Titulación de Aminoácidos

Amino acid titration

Dayana Trujillo Candela & Sara Valentina Ortiz Torres

Laboratorio de bioquímica. Programa de Química. Facultad de Ciencias Básicas. Universidad de la

Amazonia

Fecha:14/02/22

Resumen
Se realizó una titulación acido-base para determinar los dos pK de la glicina donde se
compararon con los valores de la literatura arrojando una pequeña diferencia, se realizó una
curva de valoración a partir de los datos obtenidos, que posteriormente se observaron los saltos
de pH (pH=pK) según la gráfica, teniendo en cuenta esto se determinaron los pK experimentales
para cada grupo (amino y carboxilo) de la glicina para poder así poder describir la forma iónica
teniendo en cuenta teniendo en cuenta la variación del pH para cada caso.
Palabras claves: Forma iónica, glicina, pk, valoración de neutralización

Abstract
An acid-base titration was carried out to determine the two pK of glycine where they were
compared with the values in the literature, showing a small difference, a titration curve was made
from the data obtained, which later the pH jumps were observed. (pH=pK) according to the
graph, taking this into account, the experimental pK were determined for each group (amino and
carboxyl) of glycine in order to be able to describe the ionic form taking into account the
variation in pH for each case .
Keywords: Ionic form, glycine, pk, neutralization titration

Introducción Los aminoácidos son compuestos orgánicos

que contienen un grupo amino (-NH2) y un
Los aminoácidos son un grupo heterogéneo grupo carboxilo (-COOH) u otro grupo
de moléculas que poseen unas características acido, como un grupo sulfonato (-SO3). La
estructurales y funcionales comunes. Existen mayoría de los aminoácidos biológicamente
veinte aminoácidos diferentes especificados relevantes, la fracción de amina es primaria
en el código genético, existen otros menos (-NH2) pero algunos como por ejemplo
frecuentes que se forman por modificaciones Sarcosina son aminas secundarias (-NH-) y
enzimáticas en el proceso de otras contienen aminas terciarias por
traducción(Feduchi et al., 2011). ejemplo la Pirolina es amina terciaria se
denomina iminoacidos (=N-)(Dietzen, potenciómetro con soluciones
2018). amortiguadoras, la primera solución
amortiguadora de referencia de pH=7 y una
Los aminoácidos son los bloques de solución de ajuste de pH=4.XZ
construcción fundamentales de péptidos y
proteínas. Los péptidos, que son cadenas de Se agregaron gotas de HCl al Erlenmeyer y
aminoácidos, se usan con frecuencia como se tomó lectura del pH de la solución (pH
moléculas de señalización dentro del cuerpo inicial de la solución aminoácido).
(algunas hormonas son péptidos). Las
proteínas, que son péptidos muy grandes, Para la titulación del aminoácido, se
tienen una variedad de usos (13.15: PKa y agregaron volúmenes de 0.5ml y se tomó
Aminoácidos - Química LibreTexts, n.d.).  lectura del pH, hasta llegar al pH de la
solución de NaOH.
En solución acuosa y a pH fisiológico, un
aminoácido se encuentra normalmente como
molécula ionizada o ion dipolo, lo que se Resultados y discusión
conoce como zwitterion, en la que el grupo
amino gana un protón y adquiere una carga Al realizar la titulación se escogió como
positiva, mientras que el grupo carboxilo aminoácido la glicina la cual presenta dos
pierde el protón y adquiere una carga pK uno es el del ácido carboxílico y el otro
negativa. En estas circunstancias, la es el del grupo amino no presenta un tercer
molécula sigue siendo globalmente neutra, pK como algunos otros aminoácidos y esto
aunque presenta grupos cargados se debe a que el grupo R que presenta este
individuales. Pues bien, cada aminoácido aminoácido no interacciona al estar en un
presenta unos valores de pKa que le medio ácido o en un medio básico. Al iniciar
identifican (Skoog et al., 2001). las curvas la titulación de la glicina como aminoácido
de titulación de aminoácidos permiten
el pH inicial que presentaba el aminoácido
medir el Pka de los grupos ionizables, las
después de añadirle unas gotas de ácido
formas ionizables del aminoácido y la carga
eléctrica en cada rango de pH, de igual clorhídrico era de 1,09, la adición del HCl a
manera el punto isoeléctrico. la glicina se hace con el fin de protonar el
NH2 (grupo amino) para que a medida que
El objetivo de la practica fue evidenciar las se vaya agregando el NaOH la glicina pueda
propiedades iónicas de un aminoácido a pasar por cada uno de sus pK y por el punto
partir del comportamiento del mismo en la isoeléctrico (PI).
curva de titulación.
Tabla 1. Valores obtenidos a partir de la
titulación de la glicina
Volumen Valores
Metodología añadido del de pH
NaOH (mL)
En un Erlenmeyer de 250ml se agregaron
25ml de solución de aminoácido, la cual se 0,5 1,18
colocó en una plancha de agitación con un 1 1,42
agitador magnético. Posteriormente se 1,5 1,56
agregaron 25ml de solución de NaOH con 2 1,68
una concentración de 0.3N. Se calibro el 2,5 1,85
 3 1,94
3,5 2,05
experimentalmente se obtuvo un pK para el
4 2,15
grupo carboxilo de 3,37 y para el grupo
4,5 2,28
5 2,41 amino fue de 9,05 y el punto isoeléctrico es
5,5 2,58 de 5, 97; estos valores obtenidos
6 2,75 experimentalmente presentan una pequeña
6,5 3,03 variación a los valores de pK y PI de la
7 3,37 literatura ya que los valores de la literatura
7,5 5,23 es de 2,34 para el grupo carboxilo, el pK del
8 9,05 amino es de 9,60 y para PI es de 5,97, esto
8,5 9,67 se debe a que no se preparó de manera
9 9,87 correcta la muestra que en este caso es la
9,5 10,08 glicina como aminoácido, el aire
10 10,25 acondicionado del laboratorio hace que varie
10,5 10,42 también pH en el potenciómetro , otra razón
11 10,48 puede ser a que no se calibró de manera
11,5 10,52 correcta el potenciómetro dando así valores
12 10,76 distintos de pH.
12,5 10,87
Imagen 1. Curva de valoración para la
13 10,93
13,5 11,03 glicina
14 11,16
14,5 11,42
15 11,84
15,5 12,01

