Tema 3 - Técnicas

Nazaret Andújar Ruiz
1º Laboratorio Clínico y Biomédico
TEMA 3 - LIMPIEZA Y MANTENIMIENTO DE LOS MATERIALES DE LABORATORIO
1. LIMPIEZA Y MANTENIMIENTO
- Limpieza, desinfección y esterilización.

- Mantenimiento.
2. LIMPIEZA, DESINFECCIÓN Y ESTERILIZACIÓN
La limpieza es la acción de eliminar la suciedad, es decir, cualquier sustancia que no tome
parte de aquello que queremos limpiar. La limpieza no implica la destrucción de los
microorganismos.
La desinfección elimina los microorganismos vegetativos pero no asegura la eliminación de

las esporas bacterianas.
La esterilización elimina tanto los microorganismos vegetativos como sus formas de

resistencia, las esporas.
Otros conceptos:
- La contaminación→ es la introducción en un medio de sustancias que lo hacen

inseguro o no apto para ser usado.
- Sepsis→ es la respuesta sistémica del organismo ante la presencia de
microorganismos patógenos y causada por la acción del sistema inmunitario.
- Asepsia→ es el conjunto de métodos aplicados para la conservación de la
esterilidad.
- Antisepsia→ es el empleo de sustancias químicas (antisépticos) para acabar con la
presencia de microorganismos de la piel o las mucosas.
- Higiene→ es el conjunto de conocimientos y técnicas que aplican los individuos
para el control de los factores que ejercen o pueden ejercer efectos nocivos sobre la
salud.
La limpieza
La limpieza es un procedimiento que elimina la suciedad de un objeto, combinando la

frotación con la acción química de los detergentes.
Los detergentes
Los detergentes son mezclas de sustancias tensioactivas que tienen la propiedad química
de disolver la suciedad o las impurezas de un objeto sin corroerlo.
Características de los detergentes
Son moléculas tensioactivas, es decir, con una parte polar y una no polar.
Tienen 3 propiedades:
- Poder humectante→ ayuda a romper la tensión superficial del agua.

- Dispersión→ rompe la suciedad compacta y la reduce a partículas muy finas.
- Suspensión→ envuelve las partículas de suciedad formando una emulsión, estas
partículas serán arrastradas por el agua.
Clasificación de los detergentes
Se clasifican en iónicos y no iónicos; y dentro de los iónicos, en aniónicos, catiónicos y

anfóteros. Todos son moléculas tensioactivas, que podemos destacar:
● Jabones→ tensioactivos aniónicos, se obtienen al oxidar un ácido graso de cadena

larga con una sal alcalina = saponificación.
● Alquilbencenos sulfonatos → son tensioactivos aniónicos, son los más usados por
su fuerte acción surfactante.
● Sales de amina y los compuestos de amonio cuaternario→ detergentes catiónicos
más usados. Tienen capacidad de absorber las cargas negativas de las superficies
de las fibras o del pelo, se usan en suavizantes textiles y acondicionadores de pelo.
El procedimiento de limpieza
Depende de 5 factores:
- Acción mecánica.
- Acción química.
- Tiempo.
- Temperatura.
- Cantidad y calidad del agua.
La desinfección
La desinfección es el procedimiento que destruye la mayoría de los microorganismos de un

objeto, material o superficie, con la esperanza de destruir todos los microorganismos
patógenos.
Se describen 3 niveles:
- Desinfección de intensidad baja → destruye formas vegetativas bacterianas, algunos

virus y hongos, pero no a las esporas bacterianas.
- Desinfección de intensidad media → destruye formas vegetativas bacterianas, la
mayoría de virus y hongos, pero no a las esporas bacterianas.
- Desinfección de intensidad alta → destruye todos los microorganismos, excepto
algunas esporas bacterianas.
Métodos físicos de desinfección
El calentamiento
- Pasteurización→ sumergir un objeto en agua a unos 70ºC durante 10 minutos.

