UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Universidad del Perú. Decana de América.

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

POTENCIAL DE Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 EN LA

BIODEGRADACIÓN DE POLIETILENO DE BAJA DENSIDAD

Apellidos y nombres Código

Benavidez Carbajal, Ruth Gabriela 18040004

Juro Dueñas, Jaidy Jazmin 19040076

Montes Huaynate, Astrid Zully 19040056

Olivares Perez, Victor Hugo 19040062

Vega Rivas, Mayra Alejandra 18040081

Asesores:
MSc. Hualpa Cutipa, Edwin
Mg. Chávez Fernández, Ana María

Lima – (2022)
ÍNDICE

Resumen ejecutivo 3

Descripción del estudio 3

Antecedentes y fundamentación científica 4

Planteamiento y formulación del problema 4

Planteamiento del problema 5

Formulación del problema 5

Justificación 6

Hipótesis y variables 7

Hipótesis 7

Variables 7

Objetivos 8

Objetivo general 8

Objetivos específicos 8

Metodología 8

Cronograma de actividades 15

Referencias bibliográficas 16

Anexos 17

Operacionalización de variables 17

Matriz de consistencia 18
I. Resumen ejecutivo
Actualmente existe una problemática sobre la producción y consumo
elevado de materiales plásticos a nivel mundial, y esto a su vez genera
un problema aún mayor: la contaminación ambiental, causante de la
pérdida y destrucción de ecosistemas tanto terrestres como marinos. Se
han buscado soluciones para tratar de mermar este escenario
lamentable, y entre las soluciones con más potencial se ha encontrado
el uso de microorganismos para degradar el plástico contaminante,
residual es uno eco amigable, acortando su tiempo de vida útil y por lo
tanto, disminuyendo el impacto ambiental. Para ello se realizó una
búsqueda bibliográfica para conocer qué tipo de microorganismos eran
usados con este fin, dando como mejor resultado a la Pseudomonas
aeruginosa ATCC 9027 capaz de biodegradar derivados del carbono,
como petróleo y polipropileno; y no solo del suelo terrestre si no
también en ecosistemas acuáticos a temperatura ambiental. Esta
búsqueda se realizó apoyándonos en bases de datos como
ResearchGate, Scopus, SpringerLink, Elsevier entre otros buscadores
bibliográficos. En base a la revisión bibliográfica, se realizó la
comparación de estudios de diversos autores sobre la actividad de
degradación de esta cepa sobre residuos plásticos de baja densidad.
Palabras clave: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, residuos
plásticos de baja densidad, plásticos biodegradables

II. Descripción del estudio

II.1 Antecedentes y fundamentación científica.

En la tesis de Gutiérrez (2018), se evaluó las condiciones de

temperatura y pH para la degradación de polietileno de baja densidad
por Pseudomonas aeruginosa. Para ello se preparó el agar polietileno y
se varió el pH con la adición de buffers, la variación de la temperatura
se logró con incubaciones de distintas placas a diferentes
temperaturas. Se observó que la óptima biodegradación de polietileno

2
de baja densidad se obtuvo a un pH de 8 y a una temperatura de 25°C,
por lo que Pseudomonas aeruginosa puede ejercer su acción
degradativa significativamente, bajo condiciones controladas (1).

Un trabajo desarrollado por Butrón, (2020) reporta la evaluación sobre

la capacidad de biodegradación de Pseudomonas aeruginosa frente al
polietileno de baja densidad. Para ello, la muestra se obtuvo de
residuos plásticos de un botadero ubicado en la ciudad Canchari en
Puno. La actividad biodegradadora se determinó en condiciones
específicas de temperatura 35°C y pH 7, donde la bacteria ejerce una
mayor capacidad degradativa, luego de 30 días de incubación. Dicha
determinación se realizó mediante una prueba cualitativa a través de la
técnica de fluorescencia y una prueba cuantitativa a través del método
de variación de masa del polietileno de baja densidad expuesto a la
biodegradación. En cuanto a los resultados, se observó un desgaste en
la superficie del polietileno y asimismo, se obtuvo un porcentaje de
degradación polietileno de baja densidad de hasta un 27,3% (2).

