UNIVERSIDAD NACIONAL

MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Per, DECANA DE AMRICA)

FACULTAD DE CIENCIA BIOLGICAS

E.A.P. GENTICA Y BIOTECNOLOGA

Informe N1: MICROSCOPA

Curso

LABORATORIO DE BIOLOGA CELULAR

Profesores

ROSA GONZALES GONZALES

JORGE ZEVALLOS ALVA

Alumna

LLACSAHUANGA ALLCCA, Lidia Elena

Cdigo

14100113

Ciclo

Ciudad Universitaria, setiembre del 2014

Laboratorio de Biologa Celular

UNMSM

NDICE

Contenido
MARCO TERICO ................................................................................................................................. 3
MATERIALES ........................................................................................................................................ 4
PROCEDIMIENTO ................................................................................................................................. 5
ESQUEMAS .......................................................................................................................................... 6
OBSERVACIONES ................................................................................................................................. 9
CUESTIONARIO .................................................................................................................................. 10
CONCLUSIONES ................................................................................................................................. 12
BIBLIOGRAFA .................................................................................................................................... 13

Microscopa

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MARCO TERICO
Desde un principio, el avance en los estudios celulares ha estado determinado en gran
medida por nuestra capacidad de observar sus estructuras, es decir, de ampliarlas para
poder observarlas a pesar de su minsculo tamao. Es debido a esto que la microscopa
juega un papel fundamental en la biologa celular, al ser el principal mtodo de estudio de
la clula.
Existen diversos tipos de microscopios: ptico, electrnico de barrido y de transmisin,
etc. Nos concentraremos en las partes del microscopio ptico.
Ocular: Es el lente que se encuentra cercano al ojo del observador. Capta y ampla
la imagen formada en el objetivo.
Objetivo: Son los lentes que se encuentran en el revlver. Es el lente que permite
la mayor y regulable ampliacin de imagen. Son considerados los ms importantes
en la formacin de la imagen microscpica pues determinan el poder de resolucin
Condensador: Concentra y regula los rayos luminosos.
Diafragma: Es el regulador de la cantidad de luz que llega al condensador.
Foco: Origen de la luz, dirige esta al condensador.
Tubo ptico: Cilindro mecnico que porta al ocular en un extremo y a los objetivos
en el revlver en el otro.
Revlver: Sistema rotador que porta a los objetivos de diferentes aumentos.
Macro y micromtrico: Tornillos de enfoque. Varan la distancia entre la platina
donde se ubica la muestra y los objetivos en el revlver. El macromtrico es
utilizado para variaciones ms amplias, mientras que el micromtrico para ms
pequeas.
Platina: Plataforma con orificio central donde se coloca la preparacin (muestra en
un portaobjetos). El orificio permite el paso de luz y posee pinzas para sujetar la
preparacin en su lugar.
Otros conceptos importantes en microscopa ptica:
ndice de refraccin:
Apertura Numrica (NA): capacidad del objetivo de poder captar los rayos refractados por
las estructuras finas de las cuales est constituido el objeto que se observa
Poder de resolucin (PR): capacidad de un objetivo de poder distinguir la distancia
mnima que debe existir entre dos puntos del objeto para que se puedan visualizar como
dos puntos separados.

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MATERIALES
Del Alumno:

Papel lente

Cubreobjetos

Portaobjetos

Navaja de afeitar

Frasco y gotero

Pinza de punta fina

Especmenes:

Bulbo de cebolla

Hojas de elodea

Del Laboratorio
Microscopio de campo claro con condensador mvil y diafragma de campo.

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PROCEDIMIENTO
Primero, verificamos que el microscopio se encuentre en ptimas condiciones. Nos
aseguramos que su luz funcione y luego la apagamos y preparamos las muestras a
observar.
Observacin de Elodea

Con el gotero, colocamos una gota de agua de cao en un portaobjetos.

