0 KH2PO4, 0.5 MgSO4, 0.13 en el efluente ya que en el control biótico
CaCl2, 20.0 glucosa, 2.5 extracto de levadu- (medio de cultivo sin el efluente real) no se
ra, 1.25 urea. Además, se realizó un cultivo observó dicho comportamiento. Este estu-
abiótico, sin inocular. Cada cierto tiempo se dio ha demostrado que la levadura seleccio-
realizó un espectro UV-Vis de cada sobre- nada sería potencialmente útil para su apli-
nadante, a fin de analizar la disminución cación en un proceso de decoloración del
de intensidadde absorbancia, así como la efluente real estudiado.
aparición de otros picos. El crecimiento de
la levadura se siguió mediante la medida de
densidad óptica (DO600). Al finalizar los cul-
tivos se determinó la biomasa a través del Palabras claves: EFLUENTE TEXTIL; COLORAN-
método gravimétrico de peso seco. TES; BIODECOLORACIÓN; CANDIDA SAKE.
Los valores obtenidos para los paráme-
tros Demanda Química de Oxígeno (DQO) y
137
SESIÓN 5
23BIAR a cabo se tomaron muestras de sedimentos

de faldeo y cauce del humedal. Se caracte-
Del sedimento rizaron exhaustivamente cuantificando pH,
contaminado de un cantidad de humedad, materia orgánica,
humedal a su sulfuros, sulfatos y especiación de iones fé-
rrico y ferroso con técnicas estandarizadas.
biorremediación Luego las muestras se secaron y separaron
en distintos tamaños mediante un tren de
PRETZ, Florenciaa; PRADOS, Belénb; FOUGA tamices. Algunas de estas fracciones se ana-
Gastónc; LESCANO Mariela b; PASQUEVICH lizaron por SEM, DRX, FRX y se hicieron aná-
Danielb; BOHÉ Anac; CURUTCHET Gustavoa
lisis de porosidad. También se realizaron di-
a) Instituto de Investigación e Ingeniería Am- gestiones microondas para la cuantificación
biental, Universidad Nacional de San de Energía de metales. Simultáneamente, se procedió
Martín
a aislar bacterias autóctonas del humedal.
b) Instituto y Desarrollo Sustentable, Centro Ató- Se buscaron bacterias acidófilas oxidantes
mico Bariloche de Fe(II) y azufre, como Acidithiobacillus

c) Gerencia Complejo Tecnológico Pilcaniyeu, ferrooxidans y Acidithiobacillus thiooxidans
División cinética química, Comisión Nacional de con medios 9K y 0K respectivamente; bacte-
Energía Atómica rias anaeróbicas Fe(III) reductoras y sulfato
[email protected]
reductoras con medios Geobacter y Postga-
te; y bacterias electrogénicas, haciendo cre-
cer aquellas aisladas en medio Geobacter
Un contaminante es un compuesto pre- desde la muestra de cauce en celdas electro-
sente en el medio natural en una concentra- químicas, en las cuales usan acetato como
ción mayor a la considerada normal para el donor de electrones y un electrodo como
mismo en ese contexto. Los metales pesa- aceptor. Los ensayos de biolixiviación se
dos en particular resultan muy problemáti- realizaron con bacterias stock de A. ferrooxi-
cos pues son persistentes y tóxicos, incluso dans y A.thiooxidans, agregándolas a frascos
en bajas concentraciones. El Complejo Tec- agitados con sedimentos del cauce del hu-
nológico Pilcaniyeu es una planta de enri- medal con varias combinaciones de agrega-
quecimiento de uranio y próximo al mis- dos de fuentes de electrones (Fe(II) y azufre
mo se encuentra un humedal natural que elemental), dado que no se encuentran en
durante la década de los años noventa ha el humedal, y se realizaron controles sin ino-
ido acumulando contaminación en sus se- cular bacterias. Se destaca que se tiene una
dimentos con metales, como uranio, níquel caracterización granulométrica del humedal
y cobre. El objetivo del presente trabajo fue y que la muestra proveniente del cauce tie-
analizar fiscoquímicamente estos sedimen- ne metales en mayor concentración a la del
tos para conocer sus características, aislar faldeo, por eso fue la elegida para realizar la
bacterias endógenas del humedal y luego biolixiviación. No fue posible aislar bacterias
liberar metales por medio de biolixiviación. oxidantes, probablemente debido a la falta
Esta técnica consiste en estimular el meta- de donores electrónicos. Estos resultados
bolismo de microorganismos acidófilos para indican que la comunidad microbiana es
conseguir generación de acidez y oxidación regulada por sustratos y no por aceptores
de sulfuros y Fe(II), llevando a la solubiliza- electrónicos. En cambio, sí se aislaron bac-
ción de metales de la matriz. Para llevar esto terias reductoras y se pudieron seleccionar
bacterias electrogénicas. Se encontraron
138
SESIÓN 5
las condiciones preliminares óptimas para convenientes y podrían contaminar el me-

la biolixiviación de los metales estudiados, dio ambiente. La biorremediación de estos
en condiciones de generación de ácido por efluentes con microalgas fotosintéticas es
agregado de azufre y Fe(II). Los resultados una tendencia creciente en todo el mundo,
permiten diseñar lechos percoladores para siendo particularmente atractiva para estos
lograr el escalamiento del proceso y los lixi- casos, debido a las capacidades de estos
viados se podrían tratar en un futuro en un organismos unicelulares, foto-autotróficos,
sistema bioelectroquímico para la remoción para asimilar nitrógeno y fósforo, reducir
y recuperación de uranio hexavalente pre- la demanda de oxígeno químico y bioquí-
sente. mico y realizar una desinfección indirecta
de microorganismos patógenos. El obje-
tivo de este trabajo es estudiar la capaci-
Palabras claves: BIORREMEDIACIÓN; METALES;
SEDIMENTO; HUMEDAL. dad de biorremediación de microalgas en
efluentes urbanos de General San Martín
(Chaco-Argentina) mediante el monito-
reo de parámetros fisicoquímicos y mi-
crobiológicos. El efluente se recogió de la

cámara de desbordamiento en la entrada
24BIAR de la planta de purificación en el sistema
Tratamiento de efluentes de saneamiento municipal. Se cultivó una
especie nativa de microalgas, identificada
urbanos con microalgas como Chlorella sp., presente en el efluen-
autoctonas en general San te crudo. Se realizaron análisis microbioló-
gicos y fisicoquímicos del efluente antes y
Martin-Chaco después del tratamiento de microalgas. Se
determinaron coliformes totales y fecales,
PILA, Andrea N.; CUELLO, María C.; aerobios mesófilos, mohos y levaduras,
CHAMORRO, Ester R.a,b contenido de nitrógeno y fósforo, DBO,
a) Centro de Investigación en Química Orgánica
DQO entre otros. Los resultados muestran
Biológica (QuIMOBI) Facultad Regional Resisten-
cia- Universidad Tecnológica Nacional. que después del tratamiento con micro-
algas la carga microbiana disminuyó sig-
b) Instituto de Modelado e Innovación Tecnológi- nificativamente, al igual que mejoran los
ca (IMIT-CONOCET)
parámetros fisicoquímicos. Eso indicaría
[email protected] que Chlorella sp.se puede utilizar para la
biorremediación de aguas residuales.
El aumento de la población mundial re-

gistrado durante las últimas décadas conlle-
va asociado un aumento en la generación de
residuos como consecuencia de la actividad
Palabras claves: BIORREMEDIACIÓN,
humana, como las aguas residuales urbanas. EFLUENTE, MICROALGA.
Las emisiones de efluentes con alto conte-
nido en materia orgánica, nitrógeno, fósforo
y otros componentes pueden resultar en el
proceso de eutrofización. Existen tratamien-
tos costosos e ineficaces que presentan in-
139
SESIÓN 5
25BIAR 0,1 M (pH 7, conteniendo EDTA) seguido de

clarificación por centrifugación. El extracto
Queso de pasta blanda fue caracterizado en cuando al contenido de
elaborado con extracto de proteínas y actividades proteolítica (sobre
alcaucil: evaluación de caseína de leche bovina) y coagulante (sobre
leche bovina entera) en diferentes condiciones
propiedades funcionales de pH (de 6,8 a 5,8) y temperatura (entre 25° y
45°C).Posteriormente, en simultáneo se elabo-
CROSETTI, Valentina a, b; SOLA, Agustína; raron dos quesos tipo cremoso empleando 2 L
TORRES, María J. a, b de leche cruda pasteurizada (30 min a 63°C), en
a) Laboratorio de Alimentos. Escuela de Ciencias iguales condiciones de pH (6,4) y temperatura
Agrarias, Naturales y Ambientales. Universidad
(37°C) previamente optimizadas; la única dife-
Nacional del Noroeste de la Provincia de Buenos
Aires. rencia en el proceso de elaboración fue el coa-
gulante: uno se elaboró con el extracto de flor
b) Centro de Investigaciones y Transferencia de alcaucil y el otro con cuajo comercial (Chy
del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires
Max FAR M Sticks, Chr. Hansen). En los quesos
(CIT-NOBA) – CONICET, UNNOBA, UNSAdA

desarrollados se determinaron el rendimento
[email protected] final y las propiedades funcionales: capacidad
de fusión y flujo (derretibilidad), pardeamien-
to y liberación de aceite. El extracto obtenido,
Desde hace varios siglos el queso tiene un denominado Cs, presentó actividad proteolíti-
rol importante en la alimentación humana. ca sobre caseína de leche bovina, con una ac-
El desarrollo de nuevos productos con carac- tividad específica de 0,21 Ucas/mg de proteí-
terísticas sensoriales distintivas, a partir de la nas, y cuyo pH óptimo resultó 6,4. Su actividad
innovación en los insumos y procesos, es de coagulante fue comparable a la del coagulante
interés para la industria quesera, dado que comercial, aumentando al descender el pH de
los consumidores buscan nuevas alternativas la leche o incrementando la temperatura en
de sabor y texturas. En Argentina, el principal los rangos ensayados. El rendimiento del que-
ingrediente es la leche vacuna y mediante el so desarrollado con Cs fue menor que el ela-
empleo de nuevos coagulantes o fermentos borado con coagulante comercial, y presentó
pueden desarrollarse quesos sensorialmente diferencias en las propiedades ensayadas: ma-
diferentes. En tal sentido, las especies vegeta- yor derretibilidad y pardeamiento con forma-
les son una fuente de interés en la obtención ción de burbujas, y menor liberación de aceite.
de extractos con actividad proteolítica que El análisis sensorial preliminar reveló un leve
pueden emplearse como coagulantes alterna- sabor amargo en el queso desarrollado con el
tivos a la quimosina, presente en los cuajos co- extracto vegetal debido a una mayor proteóli-
merciales. El objetivo del trabajo fue obtener y sis. Ajustando algunos parámetros del proce-
caracterizar un extracto proteolítico a partir de so, como temperatura y tiempo de coagula-
la flor de alcaucil (Cynara scolymus) para desa- ción, resulta promisorio el empleo del extracto
rrollar un queso de pasta blanda y comparar Cs como potencial coagulante alternativo en el
las propiedades funcionales del mismo con el desarrollo de quesos de pasta blanda.
elaborado con coagulante comercial en igua-
les condiciones de proceso.
Palabras claves: CYNARA SCOLYMUS; COA-
A partir de las inflorescencias de alcaucil GULANTE VEGETAL; QUESOS; PROPIEDADES
se obtuvo un extracto vegetal mediante so- FUNCIONALES
lubilización de los pistilos en buffer fosfato
140
SESIÓN 5
26BIAR ción a 1000 bares utilizando un homogenei-

zador de alta presión. Las células no tratadas
Influencia de la y resuspendidas en el buffer se usaron como
homogeneización de alta control. Las suspensiones celulares trata-
presión en la culturabilidad, das (H) y no tratadas (C) se almacenaron a
-80ºC hasta que se requirieron. La cultura-
viabilidad, actividad bilidad, viabilidad y arquitectura celular fue
enzimática y potencial determinada mediante recuentos en placa,
citometría de flujo (CF) y microscopía elec-
metabólico de trónica de barrido (ME), respectivamente.
Lacticaseibacillus La actividad lactato deshidrogenasa (LDH)
se midió en extractos libres de células (ELC)
paracasei 90 obtenidos después de la centrifugación de
las suspensiones celulares. Finalmente, el
PERALTA, Guillermo H. a,b; AGUIRRE, Andrés e; impacto del tratamiento aplicado sobre el
MENZELLA, Hugo G.e; BÜRGI, M.D. Milagros c;
MARTÍNEZ, Luciano J.d; ALBARRACÍN, Virginia potencial metabólico de L90 se evaluó en
H.d; HYNES, Erica R.a; BERGAMINI Carina V.a elaboraciones de quesos semiduros a esca-
la laboratorio en los que se incorporaron las
Facultad de Ingeniería Química (FIQ-UNL), Santa suspensiones celulares (C y H) y el ELC de L90
Fe, Argentina. como cultivos adjuntos o pool de enzimas,
b) Facultad de Ciencias Agrarias (FCA-UNL), respectivamente. Streptococcus thermoph-
Esperanza, Argentina ilus fue utilizado como cultivo iniciador en
c) Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas todos los quesos. Cuatro tipos de quesos (Q)
(FBCB-UNL), Santa Fe, Argentina fueron elaborados por triplicado: un queso
d) Centro de Investigaciones y Servicios de control sin adición de cultivo adjunto (Q0) y
Microscopía Electrónica (CONICET), Tucumán, tres quesos experimentales adicionados de
Argentina la suspensión celular C (Q1) y H (Q2) en un ni-
e) Universidad Nacional de Rosario, IPROByQ- vel de ~ 106 ufc/mL, y el ELC obtenido a par-
CONICET, Rosario, Argentina
[email protected]
tir de 5 mL de la suspensión celular H (Q3). Al
finalizar el tiempo de maduración (4 meses)
se analizó el nivel de diversos grupos bacte-
La homogeneización de alta presión (HPH rianos (bacterias totales, lactobacilos, ente-
por sus siglas en inglés) de fermentos uti- rococos, coliformes, hongos y levaduras), la
lizados en quesería puede contribuir a la composición global (pH, grasa, humedad y
maduración de los quesos mejorando la ac- proteína), y los perfiles peptídicos (HPLC-UV
cesibilidad de enzimas intracelulares de los y MALDI TOF). El nivel de culturabilidad no
fermentos a sus respectivos sustratos en el fue afectado (p<0,05) por el tratamiento de
queso. El objetivo de este trabajo fue es- HPH. Sin embargo, los resultados de CF, ME
tudiar la influencia del tratamiento de HPH y LDH evidenciaron daños de las cubiertas
sobre la culturabilidad, viabilidad, actividad celulares por el tratamiento aplicado, lo que
enzimática y potencial metabólico de Lacti- podría favorecer la liberación de enzimas in-
caseibacillus paracasei 90 (L90). La suspen- tracelulares. Los perfiles peptídicos determi-
sión celular de L90 (~109 ufc/mL) resuspen- nados por MALDI TOF presentaron diferen-
dida en buffer fosfato de potasio 50mM se cias notorias entre los quesos, resaltando el
sometió a un tratamiento de homogeneiza- potencial de L90 como cultivo adjunto con
impacto en la peptidólisis. Un menor nivel
141
SESIÓN 5
de enterococos se observó en Q1, Q2, y Q3 El orujo de manzana es un residuo orgá-

respecto a Q0. Este efecto podría ser atribui- nico proveniente de la molienda de la fruta
do a una inhibición de los enterococos ad- para la producción de caldos de sidra, jugos
venticios, potencialmente perjudiciales, por y jugos concentrados. En la región del Alto
L90. Teniendo en cuenta la influencia de L90 Valle de Río Negro y Neuquén, se produ-
en la peptidólisis, es posible que algunos de cen aproximadamente 100.000 Tn anuales
los péptidos producidos por las peptidasas del mismo, el cual si no es tratado adecua-
de esta cepa tengan actividad antimicrobia- damente origina impactos negativos en el
na. Finalmente, la viabilidad de L90 en los ambiente. Debido a la falta de antecedentes
quesos Q1 y Q2 no fue afectada por el tra- sobre producción de biogás con este sus-
tamiento aplicado. El tratamiento de HPH trato, se propuso evaluar la estabilidad del
demostró ser una tecnología eficiente para proceso con el orujo como monosustrato a
incrementar la accesibilidad de las enzimas escala piloto.
intracelulares de L90, lo que tuvo un impac- El ensayo inició en Dic/2020. Se utilizó
to durante la maduración de queso semidu- un biodigestor comercial marca Homebio-
ro. Los resultados obtenidos resaltan el po- gás, de 0,6 m3. Se inoculó con estiércol

tencial de esta tecnología para diversificar/porcino diluido en agua, y en el día 47,
modular la actividad de fermentos utilizados luego de 2 semanas de carga diaria con es-
en quesería. tiércol porcino, comenzó la carga de orujo
de manzana proveniente de una juguera
Palabras claves: HPH, VIABILIDAD, LACTOBACI- local. El Tiempo de retención hidráulico
LOS, QUESO, PÉPTIDOS. fue de 67 días y la Carga Orgánica Volu-
métrica fue de 0.975 kg SV/m3*d. Diaria-
mente se midió: temperatura ambiente,
temperatura al interior del cobertor, tem-
27BIAR peratura dentro del reactor, presión del
sistema, volumen y porcentaje de metano
Evaluación del proceso del biogás, pH, conductividad eléctrica y
de digestión anaeróbica a potencial redox del digerido. Periódica-
mente se monitoreó la alcalinidad parcial
escala piloto con orujo de y total, ácidos grasos volátiles (AGV), y los
manzana como único indicadores alfa y FOS/TAC. La agitación se
sustrato realizó mediante recirculación del digeri-
do.
ZANOVELLO, Lucas.a; BARTUCCI, Sandra La,b; Los orujos de manzana tienen bajos pH
CESANO, Margarita b,c,; MARTÍNEZ, Irened y alto contenido de AGV (Bartucci et al.,
a) Área de investigación y desarrollo tecnológi-
2019), condiciones adversas para la diges-
co para la agricultura familiar región Patagonia,
Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria.tión anaeróbica. Como estrategia para la
estabilidad del pH se diluyó el orujo con
b) CONICET el propio digerido del digestor (para lograr
c) CITAAC, Universidad Nacional del Comahue,
% de sólidos totales menor a 10%), que,
Neuquén.
d) Universidad Nacional de Río Negro, Escuela al ser inoculado con estiércol porcino,
de producción, tecnología y medio ambiente. poseería una capacidad buffer potencial-
mente adecuada para este propósito.
[email protected]
142
SESIÓN 5
Los resultados mostraron que la estrate- 28BIAR

gia adoptada fue acertada, obteniéndose un
rendimiento promedio de 167 L CH4/Kg SV
Expresión y
durante un período de 104 días de proceso caracterización de una
estable. En el mes de Mayo, con temperatu- α L-ramnosidasa de
ras internas promedio de 8°C, se evidenció
acumulación de AGV en el biodigestor, con Actinoplanes missourensis
valores de alfa y FOS/TAC fuera del rango 431t activa en acido cítrico
óptimo. Sin embargo, el pH no bajó de 7 en
ningún momento, demostrando que es un
BAGLIONI Micaelaa, OMARINI Alejandraa,b,
indicador muy tardío de fallas del proceso, BRECCIA Javier D.a, MAZZAFERRO Laura S.a
pudiendo llevar a desestabilizaciones irre-
a) 1 Instituto de Ciencias de la Tierra y Ambienta-
versibles del mismo. Luego de la suspensión les de La Pampa (INCITAP), Universidad Nacional
de la carga, los parámetros se recuperaron. de La Pampa – Consejo Nacional de Investiga-
Como conclusión, se puede observar que ciones Científicas y Técnicas (UNLPam-CONICET),
FCEyN, Av. Uruguay 151, 6300 Santa Rosa, Ar-
es posible un proceso estable utilizando el
gentina,
propio digerido para el control de la acidifi-
cación, incluso en regiones de clima frío, con b) Institute of Food Chemistry and Food Biote-
temperaturas ambientes promedio de 15°C chnology, Justus Liebig University Giessen, Hein-
(último mes), obteniéndose rendimientos rich-Buff-Ring 17, Giessen, 35392 Germany
comparables a los expuestos por otros auto- [email protected]
res (en ensayos de laboratorio con tempera-
tura mesofílica controlada). Sin embargo, es
indispensable alguna estrategia para mante- Los desechos sólidos de los cítricos son
ner la temperatura del biodigestor por enci- ricos en materiales fermentables como azú-
ma de los 10°C en la época invernal. cares y pectinas, además contienen altas
concentraciones de glicósidos de flavanonas
Estos resultados tienen gran implicancia
(hesperidina y naringina) y cantidades me-
en la gestión del residuo, permitiendo su
nores de otros flavonoides. El tratamiento
correcto tratamiento y valorizándolo, obte-
de los mismos con αlramnosidasa repre-
niéndose una energía limpia, que puede ser
senta una herramienta para su revaloración
utilizada directamente en los procesos tér-
mediante la recuperación de monosacáridos
micos de las jugueras/sidreras, y el digerido,
de alto valor agregado, ramnosa, un inter-
una enmienda orgánica que puede ser apli-
medio quiral en la síntesis orgánica de mo-
cada en los respectivos cultivos de manzana,
léculas bioactivas. Las αlramnosidasas (E.C.
para reemplazar parcialmente los fertilizan-
3.2.1.40) son glicósidasas que escinden es-
tes químicos.
pecíficamente el enlace homo o heterosaca-
rídico, liberando el residuo de ramnosa. Sin
embargo, se encuentran con el desafío de
ser inhibidas por altas concentraciones de
Palabras claves: ORUJO DE MANZANA, MONO- azúcares y ácido cítrico.
SUSTRATO, DIGESTIÓN ANAERÓBICA, VALORIZA-
CIÓN DE RESIDUOS. En este trabajo se identificó in silico una
αlramnosidasa en el genoma de Actinopla-
nes missourensis 431T. La misma se clonó y
expresó de forma recombinante en E. coli y
143
SESIÓN 5
se purificó mediante cromatografía de afini- biental -CONICET, Universidad Nacional de San

dad. Se evaluaron las condiciones de reac- Martín, 25 de Mayo y Francia, San Martín, Pcia
ción definiéndose un pH óptimo de trabajo de Buenos Aires, Argentina.
cercano a 6 y un rango óptimo de tempe- c)Instituto de Energía y Desarrollo Sustentable,
ratura entre 25 y 45 °C (80 % actividad). La Comisión Nacional de Energía Atómica, Centro
αlramnosidasa no mostró inhibición en pre- Atómico Bariloche, Av. Bustillo 9500, CP 8400, S.
sencia de 50 mM buffer citrato de sodio. Esta C. de Bariloche, Río Negro, Argentina.
enzima se destacó por su promiscuidad, con d)Consejo Nacional de Investigaciones Científi-
actividad con el disacárido rutinosa, 7Oru- cas y Técnicas. CONICET. Godoy Cruz 2290. CABA
tinosilflavanonas, 3Orutinosilflavonoles y – Argentina
polisacáridos que contienen ramnosa, tales [email protected]
como goma karaya, arábiga y gellan.
A fin de revalorizar residuos ricos en flavo-
noides, se caracterizó un residuo de naranja Las microalgas son microorganismos eu-
proporcionado por ECA Agroindustria (Con- cariotas fotosintéticos con una gran varie-
cordia, Entre Ríos). El mismo consistió en dad de aplicaciones y potencial biotecnoló-

(% sobre peso seco): 20.45 ± 0.45 celulosa, gico debido a la producción de compuestos
26.0 ± 2.8 hemicelulosa, 7.09 ± 0.37 lignina bioactivos como pigmentos, lípidos, pro-
Klason, y 3.3 hesperidina (7Orutinosilhespe- teínas y vitaminas, entre otros. Entre estos
retina). El tratamiento de dicho residuo con compuestos se encuentran las sustancias po-
la αlramnosidasa, resultó en la producción liméricas extracelulares (SPE) que las células
del monosacárido libre ramnosa. Por ende, excretan, y las que están compuestas prin-
la αlramnosidasa de A. missourensis 431T cipalmente por polisacáridos, así como por
representa un biocatalizador con potencial proteínas y lípidos. Las SPE podrían tener un
aplicación para la revalorización de subpro- rol importante en los procesos de aglome-
ductos de la industria citrícola. ración celular, lo que favorecería la cosecha
de las microalgas, proceso que representa
un alto costo en la aplicación biotecnológica
de las mismas. Estudios previos han demos-
29BIAR trado que en condiciones de estrés las cé-
lulas producen mayores cantidades de SPE.
Rol de sustancias En función de las características fisicoquími-
poliméricas extracelulares cas que este tipo de compuestos presentan,
pueden interaccionar con metales presentes
en la agregación de en solución, pudiendo favorecer los proce-
microalgas sos de adsorción de los mismos por microal-
gas. No obstante, este tipo de interacciones
ALFONSO, Andrés J.a; ARECO, María M.bd; PAS- no ha sido del todo estudiado. El objetivo del
SUCCI, Victoriabd; FERRARO, Giselacd; CURUT- presente trabajo es evaluar y caracterizar las
CHET, Gustavobd SPE producidas por una cepa de Chlorella
a) Instituto de Investigación e Ingeniería Am- sp. aislada del Río Reconquista, expuesta a
biental, Universidad Nacional de San Martín, 25 Cu(II), Zn(II); Fe(III) y Cr(III). Para ello, se rea-
de Mayo y Francia, San Martín, Pcia de Buenos lizaron cultivos en batch de Chlorella sp. en
Aires, Argentina. medio BBM y a distintas concentraciones de
b) Instituto de Investigación e Ingeniería Am- Zn(II) (0, 0,08, 0,23, 0,38 y 1,9 mM), los que
144
SESIÓN 5
fueron mantenidos en agitación constante 30BIAR

(110 rpm), a 21°C y bajo ciclo de luz:oscuri-
dad (16:8 horas). Luego de 15 días se evaluó
Remediación de níquel
la cantidad y composición de las SPE pro- utilizando algas
ducidas por la microalga en cada una de las unicelulares aisladas de
condiciones mencionadas. Por otro lado, a
distintos cultivos concentrados de Chlore- sitios contaminados
lla sp. se les agregaron soluciones 1,9 mM
de Zn(II), Cu(II), Fe(III) y Cr(III), luego de 24 GÓMEZ JOUSSE, Micaela; BAGNATO, Carolina;
hs. se separó la biomasa por centrifugación. FERRARO, Gisela
Al final de cada experimento se determinó Instituto de Energía y Desarrollo Sustentable
en las SPE, el contenido de carbohidratos (IEDS), Centro Atómico Bariloche, Comisión Na-
y proteínas por el método de fenol-ácido cional de Energía Atómica (CNEA), Av. Bustillo
sulfúrico y por Bradford, respectivamente, 9500, Bariloche, Rio Negro, ARGENTINA
y su caracterización se realizó por FT-IR. Se [email protected]
evaluó también la adsorción de Zn(II) (0,38
mM) en solución por biomasa muerta de

Chlorella sp con distinto contenido de SPE. La contaminación ambiental por metales
Los resultados demostraron que en todas es un problema que se da a nivel global. Los
las condiciones estudiadas hubo excreción metales son altamente tóxicos y no son bio-
de SPE y que las mismas están compuestas degradables. En los últimos años, el estudio
principalmente por carbohidratos. Además, de algas unicelulares para la remediación ha
la presencia de los metales favoreció la for- tomado un papel relevante. Las algas pre-
mación de flóculos de microalgas y la presentan altas eficiencias de remoción (E%),
cipitación de los mismos, lo que facilitó su especialmente en soluciones con bajas con-
separación. Los resultados demostraron el centraciones de metales (<100 mg/L) donde
potencial de las SPE para ser aplicadas en los métodos tradicionales se tornan inefi-
procesos de biorremediación de Zn(II), así cientes. Las estrategias de remoción consis-
como para facilitar la cosecha de la bioma- ten principalmente en la adsorción a grupos
sa en presencia de distintos cationes, ya que funcionales de la pared celular y/o la ab-
estos, en función de la composición de las sorción intracelular. El níquel (Ni) es un me-
SPE inducen la coagulación de los spe y la tal ampliamente usado en la industria que
aglutinación de biomasa; además, permiten puede provocar múltiples enfermedades.
comprender preliminarmente importantes En este sentido, se debe tener especial con-
aspectos del proceso de aglomeración celu- sideración en el cumplimiento de las regu-
lar implicado, lo que eventualmente permi- laciones para efluentes y en las concentra-
tirá evaluar las distintas aplicaciones. Estos ciones ambientales. Existen pocos estudios
son los primeros de una serie de estudios que aborden la remoción de Ni por medio
tendientes a evaluar la formación de SPE por de algas.
Chlorella sp. expuesta a distintos metales y El objetivo de este trabajo fue estudiar la
su participación en procesos de remediación remoción de Ni2+ utilizando cepas de algas
y de formación de biofilms con fines biotec- unicelulares aisladas de ambientes conta-
nológicos. minados, identificadas como Desmodesmus
sp. (cepas RR8, P1) y Chlorella sp. (cepa
RR6): humedal del Complejo Tecnológico
145
SESIÓN 5
Pilcaniyeu, CNEA (prefijo P); Río Reconquista Palabras claves: BIORREMEDIACIÓN; ALGAS;
(prefijo RR). Se realizaron ensayos de remo- NÍQUEL.
ción con células vivas a distintos tiempos de
contacto para evaluar la E% y la capacidad
de remoción (q). La mayor remoción se dio
durante los primeros minutos de ensayo, su- 31BIAR
giriendo que la adsorción es el mecanismo
predominante para la captación de Ni2+. Se Modelado tridimensional
obtuvieron E% de 86, 90 y 100% para las ce- de una xilanasa de
pas P1, RR6 y RR8, respectivamente, a una
concentración inicial de 55 mg/L Ni2+. La
Trichoderma atroviride
cepa RR8 alcanzó un estado estacionario a LBM 117
las 2 hs de ensayo, logrando una q máxima
de 167.8 mg/g, mientras que P1 y RR6 remo- MARQUEZ, Rocío B.a; MOLINA, Melisa A.ab;
vieron 140.6 y 190.3 mg/g, respectivamen- AYALA SCHIMPF, Alan R. ab; ZAPATA Pedro D.ab
te,a las 24 hs. Los valores de q obtenidos su- FONSECA, María I.ab

peraron ampliamente a los encontrados en a) Universidad Nacional de Misiones. Facultad
la literatura. de Ciencias Exactas Químicas y Naturales. Insti-
tuto de Biotecnología Misiones “Dra. María Ebe
Adicionalmente, se estudió la capacidad Reca” (INBIOMIS). Laboratorio de Biotecnología
de crecimiento (μ) y el rendimiento de la Molecular (BIOTECMOL). Misiones, Argentina.
biomasa (Biomasa Seca Total final (BST)) de
b) CONICET.Buenos Aires, Argentina
cada cepa; debido a que además de un alto
valor de E% de metal, las cepas deben pre- [email protected]
sentar características de crecimiento favora-
bles, ya que esto influye en los costos gene-
rales del proceso. Los valores de μ obtenidos En la actualidad cada vez son más los pro-
fueron 0.75, 0.56, 0.44 día-1 y la BST fue cesos biotecnológicos que se llevan a cabo
0.45, 0.83, 0.53 g/L para RR6, RR8 y P1, res- mediante la utilización de enzimas. En este
pectivamente. Aunque μ fue mayor en RR6, sentido, dada su actividad hidrolítica, las en-
la BST fue superior para RR8 y P1, lo que se zimas xilanolíticas son de gran interés por
condice con un mayor tamaño y peso celular sus diversas aplicaciones tales como el blan-
de estas dos cepas de Desmodesmus sp., con queo de la pulpa en la industria papelera, la
respecto a la cepa de Chlorella sp.. La cepa producción de biocombustibles y como su-
RR8 logró una E% máxima y un alto valor de plemento dietario para la alimentación ani-
q a un tiempo de contacto menor que RR6 y mal. En la industria alimentaria, y de panifi-
P1, además de un buen crecimiento en las cados particularmente, permite mejorar las
condiciones de laboratorio ensayadas, por características organolépticas. Sin embargo,
lo que parece ser una candidata favorable para su aplicación, las enzimas deben ser
para la remoción de este metal. Los resul- obtenidas en un corto periodo de tiempo,
tados obtenidos proporcionan importantes ser rentables económicamente y a su vez,
perspectivas sobre la potencial aplicación de hallarse reportadas de manera correcta. En
estas cepas en el tratamiento de soluciones este sentido el presente trabajo tiene como
contaminadas con Ni2+, con el fin de reducir objetivo caracterizar bioinformáticamente
costos del proceso y generar una tecnología la xilanasa de Trichoderma atroviride LBM
amigable con el ambiente. 117 obtenida por clonación previamente
por el grupo de trabajo. Para ello se analiza-
146
SESIÓN 5
ron parámetros que permitan predecir tanto un volumen de 822,46 Å³ y una superficie de
su validez como modelo tridimensional y su 974,21 Å². El potencial de unión a sustrato
comportamiento en la interacción con sus- (DrugScore) fue de 0,83. Los resultados del
tratos reportados en la bibliografía. acoplamiento indicaron una energía de afi-
Para la obtención de la secuencia ami- nidad de -5,2 kcal/mol, cuyos principales
noacídica se utilizó el programa ExPASy aminoácidos intervinientes fueron Tyr77,
Bioinformatic Resource Portal (https://web. Pro 126, Trp 79 y Arg122.
expasy.org/translate/). Para la predicción de Este trabajo confirma que la enzima en-
la estructura secundaria de la proteína se doxilanasa pertenece a la familia G11, no
utilizó el programa PSIPRED (http://bioinf. solo a nivel estructural sino también funcio-
cs.ucl.ac.uk/psipred/). El modelado teórico nal, evidenciado por los residuos conserva-
tridimensional de la proteína se realizó con dos en la interacción con sustratos.
SWISS-MODEL (https://swissmodel.expasy.
org/) utilizando como templado una estruc-
Palabras claves: ENDO-β-1,4-XILANASA; ANÁLI-
tura de alta resolución de una xilanasa II ob- SIS BIOINFORMÁTICO; HIDRÓLISIS ENZIMÁTICA.
tenida por el método de difracción de rayos
X 1,50 Å. La evaluación de calidad cristalo-

