3.

0 PRINCIPIO
Análisis secuencial Inmunoenzimométrico (TIPO 4) F. Sustrato A– 7.0 ml/vial- Icono S A Una desviación significativa a partir de los datos establecidos de
Los reactivos esenciales requeridos para un análisis Una (1) botella que contiene tetrametil benzidina (TMB) en desempeño puede indicar que hay cambios no perceptibles en
inmunoenzimometrico incluyen anticuerpos de alta afinidad y acetato amortiguador. Almacenar de 2-8ºC. condiciones experimentales o degradación de los reactivos del
especificidad (enzima e inmovilizados), con diferentes y distintos kit. Los reactivos frescos serán usados para determinar la razón
reconocimientos de epítopes, en exceso y antígeno nativo. En este G. Sustrato B – 7.0 ml/vial- Icono SB para las variaciones.
procedimiento, la inmovilización toma lugar durante el análisis en la Una (1) botella que contiene Peroxido de Hidrógeno (H 2O2) en
superficie de los pozos de la microplaca a través de la interacción de acetato amortiguador. Almacenar de 2-8ºC. 8.0 PREPARACION DE LOS REACTIVOS
estreptavidina que cubre el pozo con el anticuerpo monoclonal anti- STOP 1. Solución de Lavado
IgE marcado con biotina agregado exógenamente. G. Solución de parada – 8ml/vial – Icono Diluir el contenido de concentrado de lavado en 1000 ml con
Una (1) botella que contiene un ácido fuerte (1N HCL). agua destilada o desionizada en un recipiente adecuado de
Después de mezclar del anticuerpo monoclonal marcado con biotina Almacenar de 2-30ºC. almacenamiento. Almacenar a el amortiguaador diluido de 2-
y el suero que contiene antígeno nativo, la reacción resultante entre el 30ºC hasta por 60 días.
antígeno nativo y el anticuerpo es la formación de un complejo H. Instrucciones del Producto 2. Solución de Substrato de Trabajo
antígeno-anticuerpo. La interacción es ilustrada por la siguiente Vierta el contenido del vial marcado como solución “A” dentro
ecuación: Nota 1: No utilizar los reactivos después de la fecha de vencimiento del vial claro marcado como solución “B”. Ubique la tapa
Ka del Kit. amarilla al vial claro para fácil identificación. Mezcle e
Ag (IgE)+ BtnAc(m) Ag.(IgE) - BtnAc(m) Nota 2: Evitar la exposición prolongada al calor y a la luz.. Los identifique según corresponda. Almacenar de 2-8º C.
K-a reactivos abiertos son estables por 60 días cuando son Nota 1: No use el sustrato de trabajo si se ve azul.
almacenados de 2-8ºC. La estabilidad del kit y los componentes Nota 2: No use reactivos que estén contaminadas o que tengan
Btn
Ac (m)=Anticuerpo monoclonal marcado con biotina (cantidad en son identificados en la etiqueta. crecimiento bacteriano.
exceso) Nota 3: Los reactivos son para cada uno de los 96 pozos de la
Ag (IgE) =Antígeno nativo (cantidad variable) microplaca. 9.0 PROCEDIMIENTO DE PRUEBA
Sistema de Prueba Inmunoglobulina E Ag (IgE) - BtnAc(m)=Complejo antígeno-anticuerpos (cantidad variable) Antes de proceder con el ensayo, permita que todos los
Ka = Tasa Constante de Asociación 4.1 Elementos requeridos que no se suministran: reactivos, los sueros de referencia y los controles se encuentren
(IgE) k-a = Tasa Constante de Disociación 1. Pipeta (s) útil para dispensar 25µl & 50µl, con una precisión a temperatura ambiente (20-27ºC).
Código del Producto: 2525-300 superior a 1.5%. **La prueba puede ser procesada por personal experto o por un
profesional entrenado**
Simultáneamente, el complejo es depositado en el pozo a través de la 2. Dispensador(es) para las distribuciones repetidas de 0.100 ml
reacción de alta afinidad de la estreptavidina y el anticuerpo marcado 0.350ml con una precisión superior al 1.5%.
