UNIVERSIDAD MAYOR

DE SAN SIMÓN Semestre:

INFORME 1/2024
LABORATORIO QUÍMICA
ORGANICA 1
Practica N°6
Título: Cromatografía Miércoles
08:15 - 12:45

G: 5 Docente:M.Sc Espinoza
Alcancer Jenny
Fecha
Entrega:18/5/20
24

Integrante: Auxiliar:Univ.Hel Cochabamba

Villarpardo Orellana Pablo Matthew en Dayana Zerda -Bolivia
Rodríguez

1. OBJETIVOS
 Comprender la técnica de cromatografía en papel, junto con sus
características y los factores que influyen en ella.
 Calcular los valores de Rfi de las diferentes sustancias.
 Determinación del tipo de sustancia utilizando la técnica de
cromatografía.
 Establecer un criterio para evaluar la pureza de las sustancias
utilizadas en la práctica de cromatografía

2. MARCO TEÓRICO

La cromatografía es una técnica científica utilizada para separar los distintos

componentes de mezclas complejas, con el fin de identificar y cuantificar los elementos
presentes. Este método se basa en la retención selectiva, que observa el comportamiento
diferente de los componentes de una mezcla sobre un soporte como papel, gas, líquido o
resina.

Analizando la velocidad de retención de cada componente, es posible separarlos para

identificarlos y cuantificarlos. La adsorción, donde las partículas se retienen en una
superficie, es un aspecto clave de esta técnica.

Fases de la cromatografía
Los componentes de las mezclas se distribuyen en dos fases: la fase estacionaria
(reposo) y la fase móvil.

 Fase estacionaria: En esta fase, los componentes de la muestra se

retienen en el soporte adecuado. Dependiendo del tipo de soporte, ya sea
líquido o sólido, puede ser plano o en columna.
 Fase móvil: En esta fase, el compuesto químico se desplazará arrastrando
la muestra, forzándola a pasar a través de la fase estacionaria.
Adsorción. -
La adsorción es un fenómeno físico en el que un compuesto en fase líquida o gaseosa
entra en contacto con un sólido adsorbente y se adhiere a su superficie mediante fuerzas
físicas, como las fuerzas de dispersión de London. Este proceso no implica el intercambio
de electrones, lo que lo hace reversible.

Características de un buen adsorbente:

Las principales características que deben tener los materiales adsorbentes son una alta
capacidad de adsorción, una rápida velocidad de adsorción y una fácil regeneración, lo
que permite que el proceso de adsorción se realice de manera eficiente.

Tipos de cromatografía. -
Este método es ampliamente utilizado para el análisis cualitativo en laboratorios. Consiste
simplemente en una tira de papel filtro en la que se depositan unas pocas gotas de la
muestra y se evapora el disolvente. Una vez seco, las sustancias se mostrarán como
manchas de distinto color separadas. Si los componentes no tienen color propio, se deben
someter a procesos de revelado. Este tipo de cromatografía se emplea para compuestos
muy polares o polifuncionales. Permite separar sólidos mezclados con líquidos, de
manera que no es posible decantar la mezcla, pasando la mezcla a través de un material
poroso.

Este es uno de los métodos más

utilizados para la separación y
purificación de diversos compuestos
orgánicos, tanto en estado líquido como
sólido. En este procedimiento, la fase
estacionaria se coloca dentro de una
columna de vidrio equipada con una llave
en su extremo inferior para controlar el
flujo de las sustancias. La fase móvil se
añade por la parte superior de la
columna, permitiendo que atraviese el
sistema. A medida que la fase móvil, que
contiene los compuestos disueltos, fluye a
través de la columna cromatográfica, los compuestos se separan y se recogen en
fracciones individuales.

Cromatografía en placa fina

En la cromatografía en capa fina, se emplea una placa verticalmente sumergida en una
fase móvil. La fase estacionaria se compone de una capa uniforme de un adsorbente que
se mantiene sobre la placa, la cual puede ser de aluminio o vidrio. Se coloca una cubeta
cerrada sobre la placa, conteniendo uno o varios disolventes mezclados. A medida que
esta mezcla de disolventes asciende por la placa, se produce una distribución diferencial
de los componentes de la mezcla.
Cromatografía de partición
En la cromatografía de partición, la separación de los constituyentes de una mezcla se
logra mediante las disparidades en polaridad entre la fase estacionaria y la fase móvil,
ambas de naturaleza líquida y mutuamente insolubles. Este método se subdivide en dos
categorías principales: la cromatografía de fase normal, donde la fase estacionaria exhibe
polaridad y la fase móvil es apolar, y la cromatografía de fase reversa, en la cual la fase
estacionaria es polar y la fase móvil es apolar.

