Informe - Consulta Guía 9 - MARIANA GARCÍA GUZMÁN

Mariana García Guzmán
Microbiología – Informe de Laboratorio

Bacteriología – Segundo Semestre
Esta semana en el laboratorio realizamos pruebas de identificación bioquímica con diferentes
medios de cultivo y en algunos medios selectivos y diferenciales, cada uno con un
microorganismo diferente. Yo sembré K. pneumonie, es una bacteria gram negativa de la
familia Enterobacteriaceae, causa enfermedades infecciosas oportunistas.
PRUEBA
DE OXIDACIÓN-FERMENTACIÓN (O-F):
Se trabajó con un tubo de forma aerobia (abierta-sin aceite) y anaerobia (cerrada-con aceite),
esta prueba detecta la glucosa presente en el microorganismo dado.
O-F-lunes 27/09-Sin Siembra O-F-martes 28/09-Con Siembra
En ambos medios se producen ácidos a partir de la glucosa, por lo que el tubo cerrado y el
abierto viran a amarillo, por lo que se puede decir que este es un microorganismo
fermentador.
PRUEBA DE ROJO DE FENOL (RF):
Es un medio de cultivo base para determinar las reacciones de fermentación de los

microorganismos; determina la capacidad de un microorganismo para degradar un
carbohidrato específico.
RF-lunes 27/09-Sin Siembra RF-martes 28/09- Con

Siembra
Es un ácido fermentativo puesto que viró a un color amarillo (pH 6,8) pudiendo haber una
producción o no de gas (este último punto no se pudo comprobar en este laboratorio dado
que no había una campana de Durham).
PRUEBA DE ROJO DE METILO (RM):
Determina la capacidad de un microorganismo para producir y mantener estables los

productos ácidos de la fermentación de la glucosa.
RM-lunes 27/09-Sin Siembra y Sin Revelador RM-martes 28/09- Con Siembra y con Revelador
Es una prueba positiva (+), indicándonos que el microorganismo es un fermentador y hay

presencia de glucosa en él, dado que se da un color rojo estable en la superficie, lo que nos
indica que hay una producción de ácido suficiente para bajar el pH a 4.4.
PRUEBA DE VOGES PROSKAUER (VP):
Determina la capacidad de algunos microorganismos de generar un producto final neutro a

partir de la fermentación de glucosa.
VP-lunes 27/09- Sin Siembra y Sin Revelador VP-martes

27/09-Con Siembra y Con Revelador
Es una prueba negativa (-), dado que nos da un viraje cobrizo, lo que nos quiere decir que la
bacteria no genera productos neutros (acetoina y 2,3 butanodiol).
AGAR TRES AZUCARES – HIERRO (TSI):
Esta prueba se usa para observar la fermentación de tres azúcares (glucosa, lactosa y sacarosa)
y la producción de H2S por parte del microorganismo.
TSI- lunes 27/09-Sin Siembra TSI-martes 28/09-Con Siembra
El microorganismo es un A/A (fermentador de los tres (3) azúcares), da un viraje amarillo dado
que da una reacción ácida, la producción de gas (burbujas) es de una + y no hay formación de
H2S (precipitado negro) -.
AGAR MAC CONKEY:
Este medio es utilizado para aislar bacilos gram negativos de fácil desarrollo, aerobios y
anaerobios facultativos.
Mac Conkey-lunes 27/09-Sin Siembra Mac Conkey-martes 28/09-Con Siembra
Es un fermentador de lactosa pues formó colonias de color rojo – rosado, son cremosas y
punteadas.
AGAR EOSINA-AZUL DE METILENO (EMB):
Es utilizado para el aislamiento selectivo de bacilos gram negativos de rápido desarrollo y

escasas exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de todas las especies de la familia
Enterobacteriaceae.
EMB-lunes 27/09-Sin Siembra EMB-martes 28/09-Con Siembra
Es un fermentador de lactosa dado que las colonias son de color azul oscuro con un brillo
verde metálico, son colonias mate, punteadas, delgadas y no poseen mucha altura.
AGAR HECKTOEN ENTERIC (HE):
Medio selectivo y diferencial, contiene indicadores de fermentadores de lactosa, identifica

