Bmc. Unidad 1

BIOLOGÍA MOLECULAR Y CITOGENÉTICA
UNIDAD 1: ÁCIDOS NUCLEICOS Y ENZIMAS ASOCIADAS
Marta Ramajo Matesanz

Fisiopatología general
UNIDAD 1.1: LA UNIDAD CELULAR
[email protected]
CICLO FORMATIVO DE GRADO SUPERIOR DE ANATOMÍA CICLO FORMATIVO DE GRADO SUPERIOR DE LABORATORIO
PATOLÓGICA Y CITODIAGNOSTICO CLÍNICO Y BIOMÉDICO
CONTENIDOS
1.- LOS ÁCIDOS NUCLEICOS .
 ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA.
 PROPIEDADES FISICOQUÍMICAS.
2.- ADN.
 ESTRUCTURA DEL ADN.
 ORGANIZACIÓN DE LAS MOLÉCULAS DE ADN.
3.- ARN.
 ESTRUCTURA DEL ARN.
 TIPOS Y ORGANIZACIÓN DE ARN.
4.- FLUJO DE INFORMACIÓN GENÉTICA.
 REPLICACIÓN DE ADN.
 TRANSCRIPCIÓN ADN A ARN.
 TRADUCCIÓN.
5.- ENZIMAS EMPLEADAS EN BIOLOGÍA MOLECULAR.
 NUCLEASAS.
 ENDONUCLEASAS DE RESTRICCIÓN.
 ADN POLIMERASAS.
 OTROS ENZIMAS.
CONTENIDOS
2.- ADN.
3.- ARN.
 TRADUCCIÓN.
 NUCLEASAS.
 OTROS ENZIMAS.
LOS ÁCIDOS NUCLEICOS.
LOS ÁCIDOS NUCLEICOS
➢Los ácidos nucleicos son macromoléculas poliméricas encargadas de

almacenar, transmitir y expresar la información genética de los seres vivos.
❑ Ácido desoxirribonucleico (ADN). Constituye el
depósito de almacenamiento de información
hereditaria. Controla su transmisión a la descendencia.
Está formado por nucleótidos.
❑ Ácido ribonucleico (ARN). Encargado de la expresión

de esta información hereditaria mediante la síntesis de
proteínas.
ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA
➢ El ADN y el ARN se diferencian en su estructura y composición química. Sin

embargo ambos están constituidos por largas cadenas de monómeros
denominados nucleótidos.
➢ Los nucleótidos son las unidades estructurales que se repiten en los

ácidos nucleicos y que hacen posible el mecanismo de transmisión de
información genética.
ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA
➢ Son biomoléculas que contienen, almacenan y transmiten

la información genética.
➢ Polímeros de gran tamaño —> peso molecular muy
elevado.
➢ Los nucleótidos se unen por enlaces fosfodiéster.
➢ TIPOS de ácidos nucleicos.

1. ADN = ácido desoxirribonucleico.
2. ARN = ácido ribonucleico.
LOS ÁCIDOS NUCLEICOS. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA.
ÁCIDOS NUCLEICOS
➢ Están constituidos:
❑ Base nitrogenada (adenina,
guanina, timina, citosina, uracilo).
❑ Monosacárido de cinco átomos de
carbono (pentosa).
❑ Molécula de ácido fosfórico.
❑ Bases nitrogenadas: son compuestos heterocíclicos,

formadas por un anillo único (pirimidina) o por dos
anillos condensados (purina):
• Bases púricas: ADENINA (A) Y GUANINA (G).
• Bases pirimidínicas: CITOSINA (C), TIMINA (T) y URACILO (U).
Adenina, Guanina y Citosina están presentes en ADN y ARN. Timina sólo se encuentra en
ADN y Uracilo sólo está presente en ARN.
❑ Pentosa: hidrato de carbono de cinco átomos de carbono. Puede ser de

dos tipos:
• 2-desoxi-D-ribosa: en los nucleótidos de ADN.
• D-ribosa: en los nucleótidos de ARN.

Desoxirribosa (ADN) Ribosa (ARN)
❑ Fosfato: se encuentra en forma de anión fosfato (PO43-) y su carga

negativa es la responsable del carácter ácido de los nucleótidos.
• Se une al carbono 5’ de la pentosa

mediante un enlace éster
NUCLEÓSIDO
➢ Es la unión de una base nitrogenada y una pentosa.
Nucleósido = base nitrogenada + pentosa
Según la PENTOSA
● Ribonucleósidos: ARN
● Desoxirribonucleósido: ADN
NUCLEÓSIDO
➢ La unión entre pentosa y BN se realiza mediante un enlace N-glucosídico.
Se une el C1’ de la pentosa con:

● Base pirimidínica: N-1
● Base púricas: N-9
NUCLEÓSIDO
➢ El nombre del compuesto resultante se forma con el nombre de la base
nitrogenada acabado en :
• -osina: bases púricas (A, G)
• -idina : bases pirimidínicas ( C, T, U )
EJEMPLO
Citosina
ADN: 2’-desoxicitidina
ARN: Citidina
ADN pentosa = desoxirribosa, prefijo DESOXI-

NUCLEÓSIDO
COMPLETA LA TABLA
NUCLEÓSIDOS PURÍNICOS NUCLEÓSIDOS PIRIMIDÍNICOS
Sufijo “-osina” Sufijo “-idina”

Base Adenina Guanina Citosina Timina Uracilo
ADN
ARN
NUCLEÓSIDO
COMPLETA LA TABLA
NUCLEÓSIDOS PURÍNICOS NUCLEÓSIDOS PIRIMIDÍNICOS
Sufijo “-osina” Sufijo “-idina”