1.0 INTRODUCCIÓN con biotina. Esta interacción se ilustra a continuación: 3. Lavador de micro placas o frasco lavador (opcional). 1. Marcar los pozos de microplacas para cada calibrador, control y
4. Lector de micro placa con capacidad de absorbancia de 450nm muestra de paciente para ser procesados por duplicado.
Uso: Determinación cuantitativa de la concentración Ag (IgE) –BtnAc (m)+ Estreptavidina C.W. Complejo Inmovilizado (IC) a 620nm. Colocar las tiras no utilizadas nuevamente en la bolsa de
Inmunoglobulina E (IgE) suero humano, mediante ensayo Estreptavidina CW = estreptavidina inmovilizado en pozo 5. Papel absorbente para borrar los pozos de la microplaca. aluminio, sellar y almacenarlo de 2-8ºC.
inmuno-enzimométrico de microplacas. Complejo inmovilizado (IC)= Ag-Ac enlazado al pozo. 6. Envoltura plástica o cubiertas de microplacas para los procesos 2. Pipetee 0.025 ml (25μl) del suero de referencia apropiado,
. de incubación control o muestra dentro del pozo asignado.
2.0 RESUMEN Y EXPLICACION DE LA PRUEBA Luego de un periodo de incubación adecuado, la fracción unida de 7. Aspirador al vacío o vacuo (opcional) para los pasos del lavado. 3. Adicionar 0.100ml (100µl) de solución de reactivo IgE Biotina a
anticuerpo-antígeno es separada del antígeno no unido por 8. Cronómetro cada pozo pozos. Es muy importante dispensar todos los
Reacciones alérgicas, las cuales se han vuelto comunes, son decantación o aspiración. Otro anticuerpo (dirigido contra un epítope 9. Materiales de control de calidad. reactivos muy cerca de la base del pozo recubierto.
diagnosticadas generalmente en base al historial medico y síntomas diferente) marcado con una enzima es adicionado. Otra interacción 4. Agite suavemente la micro placa ligeramente por 20-30 segundos
clínicos. Sin embargo las pruebas in vitro e in vivo, juegan un papel ocurre para formar un complejo anticuerpo-antígeno-marcado con para mezclar y cúbrala.
biotina- en la superficie del pozo. El exceso de enzima es extraído 5.0 PRECAUCIONES 5. Incube 30 minutos a temperatura ambiente.
clave en la confirmación de sospechas clínicas y tratamientos de
adaptación. La medición de inmunoglobulina E (IgE) en sueros es mediante lavado. Se adiciona un sustrato adecuado para producir Para uso Diagnóstico in Vitro 6. Descarte los contenidos de la microplaca por decantación o
color medible con el uso de un espectrofotómetro de microplacas. La No para uso externo o interno en humanos o animales aspiración. Si decanta, seque la placa con papel absorbente.
usada ampliamente en la diagnostico de reacciones alérgicas e
infecciones por parásitos. Gran número de alergias son causadas por actividad enzimática en los pozos es directamente proporcional a la Todos los productos que contienen suero humano han sido hallados 7. Adicione 300μl de tampón de lavado (ver Sección Preparación
inmunoglobulinas de subclase IgE actuando como punto de contacto concentración de antígenos nativos. Mediante el uso de diversas no reactivos para antígeno de superficie de hepatitis B, VIH 1 y 2 y de Reactivos), decante (golpee y seque) o aspire. Repita 2
referencias de sueros de concentración antigénica conocida, se anticuerpos HCV según pruebas exigidas por la FDA. Ninguna prueba veces adicionales para un total de 3 lavados. Un lavador de
entre el alergéno y las células especializadas. Las moléculas de IgE
puede generar una curva de dosis respuesta, de la cual se puede puede asegurar completamente la ausencia de agentes infecciosos, placa automático o manual puede ser usado. Siga las
(MW 200,000) se unen a la superficie de las células centrales y los
deducir la concentración desconocida del antígeno. Todos los productos de suero humano deben manipularse como instrucciones del fabricante para el uso apropiado. Si se
glanulocitos basofílos. Seguidamente la unión de alergéno a la unión-
kb potencialmente peligrosos y con capacidad de transmitir emplea la botella de lavado, llene cada pozo presionándola
celular IgE causa en las células la liberación de histaminas y otras
(CI) + Enz Ac(x-IgE) Enz
Ac (x-IgE) - CI enfermedades. Las buenas practicas de laboratorio para el manejo de (evitar la formación de burbujas). Decante el lavado y repita
sustancias vasoactivas. La liberación de histaminas en el cuerpo
k-b productos sanguíneos pueden ser encontrados en el Centro de 2 veces adicionales.
