Informe 2 Q.a.instrumental

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS
Universidad del Perú, Decana de América
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
INFORME N°2
“OBTENCIÓN DEL ESPECTRO DE AZOSULFAMIDA.

LONGITUD DE ONDA ÓPTIMA Y CURVA DE RINGBOWN”
ASIGNATURA
Química analítica instrumental
DOCENTE
Mg. Carlos Casas, Norma Angélica
“SUBGRUPO 1”
Aliaga Sotelo, Dan Abinadab
Cruz Huaroto, Milagros Guadalupe
Chirinos Mejico, Anely Rocío
Espinoza Medina, Maryori Alexandra
Revollar Panaifo, Cristian Enrique
Lima, Perú
2021-II
I. OBJETIVOS
Objetivo principal
❖ Aplicar los conocimientos de espectrofotometría para determinar de la curva de
Ringbown del compuesto Azosulfamida
Objetivos específicos
❖ Determinar la curva espectral y obtención de la longitud de onda óptima de la
azosulfamida.
II. MARCO TEÓRICO
ESPECTROFOTOMETRÍA: Palabra que se deriva de “espectro” sombra de radiación

electromagnética, “foto”, luz visible, y “metría”, medición. Es una técnica analítica
experimental generalmente empleada para la detección específica de moléculas.
Principalmente se caracteriza por su gran precisión, sensibilidad y su aplicabilidad a
moléculas de distinta naturaleza (contaminantes, biomoléculas, etc) y de distinto estado de
agregación (sólido, líquido, gas).(1)
ESPECTROMETRÍA DE ABSORCIÓN: Técnica analítica que permite determinar la

concentración de un compuesto en solución, basado en la absorción de radiaciones
electromagnética, de las moléculas presentes en un analito.
La espectrofotometría UV-Vis. estudia el fenómeno de adsorción UV-visible de determinadas
moléculas orgánicas e inorgánicas. Utiliza la radiación del espectro electromagnético en una
longitud de onda comprendida entre los 100 y 800 nm.(2)
CURVA ESPECTRAL: Es una gráfica que determina las longitudes de onda en relación a la
absorbancia de los cromóforos del analito analizado.(1) Además se puede tomar esta relación
para determinar la energía de absorción, esto mediante la relación inversa existente entre el
tamaño de la longitud de onda y la propia energía absorbida por el grupo cromóforo.(3)
Figura 1. Curva espectral del agua y buffer de fosfato
Fuente: Researchgate (2013).
CURVA DE RINGBOWN: Gráfico utilizado en química analítica y en espectroscopia, que

relaciona la absortancia con la concentración logarítmica.(3)
Se encuentra determinado bajo la siguiente fórmula, se recuerda que la absortancia es

dependiente del porcentaje de Transmitancia.
%Transmitancia = 10- Absorbancia
Absortancia= 100% -%T

Log C = Log (ppm)
Figura 2. Ejemplo de Curva de Ringbown

Fuente: Researchgate (2013)
III. MATERIALES
Espectrofotómetro UV/VS Cubeta de 1cm de paso óptico
Estándar de azosulfamida 5% Matraces de diferentes volúmenes
Fiola de diferentes volúmenes Pipetas de diferentes volúmenes
IV. ESQUEMAS- PASOS

Figura 1. Diagrama de flujo sobre la obtención del espectro de la azosulfamida.
V. RESULTADOS Y CÁLCULOS
❖ CURVA ESPECTRAL Y OBTENCIÓN DE LA LONGITUD DE ONDA

ÓPTIMA
➢ Tabla de longitud de onda y absorbancia
➢ Gráfico 1. Longitud de onda vs. Absorbancia

❖ CURVA DE RINGBOM
➢ Tabla de datos de la Azulfamida
➢ Gráfico 2. 100-%T vs. Log C

