Enterobacterias Practica Microbiologia by Giovani

Giovani Montes Chvez
Microbiologa - Practicas
Secc:B
Grupo N4
Practica N 7
Enterobacterias
1.- Introduccin
En la microbiologa haba tres formas bsicas de morfologa los cocos, bacilos y
espirilos.
Las entero bacterias vienen a ser bacilos gram negativos (se caracterizan por la
estructura y composicin de su pared poca cantidad de peptidoglinano y por tener
lipopolisacaridos, en el momento de la descoloracin con alcohol acetona pierde
su pared bacteriana y todo el cristal violeta, es por eso que cuando se le aade la
safranina pintan de color rojo) (bastoncillos de color rojo) son aerobios y
anaerobios facultativos, forman flora en el tracto gastrointestinal.
En el tracto urinario se los encuentra de manera patgena sea cuando
abandonan el lugar donde hicieron la flora ya sea a nivel de tracto urinario, tracto
genital tracto respiratorio superior e inferior.
Caractersticas de los entero bacterias fermentan glucosa, son cito cromo oxidasa
negativos y reducen nitrato a nitritos caractersticas fundamentales de las entero
bacterias.
2.- Mtodos diagnsticos.
Dos tipos de muestras:
Contaminadas: Heces su examen se hace atreves del coprocultivo ya que

tiene diferentes objetivos de aislamiento
El resto de muestras (secrecin de heridas, secrecin faranguea, muestra
de esputo muestra de orina
No contaminadas: LCR (Lquido cefalorraqudeo), sangre y otros lquidos
biolgicos
Aislamiento para los dos tipos de muestra

Agar sangre: es un tipo de medio enriquecido significa que tiene nutrientes y
factores de crecimiento y permite el crecimiento de una amplia gama de
microorganismos.
Adems de esto debemos utilizar medios selectivos: son aquellos medios
que tienen inhibidores locual significa que solo dejaran crecer un
determinado grupo bacteriano

Secc:B
Grupo N4
Agar MacConkey: medio selectivo para microorganismo gram negativos, sus

inhibidores son el cristal violeta y las sales biliares estas inhiben el crecimiento de
los gram positivos.
Agar EMB (eosina metilen blue): tambin es un medio selectivo sus inhibidores
son la eosina y el azul de metileno los cuales inhiben el crecimiento de
microorganismo gram positivos.
Aparte estos medios son diferenciales porque nos permiten diferenciar a los
microorganismos por su comportamiento bioqumico.
El Agar MacConkey es diferencial porque vamos a diferenciar microorganismos
lactosa positivos y lactosa negativos. Los positivos se ven como colonias de color
rosado y los lactosa negativas sern colonias trasparentes, para diferenciar debe
tener un indicador el rojo neutro.
Agar EMB tambin es diferencial all se diferenciaran lactosas positivas y
negativas, las positivas sern de color negro y las negativas colonias
transparentes, indicador son la eosina y el azul de metileno los cuales tambin son
inhibidores.
Procedimiento
Sembramos ya sean muestras contaminadas o no.
Incubamos a 35 a 37 C por 24 horas vemos que hay crecimiento de colonias
lactosa gram positivas digamos de una muestra de orina, si crece significa que
hay infeccin, para saber que microorganismo es, lo haremos atreves de la
diferenciacin bioqumica, aislamos la bacteria y las sembramos en los agares
diferenciales: Agar TCI, Agar LIA, Agar citrato de Simmons, Agar urea y Agar SIM.
Todos ellos se siembran se incuban a 37 C y de acuerdo al comportamiento
bioqumico se identifica si es una Escherichia, klebsiella o citrobacter etc.
Escherichia coli
La Escherichia coli hay una que es buena que forma parte de nuestra flora
intestinal pero hay unas que son patgenas como la Escherichia coli
enterotoxignica,
Escherichia
coli
enteropatogena,
Escherichia
coli
enterohemorrgica y Escherichia coli enteroinvasiva. Todas son patgenas. Para
identificarlas se hace con antisueros.

