Filtranios Dossier

INFORME CIENTÍFICO
FILTRANIOS SEVEN A Y SEVEN B

FILTRANIOS 30 LPA Y 30 LPB
EVALUACIÓN DE LAS PRESTACIONES MICROBIOLÓGICAS (páginas 5 hasta 177)
1 / Challenge bacteriano según el método estandarizado ASTM F838-83 frente a

Brevundimonas diminuta – Estudio N° 8105 – página 5.
2 / Evaluación de la retención bacteriana durante 7 días en condiciones desfavorables –

Estudio N° 8326 – página 55.
3 / Evaluación de la retención bacteriana durante 7 días en condiciones de uso de

Filtranios Seven A y B – Estudio N°18346 – página 131.
4 / Evaluación de la retención bacteriana frente a Legionella pneumophilia durante 30

días en condiciones desfavorables – Estudio N° 934/04 – página 137.
5 / Evaluación de la retención bacteriana durante 30 días en condiciones de uso de

Filtranios 30 LP A y B – Estudio 18347 – página 175.
PRESTACIONES TÉCNICAS (páginas 181 hasta 241)
6 / Medida de los Volúmenes de filtración de los Filtranios tamaño A y B– Estudio

N°8071 B – página 181.
7 / Medida de los caudales en función de las presiones de la red –

Estudio N°8485 – página 193.
Estudio N° 18294.05/066 bis FR – página 201.
Estudio N° 18514.05/147 bis FR – página 215.
8 / Evaluación de la resistencia de las membranas a la temperatura y a la presión

Estudio N° 8486 – página 229.
9 / Evaluación de la resistencia de las membranas de los Filtranios Seven y 30LP al

cloro - Estudio N°6689 – página 239.
DATOS BIOLÓGICOS (páginas 245 hasta 279)
9 / Medida de la reacción pirógena a las sustancias extraíbles

Estudio N°04-4142-G5 – página 247.
10 / Medida de la reacción biológica a las sustancias extraíbles

Estudio N° 04-4142-G4 – página 259.
11 / Medida de la citotoxicidad a las sustancias extraíbles

Estudio N° 04-4142-G1 – página 271.
OTROS DATOS (páginas 283 hasta 287)
12 / Certificado de garantía de calidad ISO 9001:2000 y de conformidad

«grado farmacéutico»
informe FILTRANIOS SEVEN y FILTRANIOS 30 LP - ES - página 1/287

Estudio N°8105
Informe de ensayo de los laboratorios LSG

domnick hunter
limited
Durham Road, Birtley
Co. Durham, Inglaterra
DH3 2SF
Tél. : (0191) 410 5121
Fax : (0191) 410 5312
Preparado Laboratorios ANIOS N° de informe: 8105

para:
Producto: FILTRANIOS SEVEN cc: PH, MAB,
- con entrada y salida Tri-Clover. OW
Código: FILTRANIOS SEVEN

Título: Challenge bacteriano de las cápsulas
FILTRANIOS SEVEN A & B
RESUMEN
Se ha solicitado una prueba challenge bacteriano en el marco del programa de validación

convenido con los Laboratorios ANIOS con el fin de establecer las propiedades de
retención bacteriana de cápsulas filtrantes sacadas de las cadenas de producción. Todos
los filtros probados demostraron una capacidad de retención total cuando fueron
confrontados a una concentración de Brevundimonas diminuta superior a 107
microorganismos por centímetro cuadrado de superficie de filtración eficaz. El test de
challenge bacteriano se ha realizado según el método de test estándar ASTM F838-83 para
establecer la retención bacteriana de las membranas filtrantes utilizadas para la filtración de
líquidos. Este informe recoge los tests efectuados así como los resultados y las
conclusiones de los mismos.
Preparado por: M. Taylor Cargo: Responsable LSG

Firma: Fecha: 15/07/2004
Aprobado por: M. Brailsford Cargo: Director técnico

El contenido de este documento es de tipo confidencial. Queda prohibido fotocopiarlo,

mencionarlo o comunicarlo de otro modo a terceros sin la autorización escrita de los
Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°8105
OBJETIVO
El objetivo de este test consiste en comprobar si los filtros FILTRANIOS SEVEN,

confrontados con una suspensión de Brevundimonas diminuta viable (ATCC 19146), a la
concentración de 107 microorganismos por centímetro cuadrado, produce un filtrado estéril,
antes de utilización conforme a la metodología ASTM F 838-831.
MÉTODO
La validación ha sido efectuada según el protocolo de «challenge bacteriano de los filtros

de esterilización PROPOR PES Domnick Hunter – FILTRANIOS SEVEN – para los
Laboratorios ANIOS, a fecha de 4 de abril del 2004». En el anexo 1 figura un ejemplar del
protocolo del test.
Los datos en bruto se presentan en el anexo 2.
Se ha realizado un test no destructor de integridad con caudal de difusión antes y después

de challenge bacteriano por medio de un equipo de test de integridad PORECHECK3
calibrado, conforme al modo operatorio estándar IPPF103, sección 5.4. En el anexo 3
figura un ejemplar del certificado de calibrado de PORECHECK3.
Todos los datos en bruto obtenidos durante el test de integridad se presentan en el anexo
4.
RESULTADOS
Los resultados obtenidos durante el test de integridad con caudal de difusión permitieron
certificar la integridad de cada cartucho filtrante antes del test de challenge bacteriano.
El éxito de una prueba de challenge bacteriano exige cumplir los siguientes criterios de
aceptación:
• No se detecta ninguna colonia de Brevundimonas diminuta en los discos de análisis de
55 mm (es decir que la retención de la cápsula es total).
• El testigo positivo de 0,45 µm produce los resultados esperados.
• El control de esterilidad del sistema confirma la esterilidad del equipo de test.
• La concentración de Brevundimonas diminuta utilizada para el challenge bacteriano es
superior a 107 microorganismos por cm2 de superficie de filtración eficaz (SFE).
Los resultados obtenidos durante el test de challenge bacteriano se recogen en la tabla 1,

así como los resultados del test de caudal de difusión, antes y después del challenge.
1
F 838-83 (1993) – Método de test estándar para establecer la retención bacteriana de las membranas
filtrantes utilizadas para la filtración de líquidos.

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°8105
Tabla 1 – Resultados del test de challenge bacteriano obtenidos con FILTRANIOS SEVEN
Fecha del N° Número de Valor de TI Disco de Control de la Valor de TI Nivel total ufc/cm2 VRL ÉXITO /
test de serie del antes análisis de esterilización después de carga SFE FRACASO
lote filtro carga la carga (ufc) de carga bacteriana
del bacteriana bacteriana bacteriana (UFC)
filtro (ml/min) (ufc) (ml/min)
06-05-04 2B A250956 1,7 0 0 2,2 1,892 x 1010 2,20 x 107 10,27 ÉXITO
06-05-04 2B A250958 1,7 0 0 2,4 2,113 x 1010 2,45 x 107 10,32 ÉXITO
06-05-04 2B A250963 1,6 0 0 2,0 1,930 x 1010 2,24 x 107 10,28 ÉXITO
06-05-04 3B A250738 1,9 0 0 1,6 2,317 x 1010 2,69 x 107 10,36 ÉXITO
06-05-04 3B A250739 1,5 0 0 1,7 2,143 x 1010 2,49 x 107 10,33 ÉXITO
06-05-04 3B A250743 1,6 0 0 1,8 2,299 x 1010 2,67 x 107 10,36 ÉXITO
15-05-04 1B A250848 1,9 0 0 2,2 2,994 x 1010 3,48 x 107 10,47 ÉXITO
15-05-04 1B A250849 1,6 0 0 2,2 2,973 x 1010 3,45 x 107 10,47 ÉXITO
15-05-04 1B A251003 2,1 0 0 2,0 2,979 x 1010 3,46 x 107 10,47 ÉXITO
Abreviaturas
SFE = superficie de filtración eficaz

VRL = valor de reducción logarítmica
ufc = unidades que forman la colonia
TI = test de integridad (con gasto de difusión)

Caudal de difusión máximo autorizado: 3,0 ml/min Presión de prueba: 1 000 mbar
Fluido de remojo: IPA: agua (60 : 40)
PORECHECK 3, n° de serie A9020, última calibración 13 de febrero de 2004.
Las nueve cápsulas cumplieron las condiciones requeridas para un filtro de esterilización.
El contenido de este documento es de tipo confidencial. Queda prohibido fotocopiarlo, mencionarlo o comunicarlo de otro
modo a terceros sin la autorización escrita de los Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°8105
Los resultados muestran que cada caja de filtro retiene totalmente los microorganismos
utilizados para el challenge bacteriano (Brevundimonas diminuta, ATCC19146). El testigo
negativo (control de la esterilización) permitió comprobar la esterilización del banco de test
y establecer la validez de los resultados del test. El nivel total del challenge bacteriano es
suficiente para obtener más de 107 microorganismos por cm2 de superficie de filtración
eficaz.
CONCLUSIÓN
Los nueve filtros soporte FILTRANIOS SEVEN, que representan 3 lotes de fabricación,
cumplieron las condiciones requeridas para un filtro a grado esterilizador, conforme al
método ASTM F838-83, antes de la utilización.1
1
F 838-83 (1993) – Método de test estándar para establecer la retención bacteriana de las membranas
filtrantes utilizadas para la filtración de líquidos.

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°8105
ANEXOS
Anexo 1: Revisión 1 – 18 páginas
Protocolo de validación por challenge bacteriano de los elementos filtrantes a grado

esterilizador (0,2 µm) PROPOR PES– FILTRANIOS SEVEN – Para los Laboratorios
ANIOS.
Anexo 2: 7 páginas
Fichas de datos - Test de challenge bacteriano
Anexo 3: 1 página
Certificado de calibración del equipo del test de integridad PORECHECK3
Anexo 4: 6 páginas
Fichas de datos del test de integridad, antes y después del challenge bacteriano

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°8105
ANEXO 1
Protocolo de validación por challenge bacteriano de los elementos filtrantes a grado

esterilizador (0,2 µm) PROPOR PES– FILTRANIOS SEVEN – Para los Laboratorios
ANIOS.

Laboratorios ANIOS.

