Laboratorio de Química Analítica

Grado en Químicas
Mª del Rosario Blanc García
 ¿QUÉ ES LA
VALIDACIÓN?
Verificación de que los requisitos
especificados son adecuados para un
uso previsto [UNE-EN ISO Guía 99].

Proceso por el que se establece,

por medio de estudios de
laboratorio, que las
características de funcionamiento
de un método están de acuerdo
con los requisitos para una
aplicación prevista [Glosario de
términos analíticos, 1ª Ed. 2013].

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 VALIDACIÓN:
Objetivos

Garantizar la coherencia entre

Definir y asegurar la calidad la información analítica
de la información analítica generada y las necesidades
generada caracterizando el informativas planteadas.
proceso analítico a través de
sus propiedades analíticas.

 Caracterizar los procesos analíticos y las herramientas analíticas.

 Facilitar las auditorías de calidad.
 Fundamentar la transferibilidad de procesos y herramientas entre laboratorios.
 Apoyar el reconocimiento mutuo de resultados entre laboratorios.

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 ¿Cuándo deben validarse los procesos analíticos?

Un proceso analítico debe validarse cuando sea necesario verificar que sus
características son adecuadas para el uso en un problema analítico específico. Por
ejemplo:

 Cuando se pone a punto el método analítico por primera vez en el laboratorio

desarrollado para un problema específico.

 Cuando un método analítico ya establecido es revisado para incorporar mejoras o

extenderlo a un nuevo problema.

 Cuando el control de calidad indica que un método analítico ya establecido está

cambiando con el tiempo.

 Cuando un método analítico establecido es usado en un laboratorio diferente o con

diferentes analistas o con diferente instrumentación.

 Para demostrar la equivalencia entre dos métodos analíticos, por ejemplo, entre un
método nuevo y uno de referencia.

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 Validación del
proceso analítico

Validación de las Validación de la medida de Validación de toma y

operaciones previas la señal analítica tratamiento de datos

Validación
Validación del informática
muestreo (hardware,
Software)

Validación de Validación de equipos

reactivos, materiales (instrumentos,
de referencia, etc… aparatos, dispositivos)

Validación de la
calibración analítica
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 PROPIEDADES ANALÍTICAS

Representatividad CALIDAD DE LOS

Exactitud
RESULTADOS

Veracidad Precisión Muestreo

Gestión de

Sensibilidad/Resolución

Límite de cuantificación
Linealidad “On-Line” CALIDAD DEL

Límite de detección
muestras
Linealidad “In-Line”

Intervalo de trabajo

PROCESO
Selectividad

ANALÍTICO

Robustez

Rapidez
Transferibilidad
Criterios de practicabilidad e idoneidad Costes
Fiabilidad
Factores personales

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 Practicabilidad
• Aptitud para poner en práctica un método analítico. Está relacionada con la facilidad
de llevar a cabo las operaciones de laboratorio, la viabilidad y eficiencia en la
implementación de dichas operaciones.

Idoneidad
• Confirmación de que un sistema analítico funciona adecuadamente durante el análisis
de muestras desconocidas.

Fiabilidad
• Capacidad de un método analítico de mantener su exactitud (veracidad y precisión) a
lo largo del tiempo.

Transferibilidad
• Propiedad de un método analítico que describe su capacidad de mantener los
resultados cuando es aplicado a las mismas muestras en diferentes laboratorios.

Robustez
• Capacidad de un procedimiento analítico para permanecer inalterado por variaciones
pequeñas pero deliberadas de los parámetros característicos del método.

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 Idoneidad

Exactitud

Robustez
Transferibilidad

Fiabilidad

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 Propiedad crucial de un método analítico
que está relacionada con la coherencia de
REPRESENTATIVIDAD los resultados y las muestras de laboratorio (y
entre éstas), el objeto analítico y el problema
analítico [Glosario de términos analíticos, 1ª
Ed. 2013].

Muestreo
adecuado y
cadena de
custodia de la
muestra bien
documentada.

REPRESENTATIVIDAD

Método
analítico de
fiabilidad
contrastada

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 Grado de concordancia entre el valor
EXACTITUD medido y el valor verdadero del analito en
la muestra en cuestión.

Valor

error sistemático + error aleatorio + error accidental

VERACIDAD PRECISIÓN

PRECISIÓN

VERACIDAD

Laboratorio de Química Analítica EXACTITUD

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 Grado de concordancia entre los resultados de
PRECISIÓN sucesivas medidas independientes del mismo
mensurando, bajo condiciones especificadas.

Las condiciones especificadas pueden ser condiciones de repetibilidad, de precisión

intermedia o de reproducibilidad UNE 82009-3:1998 (ISO 5725-3:1994).

REPETIBILIDAD: precisión en condiciones bajo las que se obtienen resultados

independientes, con el mismo método, sobre idénticas muestras, en el mismo laboratorio,
por el mismo operador y utilizando los mismos equipos de medición, durante un corto
intervalo de tiempo [Glosario de términos analíticos, 1ª Ed. 2013].

