Cuestionario

1. Defina qué es un medio de cultivo y cuál es su utilidad.

Un medio de cultivo es un sustrato o solución de nutrientes en los que crece y se
multiplican los microorganismos en el laboratorio, con el objeto de aislar diferentes
especies bacterianas.(1)
Utilidad:
 Estudio morfológico de colonias
 Conservación de cepas identificadas
 Clasificación y tipificación de bacterias por estudio de sus propiedades bioquímicas
 Aislamiento de bacterias
 Cultivo y cosecha de bacterias para la elaboración de productos biológicos
(vacunas, antígenos, bacterinas, toxoides, etc.)

2. ¿Cómo se clasifican los medios de cultivo de acuerdo con su consistencia?

Los medios de cultivo se clasifican según su estado físico en líquidos, sólidos y semisolidos.
Los medios de cultivo sólidos (como el TSA) contienen el agente solidificante
(generalmente agar al 1,5-2%) y los medios de cultivo líquidos (como el agua de peptona)
no llevan adicionados agentes solidificantes; los medios de cultivo semisólidos (como el
Agar de Hugh-Leiffson contienen el agente solidificante en menor concentración que los
sólidos. (2)
3. ¿Qué sustancias se emplean para modificar la consistencia de los medios de cultivo?
Partiendo de un medio líquido podemos modificar su consistencia añadiendo productos
como albúmina, gelatina o agar, con lo que obtendríamos medios en estado semisólido o
sólido. (3)
4. Mencione las propiedades fisicoquímicas del agar.
Para un agar bacteriológico con una solución al 1.5% las características fisicoquímicas son:
 Tamaño de partícula: 98% pasa por un poro de 250 μm
 Humedad: <10%
 pH: 0.3 max
 Punto de ebullición: 80-90 °C
 Punto de gelificacIon: 32-38 °C.
 Fuerza de gel: >750 g/ cm2
 Color: <0.300 (4)

5. Qué utilidad tiene cada uno de los siguientes tipos de medios de cultivo:
a) Líquido: se utilizan preferentemente para favorecer el desarrollo bacteriano de células
estresadas, contiene nutrientes a los cuales se les adicionan sustancias con la capacidad de
mantener estables un pH, entre ellos podemos encontrar el caldo nutritivo y caldo de
peptona
b) Semisólido: se utilizan para estudiar la motilidad de las bacterias, se obtiene agregando
un poco de agar a un medio líquido determinado, permite observar cepas bacterianas y la
observación y registro de bacterias móviles.
c) Sólido: se obtiene agregando agar a un medio líquido determinado, al tener un medio
sólido nos facilita obtener colonias bacterianas aisladas (1)