gráfica y la caracterización del sitio activo de
la enzima se realizaron mediante MolPro-
32BIAR
bityy la herramienta perteneciente a Pro-
teinPlus, DogSiteScorer, respectivamente. Análisis de lacasas
Para el ensayo de acoplamiento se utilizó fúngicas en potencial
como sustrato a la D-xilosa, principal compo-
nente monosacárido del xilano, cuya estruc-
acoplamiento con
tura fue obtenida en PubChem; el docking agrotóxicos mediante
molecular se realizó mediante el software
Autodock VINA.
ensayos de docking
A partir de la secuencia nucleotídica, se
molecular
tradujo a la secuencia de 222 aminoácidos.
El modelo 3D teórico de la proteína consta de AYALA SCHIMPF, Alan R.a; CASTRILLO, María
L.ab; SALVATIERRA, Karina ab; FONSECA, María
un dominio catalítico único constituido por I.ab; ZAPATA, Pedro D ab.
dos hojas β anti-paralelas retorcidas y una
α-hélice, lo cual coincide en un 78.95% con de Ciencias Exactas Químicas y Naturales. Insti-
la estructura de una endoxilanasa II de Tri- tuto de Biotecnología Misiones “Dra. María Ebe
choderma reesi, obtenida por el método de Reca” (INBIOMIS). Laboratorio de Biotecnología
difracción de rayos X la cual se utilizó como Molecular (BIOTECMOL). Misiones, Argentina.
templado. La proteína obtuvo un score de
1,49 respecto los parámetros geométricos,
y un Clashcore de 3,85 en alusión al contac- [email protected]
to entre átomos presentes en la molécula.
De los residuos presentes en el cristal, el
El Clorpirifos y el 2,4D-diclorofenoxiacé-
95,5% se encontró en regiones favorecidas
tico son plaguicidas con participación muy
de acuerdo al diagrama de Ramachandran.
activa en la agricultura misionera, siendo
Como sitio catalítico se reportó un poket con
ésta la principal actividad productiva dentro
147
SESIÓN 5
del sector agropecuario. Su uso intensivo sentes en cada sitio potencial de interac-
produce la contaminación de los ecosiste- ción, registrando parámetros tales como
mas, provocando la intoxicación de seres Volumen, Superficie y Profundidad de los
vivos como el hombre, dado su capacidad pokets. Las estructuras 2D de los pestici-
de tornarse cancerígenos, mutagénicos das se obtuvieron mediante PubChem y su
y/o teratogénicos; es por ello que resulta preparación como ligandos se realizó con
fundamental el seguimiento de estos pro- Avogadro. Para las lacasas se empleó el
ductos en el medio ambiente. En ese sen- software Chimera, y el acoplamiento mo-
tido, el hongo aislado en Misiones Pleuro- lecular se realizó con Autodock VINA.
tus pulmonarius LBM 105 se caracteriza Se han identificado tres lacasas en el
por su elevada tolerancia y degradación genoma secuenciado. El cristal utilizado
a compuestos altamente recalcitrantes, como templado de referencia fue de 1,50
condición dada por los sistemas enzimá- Å con un R-Value Free de 0,182. La pun-
ticos constituyentes dentro de los cuales tuación MolProbity obtenida en los tres
las lacasas juegan un rol predominante. El modelos fue de 1,58 (Lac I), 1,57 (Lac II)
objetivo del trabajo fue modelar, predecir y de 2,28 (Lac III); de los pokets con ma-

y seleccionar las lacasas que mejor acopla- yor puntuación Drug Score, se utilizó para
miento molecular in silico presenten con el acoplamiento aquellos que incluían los
los pesticidas de interés para posteriores aminoácidos conformadores del sitio ca-
modificaciones estructurales que posibi- talítico en las lacasas: 10 residuos Hys, 1
lite su uso futuro en el desarrollo de un Cys y 1 Leu (Lac I/III) / 1 Phe (Lac II). Las
sensor enzimático destinado al monitoreo energías de unión resultantes del docking
ambiental de dichos contaminantes. determinaron que el Clorpirifos presenta
A partir del genoma secuenciado de mejor acoplamiento con Lac II (-4.5 kcal/
Pleurotus pulmonarius LBM105, se ob- mol) y el 2,4 D con Lac III (-6.2 kcal/mol).
tuvieron las secuencias nucleotídicas de Los resultados obtenidos sientan las bases
los genes de lacasa utilizando el software para la identificación de rasgos estructu-
Geneius 12. Posteriormente se procedió a rales determinantes de la afinidad de las
modelar las lacasas a partir de un templa- lacasas a los plaguicidas, permitiendo pos-
do proporcionado por SwissModel como tular posibles mutaciones que mejoren su
plantilla, con parámetros óptimos en Re- capacidad de unión a éstos sustratos.
solución (R) y R-Value Free que verifiquen
su calidad cristalográfica. Para ello se hizo
uso de la base de datos Protein Data Bank
(PDB). Para evaluar la validez y calidad
de las estructuras obtenidas se utilizó el Palabras claves: LACASA; PESTICIDAS; DOCKING
servidor en línea MolProbity. Luego se MOLECULAR.
procedió a identificar y caracterizar los
sitios activos de cada enzima mediante
DogSiteScorer, herramienta perteneciente
a ProteinPlus; en cada caso se priorizó el
valor “Drug Score” obtenido, el cual esta-
blece el potencial presente de cada poket
para interaccionar con posibles ligandos. A
su vez se registraron los aminoácidos pre-
148
SESIÓN 5
33BIAR obtención de compuestos fenólicos. Se uti-

lizaron 5 cepas de Auricularia SP., LBM 242,
Obtención de compuestos LBM 243, LBM 244, LBM 245 y LBM 246. Se
fenólicos a partir de extrajo ADN genómico de las 5 cepas, se rea-
bagazo de caña de azucar lizaron reacciones en cadena de la polime-
rasa utilizando los pares de cebadores ITS1-
Utilizando cepas silvestres ITS4 y NL1-NL4, las secuencias obtenidas se
de Auricularia compararon con las secuencias disponibles
en GenBank (National Center for Biotech-
fuscosuccinea nology Information) y se reconstruyeron los
árboles filogenéticos utilizando los méto-
LÓPEZ, Cinthya A. M. a; CONIGLIO, Romina O. ab; dos neighbor joining y maximum likelihood.
DÍAZ, Gabriela V. ab; ALBERTÓ, Edgardo c; Luego, se evaluó la temperatura óptima del
ZAPATA, Pedro ab.
a) Universidad Nacional de Misiones. Facultad crecimiento micelial y la actividad cualita-
de Ciencias Exactas Químicas y Naturales.Insti- tiva β-glucosidasa con el fin de seleccionar
tuto de Biotecnología Misiones “Dra. María Ebe la cepa más promisoria. La cepa seleccio-
Reca” (INBIOMIS). Laboratorio de biotecnología nada se utilizó para bioprocesar bagazo de

molecular. Misiones, Argentina caña de azúcar en estado sólido durante 20
b) CONICET. Buenos Aires, Argentina. días. Se tomaron muestras cada 5 días, se
realizaron extracciones en baño ultrasóni-
c) Universidad Nacional de San Martín-CONICET. co utilizando etanol 96% o metanol 100% y
Instituto Tecnológico de Chascomús. Laboratorio
se determinó el contenido de fenoles tota-
de Micología y Cultivo de Hongos Comestibles y
Medicinales. Buenos Aires, Argentina. les, proteínas totales, actividad cuantitativa
β-glucosidasa, y capacidad antioxidante. Las
[email protected] 5 cepas se determinaron como A. fuscosuc-
cinea, mostraron actividad β-glucosidasa y
El bagazo de caña de azúcar es un subpro- se desarrollaron a una temperatura óptima
ducto de la industria azucarera y se destaca de 30 °C. Se seleccionó la cepa A. fuscosuc-
por ser una fuente natural de compuestos cinea LBM 243 por su mayor actividad β-glu-
antioxidantes fenólicos. Sin embargo, estos cosidasa y crecimiento micelial. Los valores
compuestos están unidos a los componen- más altos de fenoles totales (507,5 ± 9,05
tes de la pared celular vegetal mediante en- mg l-1), proteínas totales (51,58 ± 6,26 mg
laces glucosídicos, lo que reduce su habili- l-1) y actividad β-glucosidasa (12,2 ± 0,62 U
dad para actuar como buenos antioxidantes. l-1) se encontraron el día 20, mientras que
Estos enlaces pueden ser hidrolizados por la capacidad antioxidante fue mayor el día
enzimas como las β-glucosidasas, aumen- 10 (34,44% ± 11,20). El aumento en el con-
tando así los compuestos fenólicos libres. tenido de fenoles totales pudo deberse a la
Auricularia es un género de hongos comesti- liberación de compuestos fenólicos por la
bles que se encuentran en la Selva Misione- acción de enzimas lignocelulolíticas, en este
ra, capaces de producir β-glucosidasas. Los sentido, el contenido de fenoles totales es-
objetivos de este trabajo fueron determinar tuvo positivamente correlacionado con la
molecularmente las cepas Auricularia SP actividad β-glucosidasa (r=0.9993; p<0.05).
aisladas de la Selva Misionera y analizar su A su vez, el contenido de fenoles extraídos
eficiencia en el bioprocesamiento en estado fue mayor cuando se utilizó etanol, el cual,
sólido del bagazo de caña de azúcar en la a diferencia del metanol, es un solvente se-
guro, eficiente y de bajo costo. De esta ma-
149
SESIÓN 5
nera, desarrollamos una técnica efectiva, de con propiedades biológicas como inmuno-
bajo costo y amigable con el ambiente para moduladoras, antiinflamatorias, antimicro-
obtener compuestos fenólicos bioactivos a bianas y antioxidantes. Teniendo en cuenta
partir de bagazo de caña de azúcar utilizan- que la composición de la pared celular de
do hongos comestibles silvestres de la Selva la levadura puede variar con respecto a las
Misionera. diferentes condiciones de crecimiento, el
objetivo de este estudio fue determinar la
influencia de los aditivos (EDTA, SDS, NaCl)
Palabras claves: AURICULARIA, BIOPROCESA-
MIENTO, ANTIOXIDANTES, SUBPRODUCTOS en la producción de biomasa, el porcentaje
AGRÍCOLAS. de pared celular (PC) y la composición de la
misma de Saccharomyces sp., y Candida sp.,
con el fin de obtener β-glucanos. Ambas ce-
pas fueron aisladas de residuo frutihortícola
e identificadas a nivel de género usando el
método de fingerprinting. Para la produc-
34BIAR ción de biomasa se usó caldo extracto de
Producción de biomasa y

levadura- peptona- dextrosa (YPD) suple-
mentado con diferentes concentraciones de
pared celular de levaduras EDTA (5 y 50 ppm), SDS (10, 20 y 100 ppm) y
aisladas de residuos ClNa (3000 y 30.000 ppm) para evaluar sie-
te (7) tratamientos diferentes (T1: Control
frutihortícolas - YPD; T2: 100 ppm SDS; T3: 50 ppm EDTA;
T4: 30.000 ppm ClNa; T5: 5 ppm EDTA y 10
MONGE, María del Pilara,d, ASTORECA, Andrea- ppm SDS; T6: 20 ppm SDS y 3000 ppm ClNa;
b,d
; CHIOTTA, M. Laurac,d; ROBLEDO, Sebastiá-
n ; PEREYRA, Carinac,d
a,d T7: 5 ppm EDTA, 20 ppm SDS y 3000 ppm
ClNa). La producción de biomasa para am-
a) Departamento de Química. Facultad de Cien-
bas cepas fue mayor en el T5 (EDTA y SDS),
cias Exactas, Físico Químicas y Naturales. Uni-
versidad Nacional de Río Cuarto, Río Cuarto, con valores de 8,6 g/L para Saccharomyces
Córdoba. sp. y de 7,9 g/L para Candida sp. El porcen-
taje de PC más alto de Saccharomyces sp. y
b) Centro de Investigación y Desarrollo en Fer- de Candida sp. se obtuvo en el T6 (36,1%) y
mentaciones Industriales (CINDEFI), UNLP- CO-
NICET, La Plata, Buenos Aires.
en el T5 (40,5%), respectivamente. Para Sac-
charomyces sp. yCandida sp. se observó una
c) Departamento de Microbiología e Inmunolo- correlación positiva entre la concentración
gía. Facultad de Ciencias Exactas, Físico Quími- celular y el contenido de PC, con valores de
cas y Naturales. Universidad Nacional de Río
R = 0,83 y R = 0,94, respectivamente. Para
Cuarto, Río Cuarto, Córdoba.
verificar la variación en la composición de
d) Miembro del Consejo Nacional de Investiga- la PC bajo la influencia de diferentes trata-
ciones Científicas y Tecnológicas (CONICET), Ar- mientos, se realizó espectroscopía infrarroja
gentina.
(IR). Los espectros de la PC de ambas cepas
[email protected] en los 7 tratamientos estudiados muestran
[email protected] tres regiones correspondientes a carbohi-
dratos (950-1185 cm-1), proteínas (1480-
Los polisacáridos de la pared celular (PC), 1700 cm-1) y lípidos (2840 - 3000 cm-1). En
entre ellos los β-glucanos, extraídos de leva- la región de los carbohidratos se muestran
duras han sido descritos como componentes grupos químicos relacionados a los β-gluca-
150
SESIÓN 5
nos y en la región de las proteínas podemos sición de la pared celular (PC) y su relación
determinar la quitina, representada por las con la adsorción de micotoxinas. El objetivo
bandas amida I y amida II. Se realizó una de este estudio fue determinar la influencia
comparación semicuantitativa de las prin- de las condiciones de cultivo de Kluyveromy-
cipales bandas infrarrojas presentes en los ces marxianus VM004 sobre el espesor y la
7 tratamientos para determinar cuál de los composición de la PC y su influencia en la
aditivos presentes en el medio de cultivo po- adsorción de aflatoxina B1 (AFB1). La cepa
tencia la producción de β-glucanos. Se de- fue inoculada en dos medios de cultivo, cal-
ben realizar futuros estudios para extraer los do extracto de levadura-peptona-dextrosa
β-glucanos y determinar su concentración. (YPD) y caldo extracto de granos de destile-
La optimización de la producción de PC y sus ría secos con solubles (DDG) para la obten-
componentes a partir de cepas de levaduras ción de biomasa y PC. El test de adsorción
permitirá su aplicación en la obtención de de AFB1 (150 ng/mL) se realizó usando una
β-glucanos para la industria alimentaria, far- concentración de células de 1 x 107 cél/mL
macológica y cosmética. y 0,001 g de PC simulando pH gástrico y pH
intestinal. La determinación del espesor de
la PC y su composición se realizaron usando

microscopía electrónica de transmisión
35BIAR (TEM) y espectroscopia infrarroja (IR),
respectivamente. La producción de biomasa
Pared celular de fue similar en ambos medios de cultivos,
Kluyveromyces marxianus para YPD (4,98 g/L) y para DDG (4,24 g/L). El
porcentaje de PC obtenido en DDG (33,3%)
VM004 como adsorbente fue superior al de YPD (8,6%). El diámetro de
de aflatoxina B1 las células y el espesor de la PC aumentaron
en 61,84% y 30%, respectivamente,
PEREYRA, Carinaa,d,e, BONGIOVANNI, Silvestreb,- utilizando caldo DDG. Los espectros IR
d,e
, MONGE, María del Pilarb,d,e, CRISTOFOLINI, de la PC provenientes de los dos medios
Andreac,d,e, CAVAGLIERI, Liliaa,d,e de cultivo estudiados incluyeron tres (3)
a) Departamento de Microbiología e Inmunolo- regiones: polisacáridos (950-1185 cm-1),
gía. proteínas (1480-1700 cm-1) y lípidos (2840-
b) Departamento de Química. 3000 cm-1). El análisis indicó la presencia de
c) Departamento de Microscopía Electrónica. los grupos C-O, O-H y N-H, los cuales están
d) Facultad de Ciencias Exactas Físico Químicas
relacionados con los componentes princi-
y Naturales. Universidad Nacional de Río Cuar-
to. Ruta 36 km. 601. (5800) Río Cuarto. Córdoba. palmente quitina y β glucanos involucrados
Argentina. en la adsorción de AFB1. La proporción de
e) Miembro del Consejo Nacional de Investiga- β-glucano y quitina fue mayor en la PC ob-
ciones Científicas y Tecnológicas (CONICET), Ar- tenida del medio YPD que del medio DDG.
gentina. El porcentaje de adsorción fue influenciado
[email protected] por el pH ensayado. A pH 2, la adsorción fue
mayor que a pH 8 en los dos medios de cul-
Kluyveromyces marxianus se utiliza en tivo estudiados usando las células enteras y
varias aplicaciones biotecnológicas, sin em- la PC. El porcentaje de adsorción (media ±
bargo, ningún estudio ha demostrado la in- DS) usando la célula entera a pH 2 cultiva-
fluencia del medio de cultivo en la compo- das en caldo YPD fue de 8,40 ± 1,11% y a pH
8 el porcentaje disminuyó hasta 1,63%. Las
151
SESIÓN 5
células cultivadas en DDG adsorbieron 13,8 mico y representan un problema de salud

± 2,3% a pH 2, mientras que a pH 8 la adsor- pública, en el que nuestro país se encuentra
ción fue de 5,2 ± 1,8%. La PC extraída de YPD inmerso. El queso de cabra tiene un lugar
adsorbió 45,3% de AFB1 a pH 2, mientras que destacado en la gastronomía del Noroeste
a pH 8 fue 29,6%. La adsorción de la PC de Argentino, siendo un producto tradicional
DDG a pH 2 fue del 37,7% y del 6,5% a pH 8. apreciado por los consumidores debido a
En conclusión, la composición del medio de sus atributos nutricionales y organolépti-
cultivo influyó en la composición de carbo- cos. Representa por lo tanto una matriz
hidratos (β-D-glucano y quitina) y, en conse- ideal para vehiculizar compuestos funcio-
cuencia, en la adsorción de AFB1. Este es el nales como prebióticos y/o probióticos,
primer estudio que reporta la capacidad de que aporten mejores características orga-
adsorción de AFB1 por PC obtenida de una nolépticas, nutricionales y mejoren la sa-
cepa probiótica de K. marxianus VM004. lud del consumidor.El Yacón (Smallanthus
Además, el uso de DDG como fuente de car- sonchifolius Poepp. & Endl), es una planta
bono podría reemplazar un medio sintético originaria de la región andina considerada
como YPD para la producción de biomasa y un alimento con múltiples funciones que

PC destinada a un adsorbente de AFB1. posee compuestos bio-activos como fruc-
tooligosacaridos (FOS) y antioxidantes que
ejercen efectos beneficiosos sobre la sa-
lud. En base a esto el objetivo fue elaborar
36BIAR quesos caprinos simbióticos, combinando
diferentes cultivos lácticos comerciales
Elaboracion y (FD-DVS-YC-X16-YO-FLEX, Chr. Hansen,
caracterizacion de quesos Denmark) y cepas autóctonas (Lactoba-
de cabra con Yacon cillus bulgaricus LCLC-2, Enterococcus du-
rans LCLC-6 y Enterococcus faecium LCLC-
18) aisladas y caracterizadas en nuestro
FABERSANI Emanuela,b, CISINT Juan Carlosa,b,
SÁNCHEZ Sarac, HONORÉ Stellac, laboratorio con y sin agregado de Yacón.
OLISZEWSKI Rubéna,b (QUESO A: Fermentos comerciales, QUESO
a) Laboratorio de Calidad de Lacteos y Alimentos B: Fermentos comerciales + Yacón, QUESO
Funcionales (LACALAC), Facultad de Agronomía C: Fermentos Autóctonos + Yacon y QUE-
y Zootecnia (FAZ), Universidad Nacional de Tu- SO D: Fermentos Autóctonos). Los quesos
cumán (UNT). se fabricaron utilizando tecnología para
b) Consejo Nacional de Investigaciones Científi- tipo semiduro a partir de leche de cabra
cas y Técnicas (CONICET) pasteurizada con adición de cultivos lácti-
c) INSIBIO CONICET cos y se maduraron 60 días. Se caracteri-
zaron microbiológica y nutricionalmente,
[email protected] y se evaluaron perfiles de azucares, ácidos
orgánicos y lípidos. Los resultados mos-
traron que la adición de Yacón favoreció
En el mundo existe una creciente preva-
el crecimiento de bacterias lácticas. Los
lencia de enfermedades crónicas no tras-
parámetros composicionales presentaron
misibles (ECNT) asociadas a una mala ali-
diferencias significativas entre grupos, ob-
mentación, como obesidad, diabetes tipo
servándose aumento en humedad y car-
II, y síndrome metabólico, que impactan de
bohidratos y reducción de grasa, calorías
forma negativa sobre el sistema socioeconó-
totales y pH en los quesos B y C compa-
152
SESIÓN 5
rados con A y D al día 60. El aumento de 37BIAR

carbohidratos inducido por el agregado
de Yacón estuvo representado por un au-
Producción enzimática de
mento significativo de fructooligasacari- ciclodextrinas para
dos (FOS) en los quesos B y C comparados remoción de colorante
con A y D, detectándose picos con diferen-
tes grados de polarización (GP2 a G≥10). índigo en efluentes textiles
El grado de lipólisis resultó mayor en los
quesos B y C, seguido por D y finalmente PARRA, Micaelaa; LIMA GONZALO, Laura G.b;
A, que mostró el menor nivel de lipolisis al PARISI, Mónica G.a; ROSSO, Adriana M.a; GEI,A-
nabella b, RODRIGUEZ GASTON, Jorgelina Aa.
día 60. En cuanto al perfil de ácidos orgá-
nicos el agregado de Yacón (QUESOS B y a) Departamento de Ciencias Básicas, Universi-
C) mostró mayor contenido de ácido lác- dad Nacional de Luján, Luján, Buenos Aires, Ar-
gentina
tico, acético y propiónico que los quesos
sin Yacón (A y D). Los resultados indican b) Departamento de Tecnología, Universidad Na-
que el uso de fermentos autóctonos com- cional de Luján, Luján, Buenos Aires, Argentina.
binado con el agregado de Yacón acentúa [email protected]

a lipólisis, modifica el perfil fermentativo
y mejora el perfil de azucares (aumento
de fructooligosacaridos) y ácidos orgáni- Una alternativa novedosa para remover
cos (principalmente propiónico), mejoran- colorantes presentes en las aguas residuales
do la calidad nutricional de los quesos y de la industria textil es el uso de ciclodex-
aportando compuestos bioactivos. Este trinas (CDs), moléculas cíclicas derivadas de
trabajo permitió elaborar y caracterizar la biocatálisis enzimática del almidón de 6,
quesos caprinos simbióticos (prebióticos 7 y 8 unidades de glucosa, llamadas α, β y
γ-CD, respectivamente. Las CDs son capaces
y probióticos) regionales y tipificar la ac-
ción diferencial de fermentos lácticos au- de formar complejos de inclusión con una
tóctonos seleccionados vs controles co- amplia variedad de compuestos, los que son
merciales con y sin el agregado de Yacón, alojados en su cavidad hidrofóbica.Nuestro
aportando información fundamental para grupo de investigación ha estudiado y puri-
la elección de cepas autóctonas y dando ficado la enzima Ciclodextrina Glucosiltrans-
valor agregado a quesos caprinos locales. ferasa (CGTasa) y logrado la producción de
una mezcla de α, β y γ-CD a partir de almidón
de mandioca. A pesar de las ventajas de con-
tar con esta mezcla de CDs, su solubilidad en
Palabras claves: YACON; PREBIOTICOS; PORO- agua no permite su uso en remediación sin
BIOTICOS; ALIMENTO FUNCIONAL. ser inmovilizadas en un polímero.
Por tal motivo, el objetivo de este traba-
jo fue la producción de una mezcla de α, β
y γ-CDs y su inmovilización en perlas de al-
ginato de calcio para eliminar el colorante
índigo de efluentes textiles. Se estudiaron
diferentes proporciones y tiempos de con-
tacto de CDs-polímero con el agua residual y
se evaluó su porcentaje de remoción.
153
SESIÓN 5
Las CDs se prepararon a partir de una 38BIAR

suspensión de almidón gelatinizado con 15
U de CGTasa por gramo de almidón a 56 ºC
Fermentación en estado
durante 4 h a 100 rpm, obteniéndose una sólido: obtención de
mezcla con una relación a : b : g / 1.0:1.3:0.3. enzimas para valorización
Las esferas de gel se prepararon por el mé-
todo de gelificación añadiendo una solución de residuos agroindustriales
de alginato sódico y CDs gota a gota a una
solución de cloruro de calcio. Se emplearon BUSTOS, Luciana B.a; DURÁN, Ludmilaa; GIL,
aguas residuales tomadas de la vertiente de Rocío M.a, b; KUCHEN, Benjamína, b; SANTANA,
Anelise E.a; RODRÍGUEZ Laura A.a; MARTÍN,
efluentes de una empresa textil de la zona María L.a
de Luján, Provincia de Buenos Aires, Ar-
gentina. El colorante presente es el índigo,
utilizado en el proceso de teñido del hilado
para tela de jean. Los ensayos con agua resi- b) CONICET
dual se realizaron con las siguientes relacio- [email protected]

nes CDs-polímero/agua residual: 1g/10 mL,
2g/10 mL y 4g/10 mL; agitando y midiendo
cada 5 minutos durante los primeros 15 mi- La actividad agroindustrial de la región de
nutos, y luego cada 15 minutos durante 1 Cuyo se basa en el procesamiento de dos
hora.La eficiencia del sistema se evaluó gra- cultivos: la vid y el olivo. La industria del
ficando espectros de absorción entre 400- vino y del aceite de oliva generan grandes
700 nm en un espectrofotómetro Shimadzu cantidades de residuos sólidos, como el oru-
UV1800. jo de uva (OU), escobajo, alpeorujo y orujo
de aceituna (OA). La disposición final de es-
Los resultados demostraron que en todas tos residuos es dificultosa debido a sus altas
las relaciones de CDs-polímero/agua resi- concentraciones de sustancias fitotóxicas,
dual se obtuvo un significativo porcentaje provocando problemas ambientales por su
de remoción del colorante a los 5 minutos acumulación. Por su composición química
de contacto, si bien se observó una leve dis- (carbohidratos, fibra, grasas, proteínas y sa-
minución de la absorbancia a tiempo cero. les minerales) resultan sustratos aptos para
Con la relación 4g/10 mL se logró la mayor la generación de productos biotecnológicos
adsorción del colorante respecto a las otras con valor agregado. La Fermentación en Es-
dos relaciones, y al control de perlas de algi- tado Sólido (FES) permite utilizar los resi-
nato sin CDs. duos agroindustriales sólidos como materias
El polímero CDs-alginato desarrollado primas para la producción de bioproductos
permitió remover el colorante índigo de las y a la vez descontaminar esos residuos. En
aguas residuales de la industria textil en un estudios previos se encontraron los valores
porcentaje del 94% con la relación 4g/10 mL óptimos de las variables para la FES. El ob-
a los 5 minutos de contacto. jetivo de este trabajo fue realizar una FES a
escala piloto utilizando una mezcla de OU y
OA como sustrato para producir un comple-
jo enzimático con actividades Exo-poligalac-
Palabras claves: CICLODEXTRINAS; ALGINATO turonasa (Exo-PG), Exo-polimetilgalacturo-
DE CALCIO; POLIMERO; INDIGO. nasa (Exo-PMG) y Endo-poligalacturonasa
(Endo-PG) y estudiar a su vez la cinética de
154
SESIÓN 5
crecimiento del microorganismo. Para la FES 39BIAR

se colocó en el reactor de 1,5 kg de sustra-
to (mezcla OU y OA), alcanzando una altura
Estudio del potencial
del lecho de 7 cm; para impedir la acumu- hidrocarbonoclástico de
lación de calor en el medio de fermenta- mohos aislados de
ción y permitir una apropiada transferencia
de oxígeno. Se proporcionó al reactor un ambientes contaminados
caudal de aire de 2 L/min y se hizo circular con combustibles
a través de un filtro de fibra de vidrio para
su esterilización. Las condiciones de cultivo
ARAUJO SOLA, Evelyn N.a; MANZO, Ricardo
del reactor fueron: 1,5% p/p de glucosa, hu- M.a,b; FRISÓN, Laura N.a
medad inicial de 66% p/p, concentración de
a) Cátedras de Microbiología y Biotecnología,
micronutrientes de 5 ml/100 g de sustrato Departamento de Tecnología de Alimentos y
húmedo, temperatura de 27ºC, tiempo de Microbiología, Facultad de Ingeniería Química
incubación de 6 días, pH inicial de 4,5 e inó- (FIQ), Universidad Nacional del Litoral (UNL),
culo de 1x107 esporos/g seco. Las activida- Santa Fe, Argentina.
des enzimáticas se midieron en los extractos

b) Instituto de Desarrollo Tecnológico para la In-
acuosos de FES. Para la determinación del dustria Química (INTEC)-UNL-CONICET, Santa Fe,
contenido de Glucosamina, a cada muestra Argentina.
de la FES, se le realizó una hidrólisis ácida
[email protected]
de la quitina fúngica a N-acetil glucosamina.
Como resultados se obtuvieron las cinéticas
de producción de las actividades enzimáti- Uno de los principales y continuos pro-
cas (Exo-PG, Exo-PMG, Endo-PG) y la cinéti-
blemas ambientales es la contaminación
ca de crecimiento del microrganismo, en el
del suelo con hidrocarburos resultantes de
reactor de lecho fijo. Se observa que hay un
las actividades relacionadas con el petróleo
pico de crecimiento entre las 72 y 96 horas
y sus productos derivados los que provocan
de cultivo, luego el microorganismo entra en
un daño excesivo a los sistemas locales. Se
fase estacionaria. Estos resultados se rela-
ha propuesto reducir la contaminación del
cionan con los valores de producción de las
suelo por hidrocarburos mediante el desa-
actividades enzimáticas, determinando querrollo de alternativas sustitutivas del com-
la biomasa fúngica aumenta a medida que bustible fósil a partir de la incorporación de
se liberan las enzimas. Este comportamiento
biocombustibles. Asimismo, en las últimas
indica la actuación de las enzimas que de-
décadas se desarrollaron distintas tecnolo-
gradan el residuo lignocelulósico entre las
gías para la remediación de los suelos con-
24 y las 72 horas de cultivo. Es posible pro-
taminados con la intención de corregir y
ducir un complejo enzimático con activida-
reducir la concentración de hidrocarburos
des pectinolíticas, usando fermentación en
en los mismos. En particular, la biorreme-
estado sólido de orujos de uva tinta y acei-
diación surge como una rama de la biotec-
tuna, por acción del hongo filamentoso A.nología que busca resolver los problemas de
niger. Sería de interés estudiar el aumento
contaminación mediante el uso de microor-
de escala para futuros ensayos de FES. ganismos capaces de degradar compuestos
que provocan desequilibrios en el medio
Palabras claves: FERMENTACIÓN EN ESTADO ambiente y en los ecosistemas. Dado que
SÓLIDO, ENZIMAS PECTINOLÍTICAS, RESIDUOS los hongos son descomponedores por exce-
AGROINDUTRIALES
155
SESIÓN 5
lencia cuyo micelio es capaz de secretar ende crecimiento en medio AMI con el agrega-
zimas extracelulares y ácidos que poseen la do de un 2% (v/v) de diésel comercial Infinia
capacidad de descomponer compuestos or- Mezcla B10, solo la especie Aureobasidium
gánicos complejos, la micorremediación se pullulans no creció en dicho medio.
presenta como un acercamiento para lograr Todas las especies sometidas al estudio
la depuración biológica de entornos conta- de crecimiento, con la excepción de A. pullu-
minados con compuestos recalcitrantes. lans, pueden ser considerados como mohos
En el presente trabajo se tomó como hidrocarbonoclásticos, ya que utilizan el dié-
objetivo general ampliar el conocimiento sel comercial Infinia Mezcla B10 como fuen-
sobre el potencial hidrocarbonoclástico de te de carbono y energía. Resulta promisoria
mohos aislados de suelos contaminados con la utilización de estas cepas en estudios de
biocarburantes provenientes de diversas degradación de hidrocarburos en forma ais-
áreas geográficas (ciudad de Santa Fe, pro- lada o combinadas en futuros trabajos.
vincia de Santa Fe y Vaca Muerta, provincia
de Neuquén), con énfasis en la región San-
ta Fe. Específicamente se efectuó el análi-

sis de la biodiversidad cultivable de mohos Palabras claves: HIDROCARBUROS; MICODE-
presentes en diversos suelos contaminados GRADACIÓN; MOHOS HIDROCARBONOCLÁSTI-
COS; BIODIÉSEL.
con combustibles y en muestras de combus-
tible diésel líquido comercial contaminado;
se los identificó empleando diversas claves
taxonómicas; se comparó si existen diferen-
cias en cuanto al recuento y riqueza fúngica 40BIAR
entre las diversas regiones geográficas; y, se Caracterización de
realizaron estudios de crecimiento en me-
dios con agregado de biocombustibles.
sedimentos anaeróbicos
Para ello se aislaron e identificaron hon-
fluviales para desarrollo de
gos filamentosos de muestras contaminadas procesos de biorremediación
con hidrocarburos. Se estudió la riqueza es-
pecífica, la similitud/disimilitud (índice de GRIMOLIZZI, María C.a; MEDINA, Mariano L.a;
Jaccard) de las muestras y se determinó la TUFO, Ana E. a; VAZQUEZ, Susana. b,c CURUT-
frecuencia porcentual de los géneros aisla- CHET, Gustavo A. a
dos e identificados. A los hongos filamento- Instituto de Investigación e Ingeniería Ambien-
sos identificados se les realizaron estudios tal-IIIA, Universidad Nacional de San Martín
de crecimiento empleando un medio Agar (UNSAM), CONICET, Campus Miguelete, San
Mineral Inorgánico con agregado de diésel Martín 1650, Argentina.
comercial Infinia Mezcla B10. b) Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universi-
Se identificaron 10 géneros de hongos fi- dad de Buenos Aires, Ciudad Autónoma de Bue-
nos Aires 1123, Argentina.
lamentosos en las muestras de la provincia
de Santa Fe y 5 géneros en las muestras de la c) Instituto de Nanobiotecnología (NANOBIO-
provincia de Neuquén. Asimismo, no hubo TEC), CONICET-Universidad de Buenos Aires, Ciu-
especies compartidas entre las muestras dad Autónoma de Buenos Aires 1113, Argenti-
na.
pertenecientes a cada provincia. De las once
especies con las que se realizó los estudios [email protected]
156
SESIÓN 5
La Cuenca Reconquista se ubica en el área tración de metales pesados por EAA y la

metropolitana de Buenos Aires. Su cuerpo de concentración de aniones y cationes mayo-
agua principal, el Río Reconquista, presenta ritarios por titulación. Sobre las muestras
las características típicas de un río urbano de sedimento se midió el pH, Eh, % hume-
altamente contaminado. Estudios realizados dad (gravimetría), sulfuros volátiles en ácido
por nuestro grupo en diferentes puntos, evi- (método de purga y trampa), %MO (calcina-
denciaron un incremento en la acumulación ción), [SO42-] (turbidimetría), concentración
de metales pesados en sedimentos a lo largo de metales pesados por digestión pseudo-
de su recorrido. Asimismo demostraron que total (EPA 3051A) y especiación de metales
los bioprocesos que ocurren en sedimentos por extracción secuencial (BCR). Se realiza-
y agua son fundamentales para determinar ron enriquecimientos en bacterias clave en
el destino de los contaminantes y su poste- los procesos de movilización e inmoviliza-
rior depuración y biorremediación. ción de metales, aeróbicas y anaeróbicas.
El presente trabajo plantea la caracteri- El agua superficial in situ presentó un
zación de un sitio no estudiado previamen- pH de7,1, temperatura de 14,68°C, Eh de
te, denominado “Troncos del Talar” (TT), -449mV, conductividad de 3,89 mS/cm y
ubicado en la cuenca baja (34°27’22.1”S turbidez de 147 NTU. En el laboratorio, las

