11-08. Lab Hemato II. Práctica 2.

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LABORATORIO DE HEMATOLOGÍA II

Fecha: 11/08/2022.

PRÁCTICA N° 2

2º CASO ENVIADO EL 10/08

Serie roja
Se observa Poiquilocitosis (variación de la forma): 2 1
1. Esferocitos: Bien oscuro, sin palidez central.
2. Acantocitos: Con espículas 3
3. Equinocitos: Espículas cortas de forma regular.
Serie plaquetaria
a. Plaquetas grises: Tiene partes grises y partes coloreadas. a
Son elementos diplásicos.
OBS: Plaquetas gigantes, macroplaquetas y plaquetas grises NO
son lo mismo. Todas estas son alteraciones de la serie
megacariocítica (= plaquetaria) que se puede informar.
 Macroplaquetas (4-7 µm): De forma redonda u ovalada, con
proyecciones citoplasmáticas finas. Citoplasma levemente basófilo-gris
con granulaciones rojo-púrpura distribuidas uniformemente.
 Plaquetas gigantes (10-20 µm): De forma redonda, ovalada o estrellada. Citoplasma levemente basófilo-gris con
granulaciones rojo-púrpura en el centro de la plaqueta. (info de internet)
Serie blanca

Se observa blasto: Es puro núcleo.


CONTADORES HEMATOLÓGICOS (a partir de diap 7)
Contador de 3 partes
 Fundamento: Medición y recuentos de pulsos de impedancia (principio Coulter)
 Utiliza el método de impedancia que nos dará una distribución a lo que se llama “Histograma”.
Histograma

 Hemograma

LEUCOGRAMA

ERITROGRAMA
PLAQUETOGRAMA

 Eritrograma
Mide:
 N° de eritrocitos
 VCM: El pulso electrónico es
directamente proporcional al VCM.
 Hb: Mide su concentración por
espectrofotometría.
Calcula:
 CHCM = HCM / VCM
 HCM = Hb / E (n° de eritrocitos).
 HTO = VCM.E / 10
 RDW: El ensanchamiento de la curva indica la variación de tamaño que existe en la población de los
glóbulos rojos. Es la abertura de la curva.

 Leucograma
Método de impedancia
 35 – 95 fL: Linfocitos – Basófilos
Todo lo que es chiquito lo llamará linfocito,
o basófilo.
 90 – 160 fL: Monocitos, eosinófilos,
leucocitos inmaduros, linfocitos
reactivos.
Todos los que tengan tamaño intermedio
entran en este rango.
El equipo a este grupo llamará “MID” =
Distribución de células medianas.
 160 – 400 fL: Neutrófilos.
Todo lo que es muy grande lo llamará
neutrófilo.
La bibliografía dice que los monocitos son las células más grandes, pero en el leucograma los neutrófilos
salen como los más grandes por el efecto del diluyente, porque el diluyente deshidrata a la célula y deja
expuesto su núcleo. Los núcleos son los que pasan a través del orificio. De aquí esta distribución.
Contador de 5 partes

 Eritrograma
 Impedancia: La mayoría lo utiliza porque es bastante “fiel”, exacto
 Espectrofotometría.
 Plaquetograma
 Impedancia
 Leucograma
 Dispersión luminosa (“Dispersograma”): Metodología
de citometría de flujo, que utiliza marcadores celulares
para marcar la célula y nombrarles.
 Citoquímica.

Ahora, hay nuevos contadores que el eritrograma y todos los


parámetros miden por dispersión óptica.

 Criterios para indicación de microscopia


 Edad < 5años
Frecuencia de desvío a la izquierda (infecciones virales, diarreas, etc.)
 Edad > 75a
Enfermedad crónica subclínica, anoxemia (policromasia), rouleaux, otros.
 Procedencia/De dónde viene la muestra
UTI (Unidad de Terapia Intensiva), ONCOLOGIA
 Delta check: Cuando se trabaja con un sistema informático, se puede realizar el seguimiento del paciente.
Por ejemplo: un px al principio vino con Hb= 14, luego de un tiempo Hb= 10, hay que confirmar si no fue
error en toma de muestra, o que está pasando.
 Pédidos médicos específicos: Si el médico exclusivamente quiere Hemograma con frotis.
 Flags o alarmas: Son los avisos que emiten los contadores de gran porte.

¿Por qué es tan importante saber el método que utiliza el equipo que usamos para medir?
Es importante porque tenemos que saber que NO observa y qué errores puede cometer a la hora de discriminar.
Si utilizas contadores de 3 partes, luego hay que confirmar necesariamente con el frotis porque estos contadores
NO lanzan alarmas. En los lugares donde se usa estos contadores, generalmente, si el MID sale <10, se divide
para colocar los porcentajes, sin tener en cuenta que aquí se pueden encontrar linfocitos reactivos, desvio a la
izquierda. Así, ¿Cuántos pacientes no se van a detectar que tengan leucemia por ejemplo? Por esto es muy
importante tener un buen contador.
Los contadores de 5 partes hace una fórmula completa, generalmente se utiliza para grandes cantidades de
muestras, porque no a todos se les podrá realizar frotis.

VIDEO. Citometría de flujo del contador alinity hq


 Una tecnología poderosa para el recuento de GB, el diferencial y la generación de alertas, todo en simultáneo.
 Combina óptica, fluidos y algoritmos sofisticados para imitar el ojo humano cuando evalúa células individuales
al microscopio.
 Esto es muy importante porque el algoritmo va a indicar a través de todos los datos que da el equipo pueda
sacar una conclusión “esto es un monocito” “es un linfocito” “hay presencia de linfocitos atípicos” “hay
presencia de blastos”. Así no es el contador de 3 partes, ya clasifica directo “vos sos chiquitito entonces
sos linfocito”.

