FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

CAPACIDAD ANTIOXIDANTE Y CONTENIDO DE

POLIFENOLES TOTALES EN Portulaca oleracea.

(Verdolaga)

TRABAJO DE INVESTIGACION PARA OPTAR EL GRADO

ACADEMICO DE BACHILLER EN FARMACIA Y BIOQUIMICA

AUTOR:
LAVERIAN LEON MIGUEL ANGEL

ASESOR:
Mgtr: LIZ ELVA ZEVALLOS ESCOBAR

CHIMBOTE-PERU
2018

1
 1. TITULO

CAPACIDAD ANTIOXIDANTE Y
CONTENIDO de
POLIFENOLES TOTALES EN
Portulaca oleracea. “Verdoalga”

ii
JURADO EVALUADOR DE TRABAJO DE INVESTIGACION

Dr. Jorge Luis Ortega Días

PRESIDENTE

Mgtr. Edison Vásquez Corales

MIEMBRO

Mgtr. Teodoro Walter Ramirez Romero

MIEMBRO

Mgtr. Liz Elva Zevallos Escobar

ASESOR

iii
 AGRADECIMIENTO

Gracias a Dios por permitirme tener y disfrutar a mi familia, gracias a mi familia por

apoyarme en cada decisión y proyecto, gracias a la vida porque cada día me demuestra lo

hermosa que es y lo justa que puede llegar a ser. Gracias por creer en mí y gracias a Dios

por permitirme vivir y disfrutar cada día.

No ha sido sencillo el camino hasta ahora, pero gracias a su amor y a su inmensa bondad

y apoyo, lo complicado de lograr esta meta se ha notado menos. Les agradezco y hago

presente mi gran afecto hacia ustedes, mi hermosa familia.

DEDICATORIA

iv
A mis padres que me han dado la existencia y en ella la capacidad de superarme y desear

lo mejor en cada paso por este camino de la vida. Gracias por ser como son, porque su

presencia y persona han ayudado a construir y forjar la persona que soy.

A mis maestros y amigos; que en el andar por la vida nos hemos ido encontrando, porque

cada uno de ustedes ha motivado mis sueños y esperanzas en consolidar un mundo más

humano y con justicia. Gracias a todos los que han recorrido conmigo este camino, porque

me han enseñado a ser más humano.

RESUMEN

v
La Portulaca oleracea es una planta medicinal conocida desde la antigüedad, muchos las

consideraban como una hierba mala pero no es así debido a que posee múltiples

propiedades medicinales algunas demostradas científicamente otras no, como alimento

destaca gracias a que contiene omega 3 y antioxidantes. El objetivo de este trabajo es

determinar la actividad antioxidante y contenido de polifenoles en las hojas y tallos de

Portulaca oleracea. Para la investigación se realizó la determinación de la actividad

antioxidante según el método de DPPH (2,2, Difenil-1-Picril Hidracilo) cuyo estándar de

referencia se utilizó Trolox y para la determinación de polifenoles totales según el método

de Folin – Ciocalteu. En los resultados el contenido de polifenoles totales en el extracto

metanólico, infusión y decocto fueron para hojas 7.77 ± 0.35, 12.81 ± 0.65 y 10.69 ± 0.17,

en tallos 5.51 ± 0.00; 8.08 ± 0.10 y 8.97 ± 0.52 mg de catequina eq/ g de muestra seca,

respectivamente. Para la capacidad antioxidante se obtuvo en el extracto metanólico,

infusión y decocto, en las hojas 210.63 ± 5.60, 238.64 ± 16.04 y 142.10 ± 4.63; en los

tallos 229.69 ± 10.05, 160.10 ± 9.20 y 140.92 ± 0.16 mM Trolox eq / g de muestra seca,

respectivamente. Se concluye que se logró determinar la capacidad antioxidante y

contenido de polifenoles totales en las hojas y tallos de Portulaca oleracea.

Palabras claves: actividad antioxidante, polifenoles, Portulaca oleracea.

ABSTRACT

vi
Portulaca oleracea is a medicinal plant known since antiquity, many considered as a bad

herb but it is not so because it has multiple medicinal properties some scientifically proven

others not, as food stands out because it contains omega 3 and antioxidants. The objective

of this work is to determine the antioxidant activity and polyphenol content in the leaves

and stems of Portulaca oleracea. For the investigation the determination of the antioxidant

activity was carried out according to the method of DPPH (2,2, Diphenyl-1-Picril

Hydracil) whose reference standard was Trolox and for the determination of total

polyphenols according to the Folin-Ciocalteu method. In the results the content of total

polyphenols in the methanolic extract, infusion and decocto were for leaves 7.77 ± 0.35,

12.81 ± 0.65 and 10.69 ± 0.17, in stems 5.51 ± 0.00; 8.08 ± 0.10 and 8.97 ± 0.52 mg of

catechin eq / g dry sample, respectively. For the antioxidant capacity was obtained in the

methanolic extract, infusion and decocto, in the leaves 210.63 ± 5.60, 238.64 ± 16.04 and

142.10 ± 4.63; in the stems 229.69 ± 10.05, 160.10 ± 9.20 and 140.92 ± 0.16 mM Trolox

eq / g dry sample, respectively. It is concluded that the antioxidant capacity and content

of total polyphenols in the leaves and stems of Portulaca oleracea were determined.