VI. INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
En el gráfico 1: el pico más alto se observa a unos 540 nm de longitud de onda con una
absorbancia de 0,190. De acuerdo a esa longitud de onda óptima es donde se absorbe mayor
energía y, como nos muestra el gráfico, la molécula se encuentra en una longitud de onda
visible.
En el gráfico 2: Para obtener el intervalo óptimo y adecuado de concentraciones con el

menor error por lectura primero se construye la curva de Ringbown que consiste en
construir una gráfica de absortancia (100%-T) vs la concentración.
En el eje Y, para hallar los valores de la absortancia se usó la fórmula: Absortancia = 100 -
%Transmitancia. Pero al no poseer datos proporcionados del %Transmitancia se procedió a
calcularlo a partir de los valores de absorbancia, reemplazando los valores en la siguiente
fórmula: %Transmitancia = 10- Absorbancia.
Con respecto al eje X, los valores colocados fueron los logaritmos de las concentraciones
(partes por millón) mencionadas en los datos que se nos brindaron.
La zona lineal corresponde al intervalo de concentraciones de mínimo error.
Para la mayoría de los sistemas la curva de Ringbom corresponde a una curva en forma de S.
La parte lineal de esta gráfica permite obtener el intervalo de concentraciones óptimo o el
intervalo que presentara una relación lineal entre absorbancia y concentración.
En esta gráfica, los cruces o intersección de la parte recta ( intermedia) que viene a ser la
línea óptima, con la parte baja o meseta inferior determinará la concentración mínima, de
igual forma la intersección de la línea óptima con la meseta superior determinará la
concentración máxima.
VII. DISCUSIÓN
En la práctica desarrollada se trato acerca de la curva de RINGBOWN de la

azosulfamida,para luego trazar correctamente la curva de calibración, sin embargo según
GOMARA FL, CORRER CJ, SATO MEO, PONTAROLO R ,en su artículo titulado
“Desarrollo y validación de un método espectrofotométrico para cuantificación de ácido
kójico” publicado el 2014 , nos muestra la importancia de realizar un método de
cuantificación de una sustancia tomando en cuenta los parámetros correspondientes ,además
de realizar la curva espectral del ácido kojico para encontrar la longitud óptima de 269 nm
,con el cual podemos realizar la curva de calibración de la sustancia, donde nos indica que se
cumple la ley de Ber(a mayor concentración una mayor absorbancia )
Experimentalmente, también se comprueba que el ph del medio es un factor que interfiere en

el análisis cuantitativo, por lo que un ph mayor a 7, se observa alteraciones en la absorbancia
.Además nos indica que las formulaciones de los fármacos puede encontrarse sustancias que
interfieran en la absorba en la región de 269 nm del espectro , como es el caso del
metilparabeno.
IX. CUESTIONARIO
1. ¿A qué se debe los máximos de absorción que se observan en una curva

espectral?
Estos se deben por la facilidad del fotón excitador de corresponder con la diferencia
de energía entre un estado basa a un estado excitado con la mínima potencia de la
especie absorbente a una determinada longitud de onda.
2. De acuerdo a la estructura química del compuesto estudiado ubique el o los

grupos cromóforos y señale las posibles transiciones electrónicas respectivas.
Como menciona Fernández (A) es importante reconocer que los grupos cromóforos
son los grupos funcionales de la molécula, responsables de la absorción de las
radiaciones electromagnéticas mediante transiciones electrónicas.
Ahora veamos la estructura química de la azosulfamida.

Figura x. Estructura química de azosulfamida
Fuente: Universidad de Granada (2011)
En compuestos orgánicos, los grupos cromóforos más comunes son dobles y triples
enlaces c-c. En la estructura observada se pueden identificar al siguiente grupo
cromóforo (4).
CROMÓFERO ESTRUCTURA TRANSICIÓN

ELECTRÓNICA
Azo
A.
3. ¿Cuáles son las transiciones electrónicas y sus valores de longitud de onda de

máxima absorción? ¿En qué consisten las bandas B, E, K Y R que presentan los
hidrocarburos aromáticos?
Existen 4 tipos de transiciones electrónicas(5).
Transición Longitud de onda (٨) ૬ (L mol 4 cm-1) Ejemplo

