Efectos tóxicos

Son muy distintos los Efectos Agudos y Efectos Crónicos.

Efectos agudos: El etanol es, básicamente, un depresor del sistema

nervioso, aunque a dosis bajas y al principio de sus efectos, actúe como
excitante por estimulación en la corteza cerebral y su acción desinhibidora.
La actividad neurodepresora no puede aprovecharse para anestesia porque
la dosis que se precisa para ello es tóxica. (No hay margen terapéutico de
seguridad).

Tras una ingestión de bebida alcohólica, dependiendo de la dosis y de la

progresión del tiempo, como consecuencia de la acción sobre el SNC, se
puede experimentar:

1. Síndrome Excitatorio: Excitación, euforia

2. Síndrome Confusional: Confusión o embotamiento mental
3. Síndrome Cerebeloso: Anestesia, hipnosis (somnolencia),
desequilibrio y ataxia (andar dificultoso)
4. Síndrome Comatoso: Progresiva disminución de la
consciencia, coma y paro respiratorio

Horas después de la toma aparece la llamada "resaca", con enrojecimiento

facial, cefalea, torpeza mental, sed, déficit de vitamina B, etc., motivada
por el metabolismo del alcohol y la acción vasodilatadora del acetaldehído.
Algunas bebidas, incluso las denominadas "sin alcohol" pueden originar,
especialmente en personas hipersensibles, en el momento inmediato de su
ingestión, un cuadro leve similar a éste, que no se debe al alcohol sino a los
compuestos histaminoides presentes en la bebida; se trata, por tanto, de un
fenómeno pseudo alérgico (3).

Tanto con fines clínicos como forenses, es útil interpretar los valores de
alcoholemia relacionándolos con situaciones clínicas o de intoxicación. A
pesar de que en la población humana, como en todas las animales, existen
individuos sensibles frente a otros resistentes, unos sin contacto previo con
el alcohol y otros que han desarrollado tolerancia. Manejando datos de
miles de individuos se han elaborado correspondencias
epidemiológicamente muy válidas y aceptadas internacionalmente, como las
que se exponen en la Tabla Nº 1 (3).

Tabla Nº 1
CORRELACIÓN ENTRE ALCOHOLEMIA Y SÍNTOMAS
Alcoholemia Estado gramo s/l

<0.3 Sobrio
0.3-1 Euforia
1-1,5 Excitación Embriaguez
1,5-2 Confusión
2-3 Estupor
3-4 Intoxicación severa
4-5 Coma 
Posible muerte
Principales Síntomas clínicos
No aparentes
Sólo por test especiales
Disminución de inhibiciones. Sociabilidad, autoconfianza
Brusquedad, Enlentecimiento reacciones
Ataxia
Inestabilidad emocional
Disminución atención, juicio y control
Disminución percepciones sensoriales
Sobrevaloración capacidades propias
Trastornos de memoria y comprensión
Desorientación
Descoordinación muscular
Somnolencia
Disminución de la conciencia
Apatía, inercia
Déficits motores
Inconsciencia, anestesia
Disminución de reflejos
Dificultades cardíacas y respiratorias
Hipotermia, Hipoglucemia
Convulsiones
Parálisis respiratoria

Fuente: (1)

Objetivo General

Validar el dictamen de embriaguez a través de la determinación de

alcoholemia por el Método de Widmark y el de la Microdifusión.

Objetivos específicos

 Crear un sistema de aseguramiento de calidad y Cadena de Custodia.

 Desarrollar la técnica y proceso de análisis adecuado para la
determinación de la concentración de alcohol en sangre.
 Diseñar Formularios de ingreso, Registros e Informes para la
determinación de la concentración de alcohol en sangre.
 Realizar la determinación de la concentración de alcohol en sangre
por el Método de Widmark y el de la Microdifusión.
 Determinar e interpretar la concentración de alcohol en sangre
cuando ocurrió el hecho (proyección).

