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ION INTERNACIONAL
LONES DE YUCA IN VITRO~

William M. Roca
Fisiólogo. Unid ad de Recursos Genéticos. CIA T. Cali. Colombia

Jorge Rodrígu ez
Asistente de lnvestig .. Unidad de Recu rsos Genéticos. C IAT . Ca li, Colombia

Resumen
La yuca se propaga tradicionalmente en forma vegetat iva, y
cas i siempr e a partir de partes de tallo . Este tipo de propagación
permite mantener indefinidamente la pureza ge nética de un
clon o variedad además de su variabilidad o heterocigocidad.
La propagación de la yuca mediante la semi lla sexual es
menos comú n pero es útil en trabajos genéticos y también para
introducir yuca en países que pueden manejar este tipo de
material. Cada uno de los métodos de propagación menciona-
dos tiene sus ventajas y desventajas respecto a la introd ucción
de nuevas variedades promisorias a un país, la cual acarrea
también el peligro de introducir plagas y enfermedades .
126 ror~rfladr\ p1 omt w na, de \ uca l'll Aménca l.atmu

En contraste con lo anterior, el cultivo in vitro de meristemas

caulinares y sus modificaciones constituyen la técnica más útil
de propagación de la yuca. El cultivo de meristemas mantiene
aislado el material vegetativo de posibles contaminantes, mate-
rial que puede considerarse prácticamente libre de problemas
patogénicos. Debido a que este sistema de cultivo ocupa poco
espacio y tiene una alta tasa de propagación potencial , puede
ser usado en el intercambio internacional de clones de yuca.
Dis trib ución ... de c/one_r tle y uca in rllro 127

Introducción
La yuca se propaga preferentemente en forma vegetativa. La propaga-
ción vegetativa no sólo sirve al agricultor en la producción de materiales
para la siembra sino que permite también al fito mejorador utilizar y
mantener indefinidamente un genotipo deseado una vez que éste ha sido
identificado. Además, mediante la propagación vegetativa la planta de
yuca conserva toda su variabilidad genética (heterocigocidad) en un solo
individuo; por el contrario, los caracteres de la planta segregan mucho
cuando ésta se propaga sexualmente (Martín, 1976). Varios problemas son
inherentes a la propagación vegetativa de la yuca; aquélla se puede conver-
tir en una forma de diseminación de plagas y enfermedades, sobre todo
-entre éstas últimas- de las causadas por organismos sistémicos como
los de tipo vi ral, muy peligrosos por su alta trasmisibilidad y dificil
detección. Por esta ra zó n, numerosas variedades se han infectado comple-
tamente con uno o más virus, lo que ha disminuido su rendimiento y
deteriorado la calidad de las raíces.
La diseminación de enfermedades con el material vegetativo de la yuca
adquiere mayor peligrosidad cuando ese material se emplea para el inter-
cambio de germoplasma entre países o regiones. El peligro puede ser aún
mayor cuando las estacas se despachan del centro de origen de la yuca a
otras regiones, ya que aquél también es, por lo general, centro de diversifi-
cación de plagas y enfermedades.
Avances recientes en los métodos de cultivo de tejidos permiten la
propagación in vitro de la yuca (Kartha et al., 1974; CIAT, 1979), con
ventajas evidentes sobre las formas convencionales de propagación.

Propagación de la yuca in vitro

El cultivo de meristemas caulinares y sus modificaciones (CIAT, 1980)
se considera la técnica más práctica de propagación de la yuca in vitro. El
cultivo de meristemas permite conservar el material vegetativo aislado de
contaminantes, por lo cual aquél se puede considerar como "cultivo áxeno
de la yuca". Debido a que requieren espacio pequeño y a su alta propaga-
ción potencial , los cultivos de meristemas pueden ser usados para el
mantenimiento e intercambio internacional de clones de yuca. Es posible
mantener bancos de germoplasma como cultivo in vitro con la ventaja de
que ocuparán un espacio reducido, estarán limpios de enfermedades y
protegidos de ellas, y su costo será menor que si se mantienen como clo nes
en el campo. En el CIAT se realiza este tipo de trabajos (CIAT, 1980).
En una planta infectada, el número relativo de patógenos tiende a
disminuir acropetalmente hacia el meristema a pica\ del tallo (Quak, 1977).
Aunque existen pocos ejemplos de la presencia de patógenos de tipo viral
128 raru:dadr~ prnmuorta\ de y uro rn AmPrtru 1 utma