Secc:B
Grupo N4
Procedimiento
El procedimiento es coger la colonia, homogenizar con suero fisiolgico (liquido
lechoso), coger una gota y poner en lmina porta objetos de all ponemos el
antisuero y se ve si hay aglutinacin.
Si aglutina es examen positivo todo esto es la tipificacin serolgica, despus de
esto recin se pasa al antibiograma que es el estudio de sensibilidad y resistencia
ante frmacos.
Diagnostico
Agar MacConkey: colonias lactosa positivas son rosadas (Escherichia coli,
Enterobacter aerogenes), la lactosas negativas son colonias transparentes
(Proteus vulgaris, salmonella).
El Staphylococcus aureus no crece en Agar MacConkey ya que este es un
medio selectivo (no crecen gram positivos).solo para bacilos gram negativos.
Agar EMB: Escherichia coli colonias negras. Enterobacter, proteus transparente
salmonella transparente, estafilococos no creci
Otra caracterstica que se ve en la Escherichia coli es un brillo metlico es
nico de este bacteria se produce por la fermentacin acelerada de la
lactosa.
La diferenciacin bioqumica
Se utiliza diferentes medios de cultivo.
Medio de cultivo citrato de Simmons: este medio sin cultivar tiene la apariencia
de color verde el indicador viene a ser azul de bromotimol aqu se evala la
fermentacin del citrato si el microorganismo fermenta el citrato el medio se
acidifica y se pone de color azul (citrato de Simmons positivo) si permanece verde
(citrato de Simmons negativo).
Agar TSI (triple azcar hierro): el indicador es el rojo fenol sin cultivar tiene
apariencia rojo ladrillo aqu se vern tres lecturas: la lectura de fermentacin de
azucares, produccin de cido sulfhdrico y la produccin de gas.
Fermentacin de azucares: se evalan de acuerdo al cambio de

coloracin que se formen en el pico de flauta y en el tubo , el medio sin
inocular luego sembrado e incubado a 37 C x 24 y se observa que
cambia de rojo a amarillo (significa acides) (A)
Ejemplos de lectura:

Secc:B
Grupo N4
1.-pico de flauta amarillo (A) tubo amarillo (A) entonces

fermentacin de azucares seria A/A.
lectura de
2.- pico de flauta rojo no ha habido variacin significa alcalinidad fondo

amarillo lectura seria K/A.
3.- en el caso que yo sembr y incubo y seque da todo rojo la lectura seria
K/k lo cual me indica que es un bacilo gram negativo no fermentador de
glucosa estos quedan en otra clasificacin (entre est clasificacin se
encuentran las Pseudomonas).
Produccin de sulfuro de hidrogeno: como lo leo cuando el medio se
pone negro se lee en cruces.
Ejemplo: tres cruces todo el medio de negro
Produccin de gas: se ve la formacin de burbujas de aire dentro del
medio tambin se lee en cruces.
Ejemplo: lo levanta al medio entonces seria +++.
Ejemplos de lectura:
1.
2.
3.
4.
K/A, produccin de sulfuro de hidrogeno +++ gas negativo.

A/A, sulfuro de hidrogeno negativo ,gas +++
K/A ,sulfuro de hidrogeno negativo, gas negativo
K/K, sulfuro de hidrogeno negativo, gas negativo
El TSI tiene tres lecturas tenemos que colocar las tres lecturas.
Agar LIA (lisina - hierro) .

El indicador es el Prpura de bromocresol.
Lectura de la lisina, produccin de acido sulfhdrico y la produccin de gas son
tres lecturas igual que el agar anterior.
Lectura de lisina: se evala:
Descarboxilacin de lisina: K/K (pico y fondo de color lila).

La desaminacin de lisina: R/A (pico rojo y fondo amarillo) (el nico
microorganismo que lo produce es el Proteus).
Produccin negativa de lisina: A/A y K/A
Ejemplos de lectura.
1. K/K, sulfuro de hidrogeno negativo ,gas negativo
2. R/A ,sulfuro de hidrogeno negativo, gas negativo
3. A/A ,sulfuro de hidrogeno positivo ,gas positivo +

Secc:B
Grupo N4
4. K/A ,sulfuro de hidrogeno negativo ,gas negativo

Agar SIM (sulfuro indol motilidad).
Tres lecturas para este medio.
Es un medio semislido por lo tanto su concentracin de agar es de 0.5%, en este
medio solo se ve fondo no tiene pico de flauta.
Lectura de sulfuro de hidrogeno: el medio se torna de color obscuro y se

lee con cruces
Prueba de indol: a este medio se le aade el reactivo de kovacs y leemos
si es que desarrolla un anillo rojo grosella es una prueba indol positiva, lo
cual significa que el microorganismo tiene la enzima triptofanasa. Si no
sucede nada y forma anillo amarillo es una prueba indol negativo.
Motilidad: el medio es transparente sin nada incubado en el, si se pone
turbio es una prueba de motilidad positiva.
Agar urea christensen.