Con la pinza, cogemos un pequeo pedazo de una hoja de Elodea y lo colocamos
sobre la gota en el portaobjetos.
Formando un ngulo de 45 entre el portaobjetos y un cubreobjetos, soltamos este
ltimo para as cubrir la muestra.
Colocamos el portaobjetos con la muestra de Elodea en la platina del microscopio.
Colocamos la muestra en el medio del campo iluminado.
Abrimos y cerramos el diafragma hasta encontrar una buena iluminacin para esta
muestra.
Enfocamos observando con el lente objetivo de 4, moviendo el macromtrico
primero y luego el micromtrico.
Observamos tambin con el objetivo de 10 y 40, en ambos casos usamos el
micromtrico para terminar de enfocar, sin mover ya el macromtrico.
Realizamos diagramas de lo observado, estos se encuentran en la siguiente seccin
del informe.

Observacin de Catfila de cebolla

Extrajimos la envoltura externa de la cebolla.

Con el Gillette o la navaja cortamos un pequeo rectngulo de cebolla.
De este pedazo de cebolla, cogemos una fina capa, la ms externa, la epidermis,
con la pinza.
Esta capa fina la colocamos en la laminilla con una gota de agua.
Nuevamente, formando un ngulo de 45 entre la laminilla y lmina, cubrimos la
muestra.
Llevamos a la platina a observar y graficamos lo observado en el microscopio con
el objetivo de 4, 10 y 40.

Observacin extra
Tambin realizamos la observacin de una letra pequea cortada de un peridico
para confirma la orientacin de la imagen: volteada.
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ESQUEMAS
Elodea

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Catfila de bulbo de cebolla

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OBSERVACIONES
Elodea
Como observamos este espcimen con 3 diferentes lentes objetivos, vimos con cada uno
de ellos diferentes niveles de detallismo. A continuacin una descripcin de los observado
a distintos aumentos totales.
x40: Con este aumento an podamos observar los bordes de la hoja de Elodea,
pero ya se puede ver ciertas separaciones en los filamentos que componen a la
hoja, parecidos a ladrillos de construccin. Adems, se observa las diferentes
tonalidades de verde.
X100: Este aumento nos permite ya ver a las clulas de la hoja, e incluso observar a
los cloroplastos esparcidos en estas. Vemos que cada clula est separada de otra
por una estructura un poco ms oscura.
X400: Se observa una mayor cantidad de detalles, se podra incluso contar los
cloroplastos en cada clula; adems, al mirar detenidamente, logramos discernir
que estos cloroplastos se encuentran en movimiento (ciclosis). Hay zonas ms
verdes que otras debido a estos cloroplastos, pues, siendo la muestra
tridimensional, hay lugares donde se encuentran uno sobre otros los cloroplastos.
Se ve, tambin, de una manera ms definida, la envoltura que separa a las clulas
unas de otra, la pared celular.
Catfila de cebolla
x40: Vimos un complejo organizado de clulas, estas tenan gorma hexadrica,
como en celdas alargadas, y estaban ordenadas con las dems, encajando como
ladrillos no rectangulares. No se poda observar ms detalles.
X100: Con este aumento ya se puede ver la pared celular entre las clulas e incluso
unas estructuras dentro de la clula (el ncleo) aunque no muy claramente.
X400: Se ve claramente el ncleo dentro de las clulas y la pared celular que las
rodea.