en los meristemas, se puede generalizar la afirmación de que la posibilidad

de la ausencia de virus en los meristemas es mayor que en los tejidos más
diferenciados de la planta (Walker y Webb, 1968). Por tanto, el aisla-
miento cuidadoso de los .meristemas a pica les del tallo y su cultivo en un
medio nutritivo estéril hasta lograr el crecimiento y desarrollo de plantas ,
constituyen un sistema de propagación vegeta tiva de material limpio.
El grado de limpieza aumenta si se expone el material enfermo a trata-
mientos físicos o químicos -o de a mbas clases- que ejercen efectos
deletéreos sobre la multiplicación y ge nera lmente. sobre el movimiento del
patógeno en la plan ta (Walkey y Cooper, 1975). El nú mero de plantas de
yuca libres de los síntomas de la enfermedad cuero de sapo fue superior al
90% cuando se cu lt ivaron meristemas de 0.4 a 10.6 mm de ta maño,
procedentes de yemas brotadas a 40°C (temperatura diurna) y 35°C (te m-
peratura nocturna) durante tres sema nas. Esta condición de limpieza se
mantiene después de varias generacio nes de propagación vegetativa de los
ma teriales.
La propagación de plantas limpias de virus que se puede n o btener po r el
culti vo de meristemas es va riable, dependiend o del virus, de la variedad y
del uso apropiado de la técnica. Por este motivo , se hace necesari o com-
probar la limpieza de las plantas mediante la aplicación de técnicas sensiti-
vas de detección. El conocimiento de estos métodos en la yuca es todavía
fragmenta rio pero se realizan esfuerzos para com pleta rlo (CIAT, 1980).
Una vez que un clon ha sido limpiado de enfermedades, debe se r
multiplicado en cantida d suficiente aplicand o téc nicas de propagació n
rápida para la producción de "semilla" básica, proceso en el cual deben
adoptarse medidas fitosanitarias para minimizar la contaminación de los
materiales po r enfermedades. Sin embargo, es de esperar siempre cierto
grado de contaminación -aunque ésta puede ser prácticamente elimi-
nada- al menos en las primeras fases de producción de semilla básica
mediante el uso de técnicas in vitro. La modificación de las condiciones
químicas y fí sicas del cultivo ha permitido inducir la proliferació n de tallos
múltiples a partir de ápices meristematicos, tallos que pueden ser micro-
pro pagados, a su vez, por medio del cultivo de nudos in vitro. El potencial
de multiplicación de esta técnica eleva la producción por un facto r de 10
cada mes (CIAT, 1981). El material producid o por esta multiplicación
puede ser mantenido, como también distribuido, in virro .

Distribución de clones in vitro

Plántulas mantenidas in vitro en un medio nutritivo artificial estéril, que
se desarrollaron partiendo de me"ristemas de 0.4-0.6 mm de tamaño corta-
dos de brotes crecidos en termoterapia, deben co nsiderarse libres de insec-
 •