Recuento y diferencial, cómo mide los glóbulos blancos

 Los GB se analizan individualmente a partir de una sola dilución, minimizando el número y el volumen de
reactivos necesarios.
 La caracterización celular para el tamaño, complejidad intracelular, lobularidad nuclear y granularidad, se
realizan manteniendo la célula muy cerca en su estado nativo. Es decir, en ese caso, el reactivo no le
deshidrata, trata de mantenerlo así como está.
Luz dispersada y analizada por múltiples detectores

 Separación de la luz polarizada en múltiples átomos = la dispersión de luz.


 Los citómetros presentan avisos o alarmas, a todos los que presentan alarma se les hace frotis.
 Los rayos incidentes, el rayo láser (una luz) que se desvía perpendicularmente,
 el DSS (Detector Side Scatter= dispersión lateral despolarizada) mide la granularidad. Discrimina los
eosinófilos de los neutrófilos utilizando las características únicas de sus gránulos.
 el PSS (Polarized Side Scatter= dispersión lateral polarizada) mide la lobularidad. Brinda detalles de la
lobularidad del núcleo permitiendo separar células polimorfonucleares de la mononucleares.
 IAS (Dispersión de Ángulo Intermedio) mide la complejidad. Indica la complejidad de las estructuras
intracelulares para establecer límites entre las poblaciones de monocitos, linfocitos y basófilos.
 ALL (Axial Light Loss= pérdida de luz axial) mide el tamaño (detector posterior que mide la penumbra).
Provee el recuento total y tamaño de cada célula.
 Hace un gráfico de puntos:
 Detector PSS vs IAS: Los que están en amarillo tienen alta lobularidad y complejidad elevada (está muy
a la derecha y más hacia arriba). Los que están en azul tienen baja lobularidad y complejidad baja.

 Detector PSS vs DSS: La lobularidad de los neutrófilos es baja (es muy variado), pero con respecto a la
granularidad, los eosinófilos tienen gránulos más complejos.
 ALL vs IAS

 Un gran número de eventos celulares y datos generados desde múltiples ángulos de luz, a través de un solo
canal, ofrecen un diferencial de leucocitos automatizado y rápido.
 Todo eso se junta:
Amarillo Neutrófilos; Azul Linfocitos; Lila Monocitos; Verde  Eosinófilos; Blanco Basófilos

Recuento de células NRBC mediante fluorescencia

NRBC (Nucleated Red Blood Cells= células nucleadas de la serie roja):


Recuento por fluorescencia.

 Son identificados por el detector de fluorescencia y con la adición


de un tinte de ADN de fluorescencia.
 Son puro núcleo prácticamente, ∴ tienen fluorescencia muy alta.
 Detector de fluorescencia vs tamaño: Fluorescencia alta.

 Los reactivos producen la esferización involumétrica de los GR para eliminar la dependencia de su forma y
orientación mientras se realizan las mediciones de su tamaño y el recuento.
 El GR es una célula biconcava. Cuando pasan por el orificio que tenía la corriente eléctrica en los equipos
de impedancia, pasan parados o acostados. Parado va a tener una oposición al flujo de corriente diferente
al que tendría si pasara acostado. ∴ para evitar ese error se le pone un reactivo que lo vuelve esférico.
 Recuento de plaquetas ópticas bidimensionales en función de su tamaño y la detección de su complejidad
interna.
 Tanto plaquetas como GR este equipo mide por dispersión óptica.

 La luz dispersada de las plaquetas se analiza mediante la detección dual para minimizar el efecto de las
interferencias.
 La luz dispersada de los GR transformados en esferas uniformes es analizada por múltiples detectores.
 Cuando mide las plaquetas a través de otro canal tenemos Lobularidad vs complejidad

Proporciona un recuento óptico de plaquetas en


cada análisis, sin reactivos adicionales o pruebas
reflejadas a otros modos de análisis.

Los GR están más arriba y hacia la derecha por


ser más complejas y grandes. En cambio, las
plaquetas están más abajo y hacia la izquierda por
ser menos complejas y pequeñas.

Recuento de reticulocitos mediante fluorescencia

 Reticulocitos también se mide por fluorescencia.


 Los reticulocitos tiene alta carga de ARN, el reactivo va a reaccionar exclusivamente con ello para poder emitir
la fluorescencia.

La fluorescencia del ADN residual separa


limpiamente los reticulocitos de los GR
maduros.

Acá tenemos los GR ya maduros, que no


tienen mucha fluorescencia. Después
vienen los reticulocitos y los GB están
mucho más arriba (WBCs).

