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LABORATORIO VIRTUAL
MICROSCOPIA DE LA LUZ

INTEGRANTES
Zareth Alejandra Palencia Sanchez
Shara Zapata Londoño
Shirley Molina Londoño
Monica Prado Ospino

Universidad Antonio Nariño

Odontología tercer semestre
INTRODUCCIÓN

En esta práctica virtual de laboratorio se observará y se ampliará nuestros conocimientos acerca

del microscopio, bacterias, entre otros.

Se comienza definiendo que es el microscopio, su función, conociendo sus partes, diferenciando

las funciones del microscopio y compartiendo diferencias entre el microscopio de luz y el
microscopio electrónico.

La siguiente parte del laboratorio consistió en la realización de una autoevaluación donde pusimos
a prueba los conocimientos ya adquiridos y pudimos observar una animación del uso del
microscopio, luego aprendimos a diferenciar aquellas células por su tamaño, forma, grosor, color,
núcleo, membrana con los respectivos objetivos del microscopio. Enfocados correctamente en
cada uno de sus aumentos iniciando en (10x, 40x,100x).

Ya finalizando logramos apreciar el funcionamiento, cuidado y uso apropiado del microscopio con
el fin de realizar una excelente observación para cada uno de los análisis propuestos.

OBJETIVO GENERAL

Estudiar las distintas partes y el funcionamiento de un microscopio.

CONCEPTOS BASICOS

 MICROSCOPIO: El microscopio es un instrumento óptico que utiliza lentes o una

combinación de lentes para producir imágenes ampliadas que son demasiado pequeñas
para verlas a simple vista.
 MICROSCOPIA DE LUZ: El microscopio óptico utiliza las propiedades de la luz para producir
una imagen ampliada. Es el tipo de microscopio más simple. Según la simplicidad del
microscopio, se puede clasificar en: Microscopio simple y microscopio compuesto.
 PARTES DE UN MICROSCOPIO:
1. Parte mecánica: base, brazo y platina
2. Parte de aumento: lente objetivo y lente ocular
3. Parte de iluminación: condensador de etapa secundaria, diafragma de iris, fuente
de luz.
LABORATORIO 1

MICROSCOPIO DE LUZ

Encienda el microscopio y ajuste la

intensidad de la luz con la ayuda de
un reóstato de lampara.

Coloque un portaobjetos de
microscopio en el escenario

Gire el revolver hacia el objetivo de

menor potencia, lente de objetivo
4X
Observe a través del microscopio y
mueva la palanca del diafragma iris,
hasta que pase la mayor parte de la
luz o el fondo se vuelva más
brillante.

Ajuste la perilla de ajuste grueso

hasta que la muestra este enfocada

Gire la perilla de ajuste fino hasta

que la imagen se vuelva mas clara
con buena resolución. La imagen se
puede ver como arriba.
Gire el revolver hacia el objetivo
10x para un aumento de 100k

Abra la mitad del diafragma del

iris

Ajuste la perilla de ajuste grueso

hasta que la muestra este
enfocada.
 Gire la perilla de ajuste fino
hasta que la imagen se vuelva
mas clara con buena resolución.

Gire la pieza de la nariz al objetivo

40x

Abra el 4° diafragma del iris

 Enfoque el lente usando la
perilla de ajuste grueso

Cierre ¾ del diafragma del iris

Gire la perilla de ajuste fino

hasta que la imagen se vuelva
mas clara y con buena
resolución
 Gire la pieza de la nariz de modo que la
muestra este entre el objetivo de 40X y
100X. coloque una pequeña gota de
aceite en el porta objetos en el centro
del área iluminada. Gire la pieza de la
nariz para que el objetivo de inmersión
en aceite de 100X toque el aceite.

Solo se realiza un ajuste fino.