Validation Protocol
Revision 1
Section: Bacterial Challenge Protocol
Validation Protocol
Bacterial Challenge of domnick hunter
PROPOR PES Sterilising Grade Filters -
FILTRANIOS SEVEN A & B – For ANIOS Laboratoires
Le contenu de ce document est de nature confidentielle. Il est interdit de le photocopier,

de le mentionner ou de le communiquer autrement à un tiers sans l’autorisation écrite
des Laboratoires ANIOS.
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FILTRANIOS SEVEN y FILTRANIOS 30 LP - ES - página 13/287
Validation Protocol
Revision 1
1 REVISION HISTORY........................................................................................................................................ 3
2 INTRODUCTION............................................................................................................................................... 4
3 OBJECTIVE........................................................................................................................................................ 4
4 RESOURCE REQUIRED .................................................................................................................................. 5

4.1 PREPARATION BACTERIAL CHALLENGE ASSESSMENT:...................................................................................5
4.2 MEDIA PREPARATION FOR CHALLENGE STUDY ..............................................................................................6
NaCl (Aq) 0.9% Saline ..........................................................................................................................................6
Tryptone Soya Agar (TSA) Oxoid reference CM131.........................................................................................6
Saline Lactose Broth (SLB) ...................................................................................................................................6
Oxoid Reference CM137G/BR0053G ...................................................................................................................6
5 ABBREVIATIONS ............................................................................................................................................. 7
6 GENERAL PREPARATION............................................................................................................................. 7
7 PROCEDURES ................................................................................................................................................... 8
7.1 BACTERIAL CHALLENGE PROCEDURE ............................................................................................................8
8.1.1 Introduction ...........................................................................................................................................8
8.1.2 Challenge Culture Preparation- for each cartridge..............................................................................8
8.1.3 Sterilisation of Challenge Assembly:.....................................................................................................9
8.1.4 Cooling the Challenge Assembly...........................................................................................................9
8.1.5 Sterility Check Procedure......................................................................................................................9
8.1.6 Challenge Procedure – Test Filter and 0.45µm Control.....................................................................10
8.1.7 Identification of Brevundimonas diminuta ATCC 19146 ....................................................................12
8.2 DILUTION PLATE COUNTS (DPC) .................................................................................................................12

8.2.1 Introduction .........................................................................................................................................12
8.2.2 DPC Procedure ...................................................................................................................................12
8.3 DOCUMENTATION.........................................................................................................................................13
8.3.1 Record all challenge testing details using Bacterial Challenge Record Sheets 1, 2 and 3 given as
appendices. ..........................................................................................................................................................13
8.3.2 Attach all autoclave and integrity test records to a written test report.................................................13
8.4 ACCEPTANCE CRITERIA................................................................................................................................14
9 APPROVAL SIGNATURES...................................................................... ERREUR ! SIGNET NON DEFINI.
APPENDIX: BACTERIAL CHALLENGE RECORD SHEET EXEMPLE 1.................................................... 15
APPENDIX: BACTERIAL CHALLENGE SCHEMATIC .................................................................................. 19

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Validation Protocol
Revision 1
1 Revision History
Revision Revision Revision Details Issued By

Number Issue Date
- 4 / 4 / 04 New Issue A. Kelly
Table 1

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Validation Protocol
Revision 1
2 Introduction
This document details the bacterial challenge testing agreed with ANIOS for validation testing of 7B
FILTRANIOS filter capsules. It is one of several protocols, which are viewed as a whole to validate
filter use in the application.
This protocol details the methods used to conduct the laboratory based validation.
Since membrane filters rely on the principle of size exclusion to prevent the passage of bacteria, any
change in cell size due to restriction of available nutrients, osmolarity or ionic effects can have an
effect on the membranes ability to retain those bacterial cells.
3 Objective
The objective of this test is to confirm that domnick hunter filters when challenged with a
suspension of viable Brevundimonas diminuta (ATCC, 19146) at a concentration of 107 organisms
per square centimeter, will provide a sterile filtrate, prior to use. The challenge methodology to be
used is based on that outlined by the Health Industry Manufacturers Association (HIMA) in their
1982 document “Microbiological Evaluation of Membrane Filters”, and subsequently documented in
ASTM F838-83 “Standard Test Method for Determining Bacterial Retention of Membrane Filters
Utilized for Liquid Filtration”.

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Validation Protocol
Revision 1
4 Resource Required
4.1 Preparation Bacterial Challenge Assessment:

Consumables and Reagents Quantity Required
Brevundimonas diminuta ATCC 19146 One Colony
Pre-conditioned Sample Test Filters (‘B’ Size DEMICAP Approx.
3 x 3 different lot number
EFA 860cm2)
47mm 0.45μm PES assay disc (Pre-Validated) for Control 1
47mm 0.2μm PES assay discs (Pre-Validated) for Sterility Check
11
& Challenge Filtrate Assay
1 litre Saline Lactose Broth (SLB) for Inoculation 9
20ml Tryptone Soya Broth (TSB) for Inoculation 1
500ml Sterile 0.85% NaCl (Aq) for Dilution Plate Counts (DPC) 1
2.0 litres 0.85% NaCl for Sterility Check 1
1.0 litre 0.85% NaCl for Challenge Make-up 3
Sterile test tubes with tops in place (for DPC) 18
Sterile pipettes (1ml) per challenge As required
Sterile pipettes (10ml) per challenge As required
55mm ∅ TSA plates (per challenge) for Sterility Check, Control
12
and Filtrate Assay
90mm ∅ TSA plates (per challenge) for DPC 18
12 litres of 60:40 IPA / Water 1
Equipment
Rotary mixer 1
Bacterial Challenge Test Rig 1
Pre-sterile Nalgene 250mm volume with 47mm 0.45μm Disc and
1
Collection pot
Pre-sterile Nalgene 250mm volume with 47mm 0.2μm Disc 11
Sterile 1 litre DURAN Bottles 10
Disposable Sterile Sample Pot 1
Sterile Filtered Compressed Air Supply 1
PORECHECK 3 Integrity Test Instrument 1
Incubator (@ 28 – 32 °C) 3
Autoclave 1

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Validation Protocol
Revision 1
4.2 Media Preparation for Challenge Study

N.B. - All water referenced in this section should be 0.2μm filtered water.
MEDIA : 0.85% NaCl DATE:

4.2.1 NaCl (Aq) 0.85% Saline
EXP: TECH:
Dissolve 2 tablets in 1 litre of water. ORGANISM:
DATE : TIME:
Autoclave at 121°C for 15 minutes (minimum). EXP DATE: TIME:
INSPECTOR:
4.2.2 Tryptone Soya Agar (TSA) Oxoid reference CM131 MEDIA : TSA DATE:
EXP: TECH:
40g Tryptone Soya Agar - make up to 1 litre with water.
Autoclave at 121°C for 15 minutes (minimum). DATE : TIME:
EXP DATE: TIME:
INSPECTOR:
4.2.3 Saline Lactose Broth (SLB)

MEDIA : SLB DATE:
EXP: TECH:
Oxoid Reference CM137G/BR0053G
30g Lactose Broth powder - make up to 1 litre with water. EXP DATE: TIME:
Prepare NaCl (Aq) 0.85% Saline as in 5.2.1. Measure out INSPECTOR:
30 ml lactose broth solution and make up to 1 litre with saline.
Autoclave at 121°C for 15 minutes (minimum).

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Validation Protocol
Revision 1
5 Abbreviations
DPC = Dilution Plate Count
TSA = Tryptone Soya Agar
LRV = Log Reduction Value
SLB = Saline Lactose Broth mix
LB = Lactose Broth
TSB = Tryptone Soya Broth
EFA = Effective Filtration Area
Note: All the tests performed from this protocol will be according to the appropriate domnick hunter
standard IPPF (Inspection Procedure Process Filtration) or procedures detailed in this protocol.
6 General Preparation
Ensure all items are pre-labeled with media identification labels (section 5.2).
Glass bottles: Either empty or containing liquid, should be autoclaved with their tops
on, but loose.
Flasks of media: Place a wad of cotton wool in the neck of the flask, leaving a finger-
sized hole down the side and cover with foil secured in place with
autoclave tape (but not completely sealed).
Please Note: All of the above items are to be sterilized and labeled with a piece of self-
indicating autoclave tape and autoclaved for a minimum of 15 minutes at
121°C.

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Validation Protocol
Revision 1
7 Procedures
7.1 Bacterial Challenge Procedure
7.1.1 Introduction
7.1.1.1 Bacterial challenge will be carried out using the appropriate challenge volume of challenge
suspension (SLB). This SLB will be inoculated, with the appropriate volume of B. diminuta
culture to provide the correct challenge level of greater than 1 x 107 organisms per cm2 of EFA.
7.1.1.2 When challenging any filter a positive control is recommended. This demonstrates that if the
test membrane / filter contains an area or point, which is not fully retentive, it will be detected by
the challenge. The most difficult non-retentive problems to detect are slightly oversized pores.
Based on this, a positive control using a 0.45μm rated filter disc is included. The filter disc is
challenged with the challenge suspension and any bacteria that pass through are enumerated.
The 0.45μm membrane should show detectable penetration by the challenge organism
indicating that the bacterial cells are small enough to detect oversized pores in the membrane.
This can only be conducted when Brevundimonas diminuta is grown under minimal growth
conditions, in accordance with ASTMF838-83.
7.1.1.3 Prior to any challenge the apparatus must be shown to be free from contamination. A sterility
check is performed using sterile saline flushed through the system. The system outlet sample
is then collected, filtered using a NALGENE funnel loaded with a 0.2μm disc, and plated out on
an agar plate and incubated to test system sterility.
7.1.2 Challenge Culture Preparation
7.1.2.1 Stock cultures of Brevundimonas diminuta (ATCC19146) are maintained and sub-cultured at
domnick hunter on a regular basis.
7.1.2.2 For the bacterial challenge of 0.2µm rated membrane filters and devices, pick off a single well-
isolated colony of Brevundimonas diminuta (ATCC19146) from a TSA plate and inoculate into
20ml of sterile TSB.
7.1.2.3 Statically incubate at 30°C + 2°C for 24 hours + 4 hours.
7.1.2.4 Aseptically transfer 2ml of the starter culture using aseptic technique into 9 x 1000ml of sterile
SLB, invert each bottle three times and statically incubate for 24 hours + 2 hours at 30°C + 2°C.

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Validation Protocol
Revision 1
7.1.3 Sterilisation of Challenge Assembly
7.1.3.1 Set up challenge assembly as shown in APPENDIX: Bacterial Challenge Assembly Schematic.
Ensure all valves are closed.
7.1.3.2 Steam the whole assembly under pressure of 1.5 barg (@ >121°C for 25 minutes).
7.1.3.3 Open main steam line valve 1.
7.1.3.4 Open valve 2.
7.1.3.5 Bleed through valve 4 until steam is issued, allowing steam to vent slowly for the whole cycle.
7.1.3.6 Open valve 5 and allow steam to vent slowly for 25 minutes. Adjust valve 1 to give required
pressure of 1.5 barg, checking steam pressure at T10 and T20.
7.1.3.7 After 25 minutes close valves 5 and 1. Fully open valve 4, allowing all remaining steam
pressure to escape from the vessel
7.1.3.8 Close valve 2.
7.1.4 Cooling the Challenge Assembly
7.1.4.1 Open valve 3 and increase the air pressure using REG 1 to 0.5 barg, open valve 5 to bleed for
the duration of the cooling cycle.
7.1.4.2 Allow air cooling until test rig is cool to touch (approx. 30 minutes).
7.1.4.3 Close valve 5, reduce the air pressure to zero using REG 1 and close valve 3 to isolate the
sterile compressed air source.
7.1.4.4 Vent off any remaining pressure using valve 4. This is the end of the cooling stage.
7.1.5 Sterility Check Procedure
7.1.5.1 Fill the challenge vessel with 2 litres of sterile 0.85% NaCl.

