Clase 2 de Molecular

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Los ácidos nucleicos

Andrés Jenuer Matta. PhD.


Diana Carolina Zambrano. PhD.
Historia del ADN
Ácidos nucleicos
Ø En 1869, utilizando esperma de salmón y
glóbulos blancos obtenidos de curativos
quirúrgicos que recogía en una clínica,
consiguió aislar el contenido nuclear,
separándolo del citoplasma.

Ø La sustancia que obtuvo después de esta


purificación fue denominada por el como
NUCLEINA.

Ø El determinó que esta sustancia era de un alto


peso molecular, por eso sugirió que esta
sustancia podría actuar como un compuesto
genético
Friedrich Miescher
(1844-1895)
Historia del ADN
Experimentos de Griffth (1928)

Los cultivos S destruidos por el calor contienen un factor


transformante (ADN) que convierte a bacterias R inocuas
en bacterias virulentas S.
Historia del ADN

Experimento de Avery (1944)

El neumococo tipo R (rough, rugoso) (colonias a la izda.) puede ser


transformado en neumococo tipo S (smooth, liso) (colonias a la
dcha.) por el DNA del neumococo S. Esta transformación se
transmite a la descendencia.
Historia del ADN
Experimento de Avery (1944)
Historia del ADN

Experimento de Avery (1944)


.
Historia del ADN
Experimento de Avery (1944)
Historia del ADN
Alfred Hershey y Martha Chase en 1952.

Bacteriófago T2

El DNA es el
material infeccioso
Historia del ADN
Alfred Hershey y Martha Chase en 1952.
Historia del ADN
Alfred Hershey y Martha Chase en 1952.
Historia del ADN

Alfred Hershey y
Martha Chase en
1958.
Historia del ADN
En 1953, James Watson y Francis Crick combinaron los datos químicos y
físicos del DNA, y propusieron un modelo estructural del DNA que
publicaron en la revista Nature

Construyendo el modelo

Watson y Crick Modelo finalizado


Historia del ADN
La estructura del ADN
En 1953, James Watson y Francis Crick demuestran la estructura de
doble hélice del ADN

Watson y yo hemos
encontrado el
secreto de la vida
El material genético son ácidos nucleicos.

Existen dos tipos de ácidos


nucleicos:
El ADN guarda la información
genética en todos los
organismos celulares.
El ARN es necesario para que
se exprese la información
contenida en el ADN.
El material genético son ácidos nucleicos.
Componentes de los ácidos nucleicos.
Composición química y estructura de los ácidos
nucleicos

l Son moléculas formadas


por la unión de un azúcar,
Glucosídico una pentosa, una base
nitrogenada y un grupo
fosfodiéster fosfato.
Composición química y estructura de los ácidos
nucleicos

Nucleósido
Composición química y estructura de los
ácidos nucleicos

Azúcar
Composición química y estructura de los
ácidos nucleicos
Bases nitrogenadas
Composición química y estructura de los
ácidos nucleicos
(DNA/RNA)
Bases nitrogenadas
derivadas de la purina

(DNA/RNA)
Composición química y estructura de los
ácidos nucleicos
Bases nitrogenadas derivadas de la pirimidina

(DNA/RNA)

(DNA)

(RNA)
Composición química y estructura de los
ácidos nucleicos
Propiedades físico-químicas de las bases nitrogenadas

1. Naturaleza básica

2. Hidrofobicidad

3. Dipolos.
La estructura del ADN
Los ácidos nucleicos están formados, por la polimerización de muchos
nucleótidos, los cuales se unen de la siguiente manera: 3´-pentosa-5´-fosfato---
3´-pentosa-5´fosfato-----
La estructura del ADN
La estructura del ADN
La estructura del ADN
La estructura del ADN
• Los puentes de hidrógeno son específicos entre las bases:
– La adenina siempre forma 2 enlaces con timina.
– La citosina siempre forma 3 enlaces con guanina
La doble Hélice

• Las secuencias de bases en una hilera


de la cadena son complementarias

Si una cadena tiene la siguiente


secuencia:

3’-AGCTAC-5’

Entonces la otra cadena tiene


esta secuencia:

5’-TCGATG-3’ fosfato hidroxilo


Estructura ADN

Primaria Secundaria Terciaria


La estructura del ADN
Estructura del ADN

Tipos de ADN según su estructura, su forma y su


empaquetamiento

ESTRUCTURA FORMA EMPAQUETAMIENTO

Monocatenario Asociado a
Lineal histonas
(Virus) (Eucariotas)

Bicatenario Circular No asociado a


(Procariotas) histonas
Estructura del ADN
Tipos de ADN según su estructura, su forma y su
empaquetamiento
Polimorfismo de la doble hélice del DNA

nº de nucleotidos
TIPO DE ADN GIRO DE HELICE nm por Vuelta Plano entre bases
por vuelta
A Dextrógiro 2.8 inclinado 11
B Dextrógiro 3.4 perpendicular 10
Z Levógiro 4.5 zig-zag 12
ADN B

ADN A

ADN Z
El ácido ribonucleico - ARN

El ARN es casi siempre monocatenario.


Tipos de ARN
EL ARN mensajero (ARNm)

•Es monocatenario, básicamente lineal, y


con un peso molecular que oscila entre
200.000 y 1.000.000.

•El ARNm eucariótico es


monocistrónico, es decir, sólo contiene
información para una cadena
polipeptídica.
EL ARN mensajero (ARNm)
EL ARN DE TRANSFERENCIA (ARNt)
• En ella se distingue:

Ø Brazo D: Unión con el enzima que


cataliza la unión a los
aminoácidos.
Ø Brazo T: Lleva timina
Ø Brazo A (del anticodón).
Ø Extermo 3’: aceptor de
aminoácidos
Ø Extremo 5’: Siempre lleva guanina
y un grupo fosfórico libre.
EL ARN RIBOSÓMICO (ARNr)
El ARNr está asociado con las proteínas ribosómicas (más de 70), formando una
estructura relacionada con la síntesis de proteínas (da alojamiento al ARNm y a los
ARNt, portadores de los aminoácidos que formarán las proteínas durante dicho
proceso).
EL ARN RIBOSÓMICO (ARNr)
Diferencias entre DNA y RNA

Desoxirribosa
ADN Adenina, guanina, citosina, timina
Radical fosfato

Ribosa
Adenina, guanina, citosina, uracilo
ARN
Radical fosfato
Diferencias entre DNA y RNA

DNA RNA

Doble cadena helicoidal Cadena Simple

Tiene las bases A, T, G y C Tiene las bases A, U, G y C

La pentosa es una desoxirribosa La pentosa es una ribosa

Es una Macromolécula Es más pequeña que el DNA

Esta en el Núcleo Se encuentra en el citoplasma

Constituye los Genes (se replica o se trascribe Es una molécula involucrada en la síntesis de
a RNA) proteínas
Propiedades Físicas y Químicas del ADN

a) Absorbancia:
Propiedades Físicas y Químicas del ADN

b) Interacciones Iónicas:
Propiedades Físicas y Químicas del ADN
c) Viscosidad: Es directamente proporcional a la resistencia de sus
componentes a flotar:
- ADN duplex: fuertemente viscoso
Propiedades Físicas y Químicas del ADN

d) Sedimentación en centrifugación:
Propiedades Físicas y Químicas del ADN

e) Desnaturalización – desnaturalización
Métodos de estudio
Electroforesis
Separación de moléculas de DNA y RNA de distinto tamaño por
migración en un campo eléctrico.
Objetivos:
• Elaborar cariotipos moleculares.
• Conocer la ubicación de genes en cromosomas.
• Elaborar mapas físicos y genéticos.
• Elaborar mapas de restricción.
• Caracterizar, amplificar y secuenciar moléculas de DNA.
•Elaborar perfiles de DNA que permitan identificar a individuos,
diferenciar poblaciones, razas o especies.
• Perfiles de DNA de utilidad en el diagnóstico de enfermedades
genéticas e infecciosas.
•Terapia con drogas y/o terapia genética.
Muestra DNA Preparación gel agarosa Instalación equipo electroforesis

Colocación muestra DNA Migración DNA

Longitud de fragmentos de DNA

Coloración de bandas DNA


Fotografía

EtBr
ADN o ARN?

1. AAC GGC AGA CGG


2. ACU GCC AUA AGG
3. GTC ATT CCA TTA

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