inicia lo que es comúnmente conocido como una reacción alérgica.
Control de Enfermedades/ Instituto Nacional de Salud, “Bioseguridad 8. Adicionar 0.100 ml (100μl) del anticuerpo IgE marcado con enzima a
Enz
Antes de tomar cualquier determinación terapéutica es importante Ac(x-IgE) = Anticuerpo marcado por enzima (Cantidad en exceso) en Laboratorios Microbiológicos y Biomédicos”, 2da Edición, 1988, cada pozo.
Enz
saber si la reacción alérgica es mediada o no por Inmunoglobulina E. Ac(x-IgE) –CI = Complejo de Antígeno-Anticuerpo HHS Publicación Nº (CDC) 88-8395.
La medición de IgE total en la muestra de suero, además de otra Kb = Tasa Constante de Asociación NO AGITAR LA MICROPLACA DESPUES DE ADICIONAR LA
k -b = Tasa Constante de Disociación La eliminación segura de los componentes del kit debe ser ENZIMA
información de diagnostico de apoyo, pueden ayudar a tomar tal
acorde con los requerimientos estatutarios y de regulación.
determinación. La medida del total de IgE circulante puede ser de
4.0 REACTIVOS 9. Cubra e incube a temperatura ambiente por 30 minutos.
valor en la pronta detección de alergias en niños y como un medio
Materiales Proporcionados: 6.0 RECOLECCIÓN Y PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS 10. Desechar el contenido de la microplaca por medio de decantación o
para predecir futuras manifestaciones atópicas. Antes de decidir
A. Suero Humano de Referencia – 1.0 ml/vial- Iconos A- F Se deben emplear las precauciones en la recolección de muestras aspiración. Si se realiza decantación, seque la placa con papel
sobre cualquier terapia es importante considerar toda la información
clínica relevante así como la información proporcionada por el análisis Seis (6) viales de suero humano basodo en calibradores de por punción venosa para las muestras de suero o sangre. La muestra absorbente.
específico de alergias. referencia con concentraciones de 0 (A), 5 (B), 25 (C), 50 (D) de suero debe tomarse en la mañana para obtener unos resultados 11. Adicionar 350μl de tampón de lavado (ver Sección Preparación de
150 (E) y 400(F) IU/ml. Almacenar de 2-8ºC. Un preservante ya exactos. La sangre se recolecta por punción venosa en un tubo tapa Reactivos), decantar (con golpe o con secado) o aspirar. Repetir 2
Los niveles de IgE muestran un aumento mínimo durante la niñez, ha sido adicionado. (Los calibradores fueron estandarizados roja sin aditivos o barrera de gel. Permitir que la sangre coagule. veces adicionales para un total de 3 lavados. Puede usarse un
alcanzando niveles adultos durante la segunda década de vida. En contra WHO’s “2ndIRP 75/502 para IgE) Centrifugue la muestra para separar el suero de las células. lavador de placa automático o manual. Siga las instrucciones
general, los niveles totales de IgE aumentan con las alergias que del fabricante para el uso apropiado. Si se usa un frasco
presentan una persona y el número de veces que está expuesta a los B. Reactivo Biotina IgE - 13 ml/vial – icono  Las muestras pueden ser refrigeradas de 2-8ºC por un período lavador, llene cada pozo descomprimiendo los contenedores
alergénos relevantes. Un aumento significativo puede verse en Un (1) vial que contiene IgE mlgG anti-humana con biotina, máximo de cinco (5) días. Si la muestra no puede ser ensayada (evitar las burbujas de aire) para dispensar el lavado. Decantar
individuos sensibilizados, pero también en casos de mieloma, reactivo presentada en matriz proteica estabilizadora. Un dentro de este tiempo, la muestra puede ser almacenada a el lavado y repetir 2 veces adicionales
aspergilosis pulmonar y durante las etapas activas de infecciones preservante ha sido adicionado. Almacenar de 2-8°C. temperatura de -20ºC por hasta 30 días. Evitar los ciclos de 12. Adicionar 0.100ml (100μl) de solución de sustrato de trabajo en todos los
congelación y descongelación repetitivos. Cuando ensayamos en pozos (Ver Sección de preparación de reactivos). Siempre adicione
parasitarias.