 Advanced MAPSS: Tiene 8 detectores: DSS, PSS, IAS, ALL, IAS 1-2-3, fluorescencia (Fl); proporcionando
diferencial de 6 partes.
 Gráficos. Gráfico tridimensional.
 Son nuevos parámetros que se van añadiendo:
 Los 3 detectores IAS adicionales permiten:
 La separación multidimensional entre
plaquetas y eritrocitos.
 Alertas por fragmentos de eritrocitos.
 Una estimación del contenido de la Hb
intracelular que provee alertas por
interferencia a la Hb.
 Obtener el promedio de Hb celular de los
reticulocitos (MCHr) durante el análisis de
reticulocitos.
 Obtener el % de plaquetas reticuladas (%rP).
Tabla 1.3 (Failace). Lo que las máquinas no ven
En el equipo de 5 partes puede emitir alarma, pero no dirá si es policromasia (a no ser que tengas reactivo de
reticulocito, pero el reactivo es mucho más caro por eso no se realiza a todos los pacientes)
 En el eritrograma
 Policromasia
 Poiquilocitosis (en general)
 Poiquilocitos específicos
 Inclusiones (Jolly, punteado basófilo, otras)
 Eritroblastos <5% (salvo algunos modelos avanzados)
 Rouleaux.
 En el leucograma
 Desvío a la izquierda: Hay flag Imm Grans/Bands (suena la alarma) en un 80% de los casos con neutrofilia,
pero en menos de un 40% de los casos SIN neutrofilia la anomalía de Pelger-Huet nunca es advertida.
Existen casos de desvío a la izquierda sin necesidad que los GB estén aumentados.
 Granulaciones tóxicas y cuerpos de Dohle.
 Plasmocitos, pero puede lanzar alguna alarma en GB
 Linfocitos atípicos: Hay flag variant lymphs en un 80% de los casos con linfocitosis, pero, en menos de un
30% SIN linfocitosis; identifican muchos como monocitos.
 Linfocitos linfomatosos o leucémicos en pequeño número: Hay flag blast cuando hay más de 5-10%.
 Linfocitos con granulación o vacuolización anormales
 Hairy cells generalmente aparecen como monocitos.
 En el plaquetograma
 Agregación, cuando es discreta (agregación acentuada siempre causa Flag Plt aggregation).
 Satelitismo plaquetario (hay trombocitopenia sin aviso).
Datos perdidos con importancia diagnóstica
 Policromasia SIN anemia.
 Ej: Hb= 15 y se observa policromasia (los reticulocitos), se debe INFORMAR porque indica que hay
respuesta reticulocitaria, estimulada por hipoxia (caída de tensión de oxígeno) que estimula la producción
de Epo.
 Se puede dar en pacientes con EPOC, con enfermedades cardiacas.
 Esferocitosis: Los contadores más nuevos pueden lanzar alguna alarma.
 Acantocitosis y C de Howell-Jolly: Generalmente se ve en la hipofunción esplénica o esplecnectomia.
 Dianocitos y estomatocitos: Dianocitos se puede observar en anemias hereditarias como las hemolíticas,
talasemias por ejemplo, y/o enfermedades hepáticas.
 Desvío a la izquierda, granulaciones tóxicas (GTOX), cuerpo de Dohle: En contadores grandes informar gran
porcentaje de “granulocitos inmaduros”.
Ejemplo de hemograma

Alarmas

Clasifica la anemia y evalúa los índices hematimétricos.

 Informe de alarma de GB: Blastos o Monocitos (+).


 Informe de alarma de GR: Deficiencia de hierro, microcitosis y anemia.
 RBC= 4.630.000
 Hb= 8.8
 Hto= 28.7
 VCM= 62 fL (microcitosis).
 Explica el histograma de los rojos

 Anisocitosis elevada.
 Se observa población de 2 tipos (por los 2 picos), 1 pico es normocitico y el otro pico es macrocitico.

A B
RBC= 2,65 RBC= 1,46
Hb= 11,6 Hb= 5,7
Hto= 33,0 Hto= 18,7
VCM= 124,5 VCM= 128,0
HCM= 43,8 HCM= 38,7
CHCM= 35,2 CHCM= 30,2
RDW= 24,0 RDW= 37,5

Figura 7.1: Eritrogramas de anemia megaloblástica incipiente (A) y avanzada (B).

En la Megaloblástica lo que ocurre es una eritropoyesis ineficaz, debido a la deficiencia de vitamina B12, siendo
que ésta es necesaria para la síntesis de ADN. Hay un proceso de replicación dónde los eritroblastos se dividen y
luego se diferencian, al fallar ese proceso el GR tiende a morir joven = hay hemolisis = hay eritropoyesis ineficaz.

A B
RBC= 1,63 RBC= 3,16
Hb= 8,63 Hb= 12,0
Hto= 23,4 Hto= 38,4
VCM= 144 VCM= 121,0
HCM= 53,1 HCM= 37,9
CHCM= 26 CHCM= 31,2
RDW= 25 RDW= 24,7

 VCM= 100-110  Anemia NO megaloblástica (hepatopatías)


 VCM >110  Anemia megaloblástica. Es difícil llegar a la deficiencia de Vitamina B12.

Figura 2.11: Histograma deformado


(seta) por macrocitos policromático
(A) e histograma con doble población,
la macrocítica causa por 4 semanas
de AZT (B).
Hemograma

Figura 6.4: Anemia ferropénica (paciente de 1 año de edad) acentuadamente microcítico, pero sin hipocromía.

Figura 6.3: Anemia ferropénica (mujer adulta) acentuadamente hipocrómica, pero sin microcitosis.

Trombocitosis reactiva

Figura 6.6: Eritrogramas de anemia ferropénica: Adulto (A) y niño de ocho meses (B).
 (B) Reticulocitos= 2,2% ¿compensa la Hb= 3,9? NO compensa ∴ se trata de una anemia arregenerativa.