Una sola lectura su indicador es el rojo de fenol.
El medio sin inocular es de color amarillo, una vez que se incuba a 37c por 24
horas y leemos, si el medio se vuelve de color rosado significa que es una prueba
urea positiva lo cual nos indica que el microorganismo produce ureasa.
Prueba de rojo de metilo Prueba de voger proskaver.
Estas pruebas evalan la fermentacin de lactosa (en esta fermentacin se
produce el acido piruvico, este acido va a tener dos vas de fermentacin: la va
glutilen glycol y la va de fermentacin acido mixto).
Va de fermentacin de glutilen glycol: en esta va hay la produccin de
acetoina y esta es detectada por la prueba de voger proskaver (evala la va de
fermentacin del glutilen glycol)
Va de fermentacin mixta: Se producen cidos fuertes como el acido lctico, el
acido actico, el acido frmico, la prueba que evala esto es la prueba de rojo de
metilo.
Debemos tener en cuenta que los microorganismos que estn ac son voger
proskaver positivos: la klebsiella, Enterobacter, la hafnia, y la Serratia y el resto
son voger proskaver negativos.

Secc:B
Grupo N4
Ejemplos: si un microorganismo es voger proskaver positivos es rojo de metilo

negativo y viceversa entonces si la klebsiella es voger proskaver positivos su rojo
de metilo es negativo.
Caldo peptonado tripticasa sdico.
Indicador rojo de metilo.
Sin inocular es claro, una vez sembrado se vuelve turbio se aade el indicador si
el medio se torna rojo es positivo, sino cambia de color o se vuelve naranja o
amarillo es negativo.
Lectura
Empezar por el agar TSI si tiene K/A o A/A .Significa que es un microorganismo
fermentador, si es K/K no es fermentador en la prctica se vieron puros
fermentadores, entonces luego vemos el citrato de Simmons si es negativo me
orienta que puede tratarse de una Escherichia coli. En esa prctica pero tambin
pudo ser la shigella, entonces es positivo se puso azul entonces pasamos a
motilidad del agar SIM .Si es negativa nos indica que se trata de una klebsiella y
esta se puede distinguir por la prueba de indol si es negativa es una Klebsiella
pneumoniae si es positiva es Klebsiella oxytoca
Si la motilidad en el Agar SIM es positiva (medio turbio) paso a evaluar produccin
de sulfuro de hidrogeno que tambin se hace en este Agar, si es negativo es un
Enterobacter y si es positivo es un citrobacter aprender bien ese cuadro para
poder dar un buen diagnostico.

Enterobacterias Practica Microbiologia by Giovani

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Enterobacterias Practica Microbiologia by Giovani

Cargado por

Información del documento

Descripción original:

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Enterobacterias Practica Microbiologia by Giovani

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Giovani Montes Chvez

Contaminadas: Heces su examen se hace atreves del coprocultivo ya que

Aislamiento para los dos tipos de muestra

Giovani Montes Chvez

Agar MacConkey: medio selectivo para microorganismo gram negativos, sus

Giovani Montes Chvez

Fermentacin de azucares: se evalan de acuerdo al cambio de

Giovani Montes Chvez

1.-pico de flauta amarillo (A) tubo amarillo (A) entonces

2.- pico de flauta rojo no ha habido variacin significa alcalinidad fondo

K/A, produccin de sulfuro de hidrogeno +++ gas negativo.

Agar LIA (lisina - hierro) .

Descarboxilacin de lisina: K/K (pico y fondo de color lila).

Giovani Montes Chvez

4. K/A ,sulfuro de hidrogeno negativo ,gas negativo

Lectura de sulfuro de hidrogeno: el medio se torna de color obscuro y se

Agar urea christensen.

Giovani Montes Chvez

Ejemplos: si un microorganismo es voger proskaver positivos es rojo de metilo

También podría gustarte