C. Reactivo de Enzima IgE - 13 ml/vial – icono E duplicado, se requiere 0.050ml de la muestra. reactivos en el mismo orden para minimizar las diferencias del
En este método primero se adicionan el calibrador IgE, y el control o Un (1) vial que contiene un complejo de IgE-HRP anti-humano tiempo de reacción en los pozos.
muestra del paciente al pozo revestido con estreptavidina. El en una proteína matriz estabilizada. Un preservante ha sido 7.0 CONTROL DE CALIDAD
Cada laboratorio debe analizar controles externos a niveles en NO AGITAR LA PLACA DESPUES DE LA ADICIÓN DEL
anticuerpo monoclonal marcado con biotina (especifico para (IgE) se adicionado. Almacenar de 2-8ºC.
los rangos de hipotiroides, eutiroides e hipertiroide para SUSTRATO
adiciona y se mezclan los reactivos. La reacción entre los anticuerpos
IgE y los IgE nativos forma un complejo que se une con la D. Placa recubierta con estreptavidina – 96 pozos– Icono monitorear el desempeño de los ensayos. Estos controles deben 13. Incubar a temperatura ambiente por 15 minutos.
estreptavidina que recubre el pozo. El exceso de proteínas en suero Una micro placa de 96 pozos recubiertos con estreptavidina y ser tratados como desconocidos y los valores determinados en 14. Adicionar 0.050 ml (50μl) de solución de parada a cada pozo y
es removido por medio del lavado. empacada en bolsa de aluminio con agente desecante. cada procedimiento de prueba realizada. Se mantendrán gráficos mezclar ligeramente (por 15-20 segundos).
Almacenar de 2-8ºC. de control de calidad para hacerle un seguimiento al desempeño 15. Leer la absorbancia en cada pozo a 450nm (usando una referencia
Otro anticuerpo monoclonal marcado con enzima específica para IgE
de los reactivos suministrados. Se deberán utilizar métodos de longitud de onda de 620-630nm para minimizar las
es adicionado los pozos. El anticuerpo marcado con enzima se une a
la inmunoglobulina E ya inmovilizada sobre el pozo a través de su E. Concentrado de solución de lavado – 20 ml- Icono estadísticos pertinentes para evaluar las tendencias. Los imperfecciones de los pozos) en un lector de microplacas. Los
unión con el anticuerpo monoclonal marcado con biotina. El exceso Un (1) vial que contiene un surfactante en solución salina laboratorios en particular deberán establecer límites aceptables resultados deben ser leídos dentro de los treinta (30) minutos
amortiguada. Un preservante fue adicionado. Almacenar de 2- de desempeño de los ensayos. Adicionalmente, la intensidad después de la adición la solución de parada.
de enzima es removido por medio del lavado. Un color es generado
8ºC. máxima de luz deberá ser consistente con lo registrado
por la adición de un sustrato. La intensidad del color es directamente
proporcional a la concentración de IgE en la muestra. anteriormente.