6. Explique en qué consisten los siguientes medios de cultivo y cite tres ejemplos de cada
uno:
 a) Básicos: Poseen los requisitos nutricionales para permitir el desarrollo bacteriano
general, ejemplos: agar nutritivo, caldo nutritivo, entre otros.
b) Enriquecido: Son medios simples o comunes, a los que se le añaden ciertos elementos
como sangre, suero, líquido ascítico, huevo, glucosa, vitaminas, etc. lo que permite el
aporte de factores de crecimiento o sustancias que neutralizan agentes inhibidores del
crecimiento en bacterias exigentes nutricionalmente, entre algunos ejemplos: agar
sangre, medio de Löwenstein-Jensen, enriquecido con huevo para facilitar el
crecimiento de Mycobacterium; agar desoxicolato-lactosa (DLA), enriquecido con
lactosa y desoxicolato.
c) Selectivo y/ o diferencial: Se consiguen añadiendo al agar nutritivo compuestos
químicos nocivos para algunas bacterias cuyo crecimiento no es de interés o también
mediante una alteración de las condiciones físicas del medio.
ejemplos: Agar MacConkey, Thayer- Martín medio selectivo para Neissar, ya que este
posee antibióticos como la vancomicina colistina y nistatina,Löwenstein-Jensen.
d) Especial o de ensayo: son aquellos medios de cultivo que por su riqueza nutritiva,
sirven para el cultivo de bacterias muy exigentes. Contienen en su formulación
sustancias inhibidoras para ciertas bacterias, que permiten el aislamiento y
diagnóstico precoz de aquellas bacterias que nos interesan. (5)
7. Indique la forma correcta de disolver un medio de cultivo que contenga agar.
Se disuelve en agua destilada la cantidad requerida de medio deshidratado o de cada uno
de los ingredientes mediante agitación continua, el agar debe hidratarse muy bien antes
de calentar, después se calienta a baño María, horno o parrilla y se retira en su primer
hervor.
8. ¿Qué precauciones deben tomarse en cuenta al preparar un medio de cultivo?
 Prepararlos sólo a partir de productos que provengan de fabricantes o
proveedores que suministren productos de calidad.
 Utilizar agua destilada o desmineralizada con una calidad microbiológica y
fisicoquímica adecuada.
 Utilizar materiales de vidrio bien lavados y enjuagados con agua destilada o
desmineralizada.
 Controlar el tiempo y la temperatura recomendada durante su esterilización.
Nunca se deben exceder las condiciones señaladas por el fabricante.
9. Realice una tabla para los siguientes medios de cultivo (al menos 5 medios de la
siguiente lista):
1. Agar Salmonela-Shigella
2. Agar para métodos estadar
3. Agar Hierro triple azúcar
4. Agar Sulfito Bismuto
5. Agar Hierro de Kigler
6. Agar Macconkey
7. Caldo MR-VP
8. Agar Eosina y azul de metileno
9. Agar citrato de Simmons
10. Agar bacteriológico
11. Agar Dextrosa y papa
12.Agar Dextrosa sabouraud
13. Agar nutritivo
Dicha tabla deberá contener la siguiente información
Nombre del medio de cultivo
Clasificación de acuerdo con su composición química
Composición química
Fundamento del medio
Utilidad
Interpretación
Nombre Clasificació Composici Fundamento Utilidad Interpretación
del medio n según su ón química del medio
de cultivo composici
ón química
Agar Selectivo -Digerido En Agar Se usa en E. Coli: colonias
MacConk pancreátic MacConkey, muestras clínicas de color rosa a
ey o de las peptonas con posible flora rojo
gelatina proporcionan microbiana Enterobacter,
-Digerido los nutrientes. mixta, tal como Klebsiella:
pancreátic Cristal violeta procedentes de colonias mucoides
o de inhibe las la orina, del de color rosa
caseína bacterias gram sistema Proteus: colonias
-Digerido positivas, en respiratorio, de incoloras
péptico de especial los heridas y otras, Salmonella
tejido enterococos y porque permite shigella: colonias
animal estafilococos. la agrupación inoloras, color del
-Lactosa La preliminar de medio:
-Sales diferenciación bacterias anaranjado a
biliares de los entéricas y otras ámbar
-Cloruro microorganism bacterias gram Pseudomonas:
sódico os entéricos se negativas en colonias
-Rojo logra mediante organismos irregulares, de
neutro la combinación fermentadores y incoloras a rosa
-Cristal de lactosa y el no
violeta indicador de fermentadores
-Agar pH rojo de lactosa
neutro. Se
producen
colonias
incoloras o de
color de rosa a
rojo según la
capacidad del
aislado para
fermentar
carbohidratos.
Agar Medios -Digerido El extracto de es un medio de Una vez
nutritivo indefinidos pancreatic carne bovina uso general para completado el
, básicos o de contiene el cultivo de una período de
gelatina sustancias amplia variedad incubación,
-Extracto solubles en de organismos observar el
de carne agua incluidos bacterianos. desarrollo de
 bovina los Muestras de colonias y
-Agar carbohidratos, aguas y registrar el
vitaminas, alimentos para el número de U.F.C.
