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    VALTEK DIAGNOSTICS

    Phone: + (562) 379 2100


    FAX: + (562) 379 1634
    Las Dalias 1900 - Ñuñoa
    Santiago – CHILE

    FOSFORO - UV
    Método UV directo para la determinación de Fósforo Inorgánico en suero, plasma u orina.
    Para uso en el diagnóstico in vitro. TECNICA SIN BLANCO MUESTRA

    SIGNIFICANCIA CLINICA Blanco Standard Desconocido


    Muestra (ml) --- --- 0.02
    Más del 80% de fósforo corporal se encuentra en los huesos
    como fosfato de calcio. La porción restante se encuentra en el Standard (ml) --- 0.02 ---
    intracelular como fosfatos orgánico ó en el extracelular como Reactivo (ml) 1.00 1.00 1.00
    fósforo inorgánico. Mezclar e incubar 10 minutos a temperatura ambiente (sobre 20°
    Hay una relación recíproca entre los niveles plasmáticos de C). Leer las absorbancias a 340 nm.
    Calcio y Fósforo. Una elevación en dichos niveles se observa en
    casos de enfermedad renal, hipoparatiroidismo, entre otros. La
    CALCULOS
    disminución se observa por ejemplo, en casos de
    hiperparatiroidismo y coma diabético.
    FACTOR= 5
    FUNDAMENTOS DEL METODO Absorbancia Standard
    Fósforo (mg/dl)= FACTOR x Absorbancia Desconocido
    La mayoría de los métodos para la determinación de fósforo
    inorgánico se basan en la formación de fosfomolibdato de TECNICA CON BLANCO MUESTRA
    amonio, y en su posterior reducción a azul de molibdeno.
    El método Valtek®, se basa en la proposición de Daly y En el caso de no contar un equipo capaz de realizar lecturas
    Ertingshausen y la modificación de Wang. La formación del bicromáticas, es altamente recomendable el realizar un blanco
    complejo fosfomolíbdico no reducido se mide a 340 nm., y la para cada muestra, con el objeto de eliminar la interferencia del
    absorbancia obtenida es directamente proporcional a la color de ella. Para tal efecto, utilizar como reactivo
    concentración de fósforo inorgánico presente en la muestra. complementario una solución de NaCl al 0.9 %.
    Para la lectura bicromática, se recomienda utilizar como
    segunda longitud de onda 376 nm. Blanco Standard Blanco Desc. Desconocido
    Muestra (ml) --- --- 0.02 0.02
    REACTIVOS
    Standard (ml) --- 0.02 --- ---
    Descartar el reactivo en caso de observar una coloración Reactivo (ml) 1.00 1.00 --- 1.00
    verdosa, o si la absorbancia a 340 nm. es superior a 0.600. NaCl 9% (ml) --- --- 1.00 ---
    Mezclar e incubar 10 minutos a temperatura ambiente (sobre 20°
    Composición del reactivo:
    C). Leer las absorbancias a 340 nm.
    Molibdato de amonio 2.0 mM
    Acido sulfúrico 350 mM CALCULOS
    Cloruro de Sodio 150 mM
    Estabilizantes y agentes tensioactivos c.s. FACTOR= 5
    Absorbancia Standard
    Solución Standard: Fósforo (mg/dl)= FACTOR x (Abs.Desc.- Abs.Blanco Desc.)

    Fosfato de Calcio en HCl diluído 5 mg/dl OBSERVACIONES

    MUESTRA • Los volúmenes indicados pueden ser modificados


    proporcionalmente, sin alterar los resultados.
    Utilizar suero o plasma libre de hemólisis. No utilizar • La reacción es lineal hasta 12 mg/dl
    anticoagulantes con fluoruro puesto que se obtienen valores
    • Sueros lipémicos, hemolíticos o ictéricos entregan valores
    falsamente bajos. El fósforo inorgánico es estable por una
    falsamente elevados, salvo que se utilice la técnica con
    semana a temperatura ambiente, y a lo menos 6 meses
    blanco muestra.
    congelado.
    Para el análisis de la fosfaturia, se recomienda trabajar con
    RANGOS DE REFERENCIA
    muestras de orina de 24 horas, colectadas en un receptáculo
    provisto con 15 ml. de HCl concentrado. En caso de muestras no
    Adulto: 2.5 a 4.5 mg/dl Niño: 3.0 a 6.0 mg/dl
    acidificadas, es conveniente su acidificación y/o calentamiento a
    56° C. por 15 minutos para la redisolución de los fosfatos
    BIBLIOGRAFIA
    precipitados. (La muestra acidificada no es utilizable para la
    determinación de uratos y creatinina). La muestra de orina se
    1.Tietz, N.W., Fundamentals of Clinical Chemistry, 2° Ed., W.B.
    debe diluír 1:20 con agua destilada
    Saunders & Co., Philadelphia (1976)
    2.Wang J. & Osaki S., Clin Chem 29(1255), 1983.
    EQUIPO REQUERIDO
    3.Young, R.B., et al., Clin Chem 21(342), 1975.
    4.Daly J.A. & Ertingshausen G., Clin Chem 18(263), 1972
    Espectrofotómetro o fotocolorímetro de filtros capaz de leer
    5.Friedman R.B., et al., Clin Chem 26(195), 1980.
    absorbancias a 340 nm. , timer y pipetas.

    E-mail: [email protected] – WEB site: http://www.valtekdiagnostics.com

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