Unidad de Posgrado

Segunda Especialidad en Bioquímica Clínica

Asignatura: Actividad en Sede I

Profesor : Mg. Freddy Alberto Sotelo Quispe

 Ayer…
 Hace mas de 100 años, Emil von Behring
introdujo la antitoxina diftérica en el
tratamiento de la difteria.
 La antitoxina tenía una eficacia muy variable.
 Paul Erlich preparó toxina diftérica altamente
purificada (Material de Referencia) y
desarrolló un “procedimiento exacto de
determinación” (Método de Referencia) para
evaluar la eficacia de dicha antitoxina.
 Ayer y hoy…

 LosMateriales y Métodos de
Referencia constituyen un
elemento clave para asegurar
la exactitud de las
determinaciones en el
Laboratorio Clínico.
El principal objetivo del laboratorio clínico es proveer información
confiable acerca de los pacientes a través del análisis de diversos
materiales biológicos.

Confiabilidad horizontal
los resultados obtenidos por distintos laboratorios deben ser
comparables.
Confiabilidad vertical
la calibración del procedimiento analítico debe estar relacionada
con referencias establecidas
Confiabilidad durable
la comparabilidad horizontal se mantiene en el tiempo.
 QUÉ NECESITA EL LABORATORIO CLÍNICO

• métodos trazables, que sólo necesiten

verificación de SU aptitud de medición

• equipamiento validado por el fabricante

• conmutabilidad de los calibradores de trabajo

y muestras humanas (EN ISO 17511 (cláusula
7.2))
 Trazabilidad
Propiedad del resultado de
una medición o del valor
de un estándar la cual
permite relacionarlos a
una referencia
establecida, usualmente
estándares de medida
nacional o internacional, a
través de una cadena
ininterrumpida de
comparaciones, todas
teniendo incertidumbres
establecidas.
 Resultado de una medición
La trazabilidad es una propiedad del resultado de la
medición.
ISO 15189
“5.6.3 Debe ser diseñado y ejecutado un programa para la calibración
y verificación de la exactitud, asi como asegurar la trazabilidad de los
resultados al Sistema Internacional de Unidades…”

ISO 17025

“5.6.2.1 … asegurar que las calibraciones y mediciones

hechas por el laboratorio sean trazables a….”

Permite asegurar la transferencia de la veracidad de los niveles

jerárquicos metrológicos superiores al resultado obtenido.
 MATERIAL DE REFERENCIA

Material de referencia primario (MRP):

Material de referencia que tiene la mayor
jerarquía metrológica cuyos valores son
determinados por medio de un procedimiento de
medición de referencia primario. (BIPM)
El concepto de “calibrador primario” es
subordinado a “calibrador” y a “material de
referencia primario”.
 MATERIAL DE REFERENCIA
Patrón secundario de medida (patrón secundario o
calibrador secundario): Patrón establecido por medio
de una calibración respecto a un patrón primario de
una magnitud de la misma naturaleza

Patrón de medida de trabajo (patrón de trabajo):

Patrón utilizado habitualmente para calibrar o
verificar instrumentos o sistemas de medida.
 MATERIAL DE REFERENCIA

Material de referencia certificado (MRC):

Material de referencia acompañado por la
documentación emitida por un organismos
autorizado, que proporciona uno o varios
valores de propiedades especificadas, con
incertidumbres y trazabilidades asociadas,
empleando procedimientos validos.
Procedimiento de medida de referencia:
Procedimiento de medida aceptado para producir resultados de
medida apropiados para su uso previsto, para evaluar la
veracidad de los valores medidos obtenidos a partir de otros
procedimientos de medida, para magnitudes de la misma
naturaleza, para una calibración o para la caracterización de
materiales de referencia.
Procedimiento de medición de referencia por convencion
internacional.
Procedimiento de medición de referencia que proporciona
valores que no son metrológicamente trazable al SI pero los
cuales e usan como VR por acuerdo internacional para una
magnitud definida
Procedimiento de medición seleccionado por el
fabricante:
Define un sistema de medición, el cual es calibrado por uno
o más calibradores primarios o secundarios, siempre y
cuando estén disponibles.

