CULTIVO DE LOS MICROORGANISMOS

Medios de cultivos. Métodos básicos de cultivo de las

bacterias, mohos, levaduras, rickettsias, clamidias y virus.

MEDIOS DE CULTIVO

De manera general se denomina “medio de cultivo” a

cualquier material que presente una adecuada combinación
de nutrientes para permitir el crecimiento o el incremento
del número de células de una población microbiana.

CLASIFICACIÓN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

• Según su estado físico

LÍQUIDOS SÓLIDOS

Se denominan caldos, contienen los nutrientes Preparar a partir de medios líquidos a los cuales se
disueltos en agua. Permiten obtener suspensiones les añaden agentes solidificantes como agar, gelatina
con un elevado número de microorganismos. o sílica gel. Se utilizan con frecuencia en el
Ej. Caldo nutritivo. aislamiento y mantenimiento de los mi-
croorganismos en el laboratorio.
Ej. Agar nutritivo.

• Según la naturaleza de sus constituyentes

MEDIOS NATURALES O COMPLEJOS MEDIOS SINTÉTICOS O QUÍMICAMENTE

DEFINIDOS
Constituidos por sustancias complejas de origen
animal o vegetal y usualmente se complementan con Se preparan a partir de ingredientes químicamente
el añadido de minerales y otras sustancias. No se puros y por lo tanto se puede conocer exactamente
conocen todos los componentes del medio de su composición cuali y cuantitativa. Por su costo
cultivo, ni las cantidades exactas que están sólo se emplean en procedimientos especiales.
presentes.
Ej. Extracto de carne, extracto de levaduras.
 TIPOS DE CULTIVOS- SEGÚN SUS PROPÓSITOS DE USO

MEDIOS DE ENIRQUECIMIENTO

Cualquier cultivo en medio líquido que

resulté en un incremento en el número de
un tipo dado de microorganismo en relación
con el número de otros tipos de
microorganismos que puedan estar en el
inóculo. Ej. Caldo tetrationato
utilizado para el enriquecimiento de
las especies del género Salmonella
provenientes de muestras de heces,
orina, agua o alimentos.

MEDIOS SELECTIVOS

Son básicamente iguales a los de

enriquecimiento, se diferencian por ser
medios sólidos y están diseñados para el
aislamiento de microorganismos espe-
cíficos. Ej. Agar desoxicolato citrato
utilizado para el aislamiento de
patógenos entéricos.

MEDIOS DIFERENCIALES

No contienen sustancias inhibidoras, es

decir, permiten el crecimiento de muchos
tipos de microorganismos, pero si
contienen indicadores de productos
derivados de la actividad metabólica de los
microorganismos sobre algunos de los
componentes del medio. Se utilizan para la
identificación de los microorganismos. Ej.
Agar base rojo fenol utilizado para
detectar fermentación de
carbohidratos.

MEDIOS SELECTIVOS
DIFERENCIALES

A veces se combinan en un mismo medio las

características de ser selectivo y diferencial.
Ej. el agar Mac Conkey contiene sales
biliares y cristal violeta, que inhiben el
crecimiento de las bacterias gram
positivas. Pero como también
contiene lactosa y un indicador de pH
permite distinguir entre las bacterias
fermentadoras de lactosa y las que no
lo son.
AGAR CHOCOLATE

CARACTERÍSTICAS GENERALES

Es un medio de cultivo sólido enriquecido no selectivo y no

diferencial.
Posee un color marrón característico muy parecido al chocolate.
Es un medio con hemina (factor X) y Nicotinamida Adenina Di
nucleótido (NAD, factor V), factores esenciales para el crecimiento
de especies de Haemophilus.
Para el aislamiento no selectivo de Neisseria, Haemophilus y otras
bacterias que pueden no crecer en los medios de agar sangre
utilizados normalmente.

FUNDAMENTO

Usa la misma base del agar sangre, los eritrocitos se adicionan a la base fundida y luego se eleva
la temperatura para lisar parcialmente las células color pardo chocolate.