La repetibilidad indica siempre la máxima precisión de un método analítico (menor

valor de desviación estándar).

Representa la precisión intralaboratorio.

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 Grado de concordancia entre los resultados de
PRECISIÓN sucesivas medidas independientes del mismo
mensurando, bajo condiciones especificadas.

Las condiciones especificadas pueden ser condiciones de repetibilidad, de precisión

intermedia, o de reproducibilidad UNE 82009-3:1998 (ISO 5725-3:1994).

REPRODUCIBILIDAD: precisión en condiciones bajo las cuales los resultados se obtienen

sobre submuestras distintas, con distintos métodos, en laboratorios diferentes, con
operadores distintos, utilizando equipos diferentes y en distintos periodos de tiempo. (ISO
5725 y VIM 1993).

La reproducibilidad indica siempre la mínima precisión de un método analítico

(mayor valor de desviación estándar)

Representa la precisión interlaboratorio.

En todos los casos, la desviación estándar de reproducibilidad ha de ser mayor que
la desviación estándar de repetibilidad. Como primera aproximación, se puede
considerar que la DEr ~ 0,6·DER.

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 Grado de concordancia entre los resultados de
PRECISIÓN sucesivas medidas independientes del mismo
mensurando, bajo condiciones especificadas.

Las condiciones especificadas pueden ser condiciones de repetibilidad, de precisión

intermedia, o de reproducibilidad UNE 82009-3:1998 (ISO 5725-3:1994).

PRECISIÓN INTERMEDIA: precisión bajo condiciones donde se obtienen resultados

independientes dentro del mismo laboratorio, con el mismo método en idénticas muestras
y cambiando condiciones como operador, equipo de medida y tiempo.

Representa la precisión intralaboratorio

Dependiendo de qué condiciones se estudien, pueden definirse otras componentes

de precisión intermedia como precisión inter-día, precisión inter-analista, etc.

La correspondiente desviación estándar toma siempre un valor intermedio (de ahí
su nombre) entre los valores de las desviaciones estándar de repetibilidad y
reproducibilidad.

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 PRECISIÓN
Estimación

Desviación estándar relativa (o coeficiente de variación) :

sC
DER(c) = 100
cm
Parámetros ISO (ISO 5725)

a) Límite de repetibilidad : r= 2.83 sr (sr = sc en cond. de repetibilidad)

b) Límite de reproducibilidad: R= 2.83 sR (sR = sc en cond. de reproducibilidad)

c) Límite de precisión intermedia: RI(..)= 2.83 sI(..) (sI(..) = sc en cond. de precisión intermedia)

Estos parámetros informan acerca del valor por debajo del cual la diferencia absoluta entre dos
resultados del ensayo, obtenidos bajo las condiciones de repetibilidad, reproducibilidad o de
precisión intermedia, puede esperarse dentro de una determinada probabilidad (95%, si no se indica
otro valor)(C-CSQ-01, ENAC, con referencia a ISO 5725).

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 Grado de concordancia entre la media aritmética de
un gran número de resultados de un ensayo y un
VERACIDAD * valor de referencia aceptado. Se expresa en
términos de SESGO (BIAS) (ISO 5725-1).

Sesgo  xm - X

Error relativo

 xm − X 
E (% ) =   ×100
 X 

Recuperación
 xm 
R(% ) = 100 ×  
X
R(% ) = 100 − E (% )
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 VERACIDAD
Valor de referencia aceptado (X)

Método de referencia Material de referencia

1. Métodos Oficiales. Su uso es exigido por MR certificados

Organismos gubernamentales para satisfacer
regulaciones estatales.
2. Métodos estándar. Desarrollados por MR patrón
organizaciones internacionales o nacionales de
prestigio, p.e. ISO, CEN, AENOR, ASTM.
MR caseros
3. Métodos publicados por Organizaciones
Profesionales. Aparecen en libros o manuales
editados por tales organizaciones, Ej. AOAC, AMC.

4. Métodos suministrados por organizaciones

comerciales. Muestra previamente analizada
Muestra sintética
5. Métodos publicados en la literatura científica.
Recogidos en revistas especializadas de libre difusión. Muestra dopada (spiked)
Muestra añadida (added)
6. Métodos desarrollados en el propio laboratorio. No
se consideran como tales los métodos resultantes de
introducir modificaciones sobre anteriores apartados.

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 VERACIDAD

ESTUDIOS INTERLABORATORIOS

Ejercicios colaborativos ESTUDIOS INTRALABORATORIOS

Materiales de referencia

Test estadísticos:
Análisis de la varianza (ANOVA) Métodos de referencia
Test t-Student
Test F

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 Capacidad de un método analítico para generar una señal
cuya intensidad es directamente proporcional a la cantidad
LINEALIDAD * de un analito o parámetro analítico dado [Glosario de
términos analíticos, 1ª Ed. 2013].

La linealidad está asociada al establecimiento de la recta de calibrado.

