Practica Seman 4 FB 2020 I

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Guía de prácticas de Farmacología Básica Escuela de Medicina Humana

PRÁCTICA N° 04
Interacciones de Fármacos in Vitro y Curva de Dosis Respuesta.

COMPETENCIA:

El estudiante al término de la práctica estará en la capacidad de resolver e interpretar aspectos


relacionados con las interacciones de Fármacos in Vitro y Curva de Dosis Respuesta.

I. FUNDAMENTO:

En los En el intestino delgado podemos distinguir tres porciones: duodeno, yeyuno e


íleon. Esta última está constituida por distintas capas celulares: serosa, muscular,
plexos nerviosos, submucosa y mucosa. De todas ellas nos centraremos en la
muscular, ya que son las células de musculatura lisa del íleon las que van a
contraerse en respuesta a diversos estímulos y por tanto las responsables de la
respuesta que nosotros vamos a registrar. Entre los distintos neurotransmisores con
capacidad de producir contracción del íleon se encuentran ACh, histamina, ya
que el íleon posee receptores para estos mediadores. Concretamente ACh es un
agonista de receptores muscarínicos y nicotínicos. El nicotínico es un receptor
preganglionar, y no se encuentra en el íleon, sino en el ganglio donde sinaptan las
neuronas que inervan el intestino. Esto quiere decir que mientras que el órgano
aislado (sin inervación) no responde a la estimulación del receptor nicotínico,
en el animal entero, esta estimulación sí provocaría respuesta. En esta práctica
nosotros vamos a añadir al baño de órganos ACh, esta en el baño va a Interaccionar
con receptores muscarínicos, concretamente M3. Tras su estimulación se
desencadenan una serie de procesos que conducen a un incremento de [Ca ]+2
intracelular, provocando la contracción del musculo liso. Recordemos que el
receptor M 3 está asociado a una proteína G cuya activación estimula la actividad de
la fosfolipasa C (PLC). En el esquema podemos ver los segundos mensajeros y
mecanismos implicados en la contracción.

DRA. ELENA A. CÁCERES ANDONAIRE MG. DAN ORLANDO ALTAMIRANO SARMIENTO


Guía de prácticas de Farmacología Básica Escuela de Medicina Humana

El íleon presenta una contracción bifásica, con un componente fásico (un pico de
contracción) seguido de otro tónico (una meseta mantenida). El pico de contracción
se asocia con la liberación de Ca+2 de los depósitos intracelulares y la contracción
tónica con la entrada de Ca+2 a través de canales.

II. OBJETIVO GENERAL:

 Identificar e interpretar aspectos relacionados con la interacciones de Fármacos in Vitro y


Curva de Dosis Respuesta.

III. OBJETIVOS ESPECÍFICOS:


1. Demostrar la importancia las interacciones de Fármacos in Vitro en la investigación y
desarrollo de medicamentos.
2. Explican la importancia de la curva de Dosis Respuesta.

IV. PROCEDIMIENTO PARA DESARROLLO DE LA PRÁCTICA :

 Los alumnos se agrupan para desarrollar la práctica, utilizando la plataforma virtual


“Zoom”, considerando:
 Interpretación, aplicaciones de los ejercicios propuestos en la práctica
 Presentación y explicación de un caso, donde se pueda evaluar interacciones
farmacológicas ( presentarlo en power point)

 También puede considerar, otros ejemplos que permitan profundizar o aclarar el tema
que se está tratando se recomienda utilizar información o bibliografía actualizada.
 El docente tutor utiliza durante la práctica simulación virtual para explicar aspectos
relacionados con el tema.

DRA. ELENA A. CÁCERES ANDONAIRE MG. DAN ORLANDO ALTAMIRANO SARMIENTO


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 Realizaran la discusión de la práctica en diapositivas e infogramas. Los demás


participaran con preguntas o aportes sobre el tema.

A. INTERACCION DE FÁRMACOS
I. Sinergias de Fármacos:
a. Sinergia Aditiva:
Experiencia 1: Acetilcolina Clorhidrato y Pilocarpina en
Yeyuno-íleon de cerdo simulado

1. Instalar simulación de Yeyuno íleon en Vaso de Órgano Aislado: Segmento


de 4 cm., Temperatura.: 37 °C., en liquido Nutrición: sol. krebs henseleit,
Gasificación constante.- O2: 95 %V, C02: 5%,V.
2. Control Basal: Hacer un trazado normal.
3. Acetilcolina Clorhidrato: Sol. 1°/000, dosis de 5M.
4. Control Post Fármaco: Hacer un trazado, Lavar 2 veces.
5. Pilocarpina: Sol. 0.5%, dosis de 5M.
6. Control Post Fármaco: Hacer un trazado. Lavar 2 veces
8. Control Post Fármaco: Hacer un trazado, Lavar 2 veces.