FROTIS DE SANGRE PERIFÉRICA


 Si pide el médico es porque sospecha de una alteración hematológica, por ende, el extendido debe ser
perfecto.
 El extendido no tiene que tener estrías, ni ser cortado, tiene que tener el tamaño adecuad y buena coloración.
SIN anticoagulante, porque el anticoagulante artefacta.
PRESENCIA DE ERITROBLASTOS (Ppt clase 5 informe)
Si tenemos un contador de 3 partes, se utiliza un reactivo que lisaba los GR, el problema de los eritroblastos es
que el reactivo no puede lisarles, entonces el equipo le contará como un linfocito (GB), entonces el equipo arrojará
20.000 blancos, pero al observar la lámina no se observan tantos GB.
 Los eritroblastos se informan en %, contando durante la realización de la fórmula leucocitaria.
 Los eritroblastos se cuenta a medida que se realiza la fórmula y se informa fuera de la fórmula.
 Si se observa 1 EB= 1%
 20 eritroblastos= 20%
 500 eritroblastos= 500%. Esto se da por ejemplo en eritroblastosis por incompatibilidad.
 La corrección se realiza cuando el % supera el 10% en SP. Cuando es inferior al 10% no se realiza la
corrección
 GBC = GB x 100 / (100 + EB)
 GBC: Corrección de Glóbulos Blancos.
 EB: Eritroblastos.
Granulaciones tóxicas

Alteración del citoplasma.


Las granulaciones toxicas son gránulos primarios persistentes de los promielocitos, porque cuando hay una
demanda de los neutrófilos, una infección grave, o proceso inflamatorio, se rompe la relación entre la maduración
del núcleo y el citoplasma, por lo que los dos maduran por su cuenta. Persisten estas granulaciones por eso
informamos el porcentaje de los gránulos que hay en el citoplasma, es muy subjetivo.
Se informa:
 2 formas de informar: 1) cantidad de neutrófilos, 2) cantidad de granulaciones tóxicas en el citoplasma del
neutrófilo. El 2 depende más de la pericia del bioquímico, si tiene mucho/poco/está lleno (10, 20, 30, 40, 60,
80%).
 % de granulaciones tóxicas (gtox) en el citoplasma de los neutrófilos. No forma parte de la fórmula leucocitaria.
NOTA: Si observo 60 neutrófilos normales y 4 neutrófilos con granulaciones tóxicas, en la fórmula leucocitaria se
considera a los 64 como neutrófilos segmentados (lo normal).
 Son granulaciones persistentes de los promielocitos.
NOTA: En las evaluaciones de Peck (59:45) se informa el número de neutrófilos con granulaciones tóxicas.

Linfocitos reactivos (LR)

 Se informa en % y fuera de la fórmula leucocitaria.


 Es el % de linfocitos reactivos contados en 100 células.
NOTA: Para la fórmula se cuenta como un linfocito normal, pero aparte se anota cuantos LR observo. Cuando se
termina de contar la fórmula, aparte de contar como linfocito normal, se informa en % fuera de la fórmula. (¿?)
Reticulocitos corregidos
N° Ret x Hto del paciente
Ret corregido =
Hto normal
Hto normal
En Paraguay no hay estudios de cuánto es el hematocrito
normal, pero los datos más o menos dice 45 para el hombre y
43 para la mujer.
Hombres: Mujeres:
45 43

Informe:

Serie Roja

Serie Roja:
 Normocitico, normocromico.
 Alteración del tamaño ANISOCITOSIS (+, ++, +++). RDW (ADE)
Macro o Micro (en cruces)
VCM  80 (+)
VCM  70 (++)
VCM  60 (+++)
Tanto en la macro como en la microcitosis se debe evaluar la ANISOCITOSIS, que es la variación del tamaño.
Podemos tener una población heterógenea, una curva más ensanchada, si se observa predominio de
microcitos o macrocitos, se informa en cruces.
Se puede informar solo micro o macrocitosis sin mencionar anisocitosis (por su curva fina = población
homogénea).
 Si se identifica se clasifica en Macro o microcitosis (+, ++, +++).
 Si no se identifica se coloca solo “Anisocitosis (+)”
a. Macrocitosis
 Anemias megaloblástica: por Deficiencia de ácido fólico, o de vitamina B12  Macroovalocitos,
neutrófilos hipersegmentados, cuerpos de Howell-Jolly.
 Anemias no megaloblástica: por Hepatopatías  Macroesferocitos.
 Se puede ver hipocromía.

b. Microcitosis
 La mayoría es por deficiencia de hierro.
 Poiquilocitosis que acompañan: Eliptocitos, dacriocitos.

 Alteración del color Hipocromía/Policromasia. +, ++, +++


OJO no son excluyentes entre ellos, cada uno da una información diferente
Hipocromía: A 40x impresiona, se evalúa en 100x.

1⁄ 2⁄
3 3
(+) (++) (+++)