(nm)
Ơ → Ơ* ᐸ 200 - Hidrocarburos
saturados
𝛑 → 𝛑* 200-500 = 104 Alquenos, Alquinos

aromáticos
ƞ → Ơ* 160-260 102-103 H2O,
CH3OH,CH3CL
ƞ → 𝛑* 250-600 10-103 carbonilos, nitro,

nitrato, carbonilo
Tabla 1: Transiciones electrónicas y valores de longitud de onda de máxima absorción
Las bandas B,E,K y R son importantes para que estas puedan captar determinada
longitud de onda que inciden sobre ellas (5).
4. ¿En qué consisten la absortividad molar (ϵ)? ¿Qué factores hacen variar sus
valores?
La absortividad molar(ε)viene a ser una constante definida en la expresión

matemática de la ley de Lambert-Beer, en la cual se señala de manera práctica qué
tanto la especie química o la mezcla absorbe la luz. De esta manera, la podemos
obtener a partir de la siguiente fórmula: 𝐴 = ε𝑏𝑐.
Por otro lado, el factor principal que hacen cambiar sus valores de absortividad molar
(ε)es el cambio de los valores de longitud de onda(λ), quiere decir, al medir las
absorbancias con luces de otras energías, εcambia, alcanzando un valor mínimo o
máximo (6).
5. De acuerdo a la curva de Ringbown, explique y fundamente ¿A qué se debe la

formación de mesetas, inferior y superior?
Para una obtención del intervalo óptimo de concentraciones, en primer lugar se

construye la curva de Ringbom, que consiste en construir una gráfica de absorbancia
(100-%T) vs. Log Concentración de la sustancia analizada. Para la mayoría
de los sistemas de la curva de Ringbom corresponde a una curva en forma de S
alargada que contiene una meseta superior y una meseta inferior. La parte lineal de
esta gráfica permite obtener el intervalo de concentraciones óptimo o el
intervalo que presentara una relación lineal entre la absorbancia y la
concentración. En esta gráfica, se trazan líneas paralelas en las mesetas superior e
inferior, con la finalidad de realizar los cruces de la parte recta (la intermedia), con la
parte baja y con la parte alta, los cuales pueden servir para determinar el valor para
conocer los límites de detección mínimo y máximo (7).
6. Investigue sobre los principales errores en la lectura de absorbancia relacionados

con la concentración (Error relativo ΔC/C) y error absoluto ΔT y ¿Cuál es la
aplicación práctica de la curva de Crackford?
Durante la lectura de escalas de transmitancia o absorbancia pueden existir errores

que deben ser tenidos en cuenta al momento de realizar las mediciones cuantitativas.
El error relativo en concentración por la incertidumbre en la medida de la
transmitancia puede deducirse de la ley de Beer. Este error relativo analítico se
designa por:
(ΔC/C)/ ΔT
A=log I0/I = ebC = -log T = -0,4343 ln T
Se puede obtener el error relativo en la concentración para una medida fotométrica:
(ΔC/C) = 0,434 ΔT/ T Log T
ΔT = Error fotométrico
La curva de Crawford se construye a partir de esta relación. Se grafica el valor

absoluto de (ΔC/C)/ ΔT vs T, tomando valores de transmitancia entre cero y uno. Se
obtiene a partir del error relativo analítico por unidad de error fotométrico vs
transmitancia. El error dependerá en forma compleja de la medida de la transmitancia
en sus valores. La concentración crece constantemente en valores de transmitancia
muy bajos o muy altos. Para valores intermedios este error permanece constante.
BIBLIOGRAFÍA
1. Informe Curva de Ringbown [Internet]. Scribd. 2015 [Citado 26 de octubre de 2021].