Dntrihuciún . . t/(' done'' de ruca in r11ro 129

tos, ácaros, nematodos, hongos y bacterias (Kahn, 1977). Una contamina-

ción -de haberla- podría ser detectada po r su aparición en el mismo
medio de cultivo. Si se trata de organismos fa stidiosos, estos podrían ser
detectados usando un medio de cultivo que pueda sopo rtar su creci miento.
Para comproba r la ausencia de parásitos o bligados, como los virus. se
deberán a plicar las técnicas de detección dispo nibles.
Los cultivos in vitro, po r su relativa limpieza de enfermedades, son uno
de los métodos más eficaces para minimizar los riesgos de dise minación de
plagas y enfermedades en el intercambio de clones de yuca . Además, por su
tamaño pequeño, los cultivos in vitro pueden satisfacer las reglamentacio-
nes cuarentenarias.
Esos regla mentos varía n enormemente de un país a otro. Hay algunos
que admiten la introducción de estaca s, como ocurre en va ri os países de
Am érica Latina y de Asia del Sur; o tros, en Africa y en América Latina ,
prohiben terminantemente esa introducción. La posibilidad de que se
establezca un microo rganismo de significación cuaren tenaria. de la yuca
(Lozano, 1977) en una región será ma yor cuanto más a lta sea la frecuencia
de introducciones de material vegetativo en la ausencia de barreras cuaren-
tenarias. La función de los programas de cuarentena es evitar la introd uc-
ción y posible establecimiento de plagas y enfermedades pel igrosas; en este
sentido, el uso de los cultivos in vitro constituye una forma de protección
adicio na l contra dicho peligro.
El proceso de transferencia de clones de yuca in virro comprende los
siguientes pasos (Figu ra 1):
l . Establecimiento de los cultivos in virro. Se debe tener en cuenta que
cua nto má s sensi bles sea n las técnicas de detecció n de patógenos,
mayo r será la seguridad de la limpieza de los materiales para su
distribución .
La forma más práctica de envío de los cultivos in vitro, desde el punto
de vista de su faci lidad de manejo en el país recepto r, es como
plántulas enraizadas en un medio nutriti vo gelatinizado con agar.
El ma teria l clona! que se distribuye in virro comprende variedades
comerciales conocidas, germo plasma básico e híbridos pro misorios
con combinaciones de características deseables.
2. Empaque y envío. Los tubos se empacan en cajas de poliestireno que,
a su vez, están protegidas oor empaques de cartón. Cada paquete
• debe ser debidamente marcado para facilitar su rápido tránsito por
las aduanas hacia los servicios de Sanidad Vegetal de cada país y de
a llí, al programa nacional de yuca que lo solicitó . Cada envío se hace
• aco mpaña r de los documentos fitosanitarios requeridos así como de
una lista de los materiales, sus características y una explicació n sobre
có mo deberán ser manejados.
 •

130 . \'OrJcdndr' promt,Ort(l \ t/(' \UCfl en ;tmPrua IAtma

MATER IA LES

l. Termotcrapia
2. Cultivo de meristemas
3. Pruebas

1
INTRODUCCIONES - - MICROPRO PAGACION - - - MANTEN IM IENTO
in raro in viiro - in vilro

Plántulas enraizadas
en medio nutritivo estéril

¡
ENVIO
l . Acompañado aéreo
2. Carga aérea
3. Correo aéreo

l
MANEJ O EN EL PA IS RECE PTOR

l. Aduana
2. Servicio de Sanidad Vegetal
3. Programa Nacional
a. /\ condicionamiento
b. Micropropagación in o•i¡m•
c. Trasplante a potes ' a campo
d. Seguimiento fit osan itario

1
MUL TIPLICACION RAPID A
"Se milla" básica

• Opcoonal

Figura l. E1apas en la disiribución internacional de clones de yuca in vitro.