Procedimiento de medición de rutina del usuario final:

Procedimiento que debe describir un sistema de medición,
frecuentemente proporcionado por el fabricante, calibrado
por uno o más de los calibrantes preparados por el
fabricante, mismos que deben traer la referencia a un
patrón de mayor jerarquía metrológica
 CALIBRACION

Conjunto de operaciones que

establecen, en determinadas
condiciones, la relación existente
entre los valores de una magnitud
indicados por un instrumento de
medida, un sistema de medida o los
valores representados por un material
de referencia y los valores
correspondientes de esa magnitud
realizado por los patrones
 CALIBRADOR

 Posee un valor asignado que tiene una

trazabilidad con un patrón
 El fabricante o casa comercial debe
proporcionar información de trazabilidad.
 Se utiliza para estandarizar el método y
nos permite calcular los valores de las
muestras de los pacientes
 CARACTERISTICAS DE UN CALIBRADOR
 Concentración del analito en rangos
similares a los medidos
 Estabilidad (temperatura, fecha de
caducidad)
 Matriz similar a la utilizada por el analito
(suero acuoso)
 Presentación (liofilizado, liquido)
 Condiciones de almacenamiento
Calibrador de trabajo del fabricante:
Material que debe tener su valor asignado de
acuerdo a uno o más de los procedimientos de
medición seleccionados por el fabricante. Este
calibrador algunas veces es llamado “calibrador
maestro del fabricante” (o calibrador interno).
Calibrador del fabricante: Calibrador propuesto
para utilizarse por el fabricante como producto final.
Este debe tener su valor asignado de acuerdo con el
procedimiento de medición establecido por el
fabricante y su propósito de uso es la calibración del
procedimiento de medición de rutina del usuario
final.
Parte de la cadena Organización responsable
trazabilidad
Organizaciones internacionales reconocidas, tales
como OMS, IFCC, IRMM (Institute for Reference
Parte superior Materials and Measurements, European Union) e
Institutos Metrológicos, BIPM, ISO
Nacionales (NIST, CENAM, entre otros), etc.
Parte de la media Fabricantes de productos médicos para el
Diagnóstico In Vitro

Parte inferior Laboratorios clínicos

 Definición SI µc(y) CGPM

BIPM, INM, LRA

Procedimiento Primario

Calibrador primario
Procedimiento secundario INM, LRA

INM, LRA
Calibrador secundario
Procedimiento de medida
LF
elegido por el fabricante

Calibrador de
trabajo del fabricante LF

Procedimiento de medida de
LF
trabajo del fabricante
Calibrador del kit
LF

Procedimiento de rutina LF, USUARIO

Muestra del paciente USUARIO

Resultado USUARIO

ISO 17511
CASO 1
Procedimiento de
medición primario y
calibrador primario
trazable al SI
Es aplicable a
analito tales como:
Electrolitos,
glucosa, colesterol,
hormonas tiroideas,
fármacos y drogas
de abuso
 MUESTRAS DEL
CALIBRADOR COMERCIAL PRODUCIDO POR EL FABRICANTE PACIENTE EN EL
MATERIAL DE REFERENCIA PRIMARIO
LABORATORIO
ENSAYO MAGNIT CLÍNICO