.
10. 0 CALCULO DE RESULTADOS 3. No se deben emplear muestras altamente lipémicas, 14.0 CARACTERISTICAS DEL RENDIMIENTO Tabla 5
Una curva dosis respuesta es usada para hallar la concentración IgE Hemolizadas o contaminadas. 14.1 Precisión Muestra observado esperado % recuperación
en muestras desconocidas. 4. Si más de 1 placa es usada, se recomienda repetir la curva de Para validar las precisiones intraensayo del sistema de prueba IgE
1. Registrar la absorbancia obtenida del listado del lector de respuesta a la dosis. AccuBInd TM ELISA se analizaron veinte replicas de cada uno de los Pool 1 106.8 - -
microplacas como se indica en el Ejemplo 1. 5. La adición de la solución sustrato inicia una reacción cinética, la tres sueros Pool (rangos bajo, medio y altos de la curva de dosis Pool 1/2 50.8 53.4 95.1
2. Graficar la absorbancia para cada calibrador en duplicado vs la cual es terminada mediante la adición de la solución de parada. respuesta) durante el mismo análisis. Se obtuvo una precisión Pool 1/4 25.3 26.7 94.8
concentración correspondiente IgE en IU/ml en papel lineal de Por lo tanto el sustrato y solución de parada deben ser intraensasyo de 1.95 a 5.87%. Pool 1/8 13.4 13.3 100.6
gráficos (no promediar los duplicados de los calibradores antes adicionados en la misma secuencia para eliminar cualquier TABLA 2 Pool 1/16 6.6 6.7 98.5
de graficar). derivación de tiempo durante la reacción. Precisión Intra-Ensayo (valores en IU/ml)
Pool 2 395.9 - -
3. Sacar la mejor curva de ajustes a través de los puntos de la 6. Los lectores de placa realizan mediciones verticalmente. No MUESTRA N X σ C.V.% Pool 2/2 189.5 197.9 95.8
grafica). tocar el fondo de los pozos. Bajo 20 48.9 2.87 5.87 Pool 2/4 106.1 98.9 107.2
4. Para determinar la concentración de IgE de una muestra 7. La falla al remover solución adherida en los pasos de aspiración Medio 20 160.5 6.47 4.03 Pool 2/8 48.0 49.5 96.9
desconocida, localizar la absorbancia promedio de los duplicados o decantación puede resultar en replicación baja y resultados Alto 20 297.6 5.81 1.95 Pool 2/16 25.8 24.7 104.2
desconocidos en el eje vertical del gráfico, encontrar el punto de incorrectos.
intersección sobre la curva y leer la concentración (en UI/ml) del eje 8. Usar los componentes del mismo lote no mezclar los reactivos Para validar la precisión interensayo del sistema de prueba IgE
horizontal del gráfico (los duplicados desconocidos pueden ser de diferentes lotes. 14.7 Recuperación.
AccuBInd TM ELISA, se analizó por duplicado los tres sueros (rangos
promediados como se indica). En el siguiente ejemplo, la absorbancia 9. Es esencial un pipeteo preciso y exacto así como seguir el Dos Pools de pacientes fueron provistos con cantidades conocidas de
bajo, medio y altos de la curva de dosis respuesta) en 10 pruebas
promedio (1.323) intersecta la curva de dosis respuesta en una tiempo exacto y la temperatura requerida. Cualquier desviación IgE y analizadas con el sistema de prueba IgE AccuBInd TM ELISA.
durante un periodo de seis meses que incluyeron cinco diferentes
concentración de IgE de 142 UI/ml (Ver Figura 1). de las instrucciones de uso Monobind´s IFU puede arrojar Los valores observados y esperados se muestran en la tabla 6.
Pools de reactivos y tres diferentes técnicas. Se obtuvo una precisión
resultados inexactos. de 3.52 a 8.42%. Ver tabla 3 a continuación.