Retire el porta objetos y limpie el objeto

de inmersión de 100x cuidadosa mente
con el papel, luego se apaga el equipo.
AUTOEVALUACIÓN
LABORATORIO 2: MICROSCOPIO DE LUZ

 CÉLULA EPIDÉRMICA DE CEBOLLA SIN TEÑIR EN 10X, 40X, 100X

Inicialmente empezamos a visualizar la muestra de la epidermis de cebolla y en el

momento que la observamos con el objetivo 10x (imagen 1) se observa las células de la
epidermis que son forma rectangular donde se observa la membrana y la pared celular y el
núcleo, en la imagen de 40x (imagen 1.2) se observa un poco mejor las células y más cerca
el núcleo y en 100x (imagen 1.3) se observa más detalladamente tanto el núcleo como la
membrana, pared celular y las células

1.2 1.3

 BACILOS GRAM POSITIVO EN 10X, 40X, 100X

La imagen 3 presentan un color de tinción morado-azul ya que poseen solo una membrana
lipídica y la pared de peptidoglicano es mucho más gruesa y puesto al ser la pared gruesa,
retiene el colorante durante la tinción de Gram por lo que queda del mismo color violeta
por lo cual la definimos como bacilos Gram positivos. Estas bacterias presentan diferentes
 formas alargadas (bastones) y se ven cada vez más grandes (gruesos) debido a el objetivo
que se está utilizando.

 BACILOS GRAM NEGATIVO EN 10X, 40X, 100X

Posteriormente se visualiza una muestra de bacilos Gram negativo, iniciando con un

objetivo de 10x (imagen 2) en la cual observamos que los bacilos Gram negativos son de
color rojo-rosado ya que su tinción de Gram está dada por presentar dos membranas
lipídicas entre las que se localiza una fina pared celular de peptidoglicano puesto a ser la
pared fina, no retiene el colorante durante la tinción de Gram y se torna de este color
característico de los bacilos Gram negativo.
 COCOS GRAM NEGATIVO EN 10X, 40X, 100X

Se puede observar cómo se presentan en forma de racimo y son Gram negativos debido a
que se torna de color rojo – rosado por su pared que es muy fina y no retiene el colorante
durante la tinción de Gram. Se observa con mayor claridad en la imagen 4.2 que es 100x.

 COCOS GRAM POSITIVO EN 10X, 40X, 100X

La imagen 5 nos presentan un color de tinción morado-azul ya que poseen una pared de
peptidoglicano que es mucho más gruesa y puesto al ser la pared gruesa, retiene el
colorante durante la tinción de Gram por lo que queda del mismo color violeta por lo cual
la definimos como cocos Gram positivos. Estas bacterias presentan diferentes formas, esta
 es en forma de racimo (estafilococos) y se ven cada vez más grandes (gruesos) debido a el
objetivo que se está utilizando.

 BACILLUS
SUBTILIS (RODS)
EN 10X, 40X, 100X

Podemos observar la bacteria bacillus sibtilis, que es una bacteria gran positiva,
catalasa-positiva,aerobio, las podemos observar en 10x, 40x, 100x, donde se
puede observar su color y forma de varilla.

 STAPHYLOCOCCUS AURCUS (COCCUS) EN 10X, 40X, 100X

Es una bacteria anaerobia facultativa, grampositiva, productora de coagulasa,

inmóvil y no esporulada. Podemos observar su forma y color, tienen forma de
racimos de uvas
 ONION CELL EN 10X, 40X, 100X

A través del microscopio podemos observar el color, textura y tamaños de las células
sometidas a evaluación, se puede observar los cambios y la nitidez a los diferentes
objetivos, son de forma alargada y bastantes grandes. La membrana celular celulósica se
destaca muy clara, teñida por el colorante. Los núcleos son grandes y visibles, en el
interior de estos se perciben granulaciones, estos son nucleolos.

 CHEEK CELL EN 10X, 40X, 100X

Bajo el microscopio podemos oibservar celulas de la mejilla, observamos si coloracion y

forma, en el centro se pueden observar nucleolos de un color mas osculo al d la
suoerficie, tambien se percibe la forma de cadena que algunas de estas celulas toma.
ONION ROOT TIPS EN 10X, 40X, 100X

Se realizan aumentos, la orceina A reblandece las membranas celulares y la B completa el proceso

de tinción. Se logra una extensión y difusión de las células de la raíz de la cebolla

Conclusiones
En el laboratorio de cebolla se logró apreciar detalladamente la membrana, la pared y el núcleo.

