Metahemoglobina Toxicologia

PRODUCCIN DE METAHEMOGLOBINA POR NITRITOS Y
EFECTO PROTECTOR DEL AZUL DE METILENO

Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Facultad de Estudios Superiores Cuautitln.
A., Equip
RESUMEN: La metahemoglobinemia es una enfermedad provocada por el exceso de nitratos, sta

enfermedad clnica, surge de la excesiva conversin de hemoglobina a metahemoglobina, la cual, es incapaz
de enlazar y transportar oxgeno. La metahemoglobina se forma cuando la molcula de hemoglobina se oxida
del Fe 2+ a Fe3+.El objetivo en sta sesin experimental fue conocer la tcnica de la determinacin ms
empleada en el estudio de la produccin de metahemoglobina por nitritos en ratas wistar, as como determinar
la presencia de metahemoglobina formada por nitritos, esto al administrar nitrito de sodio, para as determinar
los efectos, todo esto para comparar con el efecto protector del azul de metileno sobre la hemoglobina
Palabras clave: Metahemoglobina, azul de metileno, nitratos y nitritos, embutidos
ABSTRACT:
INTRODUCCIN
La carne puede protegerse de la putrefaccin
bacteriana mediante la adicin de soluciones
concentradas de sal comn. Pero la carne que
est conservada nicamente con cloruro sdico
toma un color pardo-verdoso atribuible a la
conversin de la hemoglobina en
metahemoglobina. Para que se mantenga el color
rojo se aade al cloruro sdico para salazones una
pequea cantidad de nitrito o nitrato, parte del cual
se transforma lentamente en nitrito.
El nitrito forma nitrosohemoglobina o nitroso
hemocromgeno, de color rojo oscuro. Las
concentraciones de nitrito sdico en salazones
varan del 0.04 al 10%, dependiendo del
tratamiento que se d y del tipo de carne. Los
nitratos se emplean como aditivos en la fabricacin
de productos crnicos curados y, en menor
medida, en la conservacin del pescado y en la
produccin de queso.
Adems de proporcionar color adecuado a la
carne, los nitritos tienen otros efectos sobre los
alimentos: retrasa el proceso de oxidacin de los
lpidos, con la consecuente disminucin del
caracterstico olor de enranciamiento, produce una
mayor firmeza en la textura, y provee a los
alimentos de un importante efecto antimicrobiano
(especialmente frente a Clostridium botilinum y sus
toxinas).
Adems de como aditivos, los nitratos como
sustancias de origen natural pueden encontrarse
en productos crnicos frescos, leche y productos
lcteos, cereales, frutas, bebidas alcohlicas y
verduras. En la mayora de estos alimentos se
encuentran en bajas concentraciones,
generalmente inferiores a 10 mg/kg y rara vez
exceden los 100 mg/kg. Sin embargo, las

verduras, principal aporte de estos compuestos en
la dieta junto con los embutidos, presentan unos
contenidos que oscilan entre 200 y 2.500 mg/kg,
variando en funcin del procesado del alimento,
uso de fertilizantes y condiciones de crecimiento.
La toxicidad del nitrato en humanos se debe
principalmente a que una vez reabsorbido ejerce
en el organismo la misma accin que sobre la
carne conservada, es decir, transforma la
hemoglobina en metahemoglobina, pudiendo
producir cianosis. Se han producido repetidamente
intoxicaciones debido a una cantidad excesiva de
nitrito sdico en las carnes en conserva,
principalmente debido a una mala
homogeneizacin entre ingredientes y aditivos.
Cantidades de 0.5-1 g de nitrito producen en el
hombre intoxicaciones ligeras, de 1-2 g
intoxicacin grave y 4 g intoxicacin mortal. Por
ello, la sal para salazones no debe nunca contener
ms de 0.5-0.6% de nitrito sdico, y la cantidad de
sal empleada no debe sobrepasar los 15 mg por
cada 100 g de carne tratada.
MATERIALES Y MTODOS.
5
6
7
II
III
II
RESULTADOS
Tabla 2. Resultados de las absorbancias
en cada uno de los lotes en muestra
sangunea de rata wistar
EQ
1
L
T
I
2
3
4
5
6
7
III
II
III
II
III
II
A1
0.01 0.02
5
4
0.186
0.475
0.77
0.325
0.3
0.43 0.50
9
0
A2
0.21 0.07
6
2
0.240
0.186
0.122
0.121
0.203
0.23 0.20
5
9
0.233
0.195
0.57
0.130
0.317
0.137
0.080
% Metahemoglobina
50
0
Lote
0.142
g
=A 337 . 4
100 mL
Tabla. Resultados de hemoglobina total

Equipo
Lote
Resultado
1
I
I
9.948
2.992
4
2
III
8.7142
3
II
7.293
4
III
21.318
5
II
4.862
6
III
11.8558
7
II
II
5.123
5.310
g
=( A 1 A 2 ) 23 . 4
MHbt(
100 mL
Tabla. Resultados de metahemoglobina
Equipo
Lote
Resultado
1
I
I
-4.703 -1.1232
2
III
-1.2636
3
II
6.7626
4
III
15.1632
5
II
4.7736
6
III
2.2698
7
II
II
4.77
6.8094
MetaHbt en sangre%=(
150
100
*Clculos: Para los siguientes resultados se usaron

las frmulas:
Hbt(
% Mthb
A3
0.266
II
98.1818
19.14
93.16
128.2
MHbt
100
Hbt
Tabla. Resultados de metahemoglobina en sangre