Así mismo, Hermoza, (2019) realizó su investigación con el objetivo de

evaluar la biodegradación del polietileno de baja densidad mediante
métodos microbiológicos y caracterizar los microorganismos
degradadores. Para lograr ese fin, se colocaron colonias aisladas de
muestras de un botadero de basura en Santa Clara (Lima) en reactores
air lift los cuales permiten controlar las condiciones de temperatura. La
especie bacteriana elegida a partir de las muestras para el estudio fue
la P. aeruginosa. La bacteria pudo degradar hasta 2% de PEBD en un
periodo de 7 días, así mismo, se determinó que el pH más eficiente
para la biodegradación del polímero fue 6.49 y la temperatura, fue
22.1° C (3).

Kumar K y Devi D (2020), investigaron sobre la capacidad de la cepa

bacteriana Pseudomonas aeruginosa ISJ 14 aislada de vertederos de
desechos frente a la biodegradaciòn in vitro de polietileno de baja

3
densidad (PEBD) cultivados en Caldo Bushnell Hass (BHM) y el Medio
Minimal Salt (MSM) a una temperatura de 35ºC durante 60 dìas a 180
rpm. Se agregò asépticamente películas de PE (0,1 g) a 100 ml de
medio y 5 ml de cultivo activo de la cepa, se retiraron las biopelículas y
se agregó medio fresco cada 20 días. En ambos cultivos se observó
biodegradaciòn de PEBD, pero mejor capacidad en BHM (8,70%)
mostrando colonización en la superficie, reducción de peso y presencia
de fisuras en las biopelículas de PEBD (4).

En Camerún, el estudio de Mouafo et.al, (2020) evaluaron la

biodegradación de polietileno por Pseudomonas aeruginosa en
microcosmos acuáticos ácidos y el efecto de la temperatura ambiental,
para ello 0.08 gr de polietileno fueron sumergidos en soluciones
minerales estériles a pH 5 en frascos que contenían a Pseudomonas
aeruginosa y se incubaron a diferentes temperaturas y durante distintos
días. Se observó que el mayor porcentaje de pérdida de peso del
polietileno, por acción de la degradación, fue del 6,25% luego de 30
días y a 44°C; además también se evidenció que la abundancia de
bacterias (UFC) solo varió por el cambio de temperatura de incubación
(5).
Por su parte, García et. al, (2019), realizaron un estudio que tuvo como
objetivo caracterizar bacterias capaces de utilizar el polietileno de baja
densidad (PEBD) como única fuente de carbono y energía, a partir de
cepas aisladas en suelo de un relleno sanitario ubicado en el municipio
de Teapa, Tabasco. Las cepas de P. aeruginosa fueron aisladas y
sometidas a una fase de adaptación y otra de degradación. En la
primera fase, se colocaron las bacterias en matraces con Medio de
Sales Minerales, PEBD y peptona alcalina por un periodo de 30 días en
agitación constante. Luego, se colocó a las bacterias bajo las mismas
condiciones que la fase anterior sin adición de peptona alcalina,
usando el PEBD como única fuente de carbono y energía por un
tiempo de 60 días. La investigación muestra que P. aeruginosa tuvo un

4
crecimiento de 21,500.000 UFC ml-1 y un índice de biodegradación de
PEBD de 4.33 % (6).

En el artículo realizado por Dwicania E, et al (2019) se evaluó la

degradación del polietileno lineal de baja densidad mediante el uso
concomitante de cultivo de bacterias Pseudomonas aeruginosa y
Brevibacterium sp. Para ello, se empleó el método gravimétrico para
determinar la pérdida de peso de LLDPE y el análisis infrarrojo por
transformada de Fourier (FTIR) con el fin de observar cambios en la
morfología, estructura y superficie del LLDPE. Respecto a los
resultados, a 25°C y pH 7 se obtuvo un máximo porcentaje de pérdida
peso LLDPE de 7,31%, por lo que, la mezcla de cultivo bacteriano
presentó potencial biodegradador sobre el LLDPE (7).

Patinge K (2020), recolectó muestra del suelo de basura de un sitio

contaminado con plástico, las bacterias se aislaron mediante la técnica
de propagación y se las identificó. Para la detección de
microorganismos que degradan el polietileno se empleó el método
Clear Zone. La degradación microbiana del polietileno en condiciones
de laboratorio se observó con el porcentaje de pérdida de peso. Se
concluyó que, entre los microorganismos, Pseudomonas aeruginosa
tienen mayor capacidad de degradación en comparación con S.
aureus, Bacillus subtilis, S. pyogenes, E. coli (8).