Keywords: antioxidant activity, polyphenols, Portulaca oleracea.

INDICE

vii
AGRADECIMIENTO ........................................................................................ iv

DEDICATORIA ................................................................................................... v

RESUMEN ........................................................................................................... vi

ABSTRACT ........................................................................................................ vii

INDICE DE TABLAS ......................................................................................... ix

I. INTRODUCCIÓN ........................................................................................... 1

II. REVISIÓN DE LITERATURA .................................................................. 4

2.1. Antecedentes: ........................................................................................... 4

2.2. Bases teóricas ............................................................................................. 5

III. HIPOTESIS ................................................................................................. 11

IV.METODOLOGÍA ......................................................................................... 12

4.1 Diseño de la investigación.......................................................................... 12

4.2 Población y muestra………………………………………………………14

4.3. Definición y Operacionalización de variables e indicadores .................... 14

4.4 Técnicas e instrumentos de recolección de datos ....................................... 15

4.5 Plan de análisis de datos............................................................................. 15

4.6 Matriz de consistencia ................................................................................ 16

4.7 Principios éticos ......................................................................................... 17

V.RESULTADOS ............................................................................................... 18

5.1 Resultados .................................................................................................. 19

5.2 ANÁLISIS DE RESULTADOS: ............................................................... 20

VI. CONCLUSIONES ....................................................................................... 24

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ............................................................. 25

ANEXOS………………………………………………………………………..31

viii
 INDICE DE TABLAS

TABLA 1:
Contenido de polifenoles totales en el extracto metanólico, extracto acuoso sometido a
infusión, decocción de las hojas y tallos de Portulaca oleracea.

TABLA 2:
Capacidad antioxidante de las hojas y tallos de Portulaca oleracea sometidos a
extracción metanólico y sometidos a infusión, decocción.

ix
 I. INTRODUCCION

Desde el inicio de la humanidad el uso de plantas ha servido como alimento aquellas

especies que resultaban comestibles, pero no solo se aprovechaba en la alimentación sino

que también como remedios caseros para aliviar algún mal o alguna dolencia del

organismo. Esta tradición forma parte del acervo cultural de nuestra sociedad y su

permanencia en el tiempo y espacio, pueden ayudar a comprender las tradiciones de

diferentes culturas que del pasado han llegado hasta nuestro presente. Hoy en día, el

conocimiento de las propiedades de las plantas medicinales se ha extendido de tal forma,

que las personas las siguen utilizando como medicina alternativa y en ocasiones como

apoyo a la llamada medicina tradicional. Es relevante conocer si es preciso conservar,

preservar y transmitir el conocimiento sobre las plantas medicinales. (1)

Han sido precisamente los análisis bioquímicos los que han podido determinar cuáles son

los componentes principales de las plantas medicinales, los llamados principios activos.

Estas plantas también tienen importantes aplicaciones en la medicina moderna. Entre

otras, son fuente directa de agentes terapéuticos, se emplean como materia prima para la

fabricación de medicamentos semisintéticos más complejos, la estructura química de sus

principios activos puede servir de modelo para la elaboración de drogas sintéticas y tales

principios se pueden utilizar como marcadores taxonómicos en la búsqueda de nuevos

medicamentos. (2)

En la actualidad sirven como un recurso o alternativa moderna para tratar enfermedades

ya que nos brindan en sus órganos sus principios activos, los cuales administrados en dosis

suficientes producirán efectos terapéuticos. Existe una gran variedad de especies

1
medicinales, las cuales nos brindan efectos terapéuticos, debidos a los estudios realizados

en ellas podemos encontrar un alternativa en medicina natural. (3)

En la actualidad en los países en vías de desarrollo la importancia de las plantas

medicinales se hace aún más patente. En el Perú desde la antigüedad tenemos el beneficio

de contar con plantas medicinales para todo tipo de dolencias menores e incluso con

poderes medicinales para enfermedades crónicas. Tanto la costa, sierra y selva cuentan

con un gran surtido de plantas que no solo son tradición sino que poco a poco la ciencia

va aceptando sus bondades curativas. Por sus múltiples propiedades terapéuticas cada día

son más las personas que recurren a los diferentes tipos de plantas medicinales. Es cada

vez más reconocida la importancia que adquieren las plantas en el beneficio de la salud.

Estas juegan un papel primordial en la prevención de enfermedades. (4)

Sin embargo la utilización de las plantas medicinales se debe llevar a cabo con mucha

responsabilidad, siguiendo las indicaciones adecuadas y de forma correcta, ya que al igual

que los medicamentos pueden perjudicarnos si las tomamos en dosis no recomendadas.

