Universidad de Guayaquil

Facultad de Ciencias Químicas

Carrera: Química y Farmacia
Informe de Práctica de Laboratorio
2019-2020 CI
PRÁCTICA 2 RECUENTO DE ERITROCITOS
HEMATOLOGÍA Dra. Haydee Alvarado Alvarado, mgs.
ESTUDIANTE: Villacis Barros Cindy Domenica
SEMESTRE: Sexto PARALELO: G3
Objetivos de la práctica de laboratorio
• Conocer y aprender cómo usar la cámara de recuento Neubauer, aprender las técnicas y el
procedimiento para el recuento de hematíes o eritrocitos con sangre diluida.
Fundamento
En la sangre se encuentra compuesta por diversos elementos formes entre ellos están
los leucocitos o glóbulos blancos que son las células móviles del sistema
inmunitario. Cada leucocito tiene una morfología y distintas funciones que la
realizan al entrar a los tejidos linfoides o a las zonas donde hay inflamación
intensa. En la sangre se encuentran cinco tipos de leucocitos como son:
linfocitos, monocitos, neutrófilos, basófilos y eosinófilos. Los leucocitos se
estudian en preparaciones coloreadas por dos razones: a fin de determinar la
apariencia normal o anormal de las células y sus porcentajes relativos en el
diagnóstico de ciertas enfermedades. El recuento tanto de eritrocitos y Leucocitos es
uno de los métodos de rutina. Para el conteo de leucocitos, se usan métodos sistemáticos que son más
rápidos y precisos, y los métodos manuales, como es en esta práctica, con la utilización de la cámara de
Neubauer y su reactivo respectivo, que es el de turk. El líquido de Turk es hipotónico de modo que se
destruyen los hematíes y así no entorpecen en el recuento. El
líquido de Turk consta de ácido acético glaciar 30ml, violeta de
genciana disolución de 1% 1ml y agua destilada en cantidad
suficiente para 1000ml. Deberá filtrarse a menudo para evitar
levaduras y hongos.
La cámara de recuento, Neubauer, es un dispositivo de precisión
hecho de vidrio óptico especial. Se utiliza para contar células u otras
partículas en suspensiones bajo el microscopio. Las cámaras de
recuento se utilizan principalmente para el análisis de sangre
(recuento de leucocitos, eritrocitos, trombocitos). Además, las
cámaras de recuento sirven para contar bacterias, espermatozoides y
esporas de hongo. La cámara de Neubauer o, también
llamada, Hematocimetro es un grueso portaobjetos de cristal,
dividido en tres secciones, la sección media a su vez cuenta con un rayado fino formando una cuadrícula

de 3 mm x 3 mm identificable fácilmente al microscopio.

Así mismo, esta sección está a exactamente 0.1 mm más bajo que las secciones laterales, estableciendo un
volumen fijo una vez colocado el cubreobjetos especial (cubrehematocimetro).
Al observar al microscopio la sección central, podremos identificar un cuadrado de tres por tres, que en
conjunto mide 9 mm2.
En esta cuadrícula podemos localizar fácilmente los cuatro cuadrantes
que están en los extremos, cada uno de ellos divididos a su vez en un
conjunto de 4 x 4, en el esquema correspondiente se muestran con la
letra A. En la parte central se puede apreciar un cuadro central de 1 x
1 mm dividido en 25 cuadrantes de 0.2 x 0.2 mm, en la figura se
encuentra delimitada por un recuadro e indicado por una flecha.
El cuadro central, al observarlo a mayor aumento, vemos que cada
cuadro de esos cinco limitados por una triple línea, están constituidos
a su vez por un conjunto de 4 x 4. De estos 5 cuadros se utilizan de
manera rutinaria los cuatro conjuntos de los extremos y el central.
Para identificar en cuál de los cuadrantes centrales nos encontramos,
basta con localizar las líneas prolongadas, en la siguiente figura
podemos ver esa característica y el cuadro correspondiente:
A diferencia de los cuadrantes 1, 2, 4 y 5, el cuadrante 3 no presenta estas líneas por ser un cuadrante central
y estar rodeado de otros cuadrantes, el cuadro 3 presenta unas lineas.
Los cuadrantes a utilizar dependerán de la cantidad y tipo de célula a contar, de manera rutinaria se tiene
que:
• Glóbulos blancos se contabilizan en los cuadrantes A.
• Glóbulos rojos, plaquetas y espermatozoides se utilizan los cuadrantes B.
Reactivos de laboratorio
1. Solución Salina
Materiales de laboratorio
1. Muestra de sangre venosa con EDTA k3
2. Papel higiénico
3. Cubre hematímetro.
4. Pipeta diluidora de Thoma
5. Goma de aspiración
6. Auxiliar de pipeteo
Equipos de laboratorio
1. Cámara de Neubauer
2. Microscopio
Actividades que desarrollar/ técnicas de operatorio o procedimiento