58°35’55.3”W), el cual aparenta presentar muestras de agua presentaron un pH de 7.2
las condiciones necesarias para la acumu- y dureza total de 365,85 mg/L de CaCO3. Por
lación de metales pesados en los sedimen- otra parte, el sedimento presentó un pH 6,7,
tos. Por lo tanto, se define como objetivo Eh de -311 mV, 68% de humedad, 1000 mg/
caracterizar los bioprocesos que ocurren kg de S2-, 12,6% MO y 1558,87 mg/Kg de
en la interfase agua-sedimento, para im- SO42-.
plementar en el mediano/largo plazo téc- En base al análisis de los resultados, pue-
nicas de biorremediación. den observarse condiciones que favorecen
A su vez, se observa en el sitio la pre- la acumulación de contaminantes, particu-
sencia de urbanización aledaña y una asi- larmente metales pesados, en los sedimen-
dua actividad de cooperativas encargadas tos. Se requiere un estudio exhaustivo de la
de la limpieza de los márgenes, ambos concentración y especiación de los mismos
grupos con permanente exposición a con- como base para el planteamiento y planifi-
taminantes presentes en agua y sedimen- cación de estrategias de remediación, con
tos. Se propone, por lo tanto, generar da- el objetivo de mitigar una problemática am-
tos que sean útiles a la población afectada, biental acuciante.
particularmente en la toma de decisiones
sobre el manejo del recurso.
En este marco, se realizó una campaña de
Palabras claves: RÍO RECONQUISTA; CONTAMI-
muestreo en abril de 2021, en la que se re- NACIÓN; TRONCOS DEL TALAR; BIORREMEDIA-
colectaron muestras de agua (A1-A2) y sedi- CIÓN
mentos (SA-SB). Además, se cuantificaron in
situ, con un equipo de campo multiparamé-
trico en agua superficial: pH, conductividad,
temperatura, sólidos disueltos y turbidez.
En el laboratorio, se reservaron las mues-
tras de agua para determinar la concen-
157
SESIÓN 5
41BIAR incubaron a 28°C. Se tomaron muestras des-

tructivas al día 4, 8 y 12 de incubación. Se
Evaluación de la realizaron los siguientes controles de medio
capacidad de remoción de de cultivo: con el hongo sin Cr(VI) y con Cr(-
Cr(VI) de Trichoderma VI) sin el hongo.
LBM 252 Luego de la extracción de cada muestra,

el micelio se separó del sobrenadante por
centrifugación a 8000 rpm por 15 min. La
TATARIN, Ana S.a, b; SADAÑOSKI., Marcela A.a, b;
POLTI, Marta A.c,b; FONSECA, M.I.a, b
biomasa se determinó mediante gravime-
tría. Para evaluar la capacidad de remoción
a) Universidad Nacional de Misiones. Facultad de Cr(VI) en el sobrenadante de cultivo, se
determinó colorimétricamente su concen-
Reca” (INBIOMIS). Laboratorio de Biotecnología tración por reacción con 1,5-difenilcarba-
Molecular (BIOTECMOL). Misiones, Argentina. zida (DFC). Para ello se tomaron 950 μL de
CONICET. Buenos Aires, Argentina. muestra y se agregaron 20 μL de DFC (0,5 %
p/v) y 30 μL de H2SO4 10%. Se realizó el ba-

b) CONICET. Buenos Aires, Argentina.
rrido espectral de la curva de calibración de
c) Planta Piloto de Procesos Industriales Micro- 400 a 800 nm. Posteriormente se midieron
biológicos (PROIMI). Tucumán, Argentina. todas las muestras a 543 nm. Todos los en-
[email protected] sayos se realizaron por triplicado y los datos
se evaluaron mediante Análisis de Varianza
(ANOVA).
El Cr(VI) y sus compuestos son motivo de
Se observó una diferencia estadística-
estudio debido a los efectos adversos que
mente significativa entre la biomasa obteni-
provocan en la salud humana y el ambiente.
da en los ensayos con y sin Cr(VI). El mayor
La micorremediación mediada por hongos
valor de biomasa se registró al día 8 de culti-
provenientes de suelos contaminados con
vo en ausencia de Cr(VI) (p<0,05). Los trata-
metales es una estrategia prometedora para
mientos con Cr(VI) no presentaron diferen-
remover esos contaminantes.
cia estadísticamente significativa entre ellos.
El presente estudio tuvo como objetivo En general se observó una disminución de
analizar la capacidad de crecimiento y rela biomasa en los tratamientos en presencia
moción de Cr(VI) de una cepa fúngica tole- de Cr(VI).
rante, aislada de suelo contaminado, en me-
Con respecto a los ensayos de remoción
dio de cultivo líquido mínimo. Para ello se
de Cr(VI), se observaron diferencias estadís-
emplearon Erlenmeyers de 100 mL con 50
ticamente significativas entre los tratamien-
mL de medio de cultivo Lee modificado es-
tos. La mayor remoción se alcanzó al día 4
terilizado en autoclave a 105°C durante 20
de cultivo (p<0,05) observándose una remo-
min y suplementado con 200 mg/L de Cr(-
ción de Cr(VI) mayor al 50%. En cambio, para
VI), previamente esterilizado por filtración.
los días 8 y 12 de cultivo la remoción de Cr(-
La cepa fúngica se activó en placas con MEA
VI) fue superior al 20%.
durante 7 días a 28°C con luz. Para la obten-
ción del inóculo se utilizaron dos placas y se Los resultados obtenidos confirman que
resuspendieron las esporas en Tween 80 al la capacidad de remoción de Cr(VI) fue in-
0,1%. Los Erlenmeyers se inocularon con 1 dependiente de la biomasa y que la cepa
mL de suspensión de esporas (2,4x 104) y se de Trichoderma sp. fue capaz de crecer en
158
SESIÓN 5
presencia de Cr(VI) y de alcanzar la máxima caciones biotecnológicas, que van desde la

remoción el día 4 de cultivo (50%), lo cual es industria textil hasta la industria de alimentos.
prometedor dada la alta concentración em- Estas enzimas han sido encontradas en hon-
pleada en este trabajo. Sin embargo, se re- gos aislados en la provincia de Misiones, uno
quieren estudios posteriores para determi- de ellos es Phlebia brevispora BAFC633.
nar los mecanismos involucrados (reducción Nuestro grupo ha logrado expresar con
y/o adsorción). éxito la enzima lacasa proveniente del hon-
go de pudrición blanca Phlebia brevispora-
Palabras claves: CROMO; MICORREMEDIACIÓN; BAFC633en la levadura GRAS Kluyveromy-
REMOCIÓN ceslactis.
El objetivo fue realizar el análisis enzimá-
tico de una lacasa recombinante presente
en el sobrenadante de cultivo de Kluyve-
romyces lactis. Para lo cual se partió de las
42BIAR condiciones de cultivo optimizadas para
la producción de lacasa previamente. Esta
Análisis enzimático de consitió en medio YPGal (20% extracto le-

una lacasa recombinante vadura, a0% peptona, 20% galactosa), en
un volumen final de 20 ml incubado duran-
proveniente del hongo de te cuatro días (día que se obtuvo el pico de
pudrición blanca Phlebia actividad) a 28ºC a a50 rpm suplementado
brevispora BAFC633 con 0,5 mmol l-a de sulfato de hierro. Éste se
centrifugó durante a0 minutos a 6000 g y el
sobrenadantese utilizó para las determina-
Molina, M. Aab. Sgroppo S.c, Milde LB.d, Zapata
ciones.
P. D. , Fonseca, M. I.
ab ab
a) Universidad Nacional de Misiones. Facultad En primera instancia se realizó un zimo-

de Ciencias Exactas Químicas y Naturales. Insti- grama y la actividad se reveló incubando el
tuto de Biotecnología Misiones “Dra. María Ebe- gel en tampón de acetato de sodio con 5
Reca” (INBIOMIS). Laboratorio de Biotecnología mmol l-a de 2,6 dimetoxifenol. También se
Molecular (BIOTECMOL). Misiones, Argentina. evaluó la estabilidad de la enzima frente a
b) CONICET. Buenos Aires, Argentina. diferentes condiciones de pH (en un rago de
3 a 6,5) y temperatura (en un rango de 20 a
c) Laboratorio de Tecnología Química y Broma- 90°C), para ello, fue sometida a cambios de
tología. FACENA-UNNE
pH y temperatura a distintos tiempos duran-
d) Universidad Nacional de Misiones. Facultad te 5 h y se midió la actividad en un espectro-
de Ciencias Exactas Químicas y Naturales. Misio- fotómetro a 469 nm con 5 mmol l-a de 2,6
nes, Argentina dimetoxifenol como sustrato.
[email protected] El zimograma permitó visualizar la activi-
dad de la enzima recombinante. El valor de
pH óptimo para la actividad de la enzima fue
Las lacasas son enzimas de la familia de las
de 3,6, y la temperatura óptima fue de 40ºC.
multi-cobre oxidasas que han suscitado mu-
La lacasa recombinante fue más estable a
cho interés debido a su amplia especificidad
una temperatura de 40ºC manteniendo a00
de sustrato. Las propiedades de las lacasas las
% de actividad por a h, mientras que a las
hacen buenas candidatas para diversas apli-
159
SESIÓN 5
2 h conservó un 85% de su actividad, pero Los bioprocesos basados en reacciones

al cabo de 5 h, retuvo sólo el 5% de la acti- de catálisis heterogénea enzimática re-
vidad. Al aumentar la temperatura de incu- quieren de una inmovilización efectiva de
bación, la actividad enzimática fue disminu- las enzimas intervinientes en un soporte
yendo. La enzima mostró mayor estabilidad sólido. La inmovilización enzimática tie-
a pH 3,6 manteniendo el 80% de la actividad ne como finalidad la maximización de los
después de 2 h de incubación, disminuyen- ciclos de utilización del biocatalizador, el
do su actividad a a0% después de 5 h. aumento de la eficiencia de contacto en-
El análisis de las características bioquí- zima/sustrato, el mejoramiento de la re-
micas de la enzima lacasa, posibilitará una cuperación del biocatalizador y la dismi-
aplicación biotecnológica regional y sus- nución de los costos involucrados en el
tentable. De esta manera, éstos resultados proceso. La inmovilización de enzimas en
sentarán las bases para futuras investigacio- soportes sólidos combina la alta selecti-
nes de la proteína como así también para su vidad de las reacciones enzimáticas con
aplicación en diferentes procesos. las propiedades mecánicas del soporte.
Entre los diversos soportes desarrolla-

dos, el óxido de aluminio anódico (OAA)
Palabras claves: LACASA ENZIMA-CARACTE- es un nanomaterial auto-organizado,
RIZACIÓN BIOQUÍMICA-PH- TEMPERATURA- conformado por conjuntos hexagona-
ESTABILIDAD.
les de poros estrechamente empaque-
tados, con propiedades estructurales
ajustables en función de las condiciones
de síntesis anódica. Las enzimas lacasas
43BIAR (bencenodiol oxidorreductasa de oxíge-
Lacasas inmovilizadas no) son polifenol oxidasas que catalizan
la oxidación de compuestos fenólicos y
en óxido de aluminio aminas aromáticas, ampliamente uti-
nanoporoso para su lizadas en procesos como biopulpado,
aplicación biotecnológica eliminación de colorantes textiles, bio-
detección y eliminación de compuestos
fenólicos, tratamiento de efluentes in-
KRAMER, Gustavo R.a, c, BRUERA, Florencia A. b,
dustriales y eliminación de micro con-
, SADAÑOSKI, Marcela A. b, c; VELÁZQUEZ, Juan
c
E. b, c, ZAPATA, Pedro D. b, c, ARES, Alicia E a, c. taminantes. Estas enzimas pueden ob-

tenerse a través del cultivo del hongo
a)Universidad Nacional de Misiones - CONICET.
Instituto de Materiales de Misiones (IMAM). Mi- Phlebia brevispora BAFC 633, una cepa
siones, Argentina. autóctona de la Provincia de Misiones.
En este sentido, es posible combinar es-
b)Universidad Nacional de Misiones. Facultad tos catalizadores biológicos con mate-
riales nanotecnológicos como el OAA,
Reca” (INBIOMIS). Laboratorio de Biotecnología a través de la inmovilización física, para
Molecular. Misiones, Argentina. lograr un biocatalizador mejorado que
optimice los bioprocesos actuales y
c) CONICET. Buenos Aires, Argentina.
permita el desarrollo de nuevas aplica-
[email protected] ciones en el campo de la biodetección y
[email protected] tratamiento de efluentes. El objetivo de
este trabajo es inmovilizar enzimas la-
160
SESIÓN 5
casas por adsorción física sobre recubri- 44BIAR

mientos de OAA nanoporosos y evaluar el
rendimiento y reutilización del catalizador.
Agaricomycetes
Para ello, se sintetizaron recubrimientos inmovilizados en
de OAA por duplicado, mediante un paso biomasa lignocelulósica
de anodización de a h, empleando ácido
oxálico como electrolito a diferentes con- para la bioadsorción
centraciones y temperaturas y variando el de un efluente citrícola
voltaje de anodización. Las enzimas laca-
sas obtenidas del sobrenadante de cultivo
BENITEZ, Silvana F.ab; ZAPATA, Pedro D.ab; SADA-
de P. brevispora BAFC 633 se inmovilizaron ÑOSKI, Marcela A.ab; LEVIN, Laura N.c; FONSE-
sobre el soporte de OAA, a través de la in- CA, María I.ab
mersión del soporte en una solución com- a) Universidad Nacional de Misiones. Facultad
puesta por 2,5 ml de extracto enzimático de Ciencias Exactas Químicas y Naturales. Insti-
y 5 ml de buffer. Para evaluar las mejores tuto de Biotecnología Misiones “Dra. María Ebe
condiciones de inmovilización se variaron Reca” (INBIOMIS). Laboratorio de Biotecnología
Molecular. Misiones, Argentina.
el tiempo de inmovilización en a, 2 y 3 h,
y el pH del buffer, empleando acetado de b) CONICET. Buenos Aires, Argentina.
sodio pH 3,6 y 5 y fosfato de sodio pH 6,2.
c) Universidad de Buenos Aires. Facultad de
Además, se evaluó el efecto de la morfo-
Ciencias Exactas y Naturales. Laboratorio de Mi-
logía del óxido sobre el rendimiento de cología Experimental, INMIBO-CONICET. Buenos
inmovilización de lacasa y los ciclos de uti- Aires, Argentina.
lización. Se demostró que las mejores con-
[email protected]
diciones de inmovilización por adsorción
física se observaron a pH 3,6 y 5, siendo
poco significativo la variación del tiempo La industria citrícola genera grandes vo-
de inmovilización. Además, se comprobó lúmenes de aguas residuales durante el
que la morfología del óxido no afecta el procesamiento de la fruta. La gran canti-
rendimiento de inmovilización obtenién- dad de materia orgánica presente en estos
dose actividades en el orden de 2.990 U/ efluentes y la variabilidad de sus caracterís-
cm2. Por último, se evaluaron 3 ciclos de ticas físico-químicas representan un desafío
reutilización para la muestra anodizada enpara su tratamiento considerando facto-
ácido oxálico 0,9 M a 20 °C y 40V, obser- res económicos y medioambientales. Para
vándose pérdidas en la actividad enzimá- minimizar el impacto ambiental y el costo
tica entre el a0 y 20 % por ciclo. asociado al tratamiento, diferentes estra-
tegias físico-químicas y biológicas han sido
estudiadas. En este sentido la bioadsorción
mediante la inmovilización de Agaricomy-
cetes en sustratos de bajo costo ha cobra-
Palabras claves: NANOESTRUCTURAS DE ÓXIDO do relevancia en los últimos tiempos. En el
DE ALUMINIO ANÓDICO; INMOVILIZACIÓN; EN- presente trabajo se evaluó la inmovilización
ZIMAS; LACASA. deIrpex lacteus LBM 037, Phlebia brevispora
LBM 036, Pleurotus pulmonarius LBM a05 y
Trametes sanguinea LBM 023, para el trata-
miento de un efluente citrícola, tomando la
demanda química de oxígeno (DQO; APHA,
161
SESIÓN 5
a992) como variable respuesta. Se utilizaron inmovilizados en esponja vegetal como una
tres sustratos lignocelulósicos (bagazo de alternativa promisoria para el desarrollo de
caña de azúcar, esponja vegetal y semillas estrategias de bioadsorción de efluentes de
de Panicum) los cuales fueron acondiciona- la industria citrícola.
dos mediante lavado y secado. En el caso del
bagazo, éste se tamizó tomando la porción
superior a a mm y la esponja vegetal fue cor-
tada en cubos de a cm3. La inmovilización se Palabras claves: AGARICOMYCETES; BIOMASA
llevó a cabo por triplicado en Erlenmeyers LIGNOCELULÓSICA; INMOVILIZACIÓN; EFLUEN-
TE CITRÍCOLA; BIOADSORCIÓN.
de 250 mL con 50 cm3 de sustrato, cuya hu-
medad inicial se ajustó al 75 % p p-a con me-
dio Czapek (en g L-a,sacarosa 30; K2HPO4 a;
KCl 0,5; MgSO4 7H2O 0,5; NaNO3 20). Cada
45BIAR
Erlenmeyer se inoculó con 3 tacos de 5 mm
de diámetro de hongo cultivado en medio Tratamiento de lisozima
MEA (en g L-a, extracto de malta a2,7; agar
para incrementar el

a7) y se incubó por a4 días a 28 ± a °C. Luego
del periodo de incubación, se agregó 50 mL potencial metabólico de
de efluente puro previamente filtrado y se Lactobacilos mesófilos
incubó por tres días a 28 ± a °C en condicio-
nes estáticas. Las muestras se centrifugaron autóctonos
a 5500 rpm por a0 min. La variación de DQO
se calculó como: PERALTA, Guillermo H. a,b; BÜRGI, M.D. Milagros c;
MARTÍNEZ, Luciano J.d; ALBARRACÍN, Virginia
H.d; HYNES, Erica R.a; BERGAMINI Carina V.a
Facultad de Ingeniería Química (FIQ-UNL), Santa
Fe, Argentina.
b) Facultad de Ciencias Agrarias (FCA-UNL), Es-
Donde A es la DQO luego del tratamiento peranza, Argentina
y B corresponde a la DQO del efluente sin c) Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas
tratar. Se observó una disminución signifi- (FBCB-UNL), Santa Fe, Argentina
cativa de la DQO para P. brevispora y P. pul-
monarius inmovilizados en esponja vegetal d) Centro de Investigaciones y Servicios de Mi-
croscopía Electrónica (CONICET), Tucumán, Ar-
(28,74 ± 3,98 % y 4a,38 ± a3,79 % respecti-
gentina
vamente). Para I. lacteus, T. sanguinea y P.
brevispora inmovilizados en bagazo de caña [email protected]
se observó un aumento de la DQO de alre-
dedor del a5 %. En el caso de I. lacteus, T.
El tratamiento de fermentos con lisozi-
sanguinea y P. pulmonarius inmovilizados
ma (LZ) previo a la elaboración de queso
en semillas de Panicum la DQO aumentó en-
ha sido sugerido como una estrategia para
tre 20 y 50 %. El aumento observado pue-
lisar las envolturas celulares favorecien-
de deberse a la liberación de carbohidratos
do la liberación de enzimas intracelulares
productos de la degradación del sustrato lig-
y de esta manera acelerar y/o mejorar la
nocelulósico. Estos resultados nos permiten
maduración de los quesos. En este traba-
seleccionar a P. brevispora y P. pulmonarius
162
SESIÓN 5
jo se estudió la influencia de la lisozima β-GAL; que para el caso de la LDH también

sobre la integridad celular y potencial fue significativamente mayor en el extrac-
metabólico de dos cepas autóctonas: to de L29. Los resultados obtenidos mues-
Lactiplantibacillus plantarum 29 (L29) y tran una mayor sensibilidad de la cepa L29
Lacticaseibacillus rhamnosus 77 (L77). al tratamiento con LZ, lo que fue también
Ambas cepas fueron sometidas a un tra- confirmado por ME y CF. En los quesos,
tamiento con lisozima (25ppm) duran- se destacan las diferencias en los perfiles
te 22h a 37ºC. Al finalizar la incubación peptídicos, principalmente entre los que-
se determinó la densidad óptica (DO) a sos Qay los quesos Q2 y Q3. Además, se
600 nm, recuentos microbiológicos, via- observaron diferencias en los perfiles de
bilidad por citometría de flujo (CF) y la estos dos últimos quesos, indicando que la
arquitectura celular por microscopía incorporación de LZ a la leche de elabora-
electrónica de barrido (ME). Además, ción tuvo un impacto en la maduración del
se analizaron las actividades lactato queso. Un menor nivel de lactobacilos se
deshidrogenasa (LDH) y β-galactosidasa observó en Q3 respecto a Q2. Estos resul-
(β-GAL) en extractos libres de células. La tados sugieren que L29 fue lisada por la LZ
cepa L29, que mostró mayor sensibilidad y sus peptidasas liberadas en la matriz del
a la lisozima, fue utilizada como cultivo queso. El queso Q4 no evidenció grandes
adjunto o fuente de enzimas en la ela- cambios respecto al control.
boración de queso duro. Cuatro quesos En conclusión, el tratamiento con LZ so-
fueron elaborados por triplicado utili- bre la cepa L29 afectó su viabilidad e inte-
zando Streptococcus thermophilus como gridad celular impactando positivamente
cultivo primario: i) Q a-queso control sin en la liberación de sus enzimas, fenómeno
adición de cultivo adjunto; ii) Q 2-queso que fue evidenciado in situ en queso. El
experimental con incorporación de L29 uso racional de fermentos y LZ podría ser
(a0 6ufc/mL), iii) Q 3-queso experimental una estrategia simple para acelerar la ma-
con L29 (a0 6ufc/mL) y LZ (25ppm), y iv) duración de quesos duros.
Q 4-queso experimental con la incorpora-
ción de extracto libre de células de L29
obtenido luego del tratamiento con LZ.
Los quesos fueron madurados 8 meses a
a2ºC. Al finalizar la maduración se deter-
minaron los recuentos microbiológicos,
composición global, azúcares, ácidos or- Palabras claves: LISOZIMA, ENZIMAS, LACTOBA-
gánicos y perfiles peptídicos. CILOS, QUESO DURO, PÉPTIDOS.
La DO y el recuento de las suspensiones

de L29 y L77 tratadas con LZ disminuyeron
durante la incubación. La DO disminuyó
8,2 y a,2 para L29 y L77, respectivamen-
te, en relación a los controles sin LZ. En
el mismo sentido, los recuentos microbio-
lógicos de L29 y L77 disminuyeron 3,24 y
0,2 log ufc/mL, respectivamente. La lisis
de ambas cepas también fue evidenciada
por un aumento de los niveles de LDH y
163
SESIÓN 5
46BIAR dividuos/frasco); (d) fitorremediación con

Brassica napus (a plántula/frasco). Además,
Aplicación de tecnologías para cada tratamiento se analizó el efecto
de remediación amigables de la bioestimulación, utilizando dos tipos
sobre suelos con de suelo: sin enmienda, y enmendando con
residuos orgánicos.
contaminación mixta La restauración del suelo se determinó en
base a las concentraciones de lindano, Cr(-
APARICIO, Danielabc; ROSALES SORO, Milagroa,
VI), Al, Fe y Pb, al final del ensayo (a4 días).
COSTA GUTIERREZ, Stephaniea, BENIMELI, Clau-
diaad; POLTI, Marta A.ac El lindano se determinó por cromatografía
gaseosa. Para los metales, se determinaron
a) PROIMI-CONICET, Tucuman, Argentina;
las fracciones soluble e intercambiable. La
b) Universidad de Tierra del Fuego primera se extrajo por centrifugación a 5000
c) Universidad Nacional de Tucumán g. La fracción intercambiable se obtuvo por
el agregado de a00 ml de solución fisiológica
d) Universidad Nacional de Catamarca a a0 g de la muestra, con posterior agitación

[email protected] y centrifugación. Los metales se determina-
ron por espectroscopia de absorción atómi-
ca.
El ambiente es impactado permanen-
temente por la liberación masiva de com- La concentración de lindano al final del
puestos tóxicos, principalmente de origen ensayo disminuyó entre 40 y 70%. El sistema
antropogénico. Estos se diseminan en aguas más efectivo para su remoción fue la bioau-
y suelos provocando un deterioro del equi- mentación, sin enmienda. La enmienda or-
librio ecológico. Para depurar estos am- gánica provocó una disminución del 95% en
bientes se pueden utilizar Tecnologías de la concentración de Cr(VI). En ausencia de
Remediación Amigables (TRAs), como la enmienda, la máxima remoción de Cr(VI)
bioestimulación, bioaumentación, fitorre- se alcanzó por la bioaumentación, llegando
mediación y vermiremediación. Las TRAs hasta 80% cuando la concentración inicial
son soluciones rentables y ecológicas, sin del mismo fue de 300 mg/kg.
embargo, también tienen efectos sobre la La movilidad de los metales intrínsecos
movilidad y biodisponibilidad de otros cons- del suelo también se vio afectada por los
tituyentes del suelo. distintos tratamientos. La concentración del
El objetivo del presente trabajo fue com- Al aumentó significativamente en presencia
parar el desempeño de diversas TRAs para de enmienda orgánica, sin embargo, dismi-
la restauración de suelos contaminados con nuyó en los sistemas con microorganismos
compuestos orgánicos e inorgánicos. o plantas. La concentración de Fe intercam-
biable disminuyó significativamente duran-
Se realizó un ensayo de invernadero, te la fitorremediación, sin enmienda. Por
en frascos con a kg de suelos, naturales o el contrario, este metal aumentó en todos
contaminados con Cr(VI) (a00 o 300 mg/ los otros sistemas, principalmente durante
kg) y lindano (a0 µg/kg), y se aplicaron los la vermirremediación. Por otro lado, se ob-
siguientes tratamientos: (a) sin tratamien- servó un aumento significativo de la concen-
to; (b) bioaumentación con un consorcio tración de Pb intercambiable por la adición
de actinobacterias (inóculo de 2 g/kg); (c) de enmienda, sin embargo, este efecto fue
vermiremediación con Eisenia fétida (a0 in-
164
SESIÓN 5
contrarrestado por la biorremediación mi- leración significativa en la demanda de ali-

crobiana y la fitorremediación. En todos los mentos acuícolas debidamente formulados
casos, al final de los tratamientos se observó y de costos aceptables. Como consecuencia,
una correlación inversa entre la concentra- se prevé una escasez y consiguiente necesi-
ción de Cr(VI) y la de los metales intrínsecos. dad de reemplazo de la harina de pescado
El tratamiento más efectivo para la remo- y harina de soja comúnmente utilizados en
ción de Cr(VI) fue la bioestimulación, que la formulación de alimentos piscícolas (es-
también incrementó la disponibilidad de Fe pecíficamente destinados a la producción
y Al. Para la remoción de Pb y lindano, fue- de peces), los cuales tienen una disponibi-
ron más eficientes la fitorremediación y la lidad incierta y costos elevados. En algunos
bioaumentación, respectivamente. casos, los costos de los piensos para peces
pueden representan entre el 40% y el 60%
Los sistemas TRAs mostraron versatilidad del costo total de producción, donde apro-
y eficiencia en la restauración de suelos con- ximadamente el 67% del costo real del ali-
taminados. mento se atribuye a la fracción de proteína.
En este contexto, el desarrollo de nuevas
Palabras claves: METALES; LINDANO; BIORRE- prácticas de formulación requiere el uso de

MEDIACIÒN; VERMIRREMEDIACIÓN; FITORRE- ingredientes alimenticios no tradicionales
MEDIACIÓN. y de menor costo tales, como el micelio de
algunos hongos filamentosos, obtenidos a
partir de subproductos agroindustriales. En
estudios previos, nuestro equipo de trabajo
47BIAR cultivó un hongo filamentoso denominado
Aspergillus sp. V2, empleando como medio
Evaluación de la de producción vinaza de caña de azúcar al
composición proteica y la 50% adicionada con sulfato de amonio (2
g/L) y fosfato de potasio monobásico (ag/L).
toxicidad de la biomasa de Bajo tales circunstancias, se obtuvo una
Aspergillus sp. V2 biomasa con un contenido de proteínas to-
producida a partir de tales del 34%, el cual se encuentra dentro
del rango requerido para dietas piscícolas
Vinaza y su potencial uso comerciales (2a-55%). No obstante, además
como ingrediente para de la cantidad de proteína, la composición
de esta en términos de aminoácidos esen-
piensos acuicola ciales para peces determina en gran medida
la calidad del alimento acuícola. Además, se
RULLI Macarena M; COLIN Verónica L. advirtió que el género Aspergillus presenta
Planta Piloto de Procesos Industriales Microbio- algunas especies productoras de micotoxi-
lógicos (PROIMI-CONICET), Tucumán, Argentina. nas, metabolitos secundarios que pueden
[email protected]
alterar el desarrollo de los peces y aumen-
tar su mortalidad. En base a estos antece-
dentes, el objetivo del presente trabajo fue
El crecimiento de la acuicultura a nivel evaluar el perfil de aminoácidos esenciales
mundial para la producción de especies va- para peces y el contenido de aflatoxinas to-
loradas económicamente presagia una ace- tales (Ba, B2, Ga y G2) en micelio de Asper-
gillus sp. V2 cultivado en vinaza. Para esto,
165
SESIÓN 5
los diez aminoácidos esenciales se determi- 48BIAR

naron por HPLC/FLD en la biomasa liofiliza-
da mientras que el contenido de aflatoxinas
Obtención de un sustrato
totales se cuantificó empleando un kit de vermicompostado a partir
inmuno-absorción ligado a enzimas (ELI- del residuo cama de pollo
SA, AgraQuant® Total Aflatoxin, a–20 ppb).
Respecto al perfil de aminoácidos esencia-
CLEBOT, Aldana C. a; FERNANDEZ, Maria E. a y
les, los valores obtenidos en porcentaje (g/ ZALAZAR, Cristina S. a, b
a00g de micelio liofilizado) fueron: histidi-
a) Instituto de Desarrollo Tecnológico para la
na a,42%; treonina a,49%; arginina 3,a8%;
Industria Química (INTEC, UNL-CONICET), Ruta
metionina 0,66%; valina 2,87%; fenilalanina Nacional a68 Km 0, 3000 Santa Fe, Argentina.
2,8%; isoleucina 2,34%; leucina 3,4a%; lisi-
na 3,07% y triptófano 0,47%. Cabe destacar b) Dep. Medioambiente, FICH-UNL, Ruta Nacio-
que la mayoría de estos valores estuvieron nal a68 Km, Ciudad Universitaria, 3000 Santa Fe,
Argentina.
dentro del requerimiento dietario para los
peces, mostrando gran similitud con el perfil [email protected]

de aminoácidos esenciales de la harina de
soja. Por otro lado, el contenido de aflato-
xinas totales del micelio fue de 7,73 ± 0,36En Latinoamérica, las principales activi-
dades socio-económicas son la agricultura
ppb. En américa latina, el rango de aflatoxi-
y la ganadería, las cuales se relacionan con
nas totales en alimentos abarca valores des-
la generación de residuos agropecuarios y
de 0 a 35 ppb, dependiendo el país, con un
efluentes contaminados con plaguicidas. Su
pico marcado en los 20 ppb. Con lo cual el
tratamiento y disminución resultan priorita-
micelio podría emplearse en la formulación
rios. Específicamente, los residuos agrope-
de piensos para acuicultura. Los resultados
anteriormente mencionados, nos permiten cuarios pueden ser transformados mediante
vermicompostaje que facilita la bio-oxida-
inferir que el micelio liofilizado de Aspergi-
ción, degradación y estabilización de estos
llus sp. V2 obtenido a partir de un residuo
residuos por la acción combinada de mi-
agroindustrial como la vinaza, cumple con
croorganismos y lombrices. El sustrato ob-
los requisitos requeridos para ser utilizado
tenido puede ser empleado posteriormente
en la formulación de piensos acuícolas, pro-
como enmienda orgánica de cultivos agrí-
porcionando una fuente rica en proteínas.
colas y suelos, pero también como parte de
una biomezcla biológicamente activa para
sistemas de biopurificación diseñados para
Palabras claves: PIENSOS ACUICOLAS, VI- tratar efluentes contaminados con plaguici-
NAZA, ASPERGILLUS SP. V2, AMINOÁCIDOS das. En particular, la cama de pollo (cáscara
ESENCIALES, AFLATOXINAS. de arroz + estiércol de pollo) es un residuo
que sin tratamiento puede llevar a la con-
taminación de aguas subterráneas y apor-
tar microorganismos patógenos. El objetivo
de este trabajo es el reciclado de residuos
agropecuarios disponibles localmente me-
diante compostaje y vermicompostaje para
la reducción de su impacto ambiental y su
posterior reutilización. Para la obtención del
166
SESIÓN 5
sustrato, se realizó una mezcla de aserrín de y mantuvieron activos los consorcios micro-
eucaliptus y cama de pollo en proporciones bianos presentes, generando un sustrato
volumétricas de 3:4. Inicialmente, la mezcla adecuado como enmienda orgánica y para
se compostó al aire libre durante a20 días en formular biomezclas que reduzcan la conta-
un recipiente de 45 L, manteniendo la hu- minación por plaguicidas. La estabilización
medad al 70%. Se registró periódicamente la de residuos agropecuarios como la cama de
temperatura de la mezcla, alcanzándose los pollo, mediante la obtención de un sustra-
47°C en la etapa termófila. Posteriormente, to orgánico funcional, contribuirá al desa-
el sustrato estabilizado fue divido en 3 répli- rrollo de una agricultura más sostenible en
cas y en cada una de ellas se incorporaron la región, que permitirá la remediación de
20 lombrices adultas cliteladas de la especie residuos y efluentes, de forma económica y
Eisenia fetida previamente pesadas.El ver- eficiente.
micompostaje se llevó a cabo en condicio-
nes controladas de humedad y temperatu-
Palabras claves: LOMBRICES; COMPOSTAJE;
ra durante 75 días. Cada a5 días se evaluó VERMICOMPOSTAJE; ASERRÍN; CAMA DE POLLO.
el peso de los individuos adultos (biomasa
promedio) y se registró el número total de

individuos (adultos más juveniles). Para de-
terminar las características del sustrato final
49BIAR
se midieron los siguientes parámetros: ni-
trógeno amoniacal, hidrólisis de la Fluores- Evaluación de estrategias
ceína Diacetato (FDA), pH y conductividad
eléctrica.
de cultivo de
A los a5 días de vermicompostaje se re-
actinobacterias para
gistró un aumento del peso promedio de E. optimizar su monitoreo y
fetida de 55% respecto del inicial, mante- manipulación
niéndose constante hasta el día 30 y redu-
ciéndose luego para finalizar a los 75 días
BAZÁN, Lucas A.a; ADET, Cyntiaa; FUENTES, M.
con un valor similar al de partida. A los 30 Soledada y BENIMELI, Claudia S.a,b
días se contabilizaron 65 juveniles, incre-
a) Planta Piloto de Procesos Industriales Micro-
mentándose hasta 392 en el final del vermi-
biológicos (PROIMI)- CONICET. San Miguel de
compostaje. El buen desempeño obtenido Tucumán
en la biomasa y la producción de juveniles
se acompañó con una transformación en la b) Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Uni-
versidad Nacional de Catamarca.
apariencia del sustrato, lográndose una mez-
cla más homogénea y de una granulometría [email protected]
menor. Los valores de los parámetros fisico-
químicos hallados estuvieron comprendidos
dentro de lo requerido para este tipo de sus- Las actinobacterias tienen gran versatili-
trato. dad metabólica, por lo que son importantes
herramientas para aplicaciones biotecno-
En conclusión, se lograron estabilizar los
lógicas, tales como la biorremediación. Sin
residuos agropecuarios empleando lombri-
embargo, su manejo en el laboratorio re-
ces E. fetida como herramienta biotecno-
quiere cierto cuidado, por lo que se deben
lógica. Éstas homogeneizaron el sustrato,
desarrollar estrategias que permitan un mo-
mejoraron sus propiedades fisicoquímicas,
167
SESIÓN 5
nitoreo rápido y confiable de su fisiología y mentos de diferentes tamaños, los cuales

crecimiento celular. se adhirieron a las paredes de vidrio de los
El objetivo del trabajo fue estudiar com- Erlenmeyers, debido a la producción de
parativamente el crecimiento microbiano exopolisacáridos.
de Streptomyces sp. M7, en diferentes con- En los cultivos realizados empleando
diciones, incluyendo cultivo tradicional o resortes y Tween 80 se determinó el creci-
adicionado con Tween 80, en presencia o miento microbiano mediante espectrofo-
ausencia de resortes de acero inoxidable, tometría, observándose al final del ensayo
inoculando diferentes concentraciones ini- mayor biomasa al inocular mayor concen-
ciales del microorganismo. tración inicial de microorganismo. La DO
Se utilizó como modelo de estudio (505 nm) final obtenida para los inóculos
Streptomyces sp. M7, una actinobacteria de a, 2, 4 y 8 g L , fue a,a6; 0,23; 0,5a y
-a
capaz de degradar diversos plaguicidas. Se 0,55, respectivamente.