(5)

La Portulaca oleracea, planta mucho más conocida como verdolaga planta medicinal

tiene muchas propiedades terapéuticas. Es antiinflamatoria, antiparasitaria, antibacteriana,

buena en el sistema digestivo y urinario, también es apta para la alimentación ya que

aporta ácidos grasos omega 3 y antioxidantes. (6)

Es nuestro organismo un verdadero sistema “antioxidante” natural formado por proteínas

que detonan reacciones químicas de eliminación de radicales libres y otras moléculas

2
oxidantes. Aunque el estrés de la vida cotidiana, la enfermedad y otras circunstancias

producen un exceso de estas moléculas contra las cuales nuestro cuerpo no pudiera tener

suficientes defensas. Los radicales libres son tóxicos producidos por el metabolismo

normal de la célula o por fuentes externas como la contaminación, radiación. Cuando los

radicales libres en el organismo aumentan se genera un fenómeno llamado estrés oxidativo

y está muy relacionado con el desarrollo de enfermedades crónicas y degenerativas. Los

antioxidantes propios del organismo y de los alimentos difieren mucho en su naturaleza

química y en el mecanismo para combatir a los radicales libres. Además no actúan solos,

como lo hacen los medicamentos, sino de tal forma que se potencia su actividad por la

presencia de unos y otros, así como de otras sustancias celulares. (7)

La actividad antioxidante de esta planta podría reemplazar a estos medicamentos

ayudando a disminuir en las personas los radicales libres y brindaría un estudio en base a

esta planta, de esta manera se busca una alternativa de solución en la terapéutica debido a

la realidad problemática. La importancia de este trabajo radico en determinar la capacidad

antioxidante por el método DPPH y la concentración de polifenoles totales por el método

de Folin- ciocalteu. El análisis descriptivo se presentó a través de tablas y gráficos.

OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIÓN

OBJETIVO GENERAL:

• Determinar la capacidad antioxidante y contenido de polifenoles de las hojas y

tallos de la Portulaca oleracea (Verdolaga)

3
 II. REVISIÓN DE LITERATURA

2.1 Antecedentes
Santamaría (8) en sus estudios realizados en el año 2011 en Ecuador, demostró que la

especie Portulaca oleracea Verdolaga, tiene la actividad antiinflamatoria mediante un

extracto etanólico de hojas, tallos y semillas, para esto aplico diferentes dosis y

tratamientos en ratas con edema inducido por carragenina, con la finalidad de encontrar

los más adecuados para probar su efectividad. Luego del análisis el resultado fue una

efectividad similar a la de un fármaco antiinflamatorio, brindando una alternativa frente

al uso de fármacos antiinflamatorios ya que existe una tendencia al uso de productos

naturales.

Angeles et al (9) en el año 2012, en México publicaron los resultados de un estudio donde

se evaluó el efecto alimenticio de la verdolaga Portulaca oleracea sobre el rendimiento y

las características químicas de la carne de gallina criolla, alimentadas con dieta alternativa

más pastoreo en Portulaca oleracea. Según la investigación determinaron que esta especie

tiene mayores concentraciones de proteínas, grasas, minerales y menor concentración en

el contenido del agua.

Vicente et al (10) en el año 2013 en Cuba realizaron un estudio y se plantearon como

objetivo demostrar si la especie Portulaca oleracea Verdolaga contiene ácidos grasos

(AG) atribuidos en parte a su composición lipídica. Para esto se estudió la parte aérea de

dicha especie (hojas y tallos) mediante un extracto. Los AG mayoritarios fueron:

linolénico (37,83 %), palmítico (23,11 %), linoleico (14,42 %) y oleico (6,72 %). Este

4
estudio contribuyo al conocimiento de la composición química de las partes aéreas de P.

oleracea que crecen en Cuba, al informar el contenido de AG de su extracto lipídico.

Moncayo (11) en sus estudios realizados en el año 2015 en Ecuador, demostró que la

especie Portulaca oleracea Verdolaga muestra una fuerte actividad antioxidante natural,

así como un potencial antibacteriano que podría ser utilizado en la medicina y en la

industria farmacéutica, tomando en cuenta las propiedades que se ha encontrado en esta

planta, amerita establecer una estrategia de conservación y utilidad.

2.2 Bases teóricas de investigación

VERDOLAGA (Portulaca oleracea)

La portulaca oleracea es una planta cosmopolita de hojas simples, y con brácteas y

sépalos petaloides. Es una hierba anual, tendida, de tallos y hojas crasos a veces también

suculenta que se comen en ensalada cuando están tiernos. Sus hojas son carnosas y tienen

un color variable del verde al rojo. Sus flores, hermafroditas, son poco aparentes al estar

casi ocultos los pétalos amarillos. La planta acumula grandes cantidades de agua en sus

tallos carnosos. Los tejidos para el almacenamiento de agua consisten habitualmente, en

grandes células de paredes delgadas, en el córtex o en la médula. La verdolaga, Portulaca

oleracea, desde la antigüedad es conocida y utilizada como remedio terapéutico. Esta

especie vegetal tiene virtud refrescante y, aplicada en cataplasma, inflamaciones de

diversas partes del cuerpo, es útil en los dolores de cabeza, dolor de vejiga, ardor de

estómago y varias molestias más. Como uso interno, serviría para afecciones digestivas,