NORMAS DE SEGURIDAD Y CUSTODIA DE LA MUESTRA

a. Extracción de la Muestra de sangre

b. Envío de ella al laboratorio de análisis
c. Recepción en el laboratorio de análisis
d. Análisis de la Muestra
e. Informe de alcoholemia
f. Despacho del informe a los Tribunales de Justicia (4).
a) EXTRACCIÓN DE LA MUESTRA DE SANGRE

Se realizará en Unidades de emergencia de los establecimientos

hospitalarios y en Clínicas privadas autorizadas por el laboratorio de
análisis, a solicitud de: 1) Tránsito, 2) Particulares, 3) Otros (Seguros, etc.).
La extracción debe ser efectuada en presencia del funcionario policial (quien
comprobará la identidad de la persona con su respectiva Cédula de
Identidad o documento válido similar). Para proceder a la Toma de la
Muestra, utilizar jeringas y agujas esterilizadas en seco. Utilizar en la
desinfección de la piel algodón con solución de mercurio, solución de lugol o
agua simple, "no usar nunca alcohol, solución alcohólica de yodo, éter,
cloroformo, bencina u otro líquido similar". Recibir la sangre en frascos que
proporcionará el laboratorio de análisis: Deben ser de vidrio con tapón de
goma, con capacidad de 5 cc, limpios y secos, con 0,20 gr. de
anticoagulante Fluoruro de sodio; así se evita la hemólisis de los glóbulos
rojos; a la vez, es desinfectante y, por lo tanto, evita la proliferación de
bacterias anaeróbicas. El frasco debe llenarse por completo para evitar la
evaporación del alcohol (4).

Una vez colocada la muestra en el envase, sellar y rotular todos los datos
correspondientes. Junto a la extracción de la muestra se extenderá Boleta
(en duplicado) con los siguientes datos (escritos con letra de imprenta): 1)
Nombre del establecimiento, 2) Nombre completo de la persona a la que
pertenece la muestra de sangre, 3) Cédula de identidad de la persona a la
que pertenece la muestra de sangre, 4) Fecha y hora de Toma de la
Muestra, 5) Apreciación clínica de haber ingerido o no alcohol con los
números 0, 1, 2, 3: Sobrio sin signos de ingesta, Aliento alcohólico,
Ebriedad manifiesta y Estado de coma.

Señalar el frasco con el Nº, Carnet de Identidad o cualquiera sea el sistema

de identificación debe colocarse en la Boleta y en el frasco, Nombre
completo del médico y su firma; en caso de personas no identificadas o que
no porten cédula debe agregarse a la Boleta ficha dactiloscópica (4).

Extracción de Muestra en caso de cadáveres: Se tomará de la vena arterial,

femoral, humeral y del corazón colocándola en los frascos con
anticoagulante.

Cadáveres en estado de putrefacción: No es posible extraer sangre debido a

su avanzado estado de putrefacción; se tomará 20 gramos de órganos para
la determinación de alcohol y se preferirá los siguientes en orden de pureza
de la Muestra: Humor vítreo, Cerebro, Hígado, Riñón y Bazo, sin agregar
ninguna sustancia conservadora (4).

b) ENVÍO DE LA MUESTRA AL LABORATORIO DE ANÁLISIS

Es de responsabilidad del médico Jefe de la Unidad de Emergencia

respectiva o del profesional en quien se delegue esta función. Con las copias
de las Boletas correspondientes de las Muestras depositadas, deberá
confeccionar una Nómina de Envío (en duplicado), la que enviará
conjuntamente con la Caja de seguridad.
La Nómina debe contener: Número del frasco de acuerdo a orden interna de
cada Unidad de Emergencia, Nombre y apellidos de la persona a la que
pertenece, Número de la Cédula de identidad, Fecha y hora de la Toma de
la Muestra, Apreciación clínica. En la parte inferior, tendrá un espacio para
observaciones para registrar aquella información, por ejemplo, respecto a
que la persona se niegue a tomarse la muestra u otras anomalías. En caso
de negarse a la Toma de la Muestra, se dejará constancia en la Boleta de
atención, la cual deberá constar imprescindiblemente la apreciación clínica.
La Nómina y las fichas dactiloscópicas se colocarán en un sobre cerrado y se
enviarán con la Caja de seguridad al laboratorio de análisis. El transporte de
la Caja deberá hacerse mediante un funcionario idóneo, quien será
responsable de cualquier pérdida o destrucción de algunas de las muestras
(4).

c) RECEPCIÓN DE LAS MUESTRAS EN EL LABORATORIO DE

ANÁLISIS

En el laboratorio, deberá existir una dependencia a cargo de personas

responsables, destinada a recibir las muestras.