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CUESTIONARIO
1. Explique por qu al hacer la iluminacin Kohler se requiere enfocar una
preparacin antes de desplazar el condensador.
Es necesario para la iluminacin Kohler debido a que se tendr que hacer un
enfoque de los mrgenes del campo iris, y si no hay un espcimen que observar,
no se puede saber propiamente si est o no enfocado. Sabremos que el campo iris
est correctamente enfocado cuando veamos los mrgenes de la muestra
claramente.
Adems, es recomendable realizar esta iluminacin con la muestra que se desea
observar, pues la forma en que esta muestra refracte la luz es nica o diferente a
la de otras; entonces, al realizar la iluminacin con la muestra deseada se obtiene
una mejor observacin.
2. Mencione qu cuidados del microscopio hay que tener al usar el aceite de
inmersin.
Al trabajar con el aceite de inmersin se debe tener en cuenta las siguientes
precauciones:
Apenas se termine la observacin, limpiar cuidadosamente el lente objetivo
con el papel lente para evitar que el aceite se seque, pues de pasar esto, se
tendr que usar una mezcla de alcohol-acetona o xilol para limpiarlo, que a
largas o en demasiada cantidad daan el lente o su sujecin. Adems, tener
cuidado de realizar bien esta limpieza, pues de dejar rastros de aceite en el
objetivo, este puede fluir dentro de la carcasa del microscopio y causar
dao a sus engranajes o a la lente del condensador.
Descartar rpidamente el papel lente usado para la limpieza del objetivo
con aceite para evitar su reutilizacin.
No inclinar el microscopio para que el aceite de inmersin no caiga en otras
partes del microscopio como el condensador, por ejemplo, pues lo daara.
Tambin tener otras precauciones para evitar que esto suceda, como echar
el aceite en el portaobjetos cuando este NO est en la platina, y evitar
derramarlo.
Tener cuidado de no acercar el lente objetivo demasiado a la muestra
cubierta del aceite, pues se puede romper el portaobjetos, causando
raspaduras u otros daos graves al objetivo, o en un caso peor, se puede
romper el objetivo en s.
Al cambiar de muestra y colocar el portaobjetos, nunca girar una lente seca
en la posicin de visin, puesto que si el aceite de inmersin fluye dentro
de una lente cncava, es muy difcil de limpiar completamente.
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3. Explique qu es una preparacin en fresco y qu es una fija.

En esta prctica hemos realizado preparaciones en fresco.
Preparacin en fresco: Es una preparacin inmediata, en ella se pone la
muestra directamente entre el portaobjetos y el cubreobjetos con una gota
de agua. No se fija al fuego ni se le trata demasiado, aunque s se le puede
hacer tinciones vitales. Es la que se usa cuando se desea observar la
movilidad de los microorganismos y tiene la desventaja de no permitir
demasiado contraste y que muchas muestras no llegan a ser visibles con
esta preparacin.
Preparacin fija: Esta es la preparacin que es tratada o fijada ante de ser
observada, puede ser teida y fijada a fuego y es utilizada para observar
estructuras no dinmicas de los microorganismos, gracias a las tinciones
permite una mejor observacin de la muestra, pero sin movimiento.
Demora ms en realizar.

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CONCLUSIONES
El microscopio ptico, incluso con su bajo aumento, es una herramienta vital
para el estudio celular, pues permite la rpida y eficaz observacin de cuerpos
minsculos, definitivamente no visibles a simple vista (Bajo aumento para
estudios moleculares o sus semejantes).
La preparacin correcta y el adecuado mantenimiento del microscopio son
necesarios para una buena observacin, de ser maltratado el microscopio su vida
til se reducir en gran manera y la imagen que nos proporcionar no ser la
mejor.
Los componentes del microscopio ptico brindan la mayor comodidad para el
trabajo, pues consta de diversas partes que podemos ajustar para una buena
observacin.

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BIBLIOGRAFA
Karp, Gerald. Biologa Celular y Molecular. Editorial Mc Graw Hill, 5ta edicin, Mxico,
2009: 728
Ma. Genoveva Gonzlez-Morn. Tcnicas en Biologa Celular, teora y prctica, AGT
Editor, S.A., 1era edicin, 1996
Madigan, M. T., Martinko, J. M. Y Parker, J. Biologa de los microorganismos Prentice
Hall, 8va edicin, Iberia, Espaa, 1997.
Alberts, Bruce. Biologa Molecular de la Clula Ediciones Omega, 2da edicin, Barcelona,
1994
http://zeiss-campus.magnet.fsu.edu/articles/basics/care.html
http://zeiss-campus.magnet.fsu.edu/articles/basics/kohler.html

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