Identificamos que la tinción de Gram nos da el color de las células, debido a el peptidoglucano o
mureina que nos forma el color morado-azul y la delgada cada de peptidoglucano nos forma el
color rojo-rosado.

Los bacilos y cocos Gram positivos son de color morados y los Gram negativos de color rojo.

El aceite de inmersión es muy importante ya que nos permite tener un mayor grado de nitidez en
el objetivo 100x.

RECOMENDACIONES
Es recomendable iniciar a enfocar nuevamente, desde el aumento más pequeño, en este caso el
objetivo 4x, así se asegurará una correcta resolución cuando se llega a observar con el objetivo de
100x. ya que en el simulador no muestra 4x si no desde 10x.
La intensidad de la luz debe ser regulada de tal manera que NO SOBREPASE la mitad de
graduación máxima, lo ideal es un tercio, esto con varias finalidades: no calentar demasiado los
microscopios, no dañar los reguladores, no sobre calentar los focos y con ello fundirlos y sobre
todo, no perjudicar la retina del usuario.

APRECIACION Y RESUMEN DE VIDEOS

MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO

En este video logramos aprender sobre el manejo adecuado del Microscopio ya que es un
instrumento que debe manejarse adecuadamente para lograr ver con una buena definición y
precisión el material que se vaya a observar. Y así como también las diferentes partes que lo
conforman, como los objetivos que son 4X, 10X, 40X, 100X logrando cada vez con más precisión la
muestra, la platina, el carro que sirve para desplazar la preparación, la fuente de luz, el diafragma
que abre y cierra controlando la entrada de luz, el cabezal teniendo una o dos lentes oculares,
entre otros.

Por otra parte, la preparación de la muestra sea biológica o células u otros objetos, esta debe ser
preparada sobre el portaobjetos y para poder ser observada debe cubrirla con el cubreobjeto y así
finalmente ser llevada a la platina del microscopio, logrando observar la muestra que es
demasiado pequeña a simple vista.
MEDICIÓN CON PAPEL MILIMETRADO

Lo aprendido de este video fue como se miden las cosas microscópicamente de los diferentes
aumentos de los objetivos, obteniendo de cada objetivo 4, 10, 40, 100 esto se multiplica por el
aumento del lente ocular, es decir, x10, observando la preparación de 1mm de papel milimetrado,
sin embargo, no se logra medir para los aumentos mayores a 400, para esto debemos requerir los
cálculos matemáticos, logrando deducir que a mayor aumento es menor el diámetro del campo
ocular.

Se deben emplear fórmulas como la relación del aumento con el diámetro para poder obtener los
resultados de los aumentos mayores de 400.

También se logró obtener el área del campo ocular empleado con la fórmula de A=r2 donde “r” es
el diámetro, teniendo como resultado que a mayor aumento menor es el diámetro y menor es el
área.

Como podemos ver en una vista de 40X su diámetro es de 5mm, donde se ve detalladamente que
los huevos de artemia salina pueden llegar a medir 0.3mm de diámetro hasta una artemia adulta
que mide 1.4mm de diámetro.

Finalmente también se pueden medir sin papel milimetrado, haciendo uso de las escalas
milimétricas que trae el microscopio incorporadas.

PREPARING A MICROSCOPE SLIDE

A la hora de llevar a cabo esta técnica clave, es importante identificar los peligros potenciales y los
riesgos asociados a ellos.

Preparación de un portaobjetos

Preparar correctamente un portaobjetos para el micróscopo es importante para tener éxito en el

intento de ver células u otros objetos que no suelen ser visibles a simple vista. Para practicar la
preparación de un portaobjetos de montaje húmedo, puedes utilizar un pequeño trozo de papel
de periódico y empezar recortando una letra, que llamaremos «E», ya que es lo que queremos ver
al microscopio.