En hipocromía  vamos a partir en 3 partes y dependiendo de qué tan grande sea su halo central, vamos a
clasificarlo en cruces.
– Hipocromía: (Se observa en 40x). El GR normal con su halo central se parte en 3 partes y se le asigna
cruces. HCM  27 = Hipocromía (+)
– Policromasia (Solo si hay o no. (+). Color grisáceo. Poiquilocito de menor frecuencia. Guiarse por los
criterios de la diap de clase anterior.
¿Qué parámetro es más sensible a la caída de hemoglobina? El HCM es el MARCADOR MÁS SENSIBLE DE
LA CAIDA DE HEMOGLOBINA. El CHCM es sensible pero su problema es que recién cambia su valor cuando
baja de una hemoglobina de 11 a 9 g/dl, no es muy sensible, y tiene lógica. ¿Qué pasa cuando cae la
hemoglobina?, el organismo reduce el tamaño, entonces cae glóbulos rojos más pequeños, pero bien
cargaditos. Entonces la concentración no varía.
a. Policromasia: +, ++, +++.
Presencia nomas informamos. OJO. Esta dentro de lo que llamamos, poiquilocitos de menor frecuencia, los
criterios son:
 1 – 3 (+)
 5 – 10 (++)
 10< (+++)

b. Hipocromía

 Alteraciones de la forma POIQUILOCITOSIS. +, ++, +++


 Acantocitos
 Drepanocitos Etc.
No pueden informar poiquilocitosis, y no definir que poiquilocito es.
Esquistocitos, es el poiquilocito de referencia de la Anemia Hemolitica Microangiopatica. (Autoinmune).
En la Microangiopatica,
¿Cuál es autoinmune la púrpura trombocitopénica trombótica (PTT) y el síndrome urémico hemolítico (SUH)?
 En la PTT, hay un anticuerpo pero contra quien,  hay un anticuerpo que actúa contra una una Proteasa
adamts13. Esta proteasa es necesaria porque degrada al factor VW, es una macro proteína que tiene actividad
procoagulante, cuando no está el Adamts 13, esta proteasa, se acumula y activa la coagulación, entonces hay
formación de fibrina, se deposita en la microvasculatura, los GR, se golpean contra esta formación de fibrina y se
rompen, entonces vemos los esquistocitos, consumo de plaquetas y podemos ver también esferocito.
ENTONCES en una PTT, vamos a encontrar: Esquistocitos (Poiqui estrella), Esferocitos, Plaquetas disminuidas
¿Macroovalocitos donde vamos a encontrar?  Anemia megaloblastica, para diferenciar de las hepatopatías.
 Hemaglutinación
 Las aglutinaciones se EVALÚAN en 40x, en nuestro caso se identifica la aglutinación.
 ¿Cómo se sabe si hay Rouleaux o no? Si en la zona donde se debería ver los GR uno a lado del otro se
observan todas apiladas.
 Cuando se hace un hemograma, la relación Hemoglobina-Hematocrito se pierde, dando valores totalmente
absurdos.
 Se calienta la muestra aprox 1 hora a 37°C y automáticamente se pasa por el equipo.
 Si corrige esa relación, significa que estamos en presencia de crioaglutininas.
 Las crioaglutininas se colocan dentro del informe, si corrige o no a 37°C.
 OBS.: Es característico del mieloma que presente fenómeno de Rouleaux con superficie teñida (medio
rosado) por la xx (audio 2, 15:40) de la globulina que secreta las células plasmáticas.
 Roleaux
 Hemaglutinación
 Crioaglutininas
 Aglutininas
El Rouleaux, nos indica una alteración del plasma. ¿Por qué se forma?  Tiene que ver con las proteínas del
plasma, al cambiar la composición del plasma, algo pasa con la composición de la membrana del GR. La
membrana tiene un potencial de membrana, y cuando se altera la composición del plasma, esa carga (no es
potencial de membrana) cambia, entonces se forma el Roleaux. (Potencial Z dijo el profe).
Esto puede pasar en Hepatopatias también, porque si tenemos una hepatitis, estas células mueren, liberan su
contenido, tendremos una alteración del plasma y se observaran Roleaux.
También esto se observará en los mielomas (sumamente característico). (Suele tener un fondo rosado).
Porque en el mieloma hay una paraproteína monoclonal, en cantidades grandes. Hay Roleaux diferentes, en
cada patología, lo que hacemos es orientar. También se ve en anemias de enfermedades crónicas, hay
componente inflamatorio, entonces se van a sintetizar proteínas de fase aguda, fibrinógeno, PCR, etc.
 Inclusiones: Cuerpos de Howell Jolly, Punteado Basofilo, Parásitos
Serie Blanca

 Alteración en número: Informar n°, “Se observa glóbulos blancos normal/aumentados/disminuidos (nº) por
apreciación del frotis”
 Aumentado
 Disminuido
 Normal
 Conteo aprox. GB (40x). Sumatoria de conteo de GB en 10 campos, se promedia y se multiplica por 2000.
 Fórmula leucocitaria
Entra en la formula Fuera del formula
Blastos Linfocito Reactivo
Pro Mielocito Eritroblasto
Mielocito
Metamielocito
Neutrofilo en cayado
Neutrofilo segmentado
Pro Linfocito
Linfocitos
Linfocitos anormales
Pro Monocito
Monocito
Eosinofilo
Basofilo
100
Los linfocitos anormales generalmente se informan cuando el paciente tiene algún tipo de linfoma.
 Presencia: Se informa en la conclusión (serie mieloide o linfoide)
 Granulaciones (tóxicas)
 Lobulaciones (neutrófilos hipersegmentados)
 Inclusiones

Serie Plaquetaria

 N° por apreciación del frotis


Informar nº, morfología y alteraciones
 Tamaño: Macroplaquetas, plaquetas gigantes.
plaquetaria (macroplaquetas, plaquetas
 Forma: Plaquetas grises.
gigantes, plaquetas grises).
 Aglutinación: Acúmulos plaquetarios.
Es importante informar acúmulos, una muestra con EDTA, difícilmente, tenga acúmulos, por eso se prefiere
un frotis de sangre periférica sin EDTA, para informar los acúmulos, porque me habla de la funcionalidad de la
plaqueta.

