Bioplastico Apartir Del Platano

ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO
FACULTAD DE CIENCIAS
CARRERA DE INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL
“EVALUACIÓN DEL COMPORTAMIENTO DE Aspergillus niger y

Penicillium spp EN LA DEGRADACIÓN DE BIOPLÁSTICO
ELABORADO A PARTIR DE ALMIDÓN DE CÁSCARA DE
PLÁTANO”
TRABAJO DE TITULACIÓN
TIPO: PROYECTO DE INVESTIGACIÓN
Presentado para optar al grado académico de:

INGENIERA EN BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL
AUTORA: MARISOL ALEJANDRA ERAZO PÉREZ

TUTORA: DRA. YOLANDA DOLORES DÍAZ HEREDIA
Riobamba-Ecuador
2018
© 2018, Marisol Alejandra Erazo Pérez
Se autoriza la reproducción total o parcial, con fines académicos, por cualquier medio o
procedimiento, incluyendo la cita bibliográfica del documento, siempre y cuando se reconozca el
Derecho de Autor.
i
ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE CIENCIAS QUÍMICAS
El Tribunal de Trabajo de titulación experimental certifica que: El trabajo de investigación:

“EVALUACIÓN DEL COMPORTAMIENTO DE Aspergillus niger y Penicillium spp EN LA
DEGRADACIÓN DE BIOPLÁSTICO ELABORADO A PARTIR DE ALMIDÓN DE CÁSCARA
DE PLÁTANO”, de responsabilidad de la señorita egresada Marisol Alejandra Erazo Pérez, ha sido
prolijamente revisada por los Miembros del Tribunal del Trabajo de Titulación, quedando autorizada
su presentación.
FIRMA FECHA
Dra. Yolanda Dolores Díaz Heredia

DIRECTOR DEL TRABAJO
DE TITULACIÓN ___________________ ___________________
Ing. Carlos Alcibar Medina Serrano

MIEMBRO DEL TRIBUNAL ___________________ ___________________
ii
Yo, Marisol Alejandra Erazo Pérez, declaro que el trabajo aquí descrito es de mi autoría; que no ha
sido previamente presentado para ningún grado o calificación profesional; y, que he consultado las
referencias bibliográficas que se incluyen en este documento.
La Escuela Superior Politécnica de Chimborazo puede hacer uso de los derechos correspondientes a
este trabajo, según lo establecido por la Ley de Propiedad Intelectual, por su Reglamento y por la
normativa institucional vigente.
_____________________________
Marisol Alejandra Erazo Pérez
CI: 180419908-9
iii
DEDICATORIA
El presente trabajo investigativo lo dedico principalmente a Dios, por ser el inspirador y darme la
fuerza para continuar en este proceso y cumplir un sueño más.
A mis padres Silvia y Patricio, por su amor, trabajo y sacrificio en todos estos años, gracias a ustedes
he podido llegar hasta aquí y convertirme en lo que soy. Es un orgullo y privilegio ser su hija.
A mi hermano Marcos por ser apoyo fundamental en mi diario vivir y por todo el cariño brindado.
Marisol.
iv
AGRADECIMIENTO
Agradezco a Dios por bendecirme, por guiarme a lo largo de mi existencia, ser el apoyo y fortaleza
en aquellos momentos de dificultad y de debilidad.
A la Escuela Superior Politécnica de Chimborazo por abrirme sus puertas y acogerme con mucho
cariño a lo largo de estos años. Por brindarme una de las mejores experiencias de mi vida.
A la Dra. Yolanda Díaz por dirigir mi trabajo de titulación con paciencia y dedicación, al Ing. Carlos
Medina por brindar un gran aporte en la realización del mismo.
A todos aquellos que formaron parte de mi vida estudiantil y aportaron un granito de arena en esta
formación académica, amigos y profesores.
Marisol.
v
TABLA DE CONTENIDOS
RESUMEN………………………………………………………………………...…..…..…… xii
SUMMARY…………………………………………………………………………………...... xiii
INTRODUCCIÓN…………………………………………………………………………...… 1
CAPÍTULO I
1. MARCO TEÓRICO REFERENCIAL ...................................................................... 5