Base Adenina Guanina Citosina Timina Uracilo
ADN 2’-desoxiadenosina 2’-desoxiguanosina 2’-desoxicitidina 2’-desoxitimidina
ARN Adenosina Guanosina Citidina Uridina
NUCLEÓTIDO
NUCLEÓTIDO = Pentosa + BN + fosfato
NUCLEÓSIDO
➢ La unión del nucleósido con la molécula de

anión fosfato se realiza mediante un enlace de
tipo éster.
➢ La unión entre nucleótidos se realiza mediante

enlaces fosfodiéster. A través del grupo fosfato.
Unión entre C5’ fosfato y C3’ OH.
NUCLEÓTIDO
Nucleótido = nucleósido + fosfato(s)
• Dinucleótido : unión de 2 nucleótidos mediante enlace fosfo-diester

típico.
• Oligonucleótido: Cadena lineal de hasta 50 nucleótidos.
• Polinucleótido: Cadena lineal de muchos nucleótidos (>50
nucleótidos).
➢ Las cadenas de nucleótidos tienen dos extremos libres. Extremo 5´ con un grupo
fosfato (unido al carbono 5 de la primera pentosa) y extremo 3ćon un radical –OH
(unido al carbono 3 de la última pentosa).
EL AZÚCAR SE UNE AL FOSFATO

POR UN ENLACE ESTER
UN NUCLEÓTIDO SE UNE A OTRO

NUCLEÓTIDO POR UN ENLACE
FOSFODIESTER
EL AZÚCAR SE UNE A LA BASE NITROGENADA

POR UN ENLACE NITRÓGENO GLUCOSÍDICO
(N-GLUCOSÍDICO)
LAS BASES NITROGENADAS DE UNA CADENA SE UNEN A

LAS BASES NITROGENADAS DE OTRA CADENA MEDIANTE
PUENTES DE HIDROGENO, DOBLES A T, TRIPLES G C.
NOMENCLATURA NUCLEÓTIDOS
❑ Eliminar la -a- terminal del nucleósido + 5´ Fosfato

Ejemplo: Adenina: Adenosina: Adenosín 5’-fosfato
❑ Sufijo -ilato
Ejemplo: Adenina : Adenilato
❑ Ácido + sufijo -ílico

Ejemplo: Adenina : Ácido Adenílico
COMPLETA LA TABLA
BN PENTOSA NUCLEÓSIDO NUCLEÓTIDO
Adenina D ribosa Adenosina
Citosina D ribosa Citidina
Guanina D ribosa Guanosina
Timina D ribosa
Uracilo D ribosa Uridina
Adenina 2 desoxi D ribosa Desoxiadenosina
Citosina 2 desoxi D ribosa Desoxicitidina
Guanina 2 desoxi D ribosa Desoxiguanosina
Timina 2 desoxi D ribosa Desoxitimidina
Uracilo 2 desoxi D ribosa
COMPLETA LA TABLA
BN PENTOSA NUCLEÓSIDO NUCLEÓTIDO
Adenina D ribosa Adenosina Adenosin 5´P Adenilato Ác. Adenílico
Citosina D ribosa Citidina Citidin 5´P Citidilato Ác. Citidílico
Guanina D ribosa Guanosina Guanosín 5´P Guanilato Ác. Guanílico
Timina D ribosa
Uracilo D ribosa Uridina Uridín 5´P Uridilato Ác. Uridílico
Adenina 2 desoxi D ribosa Desoxiadenosina Desoxiadenosin 5´ P Desoxiadenilato Ác. Desoxiadenílico
Citosina 2 desoxi D ribosa Desoxicitidina Desoxicitidín 5´ P Desoxicitidilato Ác. Desoxicitidílico
Guanina 2 desoxi D ribosa Desoxiguanosina Desoxigunaosín 5´ P Desoxiguanilato Ác. Desoxiguanílico
Timina 2 desoxi D ribosa Desoxitimidina Desoxitimidín 5´ P Desoxitimidilato Ác. Desoxitimidílico
Uracilo 2 desoxi D ribosa
LOS ÁCIDOS NUCLEICOS. PROPIEDADES FISICOQUÍMICAS.
PROPIEDADES FISICOQUÍMICAS.
• Las bases nitrogenadas forman puentes de hidrógeno con sus bases
complementarias, A-T y C-G.
• Desnaturalización: A temperaturas o pH elevados se rompen los enlaces de

Hidrógeno y la molécula de ADN se separa en dos cadenas de nucleótidos.
• Absorción de luz en el UV: máx. de absorción a 260nm, utilizado para determinar su
concentración.
• Propiedades en disolución:
• Carácter ácido, debido al grupo fosfato.
• Elevada viscosidad.
• Densidad: A mayor contenido en G+C mayor densidad posee el ADN.
LOS ÁCIDOS NUCLEICOS. ÁCIDOS NUCLEICOS.
ÁCIDOS NUCLEICOS
REGLAS DE CHARGAFF
Edwin Chargaff (1950)

o Las proporciones de las bases nitrogenadas
eran diferentes en los distintos organismos,
aunque seguían algunas reglas.
o Estas reglas se cumplen en el ADN de doble

hélice.
LOS ÁCIDOS NUCLEICOS. ÁCIDOS NUCLEICOS.
ÁCIDOS NUCLEICOS
REGLAS DE CHARGAFF
CONTENIDOS
2.- ADN.
3.- ARN.
 TRADUCCIÓN.
 NUCLEASAS.
 OTROS ENZIMAS.
EL ADN.
EL ADN
➢El Ácido Desoxirribonucleico (ADN) almacena la información genética de
un individuo, la transmite a los descendientes y dirige la síntesis de
proteínas.
➢Se localiza:
• Eucariotas (Animales, plantas, levaduras y hongos)
o Núcleo
o Matriz mitocondrias
o Estroma cloroplastos
• Procariotas: Bacterias
o Citosol, en un solo cromosoma
o Plásmidos
• Virus (Dentro de la cápsida ,sólo en algunos tipos)
EL ADN. ESTRUCTURA.
ESTRUCTURA DEL ADN