Coloca el espécimen sobre el portaobjetos utilizando fórceps o pinzas

Utilizando la pipeta, coloca una gota de agua sobre la muestra; es importante que te asegures de
que sólo añades una gota de agua a la muestra, de lo contrario el cubreobjetos que vamos a
añadir flotará sobre la muestra.

Coloque un extremo del cubreobjetos en la platina del microscopio y, con la aguja de montaje,
sujete el cubreobjetos en un ángulo de 45 grados.

Si dejas caer el cubreobjetos rápidamente, se formarán burbujas de aire debajo del cubreobjetos,
que no querrás ver cuando mires por el microscopio, así que recuerda bajar el cubreobjetos muy
lentamente.

Coloca el borde recto de un trozo de toalla de papel o de papel de filtro sobre el portaobjetos
contra un borde del cubreobjetos y aprieta una gota de azul de metileno sobre el portaobjetos en
el otro borde del cubreobjetos, la toalla de papel o el papel de filtro absorberá el agua de debajo
de tu El azul de metileno debe seguir el camino del agua y la mancha será arrastrada por debajo
del cubreobjetos.

Después de utilizar el portaobjetos, retire el cubreobjetos y deseche la muestra adecuadamente,

enjuague el portaobjetos y el cubreobjetos y devuelva el equipo.

VIDEO: BIOLOGY 10 – BASIC MICROSCOPE SETUP AND USE

Consta de cuatro partes:

- Instalación del microscopio

- Uso del microscopio
- Consejos para solucionar problemas
- Limpieza

INSTALACIÓN DEL MICROSCOPIO:

Saque el microscopio del armario. Lleve el microscopio con ambas manos, una sujetando el brazo
y la otra bajo la base del instrumento. Desenrolle el cable de la parte posterior del microscopio y
enchúfelo. El interruptor de encendido/apagado se encuentra en la parte posterior del
microscopio y puede ser difícil de encontrar si el cable de alimentación está todavía envuelto en
los soportes. Compruebe las lentes oculares y gírelas hasta que el número 64 se alinee con la línea
blanca debajo de la parte giratoria de la lente. Compruebe que la lente del condensador está justo
debajo de la platina. Ponga la lente objetiva a baja potencia y mueva la platina a su posición más
alta. Y ajuste la luz a la gama media o media alta. Puedes ajustar la luz más tarde para mejorar la
imagen. La luz más brillante no necesariamente resulta en la mejor imagen. Ahora deberías estar
listo para empezar a utilizar el microscopio.

UTILIZAR EL MICROSCOPIO

Abre la pinza de la platina con una mano y desliza un portaobjetos hacia la parte posterior de la
platina. Asegúrate de que el portaobjetos no pasa por debajo de los clips que lo sujetan. Utilice los
mandos situados en la parte inferior derecha de la platina para centrar la muestra sobre la lente
del condensador. Comience con la lente objetiva de baja potencia y la platina en la posición más
alta. A continuación, mire a través de la lente ocular y enfoque la muestra, que ya debería estar
casi enfocada. Una vez que haya encontrado la muestra a baja potencia, asegúrese de que está
centrada en el campo de visión. A continuación, pase a la siguiente lente objetiva más alta y vuelva
a enfocar. El espécimen debería estar casi enfocado y sólo debería tener que utilizar el botón de
enfoque fino más pequeño. Vuelva a centrar la muestra y estará listo para pasar al objetivo de
mayor potencia .

SOLUCIÓN DE PROBLEMAS

No te preocupes, y acude a su asesor o profesor, ellos te aconsejarán sobre lo que debes hacer en
determinados casos.

Limpieza

Cuando hayas terminado de utilizar el microscopio, retira la platina, y gira el objetivo de menor
potencia en su lugar. Mueve la platina a una posición centrada y el portaobjetos a la izquierda.
Compruebe que la platina está limpia y seca. Apague la luz y la alimentación y enrolle el cable.
Lleve el microscopio con ambas manos de vuelta al gabinete. Asegúrese de que la platina esté
orientada hacia fuera y de que los microscopios no estén amontonados.