En este artículo realizado por Alania y Romero (2017), donde nos hace
una reflexión sobre el uso indiscriminado de plásticos se ha
incrementado gradualmente en la rutina diaria ocasionando mayor
contaminación al medio ambiente. Actualmente, se conoce que
especies del género Pseudomonas aisladas de suelo que tienen la
capacidad de biodegradar derivados del carbono, como petróleo y
polipropileno. El objetivo de su investigación fue evaluar el crecimiento
a 2 temperaturas de dos cepas ATCC (American Type Culture

5
 Collection) de Pseudomonas sp. Nº 9027 y Nº 10145, expuestas a
polipropileno. (9)

Una investigación desarrollada por Grosso-Becerra M. (2016) y

colaboradores, resaltan el potencial de la cepa de Pseudomonas
aeruginosa definida como una bacteria ambiental que produce
compuestos de importancia biotecnológica, como los biosurfactantes
ramnolípidos (RL) y polihidroxialcanoatos (PHA) que se pueden utilizar
para producir plásticos biodegradables, frenando así o por lo menos
disminuyendo la contaminación ambiental causada por los residuos
plásticos en los ecosistemas. En particular, el impacto biotecnológico
potencial de la producción de RL es muy alta debido a las excelentes
características fisicoquímicas de estos tensioactivos y al relativamente
alto rendimiento de su síntesis, en comparación con los producidos por
otros microorganismos. (10)

II.2 Planteamiento y formulación del problema:

II.2.1 Planteamiento del problema
La contaminación ambiental de residuos plásticos se ha
convertido en un problema muy grave para la conservación de los
ecosistemas de nuestro planeta: se estima que cada año se
vierten hasta 8 millones de toneladas de plástico en los océanos.
La basura marina perjudicará a 600 especies marinas. Además
se conoce que el 15% de especies afectadas por ingestión y
enredamiento con basura marina plástica se encontrarán en
peligro de extinción. (11) Es por este motivo que se han
comenzado a plantear soluciones novedosas para tratar de
remediar esta grave situación, investigando microorganismos
capaces de degradar este material plástico hasta convertirlo en
uno más amigable con el medio ambiente. (12) De entre todos los
microorganismos estudiados se ha encontrado uno con un
potencial para llevar a cabo este objetivo, se conoce que
especies del género Pseudomonas aisladas de suelo que tienen

6
 la capacidad de biodegradar derivados del carbono, como
petróleo y polipropileno (13) y no solo del suelo terrestre si no
también en ecosistemas acuáticos a una temperatura ambiental
por lo que contribuye a mermar el daño producidos por los
plásticos producidos y que se siguen produciendo, aunque en
menor cantidad debido a las medidas recientes contra el uso de
materiales plásticos (14).

II.2.2 Formulación del problema:

¿Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 posee la capacidad de
biodegradar el polietileno de baja densidad?

II.3 Justificación científica, técnica o humanística

El presente trabajo mostrará una forma alternativa para biodegradar
el polietileno de baja densidad, por tanto, beneficiará a la población
y a animales marinos, terrestres y aèreos, ya que se reducirá la
contaminación ambiental, lo cual es necesario debido a que cada
año el uso de plàstico es más común y, como consecuencia el
desecho de este tipo de material va en incremento. Además, evaluar
la capacidad y cuantificar la biodegradación de polietileno de baja
densidad por Pseudomonas aeruginosa cepa ATCC 9027 servirá
como aporte al conocimiento científico para realizar posteriores
investigaciones con otras cepas de esta misma bacteria y
comparaciones para determinar cuáles tienen mayor rendimiento.

Asimismo, cabe mencionar que, el presente estudio se encuentra

enmarcado en los Objetivos de Desarrollo Sostenible (ODS),
específicamente en el décimo primero sobre ciudades y
comunidades más sostenibles; donde figura la meta 11.6, la cual
plantea para el año 2030, reducir el impacto ambiental negativo per
capita, prestando especial atención a la gestión de los desechos
municipales y de otro tipo. También, con el ODS 14 que indica
“conservar y utilizar sosteniblemente los océanos, los mares y los

7
 recursos marinos para el desarrollo sostenible”, especialmente con
la meta 14.1 que consiste en de aquí al 2025, prevenir y reducir
significativamente la contaminación marina de todo tipo, en
particular la producida por actividades realizadas en tierra (15),
incluidos los detritos marinos y la polución por nutrientes. Debido a
que en nuestro estudio planteamos utilizar Pseudomonas
aeruginosa como una alternativa ecoamigable para la
biodegradación del PEBD.