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Validation Protocol
Revision 1
7.1.5.2 Open valve 3 to sterile filtered compressed air supply and regulate pressure (using REG 1) to
build the pressure in the vessel to approximately 0.7 bar (10 psi).
7.1.5.3 Slowly open valve 5 and collect 1 litre NaCl in a sterile DURAN bottle. Close bottle and allow
the remaining Saline to drain.
7.1.5.4 Close valve 5, reduce the air pressure to zero using REG 1 and vent off any remaining pressure
using valve 4. Close valve 4.
7.1.5.5 In a biosafety cabinet, aseptically filter the 1 litre sterility check sample through a sterile 0.2μm
PES NALGENE funnel.
7.1.5.6 Aseptically remove the 47mm disc and plate out on to a 55mm TSA plate, open side up.
7.1.5.7 Incubate for 7 days at 30°C ± 2°C, counting at 2 and 7 days.
7.1.6 Challenge Procedure – Test Filter and 0.45µm Control
7.1.6.1 Sterile Biogel gloves must be worn for this part of the procedure.
7.1.6.2 Turn on the laminar flow cabinet (LFC), and allow it to run for at least 10 minutes prior to use.
7.1.6.3 Transfer 3 x 1000ml SLB challenge suspensions (inoculated with B. diminuta) into a 5 litre flask
containing 1 litre of sterile saline. Mix by swirling, a minimum of 5 rotations. Repeat a further
two times to achieve 3 x 4000ml B. diminuta challenge suspensions. Extract 1ml of each
challenge suspension to prepare a dilution series (Refer to section 7.2) for Dilution Plate
Counts (DPC) series used to identify the concentration of viable cells in the challenge
suspension. Each 4 litre flask will be used to challenge 3 capsules.
7.1.6.4 Aseptically sample 100ml from one of the flasks of challenge suspension and filter through a
pre-sterilised filter funnel fitted with a 47mm 0.45µm PES control disc. Collect the filtrate and
filter through a pre-sterilised filter funnel fitted with a 47mm 0.2µm PES control disc. Plate out
both assay discs (individually) onto a 55mm TSA plate. Incubate for 2 days at 30°C ± 2°C and
count.
7.1.6.5 Ensure all valves on the rig are closed.
7.1.6.6 Pour the challenge suspension into the sample pressure vessel in the bacterial challenge rig
and seal the lid.

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Validation Protocol
Revision 1
7.1.6.7 Remove the nozzle from the downstream side of valve 5.
7.1.6.8 Spray the tri-clover fitting on the downstream side of valve 5 with Isopropanol, allow
approximately one minute for this to evaporate.
7.1.6.9 Attach the autoclaved DEMICAP to the downstream side of valve 5.
7.1.6.10 Open valve 3 to sterile filtered compressed air supply and regulate pressure using REG 1 to
build to approximately 2100 mbar (30 psi).
7.1.6.11 Open the outlet valve 5 to the inlet of the test filter.
7.1.6.12 Allow the test filter bowl to fill slowly, vent air from the filter using the demicap bleed valves
taking care not to allow any challenge suspension to spray. Once the housing is full, close the
vent valves.
7.1.6.13 Weigh the DURAN bottles to be used for collecting the challenge filtrate and write the individual
weights on the bottles.
7.1.6.14 Collect 1 litre of challenge filtrate in a sterile DURAN bottle. Weigh the bottle containing the
filtrate and use this value to calculate the volume of challenge suspension passed through the
DEMICAP.
7.1.6.15 Reduce the air pressure to zero using REG 1 and close valve 3.
7.1.6.16 Vent any remaining air pressure from the system using valve 4
7.1.6.18 Close valve 5 and detach the DEMICAP from the downstream outlet of valve 5.
7.1.6.19 Follow steps 8.1.6.8 to 8.1.6.17 for the following two DEMICAPS.
7.1.6.20 After the third DEMICAP has been challenged, open valve 3 and increase the air pressure to 10
psi using REG 1.
7.1.6.21 Open valve 5 and purge any challenge suspension remaining in the system through the
DEMICAP, collect in the 5 litre flask used for mixing the suspension. This should be autoclaved
as waste.

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Validation Protocol
Revision 1
7.1.6.22 Filter the challenge suspension collected in the sterile DURAN bottles through pre-sterilised
NALGENE funnel fitted with a 0.2μm 47mm PES disc.
7.1.6.23 Plate out each disc onto a 55mm TSA agar plate, labeled with the relevant cartridge serial
number.
7.1.6.24 Incubate for 7 days at 30°C ± 2°C, counting at 2 and 7 days.
7.1.6.25 For each further set of 3 DEMICAPS repeat sections 7.1.6.3 to 7.1.6.24, ignoring section
7.1.6.4.
7.1.6.26 Autoclave all DEMICAPS challenging to allow for post-challenge integrity testing.
7.1.6.27 After challenging has finished, steam sterilize the rig as described in section 7.1.3.
7.1.7 Identification of Brevundimonas diminuta ATCC 19146
7.1.7.1 Colonies of Brevundimonas diminuta will produce a deep blue pigment when 1ml of each
reagent is added to the plate.
• Reagent (1) 0.1g/Napthol in 10ml Ethanol.

• Reagent (2) 0.1g / N, N Dimethyl-p-Phenyl-Enediomine Oxalate in 10ml H20.
7.1.7.2 Oxidase sticks or API can be used as an alternative.
7.2 Dilution Plate Counts (DPC)
7.2.1 Introduction
7.2.1.1 The measurement of concentration of organisms in a solution is made using a technique called
taking Dilution Plate Counts. Since the concentration in the solution is high, simply plating out
the original sample would not allow the number of organisms to be counted. In this technique a
succession of 10 fold dilutions of the original solution are taken and samples of each dilution
plated onto a suitable growth media. The number of colonies that grow on each plate can then
be used to calculate the concentration in the original solution. The range of suitable numbers of
counts identified in ASTM F838-83 required to enable accurate assessment of concentration is
30 to 300 colonies.
7.2.2 DPC Procedure

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Validation Protocol
Revision 1
7.2.2.1 This procedure is carried out on each challenge suspension immediately before challenge to
identify the challenge concentration.
7.2.2.2 Pipette 9ml amounts of sterile 0.9% sodium chloride solution into 6 sterile test tubes fitted with
suitable caps. These referred to as the dilution blanks.
7.2.2.3 Mix the challenge suspension well by shaking.
7.2.2.4 With a pipette, aseptically remove 1ml, and transfer into the first dilution blank, about half an
inch above the level of the liquid. Mix the tube well using the rotary mixer for approx. 5
seconds.
7.2.2.5 With a fresh pipette remove 1ml of the mixed first dilution and transfer to the second dilution
blank. Continue as above for six dilutions, as follows:-
Tube No. 1 2 3 4 5 6
-1 -2 -3 -4 -5
Dilution 10 10 10 10 10 10-6
Vol of original ml 0.1 0.01 0.001 0.0001 0.00001 0.000001
Table 2
7.2.2.6 Using two fresh TSA 90mm plates for each dilution, plate out 10-4, 10-5 and 10-6 dilutions as
follows.
7.2.2.7 Pipette 0.1ml of dilution onto centre of each plate. Spread using a flamed, then cooled glass
spreader. Incubate for 2 days at 30°C + 2°C.
7.2.2.8 To count, select plates with between 30 and 300 colonies. Calculate the number of colony
forming units per ml in the original challenge suspension.
7.2.2.9 Confirm that the colonies enumerated are Brevundimonas diminuta ATCC 19146 by performing
an oxidase or other identification test.
7.3 Documentation
7.3.1 Record all challenge testing details using Bacterial Challenge Record Sheets 1, 2 and 3 given as
appendices.
7.3.2 Attach all autoclave and integrity test records to a written test report.

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Validation Protocol
Revision 1
7.4 Acceptance Criteria
The filters will be deemed as having passed testing requirements if the following occurs:
• No Brevundimonas diminuta colonies are detected on any of the 55mm assay discs.
• Positive 0.45µm control shows expected results.
• System sterility check confirms sterility of apparatus.
• Challenge concentration exceeds 107 Brevundimonas diminuta per cm2 of effective filtration
area.

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Validation Protocol
Revision 1
Appendix: Bacterial Challenge Record Sheet Exemple 1

Validation Reference: Product Reference:
Organism Reference: Incubator Number: 1 2 3
Biosafety Cabinet Ref: dh Sample Reference:
Autoclave Number: Refrigerator No. :
Time Set Temp

Actions Batch Ref Date Technician
Inoculate (°C)
TSB Inoculated
SLB Inoculated
Challenge Culture
Action Date Time Temp (°C) Technician
Sterility Checks to Incubator
DPC Plates to Incubator
Filtrate Plates to Incubator
Control Plate to Incubator
DPC after 2 days (cfu)

Solution Duplicate Ref
-4 -5 -6
A
Challenge Suspension
B
Average A+B/2
Calculated Challenge Suspension concentration (organisms/ml):

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Validation Protocol
Revision 1

Validation Reference: Product Reference:
Organism Reference: Incubator Number: 1 2 3
Biosafety Cabinet Ref: dh Sample Reference:
Autoclave Number:. Refrigerator No. :
Autoclave Media
Preparation dh Batch Autoclave Autoclave Autoclave
Media Printout Expiry Technician
Date Number Date Temp Time
Data Ref. Date
TSA Plates
TSB
SLB
0.20µm
Assay Disc
0.45µm
Assay Disc
Oxidase Result (Positive /

Sample Reference Technician
Negative)

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Validation Protocols
Revision 1
Section: Bacterial Challenge (non-viable) in Product Protocol

Filter Catalogue Time to Filtrate 0.45µm:0.2µm
Filter Feed Challenge Challenge
Reference and Rating Filter Serial IT Value Process No. of Organisms Control Sterility
Date Housing Pressure Volume Conc.
Membrane Area (µm) Number ml/min Challenge and LRV (cfu on 0.2µm (cfu)
2
Reference (mbar) (ml) (cfu/ml)
(cm ) (secs) 2 day 7 day plate)
Sterility Check System Sterile System Non-sterile

Growth on 0.45µm Control Plate Sterile Filtrate
Growth on 0.2μm Control Plate Sterile Filtrate
Challenge Concentration: Greater than 107 / cm2 Less than 107 / cm2
Sterile Filtrate: Yes No
Results of Testing: Product Tested Meets the Requirements for a Sterilising Grade Filter
Product Tested does Not Meet the Requirements for a Sterilising Grade Filter
Technician: EXEMPLE Signature: EXEMPLE Date: EXEMPLE
Le contenu de ce document est de nature confidentielle. Il est interdit de le photocopier, de le mentionner ou de le communiquer autrement à un
tiers sans l’autorisation écrite des Laboratoires ANIOS.
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Validation Protocols
Revision 1
Section: Bacterial Challenge (non-viable) in Product Protocol
Appendix: Bacterial Challenge Assembly Schematic
V1 P1
V2 V5
STEAM
P2
AIR
REG 1
V4
V3 PRESSURE
VESSEL
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tiers sans l’autorisation écrite des Laboratoires ANIOS.
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Estudio N°8105
ANEXO 2
Fichas de datos - Test de challenge bacteriano

Laboratorios ANIOS.

Estudio N°8105
ANEXO 3

Laboratorios ANIOS.

Estudio N°8105
ANEXO 4
Fichas de datos del test de integridad, antes y después del challenge bacteriano

Laboratorios ANIOS.

