Cultivos Celulares

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CULTIVOS CELULARES

OBJETIVOS
 Dar a conocer que son los cultivos celulares, su función y los diferentes tipos de cultivos que
existen.
 Reconocer la aplicación de los cultivos celulares en células animales, vegetales y sus
diferentes áreas de aplicación.
 Mostrar un ejemplo de cultivo de órganos por medio de un experimento.
Introducción a los Cultivos Celulares
A finales del siglo XIX, se efectuó un experimento biológico donde Wilheim Roux mantuvo a un
embrión de pollo vivo en una solución de NaCl durante varios días. A partir de ese momento se
siguió desarrollando una nueva manera de observar a tejidos de organismos vivos sin
necesariamente estar dentro de un espécimen: El cultivo celular.
El cultivo celular es una técnica en donde se aíslan células de un tejido vivo y se mantienen en
condiciones de temperatura, Ph, presión, atmosfera y nutrientes que le permiten continuar su ciclo
celular, reproduciéndose fuera del cuerpo. Este proceso es también llamado “in vitro”.
¿QUÉ ES EL CULTIVO CELULAR?
El cultivo celular se define como el conjunto de técnicas que permiten el mantenimiento, la
supervivencia y/o multiplicación in vitro de células provenientes de órganos específicos o de linajes
celulares tratando de conservar al máximo sus propiedades fisiológicas, bioquímicas y genéticas.
Una de estas propiedades es la capacidad de adherencia a superficies, lo que permite que las
células crezcan ya sea en monocapa o en suspensión. Esta propiedad de adherencia está en
general asociada con el tipo de célula de la cual derivan y depende del tipo de proteínas presentes
en su superficie. Se sabe que muchos cultivos celulares se encuentran anclados a una superficie
celular debido a que sintetizan proteínas relacionadas con la matriz extracelular la cual está
encargada de mantener unidas a las células y posee un papel regulador sobre las mismas in vivo.
TIPOS DE CULTIVO CELULAR
El primario se realiza con células de tejidos animales, que no han sido modificadas genéticamente,
esto se hace con el fin de crear órganos in vitro para probar la reacción de los medicamentos. La
creación de estos órganos aún no se ha logrado completamente, debido a la poca duración de las
células en este tipo cultivo. Estas células tienen una duración de 7 días aproximadamente, y solo
puede hacerse un pasaje de caja con estas.

El de líneas celulares se realiza con células modificadas genéticamente para que su capacidad de
multiplicarse sea ilimitada. O también se realiza con células de origen tumoral (cáncer), ya que estas
no tienen bien desarrollado el sistema de apoptosis, y con los nutrientes necesarios, podrían ser
prácticamente inmortales.
Este tipo de cultivo se utiliza para investigar diferentes tipos de células sin que estas mueran a los 7
días a diferencia del cultivo primario. Debido a que están modificadas para multiplicarse de forma
ilimitada, estas pueden tener varios pasajes.
El cultivo secundario se establece cuando se hace el subcultivo exitoso a partir de un cultivo
primario. Las células dependientes de anclaje forman una monocapa que puede llegar a cubrir el
soporte en el que crecen, el grado de cobertura del soporte se llama grado de confluencia. El
subcultivo implica el desprendimiento de las células adheridas, la dilución de la densidad celular y su
reinoculación en medio fresco. Las células pueden crecer a una velocidad constante en diversos
subcultivos sucesivos, recibiendo cada uno de ellos el nombre relacionado con el pase.

CRECIMIENTO CELULAR
Los cultivos en monocapa (Figura 1A) representan una de las formas de crecimiento in vitro de las
células provenientes de cultivos primarios o de líneas celulares dependientes de anclaje. La
monocapa celular crece (confluencia) cubriendo la superficie de soporte hasta que se establece
contacto entre las células, lo que causa que éstas detengan su crecimiento (quiescencia).
El crecimiento en suspensión se presenta en células cuya naturaleza es de ese tipo como en el caso
de células hematopoyéticas o en aquéllas que han perdido o disminuido la síntesis de proteínas de
anclaje y no desarrollan el proceso de quiascencia como es el caso de algunas líneas celulares
transformadas artificialmente o de células procedentes de tumores. Las células que provienen de
cultivos primarios con requerimiento de anclaje a superficies pueden ser adaptadas a crecer en
suspensión después de ser sometidas a una serie de subcultivos, al hacer modificaciones genéticas
o cambiando el medio de cultivo.
Con los cultivos tridimensionales se busca mantener la arquitectura in vivo del tejido de origen. En el
caso del epitelio, los sistemas tridimensionales permiten estudiar la proliferación, morfología e
interacciones intra e inter celulares. De igual forma se puede evaluar el efecto de sustancias que
pueden afectar tales interacciones. En este tipo de cultivo es posible mantener los tipos celulares
diferenciados y es por ello una buena réplica del tejido de origen, sin embargo, la propagación
celular es dependiente de las características de la biomatríz o soporte2

MANTENIMIENTO CELULAR A CORTO PLAZO


el mantenimiento a corto plazo de un cultivo celular se realiza por el subcultivo del mismo en cual
puede conducir a modificaciones genéticas que pueden repercutir en su fenotipo, sin embargo,
esto no siempre sucede. Además, estas modificaciones también pueden ser inducidas por medio
de la inserción de plásmidos específicos, lo que da origen a cultivos con diferentes propiedades.

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