Fundamento y Metodología Tinción Wright

Fundamento y metodología tinción Wright
La tinción de Wright, es otro tipo de tinción tipo Romanowsky alternativamente utilizada en los
laboratorios y es conocida como tinción policromática, debido a que produce diversos colores. Es
una solución de metanol (fijador de la muestra), eosina (colorante ácido) y azul de metileno
(colorante básico), los que son muy sensibles a las variaciones de pH de las estructuras. Es una
modificación de la tinción de Romanowsky para tinción diferencial de células y elementos
celulares. La coloración característica azul o rosa es el producto de la combinación de los
colorantes purificados de eosina y tiazina
CAUSAS DE ALTERACIONES EN LA CALIDAD DE LA TINCIÓN
El control de calidad de la tinción del frotis sanguíneo es realizada por turno de trabajo o por
“corrida analítica” determinada por el laboratorio. De la misma manera, el laboratorio elabora el
registro (control documental) para el control diario de la tinción. En formulario anexo se presenta
el registro del control de tinción del frotis sanguíneo.
1. Coloración excesivamente azul:

a) Frotis muy gruesos.
b) Tiempo con colorante prolongado (sobretinción).
c) Lavado insuficiente.
d) Colorante alcalino.
2. Coloración excesivamente rosada:

a) Tinción insuficiente.
b) Enjuague prolongado.
c) Colorantes o amortiguador muy ácidos.
3. Presencia de precipitado:
a) Portaobjetos sucios al momento de extender.
b) Secado de láminas insuficiente.
c) Acción excesiva de solución fijadora.
d) Enjuague final insuficiente.
e) Filtración inadecuada de colorante.
4. Otras alteraciones:
a) Artefactos morfológicos por anticoagulante usado.
b) Artefactos por suciedad, deterioro o presencia de grasa en la lámina.
c) Hidratación de los glóbulos rojos.
FUNDAMENTO
La acción combinada de estos colorantes produce el efecto Romanowsky que da una

coloración púrpura a los núcleos de los leucocitos y a los gránulos neutrofílicos y da color rosado a
los eritrocitos. Los componentes de este efecto son el azul B y la eosina Y.
Las propiedades de tinción de Romanowsky dependen del enlace de los colorantes a las
estructuras químicas y de las interacciones del azul B y la eosina Y. Los agrupamientos de ácidos
nucleicos, las proteínas de los núcleos celulares y el citoplasma inmaduro reactivo, fijan el azul B,
colorante básico. La tinción de Wright cuyo colorante está compuesto de azul de metileno (que
tiñe de color azul las partes ácidas de las células) y eosina (que tiñe las partes alcalinas) disueltos
en metanol (que permite la fijación de las células), adicionando a la preparación buffer de fosfatos
(que rehidrata a las células después de la exposición con metanol).
La eosina Y, colorante ácido, se fija a los agrupamientos básicos de las moléculas de hemoglobina y
a las proteínas básicas.
RESULTADOS ESPERADOS
a) Eritrocitos: coloración rosada más intenso en la periferia que en el centro, debido a su

grosor y forma bicóncava.
b) Plaquetas: color rosa pálido con pequeñas granulaciones de color púrpura.
c) Neutrófilos: núcleo violeta oscuro, picnótico, con varios lóbulos unidos por puentes de
cromatina. Citoplasma rosa pálido con pequeños gránulos (granulación secundaria).
d) Eosinófilos: núcleo violeta oscuro, picnótico, con dos lóbulos unidos por puentes de
cromatina. Citoplasma gris rojizo refringente constituido por gránulos medianos.
e) Basófilos: núcleo violeta oscuro de forma irregular con lobulaciones que no se observan
por sobreposición de la granulación citoplasmática. Citoplasma basófilo repleto de
gránulos azul negruzco.
f) Monocitos: núcleo violeta claro, redondeado, ovalado o con escotadura que le da

aspecto arriñonado. Citoplasma grisáceo en vidrio esmerilado que puede presentar
vacuolas y algunas granulaciones azurófilas.
g) Linfocitos: núcleo redondo azul oscuro con cromatina condensada. Citoplasma azul
pálido o celeste límpido debido a ligera basofilia que le confiere su contenido en ARN.
Puede presentar granulación azurófila que frecuentemente se encuentra en un área
marginal del citoplasma.
Referencias
Iván Palomo G., Jaime Pereira G., Julia Palma. Hematología: Fisiopatología y
Diagnóstico. Editorial Universitaria de Talca 2005.
. Bernardette F. Rodak. Hematología fundamentos y aplicaciones clínicas. Ed. Médica

Panamericana, 2005.

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CAUSAS DE ALTERACIONES EN LA CALIDAD DE LA TINCIÓN

1. Coloración excesivamente azul:

2. Coloración excesivamente rosada:

La acción combinada de estos colorantes produce el efecto Romanowsky que da una

a) Eritrocitos: coloración rosada más intenso en la periferia que en el centro, debido a su

b) Plaquetas: color rosa pálido con pequeñas granulaciones de color púrpura.

f) Monocitos: núcleo violeta claro, redondeado, ovalado o con escotadura que le da

. Bernardette F. Rodak. Hematología fundamentos y aplicaciones clínicas. Ed. Médica

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