Estudio N°8326
Informe de ensayo de los laboratorios LSG

domnick hunter
limited
DH3 2SF
Tél. : (0191) 410 5121
Fax : (0191) 410 5312
domnick hunter
Preparado Laboratorios ANIOS N° de informe: 8326
para:
Producto: FILTRANIOS SEVEN cc: PH, MAB,
- con orificio de salida y entrada con OW
conexión acanalada para tubo.
Código: FILTRANIOS SEVEN

Título: Evaluación de la retención bacteriana
durante 7 días en condiciones
desfavorables (Worst case)
RESUMEN
Se requiere una evaluación de la retención bacteriana durante 7 días en condiciones

desfavorables (Worst case: recontaminación masiva diaria) en el marco del programa de
validación convenido con los Laboratorios ANIOS con el fin de establecer, en nueve
cápsulas filtrantes que representan tres lotes de fabricación, la capacidad de las
membranas filtrantes para retener una carga bacteriana diaria.
No se ha detectado ningún microorganismo (Brevundimonas diminuta) tras probar los
nueve filtros durante 7 días en las condiciones de utilización especificadas. Este informe
recoge los tests efectuados así como los resultados y las conclusiones de los mismos.
Preparado por: M. Taylor Cargo: Responsable LSG

Aprobado por: M. Brailsford Cargo: Director técnico

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°8326
OBJETIVO
El objetivo de este estudio consiste en establecer que las cajas de filtros FILTRANIOS
SEVEN no permiten un paso bacteriano (Brevundimonas diminuta, ATCC19146) durante 7
días en las condiciones de utilización especificadas.
MÉTODO
Los filtros probados se han recibido en embalaje individual, a razón de 3 por caja, después
de irradiación, en un formato idéntico al que se suministraría al cliente.
La validación se ha realizado según el protocolo de test de «Retención bacteriana para

FILTRANIOS SEVEN» a fecha de 14 mayo de 2004. En el anexo 1 figura un ejemplar del
protocolo del test. Se han incorporado los siguientes añadidos al protocolo aprobado.
1. Añadido
A petición de ANIOS, se ha evaluado una serie (serie n° 3) diariamente hasta constatar el
fracaso (observación de una contaminación posterior). La metodología empleada era
idéntica a la del protocolo del test de origen.
2. Añadido
Se ha realizado un test de integridad después de la simulación (caudal de difusión) en los
nueve filtros por medio de un aparato de test de integridad PORECHECK3. Los
parámetros empleados para el test de integridad eran los siguientes:
Parámetros de test Valor utilizado

Caudal de difusión máximo autorizado 3,0 ml/min
Presión de test 1 000 mbar
Fluido de remojo IPA: agua (60 : 40)
Duración de estabilización 2,0 minutos
Duración de test del filtro 2,0 minutos
Volumen del sistema Medida automática
3. Añadido
Se ha realizado un test testigo positivo para mostrar que el microorganismo del test no
resultó no viable en el equipo de test en las condiciones simuladas de una recontaminación
diaria.
La metodología empleada era la siguiente:

Se tomaron muestras en ausencia de prefiltro o de filtro probado in situ. Se tomó una
muestra antes de la inoculación (testigo negativo) utilizando la técnica de toma de muestra
descrita en el protocolo de challenge test. Se toma una muestra después de la inoculación

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°8326
con B. diminuta: la segunda muestra se toma después de 20 minutos de recirculación. De

nuevo, se utiliza la misma técnica de toma de muestras.
RÉSULTADOS
La tabla 1 recoge los resultados obtenidos durante el test de caudal de difusión. Todos los
datos en bruto del test de integridad, que incluyen un ejemplar del certificado de calibración
PORECHECK3, figuran en anexo 2.
Tabla 1 – Datos del test de integridad después de la simulación

LOTE/ N° DE CAUDAL DE DIFUSIÓN RÉSULTADOS DEL ÉXITO /
SERIE MÁXIMO AUTORIZADO TEST DE CAUDAL FRACASO
(ML/MIN) DE DIFUSIÓN
(ML/MIN)
1B A251347 3,0 2,9 ÉXITO
1B A251350 3,0 2,2 ÉXITO
1B A251345 3,0 2,1 ÉXITO
2B A251315 3,0 1,4 ÉXITO
2B A251316 3,0 1,5 ÉXITO
2B A251317 3,0 2,3 ÉXITO
3B A251338 3,0 2,8 ÉXITO
3B A251342 3,0 2,6 ÉXITO
3B A251344 3,0 2,3 ÉXITO
Los resultados obtenidos durante el test de integridad con caudal de difusión muestran que
los nueve filtros han conservado su integridad después del test de retención bacteriana.
Los resultados del test de retención bacteriana se recogen en las tablas 2, 3 y 4. Todos los
extractos diarios del test, extractos de las muestras y hojas de resultados (datos en bruto)
figuran en el anexo 3.
Los resultados muestran que no se ha observado ningún paso bacteriano hasta el 8º día.
Se ha observado un paso bacteriano en el 9º día en el lote 3B después de dos días

adicionales de inoculación, es decir, un nivel de carga bacteriana más de 3 veces superior
al exigido para el test. Se han obtenido resultados similares durante los 4 días siguientes
hasta el 12º día, cuando el test se ha detenido a un nivel de carga bacteriana más de 4
veces superior al exigido para el test.

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°8326
Tabla 2 – Datos del test de retención bacteriana para la SÉRIE 1 (lote 1B)
Día Fecha NUMÉRACION TOTAL DE AÉROBIOS VIABLES EN 2 DÍAS INOCULA- INOCULA- ÉXITO /
del del test (UFC/LITRO) CIÓN CIÓN FRACASO
test 1B A251347 1B A251350 1B A251345 DIARIA ACUMULA-
DA
ANTES DES- ANTES DES- ANTES DES-
PUÉS PUÉS PUÉS
1 18-05-04 0 0 0 0 0 0 1,575 x 109 1,575 x 109 ÉXITO
2 19-05-04 0 0 0 0 0 0 2,520 x 109 4,095 x 109 ÉXITO
3 20-05-04 0 0 0 0 0 0 3,870 x 109 7,965 x 109 ÉXITO
4 21-05-04 0 0 0 0 0 0 2,775 x 109 1,074 x 1010 ÉXITO
5 22-05-04 0 0 0 0 0 0 1,965 x 109 1,270 x 1010 ÉXITO
6 23-05-04 0 0 0 0 0 0 1,500 x 109 1,420 x 1010 ÉXITO
7 24-05-04 0 0 0 0 0 0 3,135 x 109 1,734 x 1010 ÉXITO
8 25-05-04 0 SO 0 SO 0 SO SO 1,734 x 1010 ÉXITO
SO = Sin objeto porque no se ha realizado ninguna inoculación el día 8 en la serie 1
Tabla 3 – Datos del test de retención bacteriana para la SERIE 2 (lote 2B)
Día Fecha NUMÉRACION TOTAL DE AÉROBIOS VIABLES EN 2 DÍAS INOCULA- INOCULACIÓN ÉXITO /
del del test (UFC/LITRO) CIÓN ACUMULADA FRACASO
test 2B A251315 2B A251316 2B A251317 DIARIA

PUÉS PUÉS PUÉS
1 25-05-04 0 0 0 0 0 0 3,525 x 109 3,525 x 109 ÉXITO
2 26-05-04 0 0 0 0 0 0 3,435 x 109 6,960 x 109 ÉXITO
3 27-05-04 0 0 0 0 0 0 4,260 x 109 1,122 x 1010 ÉXITO
4 28-05-04 0 0 0 0 0 0 4,800 x 109 1,602 x 1010 ÉXITO
5 29-05-04 0 0 0 0 0 0 2,910 x 109 1,893 x 1010 ÉXITO
6 30-05-04 0 0 0 0 0 0 3,570 x 109 2,250 x 1010 ÉXITO
7 31-05-04 0 0 0 0 0 0 2,715 x 109 2,521 x 1010 ÉXITO
8 01-06-04 0 SO 0 SO 0 SO SO 2,521 x 1010 ÉXITO
SO = Sin objeto porque no se ha realizado ninguna inoculación el día 8 en la serie 2
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Estudio N°8326
Tabla 4 – Datos del test de retención bacteriana para la SÉRIE 3 (lote 3B)
Día Fecha NUMÉRACION TOTAL DE AÉROBIOS VIABLES EN 2 DÍAS INOCULA- INOCULACIÓN ÉXITO /
del del test (UFC/LITRO) CIÓN ACUMULADA FRACASO
test 3B A251338 3B A251342 3B A251344 DIARIA
PUÉS PUÉS PUÉS
1 09-06-04 0 0 0 0 0 0 3,825 x 109 3,825 x 109 ÉXITO
2 10-06-04 0 0 0 0 0 0 2,205 x 109 6,030 x 109 ÉXITO
3 11-06-04 0 0 0 0 0 0 1,290 x 109 7,320 x 109 ÉXITO
4 12-06-04 0 0 0 0 0 0 1,965 x 109 9,285 x 109 ÉXITO
5 13-06-04 0 0 0 0 0 0 3,795 x 109 1,308 x 1010 ÉXITO
6 14-06-04 0 0 0 0 0 0 3,720 x 109 1,680 x 1010 ÉXITO
7 15-06-04 0 0 0 0 0 0 6,165 x 109 2,296 x 1010 ÉXITO
8 16-06-04 0 0 0 0 0 0 1,980 x 109 2,494 x 1010 ÉXITO
9 17-06-04 0 0 conf conf 75 62 3,390 x 109 2,833 x 1010 FRACASO
Conf. = colonias confluentes
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Estudio N°8326
El ÉXITO del test de retención bacteriana exige cumplir los siguientes criterios de
aceptación:
CONDICIONES REQUERIDAS CRITERIOS DE ACEPTACIÓN

CUMPLIDOS (SÍ/NO)
No se ha detectado ninguna colonia de
Brevundimonas diminuta en las tomas de SÍ
muestras diarias efectuadas en los filtros
probados, tanto antes como después de la
inoculación, hasta el 8º día.
El nivel total de carga bacteriana es
suficiente para abastecer un nivel total de SÍ
> 107 Brevundimonas diminuta por cm2 de
superficie de filtración eficaz
Los nueve filtros cumplieron los criterios de aceptación del test.
CONCLUSIÓN
Las nueve cápsulas FILTRANIOS SEVEN, que representan tres lotes de fabricación, no
permitieron el paso de microorganismos hasta el 7º día en las condiciones de uso
especificadas.

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°8326
ANEXOS
Anexo 1: Revisión 1: 17 páginas
Protocolo de test de retención bacteriana de los elementos filtrantes

FILTRANIOS SEVEN A y SEVEN B
Anexo 2: 4 páginas
Anexo 3: 39 páginas
Fichas de datos del test de retención bacteriana – Datos en bruto

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°8326
ANEXO 1
Protocolo de test de retención bacteriana de los elementos filtrantes

FILTRANIOS SEVEN A y SEVEN B

Laboratorios ANIOS.

Estudio N°8326
ANEXO 2

Laboratorios ANIOS.

Estudio N°8326
ANEXO 3
Fichas de datos del test de retención bacteriana – Datos en bruto

Laboratorios ANIOS.

Estudio N°93404
© El contenido de este informe no debe resumirse, publicarse ni utilizarse con

fines publicitarios sin consentimiento.
Retención bacteriana de las cajas de filtros

Filtranios 30LP frente a Legionella
Nº informe: 934/04
Ref. HPA PD Nº proyecto 934/04

Ref. cliente domnick hunter
Informe preparado para Michael Taylor (domnick hunter)
Responsables Carolyn Budge, Jimmy Walker y Sara Speight
Fecha de emisión 25 de febrero de 2005
Número de copia 1
Distribución Mr. M. Taylor, Mr. A. Bennett,
Central Records (Dr. P. Hammond)

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°93404
Resumen del método
El protocolo utilizado aporta la prueba mejor documentada de que la sociedad domnick

hunter domina la fabricación de cajas de filtros para el lavado de las manos en el
hospital. Estas cajas de filtros responden a la exigencia de la retención total de
Legionella pneumophilia durante 30 días de uso en condiciones operatorias definidas.
Se prueban 3 cajas de filtros que provienen de 3 lotes diferentes. Para este test, se
utiliza el nivel de challenge adoptado por los estándares de la industria de la
microfiltración. El objetivo consiste en inocular el organismo test con una concentración
necesaria para la obtención de un challenge bacteriano mínimo de ≥107 organismos
por cm² de superficie filtrante efectiva de cada caja.
Consideración sobre el modo operatorio

El protocolo contemplado depende de varios parámetros:
Flujo de agua continua vs discontinua

2 posibilidades:
1. Corriente de agua continua a un caudal de 2,5-3 litros/min durante 30 días.
2. Corriente de agua a un caudal de 2,5-3 litros/min durante 7 horas al día, sin
incluir los fines de semana, durante 30 días.
La opción 2 se considera el caso extremo (worst case). La mayoría de los

organismos tienen una velocidad de crecimiento aumentada en ausencia de flujo
(estancamiento). Resulta una eventualidad más importante de paso bacteriano debida
a unas condiciones más favorables de crecimiento, particularmente durante los
períodos prolongados de estancamiento de los fines de semana.
Toma de muestras después del filtro o en el recipiente de recirculación

La toma de muestras diaria puede situarse:
2. Inmediatamente bajo el filtro probado utilizando un "Té" sanitario que permite la
derivación del flujo hacia un recipiente estéril (toma de muestra) todos los días al
principio del experimento.
1. Directamente mediante una toma de muestras sanitaria ensobre el recipiente de
recirculación.
Se ha estimado que si se produce un paso bacteriano, estará presente en el primer

paso a través del filtro al principio del experimento diario. Esto reduce la posibilidad de
un impacto de microorganismos por recirculación, incluso débil, pudiendo quedar
indemostrable a un nivel débil.
Agua potable vs agua filtrada 0,2µm (Estéril) autoclave.