Por otra parte, esta investigación está acorde con la Política

Nacional de Investigación de la Concytec, el cual, uno de sus
objetivos consiste en “Promover la generación y transferencia de
conocimiento científico - tecnológico alineando los resultados de
investigación con las necesidades del país” (16). Considerando que
la contaminación ambiental por plásticos como el polietileno de baja
densidad es una problemática vigente que afecta al medio ambiente
y a la población peruana.

Por último, este proyecto corresponde a la séptima línea de

investigación de la Facultad de Farmacia y bioquímica de la UNMSM
”Microorganismos de interés industrial, ambiental y bioprocesos”.

II.4 Hipótesis y variables

II.4.1 Hipótesis
Hipótesis general:
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 posee la capacidad de
biodegradar el polietileno de baja densidad.
Hipótesis específicas:
● Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 presenta un
porcentaje significativo de biodegradación de polietileno de
baja densidad.
● La temperatura y el pH influyen en la actividad biodegradativa
del polietileno de baja densidad

8
 II.4.2 Variables
Variable independiente:
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027
Variable dependiente:
Actividad biodegradadora por Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027
frente al polietileno de baja densidad

III. Objetivos
III.1. Objetivo general
Evaluar la capacidad de biodegradación del polietileno de baja
densidad por Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027.
III.2. Objetivos específicos
● Cuantificar el porcentaje máximo de biodegradación de polietileno
de baja densidad por Pseudomonas aeruginosa.
● Determinar las condiciones de pH y temperatura óptimas para la
actividad biodegradativa del polietileno de baja densidad.

IV. Metodología

IV.1 Tipo y diseño de investigación

NIVEL DE INVESTIGACIÓN

Aplicada:
La finalidad de nuestro estudio es evaluar el potencial biodegradador por
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 frente al polietileno de baja
densidad.

TIPO DE INVESTIGACIÓN

Explicativa:

9
Busca responder en qué condiciones Pseudomonas aeruginosa ATCC
9027 ejercerá una capacidad biodegradadora frente al polietileno de baja
densidad.

TIPO DE ESTUDIO
a. De Acuerdo al inicio de estudio en relación a la cronología de
hechos:
● Prospectivo:
Se realiza con datos obtenidos durante el momento en el que se desarrolla
la investigación.

b. Según la finalidad de estudio

● Analítico:
Se pretende evaluar la capacidad biodegradadora por Pseudomonas
aeruginosa ATCC 9027 frente al polietileno de baja densidad.

c. Según la secuencia temporal

● Transversal:
Se abordará la evaluación del potencial biodegradador por Pseudomonas
aeruginosa ATCC 9027 durante el tiempo que se desarrolle la
investigación.

d. Según la asignación de factores y variables

● Experimental (In vitro):
● Variable dependiente: Actividad biodegradadora por Pseudomonas
aeruginosa ATCC 9027 frente al polietileno de baja densidad, se
medirá mediante el método de variación de masa (pérdida de peso)
y por microscopia de fluorescencia.
● Variable independiente: Cepa Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027
obtenido de laboratorio Fisher Scientific

IV.2 Unidad de análisis

10
Cada matraz de Erlenmeyer que contiene una porción de polietileno de
baja densidad con cepa Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027

IV.3 Población de estudio

Porción de polietileno de baja densidad con cepa Pseudomonas
aeruginosa ATCC 9027

IV.4 Tamaño de muestra

Matraces de Erlenmeyer que contiene una porción de polietileno de baja
densidad con cepa Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027

IV.5 Métodos

1. Acondicionamiento de Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 y

PEBD

Instalación: Laboratorio de Investigación de Microbiología y

Parasitología de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la
Universidad Nacional Mayor de San Marcos.

Materiales:
Insumos químicos
Etanol 70°
Agua destilada
Caldo nutritivo Merck GranuCult®
Medio mineral

Biológicos
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027

Equipos y/o materiales

Autoclave
Incubadora

11
Matraz

Fundamento
El proceso de adaptación o acondicionamiento permite potenciar la
capacidad de biodegradación de los microorganismos. Es por ello
que, la cepa en investigación Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027
se somete a un medio de cultivo que contenga PEBD, ello con
determinados periodos de tiempo (2).

