Muestreos Ambientales

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MUESTREO AMBIENTAL
Y MEDICIONES
ANALÍTICAS
Camelia DRAGHICI, Ileana MANCIULEA
Transilvania University of Braşov
[email protected], [email protected]
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commons attribution – non commercial 4.0
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TEMA 6.3: Introducción al Sistema de Monitoreo de Calidad Ambiental
UNIDAD 2. Muestreo ambiental y mediciones analíticas
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1. INTRODUCCION
Después del flujo de monitoreo ambiental, esta unidad describirá cómo
implementar la etapa de ejecución (Figura 1.):
- principios de muestreo y preparación de muestras para el análisis ambiental (U
2.1);
- principios de los métodos analíticos aplicables para la determinación de
contaminantes en el medio ambiente y los requisitos de calidad para el análisis
ambiental (U 2.2).
Figura 1. Etapas de flujo de monitoreo ambiental, ejecución y evaluación.
Al final de la Unidad 2, el estudiante podrá:

- describir los principios de los métodos disponibles para el muestreo ambiental
y la preparación de muestras;
- seleccionar los métodos de muestreo y preparación de muestras que son
apropiados para una muestra ambiental específica.
- describir los principios de los métodos analíticos disponibles para el análisis
ambiental;
- identificar y seleccionar los métodos analíticos apropiados para las mediciones
de contaminantes de muestras ambientales;
- describir los conceptos introductorios y las aplicaciones de la metrología en la
química para el análisis ambiental.
Hay varias áreas para las que se requieren análisis de muestreo y ambientales:
1. control de rutina, por ejemplo, para medir la concentración de contaminantes
en el medio ambiente e identificar tendencias a corto y largo plazo;
2. respuesta de emergencia, por ejemplo, para detectar la liberación accidental
de contaminantes en el medio ambiente y para evaluar el riesgo y la toxicidad de
los humanos y la biota;
3. aplicación regulatoria y cumplimiento regulatorio: por ejemplo, para medir
la cantidad de contaminantes que se liberan en el medio ambiente (emisiones
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gaseosas, descargas de aguas residuales) para cumplir con los requisitos
reglamentarios;
4. investigación científica, por ejemplo, para estudiar el destino y el transporte
de contaminantes y evaluar la eficiencia de los sistemas de remediación.
Como ya se presentó en U1, la muestra es una porción de un sistema (entorno),

representativa del lugar y momento de muestreo. Las muestras son complejos
sistemas homogéneos (soluciones) o heterogéneos. Rara vez analizamos una
muestra de un solo componente, en la mayoría de los casos, las muestras reales
son sistemas multicomponente, que consisten en compuestos que están
presentes como componente principal o como componentes de rastreo.
Teniendo en cuenta la complejidad de una muestra ambiental, es obvio por qué
la caracterización de estas muestras es un proceso completo y riguroso, que
requiere un conocimiento inicial mínimo sobre el sitio de muestreo y la
composición.
Alguna delimitación de términos debe ser mencionada:

- componente/compuesto/sustancia es una porción de la materia delimitada por
una cierta composición elemental y que ha atribuido una fórmula química;
- analito representa el compuesto de interés que es sujeto de análisis;
- los analitos son sujetos de determinación;
- las muestras son objeto de análisis.
Algunos típicos compuestos tóxicos posibles que difieren cuando se controla el

aire, el agua o el suelo, se dan en la Tabla 1.
Tabla 1. Compuestos típicos presentes en el aire, el agua y el suelo.
Compuestos Aire Agua Suelo

Gases O2, CO2, CO, SOx, Oxígeno disuelto (OD)
inorgánicos NOx, Cl2, H2S, HCl
aniones Nitrito, nitrato, sulfuro, cloruro, formiato, acetato…
Metales pesados Muy raro Cu2+, Pb2+, Cd2+, Ni2+, Hg2+, Fe2+
COVs(1) COVs raro Muy raro
COPs (2) (3) (4)
PAHs , PCBs , pesticidas, explosivos
Otros Material detergentes detergentes, ácidos
particulado húmicos / fúlvicos
(1)
Compuestos Orgánicos Volátiles; (2) Contaminantes Orgánicos Persistentes; (3) Hidrocarburos
Aromáticos Policíclicos; (4) Bifenilos Policlorados
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La tabla no presenta los parámetros de monitorización regulados, sino algunos
de los grupos esperados de compuestos, de acuerdo con los criterios de
diversidad: estado de agregación, naturaleza de la muestra y origen de los
compuestos, composición e hidrofobicidad. Nótese que los compuestos que se
pueden encontrar en muestras de agua y suelo son casi similares, debido a la
llamada "solución del suelo" que contiene la mayoría de las sustancias solubles
en agua dispersas en las zonas intersticiales del suelo.
2. MUESTREO AMBIENTAL
El muestreo es el término genérico que consiste en dos grupos distinguidos de

operaciones:
- operaciones previas al laboratorio - consistentes en (i) recolección / recolección
de muestras en el sitio (generalmente también denominado "muestreo"), (ii)
conservación en el sitio, (iii) transporte y almacenamiento;
- operaciones de laboratorio - que consiste en el pretratamiento de la muestra y
la preparación para el análisis; estos incluyen separación, purificación,
concentración u otras operaciones.
2.1. MUESTREO
Para los compuestos que podrían sufrir transformaciones considerables durante

el transporte al laboratorio, las muestras deberían analizarse in situ. Para estas
mediciones, se dispone de equipos adecuados, principalmente basados en
sensores selectivos y kits de reactivos. Aunque el equipo disponible no es lo
suficientemente sensible y preciso para el análisis de trazas, la información de
las mediciones in situ es muy valiosa y se pretende completar la caracterización
final de la muestra.
La Tabla 2 presenta los siete pasos de la vida de la muestra, desde la

planificación del muestreo hasta la descarga de la muestra, cuando la muestra
ha expirado o cuando ya no es necesaria o válida. La tabla también enumera
algunas preguntas relacionadas para tener en cuenta, con el fin de pasar por las
siete etapas de la vida de la muestra.
Tabla 2. Siete pasos de la vida de la muestra