De hecho, se ha propuesto como parámetro de linealidad el valor
complementario de la desviación estándar relativa de la pendiente:

LIN = 1 – DER(b).

No es una propiedad necesaria, ya que algunos métodos muestran un

comportamiento intrínsecamente no lineal, y se utilizan entonces curvas
de calibración ajustadas a funciones no lineales.

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 LINEALIDAD

Linealidad “In-line” Linealidad “On-line”

Se refiere al ajuste a la línea recta (bondad del Indica el grado de dispersión de los datos en torno a
ajuste) de los valores de señales analítica obtenidas la recta de calibrado.
experimentalmente para cada concentración de Un bajo grado de linealidad "on-line" implica que no
analito. es posible distinguir con exactitud la curvatura
Describe la ausencia de curvatura de la recta de mediante el test del fallo de ajuste.
calibrado.

Valor-P del Test del fallo de ajuste LINOL (%) = 100 [1- DER(b)]

S S S
  
 

   

   
   
 
     
  
  
Conc. Conc. Conc.

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 Cociente entre la variación de la señal analítica y la
variación correspondiente a la concentración de
SENSIBILIDAD * analito medida. Se expresa mediante la pendiente de la
recta de calibrado (S = b).

Señal
1

b1 2

Δ señal Δ señal
Δ C1
>
Δ C2
b2

Δ señal
b1 > b2 Describe los cambios que se
producen en la respuesta al variar
la concentración de analito.

S1 > S2

Δ C1 Δ C2 Concentración
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 Mínima variación de la concentración de analito
RESOLUCIÓN
ANALÍTICA
* que da lugar a una variación perceptible de la
señal analítica.

RES = sR/ b RES = sR,c / b

(sR : Desviación estándar de la respuesta para una concentración) (sR,c: desviación estándar de regresión)

Señal

Laboratorio de Química Analítica Concentración

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 Capacidad de un método analitico que puede ser utilizado para
SELECTIVIDAD * detectar y/o determinar analitos concretos en mezclas y matrices sin la
interferencia de otros componentes de comportamiento similar.

SUSTANCIA INTERFERENTE

Es un componente de la muestra identificado, diferente al analito, que altera alguna, varias o todas las
etapas del proceso analítico y que por ello origina una señal analítica similar causando un error
sistemático en el resultado analítico, para al menos una concentración de analito dentro del intervalo
de aplicación del método.

Efecto matriz es la influencia de uno o más constituyentes de la matriz sobre la detección y/o
determinación de un parámetro analítico.
Se manifiesta directamente por una disminución o incremento de la señal (afecta a la veracidad) o
indirectamente como una perturbación sobre la señal (afecta a la precisión).

Para caracterizar el efecto matriz se utilizan varios métodos como el método de adición de patrón a un
nivel, el método de adición de patrón a varios niveles y el blanco de Youden.

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 LÍMITE DE Concentración o cantidad de analito crítica a partir de la cual,
DECISIÓN con una probabilidad de error α, se decide si hay o no hay
(CCα) analito en el material analizado.

CAPACIDAD
Concentración o cantidad de analito mínima que puede ser
DE
detectado, identificado o cuantificado en un material con una
DETECCIÓN
probabilidad de error β.
(CCβ)

Concentración o cantidad de analito mínimo que puede ser

LÍMITE DE medida con una probabilidad de error β de declarar
DETECCIÓN * erróneamente la ausencia de analito en el material analizado y
(LD) con una probabilidad de error α de declarar erróneamente su
presencia.

LÍMITE DE Concentración o cantidad de analito mínima que puede

CUANTIFICACIÓN medirse aplicando el método analítico con una precisión
(LQ)
*
dada (normalmente 10%).

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 Cálculo del límite de decisión (CCα)
y
Cálculo de la capacidad de detección (CCβ)

Frecuencia
2,33 sB 1,64 sCCα

β α

xB CCα CCβ Concentración

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 Cálculo del límite de detección (LD) y de cuantificación (LQ)

3 sB
Frecuencia

LD = xB + 3 sB
LQ = xB + 10 sB

β α α = 0,1%
xB LD Concentración β = 50%

3,28 sB
Frecuencia

LD = xB + 3,28 sB
LQ = xB + 10 sB

β
α α = 5%
β = 5%
xB LD Concentración
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 LÍMITE DE LÍMITE DE LÍMITE DE
DETECCIÓN DECISIÓN CUANTIFICACIÓN

LQ = 10 S/R

LD = 3 S/R

S/R

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 Intervalo de aplicación del método, Es el intervalo de
INTERVALO
concentración o cantidad de analito que se inicia en el límite
DE
de cuantificación y se extiende hasta el valor más alto de
APLICACIÓN * concentración o cantidad de analito que ha sido validado. Si
la relación es lineal tenemos el INTERVALO DE APLICACIÓN
LINEAL.

Intervalo de aplicación cte

Pérdida de la relación
señal-concentración
Intervalo
Señal

lineal

Concentración

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Laboratorio de Química Analítica
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