1.1. Antecedentes de la investigación ................................................................................ 5
1.2. Polímeros ...................................................................................................................... 6
1.2.1. Características de los polímeros ................................................................................... 6
1.2.2. Clasificación de los polímeros ....................................................................................... 7
1.2.3. Polímeros sintéticos ...................................................................................................... 7
1.2.4. Polímeros naturales ...................................................................................................... 8
1.2.5. Almidón ......................................................................................................................... 9
1.2.5.1. Maíz..............................................................................................................................10
1.2.5.2. Plátano .........................................................................................................................10
1.2.6. Bioplásticos ................................................................................................................. 11
1.2.6.1. Clasificación ................................................................................................................12
1.2.7. Biodegradación ........................................................................................................... 13
1.2.7.1. Tipos de biodegradación..............................................................................................13
1.2.8. Microorganismos ........................................................................................................ 13
1.2.8.1. Hongos .........................................................................................................................14
1.2.8.2. Hongos Filamentosos...................................................................................................15
1.2.8.3. Aspergillus niger ..........................................................................................................15
1.2.8.4. Penicillium spp.............................................................................................................16
vi
CAPÍTULO I I
2. MARCO METODOLÓGICO .................................................................................. 17

2.1. Metodología de la investigación ................................................................................ 17
2.1.1. Lugar de la investigación ............................................................................................ 17
2.1.2. Hipótesis y especificación de las variables ................................................................. 17
2.1.3. Tipo y diseño de la investigación ................................................................................ 18
2.1.4. Población de estudio ................................................................................................... 18
2.1.5. Tamaño de la muestra ................................................................................................ 18
2.1.6. Selección de la muestra .............................................................................................. 19
2.1.7. Técnicas de Recolección de Datos .............................................................................. 19
2.2. Procedimientos realizados en el estudio................................................................... 20
2.2.1. Proceso metodológico de Almidón de Plátano .......................................................... 20
2.2.2. Proceso metodológico del Bioplástico........................................................................ 20
2.2.3. Proceso metodológico de siembra Aspergillus niger y Penicillum spp con el
bioplástico elaborado................................................................................................................. 21
2.2.4. Medición de pH ........................................................................................................... 21
2.2.5. Prueba de Yodo ........................................................................................................... 22
2.2.6. Pruebas Gravimétricas ................................................................................................ 22
CAPÍTULO I I I
3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ............................................................................... 23

3.1. Análisis de resultados ................................................................................................ 23
3.2. Resultados de degradación del bioplástico con Penicillium spp............................. 23
3.2.1. Pruebas gravimétricas del bioplástico a los 30 días .................................................. 24
3.2.2. Porcentaje de degradación del bioplástico a los 30 días ........................................... 24
3.2.3. Prueba de pH del bioplástico a los 30 días ................................................................. 25
3.2.4. Prueba de lugol del bioplástico a los 30 días ............................................................. 25
vii
3.2.7. Variación de pH del bioplástico a los 60 días ............................................................. 28
3.3. Resultados de la degradación con Aspergillus niger ............................................... 29
3.3.3. Prueba de pH del bioplástico a los 30 días ................................................................. 30
3.3.4. Variación de pH a los 60 días ...................................................................................... 33
3.4. DISCUSIÓN ............................................................................................................... 34
CONCLUSIONES ..................................................................................................................... 35
RECOMENDACIONES ........................................................................................................... 36
BIBLIOGRAFÍA
ANEXOS
viii
INDICE DE TABLAS
Tabla 1-1 Clasificación de los polímeros ................................................................................... 7