En la cromatografía de adsorción, la fase estacionaria consiste en un sólido mientras que

la fase móvil es líquida, compuesta de un solvente o una combinación de ellos. En este
proceso, algunos componentes de la mezcla se retienen con mayor afinidad que otros,
permitiendo la separación de los constituyentes de la muestra.

La cromatografía de intercambio iónico se divide en dos subtipos: el intercambio catiónico

y el intercambio aniónico. En el primero, la fase estacionaria contiene grupos funcionales
con carga negativa, lo que resulta en la retención de cationes. Por otro lado, en el
intercambio aniónico, los grupos funcionales de la fase estacionaria poseen carga
positiva, lo que lleva a la retención de aniones.

3. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
1. La espinaca lo llevamos al mortero donde con el solvente adecuado en este caso agua
destilada, lo empezamos a moler (aplastar).

2. Respectivamente continuando con el mortero, con el labial aplastando con el solvente etanol
Por último, las hojas, con el agua destilada.

3. En la pipeta y pera de goma extraer 1, 5 ml de hexano y 1,5 ml de acetato de etilo 1,0 ml en

total de la mezcla (hexano y acetato de etilo)

.
4. En los tres vasos precipitados colocar cada uno de los solventes adecuados
5. Medir dos centímetros por cinco centímetros cada una de las placas.
6. Las respectivas medidas de separación de la parte inferior ha de ser de cinco centímetros y
por la parte superior de cuatro centímetros.
7. Para cada compuesto orgánico se debe colocar con la placa fina o capa delgada en sus
respectivos solventes:
 para la espinaca con solvente hexano.
 para el maquillaje con solvente acetato de etilo.
 para las hojas con el solvente mezcla.
8. El solvente asciende por la placa arrastrando los componentes de la muestra.

9. Las placas se secan a temperatura ambiente.

10. Examinar las placas visualmente, buscando manchas coloreadas enseguida se observas
debajo de una luz ultravioleta.

11. Se miden las distancias recorridas por cada mancha y la recorrida por solvente. El cociente de
la distancia recorrida por la mancha sobre la segunda nos da el Rf de la muestra y es una
característica para cada sustancia.

4. CÁLCULOS
5. OBSERVACIONES
 Se observo que en presencias de mezclas la manchadel recorrido tiene un
cambio de color en una longitud mas reducida en comparacion con los
demas compuesto tales como el naranja de metilo,hexano,alcohol
 Se logró apreciar en el cristal violeta cierta perturbación dado a que una
leve inclinación en el recorrido de la pigmentación es perjudicial a la horA
de la práctica por lo que se recomienda prestar atención a las muestras a
la hora del reposo (secado ) del mismo.

6. CONCLUSIONES
 El cálculo del factor de retención Rf proporcionó información crucial sobre la
movilidad de los compuestos empleados. Un Rf más alto indica una mayor afinidad
a la fase móvil, mientras tanto que un Rf más bajo indica afinidad a la fase
estacionaria.
  Para una identificación completa y precisa de los componentes, es necesario
realizar pruebas adicionales, como espectroscopía o análisis por cromatografía de
gases o líquidos, para confirmar la identidad de los compuestos presentes en las
manchas.
 La relación entre la polaridad de las sustancias analizadas y la de los eluyentes
utilizados se refleja en cómo interactúan los componentes con la fase móvil
(solvente) y la fase estacionaria (papel cromatográfico), la polaridad relativa de los
eluyentes y la fase estacionaria influirá en la separación de los componentes de la
capa fina (c.c.f),

7. BIBLIOGRAFÍA
https://inensal.com/cromatografia/

https://www.carbotecnia.info/aprendizaje/tratamiento-de-agua/diferencia-
entre-absorcion-y-adsorcion/

https://www.ugto.mx/investigacionyposgrado/eugreka//contribuciones/391-
materiales-adsorbentes-para-la-obtencion-de-agua-limpia

8. CUESTIONARIO
1. Defina:
a. cromatografía de reparto
Técnica de separación de moléculas basada en su diferente solubilidad entre dos
fases inmiscibles
b. cromatografía de gases
Es una técnica cromatográfica en la que la muestra se volatiliza y se inyecta en la
cabeza de un mechero de una columna cromatográfica.

c. cromatografía en capa delgada

 Es una técnica cromatográfica que utiliza una placa inmersa verticalmente en una
fase móvil. Esta placa cromatográfica consiste en una fase estacionaria polar
adherida a una superficie sólida.
2. Explica el principio fundamental detrás de la separación de compuestos en
cromatografía.
Está basada en la separación de una mezcla de sustancias mediante el reparto existente
entre la fase móvil (líquido o gas) y la fase estacionaria (líquida) soportada o ligada sobre
un sólido adecuado.
3. ¿Qué papel juegan la fase estacionaria y la fase móvil en una técnica
cromatográfica?
 Fase estacionaria: en esta fase, los componentes de la muestra están retenidos en
el soporte adecuado. Según el tipo de soporte, líquido o sólido, pueden ser planas o
en columna.
 Fase móvil: En esta fase, el compuesto químico fluirá hasta arrastrar a la muestra
obligándola a atravesar la fase estacionaria.

