Mitosis: Escuela de Biología-Microbiología Prácticas de Biología General

Escuela de Biología-Microbiología Prácticas de Biología General
MITOSIS
OBJETIVOS
1. Observar las fases de la mitosis en raicillas de cebolla.
FUNDAMENTO TEORICO
La Mitosis es la división nuclear asociada con la división de las células somáticas. Cada mitosis
única está asociada con una única división celular que produce dos células hijas genética y
cromosómicamente idénticas. Mitosis (M), es generalmente el período más corto del ciclo, que ocupa
aproximadamente entre el 5 a 10 % del tiempo total de ciclo. Para su estudio se ha dividido la mitosis
en cuatro etapas:
• Profase: Se produce la condensación de la cromatina, haciéndose visibles los cromosomas con una
apariencia doble, cada cromosoma está compuesto de dos mitades longitudinales llamadas
cromátidas hermanas, que se juntan en la región denominada centrómero. El nucleolo desaparece,
la membrana nuclear se desorganiza y el núcleo plasma y el citoplasma se unen.
• Metafase: El huso mitótico se hace prominente. Este consiste en una serie de fibras microtubulares
paralelas. Los cromosomas se mueven al plano ecuatorial de la célula y cada uno queda unido a
las fibras del huso por su centrómero.
• Anafase: Comienza cuando las cromátidas hermanas se separan, cada una moviéndose a polos
opuestos. La separación comienza por el centrómero, que también se divide cuando cada
cromátida se mueve.
• Telofase: La membrana nuclear se vuelve a organizar alrededor de cada núcleo hijo, los
cromosomas se desenrollan y el nucleolo reaparece. El huso desaparece y la membrana celular se
estrangula en la parte media del huso (citocinesis), originando dos células idénticas.
En esta práctica se trabajará con las raíces de bulbos de cebolla, Allium cepa para realizar
preparaciones de material fijado y teñido, en preparaciones semipermanentes, para luego observar
las diferentes etapas de la mitosis.
MATERIAL
• Material biológico: bulbo de cebolla con raicillas.

• Reactivos: ácido acético al 50%, orceina acética al 1%, fijador alcohol ácido.
• Material de vidrio y otros: tubos de ensayo, vasos de precipitado, mondadientes, gradillas,
papel filtro, placas petri, microscopios compuestos, lámina y laminilla, lunas de vidrio, pinzas,
bisturí, mechero de alcohol, agujas.
PROCEDIMIENTO
1. Obtener raicillas de cebolla (Allium cepa) de la siguiente manera: Las raicillas de cebolla se
obtienen colocando una semana antes de la práctica, un bulbo de cebolla sin catáfilas externas
y quitándole todas las raicillas secas en la parte ecuatorial se introducen 3 0 4 mondadientes
distribuidas equidistamente para suspender el bulbo en la boca de un vaso con agua
corriente, permitiendo que el líquido se ponga en contacto con el disco germinativo, para
permitir la emisión de nuevas raíces.
Docente: MSc. Anacelly Valera López

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Con un bisturí realizar un corte transversal de 2 o 3 raicillas entre los 2 o 3 mm del extremo
apical, obteniéndose así una muestra por cada raicilla.
2. Colocar las muestras obtenidas en una placa petri conteniendo el fijador (ácido acético al
50%) por un tiempo mínimo de 5 minutos (5 a 30 minutos).
3. Trasladar la muestra a una luna de reloj y agregarle orceina acética en cantidad suficiente
para cubrir la muestra.
4. Realizar el calentamiento utilizando mechero de alcohol hasta la emisión de vapores, luego
se deja enfriar durante 5 minutos.
5. Repetir el calentamiento dos veces más.
Nota: El tiempo de coloración está en función al tamaño de los cortes y a la maduración del
colorante.
6. Colocar la muestra en el centro de una lámina porta objetos, agregar una gota de colorante. La
orceína tiñe de manera permanente los tejidos y la piel por lo que hay que tener cuidado en
su manejo, y no deben respirarse los vapores que se desprenden durante la tinción y el
calentamiento, para l o cual debe mantenerse la cabeza alejada y el brazo extendido.
Asimismo, debe ponerse varias capas de papel de filtro al aplastar para evitar mancharse el
dedo, ya que además de teñir puede irritar levemente la piel al tener acético y clorhídrico.
7. Colocar una laminilla cubre objetos.
8. Con un lápiz de gráfico (carboncillo) golpee el cubre objeto en forma concéntrica de adentro
hacia fuera.
9. Con un papel de filtro eliminar el exceso de colorante
10. Cubrir la lámina preparada con papel de filtro y presione fuerte con el pulgar él cubre objeto
(scuash).
Precaución: Haga este paso sobre una superficie lisa.
11. Observar con objetivo de mediano y mayor aumento.
12. Identificar las fases de la mitosis y graficarlos.
CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es la acción del ácido acético sobre las células de las raíces?
2. ¿Cuál es la fase mitótica más frecuente?
3. ¿Qué sucede en la profase de la mitosis?
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Docente: MSc. Anacelly Valera López

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• Material biológico: bulbo de cebolla con raicillas.

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