Cancer de Colon 1

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"Análisis del impacto inhibidor del crecimiento y

las propiedades antioxidantes del extracto de


garambullo fermentado en células de cáncer de
colon humano”
Milena Avila Carrascal† Juanita Garces Garcia†
†Bioquímica Médica, Facultad De Ciencias Exactas, Instituto Tecnológico Metropolitano, Medellín
050012, Colombia 2023.

RESUMEN endógeno. Sin embargo, es fundamental


llevar a cabo estudios adicionales para
El cáncer de colon es una enfermedad de esclarecer el mecanismo de acción
gran prevalencia a nivel mundial, y según molecular del fruto Myrtillocactus
las estadísticas más recientes en 2020, geometrizans.
ocasionó la lamentable cifra de 988 mil
fallecimientos. Actualmente, se ha I. INTRODUCCIÓN
establecido una fuerte conexión entre esta
enfermedad y los hábitos alimenticios y el
estilo de vida de las personas. Se ha El cáncer de colon es uno de los tipos de
observado que existe una relación inversa cáncer con mayor incidencia a nivel
entre el consumo de alimentos de origen mundial. Ocupa el tercer lugar a nivel
vegetal y la probabilidad de desarrollar
mundial después del cáncer de pulmón y
cáncer de colon. Esta relación parece estar
vinculada al contenido de compuestos antes del de próstata. En el año 2018 se
naturales conocidos como fitoquímicos registraron 1 284 207 casos a nivel mundial
que se encuentran en estos alimentos. El (International Agency for Research on
Myrtillocactus geometrizans, un fruto de la Cancer, 2018) y su tasa de mortalidad lo
familia de las cactáceas conocido posiciona como el segundo cáncer con
coloquialmente como garambullo, ha sido mayor mortalidad. Tan solo en el 2020 se
objeto de recientes investigaciones que han
reportaron cerca de 988 mil muertes (World
revelado su alto contenido de
biomoléculas. Los resultados de la Health Organization, 2020). Por su parte,
investigación demostraron que el extracto en Colombia, en el mismo periodo, esta
de garambullo reduce la viabilidad celular enfermedad fue la tercera más frecuente
de manera dependiente de la dosis, con para ambos sexos (en número absoluto), se
una IC50 del 15%. Se observó que el 30% diagnosticaron 10.783 nuevos casos y se
de la muerte celular se debió a necrosis y estimaron 5.417 muertes por esta causa.
el 44% a apoptosis. Además, el
tratamiento condujo a una detención del (Datos de Globocan).
ciclo celular, principalmente en la fase la tres características para poder clasificar
G2/M, y una disminución en los niveles de la patología
glutatión reducido. Estos hallazgos -Tamaño del tumor (T) es decir, la
sugieren un impacto en la viabilidad extensión del cáncer con base a la
celular y un efecto positivo en la composición del intestino grueso.
utilización del glutatión reducido como
mecanismo de defensa antioxidante
2

-La transmisión del cáncer a los ganglios celular en la línea celular SW480 por el
linfáticos adyacentes, en el que la “N” hace garambullo.
referencia a los nódulos. -Analizar cómo el extracto de garambullo
-Metástasis (M) el cual hace referencia al fermentado afecta al sistema antioxidante
avance del cáncer no solo a los ganglios natural del organismo.
linfáticos sino a otros órganos cercanos
como por ejemplo el hígado o los III. MATERIALES Y METODOS
pulmones. El garambullo es un fruto rico en
fitoquímicos, perteneciente a la familia de Cultivo celular
las cactáceas columnares, es endémico de Estudio experimental in vitro Se utilizó la
México. Hasta hoy se han reportado 4 línea celular de adenocarcinoma humano
especies que se distinguen por su forma, SW480, las cuales corresponden a una
color y composición fitoquímica. La carcinogénesis colorrectal en estadio II B,
especie más abundante es la Myrtillocactus con una mutación en guanina por adenina
geometrizans. El fruto comestible tiene una resultando en una mutación en p53.
forma globular con diámetros que van
desde 1.5 cm y de colores que van desde el Viabilidad celular
verde hasta un morado intenso, La viabilidad celular se analizó por el
dependiendo de su estado de maduración. ensayo colorimétrico MTT.
Los fitoquímicos componen una amplia
gama de moléculas activas que han Apoptosis
demostrado tener un importante efecto
La apoptosis se define como una muerte
sobre la salud gastrointestinal. Este estudio
celular programada por la célula. Uno de
se enfocó en la evaluación de las
los métodos para cuantificar la apoptosis en
propiedades antiproliferativas y
células es a través de citometría de flujo y
antioxidantes de un extracto de garambullo
Anexina V, esta última al ser una molécula
fermentado en células de cáncer de colon
que se une específicamente a la molécula
humano.
fosfatidilserina, permite la identificación de
apoptosis
II. OBJETIVOS

Evaluar el efecto antiproliferativo y


antioxidante del extracto de la fermentación
de garambullo (Myrtillocactus
geometrizans) en células de cáncer de colon
humano SW480. Figura 1. Efecto del EFG sobre muerte celular en
células SW480. En el cuadrante inferior izquierdo,
se muestran las células viables (Control 88.3 %, BF
Objetivos específicos
79.72 %, EFG 54.41 %), en el cuadrante inferior
-Evaluar el impacto del extracto de derecho las células en apoptosis temprana (Control
garambullo fermentado en la viabilidad de 4.2 %, BF 5.74 %, EFG 20.9 %), cuadrante superior
las células de cáncer de colon SW480. derecho las células en apoptosis tardía (control 4.64
%, BF 10.59 %, EFG 24.03 %) y en el cuadrante
-Investigar los mecanismos subyacentes
superior izquierdo se muestran las células
responsables de la inducción de la muerte necrosadas (control 2.85 %, BF 3.95 %, EFG 0.66
3

%). Los tratamientos son: control (Células sin obteniéndose 11 nmoles de GSH en las
tratamiento), blanco de fermentado (BF) y extracto células tratadas con EFG contra el control,
fermentado de garambullo (EFG).
el cual presentó 22144 nmoles de GSH.