 Métodos para el recuento de plaquetas:


a) Observación a 100, se hace el conteo de plaquetas en 10 campos, se suma y se multiplica por 2000.
𝑁° 𝑑𝑒 𝑝𝑙𝑎𝑞𝑢𝑒𝑡𝑎𝑠 𝑥 𝑛° 𝑑𝑒 ℎ𝑒𝑚𝑎𝑡í𝑒𝑠 𝑑𝑒𝑙 𝑝𝑥
b) Método indirecto:
𝑛° 𝑑𝑒 ℎ𝑒𝑚𝑎𝑡í𝑒𝑠 𝑒𝑛 10 𝑐𝑎𝑚𝑝𝑜𝑠

Serie mieloide
 Blastos. Se observan blastos, con sus características y se define.
 Granulaciones toxicas (Se informa el porcentaje de los gránulos que hay en el citoplasma del neutrófilo)
Se cuenta como neutrófilo, y aparte se informa las granulaciones toxicas.
 Se informa las características de los gránulos. Por ejemplo, si hay presencia de vacuolas en los neutrófilos,
“Se observa neutrófilos vacuolados”. Si hay inclusión como cuerpos de Dohle, bastones de Auer.
¿Por qué no se informa presencia de vacuolas en los monocitos? Porque su función principal es la fagocitosis. En
cambio, los neutrófilos tienen de función principal el ataque de producir sustancias como lactoferrina de tal manera
a atacar a los microorganismos, también tiene capacidad fagocítica.
Serie linfoide
 Linfocito Reactivo (En %)
 Blastos. Se observa o no se observa blastos, si se observa se debe caracterizar (tamaño, núcleo, citoplasma).
Los estudios de citometría de flujo para ver qué tipo de blasto es, es extremadamente costoso. La pericia del
médico debe ser alta para pedir “marcadores linfoides”, si nosotros le damos características de la serie mieloide,
entonces debe pedir una batería de análisis para clasificarlo. Por ello, si caracterizamos el blasto podemos orientar
para el siguiente pedido médico.
 Desvío a la izquierda: es la presencia de granulocitos inmaduros, generalmente neutrófilos, encontramos pro
mielocito, mielocito, metamielo.
 Mieloblasto: Cromatina laxa, Alta relación núcleo citoplasma, el citoplasma es regular, presencia de nucléolo.
Nosotros no ponemos mieloblasto, solo BLASTO.
 ProMielocito: célula grande, Alta relación núcleo citoplasma, cromatina laxa, presencia de nucléolo, y lo
característico es las granulaciones primarias.
 Mielocito: aparece granulaciones secundarias de cada serie granulocitica. Hasta aquí tenemos capacidad
mitótica.
 Metamielocito: el grado de compactación de la cromatina ya hace imposible que esta célula se divida.


 Banda 1: Neutrófilo En cayado. SOLO este consideraremos en banda. Aquel cuya cromatina, su grosor se
mantiene a lo largo de todo el núcleo.
 Banda 2: ya son segmentados

LEUCOCITOS (Ppt clase 6)

Valores normales

Leucocitos Neutrófilos Linfocitos Monocitos Eosinófilos Basófilos

• 3600 – • 40 – 50 % • 20 – 50 % • 2 – 10 % •1 – 7 % •0 – 3 %
11000 /µl • 1500 – 7000 • 1000 – 3800 • 100 – 800 /µl • 50 – 400 /µl • 0 – 200 /µL
/µl /µl

 El recuento relativo indica la proporción aproximada, que podemos esperar en un paciente normal en sangre
periférica, depende mucho de la edad, el sexo, el horario (eosinófilos aumentan a la tardecita por ejemplo, 8-
9%).
 Los médicos para hablar de neutrofilia/neutropenia o cualquier alteración de la fórmula leucocitaria se basan
en el valor absoluto.
 Práctica: Tengo 1.500/µL de GB y 80% de neutrófilos… (1.500 x 80) /100 = 1.200/ µL   ∴ se trata de una
NEUTROPENIA.
Neutropenia (<1500/µL)
Se produce por:
 Baja producción por la MO: Puede cursar con blastos bajos.
 Defecto en la liberación a SP: Los neutrófilos tienen proteínas en la membrana
que le hace capaz de movilizarse a través de los tejidos y pasar a sangre
periférica.
 El pool marginal es un equipo de neutrófilos que está a la espera de
cualquier estímulo, como suplente esperando para entrar ∴ se liberan ante
un estímulo.
 Cuando hay un problema en la migración de los GB por la alteración de
estas proteínas, ahí se puede cursar con neutropenia no porque se tiene en
poca cantidad sino porque hay un defecto en su liberación.
 Paso rápido a los tejidos: Los neutrófilos tienen la capacidad de migrar al sitio de lesión, entonces pasan de la
SP a los tejidos para efectuar su función, se queda vacío el compartimiento vascular.
 Destrucción tisular: En caso de las quemaduras, por destrucción.
Causas
 Hematológicas
 Carenciales
 Farmacológicas
 Infecciones (bacteriales – virales)
 Generalmente las infecciones virales cursan con neutropenia, fórmula invertida, es decir, linfocitos
predominan más que neutrófilos.
Clasificación
 Leve: 1500-1000/µL
 Moderada: 500-1000/µL
 Severa: < 500/µL
Los neutrófilos son los encargados de la defensa del organismo, al tener neutropenia estamos inmunocomprometidos.