NOTA 1: El software reducción de datos de computadoras diseñadas 10. Se deben seguir las buenas prácticas de laboratorio todos los Tabla 6
TABLA 3
para (ELISA) también puede ser utilizados para la reducción de estándares nacionales aplicables, regulaciones y leyes de Precisión Inter-Ensayo (en IU/ml) Muestra Observado (O) Esperado (E) % Recuperación
datos. Si tal software es utilizado, la variación del software debe manera estricta para asegurar el cumplimiento y uso adecuado MUESTRA N X σ C.V. % IU/ ml IU/ ml (O/E)
ser comprobada del dispositivo Bajo 10 46.3 3.9 8.42
11. Es importante calibrar todos los equipos, por ejemplo: pipetas, Medio 10 157.0 7.3 4.64 Pool 1 25.7 - -
EJEMPLO 1
lectores, lavadores y/o instrumentos automatizados con este Alto 10 301.0 10.6 3.52 Pool 1+25 50.7 50.7 100.0
reactivo y realizar un mantenimiento preventivo rutinario Pool 1+50 74.8 75.7 101.2
Media Abs Conc.
I.D. Pozo Abs 12. El análisis de riesgo – como lo requiere la directiva IVD Pool 1+100 122.7 125.7 97.6
(B) 14.2 Sensibilidad
98/79/EC de la marca CE- para estos y otros dispositivos Pool 1+200 232.0 225.7 102.7
El Sistema de prueba IgE AccuBInd TM ELISA posee una sensitividad
A1 0.014 elaborados por Monobind, pueden ser solicitados vía Email: Pool 2 12.3 - -
Cal A 0.015 0 de 0.125 IU/ml. La sensitividad fue acertada por determinación de la
[email protected] Pool 2+25 41.7 37.3 111.2
B1 0.016 variabilidad del suero calibrador 0 IU/ml y usando las estadísticas de
2 (95% certeza) estadistica para calcular la dosis mínima. Pool 2+50 62.6 62.3 100.6
C1 0.072
Cal B 0.073 5 12.2 Interpretación Pool 2+100 109.4 112.3 97.4
D1 0.074
14.3 Exactitud: Pool 2+200 197.2 212.3 92.8
E1 0.364 1. Medidas e interpretación de resultados deben ser
Cal C 0.345 25 El Sistema de Prueba IgE AccuBInd TM ELISA fue comparado con un
F1 0.326 procesadas por personal capacitado o profesionales
método de radioinmunoanálisis de tubo cubierto (IRMA) de referencia. 15.0 REFERENCIAS
G1 0.663 entrenados.
Cal D 0.639 50 2 Los resultados de laboratorio por si solos son únicamente un Se utilizaron muestras biológicas con niveles de IgE de rangos bajo,
H1 0.614
aspecto para determinar el cuidado del paciente y no deben ser medio y alto (Los valores presentaron un rango de 0.8 a 3100 IU/ml).
A2 1.340 El número total de tales muestras fue 219. La última ecuación de
Cal E 1.364 150 la única base para una terapia, particularmente si los resultados
B2 1.388 regresión cuadrática y el coeficiente de correlación fueron
C2 2.601 están en conflicto con otros determinantes.
Cal F 2.641 400 3. Para resultados de pruebas válidas, los controles adecuados computadas para el método IgE AccuBInd TM ELISA en comparación
D2 2.682 con el método de referencia. (Tabla 4)
y otros parámetros deben estar dentro de los rangos listados y
Control E2 2.575 requerimientos del ensayo.
2.562 375.3 TABLA 4
1 F2 2.549 4. Si los kits de prueba están alterados, ya sea por mezcla de
Control G2 0.818 partes de diferente kits, lo cual puede producir resultados de Método Media Análisis de regresión Coeficiente
0.813 71.2 de mínimos Correlación
2 H2 0.807 prueba falsos o si los resultados son interpretados
A3 1.322 incorrectamente, Monobind no tendrá responsabilidad. cuadrados
Paciente
1.323 142.0 5. Si se utiliza el sistema de reducción de datos controlados por Monobind 179 y = 12.9 + 1.21 (Y) 0.967
1 B3 1.324
Computador para interpretar los resultados del ensayo, es EIA “X”
necesario que los valores de predicción para los calibradores se Referencia 157
* Los datos presentados en el Ejemplo 1 y Figura 1 son únicamente IRMA “Y”
ubiquen dentro del 10% de las concentraciones asignadas.
para ilustración y no deben ser usados en busca de una curva de .
