PROTOCOLO 3 Carbohidratos y Lipidos A21 (1473)

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PROTOCOLOS DE LABORATORIO BIOLOGÍA CELULAR

2020
Curso virtual- Contingencia COVID-19
PROTOCOLOS DE LABORATORIO
BIOLOGÍA CELULAR

Fecha de elaboración
Tercera edición Abril 2021
Contingencia COVID-19

AUTORES

PhD. Liliana Francis Turner


MSc. Jessica Paola Alcázar Arzuza
MSc. Lina María De Los Reyes
MSc. Lina Marcela Villa Villamil
MSc. Andrea Julieth Bayona Arciniegas
MSc. Guiselle Negover Briñez Vázquez
Biólogo. Astrid Milena Perdomo González
Biólogo Diana Katherine Garzón Perdomo.
Nombres y apellidos: ______________________________________ Grupo:___________

Integrantes de Grupo

1.-_________________________________________

2.-_________________________________________

3.-_________________________________________

Laboratorios Nota

1.-Bioseguridad

2.-Materiales y técnicas básicas en biología

3.- Determinación de biomoléculas: Glúcidos y Lípidos

4.- Determinación de biomoléculas: proteínas y ADN.

5.- Microscopio: Manejo y cuidado de microscopio

6.- Mediciones con el microscopio

7.-Células Procariotas

8.-Hongos y Protistas

9.- Célula Vegetal y sustancias producidas por el protoplasto

10.-Célula animal y hemoclasificación

11.- Transporte a través de la membrana celular

12.-Mitosis y Meiosis
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MEDIDAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO Y EN CAMPO

1. Antes de realizar cada práctica lee cuidadosamente el protocolo para familiarizarte


con el trabajo a desarrollar. Al conocer el protocolo disminuyes la posibilidad de que
ocurran accidentes y además puedes aprovechar el tiempo de manera más eficaz.

2. En el laboratorio está prohibido comer, beber y fumar.

3. En el laboratorio y en campo debes llevar en todo momento el equipo de protección


personal necesario. Esto garantiza que cualquier accidente que pueda ocurrir, sea
de menor gravedad. De no acatar la regla no se permitirá acceso a la práctica.

4. Al lugar de trabajo sólo debes llevar aquellos materiales estrictamente necesarios


para la actividad que vas a desarrollar.

5. En el laboratorio comienza cada jornada limpiando tu área de trabajo. Repite este


procedimiento después de que hayas terminado, asegurándote que el material de
desecho sea depositado en el lugar que corresponde y lo reutilizable sea lavado y
desinfectado.

6. El material necesario para el desarrollo de la práctica será entregado solo mediante


un vale.

7. La indisciplina dentro del laboratorio o en campo será sancionada con la anulación


de la práctica o expulsión parcial o total del alumno, según el caso lo requiera.

8. Sé muy cuidadoso con todo el material, y equipo que utilices para evitar accidentes
y deterioro del mismo en laboratorio y en campo.

9. Si trabajas con sustancias, nunca las inhales o uses la pipeta con la boca.

10. Si utilizas jeringas no las vuelvas a tapar, deséchalas tal cual en el recipiente
adecuado.

11. En caso de romper material de laboratorio o descomponer algún equipo por el mal
uso de éste, el responsable cubrirá el costo que se genere en un lapso no mayor a
30 días hábiles.

12. Para las salidas a campo el alumno deberá firmar un oficio donde se responsabiliza
de su persona, en caso de no obedecer las normas establecidas durante la práctica
cualquier accidente será su responsabilidad.

13. Tras la sesión de trabajo, lávate las manos antes de hacer cualquier otra actividad
para mantener unas buenas condiciones higiénicas.

14. En caso de accidente o lesión, avisa inmediatamente al profesor o responsable de


la práctica en laboratorio para que pueda realizarse una acción rápida y apropiada.

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PROTOCOLO DE LABORATORIO 3

Información importante a tener en cuenta en los laboratorios.

PROCEDIMIENTOS DE SEGURIDAD

a) Responsabilidades
Antes de la práctica: Antes de la práctica: Leer el Protocolo de
bioseguridad de medidas preventivas para evitar el contagio del
covid- 19 plan retorno de trabajo seguro laboratorio biologia
celular
http://administrativos.ut.edu.co/images/Sistema_gestion_calidad/Gestion
_desarrollo_humano/P__bioseguridad_covid/DH-PT43.pdf

Revisar los materiales, equipos y reactivos que tendrán que utilizarse en


la práctica de laboratorio.

Durante la práctica: portar la bata y equipo de protección (tapabocas, guantes,


gafas, cuando sea necesario) y traer el protocolo de laboratorio. Realizar las
actividades correspondientes a la práctica.

Manipular correctamente el microscopio. Realizar las actividades incluidas en la


práctica respetando los tiempos determinados para esto.