AGAR BHI (INFUSIÓN CEREBRO-CORAZÓN, “BRAIN-HEART”)

CARACTERÍSTICAS GENERALES

La infusión cerebro-corazón es una fórmula muy rica que

puede emplearse, ya sea como caldo o medio sólido, con
sangre adicional o sin ésta
Se utiliza para el crecimiento de una gran variedad de
microorganismos.
Los componentes clave incluyen infusión de distintos
tejidos animales con el agregado de peptona, tampón fosfato y
una pequeña concentración de glucosa que proporciona una
fuente de energía fácilmente accesible a los microorganismos.
Los caldos infusión cerebro-corazón se emplean con
frecuencia como medio para hemocultivo y como medio base
para muchas pruebas metabólicas, en especial para la
identificación de estreptococos.

FUNDAMENTO

Es un medio muy rico en nutrientes, que proporciona un adecuado desarrollo microbiano. La infusión
de cerebro de ternera, la infusión de corazón vacuno y la peptona, son la fuente de carbono,
nitrógeno, y vitaminas.
AGAR BHI CON ANTIBIÓTICOS

CARACTERÍSTICAS GENERALES

El agar BHI adicionado de cloranfenicol y cicloheximida se

utiliza para el aislamiento selectivo de hongos patógenos.
La cicloheximida inhibe el crecimiento de hongos saprófitos
mientras que el cloranfenicol actúa como agente
antibacteriano tanto de bacterias Gram positivas como
Gram negativas.
La incorporación de ambos antimicrobianos proporciona
una mayor selectividad frente a hongos saprófitos y
bacterias.

FUNDAMENTO

Se aumenta la recuperación de hongos patógenos a partir de muestras clínicas debido a la

inhibición de bacterias. La gentamicina inhibe las bacterias gram negativas.

AGAR DESOXICOLATO-CITRATO (ADC)

CARACTERÍSTICAS GENERALES

Medio altamente selectivo para el aislamiento de Salmonella y

Shigella.
El desoxicolato sódico inhibe o suprime considerablemente el
crecimiento de coliformes y bacterias Gram positivas.
Sin embargo, en ocasiones crecen coliformes, y cuando se
encuentran en grandes cantidades producen ácido a partir de la
lactosa, precipitan la sal biliar y dan un medio rojo que hace difícil la
detección de patógenos.
Incluye rojo neutro como indicador.
Las colonias de Salmonella y Shigella son incoloras.

FUNDAMENTO

Es un medio selectivo diferencial en placas para el aislamiento de patógenos entéricos,

particularmente Shigella y Salmonella.
AGAR EMB (EOSINA, AZUL DE METILENO, “EOSIN-METHYLEN BLUE”, AGAR DE
LEVINE)

CARACTERÍSTICAS GENERALES

Medio diferencial y selectivo para aislar y

detectar enterobacterias en muestras mixtas.
Los colorantes de anilina (eosina y azul de
metileno) inhiben el desarrollo de bacterias
Gram positivas y a las Gram negativas
exigentes.
También se combinan precipitando a pH
ácido, actuando como indicadores de
producción de ácidos.
El medio incluye lactosa, lo que permite la
diferenciación de los fermentadores de
lactosa de los no fermentadores.
Los fermentadores fuertes de lactosa, sobre todo Escherichia coli, producen colonias de color
negro verdoso con brillo metálico.
Los productores más débiles de ácidos, forman colonias de color violeta. Los no fermentadores
de lactosa forman colonias transparentes.

FUNDAMENTO

Se trata de un medio selectivo diferencial para aislar e identificar enterobacterias, principalmente

Escherichia coli y Enterobacter aerogenes en productos de la industria farmacéutica, cosmética y
agroalimentaria incluyendo el agua

AGAR GLUCOSA DE SABOURAUD

CARACTERÍSTICAS GENERALES

Este medio fue desarrollado para el cultivo de hongos

patógenos, especialmente de los productores de
micosis superficiales.
En la actualidad se recomienda sólo para el
aislamiento primario de dermatófitos, con el
agregado de cicloheximida y cloranfenicol.
El pH final (alrededor de 5,6) es mucho menor que
el de la mayoría de los medios y tiende a eliminar el
crecimiento bacteriano.
Los subcultivos de los hongos aislados originalmente
en BHI pueden presentar una morfología más
uniforme en agar glucosa de Sabouraud, por esto es
útil para la identificación de hongos una vez aislados.

