Universidad Nacional del Altiplano Puno

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA
AGRONOMICA

TEMA:
PREPARACION DE MEDIO CULTIVOS
CURSO:
MICROBIOLOGIA
DOCENTE:
CAÑAZACA CHOQUEHUANCA EDWIN GUSTAVO
ALUMNA:
ESCOBAR CONDORI CRISTINA SARA

SEMESTRE: III GRUPO: “A”

Año Académico 2024
PUNO – PERU
 PRACTICA 4:

PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO

INTRODUCCION:
Un medio de cultivo es un material
alimenticio que se usa en el laboratorio para
el desarrollo de los microorganismos. Una
ves que ha sido preparado, un medio de
cultivo puede ser inoculado (es decir, se le
añaden organismos) y a continuación
incubado en condiciones que favorezcan el
crecimiento microbiano. El crecimiento de
los microrganismos es el cultivo. Un cultivo
axénico o puro contiene un único tipo de
microorganismos.
Los medios de cultivo deben
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y deben estar
exentos de cualquier microorganismo contaminante.
Los medios de cultivo contienen como mínimo: carbono, nitrógeno,
azufre, fosforo y sales inorgánicas. En muchos casos serán necesarias ciertas
vitaminas y otras sustancias inductoras del crecimiento. también se añaden
colorantes que actúan, como indicadores para detectar, por ejemplo, la
formación de acido o como inhibidores del crecimiento de unas bacterias y no
de otras.
El agar es el principal agente solidificante utilizando en medios
bacteriológicos. Se disuelve completamente a 100°C y se solidifica al enfriarse
a 40°C
De acuerdo con su consistencia, los medios de cultivo pueden clasificarse en:
 Líquidos: Se utilizan para el crecimiento de cultivos puros en lote. Se
denominan caldos de cultivo y no tienen agar en su formulación.
 Semisólidos: Contienen 0.5% de agar en su formulación. Se utilizan para
estudiar la movilidad de las bacterias (presencia o ausencia de flagelo).
 Sólidos: Contienen de 1.5 a 2% de agar en su formulación. Estos medios
inmovilizan a las células, permitiéndoles crecer y formar masas aisladas
visibles llamadas colonias. Las colonias permiten al microbiólogo
reconocer la pureza del cultivo; las placas que contengan más de un tipo
de colonia no provienen de un cultivo puro. Las placas de agar también
se utilizan para la determinación de células viables (recuento en placas).
De acuerdo con su composición, los medios de cultivo pueden clasificarse en:
  Definidos: es aquél medio de cultivo del cual se conoce su composición
exacta. Son muy utilizados en estudios fisiológicos. Los medios mínimos
son medios definidos que únicamente le proporcionan al microorganismo
los nutrientes necesarios para crecer, pero no para desarrollarse
óptimamente.
 Complejos: es aquél del cual no se conoce la composición exacta del
medio. A menudo, los medios complejos emplean sangre, leche,
extracto de levaduras, extracto de carne u otras sustancias muy
nutritivas, pero de las cuales se desconoce la composición química
exacta. Estos medios son muy utilizados para cultivar bacterias
desconocidas o bacterias de requerimientos nutricionales muy
complejos.
De acuerdo con su función, los medios de cultivo se clasifican como:
 Medios selectivos: Son aquellos que poseen uno o más componentes
añadidos, los cuales inhibirán 0 prevendrán el crecimiento de ciertos
tipos de especies de bacterias y/o promoverán el crecimiento de las
especies deseadas, Uno puede ajustar las condiciones físicas de un
medio de cultivo tales como cl pH, la temperatura, para hacerlo selectivo
para los organismos de interés
 Medios diferenciales: Permiten al investigador distinguir entre diferentes
tipos de bacterias con base en alguna característica observable en su
patrón de crecimiento en el medio, ya sea por producción de algún
pigmento o por cambios de color en el medio debido a indicadores de
pH, o por halos de degradación de algún componente en el medio de
cultivo.
 Medios de enriquecimiento: Contienen algún componente que permite el
crecimiento de cierto tipo especifico de bacteria, pero no contienen
sustancias inhibidoras.
 Medios enriquecidos: Se emplean para cultivar microorganismos que
requieren un gran mero de factores de crecimiento. Generalmente
contienen extractos biológicos poco usuales como sangre, suero en
polvo, extracto de cerebro de res, yema de huevo, etc.
OBJETIVOS:
1. Establecer los fundamentos teóricos para la preparación de medios
de cultivo.
2. Aprender la clasificación y uso de los medios de cultivo.
3. Preparar medios de cultivo y manejar adecuadamente la autoclave.
MATERIAL POR EQUIPO:
 1 mecheros
 1 agitador
 1 mosca (magneto)
 1 espátula
 1 matraz Erlenmeyer de 100 mL
  10 cajas de Petri estériles desechables
 Masking tape
 Asas de cultivo
 Papel aluminio
 Plumón indeleble
 Trapo
 Reactivo para el medio de cultivo
EQUIPO
 Autoclave
 Campana de vapor
PROCEDIMIENTO:
1. Tener todos los implementos adecuados para poder trabajar en la
campana de vapor y colocar todos los materiales dentro para empezar
esterilizar