Procedimiento

En primer lugar, se realizará la preparación de los medios de cultivo,

en este caso el caldo nutritivo (CN) y el medio mineral (MM). En
cuanto a la preparación del caldo nutritivo, este se realizará
siguiendo las instrucciones de su respectiva ficha técnica (17).
Respecto, a los componentes del medio mineral, este va a contener
3.8 g Na2HPO4.12H2O, 1.8 g KH2PO4, 0.02 g MgSO4.7H2O,
0.03 g Fe(NH4)2(SO4)2.6H2O, 0.01 g CaCl2.2H2O, 0.5 g NaCl,
0.3 g NH4Cl, 1 ml de solución de oligoelementos y 500mL de agua
destilada. Posterior a la preparación de los medios de cultivo, se
esterilizarán 6 matraces de una capacidad de 10 mL, los cuales se
rotularán del 1 al 6. En el primer matraz, se añadirá 5ml de (CN +
MM) para luego llevar a incubación a 37°C durante tres días.
Posterior a ello, en un segundo matraz se añadirá 1ml de (CN + MM)
y 0.002g de PEBD para luego completar con 4 ml del primer matraz
y luego se llevará a incubación a 37°C durante tres días. En un
tercer matraz, se añadirá 2ml de (CN + MM) y 0.004g de PEBD para
luego completar con 3 ml del segundo matraz y llevar a incubación a
37°C durante tres días. En un cuarto matraz se añadirá 3ml de (CN
+ MM) y 0.006g de PEBD para luego completar con 2 ml del tercer
matraz, para así llevar a incubación a 37°C durante tres días. En un
quinto matraz se añadirá 4ml de (CN + MM) y 0.008g de PEBD para
luego completar con 1 ml del cuarto matraz y llevar a incubación a

12
 37°C durante tres días. Por último, en un sexto matraz se añadirá
4,5 ml de (CN + MM) y 0.010 de PEBD para luego completar con 0,5
ml del quinto matraz y se llevará a incubación a 37°C durante tres
días. Cabe resaltar que, se espera observar turbidez en cada uno de
los matraces, lo cual nos confirmará el crecimiento del
microorganismo (2).

2. Evaluación del efecto biodegradador por Pseudomonas

aeruginosa ATCC frente al polietileno de baja densidad

2.1. Medición cuantitativa de la biodegradación del PEBD:

Instalación: Laboratorio de Investigación de Microbiología y
Parasitología de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la
Universidad Nacional Mayor de San Marcos.

Materiales:
Insumos químicos:
Etanol 70%
Agua destilada estéril

Biológicos:
Cultivo de Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027

Equipos y/o materiales:

Balanza analítica
Incubadora de 37 °C
Destiladora de agua
Cámara de flujo laminar
Estufa de secado
Papel filtro
Luna de vidrio

Fundamento:

13
Esto se realizará a través de la variación directa de la masa o peso
del polietileno que será expuesto a las condiciones de
biodegradación. El principio de este método recae en la capacidad
de determinados microorganismos de utilizar el polietileno como
fuente de carbono.
Procedimiento:
Se inoculará la cepa adaptada de Pseudomonas aeruginosa en
caldo nutritivo más medio mineral y llevará a incubación a 37ºC por 1
semana hasta obtener una turbidez de 0.5 de la escala de Mac
Farland. Se preparará 12 matraces con caldo nutritivo más medio
mineral, que contiene Pseudomonas aeruginosa, 6 matraces se
ajustan a pH 5 y los restantes a pH 7. Se fraccionará el material de
polietileno en cuadrados de 2cm x 2cm y se tomará el peso inicial de
cada cuadrado en una balanza analítica; seguidamente, el polietileno
se colocará en los matraces que contienen caldo nutritivo con medio
mineral y las bacterias, se llevarán a incubación in vitro a 25°C y
35°C, pH 5 y 7 por 30 días, con agitación periódica. Luego de este
tiempo, se separará el material plástico del caldo nutritivo, se
colocarán en una luna de vidrio y se desinfectarán los cuadrados de
PEBD con etanol al 70% durante 30 minutos en una cámara de flujo
laminar para eliminar la película o biofilm generado en la superficie
con etanol al 70% durante 30 minutos. Posteriormente, se lavará con
agua destilada estéril por 10 minutos, se secará con papel filtro y se
colocarán en la estufa a 40°C por 15 minutos para que las muestras
se encuentren secas y el pesaje sea un valor real. Finalmente las
muestras se pesarán en la balanza analítica y se anotarán los pesos
finales (2). Con la siguiente fórmula se obtendrá el porcentaje de
pérdida de peso (2,7).