7 pasos de la vida de la muestra Aspectos relacionados
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1. Un muestreo se planea • cuándo tomar muestras

• con qué frecuencia se tomarán las muestras
• qué muestras recolectar (aire, agua, suelo)
• a quién llevar la muestra (custodia de
muestra)
2. Se identifican puntos de • dónde tomar muestras

muestreo
3. las muestras son recolectadas • cómo recolectar muestras

(tomadas) • cuántas muestras tomar
• la cantidad de muestra que se necesita
4. las muestras se transfieren al • cómo conservar muestras

laboratorio • cuánto tiempo la muestra será estable
5. las muestras son preparadas y • qué propiedad analizar (física, química,

analizadas biológica)
6. las muestras se transforman en

un punto de datos químico
7. las muestras caducan y se

eliminan
2.1.1. IMPORTANCIA DEL MUESTREO
El muestreo es una actividad muy importante, teniendo en cuenta que si las

muestras no se recogen correctamente o si no son representativas del lugar y el
momento del muestreo, los datos analíticos obtenidos en esas muestras no serán
confiables, los datos se corresponderán con otras pruebas.
El muestreo depende de la complejidad y cantidad de las muestras y los analitos,

así como de los requisitos de calidad del laboratorio: estándares disponibles para
los métodos analíticos que se utilizarán en la etapa de medición, equipos,
reactivos y materiales de referencia, o personal especializado. Cualquier
información sobre el historial de muestras será útil para la elección óptima del
método analítico.
2.1.2. PRESERVACIÓN Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS

AMBIENTALES
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Para los compuestos que son estables o pueden conservarse durante el período
de pretratamiento, se usa el procedimiento de conservación. Desde el sitio de
muestreo, las muestras conservadas se transportan al laboratorio y se almacenan.
Estas etapas y operaciones se realizan de acuerdo con los estándares (si están
disponibles) y toda la información debe registrarse cuidadosamente en las
etiquetas de las muestras y los formularios estándar, para ser utilizada
posteriormente en la formulación del resultado final.
Muestras de etiquetas que contienen información sobre:

- nombre de la persona que realiza el muestreo;
- fecha, hora, lugar y lugar de toma de muestra
Las muestras van acompañadas de un formulario estándar que contiene

información sobre:
- propósito y objetivos de muestreo;
- tipo de análisis adicional;
- tipo y estado del contenedor de muestreo;
- observaciones sobre el alcance de la contaminación y las fuentes de
contaminación;
- información meteorológica;
- condiciones de conservación de la muestra.
La preservación y el almacenamiento de muestras ambientales, son etapas

previas al laboratorio, con el objetivo de evitar los procesos físicos o químicos
(Tabla 3) que pueden ocurrir durante el transporte de las muestras al laboratorio.
Tabla 3. Conservación y almacenamiento de muestras ambientales

Procesos evitados Preservación / almacenamiento
de muestra
Físico volatilización, • refrigeración / congelación

difusión, adsorción, • elegir el contenedor de
absorción almacenamiento adecuado
Químico / Degradación • refrigeración / congelación

Bioquímico microbiana, • elegir el contenedor de
reacciones químicas, almacenamiento adecuado
reacciones • agregar reactivos químicos
fotoquímicas (conservantes)
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Los procesos físicos tales como la volatilización, difusión, absorción o adsorción
se evitan al enfriar y al elegir los recipientes de muestreo y almacenamiento
apropiados.
Los procesos químicos y bioquímicos, así como la degradación microbiana, las

reacciones químicas o fotoquímicas, también se evitan al enfriar y elegir los
recipientes apropiados, adicionalmente mediante la adición de reactivos
químicos, los llamados conservantes. Los reactivos utilizados como
conservantes reaccionarán con ciertos compuestos presentes en la muestra,
siendo esto una práctica aceptada siempre que la reacción química sea
completa, controlada cualitativa y cuantitativamente. Estos procesos químicos
se tendrán en cuenta durante los cálculos que llevarán a expresar el resultado
final.
En la Figura 2, se presentan varias muestras recolectadas para el análisis

ambiental, almacenadas en diferentes contenedores, como frascos o bolsas de
plástico.
Figura 2. Ejemplos de muestras recolectadas para análisis ambiental.
La Tabla 4, da ejemplos de preservación de las muestras ambientales, qué

reactivos se usan y qué procesos de degradación se pueden evitar para ciertos
compuestos de interés, de origen inorgánico u orgánico. Por ejemplo:
- para evitar la precipitación de metales en forma de sus óxidos o hidróxidos, se
agrega ácido nítrico, que forma nitratos metálicos solubles;
- para evitar la reacción de cianuro con cloro, se agrega ácido ascórbico,
conocido como vitamina C;
- para evitar la volatilización de compuestos orgánicos volátiles, se requiere el
llenado completo del contenedor de muestreo;
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- el muestreo en un contenedor oscuro se utiliza para evitar la fotodegradación
de los productos derivados del petróleo.
Tabla 4. Conservación de muestras Ambientales