Para este estudio se consideran varios tipos de agua:
1 - Agua potable de la red
2 - Agua estéril

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°93404
Se ha elegido agua de la red por las razones siguientes:
• El agua de red se utilizará para la aplicación real (agua del grifo) con una
prefiltración integrada de vez en cuando.
• El organismo del test (Legionella pneumophila) posee un índice de supervivencia
mucho mejor en agua potable (red) que en agua estéril después de 65 días de
incubación (informe West y al).
Objetivo
El objetivo consiste en determinar la retención mediante cajas de filtros de un challenge

bacteriano, Legionella pneumophilia, presente en el agua de grifo en el hospital durante
30 días de uso en condiciones operatorias definidas.
Resumen del modo operatorio

Las 3 cajas de filtros se prueban en paralelo.
Resumen (por caja de filtro):
Establecimiento de una corriente de agua de 2,5 – 3 litros en un bucle de

recirculación
Inyección de un inóculo de Legionella pneumophila (a fin de realizar un nivel total

de challenge de ≥107 organismos/cm2 de superficie efectiva de filtración)
Corriente de agua en continuo de 7 horas por día, toma de muestras los 100 primeros
mililitros al principio de la filtración cada día durante 30 días
Análisis de la muestra para presencia/ausencia de Legionella pneumophila

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°93404
Preparación del challenge de células

El organismo Legionella pneumophila serogrupo 3 - NCTC 11232 se recoge y se
mantiene en un medio de cultivo BCYE agar a 37°C. Este medio se inocula con una
colonia única de Legionella pneumophila serogrupo 3 y se incuba a 37°C en una
incubadora toda una noche para realizar un inóculo de una concentración conocida de
≥8.6 x 109cfu / ml.
Cálculo de la pérdida bacteriana debida a la evacuación continua del aire en el

banco de test
Se utiliza pseudomonas aeruginosa en lugar de Legionella pneumophila serogrupo 3
para calcular la pérdida de inóculo debida a la evacuación del aire contenido en el
banco de test.
Se añade al sistema un nivel de challenge total de ≥8.6 x 109cfu / ml, antes del filtro
probado, directamente en el flujo. El inóculo atraviesa el filtro en una solución de 10ml
de agua estéril. El aire y el líquido, purgado de los filtros, 1 y 5 minutos después de
inoculación, se recogen y se miden.
Filtración diaria
El banco de test consta de una cuba que contiene 10 litros de agua de ciudad. Una
bomba envía este agua a través del filtro que hay que probar hacia una cuba de
recepción. El agua llena todo el sistema y el aire contenido es purgado por una
compuerta hacia un recipiente. El caudal se fija a 2,5 l/mn para cada bomba (para
simular la aplicación) a través de cada nuevo filtro; este valor se comprueba al final de
los 30 días de ensayo.
Día 1
1. El depósito de recirculación (10 litros) y la cañería se preesterilizan antes del
montaje en un recinto clasificado CL III. Se toman dos muestras de 100 ml para
preinoculación (control negativo) en condición aséptica a partir del sistema de toma
de muestra del recipiente con el fin de establecer:
• La prueba de recuento de forma viva aerobia - filtración sobre membrana de
100ml, disco transferido en medio R2 agar e incubado a 37ºC durante 3 días.
• La prueba de ausencia de Legionella pneumophila serogrupo 3 - filtración en
membrana de 100ml, disco transferido en medio BCYE e incubado a 37ºC
durante 7 días.
2. El agua pasa a través de todo el sistema para eliminar y transferir el aire purgado
hacia el recipiente de purga. El caudal se fija a 2,5-3,0 l/min para cada filtro
probado.
3. Las posibles fugas se detectan y se eliminan.
4. El organismo Legionella pneumophila serogrupo 3 (1ml) se inocula para realizar un
nivel de challenge total ≥8.6 x 109cfu/ml en el sistema, por encima del filtro probado
directamente en el flujo. El inóculo circula por el flujo en una solución de 10 ml de
agua estéril.
5. La temperatura del agua se registra.
6. Durante 7 horas el agua recircula a través de cada filtro al caudal definido. 7 horas
representan una buena simulación de la aplicación efectiva.
7. A continuación, la bomba se detiene y el filtro queda estancado en el agua (in situ)
toda la noche.
Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°93404
Días 2 a 30 (días de uso excluyendo los fines de semana)

1. Se pone en marcha un caudal de agua de 2,5 a 3 litros/min a la mañana siguiente y
los primeros 100 ml se recogen en condición aséptica en un recipiente estéril.
2. La búsqueda de Legionella pneumophila serogrupo 3 se realiza sobre esta
muestra: este volumen de 100 se filtra en un disco preesterilizado a 0,2 µ y, a
continuación, el disco se coloca en un medio de cultivo BCYE agar, incubado a
37ºC durante 7 días.
3. La temperatura del agua se registra.
4. El agua recircula durante 7 horas a un caudal de 2,5 a 3 litros/min.
5. A continuación, la bomba se detiene y el filtro queda estancado en el agua (in situ)
toda la noche.
6. El 30º día, los filtros se retiran del equipo para ser controlados. El bol del filtro se
desolidariza; una parte de la membrana filtrante se sumerge en un medio de cultivo
BCYE agar para la búsqueda de organismos vivos de Legionella pneumophila
serogrupo 3, incubación a 37°C durante 7 días.
Criterios de aceptación
Se considera que los filtros responden a las exigencias requeridas sí:
• No se detecta ninguna colonia de Legionella pneumophila serogrupo 3 en la
muestra diaria tomada bajo el filtro probado antes y después de la inoculación.
• El challenge bacteriano total alcanza ≥ 8.6 x 109cfu/ml, es decir, ≥107
organismos por cm2 de superficie filtrante efectiva.
• Un control positivo después de 30 días demuestra la presencia de organismo
vivo de test procedente de la parte anterior a las membranas de los filtros
probados.

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°93404
4 RESULTADOS
Tabla 2. Índice de recuperación de Pseudomonas aeruginosa de las muestras tomadas para

calcular la pérdida de challenge:
Concentración inicial del inóculo 9.9 x 109cfu/ml-1

Aire y liquido recuperado después de 1 minuto 1.69 x 105cfu/ml-1
Aire y liquido recuperado después de 5 minutos 3.03 x 105cfu/ml-1
Concentración del inóculo menos el recuento
9.9 x 109cfu/ml-1
de aire y líquido purgado
Tabla 3. Cálculo de la concentración del inóculo
Aire y liquido Suspensión inicial

Cultivo
inmediatamente menos el aire
centrifugado
recuperado purgado
Banco test A 8 x 108cfu/ml-1 1.5 x 104cfu/ml-1 7.9 x 108cfu/ml-1
Banco test B 6.2 x 109cfu/ml-1 3.3 x 106cfu/ml-1 6.2 x 109cfu/ml-1
Banco test C 6.9 x 109cfu/ml-1 1 x 103cfu/ml-1 6.9 x 109cfu/ml-1
Figura 1. Fotografía del sistema experimental

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°93404
Tabla 4. Índice de recuperación de Legionella pneumophila serogrupo 3 procedente de las

muestras diarias:
Recuperación de Legionella pneumophila

serogrupo 3 viable bajo el filtro (sí / no)
Tiempo de
contacto del
Día Fecha Banco test A Banco test B Banco test C
organismo
(día)
0 0 05/01/2005 n/a n/a n/a
1 1 06/01/2005 no no no
2 2 07/01/2005 no no no
3 5 10/01/2005 no no no
4 6 11/01/2005 no no no
5 7 12/01/2005 no no no
6 8 13/01/2005 no no no
7 9 14/01/2005 no no no
8 12 17/01/2005 no no no
9 13 18/01/2005 no no no
10 14 19/01/2005 no no no
11 15 20/01/2005 no no no
12 16 21/01/2005 no no no
13 19 24/01/2005 no no no
14 20 25/01/2005 no no no
15 21 26/01/2005 no no no
16 22 27/01/2005 no no no
17 23 28/01/2005 no no no
18 26 31/01/2005 no no no
19 27 01/02/2005 no no no
20 28 02/02/2005 no no no
21 29 03/02/2005 no no no
22 30 04/02/2005 no no no
23 33 07/02/2005 no no no
24 34 08/02/2005 no no no
25 35 09/02/2005 no no no
26 36 10/02/2005 no no no
27 37 11/02/2005 no no no
28 40 14/02/2005 no no no
29 41 15/02/2005 no no no
30 42 16/02/2005 no no no

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°93404
Tabla 5. Índice de recuperación de Legionella pneumophila serogrupo 3 viva en la

superficie por encima de las membranas filtrantes después de 42 días de exposición:
Filtro A Filtro B Filtro C
Posición 1 Negativo Negativo 1 Positivo
Recuperación
en BCYE Agar

Recuperación
en medio de Posición 2 Negativo Negativo 5 Positivo
cultivo BCYE

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°93404
Tabla 6. Valor del caudal de la bomba peristáltica el primer día
Test 1 Test 2 Test 3 Promedio

Bomba del banco test A 2,5litros/min 2,5litros/min 2,5litros/min 2,5 litros/min
Bomba del banco test B 2,5litros/min 2,5litros/min 2,5litros/min 2,5 litros/min
Bomba del banco test C 2,5litros/min 2,5litros/min 2,5litros/min 2,5 litros/min
Números de lote de los filtros utilizados para la determinación del caudal:
Banco test A Lote 2B7DG / Serie A251314

Banco test B Lote 2B7DG / Serie A251314
Banco test C Lote 2 / Serie 4215
Tabla 7. Valor del caudal de la bomba peristáltica al 30° día (tras 42 días de contacto):
Test 1 Test 2 Test 3 Promedio

Bomba del banco test A 2litros/min 2,58litros/min 2,5litros/min 2,4 litros/min
Bomba del banco test B 2,47litros/min 2,43litros/min 2,4litros/min 2,4 litros/min
Bomba del banco test C 2,43litros/min 2,47litros/min 2,47litros/min 2,4 litros/min
Números de lote de los filtros utilizados para la búsqueda de Legionella:
Banco test A Lote 1 / Serie DC004122

Banco test B Lote 2 / Serie DC004126
Banco test C Lote 3 / Serie DC004128
5. DISCUSIÓN Y CONCLUSIÓN
Las cajas de filtros FILTRANIOS 30LP fabricadas por domnick hunter aseguran la
retención total de un challenge del organismo Legionella pneumophila serogrupo 3,
(≥8,6 x 109cfu/ml para 2 de los filtros, y 7,9 x 108cfu/ml-1 para el 3°) durante 30 días de
uso (equivalente a 42 días de exposición) y a un caudal de 2,5 litros/min. El caudal
medido después de los 30 días de uso es de 2,4 litros/min.
Los filtros se recortan después de 42 días de exposición y el organismo Legionella

pneumopathie serogrupo 3 se vuelve a encontrar vivo del lado anterior en 2 de los 3
filtros.
En definitiva, los filtros están perfectamente adaptados a la retención de Legionella

pneumophila serogroupe 3 en una solución de challenge igual a ≥107 organismos por
centímetro cuadrado de superficie filtrante de cada cápsula.