(W inicial−W final )
% p é rdida= ×100
W inicial
A mayor porcentaje de pérdida mayor será la actividad
biodegradadora de Pseudomonas aeruginosa.

14
2.2. Medición cualitativa de la biodegradación del PEBD:
Instalación: Laboratorio de Investigación de Microbiología y
Parasitología de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la
Universidad Nacional Mayor de San Marcos.
Materiales:
Insumos químico:
Rodamina B Marca: Alquera
Aceite de inmersión.
Permanganato potásico al 5%
Agua destilada
Equipos y/o materiales:
Estereoscopio
Microscopio óptico
Portaobjetos

Fundamento:
La microscopía estereoscópica permite observar imágenes
tridimensionales, se produce por la visión simultánea de los objetos
desde dos ángulos distintos que corresponden a cada uno de los
ojos, esto debido a la separación entre las pupilas y la coordinación
mental de ambas visiones (18). Es por eso que con los microscopios
estereoscópicos se observa la muestra a través de dos lentes
distintos lo cual permite que la imagen que llega a cada ojo sea
ligeramente distinta y se observe tridimencionalmente (19).
La microscopía de fluorescencia se explica en que algunos
compuestos químicos que absorben luz ultravioleta devuelven parte
de la energía radiante como longitud de onda más larga localizada
en la región visible. Por lo tanto, cuando el objeto fluorescente se
expone a la luz ultravioleta, se percibe un cuerpo coloreado brillante
sobre un fondo oscuro (20).

Procedimiento:

15
 Luego de incubar durante 30 días, separar el material de PEBD del
caldo nutritivo y colocar en la luna de vidrio, se evaluará con el
estereoscopio y se describirán los cambios observados. Asimismo,
se observará el crecimiento bacteriano y la formación de biofilm.
Para ello, se realizará la extensión de la muestra, se añadirá el
colorante Rodamina B durante 15 minutos y se fijará con calor. A
continuación, se lavará la muestra con agua destilada, se agregará
permanganato potásico al 5% en agua destilada y se dejará actuar
por 5 minutos, luego se lavará con agua destilada y se dejará secar.
Por último, se observará con el microscopio de fluorescencia con
los objetivos 40X y 100X (2).

IV.6 Procesamiento y análisis de datos

Se empleará el análisis estadístico inferencial para obtener
generalidades que sean significativas y válidas para toda la
población. La información generada durante la fase experimental
será analizada y procesada en los programas Microsoft Office Excel
y el SPSS. Así mismo, se utilizará el análisis de varianza (ANOVA);
el estudio trabajará con un nivel de confianza de 95% y un nivel de
significancia de 0.05.

V. Presupuesto

N° Rubro S/

1 Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 3152,64

2 Reactivos químicos 1400

3 Materiales (matraces, plástico PEBD) 500

4 Reactivos químicos 110

5 Impresiones y otros 300

Total S/ 5 512,64

VI. Cronograma de actividades

16
 2021 2022
(Mese
N° Actividad(es) s) (Meses)

N D E F M A M J J A S O

1 Búsqueda de información científica x x

Acondicionamiento de
2 Pseudomonas aeruginosa ATCC x x
9027 y PEBD
Aplicación de Pseudomonas
3 aeruginosa ATCC 9027 sobre el x x x
PEBD
Organización de datos y análisis
4 x
estadístico
Presentación del proyecto de
5 x
investigación