IDENTIFICACIÓN DEL
PROCEDIMIENTO DE
UD

ANALITO
CONCENTRACIÓN

CONCENTRACIÓN

DEL
INCERTIDUMBRE

INCERTIDUMBRE

DE MEDICIÓN DE
PROCEDIMIENTO

PROCEDIMIENTO
DE MEDICIÓN DE

DE MEDICIÓN DE
MEDICIÓN DE

SECUNDARIO

PROCEDIMIENTO
FABRICANTE
REFERENCIA

UNIDADES
MATERIAL DE
REFERENCIA

REFERENCIA

FABRICANTE
RUTINA DEL
MATRIZ
MATRIZ

CUANTIFIC
MARCA
PRIMARIO

PRIMARIO

LABORATORIO

MAGNITU

MATRIZ
DA
RUTINA

AR
Dilución SRM Cal 1: 0.7;
ÁCIDO Fracción Cristales de cal 2: 6.0;
Isotópica 913a, uric 99,60% 0,10% ácido Vitros cal 3: 16.5 188 2208 Suero Uricase / Reflactanci Conce mg/dL Suero
ÚRICO de ácido úrico Espectrometr acid úrico bovino CDC a ntra
mg/dL.
SÉRICO masa ía de Masas ción
(DIEM)
CLORURO Fracci Cristales de NIST SRM 99,89% Cal 1: 65 ; Suero Conce
S EN ón cloruro de Gravimetría 919a 0,03% Cloruros Vitros cal 3: 150 166 2659 bovino Coulometrí Reflactanci ntra mmol / Suero
sodio mmol/L. a a L
SUERO mas ción
a
Cristales Cal 1: 95;
sodio en cal 2: 54; Espectros
SODIO Fracción NIST SRM Suero Conce
EN de cloruro de Gravimetría 919a
99,89% 0,03% Sodio Vitros cal 3: 220; 166 2659
bovino
copia de Reflactanci
ntra
mmol / Suero
cal 4: 16 flama de a L
SUERO masa sodio ción
mmol/L
emisión
atómica
Cal 1: 1.4 ;
UREA EN Fracción Cristales de cal 2: 17.8 Suero CDC
SRM 912a DSC, CG 99.9% 0,10% Vitros cal 3: 41 Ref 188 Reflactanci Conce mg/dL Suero
SUERO de urea 2208 bovino (ureasa / a ntra
(mmol /L)
masa GLDH) ción
Espectrometr
Disolución ía de emisión NIST Concent
Fracci óptica 10,01 1000 HNO3 al 1%
LITI acuosa 3129a 0,04 Litio High +/- 100029-1 ICP/OES AA ra ción meq/L Suero
ón inductivamen mg/g ug/mL
O acidificada mg/g Purity 3ug/m de
mas te acoplado L masa
a a plasma.
(ICP-OES)
CASO 2
Procedimiento de
medición de
referencia por
convención
internacional y uno
o mas calibradores
de CI sin
trazabilidad al SI

Es aplicable a
magnitudes que
implican
componentes
Hemoglobina
glicosilada
 MATERIAL DE REFERENCIA PRIMARIO CALIBRADOR COMERCIAL MUESTRAS DEL PACIENTE EN
EL
LABORATORIO CLÍNICO

MEDICIÓN DE RUTINA DEL

PROCEDIMIENTO DE

PROCEDIMIENTO DE
IDENTIFICACIÓN DEL
ENSAYO MAGNITU

LABORATORIO
MEDICIÓN DEL
D

FABRICANTE
CONCENTRACIÓN

CONCENTRACIÓN
INCERTIDUMBRE

INCERTIDUMBRE

CUANTIFICAR
REFERENCIA

MAGNITUD A
MÉTODO DE

SUSTANCIA
MRCs

UNIDADES
FABRICANTE
MATRIZ

MATRIZ

MATRIZ
MARCA
Concentr Sangr e
HEMOGLOBI ación de Sangre de human a y
NA hemoglob bovino HPLC/M S 0,08 Bio ovina Espectrofotom Concentr
CRM-522 49,61 µmol/L HbA1c S1-S4 % Sangre
GLICOSILAD ina hemolizad a µmol/L Systems etría ación
A glicosilad
a

Concentr Suero de Método 0,0580

PROTEÍNAS ación de albúmina Biuret y 5,47 g/dL ó
0,74 Proteína Roche / Calibrador Espectrofoto Concentr g/dL ó
TOTALES EN cantidad bovina SRM 927 c cromato 71,57 g/L g/dL ó 0,580 Suero Suero
g/L s totales Hitachi (C.f.a.s.) metría ación g/L
SUERO de (Disolución grafía de 54,7 g/L g/L
sustancia al 7%) líquidos

Turbidim
Concentr etría,
ación de Nefelom 3,70 0,03
ALBÚMINA Suero Roche / Calibrador Espectrofoto Concentr g/dL ó
cantidad CRM470 (2) etría y g/dL ó g/dL ó Suero Suero
EN SUERO humano Hitachi (C.f.a.s.) metría ación g/L
de espectro 36,0 g/L 0,30 g/L
sustancia metría
UV/VIS
CASO 3
Procedimiento de
medición de
referencia por
convencion
internacional (no
es primario) sin
calibrador por CI y
sin trazabilidad al
SI

Es aplicable a
magnitudes que
implican
componentes
Colesterol
HDL,células
sanguineas
 MATERIAL DE REFERENCIA PRIMARIO CALIBRADOR COMERCIAL MUESTRAS DEL PACIENTE EN EL
LABORATORIO
CLÍNICO