En la titulación se fue agregando 0,5 mL de

NaOH y se tomaba el pH para cada volumen
añadido donde al agregar el primer volumen
de NaOH que fue de 0,5 mL arrojó un pH de
1,18, se realizó el mismo procedimiento
hasta llegar a un pH de 12,01 que fue donde
terminó la titulación, lo dicho anteriormente
se puede apreciar en la tabla 1 donde se En las valoraciones de aminoácidos se
muestra de una manera más específica los encuentran diferentes etapas de disociación
datos obtenidos en la valoración. que presentan valores de pK diferente, la
primera etapa es el pKc está presenta
A partir de los datos obtenidos se realiza la
concentraciones iguales del dador de
curda de valoración de la glicina donde el
protones (H3N+CH2COOH) y del aceptor de
eje x es el volumen añadido y el eje y es el
(H3N+CH2COO-); el pkN presenta
pH que cambia a medida que se agrega
concentraciones equimoleculares de
solución de NaOH. En el grafico 1 se puede
(H3N CH2COO ) y (H2NCH2COO ) como se
+ - -
determinar los pK del aminoácido, donde
 Diagnostics. Elsevier Inc.
https://doi.org/10.1016/B978-0-12-
puede observar en la imagen 1. El PI solo 816061-9.00013-8
presenta altas concentraciones de  Feduchi, E., Romero, C., Blasco, I.,
(H3N+CH2COO-) indicando así que la & Yañez, E. (2011). Bioquímica
molécula no posee carga eléctrica neta. conceptos esenciales. Editorial
Medica Panamericana, 379.
Imagen 1. Formas iónicas de la glicina
 Skoog, D. A., Ramírez Medeles, M.
del C., Zugazagoitia Herranz, R., &
Santos Aquino, L. B. (2001).
Química analítica.

Conclusiones
Las titulaciones de los aminoácidos es un
buen método para determinar los pK y el
punto isoeléctrico presentes en cada
aminoácido que en este caso es la glicina y a
partir de los pK se determina la forma iónica
de cada grupo presente en la glicina, para
este caso los pK experimentales fueron un
poco diferentes a los de la literatura esto se
debe a los errores del analista y errores
aleatorios que no se podían controlar.

Referencias
 13.15: pKa y aminoácidos - Química
LibreTexts. (n.d.). Retrieved
February 12, 2022, from
https://chem.libretexts.org/Ancillary
_Materials/Worksheets/Worksheets
%3A_Inorganic_Chemistry/
Structure_and_Reactivity_in_Organi
c_Biological_and_Inorganic_Chemis
try/13%3A_Concepts_of_Acidity/
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s
 Dietzen, D. J. (2018). Amino acids,
peptides, and proteins. In Principles
and Applications of Molecular