4. Que se entiende por disolvente, sistema cromatográfico, revelador, agente

cromogénico, frente de disolvente, eluyente, cromatograma, patrón de
caracterización.
 Disolvente: es la sustancia en la que se disuelve el soluto para formar una
solución. En cromatografía, se refiere al líquido o gas que se utiliza para el
movimiento de las sustancias a través de la fase estacionaria.
 Sistema cromatográfico: conjunto de componentes y condiciones bajo las cuales
se lleva a cabo una cromatografía, incluyendo la fase estacionaria, el disolvente, el
material de la columna, etc.
 Revelador: sustancia química que permite visualizar las sustancias separadas en
una cromatografía, revelando su presencia a través de un cambio de color u otra
señal detectable.
 Agente cromogénico: compuesto químico que produce color en respuesta a
ciertas condiciones, como la interacción con otras sustancias en una
cromatografía.
 Frente de disolvente: la posición alcanzada por el disolvente a medida que se
mueve a través de la fase estacionaria en una cromatografía.
5. Describe cómo funciona la detección por espectrofotometría UV en
cromatografía.
La espectrofotometría UV-visible es una técnica analítica que permite determinar la
concentración de un compuesto en solución. Se basa en que las moléculas absorben las
radiaciones electromagnéticas y a su vez que la cantidad de luz absorbida depende de
forma lineal de la concentración.
6. Defina “adsorción”. Nombre dos adsorbentes más comunes e indique cuál de
ellos es más polar.
Proceso en el que los componentes de una mezcla se adhieren a la superficie de un
sólido, formando una capa de adsorción. Dos adsorbentes comunes son: el gel de sílice y
el alúmina. El alúmina es más polar que el gel de sílice.
7. Defina “elución” y “series eluotrópicas”
La elución es el proceso en cromatografía en el que las sustancias retenidas en la fase
estacionaria son desplazadas y liberadas por el paso de un eluyente a través de la
columna.
Las series eluotrópicas son listas de solventes que indican su capacidad para desplazar
compuestos adsorbidos en cromatografía.
8. ¿Qué significa que una sustancia tenga rf > 0,5, rf = 0,5 y rf < 0,5?
RF > 0.5: La sustancia se ha retenido significativamente en la fase estacionaria y ha
tenido poca movilidad en relación con el disolvente.
RF = 0.5: La sustancia pasa igual cantidad de tiempo en la fase estacionaria y en el
disolvente.
RF < 0.5: La sustancia ha pasado rápidamente a través de la fase estacionaria y se ha
movido principalmente con el disolvente.
9. ¿Qué debe hacerse para encontrar el eluyente adecuado para una sustancia en
una cromatografía en columna?
Para encontrar el eluyente adecuado en una cromatografía en columna, se deben realizar
pruebas utilizando diferentes eluyentes con diferentes polaridades y propiedades
fisicoquímicas. Se observa cómo se comporta la sustancia de interés en respuesta a cada
eluyente y se selecciona el eluyente que logra separar de manera efectiva los
componentes de interés en la muestra. Es importante encontrar un equilibrio entre la
retención de los componentes en la fase estacionaria y su movilidad en el eluyente para
lograr una separación eficiente.
10. Cuál sería el resultado de los siguientes errores en cromatografía en placa
delgada:
a. Aplicación de solución muy concentrada.
Si se aplica una solución muy concentrada en la placa delgada, es probable que
se produzca una sobrecarga en la mancha, lo que podría resultar en bandas muy
anchas e incluso podrían superponerse. Esto dificultaría la separación de los
componentes de la muestra.
b. Utilizar eluyentes de alta polaridad.
El uso de eluyentes altamente polares podría llevar a una migración demasiado
rápida de las sustancias en la fase móvil, lo que resultaría en una mala separación
de los componentes. Además, una alta polaridad del eluyente podría interferir con
la interacción entre la fase estacionaria y los componentes de la muestra,
afectando la resolución de la cromatografía.
c. Emplear gran cantidad de eluyente en la cámara cromatográfica.
El uso de una cantidad excesiva de eluyente en la cámara cromatográfica podría
llevar a un arrastre rápido de los componentes de interés, lo que resultaría en una
elución poco eficiente y en una separación inadecuada de los compuestos.
Además, podría diluir la muestra en exceso, lo que dificultaría la detección de los
compuestos separados.