➢ Es un polímero formado por cadenas de desoxirribonucleótidos.
Contiene Adenina, Timina, Citosina y Guanina.
➢ La molécula de ADN se caracteriza por su tamaño:
• Eucariota: posee varios millones de pb
• Plásmidos y ADN mitocondrial sólo

tienen unos pocos miles de pb.
EL ADN. ESTRUCTURA.
ESTRUCTURA DEL ADN
❑ Estructura primaria
❑ Estructura secundaria
❑ Estructuras de orden superior

EL ADN. ESTRUCTURA.
ESTRUCTURA DEL ADN

➢ Estructura primaria, está determinada por la secuencia de pares de bases
que la componen. Dirección 5’-P 3’-OH
➢ Complementariedad de bases: la cantidad de Timina es la misma que la

de Adenina y la de Citosina se equipara con la de Guanina. Esto se debe al
emparejamiento de las bases nitrogenadas por medio de puentes de
hidrógeno.
EL ADN. ESTRUCTURA.
ESTRUCTURA DEL ADN

➢ Estructura secundaria: estructura en doble hélice del ADN.
James Watson y Francis Crick en 1953 propusieron
que la estructura del ADN consiste en una doble
hélice formada por dos cadenas, antiparalelas,
complementarias y enrolladas una sobre la otra.
Para realizar su trabajo emplearon
datos ya existentes:
• Los datos obtenidos por
Chargaff (1950).
• Datos procedentes de estudios
de difracción de rayos X sobre
fibras de ADN.
EL ADN. ESTRUCTURA.
• Dos cadenas de ADN antiparalelas. 5’P → 3’ OH /

• 3’OH → 5’P.
• La secuencia de bases de una cadena es

complementaria de la otra, si una hélice contiene
una base púricas la otra contiene una pirimidínica.
• Hélices están unidas mediante puentes de
hidrógeno entre las bases.
• Adenina = Timina (dos puentes de H).
• Guanina = Citosina (tres puentes de H).
• Doble hélice está enrollada helicoidalmente sobre un
eje imaginario “a derechas”: Dextrógira.
● El diámetro de la doble hélice es de 20 Å.

EL ADN. ESTRUCTURA.
ESTRUCTURA DEL ADN
Surco menor
Surco mayor
EL ADN. ORGANIZACIÓN DE LAS MOLÉCULAS DE ADN.
ORGANIZACIÓN DE LAS MOLÉCULAS DE ADN

➢ Virus
o Monocatenario, bicatenario, lineal o circular.
➢ Procariotas: Bacterias
o Un solo cromosoma de ADNbc y circular (No dentro de la envoltura nuclear).
o Citoplasma, moléculas de ADNbc circular dispersas
(plásmidos)
➢ Eucariotas: Animales, plantas, levaduras y hongos

o Núcleo: Bicatenario.
o Matriz mitocondrias: Bicatenario - Circular
o Estroma cloroplastos: Bicatenario – Circular

➢ ADN se asocia a proteínas de dos tipos (cromatina):
o Proteínas histónicas (histonas)
▪ Función: estabilizar la estructura del ADN
▪ Tipos: H1, H2A, H2B, H3, H4
o Proteínas no histónicas.
▪ Función: reguladora estructural y
enzimática.
H2a, H2b, H3 y H4
H1

GRADOS DE CONDENSACIÓN
❑ Nivel 1: Nucleosomas
❑ Nivel 2: Solenoide
❑ Nivel 3: Cromosoma interfásico
❑ Nivel 4: Cromosoma metafásico


GRADOS DE CONDENSACIÓN
➢ Cromatina: formada por el complejo ADNbc y

las histonas.
➢ Nucleosoma: es la unidad básica de la
cromatina. Formado por 8 histonas y una hebra
de ADN que se enrolla sobre ellas.
➢ Solenoide: Se forma por el enrollamiento sobre
sí misma de la fibra de cromatina. En cada vuelta
hay seis nucleosomas.

NIVEL 1. NUCLEOSOMAS. FIBRA 10 nm
• Unidad básica de la cromatina (146pb)
• “Estructura en cuentas de rosario”
• Cada nucleosoma está formado por 8

histonas + cadena de ADN doble.
• Grosor de 10 nm = diámetro

NIVEL 2. SOLENOIDES. FIBRA 30 nm
• Estructura observada in vitro.
• Contiene 6 nucleosomas por

cada vuelta de solenoide.
• Presencia de H1.