Equipo
Lote
Resultado %
1
I
I
47.27 37.54
2
III
14.500
3
II
92.72
4
III
71.12
47.27+35.54
=40.905
2
98.18+93.16+128.2+92.72
=103.65
Lote2=
4
19.14 +71.72+ 14.5
=35.12
Lote3=
3
Lote1=
DISCUSIN
La metahemoglobinemia es un trastorno que se da
frecuentemente pues se caracteriza por la oxidacin del
hierro (II) a hierro (III) presente en el grupo hemo de los
globulos rojos estos tienen ms afinidad por el oxgeno
que impide que otros rganos o tejidos usen al oxgeno
lo cual puede provocar una intoxicacin severa que
puede ser mortal.
En la prctica se llev a cabo la cuantificacin de
metahemoglobina presente en ratas Wistar y como el
azul de metileno puede fungir como protector.
Para la experimentacin se requiri tener 3 lotes en el
cual 1 fungi como el blanco en donde las ratas
tendran su dieta normal basada en agua con nutri
cubos, el 2 y el 3 se le dara una dieta rica en
embutidos, con la finalidad de observar como el
consumo de alimentos ricos en nitritos pueden
favorecer la formacin de metahemoglobina, sin
embargo al lote 3 posteriormente se le administrara
azul de metileno para apreciar si efectivamente este
reduce la cantidad de metahemoglobina presente.
El primer parmetro que pudimos observar es el
incremento de peso de las ratas que consumieron el
embutido el cual fue salchicha FUD pues este es
sumamente rico en nitritos, adems de que tiene grasas
y conservadores lo cual induce el aumento de peso.
Una vez ya obtenido el peso final de las ratas tras haber
sido alimentadas con una dieta especfica, se hizo la
posologa para saber la cantidad de nitritos que se le
administrara, y de azul de metileno para el lote 3.
Primero se le administro nitrito de sodio por va

intraperitoneal pues por su irrigacin sangunea llegara
una cantidad apreciable de nitritos a circulacin general,
para el lote 3 se esper 10 min ms para administrar el
azul de metileno por la misma va para llevar a cabo el
efecto protector.
Dado a que el azul de metileno es una estructura la cual
se caracteriza por tener diversos dobles enlaces, es un
buen protector ya que por sus caractersticas qumicas
como moleculares este tiene la capacidad de influir
indirectamente sobre el metabolismo pues acelera a la
NADPH metahemoglobina reductasa, haciendo que el
azul se reduzca a leucometileno y este a su vez
reduce el Fe (III) presente en Fe (II).
Por los resultados obtenidos en la grfica 1 se aprecia
que el lote que presenta mayor porcentaje de
metahemoglobina es el 2 pues este a pesar de que se
les dio nitritos en su dieta, se le administr nitrito de
sodio directamente por lo tanto esto influyo a que los
niveles de metahemoglobina en sangre aumentaran.
Mientras que el lote 1 es el que sigue en cuanto

concentracin de metahemoglobina esto se debe a que
factores inherentes a la rata.
CONCLUSIONES
Se observ la influencia de consumir embutidos en
altas concentraciones de nitritos y cmo influyen en los
sistemas biolgicos.
Se conoci el efecto que produce el consumo de

embutidos a altas cantidades y la toxicidad que
estos producen.
Se efectu una metodologa instrumental para
cuantificar las cantidades de metahemoglobina en
sangre y se aprendi el fundamento qumico del
mismo.
REFERENCIAS.
Pues fisiolgicamente hablando siempre hay nitritos

presentes en el organismo sin embargo la cantidad es
prcticamente despreciable.
Para el caso del lote 3 es el que presenta menores
cantidades de metahemoglobina, se podra decir que el
Azul de metileno actu de una manera eficaz reduciendo
as la mayor cantidad de metahemoglobina en el
organismo.
Para poder llevar a cabo la cuantificacin de los metabolitos
Estudiados se llev a cabo un procedimiento en el consisti
En obtener muestra sangunea de la rata con la finalidad de
Adquirir el plasma y posteriormente tenerlo en una solucin
Amortiguadora de fosfatos el cual se ley a 630 nm la cual
Es la longitud de onda ptima para el hemiglobina ya que esta
se forma al oxidarse con el ferricanuro de potasio, es por ello
que se mide la absorbancia antes y despus aadir dichos
reactivos.
Sin embargo tambin se aadi KCN el cual cede CN- al medio
Por lo que la hemiglobina se convierte a hemiglobincianuro el
Cual absorbe a 540 nm, el cianuro tiene la capacidad de eliminar
A la metahemoglobina pues la convierte en cianometahemoglobina
Haciendo que se elimine el pico de 630 nm, adems de que se
Aadi el buffer de fosfatos para facilitar la conversin de los
Respectivos analitos.
En s se basa en aadir el cianuro con la finalidad de convertir
La metahemoglobina a hemoglobina la cual lee a una cierta
Absorbancia (630 nm) y posteriormente transformar a la
Hemoglobina en metahemoglobina la cual lee a otro (540 nm)
Y por diferencia determinar la cantidad de hemoglobina total
Es por ello que se elimina la lectura al convertir la hemoglobina
En cianometahemoglobina.

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EFECTO PROTECTOR DEL AZUL DE METILENO

RESUMEN: La metahemoglobinemia es una enfermedad provocada por el exceso de nitratos, sta

exceden los 100 mg/kg. Sin embargo, las

Tabla. Resultados de hemoglobina total

*Clculos: Para los siguientes resultados se usaron

Tabla. Resultados de metahemoglobina en sangre

Primero se le administro nitrito de sodio por va

Mientras que el lote 1 es el que sigue en cuanto

Se conoci el efecto que produce el consumo de

Pues fisiolgicamente hablando siempre hay nitritos

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