FUNDAMENTO

Medio de cultivo recomendado para el aislamiento y desarrollo de hongos, particularmente los

asociados con infecciones cutáneas (piel, pelo). En el medio de cultivo, la peptona, la tripteína y la
glucosa son los nutrientes para el desarrollo de microorganismos.
AGAR PEA (ALCOHOL FENILETÍLICO,
“PHENYLETHANOL”)

CARACTERÍSTICAS GENERALES

Agregando alcohol feniletílico a una base con peptona, extracto

de carne y agar se obtiene un medio que inhibe el desarrollo de
las bacterias Gram negativas.
La adición de un 5% de sangre de oveja proporciona nutrientes
para estreptococos y estafilococos. Este medio también se
emplea para el cultivo de microorganismos anaerobios que no
son inhibidos por el alcohol.
Después de su preparación las placas con alcohol feniletílico huelen a rosas.

FUNDAMENTO

Un medio selectivo, el alcohol feniletílico (PEA), permite el crecimiento de cocos grampositivos

e inhibe la mayoría de los organismos gramnegativos.

AGAR SANGRE KANAMICINA-VANCOMICINA

(KV)

CARACTERÍSTICAS GENERALES

El medio KV es útil para el aislamiento selectivo de

especies de anaerobios (Bacteroides, Prevotella,
Fusobacterium, Veilonella) en muestras clínicas
que contienen bacterias aerobias y anaerobias
mezcladas.
La kanamicina inhibe el desarrollo de muchos,
pero no todos, bacilos Gram negativos anaerobios facultativos y la vancomicina inhibe el de las
bacterias Gram positivas en general (incluidas la mayoría de anaerobias y no anaerobias).

FUNDAMENTO

Es un medio no selectivo, compuesto por un agar base que contiene una fuente proteica al cual se le
agrega de 5% a 8% de sangre ovina; el agar sangre, permite el crecimiento de la mayoría de las
bacterias (Gram positivas y Gram negativas), permite verificar capacidad hemolítica (medio
diferencial).
AGAR SELECTIVO PARA ESTREPTOCOCOS

CARACTERÍSTICAS GENERALES

Modificación del agar sangre de oveja, que contiene cristal

violeta, trimetoprim~sulfametoxasol y colistina en
concentraciones adecuadas para inhibir a la mayoría de los
estreptococos excepto Streptococcus pyogenes y S. agalactiae.
La beta hemólisis se observa fácilmente. El medio es efectivo
para la siembra primaria de hisopos de garganta para la
detección de estreptococos del grupo A.

FUNDAMENTO

Estreptococos es un medio selectivo que se utiliza para la detección y recuento de cocos

entéricos fecales en agua potable, bebidas, aguas residuales, starters ácido lácticos y productos
alimentarios.

AGAR SS (SALMONELLA-SHIGELLA)

CARACTERÍSTICAS GENERALES

Lleva sales biliares, citrato sódico

y férrico, tiosulfato y el colorante
verde brillante.
El carácter diferencial se basa en
la fermentación de la lactosa.
Incorpora rojo neutro.
Las colonias lactosa positivas son
de color rojo, mientras que las
lactosas negativas son
transparentes (Shigella). Las
colonias de Salmonella son
transparentes con el centro negro.

FUNDAMENTO

Es un medio diferencial y selectivo que inhibe el crecimiento de la mayoría de los coliformes y permite
el crecimiento de especies de Salmonella y Shigella a partir de muestras de heces, orina, alimentos
conservados y frescos.
CALDO NUTRITIVO

CARACTERÍSTICAS GENERALES

Contiene extracto de carne y cloruro sódico.