NIVEL 3. CROMOSOMA INTERFÁSICO
• Presencia de lazos y superenrollamiento de la estructura anterior.
• Eucromatina: menor condensación.

o Replicación al principio Fase S: Temprana
o Genes sí se expresan
• Heterocromatina:Máxima condensación.
o Replicación al final Fase S : Tardía
o Genes no se expresan

➢ El número de cromosomas es característico

de cada especie.
➢ El ADN mitocondrial es una molécula de ADNbc circular de pocos miles de

nucleótidos.
• Genes síntesis de ARN ribosómico y enzimas.
• En humanos codifica 37 genes.
• Se hereda de la madre.
CONTENIDOS
2.- ADN.
3.- ARN.
 TRADUCCIÓN.
 NUCLEASAS.
 OTROS ENZIMAS.
EL ARN.
EL ARN
➢ Controla la síntesis de proteínas a partir de la información contenida en
el ADN.
➢ Localización:
• eucariotas (Monocatenario): está
presente en el núcleo, en el citoplasma y
en los ribosomas.
• Procariotas (Monocatenario): citosol.
• Virus (Monocatenario/Bicatenario):
algunos dentro de la cápsida.
EL ARN.
EL ARN
➢ El ARN tiene como misión ser intermediario en la síntesis de proteínas.
➢ Procesos:
• Transcripción: de la secuencia de ADN a la
secuencia complementaria de ARN.
• Traducción: de la secuencia de ARN a la

secuencia de aminoácidos respectivos
para la síntesis de proteínas.
EL ARN. ESTRUCTURA.
ESTRUCTURA
o Azúcar: Pentosa (D-ribosa)
o Ácido fosfórico: enlace fosfoéster.
o Bases nitrogenadas: enlace N-glicosídico.

⮚ Bases púricas: Adenina (A) y Guanina (G)
⮚ Bases pirimidínicas: Uracilo (U) y Citosina (C)
EL ARN. ESTRUCTURA.
ESTRUCTURA
❑ Son polirribonucleótidos formados por cadenas lineales (hebra sencilla).
❑ Longitud inferior al ADN.
❑ Dirección de la cadena: 5’ 3’
❑ Tipos de estructura:
❑ Primaria
❑ Secundaria: solo en ARNt y ARNr
❑ Terciaria: única para cada tipo de ARN.
EL ARN. TIPOS Y ORGANIZACIÓN DEL ARN.
TIPOS Y ORGANIZACIÓN
➢ Se pueden distinguir dos tipos:
• Funcionales (no se traducen a proteínas): ARNr, ARNt, ARNsn y ARNsc.
• Informativos (se traducen a proteínas): ARNm y ARNhn.
➢ ARN mensajero (ARNm):
• Porta la información para la síntesis de una proteína.
• Es una copia de la información contenida en la secuencia de ADN.
• En eucariotas contiene la información para una sola proteína
(monocistrónicas) y en procariotas portan la información de varias
proteínas (policistrónicas)
➢ ARN heterogéneo nuclear (ARNhn): precursor del ARNm, tras un proceso
de maduración sale al exterior en forma de ARNm.
➢ ARN ribosómico (ARNr):
• Es el mayoritario de las células.
• Junto con proteínas constituye los ribosomas, orgánulos responsables de la

síntesis de proteínas.
• Opera como catalizador de la síntesis de proteínas (ribozimas).
• Tiene una estructura compleja con numerosos bucles y

horquillas.
RIBOSOMAS
ESTRUCTURA:
• Dos subunidades:
o Las dos subunidades se asocian por interacciones no covalentes
PROCARIOTAS (70S)
1. Subunidad grande (50S)
2. Subunidad pequeña (30S)
EUCARIOTAS (80S)
1. Subunidad grande (60S)
2. Subunidad pequeña (40S)
➢ ARN de transferencia (ARNt):
• Porta aminoácidos hasta los ribosomas para su incorporación a la cadena proteica
que se está sintetizando.
• Es un ARN corto, con forma de trébol que tiene en el extremo 3´ una secuencia CAA
donde se une a un aminoácido característico.
• Tienen 3 lazos, siendo el central o anticodón donde se localizan 3 bases que son
complementarias del ARNm. Las bases complementarias del ARNm se denominan
codón.
• Estructura (“hoja de trébol”):

o Brazo aceptor : Unión aminoácido
o Tres brazos o asas principales

✔Brazo T: TΨC
✔Brazo D: DHU (Dihidrouridina)
✔Brazo del anticodón: Unión
codón (ARNm)
o Un brazo variable o asa menor

➢ ARN pequeño nuclear (ARNsn): con actividad enzimática sobre el propio

ARNhn. Provoca su maduración. Participa en la eliminación de intrones y
unión de exones (ARNm).
➢ ARN pequeño nucleolar (ARNsno): precursor de varios ARN ribosómicos.
➢ ARN citoplasmático pequeño (ARNsc): participan en el envió de proteínas

a sus destinos finales.
CONTENIDOS
2.- ADN.
3.- ARN.
 TRADUCCIÓN.
 NUCLEASAS.
 OTROS ENZIMAS.
FLUJO DE INFORMACIÓN GENÉTICA.
FLUJO DE INFORMACIÓN GENÉTICA

➢El ADN contiene la información genética de un organismo y se transmite
íntegramente a la descendencia.
• Replicación: Duplicar el material genético
• Transcripción: Síntesis de moléculas de ARNm
• Traducción: ARNm se transforma secuencia de aminoácidos de la proteína.
FLUJO DE INFORMACIÓN GENÉTICA. REPLICACIÓN DE ADN.
REPLICACIÓN DE ADN
➢La molécula de ADN se duplica para dar lugar a dos moléculas
idénticas, con la misma secuencia a la cadena madre.
REPLICACIÓN DE ADN
➢ Replicación Semiconservativa: cada molécula "hija” contiene una cadena
de la molécula original y otra de nueva síntesis.
➢ Origen de la replicación:
● Procariotas (bacterias): único

