Practica 2

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PRACTIVA 2: ESTERILIZACION

La esterilización es el proceso de destrucción o remoción de todas las formas de vida como bacterias, hongos y
virus.

A) Eficacia de ebullición de calor


 Rotular el tubo: Con calor.
 Enfrentar al calor (Ebullición.) Por 10 minutos, Colocándole sobre la llama del Mechero en forma
intermitente.
 Llevará la incubación a 37 °C por 24 horas.

El calor provoca desmaterialización de proteínas, fusión y desorganización de las membranas y/o procesos
oxidativos irreversibles de los microorganismos. Se puede con dos tipos de líquidos (agua y aceite)

Agua en ebullición: hervirá a 100° C por 10 minutos en el mechero.

Aceite en ebullición: se utiliza aceite especial, no es necesario llevar al punto de ebullición, sino a unos 130° C por 10
minutos.

(“su proceso es oxidativo”)

B) Eficacia de vapor de agua a presión vapor


 Retirar los tubos Con autoclave.
 Llevar el tubo Del Autoclave Y someterlo 121 °C. 15 psi Por 15 minutos.
 Llevar. Incubación a 37º por 24 horas.

Estos equipos emplean saturada a una presión de 15 psi, la que permite que la cámara alcance una temperatura de
121° C.

“Tiene un proceso de coagulación” en forma de vapor altamente presurizado para la esterilización de las proteínas
dentro de los microorganismos.

“destrucción del ADN Y ARN”

(proceso de coagulación)

C) Eficacia de la radiación (rayos ultravioletas)


 Llevar dentro de la Cámara de luz ultravioleta el tubo
 ¿Dejarla por 30 minutos
 Llevará incubación a 37º por 24 horas.

Es un proceso de destrucción de toda la vida microbiana por medio de una luz ultravioleta. Se usa una radiación
ultravioleta (tipo C) por efecto germicida a una longitud de honda de 254 nm, el cual destruye la composición del
ARN/ADN de los microrganismos mas impidiendo su reproducción.

“no mueren, solo disminuyen en su proceso de metabolismos”

(proceso de oxidación)

D) Eficacia del frio


 Rotular tubos con frío. 0 °C.
 Llevar al congelador por 30 minutos.
 ¿Hola llevar a incubar A 37 °C por 24 horas.

A bajas temperaturas ocasiona la disminución de la velocidad multiplicativa de los nutrientes de las bacterias pero
no provocan su destrucción. Al descender la temperatura por debajo de los 4°C (temperatura de refrigeración) los
gérmenes dejan la de multiplicarse, no se destruyen. Sin que paralizan su actividad metabólica.

(proceso de oxidación)
PRACTICA 3: METODOS DE SIEMBRA MICROBIOLOGICA

Mediante los pasos de siembra., Aislamiento y trasplante Se sintetiza los procedimientos previos A la identificación.

AISLAMIENTO:

Es la separación de un determinado microorganismo del resto de microorganismos que le acompañan. El método


más usual es la siembra por estría sobre un medio de cultivo sólido adecuado dispuesto en una placa de petri.

TRANSPLANTE:

Significa la separación primaria de la cepa a un medio de cultivo Apropiado en un tubo de ensayo que pueda ser
líquido o sólido.

SIEMBRA:

Es introducir artificialmente una porción de muestra (inóculo) en un medio adecuado, con el fin de iniciar un cultivo
microbiano, para su desarrollo y multiplicación.

TIPOS DE SIEMBRA:

 SIEMBRA EN TUBOS

Enjuague

Estrías

Estrías y punteo

puntura

 SIEMBRA EN PLACAS Y SUPERFICIES

Estrías y agitamiento

Este método de siembra se realiza con el aza de siembra en anillo o puntura, es el mejor método de
siembra porque se puede observar los colores, no crecen amontonados, se puede hacer el conteo de
colores crecidos.

 SIEMBRA POR DISIMINACION

Este método se caracteriza por que el inoculo se disimina por toda la placa mediante la espátula de
vidrio.

 AISLAMIENTO POR DIFUSION E INCORPORACION

Por profundida (placac vertida)

Técnica de diluciones decimales

Se practica de preferencia para análisis cuantitativos de bacterias, consiste en verter agar fundido y
enfriado a 45° C sobre el inoculo depositado en la placa estéril.

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