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°93404
6. REFERENCIAS
West, AA, R Araujo, P J L Dennis, J V Lee and C W Keevil. 1989. Chemostat models of
Legionella pneumophila. In: Airbourne Deteriorations and Pathogens. pp 107-115. B.
Flannigan (ed). Biodeterioration Society, Kew Surrey.

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°93404
ANEXOS
a) Materiales y métodos
b) Resultado del estudio
c) Temperaturas de botellas de agua e incubadoras
d) Datos de validación para todos los medios
e) Datos calidad del agua
f) Datos de validación de la preesterilización del equipo
g) Documento West y Al

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a) Materiales y métodos -1-
Consumables and Reagents Quantity Required

Legionella pneumophila Serogroup 3 - NCTC 11232 ≥ 107 organism/cm2 EFA
Pseudomonas aeruginosa – GH56 ≥ 107 organism/cm2 EFA
1 capsule x 3 batches of Filtranios LP30B Product Total of 3 for study
47mm 0.2μm hydrophilic membrane assay discs in a pre-sterilised Nalgene
As required
assembly or equivalent
BCYE broth suitable for culturing Legionella pneumophila (HPA) As required
Sterile NaCl (Aq) (0.9%) As required
Mains water (HPA Porton Down) As required
Sterile containers for diluents As required
Sterile 100ml sample containers As required
Sterile disposable pipettes (1.0 ml) As required
Sterile disposable Pipettes (10.0 ml) As required
BCYE Agar plates + L cysteine (55mm) – MR/04/8863 As required
BCYE Agar plates + L cysteine (90mm) – for Sterility Check Ref: 43013 As required
BCYE Agar plates – L cysteine (90mm) – for Sterility Check Ref: 43023 As required
Pseudomonas aeruginosa Agar plates – Lot 236611 Exp 07/2005 As required
Equipment
Rotary mixer - Clifton Cycle 1
Biosafety Cabinet CL III – 321 (6 monthly service – 05/10/04) 1
Peristaltic pump tubing capable to deliver 2.5l/min (marprene 12.7mm bore) 3
Stopwatch 1
Pipette filler 0.1ml 1
Pipette filler 1.0 ml 1
Pipette filler 10.0ml 1
Incubator (37ºC) – LEEC Research CO2 Incubator 1
Shaker Incubator (37oC) – Brunswick 1
Retort Stand and clamps As required
10 litre Nalgene Bottle with sanitary sample port - Techmate 3
Autoclave – Prestige Medical Series 2100 (for empty vessel sterilisation) 1
Calibrated Temperature gauge – Digitron (0-50ºC) UR13036
1
Calibrated 24.03.04
Table 1. Consumables and reagents
All three capsules were tested in parallel.

Testing overview (per capsule):
Figure 1. Photograph of experimental system

b) Resultado del estudio -1-
Day Date Amount of Legionella in Sample Taken

A B C
0 05/01/2005 None None None

c) Temperaturas de botellas de agua e incubadoras -1-

c) Temperaturas de botellas de agua e incubadoras -2-
a)

d) Datos de validación para todos los medios -1-




b)

e) Datos calidad del agua -1-

e) Datos calidad del agua -2-

f) Datos de validación de la preesterilización del equipo -1-

g) DocumentoWest y al -1-











Estudio N°8071
Informe test NPD

domnick hunter
limited
DH3 2SF
Tel:(0191) 410 5121
Fax:(0191) 410 6723
www.domnickhunter.com
domnick hunter
Tipo: Verificación de la selección técnica Nº informe: 8071B
Ref. proyecto: Gama de cajas de filtros para el lavado de manos cc: GIJ
en el hospital. Anios
Nº proyecto: NPP3924
Título: Análisis de la vida útil antes de la obstrucción de la
gama de los filtros FILTRANIOS SEVEN y 30LP
Aplicación: Uso interno y externo
RESUMEN
Este estudio trata de la evaluación de la vida útil (volumen filtrado) de las cajas de filtros
FILTRANIOS SEVEN et 30LP. Los filtros líderes en este mercado se utilizaron realizando
comparaciones.
Los resultados indican una mayor duración en volumen y tiempo de filtración antes de la
obstrucción de los FILTRANIOS en comparación con los filtros actualmente líderes en el
mercado.
Preparado por: P Hymus Cargo: Ingeniero jefe

Firma : Fecha: 3 de marzo de 2005
Aprobado: D Calder Cargo: Responsable NPD
Firma: Fecha: 4 de marzo de 2005

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°8071
ÍNDICE
N° de páginas
Resumen 1
Introducción 3
Objetivos 3
Diseño del test 3
Productos testados 3
Protocolo/procedimiento experimental 4a5
Resultados 6a8
Discusión 8
Conclusión 9
Equipos 9

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°8071
1.0 Introducción
Este estudio trata de la evaluación de la vida útil (volumen filtrado) de los filtros
FILTRANIOS SEVEN y 30LP. Los filtros líderes en este mercado se utilizaron
realizando comparaciones.
2.0 Objetivo
Demostrar que para la aplicación probada las cajas de filtros FILTRANIOS tuvieron
una duración en volumen y tiempo de filtración al menos tan buena como la de los
productos líderes en el mercado.
3.0 Diseño del test
Se conectan 2 filtros o más a una red de agua potable. La presión del agua es
constante y se registra el volumen de agua, la reducción del caudal y el tiempo
necesario para alcanzar un valor reducido de caudal.
Una comparación directa sólo es posible entre filtros probados simultáneamente a
causa de la influencia de la calidad de agua variable en el tiempo.
Una comparación indirecta es posible entre filtros de tests sucesivos, pero la
precisión de los resultados puede estar sujeta a si la calidad del agua es fuertemente
variable.
Los productos probados se calculan según el tiempo necesario para alcanzar el valor
de caudal > 2lmn (obstrucción) y, a continuación, por el valor del volumen de agua
filtrado.
4.0 Productos probados
Producto A Filtranios A
Producto B Filtranios B
Producto C PAS Filtro Informe ref: PAS
Producto D PASm+ Filtro Informe ref: PASm+

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°8071
5.0 Protocolo/ Procedimiento experimental
5.1 La Figura A muestra un esquema así como una fotografía del equipo utilizado para
probar la vida útil de los filtros. Para este estudio se conectaron 2 sistemas en
paralelo para poder probar 4 productos simultáneamente.
Figura 1 – Esquema y fotografía del equipo experimental

KEY:
WATER SUPPLY
MANUAL VALVE
TOTALISING
FLOW METER
OR
ROTAMETER
T
PRESSURE
REGULATOR
PRESSURE GAUGE
LEG 1 RESTRICTION
(INSERT)
P
QUICK CONNECT
COUPLING, WITH &
WITHOUT
OPTIONAL LEG 2 NON-RETURN
OR
T
TEST FILTER
T
P PRE-FILTER
(1µm PEPLYN PLUS)
OPEN RESEVOIR
5.2 No se instaló un prefiltro por encima del equipo.

Laboratorios ANIOS.
Página 4/9

Estudio N°8071
5.2 Los filtros probados se instalaron en los cuatro brazos situados en paralelo como
indica la tabla 1.
5.3
Tabla 1 – Matriz de test
Ensayo Producto probado Nº de serie
A Filtranios A A251794
A251763
A252380
PASm+ IE5110102
B Filtranios B A252338
A251787
A252390
PAS IE7793661
5.4 Se toma una medida inicial para cada contador volumétrico a 0 minutos.
5.5 Un cronómetro se pone en marcha cuando se abren las compuertas manuales.
5.6 Los reguladores de presión situados sobre cada brazo están ajustados a 2Barg en la
salida.
5.7 Se toma una medida inicial del caudal en cada uno de los rotámeros a 0 minutos.
5.8 Se realizan lecturas de volumen y caudal, con indicación del horario de las tomas, a
intervalos determinados por la evolución de cada uno de los parámetros (caudal-
presión).
5.9 Los reguladores de presión se ajustan al valor requerido de 2Barg durante todo el
ensayo.
5.10 El test se considera terminado cuando el valor del caudal de cada uno de los filtros
se reduce a <2.0l/min.
5.11 Se realizan tests de integridad en cada uno de los filtros después del ensayo. Los
parámetros del test se indican en la tabla 2.
Tabla 2 – Parámetros del test de integridad

Productos Solución de Presión de Caudal máximo de
probados remojo prueba difusión (ml/min)
(Barg)
Filtranios A 60:40 IPA/agua 1.0 1.5
Filtranios B 60:40 IPA/agua 1.0 3.0

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°8071
6.0 Resultados
6.1 Los gráficos 1 y 2 muestran los resultados de la obstrucción de los ensayos A y B.
Gráfico 1 – Resultados ensayo A
Comparitive Life to Blockage Testing

Filtranios Seven A Vs PASm+
0.8000 8
Seven A (A251763) Throughput (m³)
0.7000 7
Flow rate (l/min) / Pressure (Barg)

0.6000 6
0.5000 5
Throughput (m³)
PASm+ (IE5110102) Throughput (m³)
0.4000 4 Seven A (A251794) Flow Rate (l/min)
Seven A (A252380) Flow Rate (l/min)

0.3000 3
Seven A (A251763) Flow Rate (l/min)

0.2000 2
PASm+ (IE5110102) Flow Rate (l/min)

0.1000 1
Pressure (Barg)
0.0000 0
0 50 100 150 200
Time (mins)

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°8071
Gráfico 2 – Resultados ensayo B
Comparitive Life to Blockage Testing

Filtranios Seven B Vs PAS
1.8000 8
Seven B (A251787) Throughput (m³)
1.6000 7
1.4000
Flow rate (l/min) / Pressure (Barg)

6
1.2000
5
Throughput (m³)
PAS (IE57793661) Throughput (m³)
1.0000
4 Seven B (A252388) Flow Rate (l/min)
0.8000
Seven B (A252390) Flow Rate (l/min)
3
0.6000
Seven B (A251787) Flow Rate (l/min)
2
0.4000
PAS (IE57793661) Flow Rate (l/min)
0.2000 1
Pressure (Barg)
0.0000 0
0 50 100 150 200 250 300 350 400
Time (mins)

Laboratorios ANIOS.
Página 7/9

Estudio N°8071
6.2 La tabla 3 muestra los resultados del test de integridad después de la obstrucción.
Tabla 3 – Resultados del test de integridad
Producto Número de serie Caudal de difusión

(ml/min)
A251794 1.0
FILTRANIOS A A251763 1.1
A252380 1.0
A252338 2.8
FILTRANIOS B A251787 2.1
A252390 2.8
7.0 Discusión
7.1 Los productos testados FILTRANIOS A y B tienen características superiores

(volumen de agua filtrada a la obstrucción) respecto de los productos comparados.
Cuando el caudal de los productos probados FILTRANIOS A se reduce por término

medio a <2 l/mn, el volumen de agua filtrada es de aproximadamente 5.5m³
comparado con los productos PASm+, volumen filtrado de 2m³ a 2l/min. El tiempo
medido para alcanzar 2l/mn es de 130 minutos para los productos FILTRANIOS A,
comparado con 75 minutos para los productos PASm+.
Cuando el caudal de los productos probados FILTRANIOS B A se reduce por

término medio a <2 l/mn, el volumen de agua filtrada es de aproximadamente 5.4m3
comparado con los productos PASm+, volumen filtrado de 2,6m³ a <2l/min. El tiempo
medido para alcanzar 2l/mn es de 265 minutos para los productos FILTRANIOS B,
comparado con 190 minutos para los productos PAS.
Nota: dado que la calidad del agua de entrada no se ha controlado, las

comparaciones sólo son posibles para el test actual y no para los tests sucesivos.
7.2 Se realiza un test de integridad en cada uno de los productos después de su

"obstrucción".