Disponible en:
https://es.scribd.com/document/279767186/Informe-Curva-de-Ringbown
2. CONTROL DE CALIDAD DE INSUMOS Y DIETAS ACUÍCOLAS [Internet].
Fao.org. 2021 [Citado 26 de octubre de 2021]. Disponible en:
https://www.fao.org/3/ab482s/AB482S03.htm
3. Asselum. La curva de distribución espectral [Internet]. ASSELUM. 2017 [Citado 26
de octubre de 2021]. Disponible en:
https://asselum.com/la-curva-distribucion-espectral/
4. Suárez R, Arévalo E. Linares L. Ustáriz F. Hernández G. Validación de un método
analítico para la determinación de magnesio eritrocitario [Internet]. Avances en
Química. 2009[Citado 26 de octubre de 2021] 4(2), 53-62. Disponible en:
https://www.redalyc.org/pdf/933/93313204001.pdf
5. Desarrollo y validación de un método espectrofotométrico para cuantificación de
ácido kojico [Internet]. 2019 [citado 20 de octubre de 2021]. Disponible en:
http://www.ugr.es/~ars/abstract/vol45/145-153.pdf
6. Fernández G. Grupos cromóforos y auxocromos [Internet]. Quimicaorganica.org.
2021 [Citado 26 de octubre de 2021]. Disponible en:
https://www.quimicaorganica.org/espectroscopia-visible-ultraviolata/735-grupos-cro
moforos-y-auxocromos.html
7. Serrano J. El espectro electromagnético. Absorción visible-ultravioleta. Posgrado en
Ingeniería del agua y del terreno. [Internet]. [Consultado 26 Octubre 2020].
Disponible en: https://www.upct.es/~minaeees/espectro_electromagnetico.pdf

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Aliaga Sotelo, Dan Abinadab

Cruz Huaroto, Milagros Guadalupe

Chirinos Mejico, Anely Rocío

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II. MARCO TEÓRICO

ESPECTROFOTOMETRÍA: Palabra que se deriva de “espectro” sombra de radiación

ESPECTROMETRÍA DE ABSORCIÓN: Técnica analítica que permite determinar la

CURVA DE RINGBOWN: Gráfico utilizado en química analítica y en espectroscopia, que

Se encuentra determinado bajo la siguiente fórmula, se recuerda que la absortancia es

%Transmitancia = 10- Absorbancia

Absortancia= 100% -%T

Figura 2. Ejemplo de Curva de Ringbown

Estándar de azosulfamida 5% Matraces de diferentes volúmenes

Fiola de diferentes volúmenes Pipetas de diferentes volúmenes

IV. ESQUEMAS- PASOS

❖ CURVA ESPECTRAL Y OBTENCIÓN DE LA LONGITUD DE ONDA

➢ Tabla de longitud de onda y absorbancia

➢ Gráfico 1. Longitud de onda vs. Absorbancia

➢ Tabla de datos de la Azulfamida

➢ Gráfico 2. 100-%T vs. Log C

En el gráfico 2: Para obtener el intervalo óptimo y adecuado de concentraciones con el

La zona lineal corresponde al intervalo de concentraciones de mínimo error.

En la práctica desarrollada se trato acerca de la curva de RINGBOWN de la

Experimentalmente, también se comprueba que el ph del medio es un factor que interfiere en

1. ¿A qué se debe los máximos de absorción que se observan en una curva

2. De acuerdo a la estructura química del compuesto estudiado ubique el o los

Ahora veamos la estructura química de la azosulfamida.

Fuente: Universidad de Granada (2011)

CROMÓFERO ESTRUCTURA TRANSICIÓN

3. ¿Cuáles son las transiciones electrónicas y sus valores de longitud de onda de

Existen 4 tipos de transiciones electrónicas(5).

Transición Longitud de onda (٨) ૬ (L mol 4 cm-1) Ejemplo

𝛑 → 𝛑* 200-500 = 104 Alquenos, Alquinos

ƞ → 𝛑* 250-600 10-103 carbonilos, nitro,

La absortividad molar(ε)viene a ser una constante definida en la expresión

5. De acuerdo a la curva de Ringbown, explique y fundamente ¿A qué se debe la

Para una obtención del intervalo óptimo de concentraciones, en primer lugar se

6. Investigue sobre los principales errores en la lectura de absorbancia relacionados

Durante la lectura de escalas de transmitancia o absorbancia pueden existir errores

A=log I0/I = ebC = -log T = -0,4343 ln T

Se puede obtener el error relativo en la concentración para una medida fotométrica:

(ΔC/C) = 0,434 ΔT/ T Log T

La curva de Crawford se construye a partir de esta relación. Se grafica el valor

1. Informe Curva de Ringbown [Internet]. Scribd. 2015 [Citado 26 de octubre de 2021].

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