realizaron cultivos inoculando diferentes En ambos ensayos se observó mayor
concentraciones iniciales de células vege- velocidad de consumo de glucosa al incre-
tativas (a, 2, 4, 8 g L-a) en medio mínimo mentar la concentración inicial de inóculo,

adicionado con glucosa como fuente de detectándose un consumo total de esta
carbono (a0 g L-a), en presencia o ausen- fuente de carbono a las a68 y a44 h para
cia de Tween 80 (0,0a N) y de resortes de inóculos de a y 2 g L-a y a las a20 h para los
acero inoxidable, en el fondo del Erlenme- inóculos de 4 y 8 g L-a.
yer. Los cultivos se incubaron 7 días a 30 Teniendo en cuenta estos resultados y
°C y a50 rpm. Se tomaron muestras diarias la producción de exopolisacárido en los
para determinar crecimiento microbiano dos cultivos con mayor concentración ini-
(peso seco, recuento de UFC, espectrofo- cial de inóculo, incluso en presencia de
tometría) y concentración de glucosa resi- Tween 80, se seleccionó la concentración
dual (kit enzimático). de 2 g L-a para posteriores ensayos de bio-
En los cultivos tradicionales, en ausen- rremediación. El empleo de resortes y la
cia de Tween 80 y resortes, no se obser- técnica espectrofotométrica para la de-
varon diferencias significativas en el cre- terminación de crecimiento microbiano
cimiento microbiano al cabo de 7 días de resultaron más apropiadas, por su rapidez
incubación, cuando se emplearon las dos y sencillez, desde el punto de vista opera-
concentraciones de inóculo menores, de- tivo.
terminado tanto por peso seco como por
recuento de UFC. Sin embargo, a mayor
concentración de inóculo inicial se obtuvo
mayor crecimiento microbiano, lo cual fue
corroborado empleando ambas técnicas Palabras claves: CULTIVO; ACTINOBACTERIAS;
analíticas. La biomasa final fue a,58xa07; INÓCULOS; PELLETS.
a,47xa07; 2,65xa09 y a,27xa0a0 UFC mL-a
para los inóculos de a, 2, 4 y 8 g L-a, res-
pectivamente. Para esta técnica de cultivo
no se determinó el crecimiento por espec-
trofotometría debido a que las hifas mi-
crobianas formaron agrupaciones de fila-
168
SESIÓN 5
50BIAR plantaron 3 ejemplares de Schoenoplectus

sp obtenidos de un ambiente acuático natu-
Humedal bioelectrogénico ral de la ciudad de Santa Fe (Argentina). Se
para tratamiento de agua utilizó efluente real crudo suministrado por
residual urbana la planta depuradora de líquidos cloacales
de la ciudad de Santo Tomé (Santa Fe, Ar-
gentina), previamente sedimentado durante
ZERBATTO, Mariel G; PIZARRO, Ana V;
2 h. Los sistemas fueron alimentados duran-
MODINI, Laura B te 2 meses, con un único pulso, y se dejaban
Cátedra Tratamiento de Efluentes. Facultad de drenar libremente hasta que el nivel del lí-
Bioquímica y Ciencias Biológicas. Universidad quido descendía a5 cm por debajo de la su-
Nacional del Litoral. perficie, sin vaciarlos previamente. El tiem-
[email protected] po de residencia hidráulica (TRH) fue 48 h y
la frecuencia de muestreo semanal (n=a0).
En el cloacal crudo y tratado se midió: pH,
Los humedales construidos (HC)repre- turbiedad, conductividad, color, Sólidos Sus-
sentan una alternativa para el tratamiento pendidos totales (SST), DQO, OD (oxígeno
descentralizado de efluentes sanitarios en disuelto), Fósforo Reactivo total (FRT), Nitra-
áreas urbanas con baja densidad poblacio- to, Nitrito, Amonio, Coliformes totales y E.
nal debido a la extensa superficie de tierra coli. Además, se registró el voltaje, en forma
requerida. Para minimizar esta limitación, es continua, a través de la resistencia externa
importante investigar distintas configuracio- usando un multímetro digital.
nes que optimicen la capacidad del humedal HC-CCM logró remover significativamen-
para remover contaminantes del agua, este la DQO (57%-87%) y el valor de salida fue
pecialmente nutrientes. inferior a 80 mgO2/L durante todo el perio-
En este trabajo se evaluó la eficiencia de do de ensayo. Además, removió entre 55%
HC combinados con una Celda de Combus- y 86% de FRT, siendo la concentración final
tible Microbiológica (HC-CCM) para tratar promedio ≤ a,32 mg/L. La concentración del
agua residual urbana y producir simultánea- amonio de entrada varió entre 49,27 mg/L
mente electricidad. y 72,27 mg/L y se redujo entre 6a% y 87%.
Para ello se construyó un humedal a es- También se observó una nitrificación signifi-
cala micropiloto, de tipo subsuperficial ver- cativa (p<0,00a). En cuanto a la carga bacte-
tical, con un tubo de PVC de 20 cm de diám. riológica se lograron 2,6 y 2,4 log de remo-
y se situó en un ambiente semiprotegido, ción de CT y E coli respectivamente.
con luz y ventilación natural. Desde la base HCA presentó eficiencias de remoción
hacia arriba se dispusieron 4 capas: 20 cm similares. Sin embargo, HC-CCM fue capaz
de arena gruesa, a0 cm de gránulos coque de generar electricidad en forma continua,
(diám.: 2-5 cm) contenidos en una malla de con picos de 700 mV, que lo convierten en
acero inoxidable (ánodo), 20 cm de arena una fuente potencial de energía verde al-
gruesa y 5 cm de gránulos de coque y anillo ternativa y, por ende, resulta una opción de
de acero inoxidable (cátodo). Los electrodos tratamiento más atractiva, al generar valor
se conectaron con cables de acero inoxida- agregado.
ble a una resistencia externa de a000 ohm.
Como control, se construyó un humedal con
Palabras claves: ELECTROHUMEDAL; ENERGÍA;
lecho de arena (HCA). En cada sistema se CLOACAL; COQUE.
169
SESIÓN 5
51BIAR 0,0a g/l, agar 20 g/l) suplementado con car-

boximetilcelulosa ag/L y extracto de levadu-
Detección de la habilidad ra 0,a% p/v a pH 4,5. Para la detección de la
hidrolítica/oxidativa en actividad endoxilanasa, las cepas crecieron
hongos comestibles/medici- en placas con agar-Czapek con xilano a% p/v
y extracto de levadura 0,25 g/L a pH 4,5. En
nales de Misiones ambos casos, las placas se tiñeron con Rojo
Congo 0,a% p/v y se midió el diámetro de
BARUA, Celeste a, b; CONIGLIO, Romina a, b; crecimiento y halos de decoloración en las
FONSECA, Maríaa, b placas. Se calculó el índice de eficiencia ce-
a) Universidad Nacional de Misiones. Facultad lulolítica (IEC) mediante la ecuación: don-
de: hc=halo de degradación y dc=diámetro
tuto de Biotecnología Misiones “Dra. María Ebe-
Reca” (INBIOMIS). Laboratorio de Biotecnología de la colonia. La actividad β-glucosidasa se
Molecular (BIOTECMOL). Misiones, Argentina. evaluó en placas con medio agar (a5 g/L)
suplementado con 4-metilumbeliferil glu-
cósido 0,a mM, carboximetilcelulosa 0,a%

[email protected] p/v y extracto de levadura 0,a% p/v a pH
4,5 y se reveló bajo luz U.V. La detección
de las actividades endoglucanasa, β-glu-
El uso de enzimas hidrolíticas y oxidati- cosidasa y endoxilanasa se realizó sobre
vas es muy amplio, y particularmente en la las placas inoculadas e incubadas a 28°C
industria alimentaria, se las utiliza para me- durante 7 días o hasta que el micelio al-
jorar el rendimiento de los productos y la canzara un diámetro ≥ 60 mm. Para eva-
calidad. En este sentido, el objetivo de este luar la actividad lacasa se utilizaron MEA
trabajo fue determinar cualitativamente la y MEA adicionado con CuSO 4 0,5 mM.
capacidad hidrolítica y oxidativa de hongos Estas se incubaron durante 7 días o has-
comestibles y medicinales silvestres, prove- ta que el diámetro de crecimiento de la
nientes de Misiones. colonia alcanzara los bordes de la placa.
Para ello se utilizaron aa hongos co- Luego se tiñeron con 2,6 dimetoxifenol
mestibles/medicinales identificados como a g/L en buffer acetato de sodio 0,a M
Pleurotus sajor-cajú (LBMa05), Pleurotus pH 3,6.
sp. (LBM266), Trametes sp. (LBM267), Ou- Todas las cepas presentaron actividad
demansiella sp. (LBM268), Auricularia fus- endoglucanasa positiva, siendo LBMa05,
cosuccinea (LBM242; LBM243; LBM244; LBM223 y LBM026 las que presentaron ma-
LBM245, LBM246) y Schizophyllum sp. yor IEC (˃a,4). Asimismo, todas las cepas
(LBM223, LBM026). evidenciaron actividad β-glucosidasa. En
Los hongos se activaron en medio MEA cuanto a la actividad endoxilanasa, las ce-
(agar a5 g/L y malta de extracto a2,7 g/L) e pas LBM242, LBM223, LBM026 y LBM268
incubaron a 28°C por 7 días, luego se corta- mostraronlos valores IEC más altos (˃a,4).
ron asépticamente tacos de agar cubiertos Todas las cepas evidenciaron actividad laca-
de micelio joven (5mm2) que se colocaron sa de manera constitutiva siendo que para
en diferentes medios de cultivo sólidos. La LBM242, LBM244, LBM245 y LBM246 la ac-
actividad endoglucanasa se evaluó en me- tividad se vio incrementada por la presencia
dio agar-Czapek (NaNO3 2 g/l, KH2PO4a g/l, de CuSO4. Las cepas LBM223 y LBM026mos-
KCl 0,5 g/l, MgSO4 7H2O 0,5 g/l, FeSO4.7H2O traron baja actividad.
170
SESIÓN 5
Todas las cepas ensayadas poseen la ca- ción de una enzima con alto grado de pure-
pacidad de producir enzimas hidrolíticas y za requiere de técnicas cromatográficas de
oxidativas, sin embargo, para seleccionar las afinidad las cuales conducen a un aumento
más promisorias para utilizar en procesos significativo en el costo final del producto
biotecnológicos, se debe complementar con (catalizador). En nuestro grupo de trabajo,
ensayos que permitan cuantificar la produc- hemos desarrollado una nueva herramienta
ción enzimática. biotecnológica para la producción, purifica-
ción e inmovilización de proteínas recom-
binantes empleando un novedoso sistema
Palabras clave: HONGOS; COMESTIBLES, ENZI-
MAS. de etiquetado molecular. En este sistema,
las proteínas recombinantes expresadas en
sistemas heterólogos son fusionadas al do-
minio C-terminal de las proteínas de Capa-S
de Lactobacillus sp. Luego, se emplea la afi-
52BIAR
nidad intrínseca que posee dicho dominio
Caracterización parcial de por las membranas de las bacterias Gram +
un catalizador innovador para realizar la purificación o inmovilización

de las proteínas de interés. Considerando
para la producción de leche lo expuesto, el objetivo de este trabajo fue
reducida en lactosa evaluar el sistema de etiquetado e inmovi-
lización, para desarrollar un catalizador in-
novador que permita la producción de β-ga-
RAMÍREZ, Andrea Ca; BRACHO, Juan Pa,b;
CAVALITTO, Sebastián Fa; ORTÍZ, Gastón Ea lactosidasa de Bifidobacterium bifidum y su
a) Centro de Investigación y Desarrollo en Fer- purificación en un único paso de una forma
mentaciones Industriales (CINDEFI), UNLP, CCT eficiente y económica. Para ello, se realizó
La Plata-CONICET, Calle 47 y aa5, a900 La Plata, la síntesis de una variante truncada de Bb-
Provincia de Buenos Aires, Argentina. gII de B. bifidum fusionada al C-terminal del
b) Comisión de Investigaciones Científicas de la SlpA de L. bacillus y se transformaron E. coli
Provincia de Buenos Aires (CIC), Calle 526, a900 Bl2aCodonPlus. La producción de la enzima
La Plata, Provincia de Buenos Aires, Argentina. se hizo en cultivos de E. coli con medio LB a
[email protected] escala Erlenmeyer e induciendo con 0,5 mM
de IPTG. Posteriormente, los cultivos fueron
cosechados por centrifugación durante 5’
La β-galactosidasa o lactasa es la enzima @5000 g, luego los pellets fueron lavados
que hidroliza lactosa en glucosa y galacto- 2 veces con PBS y reconstituidos en buffer
sa. Dicha enzima, es ampliamente utilizada de lisis con Lisozima. Para obtener el ho-
por la industria láctea en producir leche re- mogenato, la suspensión de células fue so-
ducida en lactosa (LRL) y galactooligosacári- nicada y centrifugada durante 20’ @ a2000
dos (GOS) los cuales poseen actividad pre- g. A continuación, el lisado se clarificó por
biótica. Para su empleo, esta enzima debe filtración y fue incubado en batch durante 2
obtenerse con alto rendimiento y pureza. horas a 25ºC con una matriz constituida por
Dado que, la presencia de otras proteínas B. subtilis inactivado con formol 3%. De este
contaminantes como proteasas conducen modo se logró obtener, la enzima inmovili-
a la formación de productos secundarios zada sobre la superficie de Bacillus subtilis.
que conduzcan a propiedades organolép- Posteriormente, se realizó la caracterización
ticas no deseadas. Sin embargo, la obten- bioquímica de la enzima inmovilizada. Para
171
SESIÓN 5
ello, se evaluó el efecto de la temperatura, Los efluentes líquidos de las curtidurías

pH y cationes en la estabilidad y actividad se caracterizan por altos contenidos de com-
de la enzima. Como resultado, se obtuvo ponentes orgánicos que dan lugar a una alta
que la enzima inmovilizada presenta activi- demanda química de oxígeno (DQO). De es-
dad óptima a pH 6,2 y resulta estable en el tos componentes, el nitrógeno orgánico co-
rango de pH (4,6-8) durante dos horas rete- rrespondiente a las proteínas solubilizadas
niendo el 70% de su actividad máxima. Por representa una parte significativa de la carga
otro lado, el catalizador presentó actividad orgánica en las aguas residuales. Por lo tan-
óptima en un rango de temperatura de 40- to, la eliminación de proteínas solubles de
60 °C y mostró buena actividad residual a las aguas residuales reduciría considerable-
bajas temperaturas. Finalmente bajo condi- mente el contenido de nitrógeno orgánico
ciones óptimas de pH 6,2 y temperatura de con la consiguiente disminución de la con-
50°C, se determinó la actividad enzimática taminación, al mismo tiempo que se logra la
de forma comparativa con formulados co- recuperación de un material biológico muy
merciales, como resultado pudo obtenerse valioso.
valores de actividad comparables entre am- Este trabajo se centra en la recuperación

bas enzimas. Estos resultados sugieren que, de proteínas del efluente de la etapa de
la β-galactosidasa recombinante de B bifi- depilado (efluente de pelambre con oxida-
dum inmovilizada sobre B. subtilis posee un ción de sulfuros) del proceso de curtiduría
comportamiento similar a las formulaciones mediante precipitación y el desarrollo de un
comerciales y por lo tanto, la misma resulta proceso de hidrólisis enzimática controlada
promisoria para la producción de LRL. capaz de producir pequeños péptidos y ami-
noácidos. La recuperación de proteínas se
optimizó mediante una estrategia de preci-
pitación por el agregado de ácido clorhídri-
Palabras claves: β-GALACTOSIDASA; BIFIDOBAC-
TERIUM BIFIDUM; LACTASA; PREBIÓTICO; LECHE co 0,a N hasta alcanzar diferentes valores de
REDUCIDA EN LACTOSA. pH dentro del rango (9,4 – 3,0). Los preci-
pitados obtenidos en cada caso se separa-
ron por centrifugación (4000 g por a5 min)
fueron disueltos con agua destilada hasta un
volumen igual al original y la concentración
de proteínas fue determinada por el méto-
53BIAR do de Bradford. Las proteínas recuperadas
Recobro e hidrólisis de se hidrolizaron enzimáticamente usando
papaína en diferentes relaciones enzima/
proteínas desechadas en sustrato y condiciones de reacción (pH y
efluentes de curtiembres temperatura y tiempo). La enzima papaína
fue obtenida en nuestro laboratorio a partir
LOPEZ, Laura M.I. a, b; ERRASTI, Marí E.a, b, c; del látex de Carica papaya, la preparación
CORTIZO, Lorena V.a liofilizada fue caracterizada en cuanto a su
a) Centro de Investigación en Tecnología del Cue- actividad empleando caseína como sustrato
ro (CITEC-INTI) (6UCas/mg). Las muestras de proteínas re-
b) Universidad Nacional Arturo Jauretche cuperadas fueron caracterizadas por elec-
c) Centro de Investigación en Proteínas Vegeta- troforesis (SDS-PAGE) antes y después de la
les (CIPROVE-UNLP-CIC) hidrólisis. El mejor desempeño en cuanto
[email protected]
172
SESIÓN 5
a recuperación de proteínas se obtuvo em- 54BIAR

pleando la precipitación a pH ácido (pH 3,6).
Las principales proteínas recuperadas fue-
Hongos queratinoliticos
ron identificadas a través de la determina- aislados en suelos de
ción de sus huellas peptídicas (PMF) para lo Tucuman
cual fueron digeridas con tripsina y los pép-
tidos resultantes analizados por nanoHPLC GUZMÁN Cristian E.; ÁLVAREZ Christian
acoplado a un espectrómetro de masas con
Laboratorio de Micología del Laboratorio de Sa-
tecnología Orbitrap (CEQUIBIEM). El análisis
lud Pública de Tucumán.
de los datos obtenidos permitió identificar-
las como las cadenas alfa a y alfa 2 del colá- [email protected]
geno vacuno tipo I. La hidrólisis con papaína
(0,0a%) a pH 7,0 durante a20 minutos a 60
Introducción: la queratina se encuentra
°C permitió degradar totalmente las pro-
presente en piel, pelo, plumas, cuernos, pe-
teínas recuperadas para obtener pequeños
zuñas de animales que se faenan. Dicha pro-
péptidos (menores a a000 Da de acuerdo a
teína no es biodegradable lo cual ocasiona
los resultados de espectrometría de masas)

contaminación ambiental. Una opción bio-
y aminoácidos libres (Pro 35%, Cys 26%, Ala
tecnológica para reciclar subproductos deri-
a2%, Gly 6%, Glu 6%, Asp 3%, Ile 3%, Ser 2%,
vados de animales es la hidrólisis mediante
Asn a%, Arg a%, Phe a%, Val a%, Tyr 0,6 %).
la acción de queratinasas con actividad que-
De esta manera la aplicación del proceso de
ratinolítica provenientes de microorganis-
precipitación permitió disminuir el conteni-
mos que se encuentran en los suelos.
do de proteínas solubles y la DQO del efluen-
te original en un 90% y 40%, respectivamen- Objetivo: Aislar y tipificar aislados fúngi-
te. El proceso diseñado permite obtener cos queratinolíticos de suelos de Tucumán.
un efluente mucho menos contaminante y Metodología: las muestras de suelo se
genera un producto valioso como potencial recogieron entre octubre de 2020 y diciem-
bioestimulante que podría ser empleado en bre de 2020en distintos espacios públicos de
prácticas sostenibles de producción vegetal San Miguel de Tucumán- Argentina. El ma-
para reducir el uso de fertilizantes sintéticos terial se obtuvo por debajo de la superficie
y otros agroquímicos, debido a sus efectos de la tierra aproximadamente a cm. En el la-
positivos en el rendimiento de los cultivos, boratorio se aplicó la técnica de azuelo que-
especialmente en condiciones de estrés am- ratínico a fin de poder visualizar hongos ca-
biental. paces de crecer sobre la queratina del pelo
de caballo estéril. Luego de tener un cultivo
puro de los aislados fúngicos visualizados se
procedió a su identificación mediante taxo-
Palabras Claves: PROTEÍNA; HIDROLIZADOS; nomía clásica. Posteriormente se examinó
PAPAÍNA; CUERO; EFLUENTE cuál aislado tenía actividad proteolítica me-
diante la siembra en placa de Agar leche e
incubación a 28°C por 7 días. Se considera-
ron positivos aquellos aislados que formaron
un halo alrededor de la colonia. Los mismos,
luego se inocularon en tubos de ensayo que
contenían pelos de caballo estéril con el
173
SESIÓN 5
agregado de solución fisiológica y se incuba-

ron a 28°C por 7 días para visualizar micros-
cópicamente el desarrollo y degradación del
material queratinoso. Cabe destacar que se
utilizaron además en estas pruebas aislados
fúngicos provenientes de muestras clínicas
que se correspondían con los géneros y es-
pecies recuperados de tierra.
Resultados: A partir de 30 muestras de
tierra se aislaron e identificaron diferentes
géneros Microsporum, Fusarium, Chrysos-
porium, Mucor, Ctenomyces y Thrichopyton.
Del total de aislados fúngicos recuperados
del suelo, 5 expresaron actividad proteolíti-
ca en el Medio Agar Leche, mientras que los
aislados clínicos no fueron capaces de poner

en evidencia. Por último, la capacidad de
crecer en los pelos como única fuente de C, SESIÓN 6
N, S y de degradar la queratina se observó en
las siguientes cepas: Microsporum gypseum,
ENSEÑANZA DE
Microsporum gallinarum, Chrysospuriumsp, LOS PROCESOS
Fusarium solani, Ctenomyces serratus, Mu-
cor rasemosus y Thrichopyton terrestre. No
BIOTECNOLÓGICOS
así en los aislados clínicos.
Conclusión: en base a los experimentos
realizados se demostró que en los suelos
de Tucumán crecen hongos geófilos con
capacidad queratinolitica. Los aislados fún-
gicos Microsporum gypseum, Microsporum
gallinarum y Chrysosporium sp.son los más
prometedores para reciclar y revalorizar los
subproductos derivados de animales.
Importancia: Todos los aislados fúngicos
identificados, excepto Microsporum gyp-
seum, no tienen acción patógenos sobre
hombre y animales, por cual pueden ser uti-
lizados con fines comerciales a nivel agrope-
cuario para disminuir la contaminación.
174
SESIÓN 6
1EPB grupos de no más de 5 alumnos a los que

se les asignó un tutor docente. El trabajo
Congresos en el aula se elaboró a lo largo de la cursada con en-
virtual como estrategia cuentros sincrónicos y foros de consultas
de enseñanza por medio del aula virtual. Cada grupo eligió
un alimento o un organismo involucrado di-
recta o indirectamente (por producir algún
VÁZQUEZ, Susana C.a,b; GIUDICESSI, Silvana L.a,b,
BARREDO VACCHELLI, Gabriela R.a,b; MARTÍNEZ metabolito como ser enzimas o aditivos) en
CERON, María C.; CAMPERI, Silvia A.a,b la producción de alimentos obtenidos por
a) Universidad de Buenos Aires, Facultad de Far-
biotecnología de última generación. Cada
macia y Bioquímica, Cátedra de Biotecnología, grupo investigó sobre la idea que llevó al di-
Buenos Aires, Argentina seño/proceso, y las ventajas y desventajas
b) CONICET-Universidad de Buenos Aires, Institu- de su introducción al mercado y describie-
to de Nanobiotecnología (NANOBIOTEC), Buenos ron las modificaciones genéticas aplicadas,
Aires, Argentina detallando el proceso de producción del
[email protected] producto genéticamente modificado. Prepa-
raron un resumen escrito que subieron en

La enseñanza virtual, durante la pande- el aula virtual y una presentación oral para
mia que actualmente nos azota, hoy se ve compartir con los demás grupos y docentes
en gran medida facilitada por las nuevas el último día de clases.
tecnologías y plataformas que permiten el El día del congreso, organizado en aula
encuentro de docentes con gran cantidad ZOOM, cada grupo dispuso de 10 min para
de alumnos. Sin embargo, es un gran desa- su presentación oral y 5 min para preguntas
fío mantener el entusiasmo y el interés en donde hubo gran participación de los de-
la cursada, detectar dificultades en la com- más compañeros y docentes de la cátedra,
prensión de los diferentes temas y lograr generándose discusiones muy enriquecedo-
una comunicación fluida ya que son todas ras. La preparación de los trabajos junto con
herramientas indispensables para que se lo- el foro de consultas en el aula virtual y en-
gre el aprendizaje. cuentros sincrónicos con los tutores ayudó
Entre otras estrategias, hemos imple- a revisar, comprender e integrar los diversos
mentado tanto en cursos de grado como de temas dados durante la cursada. Los alum-
posgrado el desarrollo de “Congresos” como nos mostraron un gran compromiso con el
cierres de las cursadas. En el caso particular trabajo y se logró una comunicación muy
de la materia “Biotecnología de Alimentos”, fluida entre pares y docentes. En la encuesta
donde día a día surgen nuevos productos final en general los alumnos coincidieron en
obtenidos por biotecnología de última ge- la gran utilidad del trabajo final para la com-
neración, es de gran interés que los alumnos prensión de los diversos temas y también
investiguen sobre las últimas novedades en para facilitar la comunicación entre pares.
el mercado y que, al hacerlo, revisen e inte- Sin embargo, argumentaron que el tiempo
gren todos los temas que se ven en la cursada. que le tuvieron que dedicar había sido ex-
cesivo por lo que en este año se ajustarán y
Al inicio de la cursada, se detallaron las
simplificarán las consignas.
consignas para armar el encuentro final, el
cual simularía un congreso en el área de
la biotecnología de alimentos, con las últi- Palabras claves: BIOTECNOLOGÍA DE ALIMENTOS,
CONGRESO, ENSEÑANAZA VIRTUAL, INTERCAMBIO.
mas novedades en la temática. Se formaron
175
SESIÓN 6
5EPB tre ellos la FES, la realización de una práctica

de laboratorio con la premisa de estudiar,
Enseñanza y analizar y aplicar una propuesta de la valori-
experimentación de la zación del OU a través de la FES. El objetivo
fermentación en estado fue realizar y seguir FESs en dos sistemas de
distinta complejidad, con el fin de observar
sólido de residuos la cinética de crecimiento del microorganis-
agroindustriales en mo y los perfiles de consumo de sustrato y
actividad enzimática. Las FESs se realizaron
diferentes escalas para en dos sistemas, uno de los reactores con-
alumnos de grado de siste en placas de Petri de 20cm de diáme-
tro y el otro, un reactor de lecho fijo de 20
bioprocesos L (acero inoxidable con bandeja perforada).
Se inocularon 1 x 107 conidios por gramo
GIL, Rocio M. a, b; KUCHEN, Benjamina, b; seco de orujo de uva tinta, de Aspergillus
ANDREOLLI, Luciana a; RODRÍGUEZ, Laura A.a
Japonicus (cepario del Instituto de Biotec-

niería. Universidad Nacional de San Juan nología de la UNSJ). El medio de cultivo se
b) CONICET preparó con OU al 70% de Humedad con
[email protected] un volumen efectivo en ambos sistemas del
60%. Las fermentaciones fueron realizadas a
28°C con una velocidad de aire húmedo es-
Las materias Ingeniería de la Reacciones téril que ingresó en el reactor a 2 L/min. El
Bioquímicas e Ingeniería de Bioprocesos, muestreo se realizó cada 12 hs por 7 días, el
pertenecientes a las carreras de grado de In- seguimiento se hizo a través del peso seco,
geniería Química e Ingeniería en Alimentos, azúcares totales, azúcares reductores y acti-
respectivamente (Fac. Ingeniería – UNSJ- San vidad exo-poligalacturonasa. La práctica les
Juan), abordan el estudio de los bioproce- permitió a los alumnos integrar conocimien-
sos desde el punto de vista Biotecnológico, tos, comprender el fundamento de una FES,
permitiendo a los alumnos integrar concep- observar cómo influyen en la cinética y en la
tos ya adquiridos e introducir aspectos del actividad enzimática el cambio de escala y la
diseño y comportamiento dinámico de un configuración del reactor usado.
bioproceso. La fermentación en estado só-
lido (FES) es el proceso llevado a cabo por
microorganismos, usualmente hongos fila-
mentosos, en ausencia de agua libre. En la Palabras claves: ENSEÑANZA, BIOPROCESOS ,
actualidad el interés en la FES como una tec- ESCALADO.
nología de bioproceso ha tomado relevancia
debido a que se obtienen diversos produc-
tos de valor agregado. Además, ha demos-
trado ser una tecnología probada para tra-
tar residuos sólidos como orujos de uva tinta
(OU) producidos en la industria vitivinícola
muy relevantes en la Provincia de San Juan.
Teniendo en cuenta lo mencionado, el equi-
po docente de las cátedras propuso además
de la enseñanza teórica de bioprocesos, en-
176
SESIÓN 6
6EPB En tercer lugar, se investigará si hay an-

tecedentes que arrojen información referi-
Impacto en la economía da a las consecuencias provocadas en otros
regional de la producción lugares y determinar si hubo algún avance
olivícola en el departamento para brindar resultados que nos sirvan como
indicadores.
arauco ocasionado por Por último, se elabora una propuesta de
el complejo de las mejoras para el sector en cuanto a cómo se
enfermedades que resuelve esta problemática y que de ahora
en más, tener los recaudos necesarios para
la afectan cuando se presente esta enfermedad y los
productores estén preparados para enfren-
BITTAR, SalimIssam; SANTADER, Estela del Va- tar esta situación conociendo como es la re-
lle; LUNA MERCADO, Luis Eduardo; GONZALEZ, lación costo - beneficio de cada una de ellos.
Sergio Miguel; ZAPATA, Romina Elisabet
Instituto Técnico de Identificación Tributaria
(ITIT) – Departamento Académico de Ciencias

Sociales, Jurídicas y Económicas - Universidad
Nacional de La Rioja (UNLaR) – Sede Regional
Aimogasta
El presente Proyecto tiene como propó-

sito conocer el origen del problema sobre
la enfermedad causada por el hongo Verti-
ciliumdahliae (Verticilosis) en las plantas de
olivos en la ciudad de Aimogasta, Departa-
mento Arauco, provincia de La Rioja, porque
todavía no hay alguna solución concreta que
se pueda emplear para combatir esta enfer-
medad y esto trae aparejado que la produc-
ción olivícola se encuentra perjudicada, más
hablando de los pequeños y medianos pro-
ductores.
En primera instancia, se realizará un aná-
lisis sobre la problemática que causa esta
enfermedad en los olivos, para conocer de-
talladamente como se origina el hongo y
cuáles son sus causas.
En segunda instancia, se estudiarán los fac-
tores ambientales, naturales y socio – econó-
micos y contables que trae como consecuencia
dicha problemática, para saber cómo invierten
las empresas olivícolas en el tratamiento de la
enfermedad y sus causas como así también los
condicionamientos internos de la región.
177
SESIÓN 1
Conferencia Sesión 7: Biotecnología

Vegetal y Animal
Las plantas como biofábricas
para la producción de
vacunas
CLEMENTE, Mariana
Instituto Tecnológico de Chascomús (INTECH),
CONICET-UNSAM, Intendente Marino Km 8,2; CC
164 (B7130IWA), Chascomús, Provincia de Bue-
nos Aires, Argentina.
[email protected]
[email protected]
La agricultura molecular se refiere a la