MEDICIÓN DE RUTINA
PROCEDIMIENTO DE

PROCEDIMIENTO DE

DEL LABORATORIO
DE MEDICIÓN DEL
REFERENCIA POR

PROCEDIMIENTO
INTERNACIONAL

CONCENTRACIÓN

CONCENTRACIÓN

DEL FABRICANTE
INCERTIDUMBRE

INCERTIDUMBRE

IDENTIFICACIÓN
CONVENCIÓN
ENSAYO MAGNITU

MEDICIÓN DE

FABRICANTE

CUANTIFICAR
MAGNITUD A
SUSTANCIA
D

UNIDADES
MATRIZ

MATRIZ

MATRIZ
MARCA
Concentr
ación de (0,102 a 192 U/L 4,12 U/L Calibrad
AMILASA EN suero Roche / IFCC(19 98) Espectrofotomet
cantidad IFCC(1998) 12) >= 2,7 % ó 3,21 ó 0,0688 or Suero AMY U/L Suero
SUERO humano Hitachi r ía
de mkat/L mkat/L (C.f.a.s.)
sustancia
IFCC
ISOENZIMAS IFCC Phospha tasa
suero fresco Calibrad Analizador
DE Fosfatasa Phosphatasa Roche / alkalina liquido Fosfatas
y congelado alkalina
204 U/l 2,32 U/l or Suero Hitachi a U/l Suero
FOSFATASA alcalina Hitachi 37°C a
ALCALINA líquido 37°C (C.f.a.s.) 917
alcalina
(fotometría)
Método de
referencia
CDC: Suero
1,3 a Reacción
HDL
HDL
suero fresco Ultrafiltración fresco,
oxidasa- HDL
COLESTERO / 9,7 mg/dL
colesterol y congelado colesterol congela
L Espectrofoto mmol/L esterasa,
doo
m etría ref colorimetrí
liofilizad
CYC_II_L_I_ a
R PM_04 o
JCTLM
DB
CASO 4
Se cuenta con un
calibrador por CI
sin Procedimiento
de medición de
referencia por CI y
sin trazabilidad al
SI

Es aplicable a
magnitudes que
implican
componentes
AgsHb,
G.corionica,
anticuerpos
 MATERIAL DE REFERENCIA PRIMARIO CALIBRADOR MUESTRAS DEL PACIENTE EN EL LABORATORIO
COMERCIAL CLÍNICO

CONCENTRACIÓN

CONCENTRACIÓN
INCERTIDUMBRE

INCERTIDUMBRE

PROCEDIMIENTO
INTERNACIONA

PROCEDIMIENTO
IDENTIFICACIÓ
PROTOCOLO

DE MEDICIÓN

FABRICANTE
SUSTANCIA

CUANTIFICA

UNIDADES
LABORATORIO

MAGNITUD
FABRICANTE
MATRIZ

MATRIZ

MATRIZ
MARCA

MEDICIÓN DE
RUTINA DEL
ENSAYO MAGNITUD

DEL
N DEL

R
A
L

DE
ICSH
Reference
method
(expert panel
on Cytimetry:
Método
Am J Clín
SSF
Contenido de plaquetas Sangre Pathol,115:46 Calibrad Citometrí a de
270.9x :ratio Contenid
PLAQUETAS fresca 0 Sysmex -7,9 orSCS- Sangre Flujo X10(9)/L Sangre
10(9)/L plaqueta o
humana -464,2001, 100
s/eritroci Plaqueta
Evaluation of
t os s
prototype for
reference
platelet
counter: J
Clin
Pathol,43:932
-
936,1990)
FACTOR VIII Actividad funcional Plasma WHO97/586 Stago plasma Coagulo métrico Actividad % plasma
de1998 funcional
Actividad funcional STA- Plasma Coagul Coagulo métrico
FACTOR VIII Plasma 5rd IS:02/150 0.68IU 0,07% FVIII Stago 7,70% Unicalibr human o Actividad % plasma
ator o métrico funcional
Actividad funcional STA- Plasma Coagul Coagulo métrico
FACTOR V Plasma 1st.IS:03/116 0.74IU 0,05% FV Stago 4,90% Unicalibr human o Actividad % Plasma
ador o métrico funcional
 MATERIAL DE REFERENCIA PRIMARIO CALIBRADOR COMERCIAL MUESTRAS DEL PACIENTE EN EL LABORATORIO
CLÍNICO

