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    Reporte Nitratos 1

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    Oscar Roldan
    1) El documento analiza el efecto de los nitritos en la producción de metahemoglobina y el efecto protector del azul de metileno. 2) Los resultados mostraron que las ratas alimentadas con embutidos tuvieron los niveles más altos de metahemoglobina, mientras que el azul de metileno redujo los niveles. 3) La metahemoglobina se forma cuando la hemoglobina se oxida, impidiendo el transporte de oxígeno, mientras que el azul de metileno actúa como antídoto al convertir el hierro

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    1) El documento analiza el efecto de los nitritos en la producción de metahemoglobina y el efecto protector del azul de metileno. 2) Los resultados mostraron que las ratas alimentadas con embutidos tuvieron los niveles más altos de metahemoglobina, mientras que el azul de metileno redujo los niveles. 3) La metahemoglobina se forma cuando la hemoglobina se oxida, impidiendo el transporte de oxígeno, mientras que el azul de metileno actúa como antídoto al convertir el hierro

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    Reporte nitratos 1

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    1) El documento analiza el efecto de los nitritos en la producción de metahemoglobina y el efecto protector del azul de metileno. 2) Los resultados mostraron que las ratas alimentadas con embutidos tuvieron los niveles más altos de metahemoglobina, mientras que el azul de metileno redujo los niveles. 3) La metahemoglobina se forma cuando la hemoglobina se oxida, impidiendo el transporte de oxígeno, mientras que el azul de metileno actúa como antídoto al convertir el hierro

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    Produccin de metahemoglobina por nitritos y efecto protector del azul de metileno

    EFECTO BIOQUMICO DE EMBUTIDOS SOBRE LA PRODUCCIN DE METAHEMOGLOBINA.


    lvarez1, S; Bautista1,L. D.; Hernndez1, O. y. Ramrez1, C.

    UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO; FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLN C-1


    Laboratorio de Toxicologa e Higiene Pblica Grupo: 2852 Q.F.B. Equipo 2

    Resumen: El objetivo de este desarrollo experimental fue conocer la tcnica de determinacin de hemoglobina producida por nitritos, adems de comprobar el efecto protector del azul de metileno sobre la hemoglobina y como antdoto; Metahemoglobinemia es una enfermedad provocada por el exceso de nitratos esta enfermedad

    clnica que surge de la excesiva conversin de hemoglobina a metahemoglobina, que es incapaz de enlazar y transportar oxgeno. La metahemoglobina se forma cuando la molcula de hemoglobina se oxida de Fe2+ a Fe3+. Los productos crnicos aportan menos del 10 por ciento del nitrato en la dieta, pero aportan del 60 al 90 por ciento del nitrito consumido. Esto es bsicamente porque a las comidas tales como perritos calientes, bacn o jamn se les aade nitrito de sodio (como conservador). Frutas, granos y productos lcteos no aportan prcticamente nada de nitratos o nitritos a la dieta.
    Palabras clave: Nitritos, metahemoglobina, azul de metileno.

    Abstract: The aim of this experiment was to develop the technique of determination of hemoglobin produced by nitrite, in addition to checking the protective effect ofmethylene blue on hemoglobin and as an antidote; Methemoglobinemia is a diseasecaused by excess nitrates clinical disease arising from the excessive conversion ofhemoglobin to methemoglobin, which is unable to bind and carry oxygen.Methemoglobin is formed when the hemoglobin molecule is oxidized from Fe2 + to Fe3+. Meat products contribute less than 10 percent of the nitrate in the diet, but provide 60 to90 percent of the nitrite consumed. This is basically because foods such as hot dogs, bacon or ham is added sodium nitrite (and preservative). Fruits, grains and dairyproducts provide virtually no nitrates or nitrites in the diet.

    Keywords: Nitrite, methemoglobin, methylene blue.

    Produccin de metahemoglobina por nitritos y efecto protector del azul de metileno