1. Necesitamos sangre total lo cual para obtenerla vamos a tomar una muestra sanguínea con
EDTA (Anticuagulante) que es el tubo lila que es el que utilizamos para hematología
2. Tomamos una pipeta de thoma la de leucocitos y la de eritrocitos, la de eritrocitos tiene una
pastillita roja con la que podemos identificar fácilmente, viene con una manguera para poder
aspirar y tomar la sangre
 3. Vamos a llenar hasta la marca de punto 0.5 con la sangre total.
4. Después procedemos a llenar hasta el 101 con mi solución de
dilución con mi solución que voy a utilizar para hacer la dilución la
cual puede ser solución salina teniendo así una dilución de 1 a 200

5. Agitamos por 1 minutos la pipeta de thoma, con cuidado de no

formar burbujas
6. Desechamos las 4 primeras gotas que se vierten con la pipeta y la
siguiente gota la colocamos entre la cámara y el cubre por uno de
los bordes de la cámara, dejándola que penetre por capilaridad.
Debemos intentar que no rebose la sangre diluida, ni se formen
burbujas.

7. Dejamos reposar la sangre diluida ya en la cámara, durante dos minutos en un ambiente

húmedo. Así las células tienen tiempo de sedimentarse.
8. Luego procedemos a ver la cámara en el microscopio si usar aceite de inmersión enfocamos a
10 para ubicar la cámara y después observamos en 40x
Resultados obtenidos (Observaciones, cálculos, datos, ecuaciones, tablas, gráficos, figuras, fotos y otros
que así se consideren)
Hematíes contados Sexo de la persona a
Eritrocitos/mm3
en 5 cuadrados Factor de dilución Eritrocitos/mm3 la que pertenece la
obtenido
medianos sangre
5380000
538 1/200 Masculino Normal
eritrocitos/mm3
Una vez contados los cinco cuadrados, obtenemos los siguientes resultados:
El resultado total de los 80 cuadrados pequeños sería 538 Eritrocitos. Teniendo en cuenta que:
– El cuadrado grande central tiene 25 cuadrados medianos (Habrá que multiplicar el resultado por 5)
– La longitud del espacio entre dicho cuadrado y el cubre es de 0,1mm (Habrá que multiplicar el resultado
por 10, para determinar la cantidad de hematíes en 1mm3)
– La dilución de la sangre previa al recuento (Habrá que
multiplicar por 200).
𝐸𝑟𝑖𝑡𝑟𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠/𝑚𝑚3 = 𝑁 × 𝐷 × 10 × 5
N: Eritrocitos hallados en los 4 cuadrantes
10: Factor de profundidad entre el cubre hematímetro y la
cámara.
D: Factor de dilución de la sangre
5: Cuantos cuadrantes fueron tomados en cuenta
𝐸𝑟𝑖𝑡𝑟𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠/𝑚𝑚3 = 538 × 200 × 10 × 5
𝐸𝑟𝑖𝑡𝑟𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠/𝑚𝑚3
= 5380000 𝑒𝑟𝑖𝑡𝑟𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠 𝑝𝑜𝑟 𝑚𝑚3 𝑑𝑒 𝑠𝑎𝑛𝑔𝑟𝑒
• Es muy importante observar que en la cámara de
Neubauer las áreas de recuento de eritrocitos y linfocitos son
diferentes. Los glóbulos rojos se cuentan en las áreas coloreadas de rojo, mientras que los glóbulos
blancos se cuentan en las áreas coloreadas de azul.
Conclusiones
• Los hematíes, también conocidos como eritrocitos, glóbulos rojos o células de la serie roja de la
sangre, son células que circulan en la sangre y transportan el oxígeno por todo el organismo. El
recuento de hematíes evalúa la cantidad total de eritrocitos en la muestra de sangre obtenida.
• Los valores normales de Eritrocitos están comprendidos entre los 4,5 y los 6 millones/mm3 en los
hombres, con esto podemos determinar que el paciente se encuentra dentro de los valores normales
de Eritrocitos.
Recomendaciones
• Al momento de preparar la disolución con la sangre no es recomendable usar agua de la llave
porque es una solución hipotónica y pueden los eritrocitos llegar a hemolizarse.
• Al momento de agitar la solución tener cuidado de que no se formen burbujas ya que puede afectar
a los eritrocitos.
• Al momento de dejar reposar la solución diluida en la cámara tiene que ser en un ambiente húmedo.
• Cuando observemos en el microscopio tiene que ser al 40 x sin utilizar aceite de inmersión
• Al momento de observar la cámara debemos enfocarnos en las rejillas del centro ya que esos son
para el conteo de eritrocitos
• Si por alguna razón usted detecta una anormalidad en el llenado de la cámara, lo más recomendable
es que desmonte esa preparación, limpie la cámara y vuelva a montar desde cero.
Bibliografía
• Cardona-Maya W, Berdugo J, Cadavid A. Comparación de la concentración espermática usando la
cámara de Makler y la cámara de Neubauer. Actas Urol Esp 2008;32 (4): 443-445. Disponible en:
scielo.
• Meneses A, Rojas L, Sifontes S. Aplicación de un método alternativo de conteo en Cámara de
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• Kasper DL, Braunwald E, Fauci AS, Hauser SL, Longo DL, Jameson JL eds, (2005). Harrison's
Principles of Internal Medicine, 16th Edition, McGraw Hill, Pp 329-336.