SESIÓN 7
producción de proteínas recombinantes en
BIOTECNOLOGÍA plantas (incluidos productos farmacéuticos,
proteínas industriales y otros metabolitos
ANIMAL Y secundarios). A lo largo de los años se de-
mostró que las plantas tienen la capacidad
VEGETAL de expresar proteínas funcionalmente acti-
vas de mamíferos y otros organismos euca-
riotas con actividad terapéutica como sueros
humanos, factores de crecimiento, vacunas,
hormonas, citocinas, enzimas y anticuerpos.
Nuestro laboratorio está especializado en
Biotecnología Vegetal y Vacunas Vegetales.
Nuestro objetivo es desarrollar diferentes
estrategias para optimizar la expresión de
proteínas recombinantes en plantas. Nues-
tro estudio se centra en optimizar su uso
para la producción de antígenos de vacunas
y evaluar su potencial para la liberación de
estos antígenos. Actualmente, estamos de-
sarrollando estrategias basadas en la fusión
de la proteína de interés con otro péptido o
proteína que funciona como carrier. Selec-
cionamos una proteína de choque térmico
de 90 kDa (Hsp90), que está relacionada con
el correcto plegamiento durante la síntesis
de determinadas proteínas, así como con el
replegamiento de proteínas desnaturaliza-
das o parcialmente desnaturalizadas. Ade-
más, varios estudios demostraron que las
178
SESIÓN 7
Hsp90 fusionadas con péptidos o proteínas características climáticas inusuales, a la con-

antigénicas aumentan su respuesta inmu- taminación ambiental o a una combinación
nitaria humoral y celular demostrando su de estos factores. Es por esto que la cría de
actividad como adyuvantes. Demostramos peces es el rubro de producción animal con
que las Hsp90 de origen vegetal son una al- mayor crecimiento en el mundo, que supera
ternativa innovadora como sustituto de los incluso al ritmo de los sectores bovino, por-
adyuvantes a base de toxinas, no solo por cino y avícola. A escala global, el consumo
sus propiedades inmunomoduladoras sino mundial de peces provenientes de la acui-
también porque son excelentes carriers de cultura es de un 48 % y se espera que, en los
proteínas antigénicas y péptidos expresados próximos 15 años, alcance el 75 %. En este
en plantas. Por ello, estamos desarrollando contexto, el cultivo y la propagación de es-
una plataforma basada en el uso de plantas pecies de peces autóctonos pueden ser vis-
de tabaco y lechuga para producir antígenos tos como una actividad productiva con gran
de vacuna fusionados a las Hsp90 de plantas potencial económico que además se en-
como estrategia para mejorar la expresión marca en la búsqueda de la diversificación
de la proteína de interés. de la producción con posible impacto en la
economía de los productores agropecuarios

pequeños y medianos.
Palabras claves: PLANTAS, BIOFÁBRICAS, VA-
CUNAS VERDES, HSP90, UNA SALUD. Dentro de las alternativas para llevar a
que una especie presente las características
suficientes para ser atractiva para el cultivo
con fines comerciales podríamos mencionar
la selección artificial, que demanda enormes
inversiones de tiempo, de entre 30 a 50 años.
Una segunda alternativa es la generación de
Edición génica para animales transgénicos, por ejemplo por el
el mejoramiento de la agregado de un transgen para la hormona
de crecimiento (GH), principal promotor del
producción en acuicultura crecimiento somático. Sin embargo esta al-
ternativa presenta una enorme resistencia
FERNANDINO, Juan I. a, BOAN, Agustín F. a por parte de los consumidores. Una opción
a) Laboratorio de Biología del Desarrollo. Institu- más novedosa es la edición específica de ge-
to Tecnológico de Chascomús. CONICET-UNSAM nes con el método de CRISPR/Cas9, que re-
[email protected] gulen algunos procesos clave en acuicultura,
como la reproducción (generación de esté-
riles), la respuesta inmune (subrogación de
Los peces representan una fuente de pro-
oocitos) o el crecimiento muscular. Además,
teína de alta calidad muy importante para la
la tecnología de edición génica puede pro-
mayoría de personas, aunque aún son reco-
mover los cambios evolutivos en productos
gidos principalmente en la naturaleza, con
acuícolas en un período breve, de 2 a 5 años,
graves consecuencias para el ambiente. A su
y sin entrar dentro de la regulación de OGM.
vez, en los últimos años se ha observado que
las poblaciones de peces de potencial im-
portancia comercial han ido disminuyendo. Palabras Claves: PISCICULTURA, CRISPR/CAS9,
Esta situación se debe fundamentalmente a HORMONA DE CRECIMIENTO, REPRODUCCIÓN
un incremento en la presión de captura, a
179
SESIÓN 7
1BAV B. altitudinis T5S-T4 y 19RS3. Por tratamien-

to se utilizaron 50 plantines orgánicos de I.
Efecto de Bacillus paraguariensis St. Hil. donados por la Fun-
altitudinis en el dación Alberto Roth (Santo Pipó-Misiones).
crecimiento de plantines Se ensayaron tres tratamientos que consis-
tieron en B. altitudinis T5S-T4, B. altitudinis
de Ilex paraguariensis 19RS3, B. altitudinis T5S-T4 + B. altitudinis
19RS3 (en partes iguales) y un control nega-
CORTESE Iliana J.a,c; SVIERCZ OLIVETTI Oriel A.a; tivo (sin inoculación). Los inoculantes bacte-
ONETTO Andrea L.a,c; BICH Gustavo Á.a,c; CAS- rianos se prepararon a partir de cultivos de
TRILLO María L.a,c; ZAPATA Pedro D.a,c; LACZESKI
Margarita E.a,b,c 24 h en medio sólido. El inóculo primario se
realizó en tubos Falcon con 30 ml de caldo
nutritivo y se incubó a 28 °C por 24 h. A par-
de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales. Insti-
tuto de Biotecnología Misiones “Dra.María Ebe
tir de este inóculo se realizó una suspensión
Reca” (InBioMis). Laboratorio de Biotecnología en agua corriente hasta llegar a la concen-
Molecular. Posadas, Misiones, Argentina. tración de 1,5x108 UFC/ml correspondiente

b) Universidad Nacional de Misiones. Facultad a la escala 0,5 de McFarland. Se inoculó cada
de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales. Cate- plantín por la técnica de riego directo, con 5
dra de Bacteriología. Posadas, Misiones, Argen- ml de la suspensión bacteriana y se realiza-
tina. ron 3 inoculaciones cada 15 días. Durante un
c) CONICET. Posadas, Misiones, Argentina.
[email protected] periodo de 6 meses (Septiembre 2019 - Mar-
zo 2020) se realizó la medición de los pará-
metros altura, número de hojas y diámetro
La yerba mate (Ilex paraguariensis St. del cuello de cada plantín, cada 15 días. Se
Hil.), es un árbol de la familia Aquifoliaceae analizaron estadísticamente las mediciones
que se distribuye en el noreste de Argenti- obtenidas mediante un análisis de varianza
na, Paraguay y el sur de Brasil, regiones don- (ANOVA) para cada uno de los parámetros
de su cultivo se realiza con fines económi- y tratamientos aplicados utilizando el pro-
cos. Las principales causas de disminución grama STATGRAPHICS Centurion XV.II con
en la productividad de los cultivos son la un nivel de significancia 95 %. Además, se
edad de las plantas y el agotamiento de los realizó un análisis de componentes principa-
nutrientes del suelo debido a prácticas de les (ACP), utilizando el programa InfoStat. El
manejo de cultivos inadecuados. El uso de ANOVA mostró diferencia significativa entre
microorganismos nativos que promueven el el tratamiento inoculado con B. altitudinis
crecimiento vegetal es una alternativa pro- T5S-T4 y los demás tratamientos para cada
metedora para mejorar su productividad y, parámetro evaluado (p˂0,05). En el ACP, las
paralelamente, la calidad del suelo. En el componentes principales CP1 y CP2, expli-
presente estudio se trabajó con dos cepas caron un 99% de la variabilidad total de los
nativas de Bacillus altitudinis aisladas de datos. Se observó una correlación positiva
plantines de I. paraguariensis, codificadas entre todos los parámetros de crecimiento
como T5S-T4 y 19RS3, seleccionadas por su y el tratamiento con B. altitudinis T5S-T4. El
capacidad de promoción del crecimiento ve- efecto de promoción del crecimiento vegetal
getal (PGP) demostrada in vitro y en vivero. fue comprobado en plantines de I. paragua-
El objetivo fue monitorear el efecto de pro- riensis inoculados con B. altitudinis T5S-T4.
moción del crecimiento vegetal en plantines La aplicación de bacterias PGP nativas, como
de I. paraguariensis St. Hil. inoculados con B. altitudinis T5S-T4, es una práctica prome-
180
SESIÓN 7
tedora que promueve el aumento de la pro- terilizada; el cultivo se realizó en fotobiorre-

ducción de los cultivos de I. paraguariensis y actores planos expuestos a las condiciones
la disminución del deterioro del suelo. atmosféricas de Quito. Se midió crecimiento
celular mediante conteo celular en cámara
de Neubauer bajo el microscopio, se deter-
Palabras claves: INOCULANTES AGRÍCOLAS;
PGPB; YERBA MATE. minaron las variaciones en nitrógeno total,
fósforo y carbono totales como parámetros
fisicoquímicos del cultivo y finalmente se
obtuvo la biomasa para la determinación
de lípidos y su caracterización en forma de
AGL y FAMEs. Se encontró un crecimiento
2BAV de biomasa de Chlorella vulgaris de 0,2 g/L,
Obtención de lípidos de también se observó que esta especie puede
emplearse potencialmente en procesos de
microalgas cultivadas en biorremediación debido a los porcentajes de
agua residual de origen remoción de nutrientes alcanzados: 87,89%
de nitrógeno total, 61,92% de fósforo total y

porcino 77,08% de carbono total; de acuerdo con la
normativa ambiental nacional ecuatoriana;
HERRERA, Kevin F., MEDRANO, Johanna L., sin embargo, será necesario la determina-
RAMÍREZ, José R. ción de más parámetros fisicoquímicos se-
Universidad Internacional SEK, Facultad de Inge-
gún lo exige dicha normativa. La extracción
nierías y Ciencias Aplicadas. Quito, Ecuador.
[email protected] de lípidos se realizó con seis solventes ex-
tractores seleccionados a partir de la biblio-
grafía consultada, a saber: hexano, etanol,
Las microalgas son microorganismos fo- metanol, metilciclohexano, acetato de etilo
tosintéticos con altos contenidos de lípidos y cloroformo:metanol (1:2). De los diversos
empleados desde hace algunos años en la solventes extractores de lípidos probados
obtención de lípidos con fines de obtención solo metilciclohexano, cloroformo: metanol
de biocombustibles como el biodiesel; sin (1:2) y acetato de etilo presentaron buenos
embargo, los costes asociados al uso de agua rendimientos de lípidos y AGL. Los porcen-
en cultivos a gran escala son elevados, por tajes de FAMEs a partir de AGL estuvieron
lo que algunos investigadores han recurrido en el rango de 51% a 80,5% en peso. Aun-
al uso de aguas menos costosas, tales como que los valores de lípidos, AGL y FAMEs se
las aguas residuales de orígenes diversos. encuentran por debajo del rango reportado
Las microalgas también son capaces de de- por otros autores, no se descarta el uso de
gradar nutrientes por lo que se han emplea- este medio cultivo en particular para la ob-
do como tratamiento en biorremediación tención de lípidos con miras a la producción
de aguas residuales. En esta investigación de biocombustibles a partir de esta especie
se cultivó biomasa microalgal de Chlorella de microalga.
vulgaris en agua residual de faenamiento
porcino con el propósito de extraer lípidos
totales, AGL y FAMEs para determinar su
posible uso en la producción de biocombus- Palabras claves: CULTIVO; CHLORELLA VULGA-
tibles. El agua residual fue previamente es- RIS; AGUA RESIDUAL; FAENAMIENTO PORCINO;
LÍPIDOS.
181
SESIÓN 7
3BAV plasto) en diatomeas colectadas en diferen-

tes ecosistemas del Ecuador. Se aislaron e
Taxonomia molecular identificaron por microscopia óptica un total
de diatomeas del de 3 especies de diatomeas: Nitzschia linea-
ecuadormediante códigos ris W.Smith y Mayamaea permitis (Hustedt)
K.Bruder & Medlin provenientes del río Ru-
de barras de ADN mipamba ubicado en Quito, y Nitzschia per-
minuta Grunow de los lagos del glaciar de
PORTILLA, Danielaa; MOYÓN, Jenniferb; Antisana. La identificación molecular se llevó
CHAMORRO, Susanaa; NAVARRO, Juan Carlosc; a cabo por medio de PCR. Los amplicones de
RAMÍREZ-IGLESIAS, José R.c
las regiones evaluadas fueron secuenciadas
a) Universidad Internacional SEK. Facultad de
Ingenierías y Ciencias Aplicadas. Quito, Ecuador. por Sanger. Secuencias de referencia de es-
b) Universidad Estatal Amazónica. Departamen- pecies y géneros relacionados obtenidas de
to de Ciencias de la Vida. Sucumbíos, Ecuador. NCBI-GenBank y las secuencias propias fue-
c) Grupo de enfermedades desatendidas, emer- ron alineadas mediante ClustalW con pará-
gentes, epidemiología y biodiversidad. Facultad metros altos de homología. Posteriormente
de Ciencias de la Salud. Universidad Internacio-

se realizaron análisis filogenéticos mediante
nal SEK,
[email protected]
algoritmos de Parsimonia Máxima y Máxima
Verosimilitud para identificar las especies
concordantes con clados monofiléticos. Las
Las diatomeas son empleadas como regiones 18S e ITS se amplificaron para to-
microrganismos bioindicadores debido a das las especies, aplicando gradientes de
su amplia diversidad de especies y a su temperatura en el caso de ITS. La amplifi-
respuesta rápida a variaciones en un eco- cación de la región rbcL fue inconsistente o
sistema. La identificación de especies de nula con los primers usados en este estudio.
diatomeas se ha basado en caracteres mor- Al realizar los árboles filogenéticos, se obtu-
fológicos como por ejemplo, la caracteriza- vo una mayor divergencia y estructura con
ción de las frústulas. Sin embargo, pueden ITS y menor con 18s y rbcL, siendo en todos
ocurrir variaciones fenotípicas muy peque- los casos suficiente para lograr una identifi-
ñas en dichas estructuras, que dificulta la cación de diatomeas a nivel de especie. No
adecuada identificación de especies crípti- obstante, debido a la limitada información
cas, lo cual complica el proceso de biomoni- de secuencias de nucleótidos de especies de
toreo. En la búsqueda de resolver los límites diatomeas en la región ITS, no fue posible
intra e interespecíficos de esta variabilidad la identificación de las especies aisladas en
morfológica, se han implementado métodos el presente estudio utilizando el código de
de identificación molecular, mediante el uso barras perteneciente a esta región. Los re-
de códigos de barras de ADN. Por lo tanto, sultados de la identificación molecular de N.
es necesario comparar diferentes regiones linearis y N. perminuta tuvieron concordan-
del ADN para establecer una correlación fe- cia con la identificación morfológica; sin em-
notipo-genotipo y evaluar su capacidad de bargo, en el caso de M. permitis no se logró
identificación de especies a nivel molecular una identificación morfológica clara por lo
y su implementación en procesos de biomo- que hubo que recurrir a la identificación mo-
nitoreo. Por ello, el objetivo de este estudio lecular. Nuestros resultados muestran regio-
fue evaluar códigos de barras de ADN de las nes genómicas confiables para la taxonomía
regiones 18S e ITS (ribosomal) y rbcL (cloro- molecular de estas especies y óptimas para
llevar a cabo un biomonitoreo en cuerpos de
182
SESIÓN 7
agua ecuatorianos, que a su vez puedan en tratable con antídotos adecuados. Para su
un futuro masificarse y automatizarse em- producción se requiere la captura de las ara-
pleando tecnologías de secuenciación de ñas y la extracción del veneno por electroes-
nueva generación (NGS). timulación, método engorroso, peligroso y
de bajo rendimiento. Son necesarios, por
lo tanto, nuevos enfoques para una produc-
Palabras claves: DIATOMEAS; BIOINDICADORES; ción más eficiente que satisfaga la demanda
BIODIVERSIDAD; CÓDIGOS DE BARRAS; IDENTI-
FICACIÓN MOLECULAR; HERRAMIENTAS FILO- a nivel nacional y regional. La neurotoxina
GENÉTICAS. Tx2-6 (δ-ctenitoxina-Pn2a) es la principal
causante de los síntomas de envenenamien-
to por Phoneutria nigriventer en huma-
nos (Foneutrismo o Ctenismo). Tx2-6 es un
péptido cíclico altamente estable frente a
proteasas debido a sus numerosos puen-
4BAV
tes disulfuro, los cuales forman estructuras
Identificación y síntesis similares a nudos (nudos de Cys). Debido a
de epitopes de toxina del su alta estabilidad, se dificulta su digestión

en las células presentadoras de antígenos,
veneno de Phoneutria la cual es necesaria para desencadenar la
nigriventer para su respuesta inmune adaptativa, por lo que es
poco inmunogénico.
aplicación como
En el presente trabajo, se identificaron los
inmunógenos epitopes de la neurotoxina Tx2-6 y se dise-
ñaron y sintetizaron derivados de los mismo
IGLESIAS-GARCÍA Lucía C.a,b; BARREDO VACCHELLI para su utilización como inmunógenos en la
Gabriela R.a,b; ACOSTA, Gerardoc,d; MINOIA, producción de antiveneno para picadura por
Juan M.a,b; ALBERICIO, Fernandoc,d; CAMPERI,
Silvia A.a,b Phoneutria.
a) Universidad de Buenos Aires, Facultad de Far-Para identificar los epitopes en la toxina se
utilizó la herramienta “MHC-II Binding Predic-
macia y Bioquímica, Cátedra de Biotecnología,
Buenos Aires, Argentina tions” del programa “Immune Epitope Data-
b) CONICET-Universidad de Buenos Aires, Insti-
base Analysis Resource”. La zona más inmuno-
tuto de Nanobiotecnología (NANOBIOTEC), Bue-génica se sintetizó en fase sólida empleando
nos Aires, Argentina
la química Fmoc/tBu sobre la resina Rink-Ami-
c) CIBER-BBN, Networking Centre on Bioengi-
neering, Biomaterials and Nanomedicine, and
de-MBHA con aminoácidos protegidos. Una
vez elongado cada péptido, se escindió de la
Department of Organic Chemistry, University of
Barcelona, Barcelona, Spain. resina y desprotegieron las cadenas laterales
por acidólisis con ácido trifluoroacético (TFA).
d) Institute of Advanced Chemistry of Catalonia
(IQAC-CSIC), Spanish National Research Coun-Además, se diseñaron y sintetizaron pépti-
cil (CSIC), Jordi Girona 18-26, 08034 Barcelona,
dos ramificados o MAPs “Multiple antigenic
Spain. peptides” y lipopéptidos, incorporando ácido
[email protected]
palmítico en el N-terminal. Los péptidos se ca-
racterizaron por RP-HPLC con columna de C-18
Los envenenamientos provocados por la Utilizando como eluyentes Agua/acetonitrilo
araña Phoneutria nigriventer (araña del ba- con 0,045% y 0,036% respectivamente de TFA.
nano) constituyen una emergencia médica y por MALDI-TOF MS.
183
SESIÓN 7
Tanto los péptidos lineales con y sin áci- esto, existen varios estudios orientados a de-
do palmítico como los péptidos ramificados sarrollar fuentes de energía alternativas y de
fueron obtenidos con alta pureza. El lipo- menor impacto ambiental, tal como el bio-
péptido ramificado se obtuvo con baja pu- diesel obtenido a partir de biomasa de mi-
reza por lo que se deberá optimizar su sín- croalgas. La capacidad productora de lípidos
tesis. Todos estos péptidos serán evaluados de las microalgas hace que estos microor-
como inmunógenos para reemplazar o com- ganismos despierten un gran interés como
plementar el uso de venenos crudos para la materia prima para la producción de energía
producción de antiveneno para picadura por limpia. En Ecuador son muy pocos los estu-
Phoneutria. dios que evalúan el potencial biotecnológico
de microalgas autóctonas para la generación
de biocombustibles líquidos como el biodie-
Palabras claves: PHONEUTRIA NIGRIVENTER;
ANTIVENENO; ARAÑA; SÍNTESIS EN FASE SÓLI- sel. Por ello, el objetivo de este estudio fue
DA; ENVENENAMIENTO. evaluar la generación de biomasa y determi-
nar el contenido de lípidos totales de Des-
modesmus communis, una microalga aislada

de la laguna de la Reserva Biológica Limon-
cocha (RBL), Ecuador, e identificada morfo-
5BAV lógica y molecularmente mediante el uso de
Aislamiento, códigos de barras, con el fin de evaluar si esta
especie de microalga autóctona posee un
identificación y evaluación contenido de lípidos apto para la potencial
del contenido de lípidos de de generación de biodiesel. Se realizó una
identificación morfológica mediante compa-
Desmodesmus communis raciones bibliográficas y una identificación
molecular por PCR, utilizando códigos de ba-
ENCALADA-ROSALES, Paulaa; MEDRANO-BARBO- rras moleculares y la construcción de árbo-
ZA, Johanna L.a; RAMÍREZ-IGLESIAS, José R.b;
les filogenéticos basados en las regiones ITS
AGUIRRE, Albertoa; NAVARRO, Juan Carlosb;
MOYÓN, Jenniferc y 18S. El crecimiento se evaluó en un culti-
vo por lotes de diez días, utilizando medio
a) Universidad Internacional SEK. Facultad de
Ingenierías y Ciencias Aplicadas. Quito, Ecuador. BG11, en el que diariamente se determinó
b) Grupo de enfermedades desatendidas, emer- la remoción de nutrientes. Posteriormente,
gentes, epidemiología y biodiversidad. Facultad se evaluó el porcentaje de lípidos totales y
de Ciencias de la Salud. Universidad Internacio- ácidos grasos libres (AGL) con los solventes
nal SEK cloroformo:metanol (1:2) y acetato de etilo.
c) Universidad Estatal Amazónica. Departamen- La remoción de DQO, nitratos (NO3-) y fosfa-
to de Ciencias de la Vida. Sucumbíos, Ecuador.
tos (PO43-) fue de 75,43%, 60,84% y 13,88%,
[email protected]
respectivamente. La biomasa generada por
la microalga fue de 2,4±0,12 g/L, mientras
que los mejores porcentajes de extracción
La generación de energía en el mundo de-
fueron 19,70% de lípidos y 63,46% de AGL,
pende principalmente de los combustibles
ambos en base seca y con el solvente cloro-
fósiles, cuya implementación deriva en las
formo:metanol (1:2). Los resultados sugie-
emisiones de gases de efecto invernadero
ren una mejor extracción de lípidos de esta
como el CO2 contribuyendo a la contamina-
microalga con cloroformo:metanol (1:2) en
ción y al calentamiento global. Con base en
comparación con el solvente acetato de eti-
184
SESIÓN 7
lo. Aun cuando los resultados de lípidos y desarrollo de biocombustibles a partir de

AGL no alcanzan los límites requeridos (ma- biomasa de tercera generación, como las
yor a 20% y 70%, respectivamente), la pro- microalgas. Se sabe que los géneros de mi-
ductividad de biomasa y de lípidos es com- croalgas con mayor producción de lípidos
parable con especies que sí se usan para la para la elaboración de biocombustibles son
producción de biodiesel, según la revisión Chlorella sp.yScenedesmus sp, pero pocos
bibliográfica realizada. Considerando que estudios han usado especies del género Des-
esta investigación no toma en cuenta facto- modesmus sp. Por lo tanto, el uso de micro-
res como un pretratamiento de la biomasa y algas autóctonas se considera una alterna-
condiciones ambientales controladas de las tiva para la producción de biocombustibles
microalgas, se hace necesaria la implemen- líquidos como el biodiésel. En este estudio
tación de diseños experimentales adiciona- identificó molecularmente la microalga Des-
les para confirmar su potencial generador modesmus armatus, aislada de una muestra
de biocombustibles líquidos. de agua de la laguna de Limoncocha, Ecua-
dor y se determinó el contenido de lípidos
de dicha especie para evaluar su potencial
Palabras claves: DESMODESMUS; MICROAL-
GAS; LÍPIDOS; BIODIÉSEL; ENERGÍA. uso en la generación de biodiésel. Se iden-

tificó morfológicamente la microalga me-
diante microscopía óptica y la identificación
molecular se llevó a cabo mediante PCR (re-
6BAV acción en cadena de la polimerasa) para ob-
Identificación morfológica tener amplicones de las regiones ITS y 18S,
junto con su correspondiente análisis filoge-
y molecular de microalgas nético. Se realizó un cultivo por triplicado de
y evaluación del contenido diez días en fotobiorreactores por lotes de
1L con medio BG11 y se determinó la remo-
de lípidos ción de nutrientes (nitratos NO3–, fosfatos
PO43– y demanda química de oxígeno DQO)
GONZÁLEZ-LOYO, Juan F. a, MEDRANO-BARBO- diariamente como parte del crecimiento de
ZA, Johanna La, NAVARRO, Juan Cc; MOYÓN, la microalga. Se evaluó el contenido de lípi-
Jenniferb, RAMÍREZ-IGLESIAS, José R.c
dos a partir de biomasa húmeda y seca; y
a) Universidad Internacional SEK. Facultad de ácidos grasos libres (AGL) con biomasa seca,
Ingenierías y Ciencias Aplicadas. Quito, Ecuador.
usando los solventes orgánicos cloroformo:-
b) Universidad Estatal Amazónica. Departamen-
to de Ciencias de la Vida. Sucumbíos, Ecuador.
metanol (1:2) y acetato de etilo, grado HPLC.
c) Grupo de enfermedades desatendidas, emer- Se obtuvo como resultado 2,5 g/L de bioma-
gentes, epidemiología y biodiversidad. Facultad sa microalgal con una remoción de nutrien-
de Ciencias de la Salud. Universidad Internacio- tes de 81,13%, en el 45,95% y 17,35% para
nal SEK. DQO, nitrato y fosforo, respectivamente. En
[email protected] el contenido de lípidos se obtuvo mejores
resultados con la mezcla de solventes cloro-
formo:metanol (1:2), cuyos porcentajes de
El uso constante de los combustibles fó-
a partir de biomasa seca fueron de 21,50%,
siles y el impacto ambiental que estos pro-
respectivamente; mientras que el rendi-
ducen ha despertado el interés en nuevas
miento en peso para AGL resultó de 52,80%.
fuentes de energía renovables. Existe ac-
Estos resultados preliminares indican pará-
tualmente una fuerte tendencia hacia el
metros de rendimiento relativamente ba-
185
SESIÓN 7
jos comparados con especies normalmente En Argentina, el HLB fue detectado por
usadas para generar biodiésel. Sin embargo, primera vez en el año 2012 en la Provincia
es necesario realizar más estudio para esti- de Misiones y donde además se encuentra
mular el aumento de lípidos para mejorar su presente el insecto vector. Hasta el mo-
aplicabilidad biotecnológica. mento la enfermedad no tiene cura, por
lo que las plantas afectadas deben erradi-
carse y destruirse. Entre las medidas ac-
Palabras claves: DESMODESMUS ARMATUS; tualmente utilizadas, se destaca el control
BIOMASA; LÍPIDOS; ÁCIDOS GRASOS LIBRES
(AGL); BIODIÉSEL. químico del vectormediante aplicaciones
de insecticidas. A efectos de aportar bases
que podrían orientar en el futuro el de-
sarrollo de nuevas estrategias de control
se analizó el gen 3-hidroxi-3-metilglutaril
CoA sintasa (HMG-CoAS). Este gen, co-
7BAV difica para una enzima involucrada en la
HLB: análisis del regulación de síntesis de precursores iso-

prenoides, entre ellos, la Hormona Juvenil
Gen3-hidroxi-3-metilglutaril (JH) clave en el desarrollo y reproducción
CoA sintasa en en insectos. Con este propósito, se extra-
jo ARN total de hembras y machos adultos
Diaphorina citri de D. citri, se procedió a su cuantificación
y posterior síntesis de ADNc. Se diseñaron
MACSEMCHUK, Nazarena A.; FIORAVANTE, cebadores específicos. Posteriores ampli-
Cynthia A.; LITWIÑIUK, Sergio L.; MIRETTI Mar-
cos M.; BLARIZA, María J. ficaciones y secuenciación de fragmentos
de ADNc del gen permitieron amplificar
Universidad Nacional de Misiones (UNaM) – CO-
tanto en hembras como en machos adul-
NICET, Facultad de Ciencias Exactas Químicas y
Naturales, Instituto de Biología Subtropical, La- tos un fragmento de 508 pares de bases
boratorio GIGA. Misiones, Argentina. (pb) con un marco abierto de lectura (ORF)
[email protected] de 186 nucleótidos que codifican para 62
aminoácidos. Utilizando información dis-
ponible en el National Center for Biote-
La enfermedad de Huanglongbing (HLB) chnology Information (NCBI) se realizaron
es causada por la bacteria Candidatus libe- alineamientos múltiples de las secuencias
ribacter ssp., agente transmitido por el psíli- nucleotídicas de D. citri con otras especies
do Diaphorina citri (Hemíptera: Psyllidae) en de insectos, donde se evidenciaron regio-
América. D. citri es considerada como la planes conservadas. Por otra parte, el análisis
ga más destructiva y consecuentemente la comparativo de las secuencias de aminoá-
más importante de todas las plagas de cítri- cidos deducidos a partir de las secuencias
cos. Posee hábito fitófago y la gama de hués- nucleotídicas de ADNc de D. citri revelóun
pedes está restringida a cítricos y especies porcentaje de aminoácidos idénticos del
de Rutáceas. La transmisión de la enferme- 57% con Aedes aegypti, 59% con Blatella
dad se lleva a cabo cuando el psílido se ali- germanica y un 53% con Ips pini. También
menta de la savia de las plantas hospederas se logró identificar 6 residuos de Serina,
y es en ese momento cuando estos insectos 2 residuos de Treonina y 2 residuos de Ti-
adquieren el patógeno, si al alimentarse lo rosina que representan potenciales sitios
hacen de plantas infectadas. de fosforilación. La relación evolutiva en-
186
SESIÓN 7
tre taxones señaló que D. citri y B. germa- presentan riesgos para el medio ambien-
nica derivan de un antecesor común, en te por la formación de residuos tóxicos,
cambio A. aegypti e I. pini derivan de otro además del uso de solventes y agentes es-
antecesor. D. citri y B. germanica han di- tabilizantes nocivos. Con el propósito de
vergido antes en el pasado evolutivo que beneficiar a los seres humanos, disminuir
A. aegypti e I. pini. Este estudio pretende los impactos generados al ecosistema y a
hallar genes blanco prometedores y efi- la necesidad de reducción de efectos cola-
caces para futuras estrategias de control terales y surgimiento de microorganismos
que permitan reducir eficientemente el resistentes, los métodos de síntesis verde
impacto que la enfermedad produce en la de nanopartículas asociadas a extracto de
región. plantas, se presentan como una alterna-
tiva sostenible en la búsqueda de nuevos
compuestos bioactivos.Nanopartículas
Palabras claves: HLB; DIAPHORINA CITRI;
HMGCoAS. metálicas como las de plata (AgNP) han
presentado diversas actividades biológi-
cas, tales como el potencial como agente
antimicrobiano y su síntesis utilizando ex-

8BAV tractos vegetales pueden incrementar ese
potencial bactericida.El presente estudio
Síntesis de nanopartículas tuvo como objetivo sintetizar la AgNP uti-
de plata de extracto foliar lizando extracto etanólico de Podocarpus
lambertii Klotzch ex Endl. (Pino Bravo) y
de Podocarpus Lambertii evaluar su actividad antimicrobiana fren-
Klotzch ex Endl te a las bacterias Escherichia coli (ATCC
25922) y Staphylococcus aureus (ATCC
BANDEIRA, Debora M.a ; CORRÊA, Juliana M.a 25923) y la levadura Candida albicans
; LASKOSKI, Larissa V.a ;BATISTA, Joelma M.a ; (ATCC 10231). Para obtener el extracto, el
EISING, Renatob; ROSSET, Jéssica.a ; CANTON material foliar seco se añadió en una pro-
Andressa G.a ; PINTO, Fabiana G. S.a ;
porción de 1:10 (p/v) en etanol (P.A), se
a) Laboratorio de Microbiología y Biotecno- mantuvo en un agitador rotatorio durante
logía. Programa de Maestría Conservación y 24 horas y se sometió a rotoevaporación
Manejo de Recursos Naturales - PPRN. Univer-
para eliminar el disolvente. Los extrac-
sidad Estatal del Oeste de Paraná - UNIOESTE/
Campus de Cascavel/PR. tos convencionales y nanoparticulados
b) Universidad Tecnológica Federal de Paraná, (AgNP) se analizaron en concentraciones
Toledo, Brasil. que variaron de 200mg.mL a 0,09 mg.mL y
[email protected] 1,25 µg.mL a 0,009 µg.mL, respectivamen-
te. Para la síntesis de AgNP se preparó una
solución de NaOH 0,001 mol/L-1, añadida
La síntesis verde de nanopartículas en solución de extracto de P. lambertii
(nps) presenta un costo bajo, biocompati- en el rango de concentración de 0,1 a 10
bilidad, ausencia/baja toxicidad y un me- mg.mL-1 y solución de AgNO3 entre 1,0 y
nor impacto al medio ambiente, haciendo 5,0 x 10 -3 mol.L-1 como precursor de los
así que su popularidad aumente y se des- iones de plata y manteniendo la solución
taque en los sectores industrial, comer- resultante bajo calentamiento constante.
cial, farmacéutico y medicinal. Algunos Posteriormente, se realizó la prueba de
métodos de producción de nanopartículas microdilución en caldo para determinar
187
SESIÓN 7
la concentración inhibitoria mínima (CIM) 9BAV

y la concentración bactericida y fungici-
da mínima (CBM/CFM) para los extractos
Dinámica poblacional de
convencional y nanoparticulado (AgNP). Sinorhizobium meliloti en
El extracto convencional presentó activi- semillas pildoradas de
dad bacteriostática y bactericida (CIM/
CBM) sobre todas las cepas analizadas, alfalfa (Medicago sativa L.)
en las concentraciones que varían de 50
a 0,78 mg.ml. Ya el extracto AgNP presen- BRIGNOLE, Tomás A.a,b, ROSSI, Alejandro O.c,
tó actividad bacteriostática y bactericida ANDRIOLO, Luisinac, CACCIATORE, Luis C.a,b
para E. coli y S. aureus (CIM/CBM de 1,25 a) Facultad de Agronomía y Ciencias Agroali-
a 0,625 µg.mL), y actividad bacteriostáti- mentarias. Universidad de Morón.
ca sobre la levadura Candida albicans. El b) Laboratorio de análisis de semillas Aletheias
extracto AgNP presentó mayor inhibición Bioseedlab. (LAS 10207/I RNCyFS INASE).
c) Laboratorio de Control de Calidad de Biotec-
cuando comparado al convencional, sien-
nológicos. RIZOBACTER.
do más eficiente en concentraciones más [email protected]

bajas para los microorganismos probados.
La síntesis AgNP presentó cambio en la co-
loración del medio reaccionario (de inco- La alfalfa (Medicago sativa L.) es la principal
loro a amarillo), un indicativo que ocurrióespecie forrajera del país. Su capacidad para la
la reducción de los iones Ag+ y la forma- fijación de nitrógeno atmosférico a través de
ción de las AgNPs y confirmada por análi- la simbiosis con Sinorhizobium meliloti la con-
sis de espectrofotometría de UV-vis, en lasvierte en un importante componente de la sus-
que todas las síntesis presentaron bandas tentabilidad de los sistemas productivos. Se ha
cercanas a 400 nm. En este ensayo inicial, postulado una carga mínima de 1x103 rizobios/
los resultados fueron prometedores en semilla para una correcta nodulación. Uno de
cuanto a la utilización de las nanopartícu-los principales problemas después de la ino-
las de plata obtenidas por síntesis verde, culación es la rápida muerte bacteriana. Los
usando hojas de P. lambertii con poten- objetivos del presente trabajo fueron: a. Estu-
cial uso para control de microorganismos diar la pérdida de viabilidad de Sinorhizobium
patógenos, aunque deben realizarse más meliloti en semillas de alfalfa pildoradas en
pruebas para verificar la estabilidad de las
función del tiempo de almacenamiento, a dos
nanopartículas. temperaturas diferentes, mediante el método
de recuento en placa; b) Evaluar el efecto de
osmoprotectores sobre la viabilidad de los
rizobios. Se partió de lotes de semillas pildo-
radas inoculadas por el fabricante y un lote
Palabras claves: ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA; de semillas pildoradas que se inoculó en el
EXTRACTO VEGETAL; NANOPARTÍCULA DE PLATA. laboratorio. El recuento de rizobios viables
se realizó mediante extracción del inoculan-
te adsorbido por suspensión de 10 gramos
de semillas en 90 ml de solución fisiológica
estéril adicionada de Tween 80. Se sembra-
ron por triplicado 100 μl de las diluciones
10-2, 10-3 y 10-4 en medio ALM rojo congo
adicionado de vancomicina 0,67 μM. El cul-
188
SESIÓN 7
tivo de las placas se efectuó durante 7 días a 10BAV