Las muestras llegarán en la Caja de seguridad cerrada y se procederá como

sigue:

 Una persona abrirá la Caja con la llave correspondiente en presencia

de otro funcionario del servicio y funcionamiento de la Unidad de
Emergencia que la transporta. En el interior, se encontrarán los
frascos envueltos en sus respectivas Boletas.
 Se desenvolverá con cuidado cada muestra, verificando en la Boleta
todos los datos requeridos. Se ha de comprobar la correspondencia
entre Boleta y frasco y también la firma del médico y fichas
dactiloscópicas.
 Si alguna muestra no cumple con lo solicitado, se dejará constancia
de los errores para su corrección en la nómina de envío.
 Firmarán la Nómina todos los presentes indicando el día y la hora.
 Se entregará al funcionario otra Caja de seguridad cerrada y la copia
de la Nómina de envío en sobre cerrado.
 En Caja separada, se entregarán los frascos con anticoagulante, en
número igual al de las muestras retiradas.
 Las personas encargadas de la recepción procederán a colocar un
número de ingreso idéntico al frasco.
 Se procederá de inmediato a entregar al profesional las muestras
recibidas y numeradas de acuerdo al punto anterior y los cheques
correspondientes junto con el talón de cada uno.
 Con los datos contenidos en las Boletas y listas se procederá a
confeccionar las tarjetas kardex (4).

d) ANÁLISIS DE LAS MUESTRAS

 Al recibir las muestras, el profesional verificará que corresponda la

numeración de los frascos, dejando constancia de las anomalías
detectadas en el talón.
  El análisis de alcoholemia se realizará por el micro Método de
Widmark, en duplicado.
 Este método está basado en un proceso de destilación del alcohol y
oxidación simultánea con reactivos valorados.
 El profesional anotará todos los resultados del análisis y el promedio
final con lapicero.
 Entregará los informes con los resultados sin firmar a la oficina
administrativa, para completarlos con el resto de los datos. Los
talones los guardará el profesional.
 En la oficina administrativa, se procederá a completar con los datos
que faltaban a cada informe y a colocar el resultado con la máquina
protectora de cheques; se lo devolverá al profesional para su firma y
revisión (4).

e) INFORME DE LA ALCOHOLEMIA

 El Informe de alcoholemia debe efectuarse en un Formulario tipo

Cheque, cuyo modelo será proporcionado por el laboratorio.
 Este Formulario consta de un original, quedando el talón en el archivo
del laboratorio.
 Tiene un número de serie que lo individualiza con la muestra y
persona correspondiente.
 No debe contener ninguna enmienda en la escritura que se efectúe.
 El resultado en número debe ser colocado con lapicero y por puño y
letra del profesional que efectuó el análisis.
 Contendrá además la firma y el timbre del profesional y la firma de la
persona que lo despacha al Tribunal de Justicia correspondiente.
 El informe debe salir protegido, tanto en su valor como en su
escritura.
 En caso de inutilizarse algún cheque, debe colocársele la palabra
"Nulo".
 En el informe anulado, debe dejarse constancia del número de serie
del cheque en que fue hecho.
 Por ningún motivo, se aceptará enmienda o borrón en los informes.

f) DESPACHO DE LOS INFORMES A LOS TRIBUNALES DE JUSTICIA

 El envío de los informes debe efectuarse solamente a solicitud de los

Tribunales de Justicia, mediante Oficio.
 El oficio de Solicitud del Tribunal debe contener el número de la
causa, nombre de la persona, lugar donde se tomó la muestra y
fecha.
 Se llena el informe con el número de causa e individualización del
juzgado (4).

MATERIALES Y MÉTODOS

La población de estudio estuvo constituida por 22 participantes de diferente

profesión (Bioquímicos, Médicos, Odontólogos, Psicólogos, Abogados y
Policías, de ambos sexos), participantes del Diplomado en Toxicología
Forense y Peritaje Judicial. Se efectuó la determinación de alcoholemia por
el micro Método de Widmark y de la Microdifusión en sangre total. Para la
determinación de la concentración de alcohol en sangre, los métodos más
frecuentemente empleados en un laboratorio de toxicología son:

1. Métodos Bioquímicos: Método Enzimático / UV y Método de

Widmark / Microbureta
2. Método de Microdifusión: Cámara de Conway
3. Métodos Instrumentales: Cromatografía gaseosa Head-Space