5
urinarias e incluso como reductor de la libido. También hace alusión a la aplicación del

jugo de la planta. (12)

HISTORIA

En el siglo XVI, se le consideraba únicamente como comestible, de temperamento frío y

húmedo, que aplicada a la cabeza quita el dolor que proviene del calor, curaba también

las llagas recientes o antiguas”. En el siglo XVII, la refieren como “útil para curar el dolor

de cabeza e inflamación de ojos, dolor de estómago y dolores de vejiga. Útil para

calenturas, contra lombrices, contra la sangre que se escupe del pecho, disentería,

almorranas, y mordeduras de sala manquesa. Sana las postillas de la cabeza y heridas

llenas de corrupción”. A inicios del siglo XVIII, la utilizaban para curar dentera, frenesía,

campanilla caída, aftas; procurar el fortalecimiento de la sangre; curar acidia hipo, cólera,

lombrices, “melancolía” y contra orinar sangre. También se le asignó la curación de “el

mal de piedra”, vómito de sangre y para “sacar las lombrices a los niños”. A finales del

mismo siglo, se reporta: “como diluyente, atemperante y antiescorbútico”. (13)

HÁBITAT

La portulaca oleracea es una planta herbácea cosmopolita, se le considera así porque

crece en costa, sierra y amazonia hasta los 3,000 metros de altitud. Crece de manera

cultivada y silvestre también en suelos ricos en materia orgánica. Se reproduce por

semillas y su siembra puede realizarse durante todo el año. (14)

6
DESCRIPCIÓN Y CLASIFICACION BOTÁNICA

Planta anual, rastrera y muy ramificada, florece de mayo a septiembre, con tallos de 5-

50cm, rojizos y carnosos. Las hojas, abundantes, de pequeño tamaño de 1-2cm, son

sésiles, alternas u opuestas, obovado-oblongas, de margen entero, ápice obtuso, y con

estípulas setáceas en la base. Las flores de unos 6 mm de diámetro, son de color amarillo,

son sésiles y terminales, solitarias o en pequeños grupos de hasta 3. El cáliz está formado

por 2 sépalos sonnados, de 4mm, y la corola por 4-6 pétalos amarillos o rojizos, más largos

que los sépalos. El androceo consta de 7 o más estambres y el gineceo de un ovario

semiinfero a ínfero, con una cavidad, y con un estilo dividido en 2-8. El fruto tiene forma

de una capsula membranácea de 0.6-1 mm, que se abre transversalmente, dejando libres

a numerosas semillas subreniformes, negras, brillantes y pequeñas, que dependiendo de

su ornamentación permite diferenciar varias subespecies. (15)

La planta se adapta a casi cualquier terreno y es muy resistente a la sequía. Siendo

abundante en terrenos sin cultivar, veredas y terraplenes, se le puede denominar como

maleza invadiendo terrenos cultivados. Es originaria de la India, extendiéndose, desde

México hasta Australia. En algunos sitios es cultivada exprofeso, dada su utilización como

recurso alimenticio. (16)

Clasificación botánica:

Reino: Plantae

División: Magnoliophyta

Clase: Magnoliopsida

7
Orden: Caryophylales

Familia: Portulacaceae

Género: Portulaca

Especie: oleracea

Nombre científico: Portulaca oleracea.

Nombres comunes: Verdolaga

COMPOSICIÓN QUÍMICA

La Portulaca oleracea es una fuente rica en ácidos grasos poliinsaturados n3 y en otros

compuestos bioactivos, como antioxidantes, vitaminas, aminoácidos (lisina, metionina,

cistina y valina), α-tocoferol, β-carotenos, glutatión y minerales, especialmente el potasio.

De su peso el 95 % es agua, con abundante mucilago. También contiene diversos

alcaloides fenólicos, entre los que se encuentran diversas oleraceínas A, B, C,

D y E, que le dan propiedades antioxidantes, inferiores en potencia al ácido caféico. Es

posible hallar ácido alfalinolénico y linoléico, y ácido caféico. También se han

identificado diversos flavonoides (apigenina, miricetina, quercetina y luteolina). En la

parte aérea de la planta se han hallado betasitosteroles, alantoína y N, N'-diciclohexilurea,

respectivamente. La verdolaga aunque es rica en nutrientes indispensables para el

organismo, también posee importantes cantidades de otros componentes que en grandes

dosis pueden resultar nocivos para la salud de las personas: los oxalatos y los nitratos. (17)

8
PROPIEDADES Y APLICACIONES TRADICIONALES

Desde la antigüedad a esta planta se le atribuyen popularmente propiedades, emolientes y

dulcificantes en irritaciones de vejiga y vías urinarias, supuestamente que procede de su

contenido en mucílago. Esta especie vegetal actúa contra la disentería, ictericia,

dermatosis, jaqueca, inflamación de riñones, picaduras e hinchazones. En países árabes se

ha utilizado P.oleracea como antipirético, antiescorbútico, antiséptico, antiespasmódico,

antihelmíntico, refrigerante, y cicatrizante contra úlceras en la boca, o alteraciones

urinarias. En la Edad Media se le atribuían propiedades afrodisiacas, antiinflamatorias y

antihistamínicas y bactericidas. Además, se elaboran cataplasmas con sus hojas que se

utilizaban para drenar el pus de las úlceras. En la India y en Pakistán también se utilizaba

para el tratamiento de úlceras, inflamación, diarrea, hemorroides, y quemaduras, el

extracto de la parte aérea de P.oleracea, tiene propiedades antiinflamatorias y analgésicas,

y es eficaz como remedio paliativo del dolor y la inflamación. (18)