30 °C. Se contaron las placas que contenían
entre 30 y 300 colonias. El peso de 1000 se-
Hacia un ideotipo de trigo
millas pildoradas se hizo por recuento por doble propósito para
repeticiones según ISTA. La carga inicial de alimento y biogás
rizobios, a temperatura de (22 ± 2) °C, fue de
(6,8x105 ± 6,4x103) UFC/g al momento de re-
GABBANELLI, Nadiaab; ERBETTA, Elisaab; SANZ
cepción del lote (tiempo cero). Se repitió el SMACHETTIa, María E; LORENZO, Maximoa;
recuento a los 7,14, 21 y 28 días. La pérdida ECHARTE, Mercedesab
de viabilidad de los rizobios se ajustó a una a) Instituto de Innovación para la Producción
ecuación de decaimiento exponencial de Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible (Estación
primer orden: UFC/g = 6,72x105 x e (-t(días)/5,37) Experimental Agropecuaria Balcarce, Instituto
+ 5,78x103, R2 = 0,99851. El tiempo de vida Nacional de Tecnología Agropecuaria – Consejo
media fue de 3,8 días. A la temperatura de Nacional de Investigaciones Científicas y Técni-
conservación de (7 ± 1) °C no se observó pér- cas), CC 276, 7620 Balcarce, Argentina.
dida de viabilidad significativa durante los b) Unidad Integrada Balcarce (Estación Experi-
mental Agropecuaria Balcarce, Instituto Nacio-
primeros 14 días; en cambio, se verificó una

nal de Tecnología Agropecuaria - Facultad de
disminución de la viabilidad de los rizobios Ciencias Agrarias, Universidad Nacional de Mar
del 36% a los 21 días. La inoculación en el del Plata); CC 276 (7620); Balcarce, Argentina
laboratorio de un lote de semillas pildoradas [email protected]
con o sin agregado de osmoprotector a los
10 min produjo en ambos casos un aporte
La paja de trigo (Triticum aestivum L.) es
similar de rizobios de 2,7x104 UFC/semilla. El
uno de los residuos agrícolas más abundan-
aporte teórico del inoculante fue de 3,8x104
UFC/semilla. El Factor de recuperación = tes en la tierra y puede ser utilizado para la
producción de bioenergía en forma sosteni-
(Recuento en semilla) x 100/Aporte teórico
ble. Entre las tecnologías de producción de
fue del 70,5%. A los 7 días y a temperatura
energía a partir de la biomasa, la producción
de conservación de (22 ± 2) °C la pérdida de
de biogás es considerada una de las más efi-
viabilidad de rizobios fue de un 15% con el
cientes ya que puede alcanzar una alta re-
agregado del osmoprotector y un 47% sin el
agregado del mismo al inoculante. Conclu-cuperación de energía y, al mismo tiempo,
generar beneficios económicos y ambienta-
siones: a. El método de recuento en placa es
les. Recientemente se introdujo un concep-
útil para evaluar la viabilidad de los rizobios
en formulaciones de inoculantes y semi- to innovador sobre el uso de cereales como
doble propósito para la alimentación y ge-
llas pildoradas de alfalfa; b. La disminución
de la temperatura de almacenamiento y el neración de biocombustibles 2G. Un geno-
agregado de osmoprotectores durante la tipo ideal (ideotipo) para estos propósitos
se caracterizaría por presentar 4 rasgos cla-
inoculación aseguran una carga de rizobios
ve: altos rendimientos de grano, alto rendi-
adecuada en cada semilla para una correcta
nodulación. miento de paja, buena resistencia al vuelco
y alta digestibilidad de la paja, entendida
en este caso como la conversión de paja
Palabras claves: SINORHIZOBIUM MELILOTI; en biogás. Con este propósito, se cultiva-
ALFALFA; SEMILLAS PILDORADAS; VIABILI-
DAD; NODULACIÓN. ron 36 genotipos de trigo utilizados actual-
mente en los programas de mejoramiento
en Argentina conteniendo germoplasma
189
SESIÓN 7
de tres orígenes diferentes (CIMMYT, Crio- Palabras claves: BIOCOMBUSTIBLES 2G; PAJA DE
llo y francés). Se determinó el rendimien- TRIGO; DIGESTIÓN ANAERÓBICA; CALIDAD DE
LA PAJA DE TRIGO.
to de grano y de paja y la susceptibilidad
al vuelo según Mirabella et al. (2019). La
conversión de la paja en biogás se midió
en términos de producción potencial de
biogás y de los parámetros cinéticos Bmax
(producción máxima de biogás específico) 11BAV
y k (constante cinética de primer orden).
Para ello, se realizaron experimentos de
Incrementando la
digestión anaeróbica en batch en botellas capacidad de síntesis de
de 120 cm3 a 37°C. Se realizó un análisis de proteínas heterólogas en
componentes principales de las variables
más relevantes (rendimiento de paja, hojas de Nicotiana
rendimiento de grano, susceptibilidad benthamiana mediante el
al vuelco, Bmax y k) y se determinaron
uso de LEC2

umbrales para cada una de ellas con el fin
de categorizar los genotipos e identificar
aquellos que se destacaron en dicha OCAMPO, Carolina Gabrielaa, b, PETRUCCELLI,
Silvana a, b
variable. Varios genotipos presentaron un
desempeño sobresaliente en algunos de a) Laboratorio de Biología Molecular. Centro de
los rasgos, pero ninguno de los genotipos Investigación y Desarrollo en Criotecnología de
exhibió valores por encima de un umbral Alimentos. Facultad de Ciencias Exactas. Univer-
sidad Nacional de La Plata
aceptable en todas las categorías
analizadas. En particular, dos genotipos de b) CONICET
origen francés (Baguette 31 y SNR Nogal) [email protected]
mostraron alto rendimiento de grano, alto
rendimiento de paja, baja susceptibilidad
al vuelco y Bmax y k con valores que van de Las plantas son el sistema más econó-
moderados a altos. Los genotipos Buck mico y seguro para la producción de pro-
Guapo y Buck Baqueano (origen Crio- teínas farmacéuticas e industriales. La pro-
llo) se destacaron por su rendimiento de ducción de proteínas recombinantes en la
grano, rendimiento de paja y Bmax y k. Sin vía secretoria de la mayoría de sistemas
embargo, su alta susceptibilidad al vuelco como células de mamíferos y levaduras
imposibilita su producción en suelos poco está limitada por la capacidad de plega-
profundos o sistemas de alta demanda de miento y transporte, utilizándose diversas
insumos. El mejoramiento de trigo para estrategias de ingeniería celular para in-
producir el ideotipo de doble propósito crementar la capacidad de sintetizar pro-
aparece como una estrategia atractiva teínas que requieren de un procesamiento
para perfeccionar el proceso de produc- típico de esta vía. En cambio, en células
ción de biocombustible 2G, ya que los es- vegetales este tipo de estrategias no han
fuerzos de mejoramiento en esta dirección sido exploradas. El objetivo de este traba-
podrían aumentar los recursos disponibles jo fue evaluar el impacto de un factor de
para la producción de biocombustible lig- transcripción vinculado a la síntesis de re-
nocelulósico sin comprometer la produc- servas en semillas, LEC2, en la producción
ción de alimentos existente. de proteínas foráneas en hojas. La hipóte-
190
SESIÓN 7
sis planteada es que la expresión ectópica proteolítico y que el uso de inhibidores

del mismo produciría cambios en el desa- de proteasas incrementa los rendimien-
rrollo de la vía secretoria que aumentarían tos de proteínas foráneas secretadas se
los niveles de acumulación de proteínas decidió evaluar la actividad proteolítica.
reporteras. Para evaluar esta hipótesis Empleando azocaseína como sustrato se
se emplearon genes reporteros dirigidos evaluó la actividad de extractos de hojas
por el promotor CaMV35S y el factor de de N. benthamiana infiltradas con un vec-
transcripción LEC2 como efector los cuales tor vacío o LEC2, siendo los valores obte-
fueron introducidos en hojas de Nicotia- nidos de un 50% y 25%, respectivamente,
na benthamiana mediante agroifiltración respecto a extractos sin infiltrar. En con-
y se compararon los resultados obtenidos clusión, demostramos que la expresión de
con y sin efector. Cabe aclarar que LEC2 no LEC2 incrementa significativamente entre
es capaz de unirse al promotor CaMV35S 3 – 6 veces los niveles de acumulación de
y los posibles efectos observados serían reporteros en la vía secretoria y disminuye
indirectos. Inicialmente se estudió el im- la actividad proteolítica, siendo una estra-
pacto de LEC2 en la localización de mar- tegia novedosa potencialmente aplicable
cadores fluorescentes de la vía secretoria: tanto en plataformas de producción de

GFP-HDEL (Retículo Endoplásmico, ER), ST- proteínas transitorios como estables.
GFP (Golgi), GFP-BP80 (compartimientos
prevacuolares, PVC) y RFP-AFVY (vacuola)
mediante microscopia confocal de barrido
laser (CLSM). No se observaron diferen-
cias en los patrones de fluorescencia de
ER-GFP y ST-GFP, en cambio GFP-BP80 y
RFP-AFVY son secretados en presencia de
LEC2, indicando una alteración post-Golgi Palabras claves: VÍA SECRETORIA; LEC2; INGE-
del funcionamiento de la vía secretoria. NIERÍA CELULAR; PLANTAS COMO BIOREAC-
Los niveles de acumulación se evaluaron TORES.
por inmunoblot, obervandosé incremen-
tos de 2,5‐3,5 veces en la acumulación de
proteínas retenidas en el ER y de 3‐6 veces
para proteínas vacuolares en presencia
del efector. La presencia fluorescencia co-
rrespondiente a GFP-BP80 en el apoplasto
llamó la atención debido a la inestabilidad
de GFP a pH ácido. Por ello se estimó el pH
del apoplasto in vivo mediante CLSM en
plantas de Arabidopsis thaliana Apo-pHu-
sion que expresan de forma estable el
sensor de pH mRFP1–EGFP direccionado
a apoplasto, observándose un aumento
del pH en hojas infiltradas con LEC2 res-
pecto a controles sin infiltrar o infiltrados
con un vector vacío a los 5 posinfiltración.
Teniendo en cuenta que se ha informado
que el apoplasto es un compartimiento
191
SESIÓN 7
12BAV fundamentalmente luz roja y azul pero no hay

estudios publicados sobre el impacto de los
Impacto de la iluminación cambios en la composición espectral de la luz
con distinta composición en la producción de proteínas recombinantes
espectral en la expresión utilizando sistemas de expresión transitorios.
de proteínas recombinantes El objetivo de este trabajo consistió en

investigar el impacto de los cambios en la
de manera transitoria en composición espectral de la fuente de ilu-
hojas de Nicotiana minación en la producción de proteínas
recombinantes utilizando sistemas de ex-
benthamiana presión transitoria en hojas de Nicotiana
benthamiana .
VIGNOLLES, Florenciaa, b, REY, Constanzab, c, MA-
ZZINI, Flaviad, PETRUCCELLI, Silvana a, b Para ello se ensayaron dos sistemas de
iluminación tradicional: tubos fluorescentes
a) Laboratorio de Biología Molecular. Centro de
(TF) y lámpara de sodio de alta presión (HSP)
Investigación y Desarrollo en Criotecnología de
y cuatro sistemas de iluminación LED: tu-

Alimentos. Facultad de Ciencias Exactas. Univer-
sidad Nacional de La Plata bos LED blanco fríos (CW), chips Full Spec-
trum (FS), chips rojos (625-660nm) y azules
b) CONICET
(450-465nm) en proporciones 2:1 (2R:1B) y
c) Instituto de Biotecnología y Biología Molecu- (3R:1B). La distancia de las plantas a la fuente
lar. Facultad de Ciencias Exactas. Universidad
de luz fue ajustada de manera de que reciban
Nacional de La Plata
una intensidad de flujo fotónico fotosintético
[email protected] entre 150-200µmol.m-2s-1. Las plantas de N.
benthamiana fueron crecidas bajo los tubos
Los sistemas de expresión basados en plantas fluorescentes durante 4-5 semanas. Posterior-
llevan más de 30 años de desarrollo habiéndose mente fueron infiltradas con Agrobacterium
consolidado en diversos nichos y con tecnologías tumefaciens GV3101 llevando plásmidos con-
variadas. Entre ellas se encuentran los sistemas teniendo los genes codificantes para las proteí-
de expresión transitorios que utilizan plantas nas reporteras GFP y la β-glucuronidasa (GUS)
jóvenes crecidas en instalaciones de agricul- dirigidos por el promotor constitutivo CaMV-
tura vertical. El crecimiento de plantas en am- 35S. Las plantas infiltradas se colocaron en los
bientes controlados ha evolucionado junto distintos sistemas de iluminación y se analiza-
con el desarrollo de la tecnología LED (light ron entre 4-8 días posinfiltración. Las plantas
emitting diode) que, al hacer uso más eficiente mantenidas bajo iluminación LED mostraron
de la energía, permite la construcción de gran- hojas más expandidas y fueron más bajas que
jas verticales. Esta tecnología también permite las mantenidas bajo las fuentes convenciona-
manipular el espectro de luz, para regular las les. El contenido relativo de agua en todas las
condiciones de crecimiento y asi obtener plan- condiciones fue similar. Los niveles de GFP y
tas con la apariencia y perfiles metabólicos de GUS fueron más altos en la condición 2R:1B
buscados. En el campo de molecular farming y los más bajos se obtuvieron para los FS. Los
se han montado varias instalaciones de este rendimientos con los tubos CW fueron simila-
tipo, pero existe escasa información sobre las res a los obtenidos con TF y HSP y tienen la ven-
características de los sistemas de iluminación taja de su facilidad de instalación, consumo ener-
empleados. Algunos de ellos, basándose en gético un 50% menor y utilidad tanto en la fase de
el espectro de absorción de la clorofila utilizan crecimiento de plantas como en la expresión.
192
SESIÓN 7
Palabras claves: MOLECULAR FARMING; PRO- que podrían orientar en el futuro el desa-
TEÍNAS RECOMBINANTES; NICOTIANA BENTHA- rrollo de nuevas estrategias de control, se
MIANA.
analizó el gen que codifica para vitelogenina
(Vg), fosfoglicoproteína precursora de la vi-
telina que constituye el principal componen-
te de la yema del huevo. Con el propósito de
13BAV analizar a este gen involucrado en el proceso
Análisis del Gen de ovogénesis, se realizó una extracción de
ARN total de hembras y machos adultos de
vitelogenina en el vector D. citri por separado, se cuantificó la concen-
del HLB Diaphorina citri tración obtenida, posteriormente se realizó
la síntesis de ADNc empleando 1 ug de ARN
FIORAVANTE, Cynthia A.; MACSEMCHUK, Naza- total y luego se diseñaron cebadores que se
rena A.; LITWIÑIUK, Sergio L.; MIRETTI, Marcos amplificaron mediante sucesivas reacciones
M.; BLARIZA, María J. de PCR end point. Con el fin de corroborar la
Universidad Nacional de Misiones (UNaM) – CO- correcta amplificación de los segmentos de
NICET, Facultad de Ciencias Exactas Químicas y ADNc, los productos de PCR fueron visuali-
Naturales, Instituto de Biología Subtropical, La- zados en geles de agarosa. Aquellos produc-
boratorio GIGA. Misiones, Argentina. tos de PCR que revelaron banda única del ta-
[email protected] maño esperado, se purificaron y se enviaron
para su secuenciación directa. Se logró am-
plificar 3194 pb correspondientes a la por-
El psílido asiático de los cítricos, Diaphori- ción N-terminal del gen. El análisis de las se-
na citri (Hemíptera: Psyllidae), constituye la cuencias de aminoácidos deducidos a partir
principal amenaza para la industria citrícola de las secuencias nucleotídicas de ADNc de
en todo el mundo, ya que es el vector de la D. citri permitió localizar un sitio de clivaje
bacteria Candidatus liberibacter ssp., agente altamente conservado en el extremo N-ter-
causal de la enfermedad “Huanglongbing” minal, RXXR (RSRR), donde el producto pri-
(HLB). El HLB es una de las enfermedades mario de Vg se escinde por endoproteasas.
de los cítricos más devastadoras del mundo Este sitio se encuentra flaqueado por dos re-
que hasta el momento no tiene cura, por giones poliserinas, las cuales corresponden
lo que las plantas afectadas deben erradi- a sitios de fosforilación imprescindibles para
carse y destruirse causando pérdidas en la la interacción entre Vg y su receptor en la
producción en las regiones afectadas. No superficie del ovocito en desarrollo. Por otra
existen métodos de control eficaces para el parte, el análisis comparativo de las secuen-
HLB; sin embargo, técnicas biotecnológicas cias de aminoácidos deducidos a partir de
emergentes tales como, el ARN de interfe- las secuencias nucleotídicas de ADNc de D.
rencia (ARNi), podrían servir como una po- citri y de otras especies, reveló un porcen-
sible estrategia sostenible y respetuosa con taje del 48.46% de identidad con Nilaparva-
el medio ambiente para el manejo de esta ta lugens, 50.42% con Triatoma infestans,
plaga citrícola. Ciertas características tales 43.18% con Plautia stali Vg1, 43.61% con
como las aplicaciones fáciles y focalización Plautia stali Vg2, 46.78% con Plautia stali
altamente específica, hacen que los enfo- Vg3, 45.88% con Graptrosaltria nigrofusca-
ques de ARNi sean deseables para el desa- ta, 48.29% con Riptortus clavatus, 48.17%
rrollo de nuevas estrategias contra muchos con Lethocerus deyrollei, y 56.06% con Ci-
insectos plaga. A efectos de aportar bases mex lectularius. Este estudio tiene como ob-
193
SESIÓN 7
jetivo detectar genes involucrados en el de- utilización de las FeNPs como promotor del
sarrollo y la reproducción del insecto vector, crecimiento de Bradyrhizobium japonicum
potencialmente targets para silenciamiento e inductor de la FBN en soja. Se incorpora-
mediante ARNi y de esta manera aportar es- ron FeNPs al medio de cultivo bacteriano
trategias alternativas de control. en las dosis de 0, 5, 10, 20, 50, 100 y 200µg
ml-1 y se analizó la cinética de crecimiento,
la actividad metabólica y la producción de
Palabras claves: DIAPHORINA CITRI; HLB;
exopolisacáridos y de ácido indolacético.
VITELOGENINA. Los resultados obtenidos demuestran que
la dosis de 100 µg ml-1 de FeNPs incrementa
los parámetros analizados. A nivel de plan-
ta, se realizaron experimentos en condicio-
nes controladas evaluando la aplicación de
14BAV las FeNPs sobre semillas de soja inoculadas
con B. japonicum. Los resultados obtenidos
Utilizacion de evidencian que la incorporación de 100 o
nanopartículas de hierro

200 µg ml-1 de FeNPs incrementa el número
y peso de los nódulos, así como el contenido
para potenciar la simbiosis de leghemoglobina y actividad nitrogenasa.
Bradyrhizobium-Soja Los datos obtenidos en estos experimentos
sugieren que las FeNPs tienen la capacidad
SPAGNOLETTI, Federico , GIACOMETTI, Romina
a,c b, c tanto de incrementar la tasa de crecimien-
a) Cátedra de Microbiología Agrícola. Facultad
to de B. japonicum, como la eficiencia de la
de Agronomía. Universidad de Buenos Aires. simbiosis con soja.
b) Cátedra de Bioquímica. Facultad de Agrono-
mía. Universidad de Buenos Aires.
b) Instituto de Investigaciones en Biociencias
Agrícolas y Ambientales (INBA-CONICET).
[email protected] 15BAV
Estudio de la actividad
El incremento de la población mundial probiotica Lactobacillus
conlleva a una mayor demanda alimentos plantarum ‘pulquensis”
y otros insumos, por lo tanto, el mayor de-
safío que enfrenta el sector agrícola es in- para su utilización en
novar y generar tecnología para producir diferentes modelos de
alimento en la cantidad y calidad necesaria.
Entre las últimas innovaciones tecnológicas,
enfermedades
se encuentra la implementación de la nano-
tecnología en el agro. Una de las NPs más DRUMOND, Mariana M a; DE PAULA, Carolina b;
CASTELO BRANCO, Paulo b; LOPES, Pedro b; PA-
promisorias para la agricultura son las de DRÃO Eduarda b; VERGARA Silvia Cristina c;MA-
hierro (FeNPs); esto se debe a que podrían TURANO, Yolanda Paola c; MANCHA-AGRESTI,
promover el crecimiento vegetal y afectar el Pamelab
proceso de fijación biológica de nitrógeno a) Centro Federal de Educação Tecnológica de Mi-
(FBN). En este trabajo, se analizó la potencial nas Gerais (CEFET-MG), Departamento de Ciências
194
SESIÓN 7
Biológicas, Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil. refiere al potencial hemolítico, fue posible
b) Faminas-BH, Faculdade de Medicina, Belo Ho- observar padrón de hemólisis tipo α, lo que
rizonte, Minas Gerais, Brasil. es reportado para otras cepas de bacterias
c)Conicet IBT UNSJ Instituto de Biotecnología lácticas. Se observó que L. plantarum“pul-
Universidad Nacional de San Juan. quensis” fue capaz de resistir al jugo gástri-
co y a las sales biliares demostrándose alta-
mente resistente presentando reducción de
El estudio de probióticos representa un 5,9% y 17,19% para la mayor concentración
amplio campo de estudio, el cual es impor- testada (1%, de oxigall), respectivamente;
tante tanto para la medicina como para la características que demostraron, la capaci-
industria. Diferentes cepas de bacterias lác- dad de resistir a los diferentes estreses en-
ticas tienen acción probiótica comprobada y contrados en el trato gastrointestinal. En los
citada en la literatura. Varias son las caracte- ensayos de actividad antimicrobiana, la cepa
rísticas que esas cepas deben presentar para presentó resultados bastante significativos,
poder ser clasificadas como probióticos. con inhibición de crecimiento, frente a todas
Dentro de esas características se destaca la las cepas patogénicas evaluadas, con halos
resistencia y persistencia en el tracto gas- superiores a 20 mm, lo que es esperado para

trointestinal. Los ensayos in vitro son inte- un microrganismo probiótico, de acuerdo
resantes debido a la facilidad de ejecución y con las exigencias de las agencias regulado-
al bajo costo. Así resultados de estos análisis ras. La adhesión a las células Caco-2, reveló
permiten identificar y caracterizar entre va- un porcentaje de 6,08%, índice considerado
rias cepas las mas promisoras para diferen- alto, siendo altamente deseado, ya que esta
tes abordajes. En este contexto, este trabajo característica puede estar relacionada a un
pretendió evaluar las características probió- aumento en los efectos inmunomodulado-
ticas de L. plantarum “pulquensis”, extraí- res de la cepa, como también a la exclusión
da de una bebida fermentada denominada de microrganismos patogénicos. Al evaluar
pulque, con ensayos funcionales sugeridos el perfil inmunomodulador, en cultivo ce-
por directrices de agencias reguladoras na- lular eucariota, fue observado significativo
cionales e internacionales con el objetivo de aumento en la expresión de TLR-2, lo que
direccionarla para el tratamiento de diferen- puede estar relacionado a la activación de
tes enfermedades. Fueron realizados ensa- diferentes vías de señalización, como a NF-
yos in vitro para caracterizar la resistencia Kb. También se observó significativa reduc-
de las cepas a los ácidos biliares, tolerancia ción en la expresión génica de IL-6, impor-
a pH ácido, susceptibilidad a antibióticos, tante citocina proinflamatória. Todos estos
potencial hemolítico y de degradación de resultados, demuestran el importante po-
mucina, producción de substancias antimi- tencial probiótico de la cepa L. plantarum
crobianas, adhesión a células intestinales e “pulquensis”. Así estos hallazgos permiten
inmuno estimulación a través de análisis de marcar un punto de partida para futuras
la expresión génica de: TNFa, TLR-2, MUC2, aplicaciones de esta cepa en diferentes mo-
TGF-b e Inf-g utilizando q-RT- PCR. En el test delos de enfermedades.
de antibiograma, la cepa mostró ser resis-
tente a: gentamicina, estreptomicina, tetra-
ciclina y vancomicina, y sensible a clindami-
Palabras claves: PROBIÓTICOS, LACTOBACILLUS,
cina. También se constató que no degrada ENSAYOS IN VITRO, INMUNOMODULACIÓN.
mucina, siendo ésta un importante com-
ponente de la barrera intestinal. En lo que
195
SESIÓN 7
16BAV Métodos: La ORF (Open Reading Fra-

me) bibaA de Estreptococos agalactiae fue
Construcción de una clonada en dos vectores: (i) para expresión
Vacuna de adn contra heteróloga de la proteína recombinante. Es-
Estreptococosis vehiculizada cherichia coli C43 fue transformada con 100
ng de plásmido y la inducción se realizó con
por Bacterias Lácticas IPTG. La expresión de la proteína recombi-
nante fue visualizada en gel de SDS-PAGE
MANCHA-AGRESTI, Pamelaa; SILVA, Brunob; (15%) y fue separada por electroelución
LEIVA, María José c; DE PAULA Carolina a, CAS- cuantitativa a partir del gel de SDS-PAGE y
TELO BRANCO, Paulo a; LOPES, Pedro a, PA-
fue cuantificada por Bradford. Seguidamen-
DRÃO Eduarda a; DRUMOND, Mariana M d.
te, los ratones fueron inmunizados por vía
a) Faminas-BH, Faculdade de Medicina, Belo Ho- subcutánea con 50 µg de la proteína recom-
rizonte, Minas Gerais, Brasil.
binante, durante los días 15, 30 y 45. Se co-
b) IBB- Institute for Bioengineering and Bioscien- lectó sangre de los animales en los días 0 y
ces, Instituto Superior Técnico Universidad de 50. Se realizó electroforesis de las proteínas
Lisboa, Portugal.

del suero y también la titulación de los anti-
c)Conicet IBT UNSJ Instituto de Biotecnología cuerpos. (ii) vector pExu (vector de expresión
Universidad Nacional de San Juan. en células eucarióticas) fue utilizado para
d) Centro Federal de Educação Tecnológica de la construcción de la vacuna de ADN, para
Minas Gerais (CEFET-MG), Departamento de lo cual fue diseñado un par de primers y el
Ciências Biológicas, Belo Horizonte, Minas Gerais, amplicón (extremidades Not I y BamHI) fue
Brasil.
clonado. Luego de confirmar la clonaje por
[email protected] PCR y digestión será evaluada la funcionali-
dad de la construcción pExu:bibA. Para esto,
células eucarióticas CHO (Chinese Hamster
La estreptococosis genera grandes pérdi-
Ovary) serán transfectadas con lipofectami-
das económicas en la producción de tilapias.
na 2000 y 4 µg del plásmido. Por Inmuno-
La antibiótico-terapia es en la actualidad la
citoquímica será evaluada la expresión de
única fuente de control. Por lo tanto, resul-
la proteína BibA en las células eucarióticas.
ta necesario el desarrollo de nuevas estra-
Serán inmunizadas, por vía oral, tilapias con
tegias que garanticen la producción animal
1 x 109 UFC de Lactococcus lactis MG1363
frente a un posible brote de estreptococo-
(pExu:BibA) recombinante, la que será incor-
sis. El empleo de bacterias como vehículos
porada al alimento comercial y esta mezcla,
para el transporte de plásmidos, por vía oral,
se ofrecerá a los animales en los tanques de
constituye una estrategia de vacunación
agua a cada 3 días durante un período de 15
promisora. Lactococcus lactis es la bacteria
días. Finalizado ese tiempo los peces serán
láctica modelo debido a sus propiedades y
desafiados con 1,7 x 106 UFC/100mL de S.
por ser ampliamente utilizada en la indus-
agalactiae por la vía intraperitoneal. Duran-
tria, siendo también, una alternativa segura
te 60 días los animales serán monitoreados
para la entrega de plásmidos.
y consecuentemente, también se evaluará la
Objetivo: Construir una vacuna génica eficacia de protección de la vacuna génica.
vehiculizada por bacterias lácticas, evaluar
Resultados Parciales: La proteína recom-
su funcionalidad en células eucarióticas y su
binante se expresó en células E. coli C43, la
eficacia en animales desafiados.
cual fue purificada, cuantificada e inyecta-
196
SESIÓN 7
da en ratones Balb/C. Los anticuerpos po- El vertido de efluentes a cuerpos de agua,

liclonales fueron producidos y titulados. Se sin un tratamiento adecuado, ocasiona gra-
confirmó que la secuencia codificadora de ves problemas para el medio ambiente. Uno
la ORF BibA fue amplificada y clonada en el de ellos corresponde al proceso de eutrofi-
vector pExu. zación, impulsado por la incorporación de
Conclusiones: La construcción del vec- materia orgánica y nutrientes, tales como
tor pExu:bibA provee perspectivas para que el nitrógeno y el fósforo (Romero Rojas,
este sistema sea probado como una posible 2010). Actualmente se proponen diver-
vacuna génica para estreptococosis en pesos tipos de tecnologías que permiten el
ces, generando nuevas perspectivas en el tratamiento de las aguas residuales para
campo de la piscicultura. dar cumplimiento a los límites de verti-
do establecidos por la normativa vigente.
Dentro de las tecnologías disponibles, las
macroalgas de agua dulce cuentan con im-
Palabras-claves: PISCICULTURA; PROTEÍNA portantes ventajas debido a su gran dis-
BIBA; STREPTOCOCCUS AGALACTIAE; VACU- ponibilidad, así como menores costos de
NA DE ADN. separación y secado (Ge et al., 2018).

El presente trabajo tuvo como objeti-
vo evaluar la capacidad depuradora de la
macroalga Spirogyra spen aguas residua-
les urbanas y efluentes tratados en una
planta de fangos activados convencional.
17BAV Para esto se procedió primeramente a la
Factibilidad de depurar recolección de macroalgas cosechadas en
orillas del Río Limay (Neuquén, Argenti-
aguas residuales con na). Las mismas se caracterizaron a partir
macroalgas de un microscópio óptico identificando su
naturaleza taxonómica como Spirogyra sp.
Posteriormente se practicó el tratamiento
ARBINI, Gianinaa; TORRES, Fabiana R.a; MU-
ÑOZ, Silvina V.b; CAMACHO, Alberto G.a; de los dos tipos de efluentes estudiados.
La experiencia se desarrolló durante un
GATTI, Marcela N.b
periodo de 83 días, con una modalidad
a)Facultad Regional del Neuquén, Universidad continua y un tiempo de retención hidráu-
Tecnológica Nacional
lica de 10 días. La iluminación se realizó
Av. Reverendo Pedro Rotter S/N - Plaza Huincul, durante los primeros 14 días a partir de luz
Neuquén, Argentina natural, continuando con iluminación ar-
b) Centro de Investigaciones en Toxicología Am- tificial LED de 15 W con ciclos intermiten-
biental y Agrobiotecnología del Comahue tes de una hora para el resto del estudio.
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas En relación a la aireación, se trabajó con
y Técnicas dos modalidades diferentes: una aireación
Universidad Nacional del Comahue elevada (5 ± 0.5 mg O2/L) y una aireación
baja (0.5 ± 0.5 mg O2/). Las muestras de
Buenos Aires Nº 1400 - Neuquén, Neuquén, Ar-
agua se analizaron al ingresar al sistema
gentina
de tratamiento, y posteriormente con una
[email protected]
frecuencia de tres días semanales, cuan-
197
SESIÓN 7
tificando las concentraciones de amonio 18BAV

(N-NH4), nitrato (N-NO3), fosfato (P-PO4), y
materia orgánica (DQO total y DQO filtra-
Micropropagación de
da) de las mismas. Cedrela balansae
Los resultados obtenidos demostraron a través de organogénesis
el potencial de Spirogyra sp. para el tra-
tamiento efectivo de aguas residuales ur-
somática
banas, lográndose una eliminación máxi-
MEDINA, Sandraa; CUELLO, Diegoa; VENEGAS
ma de amonio, nitrato, fosfato, DQO total TARANCÓN, Stefaníab y FILIPPONE, María
y DQO filtrada del 96.2 %, 70%, 70.88%, Paulaab
80.51% y 75.40% respectivamente. Aná- a) Facultad de Agronomía y Zootecnia, Universi-
logamente, se pudo evidenciar que Spiro- dad Nacional de Tucumán
gyra sp fue capaz de mejorar el efluente b) CONICET
de la planta de tratamiento, siendo las [email protected]
máximas eliminaciones de amonio, nitra-
to, fosfato, DQO total y DQO filtrada del