Después de la práctica: Diligenciar el protocolo, establecer los resultados y las


conclusiones.

b) Cuadro de disposición de desechos.


Desechos o residuos: Disposición
Vidrios y elementos cortopunzantes Guardián
Materiales no biológico-infecciosos Deposito para basura común (bolsa verde)
Líquidos no biológico-infeccioso Drenaje común
Muestras biológico-infeccioso Deposito para biológico-peligroso (bolsa roja)

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Nota: Este libro de protocolos de laboratorio de Bilogía celular se ha preparado especialmente para la
contingencia de la etapa especial por el COVID-19, donde las actividades se desarrollarán de forma virtual e
interactiva.

Laboratorio No. 3
Carbohidratos y Lípidos

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PROTOCOLO DE LABORATORIO 3

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PROTOCOLO DE LABORATORIO 3

I. Introducción

El bigbang permitió que a la tierra llegaran elementos químicos que se conocen en la tabla periódica y
otros que aun no. Sin embargo, el carbono, nitrógeno, hidrógeno y oxígeno lograron establecer
diferentes asociaciones que les permitieron integrar las moléculas que conforman las células de
organismos vivos. El agua es una de estas asociaciones, constituye el 70% o más de la masa celular.
La interacción del agua con otros componentes celulares tiene una importancia biológica. La molécula
del agua es polar, con átomos de oxigeno que confieren una carga negativa, e hidrógenos que
confieren la carga ligeramente positiva. Es por ello que existen moléculas hidrofílicas, porque pueden
formar enlaces con el agua gracias a que poseen la misma polaridad. Caso contrario a las moléculas
hidrofóbicas (Cooper y Haussman, 2014; Freeman, 2009).

El carbono es importante en la biología por su versatilidad, pues gracias a sus electrones de 4


valencias puede formar enlaces covalentes. Cuando las moléculas contienen más de un átomo de
carbono, estos átomos se pueden unir entre sí en largas cadenas por lo cual se denominan moléculas
orgánicas. Los carbohidratos, lípidos y proteínas, son moléculas cuya estructura principal es el
carbono (Freeman, 2009).

Azúcares, almidón y celulosa son carbohidratos o hidratos de carbono. Moléculas que se caracterizan
por ser la primera fuente de energía de un organismo. Incluyen azúcares simples como la glucosa, y
polisacáridos como el glucógeno (Freeman, 2009). Según la Unión Internacional de Química Pura y
Aplicada - IUPAC los monosacáridos son un grupo de carbohidratos simples compuestos por una
única unidad sin enlaces glucosídicos. Químicamente contienen polialhidroxialdehidos o cetonas con 3
o más átomos de carbono. En otras palabras, los monosacáridos pertenecen a subgrupos definidos
por el número de átomos de carbonos (por ejemplo, tetrosas, pentosas, etc), adicionando un tipo de
grupo carbonilo (aldosa, cetosa) (Wiercigroch et al, 2017).

Los polisacáridos consisten en la unión a través de enlaces glucosídicos de 10 o más monosacáridos.


La forma de la cadena principal está dada por enlaces de carbonos 1à 4 o 1 à 6 entre
monosacáridos. Los polisacáridos compuestos de in tipo de monosacárido se denominan
homopolisacáridos (por ejemplo, el glucógeno), sin embargo, los heteropolisacáridos contienen
diferentes monosacáridos o sus derivados (por ejemplo, heparina, gamma globulina y ácido
hialurónico) (Wiercigroch et al, 2017).

Los lípidos se caracterizan por ser solubles en solventes no polares (como éter y cloroformo) y
relativamente insolubles en agua. Las moléculas lipídicas tienen estas propiedades porque se
componen principalmente de carbono e hidrógeno, con pocos grupos funcionales que contienen
oxígeno. Los átomos de oxígeno son característicos de los grupos funcionales hidrofílicos; por tanto,
los lípidos, que tienen poco oxígeno, tienden a ser hidrófobos (Cooper y Haussman, 2014. Solomon et
al, 2013).

Los lípidos biológicamente importantes están las grasas, los fosfolípidos, los carotenoides (pigmentos
vegetales amarillo y naranja), esteroides y ceras. Hay lípidos que se utilizan como reserva de energía,
algunos son componentes estructurales de las membranas celulares y otros son hormonas
importantes (Solomon et al, 2013).

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PROTOCOLO DE LABORATORIO 3

II. Competencias de la práctica

Identifica características de la estructura química de los glúcidos y los lípidos.

Desarrolla habilidades y destrezas en el montaje de experimentos empleando recursos no


convencionales.

Relaciona los resultados obtenidos con su función e importancia en el metabolismo celular de los
organismos.