● Eucariotas: múltiples orígenes de
replicación
REPLICACIÓN DE ADN
https://www.youtube.com/watch?v=oQp7VlWpzNw
1. REPLICACIÓN
REPLICACIÓN DE ADN
EXTRA: Experimento Meselson y Stahl (1958)
57
1. REPLICACIÓN
REPLICACIÓN DE ADN
58
1. REPLICACIÓN
REPLICACIÓN DE ADN
59
REPLICACIÓN DE ADN
➢ Es bidireccional y secuencial: a partir del origen , las cadenas de ADN se
separan y la síntesis de nuevas moléculas se da en ambas direcciones.
➢ Gradual y repetitiva: se añaden los desoxirribonucleicos uno a uno y por

el mismo mecanismo
REPLICACIÓN DE ADN
➢ Es semi-discontinua: la síntesis siempre en dirección 5’ 3’
● Hebra adelantada: continua
● Hebra retardada : discontinua. Fragmentos de Okazaki
ENZIMAS DE REPLICACIÓN DE ADN

➢ La replicación es un proceso complejo en el que participan múltiples
enzimas:
❑ Helicasa:
● Desenrolla y separa las cadenas de la doble hélice a partir del origen de
replicación.
● Rompe puentes de Hidrógeno entre bases que mantienen unidas las dos
hebras.
❑ SSBP (Proteína de unión a cadena sencilla):
● Estabiliza las cadenas sencillas de ADN impidiendo que se vuelva a formar
la doble hélice.
❑ Girasa y Topoisomerasa:
● Relajan la tensión del resto de la molécula de ADN.

❑ ADN POLIMERASA:
✔Función polimerasa:
⮚ Síntesis de la nueva cadena añadiendo un nuevo nucleótido al
extremo 3´ de la cadena en crecimiento.
⮚ No puede iniciar el crecimiento, sólo puede elongar.
⮚ El nucleótido que añade es complementario a la secuencia de la
cadena molde que está leyendo.
✔Función exonucleasa:
➢ Eliminar nucleótidos, lo que permite corregir errores de
replicación.

❑ PRIMASA:
➢ Sintetiza fragmentos cortos de ARN denominados cebadores o
primers, que son complementarios a la molécula de ADN que se
está replicando.
➢ Se forman híbridos ARN-ADN que son reconocidos por la ADN
polimerasa para iniciar su función de elongación.
❑ LIGASA:
➢ Une los fragmentos de Okazaki entre sí y con la hebra conductora
para conseguir la continuidad de la cadena de nueva síntesis.


FASES DE REPLICACIÓN DE ADN

1. FASE DE INICIACIÓN:
➢ Hay zonas en el ADN donde se encuentra una secuencia de bases que
da origen a la replicación.
➢ Las helicasas reconocen estos puntos y rompen los puentes de

hidrógeno entre las bases separando las dos cadenas de ADN.
➢ Burbuja de replicación.

➢ Las SSBP estabilizan las cadenas separadas impidiendo que se vuelvan
a unir. Y la topoisomerasa y la girasa relajan la tensión en la zona
próxima a la burbuja.
➢ En los extremos de la burbuja
de replicación se forman dos
regiones en forma de Y
denominadas horquillas de
replicación.

2. FASE DE ELONGACIÓN:
➢ Consiste en la formación del cebador y la síntesis de la cadena de ADN.
No se desarrolla de forma idéntica en ambas hebras.
➢ La Primasa sintetiza cebadores (primers) en dirección 5´ 3´.
• Hebra adelantada solo necesita un cebador en origen.

• Hebra retardada: varios cebadores, próxima a la horquilla pero
alejada del origen. A medida que avanza necesita nuevos
cebadores que dan lugar a Fragmentos de Okazaki.

➢ ADN Polimerasa III: incorpora nucleótidos en la posición 3´ libre.
• Hebra adelantada: elongación continua.
• Hebra retardada: la Polimerasa se separa cuando alcanza el cebador
del fragmento de Okazaki anterior.
➢ ADN polimerasa I :
• Se une a los primers y los elimina (exonucleasa 5´ 3´).
• Sustituye cebadores por ADN (polimerasa 5´ 3´).
➢ Ligasa une los fragmentos de Okazaki consecutivos.
3. FASE DE TERMINACIÓN: se produce cuando al ADN polimerasa III se
encuentra con una secuencia de terminación.
https://www.youtube.com/watch?v=YqjbmrQcyfM&ab_channel=AprendizDeMedicina
REPLICACIÓN DE ADN. EUCARIOTAS

➢ Origen de replicación múltiple, iniciándose de manera simultánea en
varios puntos de cada cromosoma.
➢ Cinco polimerasas en lugar de tres, que comparten las funciones de

elongación, exonucleasa, y corrección de errores.
➢ El ADN se encuentra unido a histonas, por lo que durante la replicación

se deshacen y posteriormente se reconstruyen de nuevo los
nucleosomas.
FLUJO DE INFORMACIÓN GENÉTICA. TRANSCRIPCIÓN DE ADN A ARN.
TRANSCRIPCIÓN
➢ La transcripción es el proceso por el cual se sintetiza una molécula de
ARN utilizando como molde una cadena de ADN.
➢ Este proceso está dirigido por la enzima ARN polimerasa-ADN

dependiente o Transcriptasa.
● En Eucariotas existen 3 tipos principales:

○ ARN polimerasa I: Síntesis del ARNr.
○ ARN polimerasa II: Síntesis del ARNm.
○ ARN polimerasa III: Síntesis del ARNt.
FASES DE LA TRANSCRIPCIÓN
➢ ARN polimerasa reconoce y se une a una
región de ADN denominada promotor.
➢ La unión activa la helicasa que provoca la
separación de la doble hélice de ADN y
puede comenzar la síntesis de ARN.
➢ Adición secuencial de ribonucleótidos con bases complementarias por
parte de la ARN polimerasa.
➢ Solo se transcribe una cadena de ADN: cadena molde o codificadora.
La que no se transcribe se denomina sin sentido, informativa o no
molde.
➢ ARN polimerasa se desplaza por el ADN en dirección 3´ 5´ leyendo la
secuencia de bases nitrogenadas y seleccionando el ribonucleótido que
tiene una base complementaria a la del ADN.
➢ El crecimiento del ARN tiene lugar en dirección 5´ 3´.
3. FASE DE TERMINACIÓN:
➢ Polimerasa alcanza una secuencia de ADN denominada señal de
terminación.
➢ La polimerasa se separa de la cadena de
ADN.
➢ El ADN recupera su estructura de doble

hélice.
4. FASE DE MADURACIÓN:
➢ Es el proceso que requieren las moléculas de ARN transcrito para dar
lugar a los principales tipos de ARN (ARNm, ARNt, ARNr).
➢ En eucariota el ARNm requiere un proceso de maduración complejo:
• Exones: son secuencias que se transcriben y traducen. Información
para la síntesis de proteínas.
• Intrones: son secuencias que se transcriben, pero no se traducen.
No información para la síntesis de proteínas.
➢ El ARNm sintetizado se denomina preARNm (ARNhn) que contiene
intrones no codificantes.
4. FASE DE MADURACIÓN ARNhn a ARNm:
1. Adición caperuza (CAP) en 5´
○ para proteger al ARN.
2. Adición cola poliA en 3´

o Permite al ARNm salir al
citoplasma.
3. SPLICING.
○ Eliminación de intrones: corte y
empalme.
4. FASE DE MADURACIÓN ARNhn a ARNm:
https://www.youtube.com/watch?v=7z8oviQB0cc&ab_channel=Unani
FLUJO DE INFORMACIÓN GENÉTICA. TRADUCCIÓN.
TRADUCCIÓN
➢ Proceso por el cual a partir de una molécula de ARNm se sintetiza una
proteína.
➢ Los aminoácidos se van incorporando de
manera secuencial y precisa a la cadena
de polipéptidos en crecimiento con la
información contenida en la secuencia de
nucleótidos de ARNm.
➢ El paso de la información del código de 4
bn (A, G, C, T) a los 20 aminoácidos que
forman las proteínas es posible gracias al
código genético.
CODIGO GENÉTICO
➢ Permite traducir secuencias de tres bases nitrogenadas de nucleótidos en
una secuencia de aminoácidos.
➢ Características:
• Es universal: Es valido para todos los organismos sin excepción.
• No es ambiguo: cada codón codifica un único aminoácido.
• Es degenerado: hay codones diferentes que codifican para un mismo
aminoácido. Este fenómeno se denomina redundancia y los codones
sinónimos.
• Es continuo y no solapado: En el ARNm los codones se sitúan uno a
continuación del otro sin espacios y sin compartir ninguna base.
TRADUCCIÓN
➢ Para la síntesis de proteínas o traducción se requiere:
○ ARN mensajero
○ Aminoácidos (20)
○ Ribosomas
○ ARNt
○ Enzimas
TRADUCCIÓN
➢ Codón: es un triplete de bases nitrogenadas que codifica un aminoácido.
➢ De los 64 codones posibles ( 4 bases / 3 repeticiones, 43= 64).

○ 61 codifican para aminoácidos
■ Codón inicio = AUG = Metionina
○ 3 son secuencias de terminación

■ UAA
■ UAG
■ UGA
TRADUCCIÓN
TRADUCCIÓN
ACTIVIDAD
A PARTIR DEL SIGUIENTE ADN Y DE SU CADENA MOLDE (ROJO):

1. DEDUCE LA SECUENCIA DE ARNm
2. ELABORA LA SECUENCIA DE AMINOÁCIDOS
5ÁTGGAGTGTGCCGACTTCTACGAGGGCGGAGCCGCGGCCCCCGAT 3´
3´TACCTCACACGGCTGAAGATGCTCCCGCCTCGGCGCCGGGGGCTA 5´
https://www.youtube.com/watch?v=B77UxBHR_GE&ab_channel=RubenSebastian
FASES DE LA TRADUCCIÓN
➢ El ribosoma se une al ARNm a la altura del codón de inicio AUG.
➢ El ARNt con el anticodón complementario al inicio (UAC) se

incorpora con el aminoácido Metionina.
➢ Formación del Complejo de

Iniciación (ribosoma completo,
ARNm y Metionina).
➢ Incorporación de aminoacil ARNt.
➢ Enzima peptidil transferasa libera el

aminoácido del primer ARNt y los une
entre sí formando un dipéptido
mediante un enlace peptídico.
➢ El ribosoma se desplaza en dirección
5´ 3´ y el ARNt sin aminoácido se
separa del complejo.
2. FASE DE TERMINACIÓN:
➢ Ribosoma alcanza en el ARNm un codón de

terminación: no existe un ARNt
complementario: Factores de liberación.
➢ Liberación de las subunidades del ribosoma, el

ARNm y el ARNt.
Sitio P- Formación enlace peptídico

Sitio A- Entrada de Aminoacil RNA t
Met-ARNt : Entra al sitio P

Resto ARNt: Sitio A
https://www.youtube.com/watch?v=uiCrjZ-0eQk&ab_channel=RaCology
CONTENIDOS
2.- ADN.
3.- ARN.
 TRADUCCIÓN.
 NUCLEASAS.
 OTROS ENZIMAS.
ENZIMAS EMPLEADAS EN BIOLOGÍA MOLECULAR
➢ Las técnicas de biología molecular implican manipulaciones de ácidos

nucleicos tales como amplificación, degradación, corte, unión,
secuenciación, etc.
➢ Estas actividades son posibles por la actividad catalizadora de enzimas

específicas.
➢ Estas enzimas son muy importantes en biología molecular.