6. Las concentraciones de suero IgE depende de una multiplicidad
dosis respuesta que se debe procesar para cada ensayo. Solo unas mínimas cantidades de sesgo entre el procedimiento de
de factores, incluyendo si el paciente es sensibilizado, cuantas
veces que el paciente ha estado expuesto a un alérgeno ELISA de micro placas Monobind a AFP AccuBind y el método de
Figura 1 referencia se indican por la cercanía de los valores medios. La
específico, etc. La concentración de IgE total por si sola no es
suficiente para hacer un diagnostica de el estado clínico del ecuación de regresión de mínimos cuadrados y el coeficiente de
paciente. Los hallazgos clínicos especialmente test de alergia correlación indica que hay una excelente concordancia entre los
Absorbancia (s)

deberán ser tenidos en cuenta mientras se determina el estado métodos.

del paciente.
7 Ya que todas las reacciones atopicas no son mediadas con IgE, 14.4 Especificidad
toda la información clínica relevante debe ser tomada en Se evaluó la especificidad del sistema de prueba IgE AccuBInd TM
consideración antes de tomar una determinación para los ELISA para inmunoglobulinas relacionadas mediante la adición de
pacientes que pueden estar en un rango normal. aquellas con concentración fisiológica doble en el suero matriz. No se
detectaron reacciones cruzadas entre los anticuerpos usados y las
13.0 RANGOS DE VALORES ESPERADOS moléculas relacionadas. Revisión: 3 Fecha: 061112 DCO: 0651
El estudio de una poplación de grupos de diferentes edades se llevo Cat #: 2525-300
Valores de Ig E en Ul/ml acabo para evaluar el sistema de prueba IgE AccuBind TM ELISA. 14.5 Efecto Gancho.
Los resultados son presentados en la Tabla 1. Ya que el análisis es secuencial en diseño, altas concentraciones de
IgE no muestran el efecto Gancho. Muestras de pacientes con
TABLA 1 Myeloma presentan concentraciones superiores a 8 millones IU/ml
11.0 PARAMETROS DE CONTROL DE CALIDAD
Valores Esperados del Sistema de Prueba IgE AccuBind TM ELISA demostraron niveles extremadamente altos de absorbancia.
Con el fin de validar los resultados del análisis se deben seguir (en IU/ml)
los siguientes criterios: 14.6 Linealidad
1. La absorbancia (OD) del calibrador “A” debe ser ≤ 0.1 Edad Número Media Rango
(Años) (n) Absoluto Se analizaron dos Pools de pacientes diluidos (en Calibrador “A”) y
2. La observancia (DO) del calibrador F’ debe ser ≥1.3 sin diluir con el sistema de prueba IgE AccuBInd TM ELISA. Los
3. 4 de 6 pools de control de calidad deben estar dentro de los 0-3 31 6.4 ND – 46 valores observados y esperados se muestran en la tabla 5.
rangos establecidos. 3-16 43 25.0 ND-280
Adulto 145 43 0-200
12.0 ANALISIS DE RIESGOS
El MSDS y Forma de Análisis de Riesgo para este producto está Se sugiere que cada laboratorio establezca sus propios rangos para
disponible en la solicitud de Monoblind Inc. poblaciones normales y anormales. Estos rangos dependen siempre
12.1 Desempeño del análisis de la localización, población, laboratorio, técnica y especificidad del
método.
1. Es importante que el tiempo de reacción en cada pozo sea
mantenido en forma constante para obtener resultados
reproducibles.
2. El pipeteo de las muestras no se extenderá más de 10 minutos
para evitar derivar el análisis.