- Ebullición→ se sumerge el objeto en agua hirviendo a 100ºC durante 10 minutos.
- Planchado→ la ropa puede desinfectarse planchandola a 100-150ºC durante 15 seg.
La irradiación con ultravioleta
La acción durante 20 segundos de lámparas de radiación ultravioleta mata la mayoría de los

gérmenes. Son poco penetrantes, solo son efectivas para desinfectar objetos si son de
superficie lisa.
Los ultrasonidos
Se utilizan aparatos de ultrasonidos similares a los de limpieza, pero las cubetas se llenan
de líquido desinfectante.
El filtrado con flujo laminar
Se usan para desinfectar el aire en salas o en cabinas de seguridad.
Métodos químicos de desinfección
El desinfectante es la sustancia química que empleamos para desinfectar y que puede

aplicarse sobre material inerte.
NOTA: La diferencia entre antiséptico y desinfectante es que los antisépticos son

desinfectantes que pueden aplicarse sobre materia viva, ej:etanol.
Aplicación de los desinfectantes
- Inmersión→ consiste en sumergir el objeto en una solución desinfectante durante 10

minutos, desinfección de nivel bajo.
- Loción→ consiste en frotar el objeto con una bayeta o una esponja mojadas en un
desinfectante adecuado. Se aplica en objetos grandes y en algunas partes de los
equipos de laboratorio.
- Pulverización→ el desinfectante se proyecta en pequeñas gotas sobre la superficie
del objeto que quiere tratarse. Se aplica en superficies y en algunas partes de los
equipos de laboratorio.
Principales desinfectantes
❏ Hipoclorito sódico (lejía) → potente bactericida, acción rápida pero transitoria, es el

desinfectante de uso más común.
❏ Alcohol etílico al 70% → elimina muchas bacterias y algunos virus y hongos, pero no
a las esporas. Uso común en la desinfección de superficies de trabajo.
❏ Detergentes catiónicos → se usan diluidos al 1% para desinfectar manos o material
y diluidos al menos al 1% para inmersión de ropas y objetos.
❏ Clorofenoles→ muy eficaces para la limpieza de paredes.
❏ Compuestos yodados→ potentes bactericidas, viricidas y fungicidas, más usado =

povidona yodada.
❏ Glutaraldehído→ se emplea en disolución acuosa al 2% durante 20-45 minutos
como desinfectante de alto nivel.
❏ Biguanidas→ se usan en solución alcohólica o acuosa para desinfectar la piel.
❏ Oxidantes→ como el agua oxigenada, tiene efecto rápido porque se descompone
por la actividad de la catalasa de las células epiteliales.
La esterilización
La esterilización es un procedimiento que destruye todos los microorganismos de un objeto,

superficie o material. Por su agresividad, nunca se pueden utilizar en tejidos vivos.
Métodos físicos de esterilización
La esterilización por calor seco
❖ Flameado→ el material se expone a la llama de un mechero bunsen durante mínimo

20 segundos.
❖ Hornos de incineración→ se destruye tanto el microbio como el objeto. Elimina
instrumentos contaminados o cultivos.
❖ Estufas de esterilización→ pueden alcanzar los 200ºC. Pueden esterilizarse objetos
de vidrios o de porcelana e instrumentos metálicos.
La esterilización por calor húmedo
Propiedades:
- Alta penetración: el calor calienta más rápidamente el interior de los objetos que el
calor seco.
- Facilidad para difundir el calor: el vapor ocupa todo el espacio y permite que el calor
llegue a todas partes.
Autoclave: El autoclave es un recipiente de paredes gruesas con tapa hermética, que

posee mandos para regular la temperatura, el tiempo y la presión y una válvula de
seguridad por si la presión interior se eleva demasiado. En su interior hay una rejilla para
situar los objetos, y en el fondo un recipiente con agua destilada, que se convertirá en
vapor.
El autoclave calienta el agua destilada para que se convierta en vapor. Este vapor de agua
produce un aumento de presión en el interior del autoclave que hace que aumente la
temperatura de ebullición del agua llegando hasta unos 121 ⁰ C. Para conseguir esta
temperatura suele ajustarse el autoclave a 103 kPa de presión interior.
El proceso de esterilización, a 121 º C y 103 kPa suele durar unos 15-20 minutos, aunque el
ciclo completo es mucho más largo, ya que primero hay que conseguir las condiciones
adecuadas y posteriormente eliminar el vapor y esperar a que la temperatura baje lo
suficiente.
La irradiación con rayos gamma
Son radiaciones con mucha energía, capaces de destruir gérmenes, son muy penetrantes
que esterilizan el material aunque esté envuelto en plástico e incluso dentro de cajas de
cartón o madera.
La filtración esterilizante
Se usa en la obtención de líquidos estériles para su uso en cultivos celulares. El

fundamento es hacer pasar el líquido por filtros con poros pequeños para que pase el
líquido pero no los microorganismos.
3. MANTENIMIENTO DEL MATERIAL FUNGIBLE
El material desechable
Características:
- De 1 solo uso.
- Se deben almacenar en sus envoltorios de protección.
- La mayoría son de plástico.
- Se deben depositar→ en contenedores destinados a esta recogida.
- Pueden conllevar riesgos específicos, debidos a: su forma(bisturíes,agujas…) y su
contenido: riesgo químico(según sus características) y riesgo biológico (eliminar
instrumento o desinfectarlo).
El material reutilizable
● Tras su uso, se debe preparar para un nuevo servicio.