NUCLEASAS
➢ Las nucleasas son enzimas que cortan y degradan ácidos nucleicos
mediante hidrólisis del enlace fosfodiéster entre dos nucleótidos.
➢ Tipos:
• Según el tipo de ácido nucleico que atacan podemos encontrar:

o Ribonucleasas: rompen enlaces entre ribonucleótidos (ARN).
o Desoxirribonucleasas: rompen enlaces entre
desoxiribonucleótidos (ADN).
NUCLEASAS
➢ Tipos:
• Según el tipo de cadena que atacan:
o Nucleasas bicatenarias, rompen enlaces de ambas cadenas.
o Nucleasas monocatenarias, degradan una sola cadena.
• Según la situación del punto de corte:
o Exonucleasas: eliminan el último nucleótido.
o Endonucleasas: cortan en el interior de un polinucleótido.
• Según la especificidad de corte:
o Nucleasas que cortan aleatoriamente.
o Nucleasas que cortan en sitios concretos.
NUCLEASAS
ENDONUCLEASAS DE RESTRICCIÓN
➢ Reconocen secuencias cortas de ADNbc y producen un corte en la doble
cadena (rompe enlaces fosfodiéster), fragmentando la molécula .
➢ Estas secuencias de ADN se denominan Dianas de restricción.
➢ Cada enzima reconoce una secuencia.
➢ En bacterias constituyen un sistema de defensa para degradar ADN ajeno.

➢ Se nombran con tres letras y un número romano. La primera letra es la inicial del
género y las otras dos las de la especie de bacteria de donde se han obtenido.
➢ Tipos:
• Tipo I:
o Efectúan un corte a una distancia aleatoria de hasta 1000 pb.
o No generan patrones específicos de fragmentos.
• Tipo II o Tijeras Moleculares:

o Reconocen la diana de restricción y cortan en puntos
específicos dentro de la misma (4-8 pb de longitud).
o Generan patrones específicos de fragmentos reconocibles.
o Reconocen secuencias que son leídas de la misma forma en
ambas direcciones (sitios de corte palindrómico).
o Son una herramienta fundamental en biología molecular.
➢ Tipos:
• Tipo III:
o Reconocen secuencias invertidas dentro de la misma cadena.
o Cortan fuera de la diana a corta distancia (entre 20-30 pb).
• Tipo IV:
o Cortan ADN con marcas de metilación.
• Tipo V:
o Polipéptidos formados por enzimas de Tipo I, II y III.
o Cortan secciones de ADN de cualquier organismo.
o Son enzimas tipo CRISPER-CAS, identifican y cortan
secuencias específicas de ADN de organismos invasores.
o Son muy empleadas en Biología Molecular.
APLICACIONES EN BIOLOGÍA MOLECULAR
➢ Creación de moléculas de ADN recombinante
1. Se cortan dos moléculas distintas de ADN con el mismo enzima de restricción.
2. Cuando los fragmentos de extremos cohesivos se mezclan, se unirán por la
complementariedad de bases de sus respectivas regiones monocatenarias.
3. Los nick que quedan en cada cadena se unen con una ligasa y se obtiene una
molécula híbrida recombinante.
4. De esta manera se puede insertar un determinado gen de un organismo en otro
diferente con la finalidad de producirla en grandes cantidades.
Ej: la insulina humana de uso terapéutico es producida por bacterias

gracias a la tecnología de ADN recombinante. También la hormona del
crecimiento.
➢ Creación de moléculas de ADN recombinante
APLICACIONES EN BIOLOGÍA MOLECULAR
➢ Patrones de restricción
1. La digestión con ese enzima genera un número discreto de
fragmentos de distintos tamaños.
2. Estos fragmentos se pueden separar según su tamaño por
electroforesis.
3. Con este procedimiento se obtiene un patrón de restricción que es
único para cada ADN
El patrón de restricción sirve para la identificación de muestras, estudios
filogenéticos o detección de anomalías en el diagnóstico prenatal.
ADN POLIMERASA
➢ Permiten realizar copias de ADN mediante replicación (amplificación).
➢ Las ADN polimerasas requieren que en el medio de reacción estén

presentes los cuatro desoxinucleótidos trifosfato, el ADN molde, los
cebadores y el Mg como cofactor.
➢ PCR: Reacción en cadena de la polimerasa.
• permite obtener millones de copias de una secuencia de interés.

• Las muestras se someten a ciclos de desnaturalización, hibridación
y polimerización.
TRANSCRIPTASA INVERSA
➢ Son ADN polimerasas-ARN dependientes. Sintetizan ADN utilizando ARN
como molde.
➢ Aisladas en retrovirus, cuyo material genético es ARN que se

retrotranscribe a ADN en la célula infectada.
➢ Aplicación: Amplificación de ARN, este tipo de PCR se denomina RT-PCR