II. Antagonismo de Fármacos:


a. Antagonismo por Competencia de Receptores celulares:
Experiencia 1: Acetilcolina Clorhidrato y Atropina Sulfato en Yeyuno –
ileon de cerdo simulado

1. Control Basal: Hacer un trazado normal.


2. Acetilcolina Clorhidrato: Sol. 1°/ooo, dosis de 5 gamas/ml.
3. Control Post Fármaco: Hacer un trazado, Lavar 2 veces.
4. Atropina Sulfato: Sol. 0.5%, dosis de 8M
5. Control Post Fármaco: Hacer un trazado. Lavar 2 veces.

B. CURVA DE DOSIS EFECTO:


Experiencia 1: Dosis Efectiva Media de Acetilcolina Clorhidrato en
Yevuno- ileon de cerdo simulado

1.Instalar el Yeyuno íleon en Vaso de Organo Aislado: Segmento de 4 cm.,


Temperatura.: 37 °C., en líquido Nutrición: sol. Tyrode, Gasificación
constante.- O2: 95 %V, C02: 5%,V.
2.Control Basal: Hacer un trazado normal.
3.Acetilcolina Clorhidrato: Sol. 1°/ 0 0 0 0 .
1° Dosis: 0.025 gamas/ml. Hacer un trazado. Lavar 2 veces.
2° Dosis: 0.050 gamas/ml. Hacer un trazado. Lavar 2 veces.
3° Dosis: 0.100 gamas/ml. Hacer un trazado. Lavar 2 veces.
4° Dosis: 0.200 gamas/ml. Hacer un trazado. Lavar 2 veces.
5° Dosis: 0.400 gamas/ml. Hacer un trazado. Lavar 2 veces.
4. Determinar la Dosis Efectiva 50, empleando el método de Trevan.

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Resultados de la curva dosis efecto in vitro:

Dosis ensayada Dosis peso Dosis volumen Respuesta basal y/o Respuesta
observadas (mm) Observada (%)

Basal 0 0 14.6

0.025 gamas/ml 12.5

0.050 gamas/ml 9.8

0.100 gamas/ml 7.8

0.200 gamas/ml 5.7

0.400 gamas/ml 3.8

El alumno asesorado por su docente tutor de práctica elabora la gráfica e interpreta la curva de dosis
efecto.

Resultados Interacciones in vitro:

CONTROL BASAL INTERACCIÓN IN VITRO:

Análisis e interpretación de la gráfica:

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a. Sinergia Aditiva: Experiencia 1: Acetilcolina Clorhidrato y Pilocarpina en Yeyuno-íleon.

Análisis e interpretación de la gráfica:

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Experiencia 1: Acetilcolina Clorhidrato y Atropina Sulfato en Yeyuno¬ – ileon

Análisis e interpretación de la gráfica:

V. DISCUSIÓN DE GRUPO PRE PRÁCTICA

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1. Mencione cuatro ejemplos de interacciones in vitro de tipo sinergismo y antagonismo.


2. ¿Cuál es las diferencias entre interacciones in vitro e in vito considere sinergia de suma y
potenciación, mencione 3 ejemplos?
3. ¿Cuál es la diferencia entre DE50 y CE50?
4. ¿Cuál es la aplicación de las curvas dosis respuesta en el ámbito clínico, mencione 4 ejemplos?

VI. DISCUSIÓN DE GRUPO POS PRÁCTICA

1. Elabora cuadro o tabla para presentar ejemplos de interacciones in vitro de tipo


sinergismo y antagonismo.
2. Elabora cuadro o tabla para las diferencias entre interacciones in vitro e in vito considere
sinergia de suma y potenciación, mencione 3 ejemplos
3. Elabora un cuadro resumen para establecer la aplicación de las curvas dosis respuesta en el
ámbito clínico, mencione 4 ejemplos

REFERENCIA:
- Goodman y Gilman. Las bases farmacológicas de la Terapéutica. 12va Edición.
- Organ Bath Simulation(c) J. Dempster, University of Strathclyde 2009 16 V2.8

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