Analito Procesos evitados Preservación de muestras
metales precipitación de óxidos / HNO3 (pH<2)

hidróxidos
NH3 volatilización H2SO4 (pH<2)
H2S y sulfuros volatilización Acetato de Zn y NaOH (pH>9)
cianuro volatilización NaOH (pH>9)
reacción química con Cl2 Ácido ascórbico
compuestos reacción química con Cl2 tiosulfato de sodio

orgánicos disueltos
éster ftálico difusión a través de plásticos frascos de vidrio o teflón
COVs* volatilización llenado completo de los

matraces
Oxígeno disuelto introducción de oxígeno del llenado completo de los

aire matraces
PAHs** degradación fotoquímica matraces de vidrio oscuro
productos derivados adsorción en plásticos frascos de vidrio

del petróleo
* COVs – Compuestos Orgánicos Volátiles; ** PAHs – Hidrocarburos Aromáticos Policíclicos
2.2. MUESTRA PRE-TRATAMIENTO / PREPARACIÓN

El pretratamiento / preparación de la muestra es el segundo grupo de
operaciones, como etapa de preanálisis, que se realizará en las muestras, en el
laboratorio. El propósito de la preparación de la muestra es traer las muestras
en una forma medible.
La preparación de la muestra implica operaciones que apuntan tanto a la

muestra como al analito:
- operaciones que afectan a la muestra:
• Ponderación, secado, tamizado: se utiliza para homogeneizar la muestra o
eliminar la humedad;
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• Cambio de fase de muestra (líquido) - adecuado para instrumentos analíticos;
- operaciones que afectan al analito:
• aumentar/disminuir la concentración de analito (concentración/dilución) -
depende de la concentración de analito en la muestra;
• Disolución: se basa en las propiedades de solubilidad del analito; a veces la
disolución también se basa en reacciones químicas (disolución química);
• eliminar compuestos que interfieren - separación / purificación de analito de la
matriz de muestra; se realiza con el fin de distinguir el (los) analito(s) de interés
del resto de los compuestos, que coexisten en la muestra; estas "impurezas"
pueden introducir información interferente, similar al analito(s) de interés,
contribuyendo con los errores y la incertidumbre al resultado final;
• liberar analito de interés de la matriz de muestra: aumentar la respuesta del
detector;
• Modificación de la estructura química del analito - derivatización química que
consiste en la transformación química del analito en un nuevo compuesto
químico, adecuado a los sistemas de medición y/o detección.
Teniendo en cuenta las modificaciones físicas o químicas que se producen

durante el pretratamiento de la muestra, operaciones simples o más complejas,
la Tabla 5 proporciona ejemplos de tales operaciones de preparación de
muestras.
Tabla 5. Operaciones de preparación de muestra.

Operación física Operación química
Simple Compleja
• pesaje • disolución • disolución química

• secado • destilación • precipitación
• concentración • filtración • intercambio iónico
• dilución • ad / absorción • quelación
• extracción • derivatización química
Método de separación utilizado en el pretratamiento de la muestra

La mayoría de las operaciones utilizadas en el pretratamiento de muestras se
basan en procesos de separación y existen varios modos para clasificarlas y
agruparlas. La clasificación que proponemos se basa en diferentes fases de
equilibrio:
- equilibrio gas-líquido: absorción, extracción, destilación;
- equilibrio gas-sólido: adsorción, extracción;
- equilibrio líquido-líquido: técnicas de extracción líquido-líquido;
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- equilibrio líquido-sólido: filtración, centrifugación, ad / absorción, extracción
en fase sólida (microextracción en fase sólida, extracción con disolvente,
extracción Soxhlet, extracción por sonicación, extracción asistida por
microondas);
Todos estos procesos están contribuyendo a la separación de algunos

analitos específicos del resto de la matriz. Las operaciones de separación se
desarrollan actualmente en términos de método (principio) y técnica (equipo)
porque los analistas se dieron cuenta de la importancia del muestreo (incluida la
fase de pretratamiento) para las mediciones y el procesamiento de datos. Solo
una muestra adecuada pretratada podría garantizar una incertidumbre limitada
sobre el resultado final.
De todos los compuestos contaminantes posibles dados en la Tabla 1,

presentaremos además dos clases principales de contaminantes, considerados
de interés para el monitoreo ambiental, con ejemplos de procedimientos típicos
de pretratamiento:
1. catión de metales pesados, de la clase de contaminantes inorgánicos;
2. compuestos orgánicos, agrupados según sus propiedades específicas
(COVs, COPs), composición específica (PAHs, PCBs) o uso específico
(pesticidas, detergentes).
2.2.1. PREPARACIÓN DE MUESTRAS PARA EL ANÁLISIS DE METALES

PESADOS
El muestreo para el análisis de metales pesados se basa en un principio muy
simple: llevar los cationes de una forma soluble, estable y medible:
a. bien como cationes monoatómicos (Cu2 +, Fe2 +, etc.);
b. o como compuestos metálicos (inorgánicos u orgánicos), donde los átomos
metálicos están vinculados a otro grupo de átomos, formando diferentes
especies medibles: iones o moléculas neutras.
Técnicas de pretratamiento utilizadas para muestras líquidas
Para solubilizar los metales pesados, se usan intercambio iónico, precipitación o

quelación, transformando el compuesto de interés en una forma extraíble,
seguido de la extracción de este. Tan pronto como se obtienen las formas
solubles y extraíbles de los metales pesados, sus soluciones están listas para el
análisis químico.
Entre las técnicas de extracción utilizadas para la preparación de metales

pesados para el análisis de muestras líquidas, se mencionan las siguientes:
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- extracción líquido-líquido (ELL) - con solventes de diferentes polaridades;
- extracción en fase sólida (EFS) - que consiste en la retención / adsorción de
especies metálicas en un sorbente adecuado, seguido de la desorción con un
disolvente orgánico adecuado o uno inorgánico, como también lo es el agua.
Técnicas de pretratamiento utilizadas para muestras sólidas
El pretratamiento de muestras para el análisis de metales pesados a partir de