ESTRÉS OXIDATIVO

A partir de reacciones metabólicas pueden formarse los radicales libres, dentro de la

célula, esto también ocurre de manera espontánea si las condiciones del medio son

propicias para ello, como por ejemplo por exposición a ciertos compuestos químicos, por

el estrés oxidativo producido durante el ejercicio físico muy intenso, por contaminantes

del aire, por radiaciones ionizantes, por drogas, bacterias o virus. En nuestro organismo

en condiciones fisiológicas, la reproducción de radicales libres se mantiene en equilibrio

con las sustancias antioxidantes. Sin embargo, un exceso de radicales libres, o bien una

disminución de los sistemas de defensa antioxidante ocasiona ruptura de este equilibrio,

9
generandose daño o estrés oxidativo. El estrés oxidativo ocasiona gran daño en las células

debido a la oxidación de los lípidos, proteínas, DNA y enzimas, lo que deriva en una

reacción en cadena, que genera mayor producción de radicales libres y por lo tanto

aumento del daño celular. (19)

ANTIOXIDANTES

Los antioxidantes son sustancias que cuando están presentes, retardan e inhiben la

oxidación de sustancias susceptibles al ataque de las especies reactivas del oxígeno

(ERO). Liberan radicales libres todos los seres vivos que utilizan energía para obtener

energía, lo cual es incompatible con la vida a menos que existan mecanismos celulares de

defensa que los neutralicen, a están defensas se les denomina antioxidante. Estas

sustancias poseen acción estabilizadora sobre los radicales libres inhibiendo la

peroxidación lipídica, proceso que está involucrado en el desarrollo de diversas

enfermedades comunes, en las que se incluyen la aterosclerosis y desórdenes

neurodegenerativos como la enfermedad de Alzheimer entre otras. Por su mecanismo de

accion es posible diferenciar a los antioxidantes denominados primarios, debido a que

actúan interrumpiendo la reacción en cadena que producen los radicales libres, la

existencia de antioxidantes secundarios, tienen acción preventiva actúan atrapando los

iones metálicos que producen la descomposición del peróxido de hidrógeno, (20)

ANTIOXIDANTES Y SALUD

La dieta y la nutrición son aspectos fundamentales que deben tenerse en cuenta en el

control de la morbilidad y la mortalidad por enfermedades crónicas que afectan a la

10
humanidad, ya que muchas biomoléculas presentes en las frutas, las verduras y las

hortalizas de la dieta desempeñan un papel crucial en el mantenimiento de la salud. Se ha

demostrado que la aparición de diversas patologías, lesiones tisulares e incluso algunos

cánceres pueden estar relacionados con mecanismos oxidativos. En este sentido, un

amplio consumo de verduras, hortalizas y frutas disminuiría el consumo de carnes,

margarinas, azúcares y grasas, acercándonos a las recomendaciones de la pirámide

nutricional, además de incrementar nuestra ingesta de bioactivos saludables clasificados

muchos de ellos como antioxidantes. (21)

III. HIPOTESIS

Implícita.

11
IV. METODOLOGIA

4.1 DISEÑO DE INVESTIGACION

El presente trabajo de investigación correspondió a un estudio de tipo descriptivo con

enfoque cuantitativo.

4.1.1 obtención de la droga vegetal

El estudio se realizó con las hojas y tallos de la especie vegetal, en óptimo estado de

desarrollo vegetativo y fitosanitario. Estas fueron secadas en estufa a 45° C durante 5

horas, posteriormente pulverizadas y almacenadas a 4 ºC hasta que se utilizó.

4.1.2 Obtencion del extracto metanólico 80%: extracción exhaustiva

Para realizar la extracción exhaustiva se utilizó la muestra seca y pulverizada, cuyo peso

de la muestra fue de 0.2574 g, que fue que cubrió 15 ml de metanol al 80% + ácido

fórmico al 0,1%, se colocó sobre el agitador magnético por 30 minutos, luego se procedió

a retirar solo la fase liquida para ser centrifugada a 6000 rpm por 5 minutos. Todas las

operaciones se realizaron por triplicado, para luego ser depositado en una fiola de 50 ml,

envuelto con una capa de aluminio, este proceso de extracción se realizó por triplicado.

Finalmente se aforo, y se almaceno hasta el momento del análisis respectivo.

4.1.3 Preparación de la muestra seca en infusión

En un vaso de precipitación se añadió 200 ml de agua tipo2, se llevó a calor hasta su

ebullición luego se retiró y se agregó 3.03 gramos de muestra posteriormente se cubrió

con papel aluminio y se dejó en reposo durante 5 minutos, luego se filtró y se dejó enfriar

para su posterior análisis.