Neutrofilia
Se produce por:
 Aumento en la MO
 Mayor retención en SP
 Desplazamiento del pool marginal: El pool marginal puede aumentar la cantidad de neutrófilos debido al estrés.
Ejemplo: un niño que se estresa porque no quiere que se le extraiga sangre, entonces su pool marginal pasa
a SP, sube 3.000 a 5.000 de más. Un 10.000 no va a subir a 20.000 por ejemplo, OJO ese si ya es una
neutrofilia, probablemente por una causa infecciosa. En caso de sospecha del movimiento del pool marginal
decir que fue “el momento hematológico”
Causas
 Inflamatorias
 Infecciosas
 Farmacológicas
 Sx mieloproliferativos
 Enfermedades metabólicas: Como diabetes.
 Fisiológicas.
Desvío a la izquierda
 Presencia de leucocitos de neutrófilos en diferentes estadios madurativos en sangre periférica, es
decir, granulocitos inmaduros de la serie de neutrófilos.
 Puede estar presente en: Leucocitosis (en este caso se presenta mayoritariamente), leucopenias y en número
normal.
Alteraciones cualitativas de los leucocitos
 Granulaciones tóxicas (Gtox)

Son los gránulos persistentes de los promielocitos.


 Cuerpos de Dohle

Son inclusiones de los neutrófilos


Es una licuación del estrés oxidativo de los ribosomas (dentro de la célula), se observa de un color azulado.
 Vacuolización

¿Por qué el de la derecha se ve más feo que el de la izquierda? Por el anticoagulante, artefacta la muestra.
OBS.: Observar el extendido con anticoagulante se puede encontrar neutrófilos con vacuolas, en ese caso
vuelvo a realizar el frotis pidiendo nueva muestra sin anticoagulante, para confirmar y luego informar.

 Hipersegmentación nuclear

 Hiposegmentación nuclear o Pelger Huet o pseudo Pelger-Huet

Es una anomalía hereditaria, no tiene consecuencias catastróficas, presenta hiposegmentación nuclear.

 Anomalía de May – Hegglin

Características
 Clínica: Sangrado
 Afecta a: Glóbulos blancos y plaquetas.
 Inclusiones azules en forma de huso o medialuna en Neutrófilos, eosinófilos, basófilos, monocitos e incluso
linfocitos.
 Inclusión que parece un cuerpo de Dohle.
 Megaplaquetas O Macroplaquetas.
 Alteración de pruebas de coagulación: Trombocitopenia.
Se observará alteraciones en la morfología de las plaquetas, en su cantidad e inclusiones de ese tipo en los GB.
 Anomalía de Alder – Reilly. Enfermedad de Hurler – mucopolisacaridosis tipo I

 Mucopolisacaridosis Tipo I: Son trastornos del almacenamiento. Es una enfermedad rara.


 Deficiencia enzimático: Iduronidasa
 Se acumula sulfato de heparan.
 Gránulos azurófilos en los leucocitos: Gtox, no solo se observará en neutrófilos, también en los otros.
 Síndrome Chediak – Higashi

Albinismo
oculocutáneo

Fotofobia

Son gránulos aberrantes, muy grandes. Neuropatía


 Inmunodeficiencia
 Susceptibilidad a infecciones Deficiencia funcional
 Tendencia a hemorragia del neutrófilo
 Albinismo Pancitopenia
 Disfunción neurológica. progresiva

 Cuerpos de Auer

Son polímeros de los gránulos de los blastos.

 Corpúsculos intracitoplasmáticos
 Origen lisosomal
 Forman bastones o empalizados
 Presentes en:
 LMA (Leucemia Mieloide Aguda)
 LMC fase blástica.
“Se observa bastones de Auer” indica el origen que es Mieloide, ∴ el médico pedirá solo la batería para la serie
mieloide.

Eosinofilia
 500 / µl o mayores
 Asma bronquial 2.000 – 20.000 /µL • 60.000/µL
 Rinitis alérgica Eosinofilos
 Infecciones por helmintos: Hacen una parte de su ciclo desgranulados o
hipogranulados
por vía sanguínea
 Linfomas (Hodgkin): Con algún tipo de mutación de tal Anemia
manera que produzca producción de eosinófilos.
 Hipersensibilidad (Rx alergicas) Infiltración
 Síndrome Hipereosinofilico: Entre 2.000-20.000 /µL, pulmonar
inclusive se llegó a 60.000/µL.
Fibrosis
 Se observará todo tipo de eosinófilo: Granulado, endocardica
desgranulado, medio vacío, hipersegmentado,
inmaduros. Miocardiopatia
 Cursa con: Anemia, infiltración pulmonar, fibrosis
endocárdica, miocardiopatía (porque los eosinófilos
son los GB más sensibles por lo que se desgranulan Rash cutáneo
fácilmente, al liberar esos gránulos en zonas como
el corazón, hígado o riñón, causan efecto). También cursa con rash cutáneo (erupción cutánea)

Basofilia
 Mayor a 200 /µL.
 Podemos ver en algunas infecciones virales (no sube mucho).
 Metaplasia mieloide
 Mal pronóstico de LMC (Leucemia mieloide crónica).
 La LCM tiene 3 etapas: Fase crónica, acelerada, agudo. Que esté avanzando
una LCM a fase aguda causa elevación de basófilos (= peor pronóstico).
 Rx alérgicas
 Policitemia vera: Genera elevación de los GR, y de toda la línea celular.
 Asociada con rx de hipersensibilidad inmediata.
 La IgE se une a los receptores de los basófilos
 Liberan histamina y otros mediadores inflamatorios.
Monocitosis

 Valor: Superior a 800/µL.