Los métodos que usamos en este trabajo de investigación fueron:

1. Métodos Bioquímicos: Método de Widmark / Microbureta

2. Método de Micro difusión: Cámara de Conway

Los Métodos Bioquímicos permiten la dosificación del alcohol en la sangre u

otros fluidos biológicos a efectos de inferir la impregnación alcohólica del
organismo. Los Métodos Enzimáticos usan la enzima alcohol deshidrogenasa
por ser específica. Su gran desventaja es la contaminación y sólo actúa a
una determinada temperatura y tiempo.

El Método Enzimático no se usa en Medicina Forense por los extremos

cuidados que se deben tener y porque no es capaz de diferenciar el tipo de
alcohol. Es decir, si se trata de contaminación o adulteración, se considera
sólo como un Método de Screening y debe ser confirmado necesariamente
por otra técnica diferente (Química o instrumental), no por otro Método
enzimático. El Método de Widmark es una modificación de Nicloux que
desarrolla una técnica de oxidación simultánea; ello significa economizar
tiempo y aumentar la seguridad de la determinación; sus ventajas son
evitar: La Posibilidad de evaporación, la Contaminación del destilado con
sustancias oxidables y la Pérdida del destilado al trasvasijar (4).

La técnica de la Microdifusión se realiza en cámaras de Conway, las cuales

poseen, en el compartimiento externo, muestra y agente liberador (CO3K2)
y, en el interno, el agente atrapante Cr2O7K2 + H2SO4 0,01N. En este
caso, se produce la captación y oxidación del etanol hacia ácido acético,
forzándose la remoción completa del primer compuesto al cabo de un
tiempo y temperatura previamente determinados (5).

Materiales: 1 Micro pipeta de volumen variable de 100 á 1000 microlitros;

14 Dispositivos Widmark, limpios y secos con tapón de goma; 12 Matraces
Widmark con tapón de goma; 1 Micro Bureta 2ml; 1 Embudo de vidrio; 1
Pipeta con agua destilada; 1 Gradillas metálicas para 14 matraces Widmark;
1 Termómetro 100ºC.; 1 Balanza analítica; 2 Delantales desechables; 1
Caja de Guantes desechables XS; 1 Caja de barbijos desechables; 2
Pecheras plásticas; 2 Marcadores de vidrio para marcar los dispositivos; 1
Cronómetro para el tiempo de incubación; 34 Frascos tipo antibiótico de 5
ml de capacidad con tapa de goma, con EDTA como anticoagulante; 1 Rollo
de Teflón; 1 Rollo de papel absorbente

Reactivos: 1 Frasco de Solución dicromato de potasio (Pro Análisis); 1

Frasco Solución tiosulfato de sodio (Pro Análisis); 1 Frasco Solución de
yoduro de potasio 10% p/v; 1 Frasco de EDTA (anticoagulante); 1 Frasco
de Hipoclorito de sodio
Muestra: Sangre total, Equipos, Baño Termorregulador, Refrigerador para
mantener las muestras a 4°C, Campana de extracción

PROCEDIMIENTO

La determinación de alcoholemia se realiza por el Método de Widmark; es

un método Volumétrico (Significa que lo que se está buscando aparecerá en
solución, o aquel en el que el análisis cuantitativo se basa en una medida de
volumen). Consiste en someter al alcohol con una mezcla sulfocrómica
donde el oxidante K2Cr2O7 va a oxidar el alcohol hasta acetaldehído y
lógicamente el oxidante se reduce de +6 a +3. La solución en exceso es la
mezcla sulfocrómica que reacciona una parte con la muestra y la otra con el
indicador (IK), permitiendo la liberación de I2, que posteriormente
reacciona con el tiosulfato de sodio.

REACCIÓN

Los reactivos deben titularse y debe corregirse la dilución hasta que

1 ml de la solución sulfocrómica equivalga exactamente a 2 cc. de la
solución de tiosulfato de sodio (4).

