Informe #5 Sebastián Hidalgo y Mathias Villagómez

Universidad San Francisco de Quito
Integrantes: Sebastián Hidalgo, Mathias Villagómez
Docente: Juan Fernando Santos
Fecha: 13/11/2022 NRC: 3805
Informe de Laboratorio No 5.
Abstract
Los carotenoides son compuestos que están distribuidos de una manera amplia en los reinos
animal y vegetal. Se encuentran conformados por cadenas hidrocarbonadas con varios enlaces
dobles que se encuentran alternados y debido a esto tienen la capacidad de absorber longitudes
de onda en el espectro visible.. En la práctica, se coloca en un vaso de precipitación de 50 ml, 5g
de perejil triturado. Se agrega 10 ml de diclorometano y se mezcla con la espátula, rápidamente
se procede a filtra por succión al vacío y se recoge el filtrado en el balón de destilación, se repite
el proceso 3 veces. El extracto obtenido se mueve junto con hexano a un envase pequeño con
tapa y se evapora hasta observar que el pigmento extraído se encuentre concentrado. Se realiza
una cromatografía de capa fina (TLC) a la muestra del pigmento extraído con los solventes
Agua- Hexano y Hexano-Acetona Para el TLC se toma una placa de 3 x 6 cm de sílica gel, se
traza una línea a los 5 mm a uno de los extremos, se procede a colocar la muestra de los
pigmentos con los tubos capilares en las placas. En dos vasos de precipitación de 100 mL se
coloca aproximadamente 25 ml de Agua-Hexano y Hexano-Acetona en cada vaso. El vaso debe
estar cubierto con un vidrio reloj y se espera que el solvente eluya.
1. Resultados
Tabla 1 Datos para determinación de compuestos a partir del Rf y solvente apropiado
Solvente Rf1 Rf2 Rf3 Rfprom Rfdesvest Compuesto
XA 0.54 0.55 0.53 0.54 8.16𝑥10−3 Neoxantína
XB 0.70 0.76 0.67 0.71 0.037 Violaxantína

Solvente 1
XC 0.92 0.87 0.86 0.88 0.026 Clorofila a
Xn 1.00 0.99 0.99 0.99 5.77𝑥10−3 Caroteno

No es posible
XA 0.00 0.08 0.14 0.07 0.057
determinar
No es posible
Solvente 2 XB 0.00 0.20 0.20 0.13 0.094
determinar
XC / / / / / /
Xn / / / / / /
Fuente: Química Orgánica Laboratorio. USFQ. 2022.
Promedio:
∑ 𝑥𝑖
𝜇=
𝑛
Donde:
𝜇: 𝑃𝑟𝑜𝑚𝑒𝑑𝑖𝑜
𝑥: 𝐷𝑎𝑡𝑜𝑠
∑: 𝑆𝑢𝑚𝑎𝑡𝑜𝑟𝑖𝑎
𝑛: 𝐿𝑎 𝑐𝑎𝑛𝑡𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 𝑑𝑎𝑡𝑜𝑠
Desviación estándar:
∑|𝑥𝑖 − 𝜇 |2
𝜎=√
𝑛
Donde:
𝜎: 𝐷𝑒𝑠𝑣𝑖𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑒𝑠𝑡á𝑛𝑑𝑎𝑟
𝜇: 𝑃𝑟𝑜𝑚𝑒𝑑𝑖𝑜
𝑥: 𝐷𝑎𝑡𝑜𝑠
∑: 𝑆𝑢𝑚𝑎𝑡𝑜𝑟𝑖𝑎
𝑛: 𝐿𝑎 𝑐𝑎𝑛𝑡𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 𝑑𝑎𝑡𝑜𝑠
2. Discusiones
Según Nieves, la cromatografía en capa fina (TLC) es un método de afinidad utilizado
para separar compuestos presentes en una mezcla. La cromatografía en capa fina es muy útil y se
utiliza de manera amplia en el análisis cualitativo y cuantitativo de muestras. La TLC se utiliza
para analizar sustancias como pigmentos vegetales, plaguicidas, esteroides, carbohidratos, ácidos
grasos, entre otros. (Díaz, N. et al. 2010)
De acuerdo a Ortega, en la cromatografía de capa fina, la fase estacionaria es una delgada
capa de material absorbente y usualmente se usa el gel de sílice, ya que éste cubre un área de
placa inerte como puede ser vidrio o plástico. En la placa se coloca una pequeña cantidad de la
muestra en la parte extrema de la placa de TLC, se procede a colocarla de manera vertical en un