 Acompañan a la neutrofilia en procesos inflamatorios, porque tienen antecesor común.
 Endocarditis
 Brucelosis
 Tuberculosis
 Paludismo.
En el dengue, impresionante el aumento de los monocitos, con gránulos azurófilos, es decir, totalmente activados.
Linfocitos
 Tipos del linfocitos

 Pequeños
 Medianos
 Grandes granulares (linfocito T citotóxico): Generalmente los que presentan gránulos es del tipo T.
 Citometría de flujo
Linfocitos T
 70 – 90%
 Inmunidad celular: Son los que median las reacciones citotóxicas.
 CD2 + CD3 +
 CD4 + helper
 CD8 + citotoxicos (LLG=Linfocitos Grandes Granulares?)
Linfocitos B
 5 – 20%
 Inmunidad humoral
 CD19 + CD20 +: Son sus marcadores.
LGG (Linfocitos Grandes Granulares)
 NK (Natural Killer): También miden la acción celular.

Linfocitosis. Donde se presentan


Descarga de Infecciones
Esplenectomia Infecciones virales Sx linfoproliferativos
adrenalina bacterianas (rara)

Linfocitopenia
Luego de la Tx de
Enf. De Hodkin LES HIV Población anciana
radioterapia drogas inmunosupresoras
 Linfocitos reactivos (LR)

Hay diferentes tipos de LR.


LR. Se observa en:
 Mononucleosis infecciosa “Enfermedad del beso” (porque se trasmite por la saliva.
 Signos y síntomas: Letargia, anorexia, náuseas, dolor de cabeza, escalofríos, fiebre, faringitis,
linfadenopatía, esplenomegalia, hepatomegalia.
 Patología: Virus del Epstein-Barr.
o Se unen a linfocitos B por su receptor específico
o Período de incubación: 30 – 40 días.
 Linfocitosis
o 12.000 – 25.000/µL
o LR > 20%. Son muy feos y grandes.
 Presencia de inmunoblasto, es un linfocito muy picnótico, con mucha secreción de anticuerpo.
 GR: Anemia Hemolítica Autoinmunidad (AHAI).
 Plaquetas: Normal o disminuido.
 Citomegalovirus
 HIV
 Dengue: Pequeños, con citoplasma hiperbasófilo, luego, en su “2da venida” se presentaban LR en sábana,
es decir, envolvían a los GR, y se caracterizaba por un citoplasma basófilo (celeste en el borde, y degrade
de azul en el centro).
 Coqueluche
Tos ferina
 Infección por bacteria gram negativa
 Bordetella pertussis
 Se observa en recién nacidos y niños pequeños.
 Leucocitosis intense: Linfocitosis.

Caso clínico
Paciente de 16 días de nacida ingresa en el servicio de neonatología con cuadro clínico de 3 días de evolución
consistente en rinorrea y tos húmeda. En la admisión, se encuentra frecuencia cardíaca 157 latidos por minuto,
respiratoria 48 por minuto, temperatura 37º C, saturación de oxígeno al 90% en reposo que disminuye hasta 78%
con la tos, Silverman 1, por tirajes subcostales.
En el examen físico, se hallan ruidos cardíacos rítmicos sin soplos, campos pulmonares hipoventilados con
sibilancias espiratorias ocasionales bilaterales, sin otros hallazgos de relevancia.
Tabla 1. Evolución de los parámetros del hemograma de la paciente a lo largo de la hospitalización

 24/11: Hay trombocitosis reactiva (Plt = 728.000).


 25/11: Hemoglobina y leucocitos se elevaron más. ¿Se le hizo frotis a este paciente en esta fecha? NO
porque en la fórmula leucocitaria sus neutrófilos estaba 15,10%.
 26/11: Leucocito se sigue elevando.
 29/11: Leucocitos llegó a 60.400, lo que implicaría una alteración hematológica como una leucemia. Ya no
es más una reacción leucemoide, esta reacción es aquella en que aparece con GB elevados pero hasta
cierto punto (hasta 50.000), después de eso hay que pensar en un proceso mieloproliferativo o
linfoproliferativo.

Observación de láminas en la tv
 Eliptocitosis e hipocromía (+++)
 Microcitosis, hipocromía (+++), eliptocitos

Caso enviado durante clases

 Hemoglobina= 13,7
 Hematocrito= 37
 RDW= 15,7 (=Anisocitosis)
Aparentemente no está anémico
 Reticulocitos (Reti)= 15,4% (↑↑)
 CHCM=36,5 (↑), está bien concentrado.
 VCM=76,5 fL (Microcitosis).

En esta foto se observa a los GR un poco separados, es decir,


está más hacia la cola, lo llamativo es que no son GR aplanados, están más teñidos = Esferocitos.

 En qué casos también podemos encontrar esferocitos?


 Por ejemplo en Anemia hemolítica microangiopática el poiquilocito de referencia es el esquistocito pero
puede ir acompañado de esferocitos.
 En las anemias hemolíticas autoinmune también puede ir acompañado de esferocito porque los
macrófagos captan, rompen y se cierran, y al cerrarse se forma el esferocito.
Mielocito

Se observan algunos gránulos primarios en el borde.


Metamielocito

Promielocito
Neutrófilo en banda

Blasto

Eritroblasto
Linfocito Reactivo

Núcleo en anillo

Pro linfocito

Eosinofilo

Se observa Un eosinofilo y plaqueta gigante

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