12
4.1.4 Preparación de la muestra seca en decocción

En un vaso de precipitación se colocó 200 ml de agua tipo2 más 0.52 gramos de muestra

y se sometió a ebullición durante 10 minutos, se cubrió con papel aluminio, seguido se

filtró y se dejó enfriar para su posterior análisis.

4.1.5 Determinación de polifenoles totales mediante el método de Folin - Ciocalteu

En una fiola de 10 ml se agregó 2,5 ml de agua desionizada, después se le añadió el estándar

de catequina a concentraciones de 0,5; 1; 2,5; 5 y 10 ppm (mg/L) para obtener la curva de

calibración, a las siguientes fiolas se adicionó 100 μL de extracto metanólico al 80%,

200μL de infusión y 200 μl de la decocción. Luego se adiciono 500 μL de Folin Ciocalteu

y se llevó a oscuridad por 5 minutos. Pasado el tiempo requerido se agregó 2 ml de

carbonato de sodio al 10%, seguidamente se aforó con agua tipo 2 para ser llevado a

oscuridad por 90 minutos, finalmente se realizó la lectura en el espectrofotómetro ÚNICO

2800 UV/Vis a una longitud de onda de 700 nanómetros. Todas las mediciones se

efectuaron por triplicado.

4.1.6 Determinación de la actividad antioxidante según el método DPPH Método

DPPH (1,1-difenil-2-picril-hidrazilo)

En una cubeta se adicionó 1450μL de DPPH a 0.06 mM, se llevó a leer al espectrofotómetro

a una longitud de onda de 515nm para obtener la absorbancia a tiempo cero (DPPH t0), luego

de ello se le agregó 50μL del extracto de hojas y tallos y se colocó a oscuridad por un tiempo

de 15 minutos para que reaccione, finalmente se obtuvo la absorbancia a tiempo 15 (DPPH

t15). El análisis se realizó por triplicado para cada una de las muestras.

13
Como estándar se utilizó el Trolox a concentraciones de 0.05, 0.1, 0.2, 0.4, 0.8 Mn,

para obtener la curva de calibración.

Para determinar el % de inhibición se utilizó la siguiente formula:

% Inhibición = DPPH t0 – DPPH t15 X 100

DPPH t0

4.2 Población Y Muestra

Población vegetal: Hojas, tallos, de la especie Portulaca oleracea Verdolaga que se

obtuvieron de una zona de Santo Domingo, distrito de Chimbote, departamento de Áncash.

4.3 Definición y Operacionalización de variables e indicadores

Variable Definición conceptual Definición operacional Indicador

- Capacidad
antioxidante de los Sustancia que al - mM de
Trolox eq/g
Extractos de hojas, encontrarse a bajos Secuestro de radicales
muestra
tallos de la niveles de libres. (DPPH) seca
Portulaca oleracea concentraciones en
Verdolaga. existencia de un
sustrato oxidable, esta
retarda la oxidación de
la misma.

- Contenido de Son grupos de Tècnica de folin- - mg

Polifenoles de los sustancias ciocalteu. Catequina
extractos de hojas, heterogéneos que eq/g

14
tallos de la comparten uno o más muestra
Portulaca oleracea grupos fenol por seca
Verdolaga. molécula, una
característica común
en su estructura
molecular.

4.4 Técnicas e instrumentos de recolección de datos

Se utilizó la observación directa, medición y registro de las reacciones de coloración y

otras características que se observaron en la medición de las concentraciones totales de

polifenoles. Los datos obtenidos se registraron en fichas de recolección de datos.

4.5 Plan de análisis

Los resultados se presentaron con datos de medidas de tendencia central: promedio y

desviación estándar. Regresión lineal para la elaboración de la curva de calibración del

estándar.

15
 4.6. Matriz de consistencia

TÍTULO DE LA FORMULACIÓN TIPO DE

OBJETIVOS HIPOTESIS VARIABLE METODOLOGIA
INVESTIGACIÓN DEL PROBLEMA INVESTIGACIÓN

- Capacidad antioxidante de
Objetivo general.
los Extractos de hojas, tallos Diseño de
• Determinar el contenido de
de la Portulaca oleracea Investigación:
polifenoles totales y la actividad
Capacidad
¿Tendrá antioxidante de las hojas y tallos Verdolaga. - Determinación
antioxidante y de la Portulaca oleracea de polifenoles
capacidad
(Verdolaga) totales según el
contenido de
antioxidante y Descriptivo método de Folin-
polifenoles Ciocalteu
contenido de
totales en
Implícita -Contenido de Polifenoles
polifenoles la - Determinación
de hojas, tallos de la
Portulaca de Capacidad
Portulaca
oleracea. Portulaca oleracea antioxidante
oleracea según el método
“verdoalga” Verdolaga.
verdolaga? de DPPH.

16
4.7 Principios éticos

Se promueve la recuperación del conocimiento tradicional sobre el uso del, no solo para

preservar su legado cultural, sino también para registrar información relevante y

demostrar científicamente sus efectos terapéuticos que servirán como nuevas fuentes

de medicamentos y otros beneficios para la humanidad. La finalidad es contribuir con

la protección de la biodiversidad, puesto que es un bien común.