muestras sólidas se lleva a cabo simplemente por disolución en agua (agua fría
o caliente), mineralización o por digestión. La mineralización consiste en
transformar especies inorgánicas y orgánicas en compuestos inorgánicos
(minerales) simples.
Las siguientes técnicas de digestión están disponibles para la preparación de

muestras con el objetivo de análisis de metales pesados:
- digestión ácida - con ácidos fuertes o mezclas de ácidos fuertes con un potente
oxidante (HCl, HF, HNO3, agua real, H2SO4 con H2O2);
- digestión alcalina - con NaOH o KOH, especialmente cuando los metales
pesados de interés tienen un carácter anfótero (Cr, Mn);
- desagregación por fusión con fondants (NaOH o K2S2O8) seguido de la
disolución de los compuestos obtenidos;
- calcinación a alta temperatura - seguido de la disolución de los compuestos que
dan como resultado la ceniza de calcinación, en las condiciones ácidas o
alcalinas mencionadas anteriormente;
- digestión a alta presión - en bombas de digestión;
- digestión de microondas - combina el efecto de presión con la temperatura uno.
2.2.2. PREPARACIÓN DE MUESTRAS PARA EL ANÁLISIS DE

CONTAMINANTES ORGÁNICOS
El pretratamiento de las muestras para el análisis de compuestos orgánicos se

basa en un principio similar al utilizado para el análisis de metales pesados:
extraer el compuesto orgánico de la matriz de muestra en una forma soluble y
estable. Esta etapa de preparación depende del estado de agregación de la
matriz de muestra: líquido o sólido.
Debido a las estructuras más complejas de los compuestos orgánicos (en

comparación con los inorgánicos), las técnicas de extracción utilizadas en la
etapa de pretratamiento se basan en diferentes propiedades físicas de los
analitos: transformaciones de fase; propiedades de absorción; solubilidad en
disolventes polares o no polares.
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Extracción de contaminantes orgánicos a partir de muestras líquidas
Los compuestos orgánicos volátiles (COVs) se separan por extracción estática

del espacio de cabeza (extracción en vapores saturados) o por extracción con
purga y trampa (vaporización seguida de condensación). Los compuestos
orgánicos semivolátiles (COSVs) y los compuestos orgánicos no volátiles
(CONVs) se separan en dos etapas: la primera etapa tiene como objetivo obtener
un líquido homogéneo y es seguida por la etapa de extracción.
Para la separación de COSVs y CONVs se utilizan contaminantes de muestras

líquidas:
1. extracción líquido-líquido (LLE)
2. extracción en fase sólida (SPE) y microextracción en fase sólida (SPME)
Extracción de contaminantes orgánicos de muestras sólidas
Para la extracción de compuestos orgánicos semivolátiles y no volátiles de

muestras sólidas, las siguientes técnicas son más a menudo aplicables:
- Extracción Soxhlet (automatizada),
- extracción acelerada de disolventes (ASE),
- extracción con solvente ultrasónico (USE),
- extracción con solvente a presión (PSE),
- extracción asistida por microondas (MAE).
Como aplicación específica, hemos ejemplificado técnicas para la extracción de

pesticidas a partir de muestras líquidas o sólidas. En la Tabla 6 se presentan las
técnicas de extracción, con aplicaciones correspondientes que dependen del
estado de agregación de los compuestos, respectivamente, de la muestra. De
interés también podría ser algún costo o información técnica (como el tiempo de
extracción).
Tabla 6. Ejemplos de extracción de pesticidas de muestras ambientales líquidas

y sólidas.
Técnica de extracción Aplicaciones Costos Tiempo de

extracción
LLE COVs, bajo 1h
COSVs,
SPE medio 30 min
CONVs en
SPME muestras bajo 30 min
líquidas
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Soxhlet COSVs, bajo 12–48 h
CONVs en
USE medio 15–30 min
muestras
MAE sólidas medio 15 min
ASE (PSE) alto 20–30 min
Con base en la complejidad de la muestra, el analista elegirá las operaciones de

pretratamiento más adecuadas, a menos que estén sujetas a estandarización,
considerando diferentes criterios de selección basados en las características de
rendimiento: selectividad; especificidad; precisión y exactitud; reproducibilidad;
recuperación.
En el Tema 6.4 se presentará información particular para el muestreo de aire, agua

o suelo y el pretratamiento de la muestra.
3. ANÁLISIS AMBIENTAL
La mayoría de los análisis ambientales están regulados por estándares, que están
sujetos a revisión de vez en cuando, dependiendo de los métodos analíticos y el
desarrollo del equipo en ese momento. Además, a veces la muestra puede ser más
compleja que el estándar disponible. Por lo tanto, el objetivo de los siguientes
párrafos es presentar los principios básicos de los métodos analíticos y no los
estándares medioambientales europeos u otros internacionales. Consideramos que
la comprensión de los principios de los métodos analíticos y las técnicas contribuirán
al uso adecuado de los mismos, a la correlación de toda la información disponible.
La química analítica es la ciencia que estudia y utiliza métodos e instrumentos

desarrollados para separar, identificar y cuantificar la composición de la materia /
muestra.
El análisis químico representa una suma de las operaciones en el sitio o en el

laboratorio realizado para proporcionar información cualitativa y cuantitativa sobre
la composición de una muestra compleja. El análisis químico de una muestra
consiste en caracterizarlo desde el punto de vista de su composición química y, en
principio, se basa en una propiedad mensurable del soluto (analito), a veces de la
solución (muestra).
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3.1. PRINCIPIOS DE MÉTODOS ANALÍTICOS
Los principios de los métodos analíticos se basan en una propiedad medible