100%, 56.52%, 62.81%, 65.35%, 41.84% Las Yungas y la Selva Misionera son el
respectivamente. Estos datos indican que mayor ecosistema de Selva Subtropical de
la macroalga estudiada tiene una gran ca-Argentina, contienen más del 50 % de la bio-
pacidad depuradora y puede implemen- diversidad del país y es hábitat de diferen-
tarse no solo para el tratamiento de aguates especies del género Cedrela. En la Selva
residual urbana, sino también como acciónPedemontana de Salta y Jujuy, C. balansae
habita naturalmente en lugares accesibles y
correctiva o post-tratamiento en las plan-
tas de tratamiento de fangos activados está sometido a una elevada depredación,
y lagunas que se encuentran en la zona. por lo cual resulta imperioso restaurar el
Esto evitaría que los efluentes lleguen abosque dañado con material saneado, dis-
los ríos con elevadas cargas de nitrógenoponible en forma masiva y originado de ár-
y fósforo. Debido a su composición, las boles élite. El objetivo de este trabajo fue
macroalgas se posicionan como un sustra- optimizar una técnica de micropropagación
to aprovechable en términos energéticos, para la producción masiva de plantines de
lo que resulta aún más atractivo desde elalta calidad de C. balansae. Para esto, semi-
punto de vista energético-ambiental, dadallas provenientes de la colección de INTA-Fa-
la posibilidad de cultivar macroalgas en maillá, Origen BY13: Yuto (Jujuy), fueron
un sistema de depuración de efluentes desinfectadas con diferentes tratamientos,
siendo el más efectivo el lavado con agua co-
para luego poder utilizarlas en la digestión
rriente y detergente, agua destilada 10min,
anaeróbica, constituyendo así un ciclo au-
tosustentable. luego 40min en 15% de NaOCl y tres enjua-
gues finales con agua destilada estéril. Las
semillas desinfectadas se germinaron en el
medio WPM (Woody Plant Medium) al 75%,
Palabras claves: SPIROGYRA SP.; MACROAL- 4% de agar, con 0% y 1,5% de sacarosa. Pa-
GA DE AGUA DULCE; ALGAS FILAMENTOSAS ralelamente se realizó una siembra en sus-
;TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES; ELI- trato estéril ex vitro. La condición de germi-
MINACIÓN DE NUTRIENTES.
nación en ambos casos fue a 25°C con 16hs
de luz. En el medio con sacarosa se obtuvo
198
SESIÓN 7
el mayor porcentaje promedio de germina- 19BAV

ción in vitro del 75%, y del 80% en sustrato
ex vitro. Cuando los plantines (germinados
Sensibilidad de levaduras
in vitro y ex vitro) alcanzaron los 4 nudos, se antagonistas y Fusarium
cortaron segmentos nodales de 1cm de lar- a fungicidas químicos de
go y se colocaron en los medio WPM al 75%,
3% de sacarosa y 4% de agar, suplementado síntesis
con 1 y 2 mg/L de Bencilaminopurina (BAP),
los cuales fueron mantenidos en oscuridad PESCE Virginia M.a,b; SÁNCHEZ Gonzalo E.d;
a 25°C durante 10 días y luego en 16hs de NALLY Maria.C.a.b; LENCINAS Marcos a.b;
PEDROZO Lina P. a.b; FLORES Cintia.B. a.b;
luz. A las dos semanas, en los segmentos CASTELLANOS DE FIGUEROA Lucía.I,b,c;
provenientes de germinación in vitro, se co- VAZQUEZ Fabioa,d
menzaron a formar callos embriogénicos en a) Instituto de Biotecnología-Facultad de Inge-
los extremos de los segmentos, a partir de niería-UNSJ
los cuales se generaron brotes, en un pro- b) CONICET
medio de 3 y 2 brotes/callo en el medio con
c) Planta Piloto de Procesos Industriales Micro-
1 y 2mg/L de BAP, respectivamente. Los seg- biológicos (PROIMI)

mentos de plantines ex vitro no mostraron
d-) Departamento de Agronomía-Facultad de In-
respuesta in vitro. A las 6-8 semanas los bro-
geniería-UNSJ
tes fueron transferidos a cuatro medios de
[email protected]
enraizamiento contenido WPM 75% suple-
mentados con diferentes concentraciones
de Ácido Indolbutírico (AIB, 0;1 y 0,1 mg/L)Introducción: San Juan es una de las
y en sustrato directo. A las cuatro semanas
principales provincias productora de se-
los brotes solo desarrollaron raíces en el
millas de cebolla. Fusarium es un hongo
sustrato y en WPM sin AIB, sin embargo, el
fitopatógeno causante de enfermedades
desarrollo radicular fue más rápido y abun-
en cebolla tanto en el cultivo como en
dante en sustrato directo. La aclimatación
condiciones de almacenamiento. Básica-
de los brotes enraizados en sustrato se inició
mente, el control de este patógeno con-
a las cuatro semanas, y en los enraizados in
siste en el empleo de fungicidas químicos.
vitro recién a partir de los 6 a 8 semanas, en
Sin embargo, su uso desmedido puede
que fueron trasplantados en sustrato man-afectar negativamente la salud humana, el
teniéndolos en condiciones controladas demedio ambiente y favorecer la aparición
25°C, 70%HR y 16hs de luz. El porcentaje de
de cepas resistentes a la acción tóxica de
sobrevivencia fue del 100% y 90%, respecti-
los mismos. Por lo tanto, es necesaria la
vamente. La importancia de generar conoci-
búsqueda de alternativas para el control
mientos y tecnologías adecuadas para lograr
de Fusarium en cultivos de cebolla. Una
una eficiente multiplicación será un valioso
de las propuestas incorpora el manejo in-
aporte para la propagación, conservación y
tegrado de enfermedades, combinando
manejo sostenible de Cedrela balansae. bajas dosis de fungicidas con agentes de
biocontrol. El objetivo es determinar la to-
lerancia de levaduras antagonistas y de Fu-
sarium a dos fungicidas de síntesis química,
Palabras claves: YUNGAS; MULTIPLICACIÓN;
SEGMENTOS NODALES. en un contexto de manejo integrado de en-
fermedades fúngicas en cultivos de cebolla.
199
SESIÓN 7
Materiales y Métodos: Microorganis- concentraciones ensayadas del fungicida

mos: Se emplearon 10 aislamientos de Fu- Infinito®(p≤0,05). F. proliferatum BC20, fue
sarium (Fusarium proliferatum BC1, BC9, resistente a la acción fungicida de Infinito®,
BC11, BC12, BC13, BC14, BC15, BC19, BC20 ya que no mostró diferencias significativas
y Fusarium sp. BC10)., provenientes de culti- con el control (p≥0,05). Todas las levaduras
vos locales de cebolla destinado a la produc- antagonistas ensayadas fueron tolerantes a
ción de semilla. Las levaduras antagonistas los fungicidas Carbendazim® e Infinito®, en
ensayadas pertenecen a la especie Saccha- todas las concentraciones ensayadas, hasta
romyces cerevisiae (PB62, PB69, PB70, PB71, la dosis recomendada.
PB72, PB73, PB74, PB78 BSc56, BSc92) y fue- Conclusiones: El fungicida Carbenda-
ronpreviamente seleccionadas in vitro como zim® podría combinarse, en dosis menores
antagonistas de Fusarium. Los fungicidas a la recomendada, junto con levaduras an-
utilizados fueron Carbendazim® (Carbenda- tagonistas, para el manejo integrado de en-
zim 50%), e Infinito® (Fluopicolide 6.25% y fermedades fúngicas, logrando una posible
Propamocarb 62.5%). En medio YEPD-Agar estrategia de control para una producción
y en PDA, para levaduras antagonistas y sostenible de semillas de cebolla en la pro-

hongos filamentosos, respectivamente, se vincia.
colocaron concentraciones crecientes has-
ta dosis recomendada de los fungicidas
Carbendazim® (0,46; 0,90; 1,80; 2,70; 3,60
mL/L) e Infinito® (0,31; 0,62; 1,25; 1,87; 2,50 Palabras claves: MANEJO INTEGRADO; CEBO-
mL/L). Sobre la superficie del medio se ino- LLA; CONTROL BIOLÓGICO; FUNGICIDAS QUÍMI-
COS
culó puntualmente un cultivo de levaduras
(108 células/mL) y para evaluar Fusarium se
sembró un disco de micelio en el centro de la
placa. Las placas se incubaron 7 días a 25°C,
en oscuridad. Como control se sembraron 20BAV
los microorganismos en medio agarizado sin
fungicida. Se calculó del porcentaje (%) de Inhibicion del crecimiento
inhibición del crecimiento micelial para cada de hongos productores de
hongo y concentración de fungicida ensaya-
da. En levaduras se determinó la Concentra-
aflatoxinas aislados de
ción Mínima Inhibitoria (CMI) evaluando la pistachos mediante el uso
presencia o ausencia de crecimiento en cada
una de las dosis.
de levaduras nativas de
Resultados: En todas las concentracio-
SanJuan, Argentina
nes ensayadas de Carbendazim®, se obser-
varon inhibiciones del 100% del crecimien- FLORES, Cintia B; a, b LENCINAS, Marcos; a, b PE-
DROZO, Paula; a, b PESCE, Virginia; a, b MATURA-
to micelial para los patógenos ensayados, NO, Paola; a, b NALLY, Cristina.a, b
excepto para F. prolifertaum BC19, que fue
inhibido entre 81,42% y 82,96% en las dife-
rentes concentraciones (p≤0,05). Cinco ais-
lamientos (F. proliferatum BC1, BC9, BC11, b) CONICET
BC12 y BC15) mostraron diferencias signifi- [email protected]
cativas con respecto al control en todas las
200
SESIÓN 7
El pistacho es unos de los frutos secos De las 32 levaduras ensayadas frente a A.

más populares del mundo, se cultivan al- flavus H5 y H19 a 25°C fueron 10 las levadu-
rededor de 1.024.997 ha de pistachos en ras que presentaron un porcentaje de inhibi-
el mundo. En Argentina, existen alrede- ción del 100%. Las levaduras pertenecen a la
dor de 1.007 ha cultivadas con pista- especie Metschnikowia pulcherrima (PB37,
chos. Los pistachos pueden contaminar- PB39, PB42, PB44, PB64, PB65, PB66, PB67
se con aflatoxinas (toxinas cancerígenas) y PB69) aisladas de mostos en fermenta-
producidas por Aspergillus flavus y As- ción y M. pulcherrima (Mp36) aislada de uva
pergillus parasiticus. La aflatoxina B1 de mesa. A 30°C la levadura Candida sake
es considerada la más tóxica y es pro- (BCs54) aislada de mostos en fermentación
ducida por ambas especies. Existen di- inhibió al 100% el crecimiento del hongo A.
ferentes métodos de descontaminación flavus H5. Por otra parte, Saccharomyces
como físicos, químicos y biológicos. En cerevisiae (PB65) aislada de mostos en fer-
pistachos existen algunos antecedentes mentación con posibles aptitudes probió-
sobre el uso de microorganismos como ticas inhibió al 100% al patógeno A. flavus
inhibidores de hongos productores de H19.
aflatoxinas y/o reductores de micotoxi- Por ultimo, 19 levaduras inhibieron

nas. El objetivo del trabajo esevaluar la entre el 60% y 90% el crecimiento radial
capacidad inhibitoria de aislamientos de de ambos patógenos en ambas tempera-
levaduras nativas frente al crecimiento turas ensayadas (25°C y 30°C). Las leva-
de hongos productores de aflatoxinas in duras pertenecen a aislamientos de mos-
vitro. Mediante la técnica de antibiosis tos en fermentación S. cerevisiae (BSc97,
en lawn se ensayaron 32 levaduras fren- BSc109, BSc149, BSc172), C. sake (Bcs54),
te a 2 hongos A. flavus H5 y A. flavus H19 Kluyveromyces marxianus (BKm145) y S.
aislados de pistachos. Una suspensión kluyveri (BSk11); levaduras aisladas de uva
de levaduras (100 µL, 1x10 6 cel/mL) se de mesa M. pulcherrima (Mp22 y Mp43)
inoculó en forma de césped en cajas de y de mostos en fermentación con posibles
Petri con medio de cultivo PDA. Luego se aptitudes probióticas pertenecientes a las
sembró una suspensión de conidios de especies M. pulcherrima (PB33, PB34) y S.
A. flavus H5 yH19 (10µL, 1x10 4 conidios/ cerevisiae (PB70, PB71, PB72, PB73, PB74,
mL) en forma puntual y superficial en el PB75, PB76, PB77). Los resultados revelan
centro de la placa. Las placas se incuba- el potencial inhibitorio de las levaduras
ron durante 5 días a 25°C y 30°C. El con- nativas en condiciones in vitro. Es impor-
trol negativo consistió en sembrar en el tante destacar la efectividad de estas leva-
centro de la placa con medio PDA conidios duras frente a A. flavus H5 y H19 para su
fúngicos (sin levadura). Se realizaron dos posible aplicación como biocontroladoras
replicas por tratamiento. Finalizado el en pistachos.
periodo de incubación se tomaron 2 me-
didas perpendiculares del radio micelial
fúngico con calibre digital. Se calculó el
porcentaje de inhibición del crecimiento
fúngico:
201
SESIÓN 7
21BAV de cultivo MS (medio basal de Murashige y

Skoog), al que se le añadió Acido Indol Acéti-
Protocolo para la co (AIA) 1mg/L y Bencilaminopurina (BA) 0,1
micropropagación in vitro mg/L. También se preparó el medio MS con
de la especie Aloe 1mg/L y 1.5 mg/L BA y MS sin los regulado-
res de crecimiento como control.
Barbadensis Miller Se evaluó el número de brotes por ex-
plante, también los explantes contaminados
RIVERO, ROMINA E. A., GONZÁLEZ, ARIELA J.,
y los que presentaron signos de necrosis.
MAGUNA, FABIANA P.
a) Instituto Nacional de Tecnología Agropecua- Para determinar la Eficiencia de regene-
ria (INTA) EEA Sáenz Peña ración, que permita evaluar la respuesta ob-
b) Universidad Nacional del Chaco Austral tenida se utilizó la siguiente ecuación:
(UNCAus)
[email protected]

Aloe barbadensis Miller es una especie fa-
nerógama; tiene gran importancia a nivel sa- A partir de los 7 días posteriores a la siem-
lud e industrial. Sin embargo, presenta ciertas bra de los explantes en el medio correspon-
limitaciones al llevar la producción a escala co- diente, se comenzaron a observar respuestas
mercial, debido a su lenta velocidad de propa- de regeneración directa a partir de los explan-
gación. Dicha propagación mediante clones es tes de hijuelos en MS conteniendo 1 mg/L y
más rápido, fácil y económico que hacerlo por 1.5 mg/L de BA.
semillas. Dados los avances alcanzados con el
Al mismo tiempo que se observaron las
cultivo in vitro de aloe vera, estos permiten
respuestas regenerativas, se presentaron con-
diseñar plantas con mejores características fe-
taminaciones frecuentes. Dado que este pro-
notípicas, entre otras.
blema fue persistente se adicionó al medio de
El objetivo general del trabajo fue desa- cultivo, en los siguientes ensayos, el antifúngi-
rrollar un protocolo de micropropagación co PPM a razón de 0.5 ml/L.
eficiente para el cultivo in vitro de la especie
A los 15 días los brotes aumentaron de
Aloe barbadensis regional, con su posterior
tamaño y comenzó el desarrollo de raíces, lo
aplicación y optimización a escala post-labo-
que permitió que los 35 días ya sea pasado a
ratorio.
tierra para iniciar su evolución en condiciones
La metodología y los materiales utilizados ex vitro. Sin embargo, una vez realizado el tras-
fueron: las plantas de Aloe barbadensis utili- plante no se lo expuso al brote directamente al
zadas como plantas madres fueron recolec- ambiente externo, se los mantuvo en cámara
tadas en la región geográfica que rodea Ro- de cultivo y se les colocó en una bolsa de nylon
que Sáenz Peña. Dichos ejemplares fueron a la cual se la rociaba con agua para mantener
mantenidos en invernaderos y controlados la humedad del entorno, después de 14 días
para optimizar su crecimiento. En el labora- en dichas condiciones fueron llevados al inver-
torio los explantes se lavaron con NaClO y nadero.
soluciones hidroalcohólicas, luego se redujo
Las hojas alcanzaron los 5 cm a los 25 días
el tamaño del explante a 1 cm aproximada-
demostrando que fue exitosa la fase de acli-
mente para luego ser sembrado en el medio
matación en estas condiciones.
202
SESIÓN 7
Considerando las experiencias y los re- Metodología: Se ensayaron 4 aislamien-

sultados del trabajo se establece que el tos de P. expansum (PSS4, PSS6, PRG2 y
explante que presenta mejores resultados PRG3) y 2 aislamientos de B. cinerea (B87
para la micropropagación in vitro de Aloe y B97). Se prepararon placas de Petri con
barbadensis son hijuelos de plantas madre, medio PDA suplementado con diferentes
y en relación a los reguladores de crecimien- concentraciones de NaHCO3 (0.25, 0.5, 0.75
to adicionados al MS los mejores resultados y 1% p/v). Se sembraron puntualmente 20
fueron con 1.5 mg/L BA. μL de cada suspensión fúngica (2 x 103 coni-
dios.mL-1). Los controles del ensayo se reali-
zaron inoculando los 6 aislamientos patogé-
nicos en placas que contenían únicamente
PDA. Todos los tratamientos se incubaron en
oscuridad a 2 ± 1° C durante 4 semanas. Al
22BAV
finalizar el ensayo se tomaron dos medidas
Control de enfermedades perpendiculares del diámetro del micelio
de postcosecha en uva con para calcular el porcentaje de crecimien-
to micelial (PCM) en relación con el trata-

bicarbonato de sodio miento control. Los resultados se analizaron
usando el análisis de la varianza (ANOVA) y
LLADÓ, Cecilia a, PEDROZO, Paulaa,b, RODRÍGUEZ, las medias separadas de acuerdo al test de
Leticia.a, FLORES, Belen a,b, LENCINAS, Marcos a,b;
PESCE Virginia a,b, MATURANO, Paola.a,b, NALLY, Tukey (p<0.05). Además, se determinó la
Cristina a,b, VAZQUEZ, Fabioa. concentración mínima inhibitoria (CMI) de
a) Instituto de Biotecnología. Facultad de NaHCO3, registrando la menor concentra-
Ingeniería. Universidad Nacional de San Juan. ción de sal que impidió el desarrollo visible
b) CONICET. de cada patógeno.
[email protected]
Resultados: Se observó que la aplicación
de NaHCO3 afectó el crecimiento de todos
Introducción: La eficacia de fungicidas de los aislamientos de B. cinerea y P. expansum,
síntesis química disminuye con la generación en al menos una de las concentraciones en-
de cepas resistentes de hongos fitopatógenos, sayadas. La CMI encontrada fue de 1% p/v,
afectando económicamente la producción de concentración que inhibió por completo el
uva para consumo en fresco durante su con- desarrollo de los patógenos ensayados. En
servación en cámaras frigoríficas. En el marco cuanto a los aislamientos B87 y B97, los
de un manejo integrado de enfermedades de tratamientos con concentraciones de 0.5%
postcosecha existen alternativas para comba- y 0.75% de NaHCO3 resultaron efectivos,
tir esta problemática, como la aplicación de sa- reduciendo significativamente (p<0,05) el
les inorgánicas. Diversos estudios han demos- PCM en relación a los respectivos contro-
trado que el bicarbonato de sodio (NaHCO3) les. La aplicación de bicarbonato al 0,25%
reduce el crecimiento de diferentes especies no inhibió significativamente el crecimiento
de hongos fitopatógenos. fúngico de B87 (PCM: 93%), mientras que
el mismo tratamiento en B97, el desarrollo
Objetivo: Determinar si la aplicación de micelial no superó el 50%. Los resultados so-
bicarbonato de sodio reduce el crecimiento bre el desarrollo de micelio de P. expansum
micelial in vitro de Penicilliumexpansum y Bo- indican que los aislamientos más tolerantes
trytis cinerea, patógenos de uva de mesa en a las diferentes concentraciones de sal ensa-
postcosecha.
203
SESIÓN 7
yadas fueron PRG2 y PRG3, ya que con bicar- En Argentina la producción de jengibre
bonato al 0.75% v/v, ambos patógenos al- es casi exclusiva de la provincia de Misiones,
canzaron un porcentaje de crecimiento igual debido a los requerimientos de la especie y
a 60%. Sin embargo, los aislamientos PSS4 al clima subtropical húmedo de la misma.
y PSS6 fueron significativamente inhibidos Misiones abastece el mercado interno y ex-
desde la menor concentración empleada terno; y resulta insuficiente para abastecer
(0.25% p/v), con una reducción del micelio la demanda de nuestro país, razón por la
mayor al 50%. cual, muchas veces es necesario importar,
Conclusión: La aplicación de compuestos esencialmente de Brasil.
generalmente reconocidos como seguros La provincia del Chaco cuenta con algunas
(GRAS), como el bicarbonato de sodio, re- de las características climáticas en ciertas re-
presenta una herramienta complementaria giones, como ser la temperatura y en otras
viable para el control de hongos fitopatóge- las precipitaciones. Sin embargo, para poder
nos en condiciones de postcosecha. obtener un cultivo viable, es indispensable
el establecimiento de un protocolo que se
ajuste a las características de la región. Es

Palabras claves: POSTCOSECHA; FITOPATÓGE-
NOS; BICARBONATO DE SODIO. por ello que este trabajo propone como
meta final el diseño de un protocolo de mi-
cropropagación “in vitro” de jengibre ade-
cuado a las condiciones climáticas, de suelo
y fitosanitarias de la zona centro chaque-
24BAV ña, que permita establecer los parámetros
Etapa inicial para apropiados para el crecimiento de plantas
enteras con calidad genética y fitosanitaria.
la micropropagacion Éste permitirá obtener una mayor cantidad
in vitro de Zingiber de plantas de jengibre uniformes, sanas,
en menor tiempo y espacio, propiciando el
Officinale en Chaco abastecimiento regional que existe.
El diseño metodológico está enfocado en
ZARATE, Iris P., MAGUNA, Fabiana P.
generar conocimiento respecto a las variables
a) Universidad Nacional del Chaco Austral, Lab. que afectan el desarrollo del cultivo “in vitro”
4 – PA.
de jengibreen nuestra región. Se manipularán
b) INTA Sáenz Peña, Lab. de Genética.
[email protected] las variables independientes (pH, tempera-
tura, humedad, cantidad de luz, concentra-
Zingiber officinale Roscoe, conocido como ción de hormonas y sacarosa), para medir
jengibre, es una especie ancestral proveniente sus efectos sobre variables dependientes
de Asia. Actualmente su producción aumen- (promedio de brotes por explante, tamaño y
tó por su uso medicinal, como materia prima biomasa de los microrizomas). Esto permitirá
para la industria farmacéutica, alimenticia e conocer la combinación óptima para el esta-
incluso en la vida cotidiana. La alta demanda blecimiento del protocolo de cultivo “in vitro”
hace necesario contar con protocolos para su del jengibre para la región centro chaqueña.
propagación “in vitro” que garantice un ele- Debido al contexto actual, este trabajo se
vado número de plantas con calidad gené- encuentra en etapa inicial, hasta el momen-
tica y fitosanitaria para iniciar con éxito una to los resultados que podemos mencionar
plantación.
204
SESIÓN 7
son los obtenidos del proceso de cultivo al Cascavel/PR.

estilo tradicional de ejemplares que serán b) Universidad Tecnológica Federal de Paraná,
usados como plantas madre. Para el cultivo Toledo, Brasil.
[email protected]
se usaron rizomas seleccionados de la ofer-
ta comercial de la localidad de Roque Sáenz
Peña, de ellos se tomaron como explantes Actualmente con el surgimiento de mi-
iniciadores las yemas axilares del rizoma. croorganismos resistentes a las drogas sin-
Esos explantes, se mantuvieron en agua co- téticas, se intensificó la búsqueda de nuevos
rriente, y al mostrar inicio de desarrollo se lo agentes antimicrobianos. Una de las alterna-
llevó a tierra colocándolos en macetas con tivas es la síntesis verde que investiga com-
sustrato conteniendo tierra con fertilizan- puestos bioactivos de extractos vegetales y
te GrowMix multipropósito. Éste proceso su interacción con nanopartículas de plata
mostró alto índice de contaminación en la (AgNP), ya que presentan amplio espectro
mayoría de las plántulas iniciadas, además de acción antibacteriana, incluso en concen-
de ser afectadas lo parte foliar por las tem- traciones muy bajas. El objetivo de este tra-
peraturas de la región. Luego se las colocó bajo fue sintetizar AgNP utilizando extracto
en espacios exteriores, al reguardo de las etanólico de Myrsine umbelata y evaluar el

temperaturas superiores a 35°C y con riego potencial antimicrobiano frente a las cepas
cada 48hs. Esta última modificación de pará- estándares Escherichia coli ATCC 25922, Sta-
metros nos permitió obtener ejemplares fo- phylococcus aureus ATCC 25923 y Candida
liados de 20 cm de altura. De los ejemplares albicans ATCC 10231. Para la obtención de
que se desarrollen adecuadamente se toma- los extractos etanólicos convencional y el
rán los explantes para el establecimiento del nanoparticulado (AgNP), las hojas se seca-
cultivo “in vitro” de la especie. ron a 40 ºC y se molieron en molino de cu-
chillos y el material foliar seco se añadió en
Palabras claves: JENGIBRE, MICROPROPAGA- una proporción de 1:10 (p/v) en alcohol etí-
CIÓN, CULTIVO IN VITRO, ZINGIBER OFICINALE. lico (P.A), mantenidos en un agitador rota-
torio durante 24 horas y sometidos a rotoe-
vaporación para eliminar el disolvente. Para
la síntesis de AgNP se preparó una solución
25BAV de NaOH 0,001 mol L -1, añadida en solución
de extracto etanólico de M. umbellata en el
Efecto antimicrobiano de rango de concentración de 0,1 a 10 mg mL-1
nanopartículas de plata y solución de AgNO3 entre 1,0 y 5,0 x 10 -3
mol L-1 como precursor de los iones de pla-
sintetizadas con Myrsine ta y manteniéndolosi la solución resultante
umbellata bajo calentamiento constante. Posterior-
mente, se realizó la prueba de microdilución
LASKOSKI, Larissa V.a; BATISTA, Joelma M.a; en caldo para determinar la concentración
BANDEIRA, Débora M. a; CORRÊA, Juliana M.a; inhibitoria mínima (CIM) y la concentración
EISING, Renatob; ROSSET, Jéssicaa; CANTON, bactericida y fungicida mínima (CBM/CFM)
Andressa G.a;PINTO, Fabiana G. S.a
para los extractos convencional y nanopar-
a) Laboratorio de Microbiología y Biotecnología. ticulado (AgNP). Como control positivo se
Programa de Maestría Conservación y Manejo
utilizó gentamicina para bacterias y nistati-
de Recursos Naturales - PPRN. Universidad Esta-
tal del Oeste de Paraná - UNIOESTE/Campus de
na para levadura. El metabolismo bacteria-
205
no se verificó a simple vista con el uso de 26BAV
cloruro de trifeniltetrazólico (TTC) al 0,5%.
En cuanto al potencial antimicrobiano, se
Potencial antimicrobiano
observó actividad bacteriostática y bacte- de extractos vegetales
ricida del extracto etanólico convencional etanólico y nanopartículado
sobre la cepa E. coli (CIM de 3,12 mg/mL y
CBM de 25 mg/mL), seguidas de las cepas de Musa X paradisiaca L.
C. albicans (CIM de 6,25 mg/mL y CBM de
25 mg/mL) y S. aureus (CIM de 12,5 mg/ CORRÊA, Juliana M.a ; BANDEIRA, Débora M.a ;
ml y CBM de 200 mg/ml), respectivamen- LASKOSKI, Larissa V.a ; BATISTA, Joelma M.a ; EI-
SING, Renato.b; ROSSET, Jéssica.a ; CANTON An-
te. Ya el extracto AgNP demostró actividad dressa G. a ; PINTO, Fabiana G.Sa;
bacteriostática (CIM de 0,125 µg/mL) so-
a) Laboratorio de Microbiología y Biotecnología.
bre E. coli y S. aureus, pero no demostró
Programa de Maestría Conservación y Manejo
actividad bactericida para ninguna de las de Recursos Naturales – PPRN. Universidad Es-
cepas testadas. Por lo tanto, el extracto tatal del Oeste do Paraná – UNIOESTE/Campus
AgNP presentó mayor inhibición cuando de Cascavel/PR.

comparado al convencional, siendo más b) Universidad Tecnológica Federal de Paraná,
eficiente en concentraciones más bajas Toledo, Paraná, Brasil.
para las bacterias testadas. Los resultados [email protected]
sugieren que el extracto de M. umbellata
representa una fuente alternativa soste-
La búsqueda por conocimiento y utiliza-
nible en la producción de nanopartículas
ción de elementos químicos de fuentes na-
con aplicaciones biotecnológicas como an-
turales en sustitución de los de orden quí-
timicrobianos. Además, el extracto AgNP
mico convencional, viene siendo cada vez
presenta elevada actividad antimicrobiana
más aplicado en diferentes áreas para mejor
debido a la sinergia entre los compuestos
aprovechamiento de los elementos disponi-
bioactivos vegetales y la plata, potencian-
bles en la naturaleza. La aplicación de estos
do el efecto bacteriostático sobre las cé-
compuestos para control sanitario se preten-
lulas microbianas. Aunque los resultados
de para diferentes cadenas productivas de
con el extracto de AgNP son prometedo-
animales con finalidad de consumo humano.
res, todavía son necesarios estudios adi-
Dentro de esa perspectiva, ese estudio tuvo
cionales para confirmar el potencial anti-
por objetivo sintetizar la AgNP utilizando ex-
microbiano de M. umbellata y evaluar la
tracto etanólico de Musa x paradisiaca L. y
estabilidad del extracto de AgNP.
evaluar el potencial antimicrobiano frente a
las cepas de bacterias patógenas de interés
comercial como Gram negativa Escherichia
coli - ATCC 25922 y Salmonella Enteritidis -
ATCC 13076; Gram positiva Staphylococcus
aureus - ATCC 25923. Para obtener el extrac-
Palabras claves: SÍNTESIS VERDE; NANOPAR-
TÍCULA DE PLATA; EXTRACTO VEGETAL. to , el material foliar seco se añadió en una
proporcíon de 1:10 (p/v) en etanol (P.A), se
mantuvo en un agitador rotatorio durante
24 horas y se sometió a rotoevaporación
para eliminar el disolvente. Los extractos
convencional y nanoparticulado (AgNP) se
206
analizaron en concentraciones que variaron
de 200mg/mL a 0,09 mg/mL y 1,25 µg/mL a
0,009 µg/mL, respectivamente. Para la sínte-
sis de AgNP se preparó una solución de NaOH
0,001 mol L -1, anãdida en solución de extracto
de Musa x paradisiaca L. en el rango de con-
centración de 0,1 a 10 mg mL-1 e solución de
AgNO3 entre 1,0 e 5,0 x 10 -3 mol L-1 como pre-
cursor de los iones de plata y manteniendo la
solución resultante bajo calentamiento cons-
tante. Posteriormente, se realizó la prueba de
microdilución en caldo para determinar la con-
centración inhibitoria mínima (CIM) y la con-
centración bactericida y mínima (CBM) para
los extractos convencional y nanoparticulado
(AgNP). La caracterización fitoquímica detectó
en el extracto la presencia de compuestos de

las clases de los alcaloides, flavonoides este-
roides. En cuanto al potencial antimicrobiano,
se observó actividade bacteriostática tanto del SESIÓN ESPECIAL
extracto etanólico convencional (CIM 50 a 12,5
mg/mL) comodel AgNP (CIM 1,25 a 0,625 µg/
mL) sobre todos los microorganismos analiza-
BIO – START UP
dos. No se ha demostrado la actividad bacte-
ricida del extracto convencional sobre S. En-
teritidis y el extracto AgNPfrente a S. aureus.
El extrato AgNP de Musa sp. fue superior y
eficaz promoviendo la acción bactericida total
y acción bacteriostática en el 75% de los mi-
croorganismos probados. La principal ventaja
de aplicación de extractos nanoparticulados
es la posibilidad de mejor perfomance y dis-
minución en la concentración de uso en los
ensauos, por presentar rendimento superior
cuando comparado al extracto convencional.
Aunque el uso del extracto de Musa X para-
disiaca L.resultóprometedor, ya que dio lugar
a partículas en la escala nanométrica, y con
acción antimicrobiana contra patógenos resis-
tentes a diversos antimicrobianos convencio-
nales, más estudios son necesarios para eva-
luar la estabilidad del extracto de AgNP.
Palabras claves: SÍNTESIS VERDE; NANOPAR-

TÍCULA DE PLATA; ACTIVIDAD ANTIMICRO-
BIANA.
207
SESIÓN ESPECIAL
SESIÓN ESPECIAL
Conferencia Sesión Especial: BioStart Ups

Vinculación entre la ciencia y el medio productivo:
impacto y beneficios mutuos

BINETTI, Ana G.
Instituto de Lactología Industrial, INLAIN (UNL-CONICET). Facultad de Ingeniería Química (FIQ,
UNL). Santiago del Estero 2829, 3000, Santa Fe, ARGENTINA.
[email protected]
La aplicación de la investigación, de algún modo, permite a los investigadores un cambio

de actitud, dando otro sentido al trabajo de laboratorio. Esta charla pretende dar un enfo-
que sobre la importancia de impulsar la vinculación entre los grupos de investigación y el
sector productivo, planteando algunas pautas para lograr exitosamente este acercamiento
a través la comunicación efectivas y la adaptación del trabajo de investigación a las necesi-
dades puntuales de cada industria (respuesta rápida, confianza, prudencia en la difusión de
resultados, etc.). Estos cambios en la forma de pensar y abordar las ideas permiten lograr
un acercamiento a la realidad industrial, y favorecen el surgimiento de nuevas líneas de
investigación, con un fuerte correlato práctico.
208
SESIÓN ESPECIAL
SESIÓN ESPECIAL
Conferencia Sesión Especial: BioStart Ups

Desarrollé una tecnología interesante.
¿Y ahora? ¿Transfiero o emprendo?
FELDMAN, Pablo
Director de Vinculación Tecnológica en Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas,
Univ. Nacional de Rosario.
Esta presentación intentará disparar una conversación desestructurada, pero no por ello
menos necesaria, sobre el rol de la transferencia de tecnología en el Sistema Nacional de
Ciencia, Tecnología e Innovación (SNCTI). Para ello, se abordarán estas y otras preguntas:
i) Por qué la mayor parte de nuestros desarrollos muere dentro de las paredes del labo-
ratorio, o en un paper, o en una presentación a un Congreso (como este!)? Qué alternativas
propone la transferencia de tecnología para devolverle a la sociedad una parte de lo que se
invirtió en nuestro trabajo?
ii) Vale la pena patentar? Quién es el titular de la propiedad intelectual que nosotros
desarrollamos? Qué alternativas tengo? Qué ventajas tengo? El arte imitando a la vida: el
caso real que inspiró el episodio de Los Simpsons “Llamarada Moe”.
iii) Vale la pena emprender? Factores a tener en cuenta. Buenas y malas noticias. La
trampa de los incentivos estatales: el “Triángulo de Sábato-Botana” vs el “Diagrama de
Venn de la Innovación”. Consiguiendo 2 recursos fundamentales: gente y dinero. Apoyo de
programas de innovación abierta, companybuilders, incubadoras y/o aceleradoras.
209
SESIÓN ESPECIAL
1BSU cherichiacoli. La producción fue realizada a

37ºC y 250 rpm empleando Erlenmeyer con-
Desarrollo de un teniendo medio LB e IPTG 1 mM como in-
inmunoensayo de flujo ductor. Posteriormente, la proteína fue pu-
lateral para detección de rificada mediante cromatografía de afinidad
(IMAC-Ni+2) y empleada en la puesta apunto
anticuerpos COVID19 del inmunoensayo. Al efecto, se utilizó un
diseño sandwich en donde los anticuerpos
BEZUS Brendaa, BRACHO Juan P.a,b, RAMÍREZ anti-Np IgG/IgM (humanos) reaccionan con
Andrea C.a, HARGUINDEGUY Inés.c, MANESE el oro coloidal conjugado a anticuerpos an-
Victoria.c, CAVALITTO Sebastián F.a,c, ORTIZ Gas-
tón E.a,c ti-humano (cabra) y posteriormente captu-
rados por el antígeno recombinante Np dis-
a) Centro de Investigación y Desarrollo en
Fermentaciones Industriales (CINDEFI), UNLP, pensado en la línea de testeo. Como control
CCT La Plata-CONICET, Calle 47 y 115, 1900- del ensayo se dispensó anticuerpo anti-ca-
La Plata 1900, Provincia de Buenos Aires, bra (conejo) en las líneas de control. Para
Argentina optimización del ensayo se realizó un dise-
b) Comisión de Investigaciones Científicas de la