17
 V. RESULTADOS

5.1 Resultados.

Tabla 1. Contenido de polifenoles totales por gramo de hojas y tallos seca de

Portulaca oleracea.

Partes de la Polifenoles totales (mg de

Muestra Tipo de extracto
planta catequina eq./g de muestra seca )

Portulaca Exhaustiva
Hojas 7.77 ± 0.35
oleracea (Metanol 80%)

Portulaca
Hojas Infusión 12.81 ± 0.65
oleracea

Portulaca
Hojas Decocción 10.69 ± 0.17
oleracea

Portulaca Exhaustiva
Tallos 5.51 ± 0.00
oleracea (Metanol 80%)

Portulaca
Tallos Infusión 8.08 ± 0.10
oleracea

Portuaca
Tallos Decocción 8.97 ± 0.52
oleracea

Fuente: Datos obtenidos de la investigación

18
Tabla 2. Capacidad antioxidante por gramo de muestra seca de hojas y tallos de
Portulaca oleracea.

DPPH (mM Trolox Eq./1 g

Muestra Partes de la planta Tipo de extracto
muestra seca)

Portulaca oleracea Exhaustiva

Hojas 210.63 ± 5.60
(Metanol 80%)

Portulaca oleracea Hojas Infusión 238.64 ± 16.04

Portulaca oleracea Hojas Decocción 142.10 ± 4.63

Exhaustiva
Portulaca oleracea Tallos 229.69 ± 10.05
(Metanol 80%)

Portulaca oleracea Tallos Infusión 160.10 ± 9.20

Portulaca oleracea Tallos Decocción 140.92 ± 0.16

Fuente: Datos obtenidos de la investigación

19
 5.2 Análisis de resultados
El presente trabajo de investigación cuantitativo descriptivo, donde se evaluó el

contenido de polifenoles y la capacidad antioxidante en la muestra de Portulaca oleracea,

para dicho estudio se utilizaron estándares y métodos para determinar la composición

química de los extractos en que fueron sometidos. A partir de allí se obtuvieron los

siguientes resultados.

Al evaluar el contenido de polifenoles en la muestra de Portulaca oleracea se expresa en

la tabla Nº 1, el resultado obtenido en el extracto metanólico de las hojas fue 7.77 ± 0.35

y de los tallos fue 5.51 ± 0.00 mg de catequina equivalentes /g de muestra seca, por lo

contrario, en la muestra que fue sometida a infusión presenta 12.87 ± 0.65 en hojas y 8.08

± 0.10 en tallos mg, del mismo modo en el extracto obtenido por decocción se evidencio

un 10.69 ± 0.17 en hojas y 8.97 ± 0.52 en tallos mg de catequina / g de muestra seca.

Mediante estos métodos es donde se extrae la cantidad de metabolitos secundarios

presente en una muestra, evidenciando que el proceso de ebullición y maceración de una

investigación juega un rol muy importante en la actividad de los extractos, lo que podría

explicarse por la aplicación de temperatura en el tipo de extracción, ya que las enzimas

pueden inactivarse con calor, de modo que los compuestos fenólicos no se degraden. En

consecuencia, se obtuvo concentración de polifenoles, que aunque su extracción puede

ser severo para los fenoles lábiles, por lo contrario pueden captar concentración de

metabolitos secundarios aceptables.

Un estudio realizado por Santiago et al (25), de la planta en estudio, se evaluó la

capacidad antioxidante, las técnicas utilizadas para evaluar fueron de DPPH (2,2-difenil-

1-picrilhidrazilo) y ABTS [2,2’- azino-bis (ácido 3-etilbenzotiazolin-6-sulfónico)]. Los

valores obtenidos de actividad antioxidante por DPPH (84% inhibición del radical) y

ABTS (74 µM Trolox/g PS) fueron óptimos. Por lo tanto en base a los resultados
20
encontrados, se puede comentar que los cultivos de Portulaca oleracea pueden ser

utilizados como una fuente importante de antioxidantes, confirmando este estudio

cuantitativo descriptivo presencia de polifenoles y su capacidad antioxidante bajo el

mismo método realizado.

Según Pérez (26), en su estudio del 2015, determinó las propiedades antioxidantes de la

Portulaca oleracea cultivadas en su país, mediante extractos etanólicos, por los métodos,

FRAP, ABTS y Folin Ciocalteu. La muestra evaluada presentó notables índices de

actividad antioxidante y contenido de fenoles totales, FRAP (mg de ácido gálico/100 g)

1824 (415), ABTS (mg de ácido ascórbico/100 g) 224 (44) y Fenoles (μmoles Fe2+/100

g) 144 (31), considerándolo en su investigación como cantidad apreciable, lo cual se

explicaría la presencia de polifenoles totales y su capacidad antioxidante.