Puede complementarse con peptonas, extracto de levadura
y/o glucosa.
Asimismo, puede incorporar un tampón.
Este tipo de medio se encuentra comercializado bajo
diferentes denominaciones, según su formulación más o
menos rica: caldo de infusión de cerebro y corazón (BHI),
caldo triptona de soja (TSB), caldo brucela, caldo Columbia,
etc.

FUNDAMENTO

Medio no selectivo, contiene pluripeptona (una mezcla de partes iguales de peptona de carne y de
caseína) y extracto de carne que constituyen la fuente de carbono y nitrógeno necesarias para el
adecuado desarrollo bacteriano.

MEDIO DE DIAMOND

CARACTERÍSTICAS GENERALES

Medio de cultivo empleado que favorece

considerablemente el crecimiento y la multiplicación
de Trichomonas vaginalis.
El medio de Diamond contiene tripticasa de peptona,
extracto de levadura, maltosa, L- cisteína, ácido L-
ascórbico, suero bovino, penicilina G y
estreptomicina.
La incorporación de agar en el medio limita a los
microorganismos contaminantes en su mayoría a la
porción superior del tubo del ensayo, mientras que
ayuda a mantener las condiciones microaerófilas en el
fondo del tubo, donde Trichomonas se encuentra en
grandes cantidades.

FUNDAMENTO

Favorece considerablemente el crecimiento y la multiplicación de Trichomonas vaginalis.

CALDO SELENITO F

CARACTERÍSTICAS GENERALES

Caldo con selenito sódico que en ocasiones se suplementa

con cisteína, diseñado para el enriquecimiento de
salmonelas.
El selenito inhibe el crecimiento de coliformes y
enterococos en las primeras 12 horas de incubación
mientras que Proteus y Salmonella no son inhibidos.

FUNDAMENTO

En el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano. La
lactosa es el hidrato de carbono fermentable, el selenito de sodio inhibe flora Gram positiva y la
mayoría de la flora entérica excepto Salmonella spp. durante las primeras 8-12 horas de incubación.

CALDO TODD-HEWITT CON SANGRE Y

ANTIBIÓTICOS

Se utiliza para la selección y enriquecimiento de

Streptococcus agalactiae en muestras de tracto genital
femenino.
El caldo Todd-Hewitt, que se emplea para el
enriquecimiento de estreptococos, se suplementa con
ácido nalidíxico y gentamicina o colistina para una mayor
selectividad.

FUNDAMENTO

El caldo Todd-Hewitt suplementado con colistina (10 ug/ml) + ácido nalidíxico (15 ug/ml) o con
gentamicina (8 ug/ml) + ácido nalidíxico (15 ug/ml) es recomendado por el Center for Disease
Control and Prevention (CDC) a partir del año 1996 para la investigación de Estreptococo Grupo B
(Streptococcus agalactiae) en muestras genitales de mujeres embarazadas ya que es un mediode
cultivo altamente nutritivo y selectivo, que aumenta hasta un 50% la recuperación de este
microorganismo mientras que se inhibe el desarrollo de flora acompañante por la presencia de los
antimicrobianos

CALDO TIOGLICOLATO CAMPY

Medio de apoyo selectivo para la recuperación de

especies de Campylobacter.
Se trata de un caldo tioglicolato suplementado con
una concentración aumentada de agar y antibióticos.

FUNDAMENTO

Medio de enriquecimiento de uso general utilizado para el aislamiento y cultivo de bacterias aerobias,
anaerobios y bacterias exigentes. Se utiliza como medio de enriquecimiento para muestras clínicas.
FACULTADA DE ENFERMERÍA Y CIENCIAS DEL CUIDADO DE SALUD

TÉCNICO EN ENFERMERÍA

CUARTO SEMESTRE

LICDA MARITZA SAMAYOA

MEDIO DE CULTIVOS

NOMBRE DEL ESTUIANTE: MÒNICA ESTER JOJ VELASQUEZ

CARNE:202200306

MICROBIOLOGÌA Y PARASITOLOGÌA

GUATEMALA, 29 DE JULIO 2023.