(P) del analito (A): masa, volumen, propiedad térmica, eléctrica u óptica.
El desarrollo de los métodos analíticos, en términos de mecanismos o equipos,

permitió el desarrollo de nuevas técnicas analíticas del mismo método, lo que
significa que la técnica analítica está definida por la misma propiedad
mensurable. Las técnicas analíticas pertenecen al mismo método, teniendo el
mismo principio, pero desarrollado en base a diferentes mecanismos de
medición.
La determinación de la composición química de una muestra impone dos tipos

de información a adquirir: información cualitativa (análisis cualitativo o
identificación); información cuantitativa (análisis cuantitativo o cuantificación). El
análisis cuantitativo significa encontrar la propiedad medible (P) que se puede
relacionar como una función de la concentración de analito (CA), basada en leyes
físico-químicas: P=f(CA). No se puede determinar información cuantitativa
confiable sin una caracterización cualitativa correcta y completa de la muestra.
3.2. CLASIFICACIÓN DE LOS MÉTODOS ANALÍTICOS

AMBIENTALES
Los métodos analíticos se pueden agrupar en dos categorías:

- métodos analíticos clásicos - también llamados métodos químicos húmedos;
- métodos analíticos modernos o instrumentales; los analitos son sujetos de
transformación física durante las mediciones, siendo así métodos no
destructivos; estos métodos usan curvas de calibración para determinaciones
cuantitativas obtenidas en soluciones estándar P=f(CA).
Los métodos químicos (clásicos) se desarrollaron primero, dependiendo del

desarrollo de la tecnología en el tiempo, y se basan en reacciones químicas que
ocurren entre el analito y los reactivos específicos, por lo tanto, son métodos
destructivos. Los métodos analíticos instrumentales se desarrollaron más
recientemente, basados en la transformación física del analito, por lo tanto no
son destructivos.
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Algunas veces se requiere una combinación de transformación física y química
y los métodos se llaman físicos y químicos. Habitualmente, se produce un
pretratamiento químico del analito (por ejemplo, una derivatización), seguido de
una transformación de la propiedad física.
En la Tabla 7 se presentan los principales métodos analíticos y técnicas

relacionadas, con información sobre la propiedad medida, de los cuales se
presentarán los métodos más comúnmente utilizados: gravimétrico, titrimétrico,
espectrométrico y cromatográfico.
Tabla 7. Métodos y técnicas utilizados para el análisis ambiental.
Métodos Técnicas Propiedad medida
Gravimetría (1), (2) • electrogravimetría masa de analito puro o de una

• termogravimetría mezcla
Titrimetría (1), (2) • ácido-base volumen de la solución de un

• redox reactivo estándar que reacciona
• precipitación con el analito
• complejación
Métodos • voltamperometría propiedades eléctricas de las

electroquímicos • potenciometría soluciones de analito: potencial,
(3), (4) • conductometría fuerza electromotriz, conductibilidad
Espectrometría (3), • espectrometría longitud de onda e intensidad de la

(4) atómica / molecular radiación electromagnética emitida
• espectrometría de o absorbida por el analito
absorción / emisión
Cromatografía (3), • cromatografía de repartición del analito entre dos

(4) gases fases no miscibles (fase móvil y
• cromatografía líquida estacionaria)
(1) - análisis cuantitativo; (2) - concentración de contaminantes a nivel mayor, menor, a veces
rastros; (3) - análisis cualitativo y cuantitativo; (4) - concentración de contaminantes a nivel
mayor, menor o de rastros.
3.2.1. MÉTODOS QUÍMICOS MOJADOS Y APLICACIONES EN

ANÁLISIS AMBIENTAL
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La gravimetría es un método químico clásico, cuyo principio se basa en
medir la masa de un analito o, en la mayoría de los casos, la masa de un
producto, obtenida durante una reacción química.
El método se aplica para muestras ambientales, para la determinación de la

humedad o contenido de sólidos, aceites y grasas.
La titrimetría es también un método químico clásico, cuyo principio se basa

en la reacción entre el analito y un reactivo específico (ácido/base, redox,
precipitación o reactivo complejante), que mide el volumen de soluciones
estándar de un compuesto involucrado en la reacción de titulación.
Las técnicas de Titrimetría se utilizan para el análisis ambiental, como:

- valoración ácido-base para determinación de acidez y alcalinidad;
- titulación redox para la determinación de cloro residual y sulfuro;
- titulación de precipitación para la determinación de cloruro;
- valoración de complejación para la determinación de cianuro.
3.2.2. TÉCNICAS ESPECTROMÉTRICAS Y APLICACIONES EN

ANÁLISIS AMBIENTAL
La Tabla 7 muestra algunas técnicas espectrométricas con información sobre el

principio del método y ejemplos de aplicaciones en análisis ambientales. Las
técnicas espectrométricas pueden ser de adsorción o emisión, para
determinaciones atómicas o moleculares. Esta amplia gama de principios
permite el uso de técnicas espectrométricas para determinar una gran cantidad
de contaminantes en muestras ambientales. Por ejemplo, la espectrometría de
absorción atómica se usa para determinar metales pesados en el análisis de
trazas, mientras que la espectrometría de adsorción molecular permite la
determinación de compuestos orgánicos inorgánicos y no saturados (Tabla 8).
3.2.3. TÉCNICAS DE CROMATOGRAFÍA Y APLICACIONES EN

ANÁLISIS AMBIENTAL
Otro grupo de métodos analíticos utilizados en el análisis ambiental es la

cromatografía, capaz de proporcionar información compleja: separación,
cualitativa, cuantitativa y estructural. El principio de la cromatografía es la
distribución diferenciada de analitos entre dos fases inmiscibles entre ellos, una
fase móvil (un gas o un líquido) y una estacionaria (un líquido o un sólido).
Tabla 8. Técnicas espectrométricas y sus aplicaciones en análisis ambientales.
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Técnica Acrónimo Principio Aplicación