2. Proseguimos quemando cualquier impureza en la azas de cultivo

3. on cuidado, con ayuda del trapo, sacar el matraz.

4. Vaciar el medio en las cajas de Petri estériles siguiendo la técnica
aséptica. Las cajas no pueden ser destapadas a menos que sea entre
los mecheros o dentro de la campana de flujo laminar. Las tapas no se
tocan por dentro con los dedos, ni se sacan del área de esterilidad.
5. Ya sólidas, se cierran adecuadamente y se etiquetan con el tipo de
medio, equipo, grupo y fecha de elaboración. Guardar en el refrigerador
para utilizar la siguiente práctica.
 6. Vaciar el agua de la autoclave con cuidado de no quemarse.
RESULTADOS:

CUESTIONARIO:
a) Glosario. Define los siguientes términos.

1. Factor de crecimiento. - Proteínas que

hay en la sangre y que tienen como función
la comunicación intercelular para reparar
lesiones. Inyectar estos factores de
crecimiento en las lesiones permite acelerar y
mejorar el proceso de regeneración celular,
pudiendo acortar hasta la mitad el tiempo
de recuperación.
2. Elemento traza. - Lon minerales esenciales para el funcionamiento
óptimo del organismo humano. Estos
incluyen minerales como el hierro, zinc,
cobre, selenio, manganeso, entre otros. El
 análisis de elementos traza se enfoca en medir las concentraciones de
estos minerales en el cuerpo humano.

3. Macronutrientes. - Son aquellas

sustancias que proporcionan energía al
organismo para un buen
funcionamiento, y otros elementos
necesarios para reparar y construir
estructuras orgánicas, para promover el crecimiento y para regular
procesos metabólicos.
4. Micronutrientes. - son pequeñas cantidades de vitaminas y minerales
requeridos por el cuerpo para la mayoría de las funciones celulares.
5. Peptona. Se utilizan como sustrato para el
crecimiento de una gran variedad de
microorganismos involucrados en numerosos
procesos utilizados en empresas biotecnológicas,
farmacéuticas y alimentarias.
6. Triptona. – Es un digesto pancreático de
caseína y se utiliza como fuente de nitrógeno en
medios de cultivo.
7. Extracto de levadura. - Es un ingrediente que
no procede de animales, lo que resulta útil para
la formulación de productos veganos y
vegetarianos. El extracto de levadura sirve para
reforzar la base aromática de una receta, así
como para aportarle una nota de sabor única o
varias notas específicas.
8. Indicador de pH. - Es una herramienta que
permite medir el pH de un medio. Habitualmente
se utilizan como indicador a sustancias químicas
que cambian su color al cambiar el pH de la disolución. El cambio de
color se debe a un cambio estructural inducido por
la protonación o des protonación de la sustancia.
9. Autoclave. - Es un esterilizador a vapor, utiliza
calor húmedo en forma de vapor saturado bajo
presión para alcanzar una temperatura por encima
del punto de ebullición, hasta 135-137°C, para
destruir microorganismos como bacterias, virus,
hongos y esporas
10. Campana de flujo laminar. - es un
instrumento que se emplea para poder
 tener ambientes libres de contaminación, debido a que logra
proporcionar aire descontaminad⁸ de partículas de hasta 0.1 micras.

b) Haz un diagrama de flujo del procedimiento a seguir en esta práctica.

c) Haz un esquema de una autoclave, indicando cómo funciona.

En una hoja aparte (por equipo), haz los cálculos necesarios para preparar 250
m del medio empleado en la clase.
AGAR Ingredientes (g/L) 250mL
NUTRITIVO - Peptona de 5.0 X
(AN) caseína
- NaCl 8.0 X
- Extracto de carne 3.0 X
- Agar 15.0 X