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    Composición

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    Samuel Solis Martínez
    Este documento describe la composición y preparación del agar verde brillante, un medio de cultivo utilizado para aislar cepas del género Salmonella. Contiene extracto de levadura, verde brillante, peptonas, cloruro de sodio, lactosa, sacarosa, rojo de fenol y agar. Se prepara mezclando los ingredientes en agua purificada, calentando y esterilizando la mezcla. El agar verde brillante es selectivo para Salmonella debido a que el verde brillante inhibe el crecimiento de otras bacterias,

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    Este documento describe la composición y preparación del agar verde brillante, un medio de cultivo utilizado para aislar cepas del género Salmonella. Contiene extracto de levadura, verde brillante, peptonas, cloruro de sodio, lactosa, sacarosa, rojo de fenol y agar. Se prepara mezclando los ingredientes en agua purificada, calentando y esterilizando la mezcla. El agar verde brillante es selectivo para Salmonella debido a que el verde brillante inhibe el crecimiento de otras bacterias,

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    1. Extracto de levadura 3.0 g


    2. Verde brillante 0.0125 g
    3. Mezcla de peptonas 10.0 g
    4. Cloruro de sodio 5.0 g
    5. Lactosa 10.0 g
    6. Rojo de fenol 0.08 g
    7. Sacarosa 10.0 g
    8. Agar bacteriológico 20.0 g

    Preparación (método).
    1. Pesar 58 gramos
    2. Mesclar en un litro de agua purificada.
    3. Mezclar bien y calentar con agitación suave hasta su completa disolución
    4. hervir durante un minuto.
    5. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos.
    6. Dejar enfriar a una temperatura entre 45-50°C
    7. El pH final debe quedar en 6,9 ± 0,2.
    8. El medio en polvo es de color verde, y preparado toma un color
    anaranjado-marrón o rojizo verdoso, dependiendo del pH y de la casa
    comercial. Un color muy pardo es indicativo de que el agar fue
    sobrecalentado.
    9. Y vaciar en placas de Petri estériles.

    Procedimiento
    1. Sembrar las muestras de acuerdo a los procedimientos internos de laboratorio o normas
    aplicables.

    2. Incubar las placas a 35 ± 2°C durante 24 a 48 horas. En caso de no obtener crecimiento, incubar
    por 24 horas más.

    ¿Qué es el agar verde brillante?


    Se utiliza exclusivamente para el aislamiento de cepas del género Salmonella. Sin embargo, existen
    algunas excepciones, como la especie typhi y paratyphi, que no crecen en este medio.

    La búsqueda del género Salmonella es frecuente en muestras de heces, agua o alimentos. En este
    sentido, este medio puede ser de gran utilidad. Este agar fue creado en 1925 por Martin
    Kristensen, Vera Lester y Axel Jürgens, y más tarde modificado por Kauffmann.
    Está compuesto por pluripeptonas provenientes de digerido péptico de tejido animal y digerido
    pancreático de caseína, además contiene extracto de levaduras, cloruro de sodio, lactosa,
    sacarosa, rojo fenol, verde brillante y agar-agar.

    Se caracteriza por ser un medio bastante inhóspito para la mayoría de las bacterias, favoreciendo
    el crecimiento de Salmonella.

    Fundamento
    1. Las pluripeptonas y el extracto de levadura son la fuente de nutrientes de donde los
    microorganismos toman el nitrógeno y los minerales necesarios para su desarrollo. La
    lactosa y la sacarosa son fuentes de energía para los microorganismos capaces de
    fermentarlas.

    2. El verde brillante es la sustancia inhibidora que impide el desarrollo de las bacterias


    grampositivas y un gran número de microorganismos gramnegativos.

    3. El cloruro de sodio brinda estabilidad osmótica al medio. Mientras que el rojo de fenol es
    el indicador de pH, el mismo cambia de color al detectar la producción de ácidos
    proveniente de la fermentación de los carbohidratos.
    4. Las colonias no fermentadoras de lactosa y sacarosa crecen en este medio de un color
    blanco rosadas o transparentes, sobre un fondo rojo. Por ejemplo, bacterias del
    género Salmonella.
    5. En tanto que las bacterias fermentadoras de lactosa o sacarosa capaces de crecer en este
    medio, desarrollan colonias de color amarillo verdosas o verde amarillentas, sobre un
    fondo amarillo verdoso. Por ejemplo, Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae.

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