Espectrometría AES emisión atómica metales y no metales
de emisión ICP-AES en arco, en llama; (trazas)
atómica emisión atómica
en plasma
Espectrometría emisión atómica Hg, hidruros no
atómica de de fluorescencia metálicos (trazas)
fluorescencia
Fluorimetría emisión molecular PAHs
Espectrometría AAS absorción atómica metales y no metales
de absorción (trazas)
atómica
Espectrometría UV-VIS absorción especies inorgánicas y
UV-VIS molecular compuestos orgánicos
insaturados
Espectrometría IR absorción gases, soluciones o
IR molecular sólidos de compuestos
inorgánicos u orgánicos
Espectrometría MS ionización identificación y análisis
de masas molecular y estructural de
fragmentación compuestos orgánicos
La cromatografía de gases, la cromatografía líquida y la cromatografía iónica han

encontrado aplicaciones para la separación, determinación cualitativa y
cuantitativa de contaminantes de muestras ambientales (Tabla 9). Por ejemplo,
la cromatografía de gases se usa para análisis de contaminantes gaseosos,
compuestos orgánicos volátiles o semivolátiles.
Tabla 9. Técnicas cromatográficas y sus aplicaciones en análisis ambientales.

Técnica cromatográfica Aplicaciones
Cromatografía de gases (GC) gases, COVs, COSVs
Cromatografía líquida (LC) COSVs, CONVs (pesticidas, PAHs, PCBs)
Cromatografía de iones (IC)) especies iónicas y moléculas polares
Las técnicas cromatográficas son técnicas adecuadas con acoplamiento con

espectrometría de masas (MS), que desempeña un papel importante en la
identificación (información estructural) de los compuestos orgánicos:
– GC-MS; GC–MS-MS;
– LC-MS; LC–MS-MS.
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3.2.4. ETAPAS EN LAS MEDIDAS AMBIENTALES QUE REQUIEREN
METODOLOGÍA
Para el análisis ambiental, por lo general, están disponibles el muestreo

estandarizado, la preparación de muestras y los métodos analíticos, pero a
veces la muestra puede ser más compleja o inadecuada para un estándar en
particular. Por lo tanto, todas estas operaciones están sujetas al desarrollo de
métodos (Figura 3.).
Los métodos analíticos registraron un largo tiempo para el desarrollo de

métodos, llevado a cabo por analistas químicos, en la investigación
especializada de laboratorios profesionales. Más adelante, considerando la
importancia del muestreo y la importancia de la preparación de muestras en la
incertidumbre total del resultado final, también se desarrollaron nuevos métodos
y técnicas relacionados con estas etapas analíticas.
Cuando no hay un estándar disponible, o cuando incluso si está disponible, el

estándar no es aplicable en un determinado laboratorio, el analista está en
posición de elegir los métodos y técnicas más adecuados, tanto para la
preparación de la muestra como para el análisis. La elección de estas técnicas
debe tener en cuenta diferentes criterios de evaluación: según la muestra;
dependiendo del rendimiento de los métodos y la validación; dependiendo del
laboratorio analítico.
Figura 3. Etapas en el proceso analítico que requieren el desarrollo del método.
3.3. REQUISITOS DE CALIDAD PARA LAS MEDIDAS AMBIENTALES
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Teniendo en cuenta las etapas de ejecución del flujo de monitoreo, la Figura 4,
presenta todo el proceso analítico que está sujeto al aseguramiento de la calidad
y al control de calidad (QA/QC).
La sociedad moderna se basa en mediciones. El 40% de las directivas de la UE

se refieren a mediciones, en tecnología, comercio, regulaciones, confirmando la
declaración. La sociedad moderna requiere calidad en los resultados de las
mediciones químicas, de tal manera que sean accesibles en todas partes. Hay
dos formas de garantizar la calidad de las mediciones químicas: (1) aplicar los
sistemas de gestión de la calidad y la acreditación (ISO/IEC 17025, 1999); (2)
aplicar los principios de la ciencia de la medición (metrología) a las mediciones
químicas (metrología en química - MiC). Por lo tanto, MiC se desarrolló a partir
de la necesidad de comparar y tener un sistema uniforme para informar los
resultados.
Figura 4. Proceso analítico que requiere garantía y control de calidad.
Para garantizar la calidad en los resultados de las mediciones químicas, en 1999

se lanzó la norma de acreditación ISO/IEC 17025 (la última versión es de 2017),
diseñada como guía para los requisitos generales de competencia para llevar a
cabo pruebas y / o calibraciones, incluido el muestreo, con métodos estándar,
métodos no estándar o incluso métodos desarrollados en laboratorio. ISO/IEC
17025 se basa en los siguientes objetivos:
- proporcionar una base para ser utilizada por los organismos de acreditación al
evaluar la competencia de los laboratorios;
- establecer requisitos generales para demostrar el cumplimiento del laboratorio
para realizar pruebas o calibraciones específicas;
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- ayudar en el desarrollo e implementación de un sistema de calidad de
laboratorio.
La acreditación le permite al laboratorio demostrar que los resultados son

defendibles a un estándar reconocido y no cambian cuando el personal del
laboratorio o las circunstancias están cambiando. ISO / IEC 17025 es aplicable
a cualquier organización que realice pruebas y / o calibraciones. Es utilizado por:
(i) laboratorios acreditados o en proceso de acreditación; (ii) organismos de
acreditación; (iii) autoridades reguladoras.
Para obtener la acreditación, el laboratorio debe proporcionar información