MEDICIÓN DE RUTINA
PROCEDIMIENTO DE
DE MEDICIÓN DEL

DEL LABORATORIO
PROCEDIMIENTO
CONCENTRACIÓN

CONCENTRACIÓN

DEL FABRICANTE
INCERTIDUMBRE

INCERTIDUMBRE
INTERNACIONAL

IDENTIFICACIÓN

CUANTIFICAR
FABRICANTE
PROTOCOLO

MAGNITUD A
SUSTANCIA

UNIDADES
ENSAYO MAGNITUD

MATRIZ

MATRIZ

MATRIZ
MARCA
Actividad STA- Plasma Coagulo Coagulo métrico
FACTOR X funcional Plasma 3er.IS:99/826 0.93IU 0,09% FV Stago 4,40% Unicalibr humano métrico Actividad funcional % Plasma
ador
Coagulo
métrico,
usando un
internal
master lot
STA- calibrado
FACTOR XII Actividad Plasma FXII Stago 6,10% Plasma Coagulo métrico Actividad funcional % Plasma
Unicalibr ator frente a un
funcional humano
pool de
plasma
fresco

Actividad 3er STA- Plasma Coagulo Coagulo métrico

FACTOR VII funcional Plasma st.IS:99/826 1.00IU 0,09% FVII Stago 4,50% Unicalibr humano métrico Actividad funcional % plasma
ador

WHO 96/670
Nivel bajo
Prostate Nivel bajo CAL Q
ANTÍGENO 1 μg total Antígen o SIEMEN 0.0 ug/dl
Proteína de specific NA Nivel NIVEL LOW Quimiolu miniscen cia
PROSTÁTICO Concentra PSA por prostátic o S Nivel alto
plasma antigen alto 29.5 NIVEL HIGH Concentración ug/mL
ESPECÍFICO ción vial MEDICA L 65 ug/dL
purificado (90:10), ug/dL
TOTAL Lyophilized., 1
μg total PSA
por vial. 1 st
CASO 5
Procedimiento de
medicion
seleccionado por
los fabricantes, no
cuentan
Procedimiento de
medición ni
calibradores
establecidos por
CI y sin
trazabilidad al SI

Es aplicable a
magnitudes que
implican
componentes
Dimero D,
marcadores
tumorales,
 LABORATORIO DE ANÁLISIS CLÍNICOS
MIDEN ANALITOS DE LA .....

• LISTA I: ANALITOS BIEN DEDEFINIDOS

ELECTROLITOS, ENZIMAS, DROGAS, METABOLITOS Y SUSTRATOS,
HORMONAS NO PEPTÍDICAS, Y ALGUNAS PROTEÍNAS.
• LISTA II: SUSTANCIAS NO TRAZABLES A UNIDADES SI Y/O
SIN PROCEDIMIENTOS DE MEDIDA DE REFERENCIA
FACTORES DE COAGULACIÓN, ÁCIDOS NUCLEICOS, PSA
• ANALITOS NO INCLUÍDOS EN I ni II
PE MARCADORES TUMORALES
* EN FLUIDOS BIOLÓGICOS
 Joint Committee of Traceability in Laboratory Medicine
JCTLM
Comité Conjunto de Trazabilidad en Medicina de Laboratorio

El International Committee of Weights and Mesures† (CIPM), la International

Federation for Clinical Chemistry and Laboratory Medicine (IFCC), y la International
Laboratory Accreditation Cooperation (ILAC) acuerdan cooperar para establecer el
Joint Committee for Traceability in Laboratory Medicine, con el acrónimo JCTLM.
Para los propósitos de del Comité Internacional de Pesas y Medidas (CIPM) va a ser representado por el Bureau

Internacional de Pesas y Medidas BIPM)

Paris, Sèvres BIPM

 BASE DE DATOS ACTUAL DEL JCTLM

• 298 MATERIALES DE REFERENCIA PARA 175

MENSURANDOS

• 180 MÉTODOS DE REFERENCIA PARA 80

MENSURANDOS

• 146 SERVICIOS DE MEDIDA DE REFERENCIA PARA

39 MENSURANDOS
Conclusiones
 La trazabilidad ofrece la mejor estrategia para lograr
la estandarización de los laboratorios.
 Las instituciones científicas deberán desarrollar
Sistemas de Referencia para cubrir las necesidades del
laboratorio clínico.
 La industria deberá proveer los calibradores y
controles con valores trazables utilizando los Sistemas
de Referencia.
 El laboratorio deberá transferir la veracidad de los
calibradores a los resultados de los pacientes.
 Los laboratorios deberán realizar –indefectiblemente-
acciones programadas para garantizar la calidad
analítica.