(Reverse transcription polymerase chain reaction), que permite que el
ARN sea transcrito a ADN. ¡NO confundir con PCR Real Time!.
LIGASA
➢ Unen dos moléculas de ADN mediante la formación de enlaces

fosfodiéster entre los extremos 3ý 5´ de cada una de ellas.
➢ Pueden también reparar mellas en una de las cadenas.
➢Aplicación: Unir fragmentos de ADN de distinta procedencia previamente

cortados por el mismo enzima de restricción.
BIBLIOGRAFÍA
LIBROS:
• Manuel Mota Caparrós, Juan Bautista Cuenca Pardo y María Cruz Sipán Sarrión. 2016. Biología molecular y citogenética. Sanidad Anatomía patológica y citodiagnóstico;
laboratorio clínico y biomédico, Paranninfo ciclos formativos. Madrid, España.
• José Luque y Ángel Herráez. Texto ilustrado de biología molecular e ingeniería genética. Conceptos, técnicas y aplicaciones en ciencias de la salud. Elsevier. Madrid, España.
ISBN:84-8174-505-7
APUNTES
• Apuntes FP Claudio Galeno
• https://www.ucm.es/genetica1/apuntes-de-genetica
VIDEOS CORTOS
https://www.youtube.com/watch?v=kIjXCLk7SmQ
https://www.youtube.com/watch?v=zo6QxDfO8Zo
https://www.youtube.com/watch?v=j8sLw_fdoY0&list=PLlJ-LmCi75KaEG9EqnJ-ObvVD2EeKu0d-&index=35
https://www.youtube.com/watch?v=aD70pdmrsfU&list=PLlJ-LmCi75KaEG9EqnJ-ObvVD2EeKu0d-&index=36
https://www.youtube.com/watch?v=dVDrdyEKF7Y&list=PLlJ-LmCi75KaEG9EqnJ-ObvVD2EeKu0d-&index=40
https://www.youtube.com/watch?v=wW90gn-M4kI&list=PLlJ-LmCi75KaEG9EqnJ-ObvVD2EeKu0d-&index=38
https://www.youtube.com/watch?v=_vsNWjMVRbY&list=PLlJ-LmCi75KaEG9EqnJ-ObvVD2EeKu0d-&index=46
https://www.ted.com/talks/richard_resnick_welcome_to_the_genomic_revolution
https://www.ted.com/talks/james_watson_on_how_he_discovered_dna
actividad de clase: http://agrega.juntadeandalucia.es/repositorio/09022011/26/es-an_2011020913_9080443/ODE-0acbc109-5c71-398c-8a59-774a91904647/index.html

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BIOLOGÍA MOLECULAR Y CITOGENÉTICA

UNIDAD 1: ÁCIDOS NUCLEICOS Y ENZIMAS ASOCIADAS

Marta Ramajo Matesanz

LOS ÁCIDOS NUCLEICOS

➢Los ácidos nucleicos son macromoléculas poliméricas encargadas de

❑ Ácido ribonucleico (ARN). Encargado de la expresión

ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

➢ El ADN y el ARN se diferencian en su estructura y composición química. Sin

➢ Los nucleótidos son las unidades estructurales que se repiten en los

ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN QUÍMICA

➢ Son biomoléculas que contienen, almacenan y transmiten

➢ Los nucleótidos se unen por enlaces fosfodiéster.

➢ TIPOS de ácidos nucleicos.

❑ Bases nitrogenadas: son compuestos heterocíclicos,

❑ Pentosa: hidrato de carbono de cinco átomos de carbono. Puede ser de

• 2-desoxi-D-ribosa: en los nucleótidos de ADN.

• D-ribosa: en los nucleótidos de ARN.

❑ Fosfato: se encuentra en forma de anión fosfato (PO43-) y su carga

• Se une al carbono 5’ de la pentosa

Nucleósido = base nitrogenada + pentosa

➢ La unión entre pentosa y BN se realiza mediante un enlace N-glucosídico.

Se une el C1’ de la pentosa con:

ADN pentosa = desoxirribosa, prefijo DESOXI-

NUCLEÓSIDOS PURÍNICOS NUCLEÓSIDOS PIRIMIDÍNICOS

Sufijo “-osina” Sufijo “-idina”

NUCLEÓSIDOS PURÍNICOS NUCLEÓSIDOS PIRIMIDÍNICOS

Sufijo “-osina” Sufijo “-idina”

NUCLEÓTIDO = Pentosa + BN + fosfato

➢ La unión del nucleósido con la molécula de

➢ La unión entre nucleótidos se realiza mediante

Nucleótido = nucleósido + fosfato(s)

• Dinucleótido : unión de 2 nucleótidos mediante enlace fosfo-diester

EL AZÚCAR SE UNE AL FOSFATO

UN NUCLEÓTIDO SE UNE A OTRO

EL AZÚCAR SE UNE A LA BASE NITROGENADA

LAS BASES NITROGENADAS DE UNA CADENA SE UNEN A

❑ Eliminar la -a- terminal del nucleósido + 5´ Fosfato

❑ Ácido + sufijo -ílico

• Desnaturalización: A temperaturas o pH elevados se rompen los enlaces de

Edwin Chargaff (1950)

o Estas reglas se cumplen en el ADN de doble

ESTRUCTURA DEL ADN

• Eucariota: posee varios millones de pb

• Plásmidos y ADN mitocondrial sólo

ESTRUCTURA DEL ADN

❑ Estructuras de orden superior

ESTRUCTURA DEL ADN

➢ Complementariedad de bases: la cantidad de Timina es la misma que la

ESTRUCTURA DEL ADN

• Dos cadenas de ADN antiparalelas. 5’P → 3’ OH /

• La secuencia de bases de una cadena es

● El diámetro de la doble hélice es de 20 Å.

ESTRUCTURA DEL ADN

ORGANIZACIÓN DE LAS MOLÉCULAS DE ADN

➢ Eucariotas: Animales, plantas, levaduras y hongos

ORGANIZACIÓN DE LAS MOLÉCULAS DE ADN

ORGANIZACIÓN DE LAS MOLÉCULAS DE ADN

❑ Nivel 3: Cromosoma interfásico

❑ Nivel 4: Cromosoma metafásico

ORGANIZACIÓN DE LAS MOLÉCULAS DE ADN