Según Gutiérrez et al (27), describen en su investigación realizada de la planta en estudio,

la capacidad antioxidante total como alimento convencional, por la técnica de Miller

donde utilizo el Trolox, la muestra evaluada presento 28,21 (0,24) cuyo análisis revelaron

la presencia de la capacidad antioxidante en la portulaca oleracea más conocida como

verdolaga, en nuestro país no hay ningún estudio presentado por ello la necesidad de

realizar este tipo de análisis.

En el grafico 1, se muestra la curva de calibración de catequina obtenida con un

coeficiente de correlación de 0.9973, entre concentración de catequina y su respectiva

absorbancia, por lo cual se determinó el contenido de polifenoles totales para los

extractos referenciados.

Los polifenoles, esenciales para el ser humano, debido a que estos constituyen uno de los

metabolitos secundarios de las plantas, poseen una estructura química perfecta para la

acción frente a los radicales libres. Su capacidad como antioxidante se origina en su

21
extraordinaria reactividad como donadores de electrones de hidrogeno y de la capacidad

del límite del radical conformado, que le otorga estabilidad al electrón desapareado y su

habilidad para quelar iones. Los polifenoles tienen una porción hidrofilica e hidrofobica,

por lo que puede actuar contra ROS que se producen en medios hidrofobicos y acuosos,

por lo tanto su capacidad antioxidante es directamente proporcional con el nivel de

hidroxilaciòn del compuesto. Siendo este de utilidad en la salud pública. (22)

En la tabla Nº 2. Determinación de la capacidad antioxidante por método de DPPH se

observa el resultado obtenido de la muestra de las hojas y tallos de Portulaca oleracea

en extracto metanòlico fue 210.63 ± 5.60 en hojas y 229.69 ± 10.05 en tallos mM Trolox

equivalente / g de muestra seca, bajo el método de infusión fue 238.64 ± 16.04 en hojas

y 160.10 ± 9.20 en tallos mM eq /g de muestra seca, del mismo modo se evidencio el

resultado de la muestra sometida a decocción fue 142.10 ± 4.63 en hojas y 140.92 ± 0.16

en tallos mM eq. / g de muestra. Como se detalló anteriormente estos métodos son

efectivos debido por la aplicación de temperatura en el tipo de extracción, ya que las

enzimas pueden inactivarse con calor, de modo que los compuestos fenólicos no se

degraden y capten mayor concentración metabolitos secundarios.

6- hidroxi- 2, 5, 7, 8-tetrametilcromo- 2-acido carboxílico (Trolox), un análogo del α-

tocoferol, soluble en agua. Conocido por su elevada capacidad antioxidante y por lo tanto

es utilizado como compuesto de referencia y es expresada como equivalentes trolox

principalmente para el método de DPPH.

En el grafico 2, denominada curva de calibración DPPH, donde se realizó la curva con

Trolox, con un coeficiente de correlación R2: 0.9996, a partir de ello fue posible expresar

la capacidad antioxidante de los extractos de las muestras.

Numerosos informes han demostrado una cerca relación entre la sustancia de fenoles y

22
la actividad antioxidante de las plantas. Sin embargo, no se puede considerar que la

actividad antioxidante se deba solo a la presencia de polifenoles, debido que en su

composición química pueden existir otros metabolitos secundarios, propia de su

estructura que determinan su capacidad antioxidante. (23)

Diversas investigaciones demuestran una relación inversa entre el consumo de alimentos

o sustancias antioxidantes y el riesgo que producen los agentes oxidantes creando

diferentes enfermedades crónicas, demostrando una incidencia favorable en el daño

producido por los radicales libres, con una disminución importante, sin embargo es

necesario aun seguir añadiendo información acerca de nuevas especies que del mismo

modo muestra que tiene una actividad antioxidante lo cual sería de gran utilidad debido

a que permitirá una disminución de los efectos nocivos de estos. (24)

23
VI. CONCLUSIONES

• En las hojas y tallos de Portulaca oleracea la cantidad de polifenoles totales

mediante el método de Folin – Ciocalteu encontrados fue para el extracto

metanòlico 7.7 ± 0.35 en hojas y 5.51 ± 0.00 en tallos, en infusión 12.81 ± 0.65 en

hojas y 8.08 ± 0.10 en tallos, el extracto sometido a decocción 10.69 ± 0.17 en hojas

y 8.97± 0.52 en tallos mg de catequina eq/ g de muestra seca, y la capacidad

antioxidante por método de DPPH encontrada fue para el extracto metanólico fue

210.63 ± 5.60 en hojas y 229.69 ± 10.05 en tallos, en infusión fue 238.64 ± 16.04

en hojas y 160.10 ± 9.20 en tallos, y la muestra sometida a decocción fue 142.10 ±

4.63 en hojas y 140.92 ± 0.16 en tallos expresados en mM Trolox eq / g de muestra.

24
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30
 Anexos
Grafico 1. Curva de calibración de polifenoles totales utilizando catequina como

estándar.

Fuente: Datos obtenidos de la investigación

31
GRAFICO 2: Curva de calibración (o estándar) del Trolox como estándar de la

actividad antioxidante con una longitud de onda de 515 nm.

Fuente: Datos obtenidos de la investigación

32
33
34
35