III. Metodología

Materiales
Yodopovidona o Isodine, agua, vasos trasparentes de vidrio, aceite, removedor de esmalte, alcohol,
color (condimento de cocina), tempera (del color que desee), 4 cucharas; un trozo o pequeña porción
de los siguientes alimentos: manzana, pan o galleta, zanahoria, cebolla, tomate maduro, frijol seco,
plátano maduro, papa criolla o papa negra, maíz, avena en hojuelas, yuca, pasta para sopa o
espagueti, arroz, arepa, frutas.

1. Identificación de azúcares reductores

Para la identificación de azúcares reductores es necesaria la observación del siguiente video y


a partir de él, responder las preguntas del formulario:

https://www.youtube.com/watch?v=qoSppTUuwEw

1.1. Consulta 3 alimentos que contienen los siguientes carbohidratos:

Glucosa Lactosa Fructosa Maltosa Sacarosa

1. 2. Hidrólisis de la sacarosa

-Primero observe el siguiente video: https://www.youtube.com/watch?v=NIoiEh2kmmI

De acuerdo al video anterior dibuje lo observado en cada tubo de acuerdo al título de la casilla
que corresponda.

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PROTOCOLO DE LABORATORIO 3

Prueba de Fehling a la
Prueba de Fehling a la Sacarosa
Sacarosa previamente a la
después del tratamiento con HCl
aplicación de HCl

1.3. Investigación de polisacáridos

-Observe el siguiente video https://www.youtube.com/watch?v=vm1XUwSgKns&t=71s

- Prepare una solución yodada: Mezcle 40 gotas de agua con 10 gotas de yodopovidona o
Isodine.

- En la siguiente tabla encuentra algunos alimentos. Saque una rodaja o un pedazo del
alimento y aplique la solución yodada. En la tabla marque con una X según sea el resultado:

1. Transparent 2. Morado o azúl


Caso 3. Naranja
e oscuro
Arepa
Agua
Papa negra
Arroz
Zanahoria
Cebolla,
Tomate maduro
Frijol seco
Plátano maduro
Maíz
Avena en hojuelas
Yuca
Pasta para sopa o
espagueti
Pan
Galleta
Manzana
Otra fruta

Analice los resultados obtenidos y concluya teniendo en cuenta lo visto en el video anterior.

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2. Reconocimiento de lípidos

2.1. Saponificación

Observe el siguiente video y responda en el formulario.

https://www.youtube.com/watch?v=BJif9kjR-2w

2.2. Solubilidad

Realice el siguiente procedimiento:

 Tomar dos vasos trasparentes, rotularlos con el número 1 y 2.


 A cada uno adicionar 5 ml (50 gotas) de aceite de cocina (si tiene aceite reutilizado
mejor).
 Al vaso 1, adicionar 5 ml de agua y al vaso 2, 5ml de removedor de esmalte.
 Homogenice con una cuchara por separado.
 Dejarlos sobre el mesón y esperar 2 minutos. Observar, dibujar y responder.
 Presentar la actividad durante el desarrollo del laboratorio.

2.3. Tinción

Observe el siguiente video: https://www.youtube.com/watch?v=ks928R8knnk&t=5s

Adicionalmente, realizar lo siguiente:

 El día anterior preparar la solución coloreada (Sudan III) mezclando cuatro (4)
cucharadas de alcohol y medio sobrecito de “color” para cocina. Posteriormente filtre
con ayuda de un tapabocas. Rotular como SUDAN III.
 El día de la práctica, tomar dos vasos trasparentes, rotularlos con el número 1 y 2. A
cada vaso adicionar 10 ml (100 gotas) de aceite de cocina.
 Al vaso 1, agregar 30 gotas de la solución de SUDAN III (casero) y al vaso 2 adicionar
la misma cantidad de tempera (con color diferente al aceite). Homogenizar con
cuchara.
 Presentar la actividad durante el desarrollo del laboratorio.

IV. Autoevaluación.

El link será suministrado por el docente.

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V. Bibliografía y Webgrafía.

Cooper G., y Haussman R. (2014). La célula. Boston University. Marbán ediciones.

McMurry J. (2016). Biomolecules carbohydrates, in: Org. Chem., 9 ed., Cengage Learning,
USA: pp. 832-869.

Ewelina Wiercigroch., Ewelina Szafraniec., Krzysztof Czamara., Marta Z. Pacia., Katarzyna


Majzner., Kamila Kochan., Agnieszka Kaczor., Malgorzata Baranska., Kamilla Malek. (2017).
Raman and infrared spectroscopy of carbohydrates: A review. Spectrochimica Acta Part A:
Molecular and Biomolecular Spectroscopy Volume 185: pp. 317-335.
https://doi.org/10.1016/j.saa.2017.05.045

Freeman Scoot. (2009). Biología. Pearson 3 edición.

Solomon E., Berg L., Martin D. (2013). Biología. CENGAGE learning. 9 edición.

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