1 cc de la solución = 2 cc de la solución 
sulfocrómica de tiosulfato de sodio
(K2CrO7 + H2SO4)

TÉCNICA

1. Colocar en cada matraz 1,0 ml, exactamente medidos, de

mezcla sulfocrómica e introducirla hasta el fondo, para no
dejar reactivo en el cuello.
2. En el dispositivo del vástago, colocar exactamente 200
microlitros de sangre total, suero o plasma.
3. El extremo del vástago deberá quedar aproximadamente a 1
cm sobre el nivel de la mezcla sulfocrómica; nunca debe
tocarse la mezcla.
4. Sumergir en Baño María a 70 ºC durante dos horas. No debe
elevarse la temperatura indicada porque el aumento de la
presión interior puede destapar el matraz y, por lo tanto,
inutilizará el análisis.
5. Si, al término del calentamiento, se observa que la mezcla
sulfocrómica está de color verde (reducción completa), se
debe repetir el análisis ya que es posible que el matraz tuviese
alguna sustancia reductora extraña. Si el nuevo análisis
resultara igual, colocar en el dispositivo menor cantidad de
 muestra. Valores superiores a 5 g% o de alcohol pueden
significar Error en la Toma de la Muestra o en la manipulación
de la técnica.
6. Una vez completado el calentamiento, los matraces se retiran
del Baño María y se enfrían. Logrado esto, se destapan y se le
agrega 2 ml. de solución de Yoduro de potasio a cada matraz.
No se debe tocar la mezcla sulfocrómica interior. Luego se
agita y hay que esperar dos minutos. Sólo, en este momento,
se titula la solución de tiosulfato hasta la aparición del color
verde pálido.
7. Cada 0,01 ml de tiosulfato equivale a 0,02 g /L de alcohol. Se
puede hacer una tabla desde 0 a 4,80 g /L de alcohol.
8. La interpretación de los resultados está sujeta a la
reglamentación vigente al respecto en cada país (4).

RESULTADOS

Tabla Nº 2. DIFERENCIAS DE LA CONCENTRACIÓN DE ALCOHOL EN

SANGRE 
ENTRE HOMBRE / MUJER
TIPO DE BEBIDA HOMBRE MUJER
CANTIDAD
GRADO ALCOHÓLICO
Cerveza 4 vasos 5% 0,62 g/L 1,05 g/L
Vino 4 vasos 12% 0,72 g/L 0,88 g/L
Fernet 6 vasos 50% 1,20 g/L 2,08 g/L
Guarapo 16 vasos 7,5% 3,04 g/L 3,11 g/L
Fuente: Elaboración propia, 2009

Tabla Nº 3. DIFERENCIAS DE LA CONCENTRACIÓN DE ALCOHOL EN

SANGRE 
ENTRE AYUNO / NO AYUNO
TIPO DE BEBIDA AYUNO NO AYUNO
CANTIDAD
GRADO ALCOHÓLICO
Chicha 24 vasos 5% 2,82 g/L 2,46 g/L
Masculino
Chicha 2,5 vasos 5% 0,6 g/L 0,5 g/L
Femenino
Fuente: Elaboración propia, 2009

Tabla Nº 4. DIFERENCIAS DE LA CONCENTRACIÓN DE ALCOHOL EN

SANGRE ENTRE FUMA / NO FUMA 
TIPO DE BEBIDA FUMA NO FUMA
CANTIDAD
GRADO ALCOHÓLICO
Ron 5 vasos 5% 1,50 g/L 1,70 g/L
Cerveza 4 vasos 5%
Whisky 3 vasos 40%
Masculino
Chicha 2,5 vasos 5% 0,5 g/L 0,6 g/L
Femenino
Fuente: Elaboración propia, 2009

Tabla Nº 5. DIFERENCIAS DE LA CONCENTRACIÓN DE ALCOHOL EN

SANGRE 
ENTRE ABUNDANTE TEJIDO ADIPOSO/DELGADO DE POCA GRASA 
TIPO DE BEBIDA ABUNDANTE DELGADO
CANTIDAD TEJIDO DE POCA
GRADO ALCOHÓLICO ADIPOSO GRASA
Guarapo 4 vasos 7,5% 1,00 g/L 0,90 g/L
Sexo Femenino
Fuente: Elaboración propia, 2009

Figura Nº 2. NIVELES DE CONCENTRACIÓN DE ALCOHOL EN SANGRE

RELACIONADO
CON EL ESTADO DE LAS PERSONAS QUE INGIRIERON BEBIDAS
ALCOHÓLICAS