•

n l\trthllct ÓU . . . d(, c/onr\ tfr l'IICtl llr \'1/ro 131

Los envíos se deben hacer, de preferencia , por vía aérea y si fuere

posible, como equipaje acompañado; también pueden hacerse como
carga o correo aéreo. La yuca es altamente sensible a la falta de luz,
por lo que el tiempo de duración de un envío debe ser muy corto. Se
ha podido determinar que envíos de duración mayor de las dos
semanas producen eti olación , clorosis y po r último, deterioro de los
tejidos, todo lo cual dificulta la recuperación de las plantas en el país·
receptor. Sin embargo , ha sido posible recuperar plantas de cultivos
fuertemente afectados por viajes largos enviados a varios países de
Asia del Sur, Australia y Africa del Sur. El éxito logrado en estos
casos se debió a la buena preparación del personal de esos países en
las técnicas de micropropagación in vitro y de trasplante de los
cultivos a macetas y al campo.
3. Manejo en el país receptor. Este es el paso más crítico de todo el
proceso de transferencia ; como ya se indicó , depende en gran medida
de la preparació n técnica del personal que recibe el material así como
de la existencia de facilidades mínimas de laboratorio e invernadero.
Después de pasa r por la aduana y po r el servicio de Sanidad Vegetal,
el manejo consiste básicamente en aclimatar los cultivos para su
trasplante y luego hacer el trasplante a macetas usando un sustrato
esterilizado, bajo condiciones de a lta humedad que reduzcan la
pérdida de agua de las plantas. El riego de las plantas co n un
fertilizante rico en fósforo durante las dos primeras semanas es
crucial para lograr un buen arraigo y un crecimiento rápido de las
mismas.
Cuando las pla ntas tienen aproximadamente 15 ó 20 cm de altura y
están aparentemente adaptadas en el invernadero, se consideran
listas para el trasplante al campo definitivo, que es de observación y
multiplicación a la vez.
Durante el crecimiento de las plantas en el invernadero, y más tarde
en el campo, se deben practicar observaciones fitosanítaría s para
confirmar la seguridad que se tiene de su limpieza, utilizando, si fuere
posible, técnicas sensibles de detección.
Entre 1979 y 1981 se han distribuido más de 140 variedades del CIAT a
numerosos países de América en forma de cultivos in vitro. Asimismo se
han enviado más de 50 variedades a varios países de Asía del Sur, y 15
clones a otros países.
El método in vitro también se está utiliza ndo para introducir en el CIAT
germoplasma nuevo de yuca procedente de varios países latinoa mericanos
y asiáticos. Entre 1979 y 1981 se introdujeron en el CIAT cerca de 300
variedades en forma de cultivos de meristemas. Estos materiales, después
 •

132 : \'anedaclr~ prmtii\OIIO\ dr 1ucn en Amér1<a l auna

de se r micro propagad os in vitro y traspla ntados a l inve rnadero, ha n sido

llevados al campo pa ra su mult iplicació n y uso fut u ro e n eva luacio nes de
germoplasma.
El empleo sistemá t ico de los cultivos in vitro sólo se rá efectivo si se
cuenta con perso na l bien e ntrenado y con un nivel mín imo de insta lacio nes
de labo ratorio e invernad ero. Aun que el costo de esas insta lac io nes básicas
no es elevado, la ex periencia ga nada e n la a plicació n d e este siste ma
demuestra q ue la crea tividad pa ra ada pta r facilida des ya existe ntes a esta
tarea y el a p oyo administ ra ti vo que el pe rsona l téc nico requiere, juega n un
pa pel muy impo rta nte. Ot ra ne cesidad es el desa rrollo de téc nicas pa ra la
detección de vi rus en e l ma terial vegeta ti vo d e yuca, aplicadas ta nto a ntes
de su di st rib ució n internacio nal co mo en los países recepto res.
Actualme nte, resulta d ifícil la propagac ió n d e especies sil vestres de
Maniho1 por medio del culti vo de meriste mas. Mie ntras se ad ecúan los
métodos para logra rlo, el ma terial silvest re de yuca se interca mbia e n
forma de se mil la sexual. El cultivo in virro de e mb rio nes de estas especies
permite prod ucir plantas a partir de las se millas, salva nd o así el problema
de la escasa ge rminación de estos materiales. La mayoría de las e nferme-
dades conocidas de la yuca no se trasmi ten por la semilla sexual que, po r
este moti vo, es muy aceptada pa ra la int roducción de ge rm op lasma a
varios países (Elango y Loza no, l 980);sin em ba rgo. es también n ecesario
que se tomen medidas sa n ita rias c ua ndo se intercam bia n se millas que
podría n diseminar pa tóge nos desconocidos.

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