● Si no se eliminan bien los microorganismos, podemos obtener al reutilizarlo:
○ Resultados erróneos.
○ Lecturas inexactas.
○ Contaminarnos con gérmenes que hayan proliferado en él.
Control de calidad de lavado del material de vidrio
- Se revisa si hay manchas de agua.

- Se llena de agua y se observan las paredes para ver si está limpio.
- Control adicional→ preparar una mezcla de detergente con una solución
bromosulftaleína sódica y enjuagar algunos recipientes con ella.
4. MANTENIMIENTO DEL MATERIAL INVENTARIABLE
Tiene una duración larga, siempre que se cuide. Debemos:
- Usar los equipos correctamente siguiendo las instrucciones.

- Efectuar las operaciones de mantenimiento.
- Se deben limpiar adecuadamente y deben protegerse del polvo.
Las operaciones de mantenimiento
Se deben efectuar:
- Verificaciones→ se hacen efectuando una medida con un producto patrón, cuyo

valor es conocido.
- Calibraciones→ se hacen cuando el equipo no da lecturas correctas o, dentro del
plan de mantenimiento.

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Nazaret Andújar Ruiz

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TEMA 3 - LIMPIEZA Y MANTENIMIENTO DE LOS MATERIALES DE LABORATORIO

- Limpieza, desinfección y esterilización.

2. LIMPIEZA, DESINFECCIÓN Y ESTERILIZACIÓN

La ​desinfección ​elimina los microorganismos vegetativos pero no asegura la eliminación de

La ​esterilización ​elimina tanto los microorganismos vegetativos como sus formas de

- La ​contaminación→ ​es la introducción en un medio de sustancias que lo hacen

La limpieza es un procedimiento que elimina la suciedad de un objeto, combinando la

Características de los detergentes

- Poder humectante→ ayuda a romper la tensión superficial del agua.

Clasificación de los detergentes

Se clasifican en iónicos y no iónicos; y dentro de los iónicos, en aniónicos, catiónicos y

● Jabones→ tensioactivos aniónicos, se obtienen al oxidar un ácido graso de cadena

La desinfección es el procedimiento que destruye la mayoría de los microorganismos de un

- Desinfección de intensidad baja → destruye formas vegetativas bacterianas, algunos

Métodos físicos de desinfección

- Pasteurización→ sumergir un objeto en agua a unos 70ºC durante 10 minutos.

La irradiación con ultravioleta

La acción durante 20 segundos de lámparas de radiación ultravioleta mata la mayoría de los

El filtrado con flujo laminar

Se usan para desinfectar el aire en salas o en cabinas de seguridad.

Métodos químicos de desinfección

El desinfectante es la sustancia química que empleamos para desinfectar y que puede

NOTA: La diferencia entre antiséptico y desinfectante es que los antisépticos son

Aplicación de los desinfectantes

- Inmersión→ consiste en sumergir el objeto en una solución desinfectante durante 10

❏ Hipoclorito sódico (lejía) → potente bactericida, acción rápida pero transitoria, es el

❏ Compuestos yodados→ potentes bactericidas, viricidas y fungicidas, más usado =

La esterilización es un procedimiento que destruye todos los microorganismos de un objeto,

Métodos físicos de esterilización

La esterilización por calor seco

❖ Flameado→ el material se expone a la llama de un mechero bunsen durante mínimo

La esterilización por calor húmedo

Autoclave: El autoclave es un recipiente de paredes gruesas con tapa hermética, que

La irradiación con rayos gamma

Se usa en la obtención de líquidos estériles para su uso en cultivos celulares. El

3. MANTENIMIENTO DEL MATERIAL FUNGIBLE

● Tras su uso, se debe preparar para un nuevo servicio.

Control de calidad de lavado del material de vidrio

- Se revisa si hay manchas de agua.

4. MANTENIMIENTO DEL MATERIAL INVENTARIABLE

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