17
VII. Referencias bibliográficas
1. Gutierrez K. Influencia de factores ambientales de crecimiento microbiano
en la degradación de polietileno de baja densidad por la bacteria
Pseudomonas aeruginosa en Huancayo [Titulado]. Universidad
Continental; 2018. Disponible en:
https://repositorio.continental.edu.pe/bitstream/20.500.12394/4507/4/
IV_FIN_107_TE_Gutierrez_Taipe_2018.pdf
2. Butron S. Capacidad de biodegradación de Pseudomonas aeruginosa
frente al polietileno de baja densidad [Doctor]. Universidad Nacional del
Altiplano; 2020. Disponible en:
http://repositorio.unap.edu.pe/bitstream/handle/UNAP/13475/Sandra_Beatri
z_Butron_Pinazo.pdf?sequence=1&isAllowed=y
3. Hermoza A. Biodegradación microbiana de polietileno de baja densidad,
bajo condiciones térmicas controladas en biorreactor air lift, en Santa
Clara- Lima 2019 [Tesis de grado]. Lima: Universidad César Vallejo. 201
[Citado 8 enero 2022]. Disponible en:
https://repositorio.ucv.edu.pe/bitstream/handle/20.500.12692/51943/
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biodegradation activities of Pseudomonas aeruginosa strain ISJ14
colonizing low density polyethylene (LDPE) surface [Internet] 2020 [Citado
4 enero 2022]; 6(7). Available from:
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5. Mouafo E, Tamsa A, Nougang M, Metsopkeng C, Noah O, Moungang L.
Biodegradation of polyethylene by the bacterium Pseudomonas aeruginosa
in acidic aquatic microcosm and effect of the environmental temperature.
Environmental Challenges [Internet]. 2021 [citado 1 enero 2022];3.
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6. García J., Pedrón R., Vásquez L., Torres M. Pseudomonas aeruginosa:
Patógeno oportunista con potencial de biodegradación de polietileno de
baja densidad. Ecot Susten Amb Trop Hum [Internet]. 2019 [Citado 4 enero

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 2022];1 :51-8. Disponible en:
http://ri.ujat.mx/bitstream/20.500.12107/3593/1/2.pdf
7. Dwicania E, Rinanti A, Fachrul M. Biodegradation of LLDPE plastic by
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Journal of Physics: Conference Series [Internet]. 2019 [citado 4 enero
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8. Patinge K, Zodpe S. Screening of Low Density Polyethylene Degrading
Microflora From Garbage Soil. Int J Sci Res Sci & Technol [Internet] 2020
[Citado 11 enero 2022]; 7(4) :110-116. Disponible en:
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v2.pdf?Expires=1641935348&Signature=Ceyb9~ilK8-
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ar-ZYENTlR1nT1vC8UaCFiu108kIfQ8mgEz3BwnJL1aFQ__&Key-Pair-
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20. Mundo microscopio. [Internet]. 2022 [Citado 9 enero 2022]. Disponible en:
https://www.mundomicroscopio.com/microscopio-estereoscopico/

21
 VIII. Anexos:
VIII.1 Operacionalización de variables

Variables Definición conceptual Definición Dimensiones Indicadores Medición Items

operacional

Variable Bacteria perteneciente Capacidad de

independiente a la familia biodegradación
Pseudomonas Pseudomonaceae.
aeruginosa Son bacilos gram
ATCC negativos, aerobios,
9027 no esporulados y
móviles.

Variable Proceso metabólico Los resultados se Cuantitativa Cuantificación Porcentaje de

dependiente enzimático realizado calcularán en de masa pérdida
por bacterias que base al método perdida (mg)
Biodegradación poseen enzimas de Diferenciación
de polietileno capaces de degradar de pesos antes y
de baja la estructura después de estar
densidad molecular del expuestos a P.
polietileno de baja aeruginosa. Cualitativa Caracterización Color, brillo, Comparación con
densidad /Estereoscopía porosidad, estándar
fisuras, formación
de biopelículas.

Marcador Sistema de Presente (+)

fluorescente/Mi cruces Ausente (-)
croscopía de
fluorescencia.

VIII.2 Matriz de consistencia

22
 Problema general Objetivo general Hipótesis general

Biodegradación de polietileno de baja Evaluar la capacidad de biodegradación Pseudomonas aeruginosa posee la

densidad por Pseudomonas aeruginosa del polietileno de baja densidad por capacidad de biodegradar el polietileno
ATCC 9027 Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027. de baja densidad

¿Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027

posee la capacidad de biodegradar el
polietileno de baja densidad?

Problemas específicos Objetivos específicos Hipótesis específicas

¿Cuál será el porcentaje máximo de Cuantificar el porcentaje máximo de La Pseudomonas aeruginosa presenta
biodegradación de polietileno de baja biodegradación de polietileno de baja un porcentaje significativo de
densidad por Pseudomonas densidad por Pseudomonas aeruginosa biodegradación de polietileno de baja
aeruginosa? ATCC 9027. densidad

¿En qué condiciones de pH y Determinar las condiciones de pH y La temperatura y el pH influye en la

temperatura la Pseudomonas temperatura óptimas para la actividad actividad biodegradativa del polietileno
aeruginosa ATCC 9027 presentará biodegradativa del polietileno de baja de baja densidad
actividad biodegradativa del polietileno densidad
de baja densidad?

23