(Ex) Une-En 12821 2009

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norma UN

NE-EN 12821

españolla
Noviembre 2009

TÍTULO Produ
uctos alimenticios

Determinación de vitamina D mediante crom


matografía líquida
de alta eficacia

Medicción de colecalciferol (D3) y ergocalciferool (D2)

Foodstuffs
fs. Determination of vitamin D by high performance liquid chrom
matography. Measurement of
cholecalciferol (D3) or ergocalciferol (D2).

Produits alimentaires.
a Dosage de la vitamine D par chromatographie liquide haute
h performance. Dosage du
cholécalciférol (D3) et de l' ergocalciférol (D2).

CORRESPONDENCIA Esta norrma es la versión oficial, en español, de la Norma Europpea EN 12821:2009.

OBSERVACIONES Esta norrma anula y sustituye a la Norma UNE-EN 12821:2000..

ANTECEDENTES Esta noorma ha sido elaborada por el comité técnico AE


EN/CTN 34 Productos
alimentaarios cuya Secretaría desempeña FIAB.

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Editada e impresa por AENOR LAS OBSE
ERVACIONES A ESTE DOCUMENTO HAN DE DIRIGIRSE A:
Depósito legal: M 47992:2009
26 Páginas

© AENOR 2009 Génova, 6 [email protected] Tel.: 902 102 201 Grupo 17


Reproducción prohibida 28004 MADRID-Españña www.aenor.es Fax: 913 104 032
ÍNDICE

Página

PRÓLOGO .............................................................................................................................................. 5

1 OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN ............................................................................. 6

2 NORMAS PARA CONSULTA ............................................................................................. 6

3 PRINCIPIO............................................................................................................................. 6

4 REACTIVOS .......................................................................................................................... 6

5 APARATOS .......................................................................................................................... 10

6 PROCEDIMIENTO ............................................................................................................. 10

7 CÁLCULOS .......................................................................................................................... 13

8 PRECISIÓN .......................................................................................................................... 14

9 INFORME DEL ANÁLISIS................................................................................................ 15

ANEXO A (Informativo) EJEMPLOS DE SISTEMAS DE HPLC ADECUADOS ...................... 16

ANEXO B (Informativo) EJEMPLOS DE CONDICIONES ADECUADAS


DE EXTRACCIÓN Y SAPONIFICACIÓN .......................................... 17

ANEXO C (Normativo) EJEMPLOS DE CROMATOGRAMAS ADECUADOS DE HPLC


SEMI-PREPRATIVA Y ANALÍTICA................................................... 18

ANEXO D (Informativo) DATOS DE PRECISIÓN ........................................................................ 20

ANEXO E (Informativo) ETAPA ADICIONAL DE LAVADO PARA LA


DETERMINACIÓN DE VITAMINA D MEDIANTE
EL USO DE TLC PREPARATIVA, CROMATOGRAFÍA
EN COLUMNA O SPE ............................................................................ 22

BIBLIOGRAFÍA ................................................................................................................................... 26

1 OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN


Esta norma europea describe un método para la determinación de vitamina D3 (colecalciferol) o vitamina D2 (ergocalci-
ferol) en los productos alimenticios mediante cromatografía líquida de alta eficacia (HPLC).

La vitamina D3 se encuentra fundamentalmente en los productos alimenticios de origen animal, mientras que la
vitamina D2 se encuentra fundamentalmente en los champiñones silvestres. Tanto la vitamina D3 como la vitamina D2
pueden estar presentes en productos alimenticios reforzados. Esta norma europea no resulta aplicable para muestras con
presencia conjunta de vitamina D3 y vitamina D2.

Además de la actividad de vitamina D procedente de sus formas parentales, vitamina D3 y vitamina D2, los metabolitos
correspondientes 25-hidroxi-vitamina D y 1,25-dihidroxi-vitamina D también contribuyen a la actividad de vitamina D.
Esta norma europea solamente incluye la medición de vitamina D3 y vitamina D2.

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Esta norma europea proporciona la base para los métodos analíticos. Su objetivo es servir como esquema sobre el cual
el analista pueda definir su propio trabajo analítico conforme al procedimiento normalizado.

Este método se ha validado en análisis interlaboratorios realizados sobre muestras reforzadas y no reforzadas como
margarina, leche, leche en polvo, alimentos infantiles líquidos, alimentos infantiles, aceite de cocinar y aceite de
pescado, a unos niveles de entre 0,4 μg/100 g y 14 μg/100 g. En el anexo D se ofrece una mayor información sobre los
datos de validación.

2 NORMAS PARA CONSULTA


Las normas que a continuación se indican son indispensables para la aplicación de esta norma. Para las referencias con
fecha, sólo se aplica la edición citada. Para las referencias sin fecha se aplica la última edición de la norma (incluyendo
cualquier modificación de ésta).

EN ISO 3696 Agua para uso en análisis de laboratorio. Especificación y métodos de ensayo. (ISO 3696:1987).

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