relacionada con el origen del método (estándar o no estándar), la comparación
con los métodos estándar que reemplazan (si corresponde) y el procedimiento
de validación de datos.
3.4. METROLOGÍA EN QUÍMICA
La metrología en química está asumiendo que el análisis químico se basa en el

muestreo y las mediciones, ambas etapas contribuyen a la incertidumbre de la
medición. Los principios metrológicos son importantes para todos los analistas que
se ocupan de las mediciones químicas, los temas más relevantes de interés para
MiC, de los cuales la validación del método y la estimación de la incertidumbre se
presentarán en esta unidad:
a. establecer la trazabilidad de los resultados de las mediciones,
b. utilizando métodos de análisis validados,
c. estimar la incertidumbre de los resultados de medición,
d. utilizando materiales de referencia certificados (CRM) y
e. participación en esquemas de prueba de competencia (PT) y comparación entre
laboratorios (ILC).
EURACHEM es una red de organizaciones en Europa que tiene el objetivo de

establecer un sistema para la trazabilidad internacional de mediciones químicas y
la promoción de buenas prácticas de calidad. EURACHEM ha publicado una serie
de guías sobre cuestiones de calidad y acreditación en la medición analítica, para
todos los temas de interés antes mencionados (a - e). Todas las guías están
disponibles en el sitio web de EURACHEM.
3.4.1. VALIDACIÓN DEL MÉTODO
Según la Guía EURACHEM (2014), la validación del método es el proceso de

definición de un requisito analítico y la confirmación de que el método en cuestión
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tiene capacidades de desempeño consistentes con lo que la aplicación requiere.
También se considera que la validación da la confirmación mediante el examen
y la provisión de evidencia objetiva de que los requisitos particulares de un uso
previsto especificado se cumplen o se ajustan a su propósito. Un método debe
validarse siempre que se produzca un cambio en el proceso analítico, y el
laboratorio debe demostrar que sus parámetros de rendimiento son adecuados
para su uso en un problema analítico particular, lo que significa:
- se desarrolló un nuevo método;
- el método existente fue revisado;
- el método está cambiando con el tiempo;
- el método se usa en un laboratorio diferente, o con diferentes analistas o
diferentes instrumentos;
- el método es equivalente a otro, por ejemplo, uno estándar.
Para validar un método es obligatorio demostrar los siguientes criterios de

rendimiento del método: especificidad/selectividad, precisión, veracidad,
linealidad y rango de linealidad, límite de detección (LOD), límite de
cuantificación (LOQ) y fiabilidad/robustez. Como se presenta en la Tabla 10, no
se requieren todos los parámetros de rendimiento del método para ningún
procedimiento de validación. Dependen del propósito analítico: pruebas de
identificación; pruebas de impurezas; pruebas de ensayo.
Tabla 10. Criterios de rendimiento del método, dependientes del propósito

analítico.
Prueba de impureza
Prueba
Parámetro de rendimiento Prueba de Prueba de Prueba de
de
del método identificación límite de impureza
ensayo
impurezas cuantitativa
selectividad y especificidad + + + +
veracidad - -* + +
precisión -* - + +
linealidad y rango lineal -* - + +
límite de detección (LOD) -* + - -
límite de cuantificación (LOQ) -* - + -
robustez + + + +
* puede ser realizado
La selectividad y la especificidad son medidas que evalúan la confiabilidad de

las mediciones en presencia de interferencias. Un método es selectivo si produce
respuestas para un grupo de entidades químicas o analitos que pueden
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distinguirse entre sí, mientras que el método es específico si produce una
respuesta para un único analito solamente.
La exactitud proporciona el grado de diseminación de datos y se estudia como

dos componentes: precisión y veracidad.
La veracidad de un método es una medida de qué tan cerca está la media de

un conjunto de resultados (producidos por el método) al valor verdadero. Debido
al hecho de que el valor verdadero siempre se desconoce, se reemplaza por un
valor de referencia y se estima por el valor medio. La evaluación práctica de la
verosimilitud se basa en la comparación de los resultados medios de un método
con valores de referencia, la prueba de recuperación (R) se basa principalmente
en agregar una muestra en blanco con una cantidad conocida del compuesto de
interés puro y estable (valor de referencia), y calculado con la ecuación 1.
La precisión del método es una medida de cuán cerca están los resultados entre
sí. La precisión puede evaluarse como: precisión de repetibilidad intralaboratorio;
precisión de reproducibilidad intralaboratorio (o precisión intermedia); precisión
de reproducibilidad entre laboratorios. Por lo general, la precisión se expresa
mediante medidas como la desviación estándar (s o SD), la dispersión (s 2) o la
desviación estándar relativa (RSD%), de acuerdo con las ecuaciones 2-3:
CF  C I
R 100 1.
CA
n
( X  X i ) 2
2.
s 1
n 1
s
RSD   100 3.
x
Dónde: CF es la concentración final de la muestra enriquecida; CI es la

concentración inicial antes del pico; CA es la concentración de la solución
adicionada de adición; Xi son valores medidos discretos, es el valor promedio de
n medidas repetidas.
El rango de linealidad y linealidad proporciona información sobre la capacidad

del método para producir una respuesta de señal (propiedad medible) en una
relación lineal con las concentraciones (o cantidad) de analito. En el extremo
inferior del rango de concentración, los factores limitantes son los valores de los
límites de detección y/o cuantificación.
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El límite de detección (LOD) representa el contenido más bajo del analito que
se puede medir con una certeza estadística razonable. Da una información
"cualitativa".
El límite de cuantificación (LOQ), o límite de cuantificación, representa el

contenido más bajo de un analito que puede determinarse con una precisión
aceptable en las condiciones establecidas de la prueba. Proporciona información
"cuantitativa".
La fiabilidad y la robustez son medidas de la capacidad del método para

producir resultados no afectados mediante entrevistas de variaciones, ya sea en
el parámetro del método (fiabilidad) o en las condiciones de operación
(robustez).
3.4.2. ESTIMACIÓN DE INCERTIDUMBRE
Según la Guía EURACHEM (2012), la incertidumbre (U) es un parámetro

asociado con el resultado de una medición, que caracteriza la dispersión de los
valores que podrían atribuirse razonablemente al mensurando (resultado). La
incertidumbre puede expresarse como desviación estándar relativa (DER) e
intervalo de confianza.
Se requiere estimación de incertidumbre siempre que:

- se introduce un nuevo procedimiento/método en el laboratorio;
- se modifica un parámetro importante del proceso (equipo, tipo de muestra);
- un nuevo método está validado;
- no se requiere para el análisis diario.
La Tabla 11, presenta las fuentes de incertidumbre, que surgen tanto del
muestreo como de las mediciones analíticas.
Tabla 11. Fuentes de incertidumbre y estimación

Contribuciones de incertidumbre Símbolo Fuentes de incertidumbre
Contribución del muestreo US muestreo, transporte, almacenamiento
Contribución de mediciones UM equipo, reactivos, pureza, condiciones
de medición
Incertidumbre total U U = U S + UM
Hay dos pasos a seguir para estimar la incertidumbre:

1. identificar las fuentes de incertidumbre y construir el diagrama de Ishikawa;
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2. Cálculo de incertidumbre, considerando las restricciones, que tienen la
contribución más relevante a la incertidumbre total.
El diagrama de Ishikawa puede construirse separadamente teniendo en cuenta

las fuentes de incertidumbre del muestreo, las mediciones en soluciones
estándar (Figura 5) o en muestras reales (Figura 6). Se demostró que la
contribución de muestreo a la incertidumbre total es bastante considerable,
llegando a veces hasta el 80% del valor de U.
R=CU 4.
Para el laboratorio, la estimación de la incertidumbre proporciona el grado de

confianza asociado al procedimiento analítico.
Figura 5. Diagrama de Ishikawa para las fuentes de incertidumbre en

soluciones estándar.
Figura 6. Diagrama de Ishikawa para las fuentes de incertidumbre en muestras

de aguas residuales.
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14. EURACHEM Guide, Quantifying Uncertainty in Analytical Measurement, 3rd
Edition (2012).
15. EURACHEM Guide, Measurement uncertainty arising from sampling (2007).
16. EURACHEM Guide, Traceability in Chemical Measurement (2003).
17. EURACHEM Guide, The Selection and use of Reference Materials (2002).
18. EURACHEM Guide, Selection, Use and Interpretation of Proficiency Testing (PT)
Schemes by Laboratories (2011).
19. https://www.eurachem.org/index.php/publications/guides
20. https://www.eea.europa.eu/
21. https://ec.europa.eu/jrc/en/research-topic/environmental-monitoring
26
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Project coordinator: Ana I. Morales

Headquarters office in Salamanca.
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Contact Phone: +34 663 056 665
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Al final de la Unidad 2, el estudiante podrá:

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5. las muestras son preparadas y • qué propiedad analizar (física, química,

6. las muestras se transforman en

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2.1.1. IMPORTANCIA DEL MUESTREO

El muestreo es una actividad muy importante, teniendo en cuenta que si las

El muestreo depende de la complejidad y cantidad de las muestras y los analitos,

2.1.2. PRESERVACIÓN Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS

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Las muestras van acompañadas de un formulario estándar que contiene

La preservación y el almacenamiento de muestras ambientales, son etapas

Tabla 3. Conservación y almacenamiento de muestras ambientales

Físico volatilización, • refrigeración / congelación

Químico / Degradación • refrigeración / congelación

Los procesos químicos y bioquímicos, así como la degradación microbiana, las

En la Figura 2, se presentan varias muestras recolectadas para el análisis

Figura 2. Ejemplos de muestras recolectadas para análisis ambiental.

La Tabla 4, da ejemplos de preservación de las muestras ambientales, qué

Tabla 4. Conservación de muestras Ambientales

metales precipitación de óxidos / HNO3 (pH<2)

NH3 volatilización H2SO4 (pH<2)

H2S y sulfuros volatilización Acetato de Zn y NaOH (pH>9)

cianuro volatilización NaOH (pH>9)

reacción química con Cl2 Ácido ascórbico

compuestos reacción química con Cl2 tiosulfato de sodio

éster ftálico difusión a través de plásticos frascos de vidrio o teflón

COVs* volatilización llenado completo de los

Oxígeno disuelto introducción de oxígeno del llenado completo de los

PAHs** degradación fotoquímica matraces de vidrio oscuro

productos derivados adsorción en plásticos frascos de vidrio

2.2. MUESTRA PRE-TRATAMIENTO / PREPARACIÓN

La preparación de la muestra implica operaciones que apuntan tanto a la

Teniendo en cuenta las modificaciones físicas o químicas que se producen

Tabla 5. Operaciones de preparación de muestra.

• pesaje • disolución • disolución química

Método de separación utilizado en el pretratamiento de la muestra

Todos estos procesos están contribuyendo a la separación de algunos

De todos los compuestos contaminantes posibles dados en la Tabla 1,

2.2.1. PREPARACIÓN DE MUESTRAS PARA EL ANÁLISIS DE METALES

Técnicas de pretratamiento utilizadas para muestras líquidas

Para solubilizar los metales pesados, se usan intercambio iónico, precipitación o

Entre las técnicas de extracción utilizadas para la preparación de metales