compuestos aislamiento o de cada muestra.
de nitrógeno para el recuento
orgánicos y de bacterias
sales. Las mesófilas totales.
peptonas son
la fuente
principal de
nitrógeno
orgánico, en
particular
aminoácidos y
péptidos de
cadena larga.
El agar es el
agente
solidificante.
Agar Medios -Peptona Es nutritivo es utilizado para Microorganismos
Eosina y diferencial -Lactosa por la el aisla- miento fermentadores de
azul de es -Sacarosa presencia de selectivo de lactosa y / o
metileno -Fosfato peptona que bacilos Gram sacarosa: colonias
dipotásico favorece el negativos de de color negro
-Eosina desarrollo rápido desarrollo azulado o
-Azul de microbiano. La y escasas amarronado.
metileno diferenciación exigencias Pueden tener
-Agar entre nutricionales. centro oscuro y
organismos Permite el brillo metálico.
capaces de desarrollo de Microorganismos
utilizar la todas las no fermentadores
lactosa y/o especies de la de lactosa y
sacarosa, y familia sacarosa: colonias
aquellos que Enterobacteriace del color del
son incapaces ae. medio, incoloras.
de hacerlo,
está dada por
los indicadores
eosina y azul
de metileno;
éstos ejer- cen
un efecto
inhibitorio
sobre una
amplia
variedad de
bacterias
Gram
 positivas. El
agar es el
agente
solidificante.
Agar Medio Pluripepto En el medio de Utilizado para el Microorganismos
Salmonel selectivo y na cultivo la aislamiento de fermentadores de
a-Shigella diferencial -Extracto pluripeptona y Salmonella spp. y lactosa: colonias
de carne el extracto de de algunas rosadas o rojizas.
-Lactosa carne aportan especies de Microorganismos
-Mezcla de los nutrientes Shigella spp. a no fermentadores
sales para el partir de heces, de lactosa:
biliares desarrollo alimentos y otros colonias del color
-Citrato de microbiano. materiales en los del medio,
sodio Las sales cuales se incoloras.
-Tiosulfato biliares y el sospeche su Microorganismos
de sodio verde brillante presencia. productores de
-Citrato inhiben el SH2: colonias con
férrico desarrollo de centro negro.
-Verde una amplia
brillante variedad de
-Rojo bacterias
neutro Gram
-Agar positivas, de la
mayoría de los
coliformes y el
desarrollo
invasor del
Proteus spp.
La lactosa es el
hidrato de
carbono
fermentable.
El tiosulfato de
sodio permite
la formación
de SH2 que se
evidencia por
la formación
de sulfuro de
hierro.
El rojo neutro
es el indicador
de pH y el agar
es el agente
solidificante.
Agar Medio de Extracto de En el medio de Medio Observar el color
Hierro cultivo carne cultivo, el universalmente del medio de
triple diferencial Pluripepto extracto de empleado para la cultivo y la
 azúcar na carne y la diferenciación de producción de
Cloruro de pluripeptona, enterobacterias gas.
sodio apor- tan los 1- Superficie
Lactosa nutrientes alcalina/profundi
Sacarosa adecuados dad ácida (pico
Glucosa para el rojo/fondo
Sulfató de desarrollo amarillo): el
hierro y bacteriano. microorganismo
amonio La lactosa, solamente
Tiosulfato sacarosa y fermenta la
de sodio glucosa son los glucosa.
Rojo de hidratos de 2- Superficie
fenol carbono fer- ácida/Profundida
Agar mentables. El d ácida (pico
tiosulfato de amarillo/fondo
sodio es el amarillo): el
sustrato microorganismo
necesario para fermenta glucosa,
la producción lactosa y/o
de ácido sacarosa.
sulfhídrico, el 3- Superficie
sulfato de alcalina/Profundi
hierro y dad alcalina (pico
amonio, es la rojo/fondo rojo):
fuente de el
iones Fe3+ , microorganismo
los cuales se es no
combinan con fermentador de
el ácido sulfhí- azúcares.
drico y 4- La presencia de
producen burbujas o la
sulfuro de ruptura del medio
hierro, de de cultivo indican
color negro. El que el
rojo de fenol microorganismo
es el indicador produce gas.(6)
de pH, y el
cloruro de
sodio
mantiene el
balance
osmótico. El
agar es el
agente
solidificante.
Referencias
1.  Medios de cultivo [Internet]. EduLabC. admin; 2019 [citado el 15 de marzo de 2023].
Disponible en: https://edulabc.com.mx/medios-de-cultivo/
2.  Clasificacion de Medios de Cultivo [Internet]. Ugr.es. [citado el 15 de marzo de
2023]. Disponible en: https://www.ugr.es/~pomif/pom-bac/pb-i/pb-i-2-variedad.htm
3.  Medios de cultivo [Internet]. conalepfelixtovar. 2012 [citado el 15 de marzo de
2023]. Disponible en: https://conalepfelixtovar.wordpress.com/2012/09/26/medios-
de-cultivo/
4.  Físico-Químicas C. [Internet]. Britanialab.com. [citado el 15 de marzo de 2023].
Disponible en:
https://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_5a31600f60075.pdf
5.  Tipos de medios de cultivo [Internet]. Com.mx. [citado el 15 de marzo de 2023].
Disponible en: https://viresa.com.mx/blog_tipos_medios_cultivo
6.  Britanialab.com. [citado el 15 de marzo de 2023]. Disponible en:
https://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_6070971eb11bd.pdf