bacterias intestinales patógenas, contiene una alta concentración de sales biliares lo que hace
que se inhiba el crecimiento de bacterias gram positivas.
HE – lunes 27/09 – Sin Siembra HE – martes 28/09 – Con Siembra
Es un fermentador rápido de lactosa ya que las colonias formadas son de un color naranja
brillante.
CONCLUSIONES:
 En todos los medios muestra que hay fermentación de tres azúcares (sacarosa, lactosa
y glucosa), por lo que podemos decir que la K. pneumonie en las diferentes pruebas
hubo un cambio de color notable y formación de colonias en los medios de cultivo.
 En las pruebas de OXIDACIÓN-FERMENTACIÓN (O-F) y ROJO DE METILO (RM) hay
fermentación de glucosa.
 En el medio HECKTOEN ENTERIC (HE) crece microorganismos patógenos, y en este
medio la K. pneumonie creció y formó colonias.
 En el caldo VOGES PROSKAUER (VP) da una prueba negativa, lo que nos indica que no
hay generación de productos neutros.
 En todas las pruebas de identificación bioquímica (exceptuando la de VOGES
PROSKAUER (VP)) evidenciamos que la K. pneumonie hacen reacciones ácidas.
 En los medios MAC CONKEY y EOSINA-AZUL DE METILENO (EMB) permiten el

crecimiento de bacterias gram negativas, y cómo pudimos ver en las características de
la K. pneumonie es una bacteria gram negativa, y esto lo pudimos corroborar gracias a
estos medios.
CONSULTA GUÍA 9
1. Investigue que otras fuentes de carbono son utilizadas para la realización de
identificación bioquímica y que tipo de prueba se realiza:
 Utilización de citrato: Esta prueba sirve para determinar si un microorganismo
es capaz de utilizar citrato como única fuente de carbono y compuestos
amoniacales como única fuente de nitrógeno en su metabolismo, provocando
una alcalinización del medio.
2. Con respecto a las pruebas de identificación bioquímica utilizadas en la práctica
complete el siguiente cuadro: composición del medio de cultivo (carbohidratos,
indicadores de pH), reveladores utilizados en la prueba, lectura e interpretación:
PRUEBAS CARBOHIDRATOS INDICADOR REVELADOR COLOR LECTURA INTERPRETACIÓN

DE pH INICIAL/TIPO DE
SIEMBRA
TEST O-F Glucosa Rojo neutro Color inicial: A/A, Gas +, H2S Reacción ácida
pH: 7.1 ± 0.2 naranja negativo (A), producción
Tipo de de gas, se lee por
siembra: cruces (+) y
picadura y estría formación de H2S
se lee por cruces
(+)
ROJO DE Glucosa Rojo fenol Color inicial:
FENOL pH: 7.4 ± 0.2 naranja
Tipo de
siembra: asa
bacteriológica
argollada

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O-F-lunes 27/09-Sin Siembra O-F-martes 28/09-Con Siembra

PRUEBA DE ROJO DE FENOL (RF):

Es un medio de cultivo base para determinar las reacciones de fermentación de los

RF-lunes 27/09-Sin Siembra RF-martes 28/09- Con

PRUEBA DE ROJO DE METILO (RM):

Determina la capacidad de un microorganismo para producir y mantener estables los

Es una prueba positiva (+), indicándonos que el microorganismo es un fermentador y hay

PRUEBA DE VOGES PROSKAUER (VP):

Determina la capacidad de algunos microorganismos de generar un producto final neutro a

VP-lunes 27/09- Sin Siembra y Sin Revelador VP-martes

AGAR TRES AZUCARES – HIERRO (TSI):

TSI- lunes 27/09-Sin Siembra TSI-martes 28/09-Con Siembra

AGAR MAC CONKEY:

Mac Conkey-lunes 27/09-Sin Siembra Mac Conkey-martes 28/09-Con Siembra

AGAR EOSINA-AZUL DE METILENO (EMB):

Es utilizado para el aislamiento selectivo de bacilos gram negativos de rápido desarrollo y

AGAR HECKTOEN ENTERIC (HE):

Medio selectivo y diferencial, contiene indicadores de fermentadores de lactosa, identifica

HE – lunes 27/09 – Sin Siembra HE – martes 28/09 – Con Siembra

 En los medios MAC CONKEY y EOSINA-AZUL DE METILENO (EMB) permiten el

PRUEBAS CARBOHIDRATOS INDICADOR REVELADOR COLOR LECTURA INTERPRETACIÓN

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