Provincia de Buenos Aires (CIC), Calle 526, 1900 ño experimental de tipo compuesto central,
La Plata, Provincia de Buenos Aires, Argentina cuyas variables fueron: concentración de
c) BambooBiotech SAS, RomuloNaón 3237, BSA en el bloqueo del conjugado (0,75-1,25
1430 CABA, Provincia de Buenos Aires,
Argentina. %p/v); BSA en el bloqueo de la membrana
[email protected] (0,5-1,5 %p/v), BSA en la formulación de la
proteína Np (0,25-0,75 %p/v) y caseína en el
bloqueo de la membrana (0,25-0,75 %p/v).
El Coronavirus SARS-CoV2 causa el síndro- Las tiras reactivas resultantes, se ensaya-
me respiratorio COVID-19, declarado pande- ron empleando sueros reactivos (SR) y no
mia por la OMS en el año 2020, se caracte- reactivos (SNR) para COVID-19 y se registró
riza por tener una nucleocápside proteica la intensidad de color (señal) en la línea de
que envuelve el ssARN viral. Estas proteínas, testeo como señal específica en SR e ines-
generan una buena respuesta humoral de pecífica en SNR. La condición óptima se de-
anticuerpos IgG/IgM que pueden ser utiliza- terminó como aquella que minimiza la señal
dos para identificar personas infectadas. La inespecífica y maximiza la específica. Como
proteína Np de la nucleocápside SARS-CoV2 resultado, se obtuvo de forma recombinan-
posee poca homología con nucleoproteínas te la proteína Np de SARS-CoV2 y pudo ser
de otros coronavirus y por ello se convierte empleada con éxito en la elaboración de un
en un blanco ideal para el desarrollo de sis- prototipo de prueba diagnóstica. Del diseño
temas diagnósticos basados en inmunoen- factorial, se determinó que las condiciones
sayos. En particular, el desarrollo de tecno- óptimas para la elaboración de las tiras re-
logías del tipo point of care (PoC) permiten activas son: 0,75 %p/v de BSA en el bloqueo
detectar rápidamente personas infectadas del oro conjugado; 0,6 %p/v de BSA en la
en los puntos de atención primaria. Por ello, formulación de la proteína y 0,6 %p/v caseí-
el objetivo de este trabajo fue desarrollar un na más 1 %p/v de BSA para el bloqueo de
inmunoensayo de flujo lateral (IFL) que per- membrana. En estas condiciones, se logró la
mita la detección de anticuerpos IgG/IgM detección de anticuerpos IgG/IgM en mues-
anti-Np en muestras serológicas de forma tras serológicas con una especificidad y sen-
rápida y sencilla. Para ello, la secuencia de la sibilidad diagnóstica del 87% y 95%, respec-
proteína Np fue clonada y expresada en Es- tivamente. Finalmente, la rapidez y sencillez
210
SESIÓN ESPECIAL
del ensayo aquí presentado surge como una y nutrientes. La aplicación de biofertilizantes
alternativa para la detección de personas in- a base de microorganismos con propiedades
fectadas en los puntos de atención primaria. que promueven el crecimiento vegetal (PGP)
se presenta como una alternativa promete-
dora para la producción sustentable de culti-
Palabras Claves: COVID-19; SARS COV-2; IN-
MUNOENSAYO DE FLUJO LATERAL (IFL); vos y la regeneración de suelos degradados.
POINT OF CARE (POC). En estudios previos se seleccionaron y estu-
diaron dos cepas endófitas esporulantes de
Bacillusaltitudinisaisladas de plantines de
2BSU yerba mate en la provincia de Misiones. Es-
Biofertilizantes: validación tas cepas presentaron propiedades capaces
de estimular el crecimiento vegetal, evalua-
y ensayos de trazabilidad das in vitro y en vivero en plantines de yerba
de las cepas PGPB mate. Para continuar con la investigación se
propusieron como objetivos generales va-
Bacillusaltitudinis 19RS3 lidar el efecto de las cepas de B. altitudinis
y T5ST4 sobre cultivos de
T5S-T4 y 19RS3 en cultivos a campo y rea-

yerba mate lizar estudios de trazabilidad que permitan
monitorear la colonización y persistencia de
ambas cepas en plantines de yerba mate.
CORTESE Iliana J. ; ONETTO Andrea L. ; BICH
a,b a,b
Gustavo A.a,b; GORTARI Fermina,b; SVIERCZ Para ello, se ensayó el efecto de las cepas
OLIVETTI Oriel A.a; BOYCHO Marisaa; ZAPATA de B. altitudinis T5S-T4 y 19RS3 sobre planti-
Pedro D.a,b; CASTRILLO María L.a,b; y LACZESKI
nes de yerba mate en condiciones de vivero
Margarita E.a,b,c
que luego fueron llevados a campo, como
de Ciencias Exactas Químicas y Naturales. así también sobre plantaciones adultas en
Instituto de Biotecnología Misiones “Dra. condiciones de suelos aptos para el cultivo
María EbeReca” (INBIOMIS). Laboratorio y en suelos degradados. A partir de cultivos
de Biotecnología Molecular (BIOTECMOL). bacterianos de 24 h en medio líquido (caldo
Misiones, Argentina.
b) CONICET (Centro Nacional de Investigaciones nutritivo), se realizó una suspensión en agua
Científicas y Tecnológicas).Buenos Aires, corriente hasta llegar a la concentración de
Argentina. 1x108 UFC/ml correspondiente a la esca-
c) Universidad Nacional de Misiones. Facultad
la 0,5 de McFarland. En los ensayos sobre
de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales.
Cátedra de Bacteriología. Posadas, Misiones, plantaciones adultas se evaluaron tres tra-
Argentina. tamientos (B. altitudinis T5S-T4, B. altitudi-
[email protected] nis 19RS3, y B. altitudinis T5S-T4 + B. altitu-
[email protected]
dinis 19RS3 en partes iguales), y un control
negativo (sin inoculación). En los ensayos
En la provincia de Misiones, la yerba mate en vivero se incluyeron además un control
(Ilexparaguariensis St. Hil.) es un cultivo de positivo biológico (cepa PGPR comercial,
gran importancia económica. Sin embargo, Azospirillum brasiliensesp. 245), y un control
el sistema agrícola de monocultivo adopta- positivo químico consistente en la aplicación
do, sobre todo en Argentina y Paraguay, pre- de 1 gr/plantín de Minicote® (13-6-16 +1,4
senta inadecuadas prácticas de manejo de MgO + 10 S) por única vez al inicio de las
suelo, que aceleran su erosión, compacta- inoculaciones. Para los ensayos en vivero se
ción, progresiva pérdida de materia orgánica emplearon 50 plantines con buen aspecto fi-
211
SESIÓN ESPECIAL
tosanitario para cada tratamiento, mientras por lo que se seguirán realizando medicio-
que para los ensayos a campo se emplearon nes periódicas en el futuro.
45 plantas adultas ubicando cada tratamien- Por otra parte, a efectos de realizar estu-
to en iguales condiciones de intensidad lu- dios de trazabilidad de las cepas evaluadas
mínica. Los plantines de vivero fueron ino- se secuenció, ensambló (mediante los pro-
culados por la técnica de riego directo y las gramas SPAdes, ABySS, Velvet, Soap DeNo-
plantaciones a campo fueron inoculadas por vo2, Geneious y CLC GenomicsWorkbench)
aspersión utilizando la dilución bacteriana. y anotó (utilizando PROKKA, RAST y KAAS)
El procedimiento de inoculación fue repeti- el genoma completo de las cepas B. altitudi-
do en 3 ocasiones con 2 semanas de diferen- nis T5S-T4 y 19RS3. Se buscaron secuencias
cia. A los plantines de vivero se les realizaron génicas únicas para cada cepa mediante la
mediciones de parámetros asociados al cre- comparación entre ambos genomas y otros
cimiento vegetal: altura, número de hojas, genomas de Bacillussp. disponibles en la
número de ramificaciones, diámetro de cue- base de datos del National Center forBiote-
llo, contenido de clorofila, área foliar y pesos chnologyInformation (NCBI). Se selecciona-
secos; mientras que en las plantas adultas ron secuencias de una longitud adecuada

se midieron: cantidad de hojas y ramas co- como blancos de amplificación, y mediante
sechadas, contenido de clorofila (Clorofilio, el uso de la plataforma Primer3 se diseñaron
Cavadevices) e intersección de radiación so- los pares de cebadores específicos para cada
lar (Ceptómetro, Cavadevices). cepa. Estos fueron analizados empleando el
A partir del ensayo realizado sobre planti- programa OligoAnalyzer 3.1, y se simuló una
nes de yerba mate en condiciones de vivero, reacción en cadena de la polimerasa (PCR) in
se observó que los tratamientos con bioino- silico con los genomas de B. altitudinis T5S-T4
culantes podrían reemplazar al fertilizante y 19RS3 para evaluar el correcto funciona-
químico con el cual no se observaron dife- miento de los cebadores diseñados. Final-
rencias estadísticamente significativas para mente, se estableció un ensayo de inoculación
los parámetros de altura, diámetro de cue- sobre plantines en vivero siguiendo el proce-
llo, número de hojas, número de ramifica- dimiento aplicado en los ensayos anteriores, y
ciones, peso seco de parte aérea, peso seco se realizaron muestreos sucesivos de suelo y te-
de raíz, volumen radical y clorofila medidos jido radical a fin de evaluar la persistencia de las
previamente a su pasaje a campo. Se des- cepas en el tiempo. A partir de la extracción de
taca además que los tratamientos con los ADN de suelo y tejido radical, se optimizó la am-
bioinoculantes ensayados individualmente plificación por PCR y se obtuvieron amplicones
mostraron diferencias estadísticamente sig- con el tamaño correspondiente a los esperados
nificativas y positivas con respecto al ferti- para los cebadores diseñados. Estos resultados
lizante químico al evaluar la sobrevivencia sugieren que los cebadores diseñados permi-
de los plantines previo al pasaje a campo. ten la detección de las cepas de B. altitudinis
Para el ensayo en plantaciones adultas en T5S-T4 y 19RS3 en raíces y suelo inoculados,
condiciones de suelos aptos para el cultivo por lo que serán aplicados en futuros ensayos
y en suelos degradados se comenzaron a de trazabilidad del bioinoculante en condiciones
observar diferencias estadísticamente signi- de campo.
ficativas para algunos parámetros medidos
en forma periódica como la clorofila; sin em- Palabras claves: BACILLUSSPP., BIOINOCULAN-
bargo, este tipo de ensayo requiere de un TE, ILEXPARAGUARIENSIS ST. HIL, ENSAYOS IN
seguimiento más prolongado de los cultivos, VITRO E IN VIVO, CEBADOR CEPA-ESPECÍFICO
212
Índice de Autores
A BAZÁN, LUCAS A. -80,167
BECCARIA, ALEJANDRO -22,50,73,90
ACIÉN FERNÁNDEZ, FRANCISCO G. -116 BENEDETTI, GONZALO -47
ACOSTA, GABRIELA A. -94 BENIMELI, CLAUDIA -80,135,164,167
ACOSTA, GERARDO -183 BENITEZ, SILVANA F. -161
ADACHI, O. -62 BENZZO, MARÍA T. -25,28
ADET, CYNTIA -80,167 BERGAMINI, CARINA V. -52,72,79,141,162
AGUIRRE, ALBERTO -184 BERGOTTINI, VERÓNICA M. -111
AGUIRRE, ANDRÉS -141 BERNHARDT, DANA C. -111
AJOT, HIPÓLITO F. -115 BESBES, N. -48
ALBARRACÍN, VIRGINIA H. -141,162 BEZUS, BRENDA -110,125,210
ALBERICIO, FERNANDO -183 BICH, GUSTAVO A. -23,31,53,59,180,211
ALBERTÓ, EDGARDO -149 BINETTI, ANA G. -52,208
ALCONADA, TERESA -128 BIRENBAUM, JOAQUÍN -98
ALDERETE, MICAELA E. J. -75 BITTAR, SALIMISSAM -177
ALE, ELISA C. -52 BLARIZA, MARÍA J. -186,193
ALFONSO, ANDRÉS J. -144 BLASCO, MARTIN -68,114
ALNOCH, ROBSON C. -55,57,58 BÓ, GABRIEL -16
ALONSO, LEONARDO G. 98 BOAN, AGUSTÍN F. -179
ALVARENGA, ADRIANA E. -27,61 BOHÉ, ANA -138

ÁLVAREZ, CHRISTIAN -173 BOLÍVAR, J.M. -48
ÁLVAREZ, PAOLA -130 BONANNI, PABLO S. -114
ÁLVAREZ SERAFINI, M.S. -48 BONGIOVANI, NATALIA -38,77
ALVES, LUIS F. A. -33,34 BONGIOVANNI, SILVESTRE -151
AMARANTO, MARILLA -95,96 BORDAQUIEVICH, MAYRA F. -122
AMERIO, NATALIA S. -23,31,59 BOYCHO, MARISA -211
AMORÓS, LESLIE -103 BRACHO, JUAN P. -110,171,210
ANDREOLLI, LUCIANA -88,176 BRECCIA, JAVIER D. -143
ANDRIOLO, LUISINA -188 BRIGNOLE, TOMÁS A. -188
ANTUÑA, SEBASTIÁN -16 BRUERA, FLORENCIA A. -160
APARICIO, DANIEL -164 BRUNO, MARIELA A. -133
AQUINO, M. D. -15 BÜRGI, M.D. MILAGROS -18,141,162
ARAUJO SOLA, EVELYN N. -155 BURNS, PATRICIA -52
ARBINI, GIANINA -197 BUSALEM, JUAN -114
ARECO, MARÍA M. -144 BUSTILLO, SOLEDAD -93
AREDES FERNÁNDEZ, PEDRO A. -51 BUSTO, VÍCTOR D. -89
ARES, ALICIA E. -160 BUSTOS, LUCIANA B. -154
ARGUMEDO MOIX, MAXIMILIANO C. J. -89 BUTIUK, ANA P. -62
ARISMENDI SOSA, ANDREA C. -123
ARTURI, TATIANA -136
ASSAD, FODDA -126 C
ASTORECA, ANDREA -150
ASTORGA, MARCOS -132 CABALARO, LUDMILA M.L. -40
AYALA SCHIMPF, ALAN R. -146,147 CABALLERO, MARÍA. S -79
CABEZUDO, I. -26
B CACCIATORE, LUIS C. -188
CAMACHO, ALBERTO G. -132,197
BAGLIONI MICAELA -143 CAMPERI, SILVIA A. -175,183
BAGNATO, CAROLINA -145 CAMPOS, ELEONORA -68
BANDEIRA, DEBORA M. -187,205,206 CANTON ANDRESSA G. -187,205,206
BARENGO, MARCELA P. -23,31,59 CAPRIOTTI, NATALIA -103
BARRA, JOSÉ L. -95,96 CARDOSO SCHWINDT, VIRGINIA -38
BARREDO VACCHELLI, GABRIELA R. -175,183 CARMARÁN CECILIA C. -35
BARRIO, DANIEL A. -112 CARRARA, CARLOS R. -54
BARROETAVEÑA, CAROLINA -45 CASÁ, NAHUEL -130
BARTUCCI, SANDRA L. -142 CASTELLANOS DE FIGUEROA, LUCÍA -199
BARUA, CELESTE -170 CASTELLI, MARÍA V. -70
BATISTA, JOELMA M. -187,205,206 CASTELO BRANCO, PAULO -194,196
BATISTELA, MARA E. 72 CASTRILLO, MARÍA L. -23,31,53,59,147,180,211
213
CATTANEO, LUCIANO -16 FAVIER, GABRIELA I. -123
CAVAGLIERI, LILIA -151 FELDMAN, PABLO -209
CAVALITTO, SEBASTIÁN F. -110,125,136,171,210 FERNÁNDEZ LAHORE, MARCELO -92
CAVELLO, IVANA A. -125,136 FERNANDEZ, MARIA E. -166
CEAGLIO, NATALIA -16,101,105 FERNÁNDEZ, PABLO M. -115
CERIANI-NAKAMURAKARE, ESTEBAN D. -35 FERNANDINO, JUAN I. -179
CESANO, MARGARITA -142 FERRARO, GISELA -144,145
CHAMORRO, ESTER R. -139 FERREIRA, MARÍA L. -55,57,58
CHAMORRO, SUSANA -182 FERREIRA, TIAGO T. -33,34
CHELALICHE, ANÍBAL S. -61 FERRELLI, M. LETICIA -103
CHIOTTA, M. LAURA -150 FETTER, ISABELA -33,34
CISINT, JUAN CARLOS -152 FILIPPI, MARCELA V. -134
CLAVER, SANTIAGO -104 FILIPPONE, MARÍA PAULA -198
CLEBOT, ALDANA C. -166 FIORAMONTI, SILVANA -54
CLEMENTE, MARIANA -178 FIORAVANTE, CYNTHIA A. -186,193
CLEMENTZ, ADRIANA -24 FLORES CINTIA -199
COLETTO, MAURICIO -38 FLORES SILVIA K. -131
COLIN, IVANA -38,77 FLORES, BELEN -203
COLIN, VERÓNICA L. -120,165 FLORES, CINTIA B. -200
COMELLI, RAÚL N. -25,28,40,46 FLORES, MARÍA L. -116
CONDE MOLINA, DEBORA -78 FONSECA, MARÍA I. -65,76,94,122,146,147,158,
CONIGLIO, ROMINA O. -118,122,149,170 159,161,170
CORDOBA, PATRICIA A. -126 FONTANA, DIEGO S. -13

CORREA OLIVAR, GABRIELA -52 FONTICELLI, MARIANO -103
CORRÊA, JULIANA M. -187,205,206 FOUGA GASTÓN -138
CORTESE, ILIANA J. -180,211 FRESCURA, JULIETA M. -39
CORTIZO, LORENA V. -172 FRISÓN, LAURA N. -155
COSTA GUTIERREZ, STEPHANIE -164 FUENTES, M. SOLEDAD -80,167
COTABARREN, JULIANA -104
CRISTOFOLINI, ANDREA -151
CROSETTI, VALENTINA -140 G
CUELLO, DIEGO -198
CUELLO, MARÍA C. -139 GABBANELLI, NADIA -189
CURUTCHET, GUSTAVO -136,138,144,156 GALETTO, CECILIA S. -26
GALVAGNO, MIGUEL A. -78
D GARAY, ERNESTO S. -13
GARCIA-OCHOA, FÉLIX -48,82
DE ESCALADA PLA, MARINA F. -130,131
GAROLERA, BETSABÉ -115
DE OVALLE, STEFANI -125
GARRIDO, MERCEDES -68
DE PAULA, CAROLINA -194,196
GATTI, MARCELA -132,197
DE SOUSA, ELISA -103
GEI, ANABELLA -153
DEL GOBBO, LUCIANA M. -120
GEIER, FLORENCIA -104
DI SANTO MEZTLER, GABRIELA P. -41
GEORGE, GUILLERMO A. -79
DÍAZ, GABRIELA V. -122,149
GHIRINGUELLI, PABLO D. -126
DÍAZ-BARRERA, ALVARO -20
GIACOMETTI, ROMINA -194
DIETRICH, JULIAN -121
GIL ROLÓN, MARTÍN E. -46
DONDO, RODOLFO -22
GIL, ROCÍO M. -66,87,88,154,176
DRUMOND, MARIANA M. -194,196
GIMÉNEZ CLAUDIA Y. -108
DURÁN, LUDMILA -154
GIMÉNEZ, PAULA -79
E GIUDICESSI, SILVANA L. -175
GIULIETTI, ANA M. -89
ECHARTE, MERCEDES -189 GIUNTA, VALERIA -114
EISING, RENATO -187,205,206 GODINO, AGUSTINA -95,96
ENCALADA-ROSALES, PAULA -184 GÓMEZ JOUSSE, MICAELA -145
ERBETTA, ELISA -189 GOMEZ, EMILIO -82
ERMILIO, ALEJO E. -127 GONZALEZ HOLC, VICTORIA G. -61
ERRASTI, MARÍ E. -172 GONZÁLEZ, ARIELA J. -202
GONZÁLEZ, GABRIELA C. -45
F GONZALEZ, MATÍAS -14
GONZALEZ, SAMANTA K. -135
FABERSANI EMANUEL -152 GONZALEZ, SERGIO MIGUEL -177
FAIT, MARÍA E. -41 GONZÁLEZ-LOYO, JUAN F. -185
FARIÑA, JULIA I. -94 GONZALEZ-POMBO, PAULA -125
214
GORTARI, FERMIN -211 LEGISA, DANILO -68
GRASSELLI, MARIANO -108 LEIVA ALANIZ MARÍA J. -63,64,69,74,196
GRASSI, EMANUEL M. -118 LENCINAS, MARCOS -199,200,203
GRILLO, PATRICIA D. -41 LEÓN PELÁEZ, ÁNGELA -128
GRIMOLIZZI, MARÍA C. -156 LEONARDI, RODRIGO J. -40,46,83,84,86
GROFF, MARÍA C. -67 LEOPOLD, MARÍA J. -105
GUERRA, LAUREANA -24 LESCANO MARIELA -138
GUEVARA, MARÍA G. -129 LEVIN, LAURA N. -161
GUGLIOTTA, AGUSTINA -13 LEWKOWICZ, ELIZABETH S. -124
GUTIÉRREZ, MARÍA DEL CARMEN -89,130 LIGGIERI, CONSTANZA S. -133
GUZMÁN, CRISTIAN E. -173 LILLIO, CRISTIAN -103
GUZMÁN, VICTORIA M. -25 LIMA GONZALO, LAURA G. -153
LITWIÑIUK, SERGIO L. -186,193
LLADÓ, CECILIA -203
H LOIS-MILEVICICH, JULIETA -130
LOPES, PEDRO -194,196
HAIDAR, CARLA N. -21,37,47 LOPEZ DÍAZ, FERNANDO -13
HARGUINDEGUY, INÉS -110,210 LOPEZ SILVIA N. -70
HEINRICH, JOSUÉ M. -83,84,86 LÓPEZ, ANA C. -27
HERMET, MELISA -41 LÓPEZ, CINTHYA A. M. -149
HERRERA SEITZ, MARÍA K. -50 LÓPEZ, DÉBORA N. - 21
HERRERA, KEVIN F. -181 LOPEZ, LAURA M.I. -172
LOPEZ, M. FLORENCIA -103
HINTERMEISTER, EMILIA -90

HONORÉ, STELLA -152 LORENZO, MAXIMO -189
HYNES ERICA R. -72,79,141,162 LOYEAU, PAULA A. -54
LUCAS, LAURA B. -117
LUNA MERCADO, LUIS EDUARDO -177
LUNA, MARÍA F. -27
I
IANNONE, LEOPOLDO J. -78
IBAÑEZ, MANUEL V. -83,84,86 M
IGLESIAS-GARCÍA LUCÍA C. -183
IRIARTE, HEBE J. -123 MACSEMCHUK, NAZARENA A. -186,193
IRIBARREN, ADOLFO M. -124 MAGUNA, FABIANA P. -202,204
ITURMENDI, FACUNDO -38,77 MAIDANA, SILVANA A. -62
MANASSERO, AGUSTINA -95
MANCHA AGRESTI, PAMELA -63,74,194,196
MANESE VICTORIA -210
J MANUALE, DEBORAL.- 90
MANZO, RICARDO M. -155
JIMÉNEZ VEUTHEY, MARIANA -116 MARQUEZ, ROCÍO B. -146
JOCHEN, SCHMID -9 MÁRQUEZ, VANINA -22,73
JUNCAL, LUCIANA -103 MARTÍN, MARÍA L. -87,154
MARTÍNEZ CERON, MARÍA C. -175
MARTINEZ JIMÉNEZ, ALFREDO -30
K MARTÍNEZ, IRENE -142
MARTÍNEZ, LUCIANO J. -141,162
KHAWAM, JORGE N. -28 MARTINI, GEORGINA -93
KRAMER, GUSTAVO R. -160 MARTOS, MARÍA A. -62
KRAMER, LUIS F. -53 MATEUCCI, RICARDO -130
KRATJE, RICARDO B. -13,18 MATTAR DOMINGUEZ, MARÍA A. -123
KRIEGER, NADIA -55,57,58 MATURANO, PAOLA -63,64,69,74,194,200,203
KUCHEN, BENJAMÍN -66,74,87,88,154,176 MAZZAFERRO, LAURA S. -143
MAZZINI, FLAVIA -192
MC CALLUM, GREGORIO J. -98
MEDINA, MARIANO L. -156
L MEDINA, SANDRA -198
MEDRANO, M. -102
LACZESKI, MARGARITA E. -180,211 MEDRANO-BARBOZA, JOHANNA L. -181,184,185
LADERO, M. -48 MEINI, MARÍA R. -26,70
LAIGLECIA, JUAN I. -38,77 MELNICHUK, NATASHA -70
LASKOSKI, LARISSA V. -187,205,206 MENDOZA ZELIS, PEDRO -103
LAVORATO, GABRIEL -103 MENEGON, MALEN -101
215
MENZELLA, HUGO G. -141 PERETTI CANALE, MARÍA V. -50
MESTRE FURLANI, MARÍA V. -63,64,69,74 PEREYRA, CARINA -150,151
MICHALUK, ARIEL -99 PÉREZ ZAMORA, CRISTINA -99
MILDE, LB. -159 PÉREZ, MARÍA DE LOS ÁNGELES -134
MINOIA, JUAN M. -183 PERÍA, MARA E. -32,35
MIRANDA, MARÍA V. -98 PERNIGOTTI, MARTÍN -95
MIRETTI, MARCOS M. -186,193 PEROTTI, MARÍA C. -79
MODINI, LAURA B. -73,169 PESCE, VIRGINIA M. -199,200,203
MOLINA, MELISA A. -146,159 PESCUMA, MICAELA -20,45
MONGE, MARÍA DEL PILAR -150,151 PETRIGNANI, DIEGO B. -63,64,69,74
MORCELLE, SUSANA R. -41 PETRUCCELLI, SILVANA -109,190,192
MORELLI, MATÍAS N. -127 PIDHIRNYJ, MARÍA I. -50
MORILLA, ESTEBAN A. -43,44 PIDRE, MATIAS -103
MORILLAS ESPAÑA, AINOA -116 PIERMARIA, J. -102
MOURE, M. CANDELA -128 PILA, ANDREA N. -139
MOYÓN, JENNIFER -182,184,185 PILDAIN, M BELÉN -15,45
MUÑOZ, SILVINA V. -197 PINTO, FABIANA G. S. -187,205,206
MUSSIO PABLO E. -106 PIZARRO, ANA V. -169
MUTTI STEGMANN, PAULA -43 ,44 POLTI, MARTA A. -158,164
PORTILLA, DANIELA -182
N PRADOS, BELÉN -138
PRAT, AGUSTINA -41
PRETZ, FLORENCIA -138

NALLY, CRISTINA -200,203
NALLY, MARÍA C. -74,199 PRIETO, CÉSAR C. -106
NAVARRO, JUAN CARLOS -182,184,185 PRIETO, CLAUDIO -13,16
NERLI, BIBIANA B. -21,93
NORIEGA, SANDRA E. -67 Q
NOVELLI POISSON, GUIDO -78
NUÑEZ, MARÍA A. -75 QUINTERO, JUAN P. -79
QUIROGA ZINGARETTI, ADRIANA E. -76
O QUIROGA, MARINA -76
OBREGÓN, WALTER D. -104 R

OCAMPO, CAROLINA GABRIELA -190
OCANTE, TERESA A. -135 RAMÍREZ, ANDREA -110,171,210
OGGERO, MARCOS R. -10,18,105 RAMÍREZ, JOSÉ R. -181
OLISZEWSKI RUBÉN -152 RAMÍREZ, NOELIA S. -134
OLMOS, NAHUEL -130 RAMÍREZ-IGLESIAS, JOSÉ R. -182,184,185
OMARINI, ALEJANDRA -143 REBAGLIATI, INÉS R. -117
ONETTO, ANDREA L. -180,211 RESTELLI, MARÍA F. -118
ONS, SHEILA -103 RESTUCCI, FERNANDO. E. -109
ORTELLADO, L. E. -65 REY, CONSTANZA -192
ORTÍZ, GASTÓN E. -32,35,110,171,210 RIPETTA, SOL -112
ORTIZ, OSCAR A. -67 RIVERO, ROMINA E. A. -202
OZÓN, BRENDA -104 RIVERO, S. -102
ROBLEDO, SEBASTIÁN -150
P ROCHA PARRA, ANDRES F. -38,77
ROCHA PARRA, DIEGO F. -77
P. MALPIEDI, LUCIANA -21,93 RODRIGUEZ GASTON, JORGELINA A. -153
PADRÃO, EDUARDA -194,196 RODRIGUEZ SIMÓN, CARLOS N. -114
PALMIER, MAXIMILIANO -83,86 RODRIGUEZ TORRES, CLAUDIA -103
PARISI, MÓNICA G. -153 RODRÍGUEZ, AILÉN N. -50
PAROLDI, EMILIO H. -66 RODRÍGUEZ, LAURA A. -66,87,88,154,176
PARRA, MICAELA -153 RODRÍGUEZ, LETICIA -203
PASCUAL, LOURDES I. -123 RODRIGUEZ, MARÍA C. -16,101,106
PASQUEVICH DANIEL -138 RODRÍGUEZ, MARÍA E. -108
PASSUCCI, VICTORIA -144 ROJAS, LAURA N. -126
PEDREGAL, T. -48 ROJAS, M. FLORENCIA -52
PEDROZO, LINA P. -199 ROJAS, NATALIA L. -30,32,35,39,124
PEDROZO, PAULA -200,203 ROMANINI, DIANA -24,26,70
PELLEGRINI MALPIEDI, LUCIANA -37,43,47 ROMANOWSKI, VÍCTOR -103
PEPE, ALFONSO -129 ROMERO, EDUARDO R. -75
PERALTA, GUILLERMO H. -52,72,14,162 ROSALES SORO, MILAGRO -164
216
ROSSET, JÉSSICA -187,205,206 TORRESI, PABLO A. -90
ROSSI, ALEJANDRO O. -188 TORTORA, MARÍA L. -75
ROSSO, ADRIANA M. -153 TOSSOLINI, ILEANA -13
ROSSO, MARÍA C. -126 TRAVERSO, LUCILA -103
ROSSOTTI, MARTINA -104 TUBIO, GISELA -43,44,47
RULLI, MACARENA M. -165 TUFO, ANA E. -156
RUSCASSO, FLORENCIA -136
RUSCITTI MARCELA -14 U
UTHURRY, CARLOS -38
S
SABATIÉ, ALEJANDRO -41
V
SADAÑOSKI., MARCELA A. -158,160,161 VAILLARD, SANTIAGO E. -101
SAEZ, JULIANA M. -135 VAILLARD, VICTORIA A. -101
SALESE, LUCÍA -133 VALDEZ HUGO A. -108
SALVATIERRA, KARINA -147 VALENTI MELINA -14
SAMAN, CANDELA -104 VARGAS MERCEDES -64
SÁNCHEZ CARNERO, MARÍA A. -54
VAZQUEZ FABIO -63,64,69,199,203
SÁNCHEZ ZURANO, ANA -116
SÁNCHEZ, DANIEL A. -55,57,58 VAZQUEZ, SUSANA. -156,175
SANCHEZ, ESTEBAN A. -90 VELA GUROVIC, MARÍA S. -100,121
SÁNCHEZ, GONZALO E. -199 VELÁZQUEZ, JUAN E. -160
VENEGAS TARANCÓN, STEFANÍA -198
SÁNCHEZ, MIRNA L. -108

SÁNCHEZ, SARA -152 VERGARA, PRISCILLA -82
SANTADER, ESTELA DEL VALLE -177 VERGARA, SILVIA CRISTINA -63,64,69,74,194
SANTANA, ANELISE -87,154 VERICAT, CAROLINA -103
SANTILLAN, JULIA Y. -124 VICECONTE, FÁTIMA R. -100
SANZ SMACHETTI, MARÍA E. -189 VIEJOBUENO, JOSEFINA -115
SAPARRAT, M. C. N. -15 VIGNOLLES, FLORENCIA -192
SCAGLIA, GUSTAVO -67 VILLALBA LAURA L. -27,31,53,59,65
SCHAPOVALOFF, MARIA E. -33 VILLAR, JUAN C. -82
SCHILARDI, PATRICIA -103 VILLARRAZA, CARLOS J. -16
SEDE LUCENA, BRENDA -45 VILLECCO, MARGARITA B. -51
SELUY, LISANDRO G. -25,28,46 VINDEROLA, GABRIEL C. -54
SGROPPO, S. -159 VITALE, IGNACIO -22
SIERRA-IBARRA, ESTEFANÍA -30 VOGET, CLAUDIO -38
SILVA, BRUNO -196
SILVA, FERNANDA M. -99 W
SILVA, NOELIA E. -131
SMITH, IGNACIO -98 WAGNER EVELYN -30,32,35
SNOUSSI, Y. -48 WANDEL PETERSEN, VALENTINA -18
SOLA, AGUSTÍN -140 WOLMAN, FEDERICO J. -98
SOLOAGA, MARÍA A. -126
SPAGNOLETTI, FEDERICO -194 Y
SPANO CRUZ, MARÍA A. -126
SPOTTI, MARÍA -54,79 YORI, JUAN C. -90
STIVALA, MARIA G. -51
STUDDERT, CLAUDIA A. -50 Z
SVIERCZ OLIVETTI, ORIEL A. -180,211
ZALAZAR, CRISTINA S. -166
T ZANOVELLO, LUCAS -142
ZAPATA PEDRO DARÍO -23,27,31,53,59,61,65,76,94,
TADDIA, ANTONELA -37 147,149, 159, 160,161,180,211
TARDIVO, BELÉN -16 ZAPATA, ROMINA ELISABET -177
TARGOVNIK, ALEXANDRA M. -98 ZARATE, IRIS P. -204
TARIFA, MARÍA C. -77 ZERBATTO, MARIEL G. -169
TATARIN, ANA S. -158 ZURBRIGGEN, ABRIL -25
TITO, FLORENCIA R. -129
TOMASSI, ARIEL H. -25
TONETTO, GABRIELA M. -48,55,57,58
TOPALIAN, JULIANA -68
TORRES, FABIANA R. -197
TORRES, MARÍA J. -140
217
218

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Archivo Digital: descarga y online

1. Biotecnología. 2. Biotecnología Ambiental. 3. Tecnologías. I. Zapata, Pedro

Diseño y composición general / Responsables sitio Web:

Diseño gráfico y editorial:

APOYOS FINANCIEROS: RC-RPN-2020-00062 (AGENCIA NACIONAL DE PROMOCIÓN DE

ÍNDICE DE AUTORES ........................................................................................ 213

Products and processes

CONFERENCIA PLENARIA SESION 1

La glicosilación de proteínas es la forma

6º Simposio Argentino de Procesos Biotecnológicos-Agosto 2021

TECNOLOGÍA común a las células eucariotas. La glicosila-

DE CULTIVO metabólica y diferentes tipos de vías que or-

contenido y/o la estructura de los glicanos

6º Simposio Argentino de Procesos Biotecnológicos-Agosto 2021

2TCC estas razones, el uso de promotores endó-

una actividad transcripcional comparable o la provincia de Buenos Aires, Junín, Buenos

6º Simposio Argentino de Procesos Biotecnológicos-Agosto 2021

Las plántulas de ambas especies obteni- 4TCC

medio de proliferación de brotes y los brotes

es evaluar la capacidad de aislamientos de 5TCC

6º Simposio Argentino de Procesos Biotecnológicos-Agosto 2021

of medium and large follicles and improved recuperación de aproximadamente 70%. La

Se generó una línea celular productora Los resultados obtenidos demuestran

6TCC La adaptación directa al MLS mantuvo la

do B. a, b; OGGERO, Marcos R.a, b; BÜRGI, María superior al 98%.

Dado el elevado costo de los reactivos que

6º Simposio Argentino de Procesos Biotecnológicos-Agosto 2021

Como perspectiva futura, se emplearán

Palabras claves: ANTICUERPOS MONOCLONA-

Conferencia Sesión 2: Fermentación producir PHB en A. vinelandii. Se presentan

6º Simposio Argentino de Procesos Biotecnológicos-Agosto 2021

de sales de Se en el suelo. Las bacterias lác- Introducción: En la actualidad, los biosur-

6º Simposio Argentino de Procesos Biotecnológicos-Agosto 2021

de cultivo indicado. En dicha red, cada fun- 4FMB

variables de control. El problema se resolvió

6º Simposio Argentino de Procesos Biotecnológicos-Agosto 2021

Se realizó un análisis de varianza de RSM Producción de enzimas

fructooligosacáridos, a partir de descartes

disponible en el mercado se produce me- de azúcares entre el 65 y 90%, dependiendo

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lly Recognized as Safe, GRAS) y son produc- Trichoderma para aplicar

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prima. La melaza representa un subproduc- Se evaluaron distintas condiciones de

car. fugación, y el mosto utilizado para la fer-

10FMB de pretratamiento -1 y 1.5 h- utilizando una

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celulares tratadas de Fusarium sp., como la mundo toneladas de un residuo lignocelu-

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Luego de los pretratamientos, la mayor

lanasas) generado mediante FSS por T. ree- 13FMB

desarrolla en condiciones compatibles con c) Instituto Nacional de Tecnología Agropecua-

especial de los pocitos). Los dispositivos Palabras claves: HONGOS ENTOMOPATÓGE-

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tri con medio PDA (papa-dextrosa-agar) y se 76% de mortalidad). La fermentación bifási-

minutos en agua fría y escurrido) y se este-

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16FMB monitoreado mediante determinación de