Laboratorios ANIOS.
Página 8/9

Estudio N°8071
8.0 Conclusión
Los productos FILTRANIOS A y B tienen ambos 2 características de obstrucción

(volumen filtrado, tiempo de utilización) superiores respecto de los productos
comparados.
Los resultados confirman la ausencia de la obstrucción de los productos

FILTRANIOS A&B definidos según su aplicación específica.
9.0 Resumen del equipo utilizado
2 equipos para test de obstrucción

Equipo de test de integridad Porecheck 3 – número de serie PF00551

Laboratorios ANIOS.
Página 9/9

Estudio N°8485
Informe test NPD

domnick hunter
limited
DH3 2SF
Tel:(0191) 410 5121
Fax:(0191) 410 6723
domnick hunter
Tipo: Verificación de la elección técnica Nº informe: 8485
en el hospital. Anios
Nº proyecto: NPP3924
Título: Análisis del caudal inicial
RESUMEN
Este estudio trata de la determinación del caudal inicial de agua pura de las cajas de filtros
FILTRANIOS SEVEN y 30LP y confirma la especificación mínima requerida de 4l/min a 2-
3Barg.
Los resultados indican valores superiores a esta especificación de los FILTRANIOS A y B.
Preparado por: P Hymus Cargo : Ingeniero jefe

Aprobado: D Calder Cargo: Responsable NPD

Laboratorios ANIOS.
Página1/6

Estudio N°8485
ÍNDICE
N° de páginas
Resumen 1
Introducción 3
Objetivos 3
Diseño del test 3
Productos probados 3
Protocolo/procedimiento experimental 4
Resultados 5a6
Conclusión 6
Equipos 6

Laboratorios ANIOS.
Página 2/6

Estudio N°8485
1.0 Introducción
Este estudio trata de la determinación del caudal inicial de agua pura de las cajas de
filtros FILTRANIOS SEVEN y 30LP.
2.0 Objetivos
Confirmar la especificación mínima requerida de 4l/min a2-3Barg.
Agua pura pasa a través de los productos probados con valores de caudal cada vez
mayores y se anota la presión diferencial. En este estudio, el agua fluye a través de
los productos; a continuación, se elimina directamente a presión atmosférica. Sólo se
registra la presión anterior a los filtros.
Producto A FILTRANIOS SEVEN A – conexión de entrada contera

Walther / ducha a la salida
Números de serie – DC024717
DC024713
DC024735
Producto B FILTRANIOS SEVEN B – conexión de entrada contera

Walther / ducha a la salida
Números de serie – DC027922
DC029312
DC027410
Nota: la conexión de entrada contera Walther posee un diámetro interno de 3 mm

para el Seven A y 6mm para el SEVEN B.

Laboratorios ANIOS.
Página 3/6

Estudio N°8485
5.0 Protocolo/Procedimiento experimental
5.1 La Figura A muestra un esquema y una fotografía del equipo utilizado para probar la
vida útil de los filtros. Dicho equipo fue utilizado para el análisis de los flujos de agua
limpia.
Figura 1 – Esquema y fotografía del equipo experimental

KEY:
WATER SUPPLY
MANUAL VALVE
TOTALISING
FLOW METER
OR
ROTAMETER
T
PRESSURE
REGULATOR
PRESSURE GAUGE
LEG 1 RESTRICTION
(INSERT)
P
QUICK CONNECT
COUPLING, WITH &
WITHOUT
OPTIONAL LEG 2 NON-RETURN
OR
T
TEST FILTER
T
P PRE-FILTER
(1µm PEPLYN PLUS)
OPEN RESEVOIR
5.2 Se instala un filtro 0.2µm PROPOR-PES en el cuerpo del prefiltro en la entrada del
agua.
5.3 Los filtros probados se colocan sobre uno de los brazos del equipo; el segundo está
obturado y no se utiliza para este ensayo.
5.4 El caudal se aumenta por tramos idénticos sucesivos y se registra la presión anterior
a los filtros.

Laboratorios ANIOS.
Página 4/6

Estudio N°8485
6.0 Resultados
Los gráficos 1 y 2 muestran los resultados de los tests de caudal de agua limpia de
las cajas de filtros FILTRANIOS SEVEN A y SEVEN B, respectivamente.
Gráfico 1 – Caudal de agua limpia de los FILTRANIOS SEVEN A
Clean Water Flow Rate Analysis of Filtranios Seven A
3.5
DC024717
DC014713
3
DC024735
2.5
Differential Pressure (Bar)
1.5
0.5
0
1 2 3 4 5 6 7
Flow Rate (l/min)

Laboratorios ANIOS.
Página 5/6

Estudio N°8485
Gráfico 2 – Caudal de agua limpia de los FILTRANIOS SEVEN B
Clean Water Flow Rate Analysis of Filtranios Seven B
1.9
DC027922
DC029312
1.7
DC027410
1.5
Differential Pressure (Bar)
1.3
1.1
0.9
0.7
0.5
4 5 6 7 8 9 10
Flow Rate (l/min)
7.0 Conclusiones
Los caudales de agua limpia de los productos FILTRANIOS SEVEN A y B tienen

valores superiores al valor mínimo requerido de 4l/min a 2-3Barg en presión de
entrada.
8.0 Equipos
Equipo de test de obstrucción.

Laboratorios ANIOS.
Página 6/6

Estudio N°8486
Informe test NPD

domnick hunter
limited
DH3 2SF
Tel: (0191) 410 5121
Fax: (0191) 410 6723
domnick hunter
Tipo: Verificación de la elección técnica Nº informe: 8486
Nº proyecto: NPP3924 Anios
Título: Evaluación de la presión de ruptura
RESUMEN
Este estudio trata de la evaluación de la presión de ruptura de las cajas de filtros

FILTRANIOS SEVEN (resistencia mecánica).
Los resultados verifican los valores superiores de la presión de ruptura al valor mínimo
requerido de 12Barg a 50°C.
Los productos se prueban a 20°C y 50°C para determinar el efecto de la temperatura,

ocasionando un valor de presión de ruptura inferior del 20 al 25% a 50ºC con relación al
observado a 20°C.
Preparado por: P Hymus Cargo: Ingeniero jefe

Aprobado: D Calder Cargo: Responsible NPD

Laboratorios ANIOS.
Página 1/8

Estudio N°8486
ÍNDICE
N° de páginas
Resumen 1
Introducción 3
Objetivos 3
Diseño del test 3
Productos probados 3
Protocolo/Procedimiento experimental 3
Resultados 4a5
Discusión 6
Conclusión 6
Equipos 6
Anexo A 7a8

Laboratorios ANIOS.
Página 2/8

Estudio N°8486
1.0 Introducción
Este estudio trata de la determinación del valor de la presión de ruptura de las cajas
de filtros FILTRANIOS SEVEN.
2.0 Objetivos
Comprobar el valor mínimo requerido de la presión de ruptura a 12 barg a 50°C.
Asimismo, los productos se prueban a 20°C y 50°C para determinar el efecto de la

temperatura.
Los productos probados experimentan una fuerza dentro de las cajas procedente de
un aparato de test hidráulico. La presión aumenta por tramos idénticos sucesivos
hasta ruptura de las cajas.
Producto A 30 x FILTRANIOS SEVEN A - conexión de entrada contera

Walther / salida de ducha
Producto B 30 x FILTRANIOS SEVEN B - conexión de entrada contera
Walther / salida de ducha
5.0 Protocolo/Procedimiento experimental
5.1 Los productos probados se llenan y se sumergen totalmente en un baño de agua

caliente controlada de 20°C o 50°C. Las cajas quedan inmersas durante al menos 30
minutos para asegurar su estabilización.
5.2 A continuación, los productos se conectan a un aparato hidráulico (probador) y la

presión aumenta por tramos de 1 bar hasta ruptura. Después de cada tramo de 5
bar, los productos se examinan para observar fugas en la termosoldadura de la base
de la caja o signos de componentes forzados.
5.3 Se registra la presión de ruptura y el tipo de fallo de cada una de las cajas probadas.

Laboratorios ANIOS.
Página 3/8

Estudio N°8486
6.0 Resultados
Los gráficos 1 y 2 muestran los valores de la presión de ruptura de las cajas

Filtranios A y B, respectivamente, y la tabla 1 resume los resultados. Los resultados
completos se indican en el anexo A.
Tabla 1 – Resumen de resultados
Presión de ruptura (Barg)

Producto
20°C 50°C
FILTRANIOS SEVEN A 29 22
FILTRANIOS SEVEN B 28 22
Gráfico 1– Presión de ruptura de FILTRANIOS SEVEN A
Burst Pressure Testing of Filtranios Seven A filter capsules
60
Test Temperature
Burst Pressure
Average at 20°C
Burst Pressure (Barg) / Temperature (°C)
Average at 50°C
50
40
30
20
10
0
02 76
02 77
02 78
02 79
02 82
02 83
02 88
02 89
02 90
02 93
02 94
02 95
02 96
02 97
02 03
02 75
02 80
02 81
02 84
02 85
02 86
02 87
02 91
02 92
02 98
02 99
02 00
02 01
02 02
04
D 89
D 89
D 89
D 89
D 89
D 89
D 89
D 89
D 89
D 89
D 89
D 89
D 89
D 89
D 90
D 89
D 89
D 89
D 89
D 89
D 89
D 89
D 89
D 89
D 89
D 89
D 90
D 90
D 90
90
02
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
D
Filter ID

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°8486
Gráfico 2 – Presión de ruptura de FILTRANIOS SEVEN B
Burst Pressure Testing of Filtranios Seven B filter capsules
60
Test Temperature
Burst Pressure
Average at 20°C
Burst Pressure (Barg) / Temperature (°C)
Average at 50°C
50
40
30
20
10
0
02 33
02 34
02 06
02 07
02 10
02 13
02 14
02 15
02 08
02 09
02 11
02 12
02 17
02 18
02 19
02 20
02 22
02 24
02 28
02 29
02 30
02 16
02 21
02 23
02 25
02 26
02 27
02 31
02 32
35
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
93
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
D 93
02
C
C
C
C
C
D
Filter ID
Se ha observado una caída de aprox. el 20 % (o 6 barg) entre

los filtros FILTRANIOS SEVEN B probados a 20ºC y a 50ºC.