    INTRODUCCION El nitrato es un compuesto inorgnico compuesto por un tomo de nitrgeno (N) y tres tomos de oxgeno (O); el smbolo qumico del nitrato es NO3. El nitrato no es normalmente peligroso para la salud a menos que sea reducido a nitrito (NO2) Un grupo importante de intoxicaciones se expresa a travs de metahemoglobinemia. Se produce metahemoglobinemia cuando la concentracin de metahemoglobina dentro de los eritrocitos circulantes aumenta por encima de su valor normal. Estas intoxicaciones pueden ser fundamentalmente por 3 situaciones: causadas mximo de coma, estupor y muerte. En la metahemoglobina txica el cuadro es ms complicado y muy difcil establecer relaciones entre determinados porcentajes de metahemoglobina y la gravedad de la enfermedad clnica resultante. Una de las razones para ello es el hecho de que los niveles de metahemoglobina de la sangre extrada de los individuos afectados contina cambiando in vitro (siguen actuando los mecanismos reductores enzimticos), de manera que, para cuando se analizan las muestras se obtienen valores que pueden ser inferiores a los valores reales del momento de la toma de la muestra. Pero an siguiendo las indicaciones que nos dan los bioqumicos toxiclogos intervienen otros elementos para complicarnos las cosas. Uno es que la mayor parte de los agentes metahemoglobizantes tienen efectos txicos adicionales agudos y/o txicos que son independientes de su accin metahemoglobinizante y generalmente ms serios. El clorato daa mucho ms por sus efectos corrosivos, hemolticos y nefrotxicos que por metahemoglobinemia. Los nitritos son vasodilatadores y pueden producir hipotensin ortosttica, taquicardia refleja y colapso cardiovascular que pueden ser mucho ms importante que la anemia anxica de la metahemoglobinemia. Otros compuestos como la nitroanilina son depresores del SNC y causan toxicidad hepatorenal adems de su accin productora de metahemoglobina y as deberamos continuar enumerando con cada agente metahemoglobinizante. la metahemoglobina-diaforasa est disminuido por la utilizacin en el metabolismo del alcohol.

    1. Presencia de una hemoglobina con estructura anormal que la hace susceptible a la oxidacin o poco adecuada para la reduccin, o ambos procesos. 2. Deficiencia de los mecanismos reductores de hemoglobina. 3. Exposicin a drogas o productos qumicos que aumentan el ritmo de oxidacin ms all de la capacidad protectora y reductora de la clula. Los 2 primeros grupos son las metahemoglobinemias congnitas, poco frecuentes. De acuerdo al grado de la metahemoglobina ser el grado de hipoxia anmica, desde una fcil fatigabilidad y disnea de esfuerzo hasta el grado Algunos factores que favorecen la aparicin de metahemoglobinemia son:

    Lactantes: como ya se mencion, la hemoglobina fetal forma metahemoglobina ms fcilmente que la hemoglobina del adulto y los recin nacidos tienen 60 a 80 % y los prematuros hasta el 90% de la hemoglobina fetal. A los 5 o 6 meses de edad ya toda la hemoglobina es reemplazada por la forma adulta. Tambin hay una deficiencia relativa de metahemoglobina-diaforasa en este perodo neonatal. El alcohol agrava la metahemoglobina debido quizs a que el NAD necesario para que acte

    Insuficiencia heptica y otras alteraciones digestivas. Gentica: deficiencia de glucosa 6 fosfato deshidrogenasa. Factores que agravan la anoxia como anemia previa, cortocircuito arteriovenoso, hemlisis, shock secundario, edema cerebral u otras causas que aumentan el grado de instauracin del oxgeno.

    Produccin de metahemoglobina por nitritos y efecto protector del azul de metileno

    Tabla 1.Relacion de porcentaje de metahemoglobina y los sntomas causados (Fuente: Manual de toxicologa ,Thomas, 2001)
    0-3% 3-10% 10-15% 15-20% 20-45% 45-55% 55-65 >65% Nivel normal Sin sntomas clnicos Nada o ligera coloracin cutnea griscea. Coloracin chocolate marrn de la sangre Cianosis azul-griscea generalizada, usualmente asintomtica Cefalea, fatiga, mareos, intolerancia a los ejercicios, sncope. Aumento en la depresin del SNC Coma, convulsiones, falla cardaca, arritmias, acidosis metablica. Alta incidencia de mortalidad

    RESULTADOS Tabla 2. Resultados de las absorbancias en cada uno de los lotes en muestra sangunea de rata wistar (Fuente: FES-C1, laboratorio de toxicologa; 5/05/2011) Equipos 1 2 3 4 5 6 7 CLCULOS Lote I II I II III III III Dieta
    Agua y nutricubos Jamos y salchicha Agua y nutricubos Rica en embutidos Rica en embutidos Rica en embutidos Rica en embutidos

    A1 -0.114 0.037 -0.160 0.020 0.128 0.062 0.016

    A2(630nm) 0.036 0.074 0.023 0.036 0.071 0.057 -0.016

    A3 (540nm) 0.280 0.380 0.306 0.300 0.228 0.206 0.008

    Tabla 3.Resultados de Hbt de cada equipo y lote (Fuente: Manual de toxicologa ,Thomas, 2001) Equipo 1 2 3 4 5 6 7 Lote I II I II III III III Resultado 10.472 14.243 11.44 11.22 8.5272 7.7044 .2992

    Produccin de metahemoglobina por nitritos y efecto protector del azul de metileno

    Tabla 4.Resultados de MHbt de cada equipo y lote (Fuente: Manual de toxicologa ,Thomas, 2001) Equipo 1 2 3 4 5 6 7 Lote I II I II III III III Resultado -0.8 -0.9 -4.3 -0.4 1.3 0.1 0.7