Figura 2. Efecto del EFG sobre la apoptosis. Los


resultados están expresados de acuerdo al porcentaje
de células totales detectadas por el citómetro de
Figura 3. Cuantificación de glutatión reducido. Los
flujo. Se representan la media ± ES de al menos dos
resultados están expresados en nmoles de GSH con
experimentos independientes. *Representa
respecto al control negativo (Células incubadas en
significancia estadística (p<0.05).
ausencia de EFG). Se representan la media ± ES de
al menos tres experimentos independientes. *
Marco metodológico Representa significancia estadística p<0.05.
Aunque se sabe que una gran cantidad de
polifenoles son capaces de llegar al colon El efecto del extracto fermentado del
por efecto de la fibra dietaria, se garambullo sobre las fases del ciclo
desconocen los efectos que las celular
biomoléculas del garambullo pudieran Para el estudio del efecto del EFG en el
ejercer sobre este órgano. Hasta el ciclo celular de células SW480 se utilizó la
momento se sabe que algunas biomoléculas metodología por citometría de flujo con
tienen su efecto en varios reguladores ioduro de propidio. Nuevamente se
importantes del ciclo celular como lo son la comenzó usando la IC50 determinada en el
ciclina D1, cdk4, cdk6, p53, p21 and p27 ensayo de viabilidad celular del presente
(Langer y col., 2013). Aunado a esto, los estudio. Obteniéndose como resultado un
resultados que se obtuvieron de la aumento de la población celular en las fases
cuantificación de lactato deshidrogenasa y G2/M de células tratadas con el EFG en
apoptosis sugieren no sólo un efecto sobre comparación con las células control
el arresto del ciclo celular por parte del (Células sin tratamiento). De acuerdo al
extracto fermentado de garambullo, sino un análisis estadístico, las diferencias entre las
efecto directamente sobre estos dos tipos de células tratadas con el EFG y el control
muertes celulares (necrosis y apoptosis) existe una diferencia estadísticamente
sugiriendo la regulación directa sobre las significativa (Figura 4). Lo que sugiere que
moléculas involucradas. el efecto del EFG sobre los mecanismos
involucrados en el arresto de las últimas
El glutatión reducido se vio disminuido por fases del ciclo celular (G2/M).
el extracto fermentado de garambullo
(EFG) en células de cáncer de colon
SW480. Los resultados del presente estudio
respecto a la cuantificación de GSH
muestran una disminución significativa
4

V. CONCLUSIONES

En el presente estudio, se llevó a cabo una


investigación para analizar los efectos
antiproliferativos y antioxidantes de un
extracto fermentado de garambullo en
células de cáncer de colon humano
(SW480). Los resultados revelaron que
Figura 4. Efecto del EFG sobre las fases del ciclo
celular. Los resultados están expresados de acuerdo este extracto redujo la viabilidad celular en
al porcentaje obtenido de células en fase G0/G1, S y función de la dosis aplicada, y se
G2/M con BF y EFG con respecto al control determinó una concentración inhibitoria
negativo (Células incubadas en ausencia de EFG). del 50% (IC50) del 15%. Además, se
Se representan la media ± ES de al menos dos
observó que el 30% de las células
experimentos independientes. *Representa
significancia estadística (p<0.05). murieron por necrosis, mientras que el
44% experimentaron apoptosis como
mecanismo de muerte celular.
IV. RESULTADOS ESPERADOS Asimismo, el tratamiento con el extracto
fermentado de garambullo indujo un
El EFG disminuye la viabilidad celular en arresto en el ciclo celular, principalmente
células SW480. en la fase G2/M, y se observó una
En la Figura 5 se muestra un efecto dosis- disminución en los niveles de glutatión
respuesta del EFG sobre la viabilidad de las reducido. Estos hallazgos sugieren un
células SW480. . El EFG al 10% redujó un impacto en la viabilidad celular y un
30% la vibilidad celular y a la posible papel del glutatión reducido como
concentración de 30% redujo la viabilidad parte de la defensa antioxidante endógena.
a un 82%, del mismo modo se obtuvo la Sin embargo, es esencial destacar la
IC50 al 15 % de la concentración de EFG. necesidad de continuar con investigaciones
adicionales para desentrañar el mecanismo
molecular subyacente a los efectos
observados en las células de cáncer de
colon SW480.

Figura 5. Efecto del extracto fermentado de


garabullo (EFG) sobre la viabilidad de las células
SW480 con MTT. La viabilidad celular está
normalizado a 100% con respecto al control (células
incubadas en ausencia de EFG) y representan la
media ± ES de tres experimentos independientes.
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Referencias
https://www.minsalud.gov.co/Paginas/Una
%20fecha%20para%20recordar%20y%20
actuar.aspx
https://www.sciencedirect.com/science/arti
cle/abs/pii/S022283605006959
https://ri-
ng.uaq.mx/bitstream/123456789/4335/1/R
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https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles
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https://www.thermofisher.com/order/catal
og/product/K1675
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1606125
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https://cytekbio.com/products/muse-
annexin-v-dead-cell-
kit?variant=40651389894692
https://cytekbio.com/products/muse-cell-
cycle-kit?variant=40651389927460

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