vaso de precipitación junto con un disolvente orgánico y éste debe cerrarse con una tapa, al
disolvente orgánico se lo conoce como fase móvil. (Ortega, G. et al. 2007).
Según Mennickent, el disolvente orgánico o fase móvil se corre hacia la parte superior de
la placa debido a la capilaridad, de esta manera los compuestos de la muestra recorren distancias
variables de acuerdo a sus afinidades diferenciales por la fase estacionaria y móvil. Cuando el
disolvente sube hasta la parte superior de la placa, se retira la placa del disolvente orgánico y se
espera a que seque. Los compuestos separados aparecen como líneas en la placa, y se valora el
factor de retención (RF) de cada compuesto. (Mennickent, S. et al 2000).
3. Conclusiones
Durante la hora práctica se hizo uso de las TLC (Cromatografía de capa fina), de donde al
comienzo del experimento se extrajo los pigmentos al pasar la muestra (perejil en este caso)
por el embudo hacia el Kitasato, para hacer esto se necesita pasar la muestra al Kitasato por
el embudo y con el uso de papel filtro, y de esta forma se repite el proceso 3 veces. Al extraer
los pigmentos se procede a realizar la TLC, en este experimento se observa como los
compuestos van cambiando su posición dependiendo el solvente usado, usando al perejil
como muestra en este experimento se puede observar en el experimento que con el solvente 1
se puede observar mejor la posición en la que se encuentre el compuesto desde su posición
inicial al menos en el caso del perejil. De misma forma en el caso del solvente 2, no se
mostró casi ningún cambio de la posición de los compuestos desde su posición inicial.
4. Referencias
Díaz, N. A., Ruiz, J. A. B., Reyes, E. F., Cejudo, A. G., Novo, J. J., Peinado, J. P., ... &
Fiñana, I. T. (2010). Espectrofometría: Espectros de absorción y cuantificación
colorimétrica de biomoléculas. Universidad de Córdoba, 1-8.
Ortega, G., Carabeo, V., Delgado, G., & Michelena, G. (2007). Determinación cualitativa de
giberelinas y auxinas por cromatografía de capa fina. ICIDCA. Sobre los Derivados
de la Caña de Azúcar, 41(1), 12-17.
Mennickent, S., Vega, M., Godoy, C. G., & Yates, T. (2000). DESARROLLO DE UN
METODO POR CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA INSTRUMENTAL PARA
ANALISIS CUANTITATIVO DE ACIDO ACETILSALICILICO. Boletín de la
Sociedad Chilena de Química, 45(4), 615-620.

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Docente: Juan Fernando Santos

Fecha: 13/11/2022 NRC: 3805

de onda en el espectro visible.. En la práctica, se coloca en un vaso de precipitación de 50 ml, 5g

de perejil triturado. Se agrega 10 ml de diclorometano y se mezcla con la espátula, rápidamente

estar cubierto con un vidrio reloj y se espera que el solvente eluya.

Tabla 1 Datos para determinación de compuestos a partir del Rf y solvente apropiado

Solvente Rf1 Rf2 Rf3 Rfprom Rfdesvest Compuesto

XA 0.54 0.55 0.53 0.54 8.16𝑥10−3 Neoxantína

XB 0.70 0.76 0.67 0.71 0.037 Violaxantína

Xn 1.00 0.99 0.99 0.99 5.77𝑥10−3 Caroteno

Según Nieves, la cromatografía en capa fina (TLC) es un método de afinidad utilizado

utiliza de manera amplia en el análisis cualitativo y cuantitativo de muestras. La TLC se utiliza

grasos, entre otros. (Díaz, N. et al. 2010)

De acuerdo a Ortega, en la cromatografía de capa fina, la fase estacionaria es una delgada

muestra en la parte extrema de la placa de TLC, se procede a colocarla de manera vertical en un

disolvente orgánico se lo conoce como fase móvil. (Ortega, G. et al. 2007).

factor de retención (RF) de cada compuesto. (Mennickent, S. et al 2000).

compuestos van cambiando su posición dependiendo el solvente usado, usando al perejil

se puede observar mejor la posición en la que se encuentre el compuesto desde su posición

Fiñana, I. T. (2010). Espectrofometría: Espectros de absorción y cuantificación

colorimétrica de biomoléculas. Universidad de Córdoba, 1-8.

de la Caña de Azúcar, 41(1), 12-17.

METODO POR CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA INSTRUMENTAL PARA

ANALISIS CUANTITATIVO DE ACIDO ACETILSALICILICO. Boletín de la

Sociedad Chilena de Química, 45(4), 615-620.

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