    Tabla 3.Resultados de % de metaHb en sangre de cada equipo y lote (Fuente: Manual de toxicologa ,Thomas, 2001) Equipo Lote Resultado 1 I 8.0 2 II 6.1 3 I 37.4 4 II 3.3 5 III 15.6 6 III 1.5 7 III 250

    Tabla 3. Resultados de la prctica de determinacin de metahemoglobina en muestra sangunea de rata wistar (Fuente: FES-C1, laboratorio de toxicologa; 5/05/2011) Equipos 1 2 3 4 5 6 7 Lote I II I II III III III Hb t (g/dL) 10.5 14.2 11.4 11.2 8.5 7.7 0.3 mHb t (g/dL) -0.8 -0.9 -4.3 -0.4 1.3 0.1 0.7 % de mHb sang.

    8.0 6.1 37.4 3.3 15.6 1.5 250.3

    Produccin de metahemoglobina por nitritos y efecto protector del azul de metileno


    25

    % de Mhb en sangre

    20

    15 Serie 1 10 Columna1 Columna2 5

    0 control dieta NO2 tratados con NO2 y azul de metileno lotes

    Grafico 1 : Muestra los resultados en % en sangre de Mhb en los tres tratamientos hechos en las ratas

    DISCUSIN La metahemoglobina es una hemoglobina en la cual el hierro ferroso (Fe2+) de la porcin hem est en estado frrico (Fe3+). A causa de esta carga positiva adicional, la sexta posicin de coordinacin del hierro ya no queda disponible para fijar el oxgeno molecular en forma reversible sino que es ocupado por agua u otros aniones. Es decir: las metahemoglobinemias se caracterizan por el aumento de la metahemoglobina intraeritrocitaria, pigmento que es incapaz de transportar oxgeno. Normalmente, a travs del ciclo fisiolgico de oxigenacin y desoxigenacin el hierro del hem de la hemoglobina permanece en estado ferroso esto sucede gracias a que la estructura intrnseca de la hemoglobina protege al hierro de la oxidacin y a los mecanismos protectores y reductores de que dispone el eritrocito. La reduccin de la hemoglobina en los eritrocitos del hombre depende sobre todo de la actividad de un sistema de la metahemoglobinemia diaforasa dependiente de NADH. El NADH que utiliza este sistema es generado por la gliceraldehido 3-P- deshidrogenasa de la va de Embdem- Meyerhof de la gluclisis, el azul de metileno el cual es cloruro de tetrametiltianina acta como un cofactor de la metahemoglobina reductasa NADPH dependiente o diaforasa 2. En presencia de NADPH y diaforasa 2, el azul de metileno es reducido a azul de leucometileno, el cual reduce directamente la metahemoglobina. Esto resulta en la induccin de dicha enzima, acelerando la conversin de metahemoglobina en hemoglobina (convierte el hierro frrico a ferroso) de ah radica su efecto como antdoto. Estas afirmaciones son sustentadas cientficamente en varios estudios sobre este tema, lo que sin duda sugiere un error al momento de la cuantificacin ya que la tabla de comparacin de metahemoglobina arroja resultados muy diferentes a los hechos en la literatura : las ratas control con un dieta normal presentan un alto porcentaje de metahemoglobina(22.7) mientras la ratas del lote 2 que fueron administradas con nitratos en su dieta y 30 min antes con un solucin de nitrito de sodio muestran 5

    Produccin de metahemoglobina por nitritos y efecto protector del azul de metileno


    una baja concentracin de metahemoglobina (4.7) , y las ratas administradas con el protector azul de metileno tienen una concentracin de 8.5 lo que no concuerda con los resultados experimentales. El azul de metileno es el tratamiento de eleccin para las metahemoglobinemias txicas cuya etiologa incluye numerosos oxidantes directos e indirectos: anilinas, acetofenetidina, nitritos, nitratos, cloratos, nitrobenceno, benzocana, lidocana, nitroglicerina, nitroprusiato, fenazopiridona, sulfonamidas, clorobenceno, naftaleno, nitrofenol, nitrato de plata y trinitrotolueno; aunque excepcional, el mismo azul de metileno en dosis elevadas produce metahemoglobinemias CONCLUSIONES No se determino correctamente la cantidad de metahemoglobina en la sangre de estos roedores ni el efecto protector del azul de metileno mas all de la literatura, se sugiere la repeticin del mtodo ya que por algn posible error haya afectado los resultados y estos hayan sido alterados

    REFERENCIAS 1. Hernndez, Mauricio y Palazuelos, Eduardo. (1995) Intoxicacin por plomo en Mxico: prevencin y control Fernndez editores. Mxico. 15, 71, 258. 2. Mart, J. A. y Desoille, H. (1993) Medicina del trabajo 2. Edicin. Masson. Barcelona. 289-299. 3. Harris, Daniel C. (2007) Anlisis qumico cuantitativo 3. Edicin. Revert. Barcelona. 717.

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