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°8486
7.0 Discusión
7.1 Los productos se fabrican con una salida de ducha, lo que implica 2 piezas al nivel
de la base, unidas por termosoldadura durante la rotación de dichas piezas. Para la
caja FILTRANIOS SEVEN A, la mayoría de las rupturas se localizan en la zona de
esta termosoldadura a una temperatura de 50°C. A 20°C, esta zona localiza el 75 %
de las rupturas; el 25 % restante procede de la zona situada alrededor de la unión
bol/base. No se localiza ninguna ruptura en la termosoldadura en ningún producto.
7.2 En cuanto a la caja FILTRANIOS SEVEN B a 50°C, encontramos la misma

repartición de ruptura en las zonas de termosoldadura bol/base, ducha/base y pared
del bol. Cabe observar la ausencia de ruptura de la unión ducha/base durante los
test a 20°C. Observamos, sin embargo, la misma repartición de ruptura en la zona
de la unión bol/base y pared del bol. No hay ninguna ruptura localizada en la
termosoldadura en ningún producto.
7.2 Se observa una disminución del 25% en el valor (7Bar) entre los productos Seven A
probados a 20°C y 50°C.
Se observa una disminución del 20% en el valor (6Bar) entre los productos Seven B
probados a 20°C y 50°C.
8.0 Conclusiones
Los valores de la presión de ruptura de los productos FILTRANIOS SEVEN A y B

son superiores al valor especificado de 12Barg a 50°C.
9.0 Equipos
Baño termostato Grant GD120 Número de serie – GM0316005

Equipo de test hidráulico hmp100 Número de serie – AD4026

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°8486
Anexo A – Resultados completos del test de ruptura
FILTRANIOS SEVEN A
Serial No Test Burst Failure Point

Temperature Pressure
(°C) (Barg)
DC028976 20 27 Shower to base weld area
DC028979 20 32 Bowl to base weld area

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°8486
Anexo A – Resultados completos del test de ruptura
FILTRANIOS SEVEN B
Serial No Test Burst Failure Point

Temperature Pressure
(°C) (Barg)
DC029311 20 29 Bowl wall split

Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°6689
Informe test NPD

domnick hunter
limited
DH3 2SF
Tel:(0191) 410 5121
Fax:(0191) 410 5312
domnick hunter
Preparado P Riddell Nº informe: 6689
para:
Producto: BEVPOR-P y PROPOR-PES cc: JP, GIJ, GB,
LSP
Código:
Título: Compatibilidad de los cartuchos BEVOR-P y
PROPOR-PES de PolieterSulfona en agua
que contiene 1000 ppm de cloro libre.
INTRODUCCIÓN
En respuesta a la petición técnica 3965, se ha puesto en contacto a cierto número de

cartuchos filtrantes de PES (PolieterSulfona) con disoluciones acuosas de cloro. La
exigencia precisa es un tiempo de contacto de 15 a 30 minutos a temperatura ambiente y a
una concentración de 1000 ppm de cloro libre.
MÉTODOS
Se utiliza un banco de test automático de acuerdo con el siguiente ciclo:
Nº de Descripción Valor de Tiempo (min.)

secuencia consigna
3 Retirada del contenido de la cuba 2 90I/min 30
7 Purga de aire de la cuba 2 0.6 bar N/A
9 Valor de la presión estabilizada 0.6 bar 10
La disolución de prueba se prepara rellenando la cuba 2 con agua añadida de una

disolución del 14-15% de hipoclorito de sodio, hasta la concentración de >1250ppm de
cloro libre.
mencionarlo o comunicarlo de otro modo a terceros sin autorización escrita de los
Laboratorios ANIOS.
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Estudio N°6689
Esta concentración se determina por análisis colorimétrico.

La concentración se comprueba regularmente para garantizar la conservación a un valor de
1000 ppm como mínimo.
La temperatura y el pH se miden pero no se controlan durante la prueba.
El flujo de 90I/min se utiliza para constituir el valor medio de 10I/min por módulo de 10”.
Los módulos de cartuchos filtrantes se eligen entre 3 lotes separados de fabricación.
Los cartuchos filtrantes se someten a un test de integridad (mantenimiento de presión)

según IPPF 29 a valores de presión recomendados antes del uso y después de 77 ciclos.
Después de 77 ciclos, un módulo de cada lote se diseca y la membrana se examina

visualmente.
RESULTADOS
Resultados de la prueba de
ID de Tipo de mantenimiento de presión (Pressure
módulo membrana Decay Test)
Inicial Después de 77
ciclos
G57438 12F 3 3
G57465 12F
G57430 12F 5 4
G65303 12F
G65293 12F 5 3
G65301 12F
G55098 1F EL 7 8
G55103 1F EL
G55097 1F EL 6(2) 4(2)

Laboratorios ANIOS.
Página 2/3

Estudio N°6689
Tabla 1: Notas (1) Presión de prueba 0.6 bar para módulos 12f y 4.8 bar para módulos 1F
EL
(2) Instalados en un cuerpo de filtro con referencia ZVS-011, todos los
demás módulos en un cuerpo de filtro ZVS-013.
Los valores de pérdida de presión del cuerpo de filtro multicartucho son inferiores a 30 mb
para 10 minutos de mantenimiento de presión.
La temperatura queda comprendida entre 26 y 30°C.
En el examen visual no aparece ninguna deterioración de la membrana en ningún módulo

de lote diferente.
CONCLUSIÓN
A una temperatura de 26-30°C y una concentración 1000-1250ppm de cloro libre en el

agua, los elementos filtrantes BEVPOR-P y PROPOR-PES quedan íntegros después de
más de 38,5 horas de contacto en dinámico y más de 77 horas de contacto en estático.

Laboratorios ANIOS.
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Informe de la sociedad Texicon Corporation en Bedford
Ref. 04-4142-G5 del 6 de octubre de 2004:
Implantación del material sólido en tejido animal
Test de conformidad con la FDA (Food and Drugs Administration) 21 CFR, Parte 8.
Buenas prácticas de laboratorio para estudios no clínicos de laboratorio.
Resumen
De acuerdo con el test de implantación de materiales en tejido animal de conejo
blanco de Nueva Zelanda por inyección intravenosa de extractos sólidos en una
solución de cloruro de sodio (NaCl) al 0,9 %, los productos FILTRANIOS A y B no
aportaron ninguna respuesta pirogénica; por tanto, sus materiales se consideran no
pirogénicos.

Ref. 04-4142-G4 del 23 de septiembre de 2004:
Inyección de extractos de plástico: búsqueda de una toxicidad sistémica
Evaluación biológica de dispositivo médico – Parte 11 test para toxicidad sistémica,
ISO 10993-11, 1993.
Resumen
Extractos de materiales de FILTRANIOS A y B en una solución de cloruro de sodio
(NaCl) al 0,9 % y de aceite de vaina de algodón (CSO- Cotton seed oil) no indujeron
ninguna reacción biológica más importante que los productos de referencia,
probados en el ratón suizo albino.
De acuerdo con los estándares del protocolo del estudio, este test se considera, por
tanto, negativo.

Ref. 04-4142-G1 del 21 de septiembre de 2004:
Test de toxicidad por elución de un cultivo de célula mamaliana L929
Evaluación biológica de dispositivo médico – Parte 5 test para toxicidad in vitro,
ISO 10993-5, 1999.
Resumen
No se observó ninguna reacción biológica (grado 0) en las células mamalianas L929
en 48 horas, después de exposición de extractos de materiales constitutivos de los
productos probados FILTRANIOS A y B.
La respuesta celular observada obtenida a partir del control positivo de extractos de
productos (grado 4) y del control negativo de extractos de productos (grado 0)
confirma la fiabilidad del protocolo del test.
Los productos probados, las cajas de filtro FILTRANIOS SEVEN A y B, se
consideran no citotóxicos y de acuerdo con las exigencias del test de elución, ISO
10993-5.
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INFORME CIENTÍFICO

FILTRANIOS SEVEN A Y SEVEN B

1 / Challenge bacteriano según el método estandarizado ASTM F838-83 frente a

2 / Evaluación de la retención bacteriana durante 7 días en condiciones desfavorables –

3 / Evaluación de la retención bacteriana durante 7 días en condiciones de uso de

4 / Evaluación de la retención bacteriana frente a Legionella pneumophilia durante 30

5 / Evaluación de la retención bacteriana durante 30 días en condiciones de uso de

PRESTACIONES TÉCNICAS (páginas 181 hasta 241)

6 / Medida de los Volúmenes de filtración de los Filtranios tamaño A y B– Estudio

7 / Medida de los caudales en función de las presiones de la red –

8 / Evaluación de la resistencia de las membranas a la temperatura y a la presión

9 / Evaluación de la resistencia de las membranas de los Filtranios Seven y 30LP al

DATOS BIOLÓGICOS (páginas 245 hasta 279)

9 / Medida de la reacción pirógena a las sustancias extraíbles

10 / Medida de la reacción biológica a las sustancias extraíbles

11 / Medida de la citotoxicidad a las sustancias extraíbles

OTROS DATOS (páginas 283 hasta 287)

12 / Certificado de garantía de calidad ISO 9001:2000 y de conformidad

informe FILTRANIOS SEVEN y FILTRANIOS 30 LP - ES - página 1/287

Informe de ensayo de los laboratorios LSG

Preparado Laboratorios ANIOS N° de informe: 8105

Código: FILTRANIOS SEVEN

Se ha solicitado una prueba challenge bacteriano en el marco del programa de validación

Preparado por: M. Taylor Cargo: Responsable LSG

Aprobado por: M. Brailsford Cargo: Director técnico

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informe FILTRANIOS SEVEN y FILTRANIOS 30 LP - ES - página 5/287

El objetivo de este test consiste en comprobar si los filtros FILTRANIOS SEVEN,

La validación ha sido efectuada según el protocolo de «challenge bacteriano de los filtros

Los datos en bruto se presentan en el anexo 2.

Se ha realizado un test no destructor de integridad con caudal de difusión antes y después

Los resultados obtenidos durante el test de challenge bacteriano se recogen en la tabla 1,

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informe FILTRANIOS SEVEN y FILTRANIOS 30 LP - ES - página 6/287

SFE = superficie de filtración eficaz

TI = test de integridad (con gasto de difusión)

informe FILTRANIOS SEVEN y FILTRANIOS 30 LP - ES - página 7/287

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informe FILTRANIOS SEVEN y FILTRANIOS 30 LP - ES - página 8/287

Anexo 1: Revisión 1 – 18 páginas

Protocolo de validación por challenge bacteriano de los elementos filtrantes a grado

Fichas de datos - Test de challenge bacteriano

Certificado de calibración del equipo del test de integridad PORECHECK3

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informe FILTRANIOS SEVEN y FILTRANIOS 30 LP - ES - página 9/287

Protocolo de validación por challenge bacteriano de los elementos filtrantes a grado

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informe FILTRANIOS SEVEN y FILTRANIOS 30 LP - ES - página 11/287

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4 RESOURCE REQUIRED .................................................................................................................................. 5

8.2 DILUTION PLATE COUNTS (DPC) .................................................................................................................12

8.4 ACCEPTANCE CRITERIA................................................................................................................................14

9 APPROVAL SIGNATURES...................................................................... ERREUR ! SIGNET NON DEFINI.

APPENDIX: BACTERIAL CHALLENGE RECORD SHEET EXEMPLE 1.................................................... 15

APPENDIX: BACTERIAL CHALLENGE RECORD SHEET EXEMPLE 2.................................................... 16

APPENDIX: BACTERIAL CHALLENGE RECORD SHEET EXEMPLE 3.................................................... 18

APPENDIX: BACTERIAL CHALLENGE SCHEMATIC .................................................................................. 19

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