Tabla 2-1 Ventajas y desventajas de los bioplásticos............................................................... 12
Tabla 1-3 Resultados de la degradación del bioplástico con Penicillium spp obtenidos a
los 30 días.................................................................................................................................... 23
Tabla 2-3 Resultados de la prueba de Lugol del bioplástico con Penicillium spp a los 30
días .............................................................................................................................................. 26
Tabla 3-3 Resultados de la degradación del bioplástico con Penicillium spp obtenidos a
los 60 días.................................................................................................................................... 26
Tabla 4- 3 Resultados de la prueba de Lugol del bioplástico con Penicillium spp a los 60
días .............................................................................................................................................. 28
Tabla 5-3 Resultados de la degradación del bioplástico con Aspergillus niger obtenidos a
los 30 días.................................................................................................................................... 29
Tabla 6-3 Resultados de la prueba de Lugol del bioplástico con Aspergillus niger a los 30
días .............................................................................................................................................. 31
Tabla 7-3 Resultados de la degradación del bioplástico con Aspergillus niger obtenidos a
los 60 días.................................................................................................................................... 31
Tabla 8-3 Resultados de la prueba de Lugol del bioplástico con Aspergillus niger a los 60
días .............................................................................................................................................. 33
ix
INDICE DE FIGURAS
Figura 1-1 Clasificación Biopolímeros ............................................................................................ 12

Figura 2-1 Características morfológicas Aspergillus ....................................................................... 16
Figura 3-1 Características morfológicas Penicillium spp. ............................................................... 16
x
INDICE DE GRÁFICOS
Gráfico 1-3 Pruebas Gravimétricas del bioplástico con Penicillium spp a los 30 días ........... 24
Gráfico 2-3 Porcentaje de degradación del bioplástico con Penicillium spp a los 30 días ..... 24
Gráfico 3-3 Resultados de pH del bioplástico con Penicillium spp a los 30 días ................... 25
Gráfico 4-3 Pruebas Gravimétricas del bioplástico con Penicillium spp a los 60 días .......... 26
Gráfico 5-3 Porcentaje de degradación del bioplástico con Penicillium spp a los 60 días ..... 27
Gráfico 6-3 Resultados de pH del bioplástico con Penicillium spp a los 60 días ................... 28
Gráfico 7-3 Pruebas Gravimétricas del bioplástico con Aspergillus niger a los 30 días......... 29
Gráfico 8-3 Porcentaje de degradación del bioplástico con Aspergillus niger a los 30 días... 30
Gráfico 9-3 Resultados de pH del bioplástico con Aspergillus niger a los 30 días................. 30
Gráfico 10-3 Pruebas Gravimétricas del bioplástico con Aspergillus niger a los 60 días......... 32
Gráfico 11-3 Porcentaje de degradación del bioplástico con Aspergillus niger a los 60 días... 32
Gráfico 12-3 Resultados de pH del bioplástico con Aspergillus niger a los 60 días................. 33
xi
RESUMEN
En el presente estudio se evaluó el comportamiento de Aspergillus niger y Penicillium spp en la

degradación de bioplástico elaborado a partir de almidón de cáscara de plátano a nivel de laboratorio.
El plástico es un material contaminante para la naturaleza y con un período de degradación largo,
generando un problema ambiental muy grave. En busca de una solución se han creado bioplásticos
que son de fácil degradación, pero con costos mayores a los polímeros existente. Se realizaron 20
unidades experimentales con el bioplástico más 2 unidades de control, incubadas a una temperatura
de 28 oC. Se hicieron pruebas gravimétricas, variación de pH y pruebas de lugol a los 30 y 60 días de
la fase experimental. Se determinó que la cepa Aspergillus niger tuvo mayor degradación del
bioplástico con 20 % y un pH final de 3,41. Por otro lado la mayor degradación registrada de
Penicillium spp fue 8 % con un pH final de 3,47. Los resultados obtenidos para las dos cepas, fueron
a los 60 días de la fase experimental. Por medio de la prueba de lugol en los bioplásticos se determinó
que aún existe la presencia de almidón, transcurrido el tiempo de experimentación, con lo cual se
concluye que la degradación puede continuar.
PALABRAS CLAVE: <BIOTECNOLOGÍA>, <DEGRADACIÓN>, <HONGO Aspergillus

niger>, < HONGO Penicillium spp>, <BIOPLÁSTICO>, <ALMIDÓN>
xii
SUMMARY
The present study evaluated the behavior of Aspergillus niger and Penicillum spp in the degradation
of bioplastic made from starch of banana peel at laboratory level. Plastic is a contaminating material
for nature and with a long degradation period, generating a very serious environmental problem. In
search of a solution, bioplastics have been created that are easily degradable, but with higher costs
than the existing polymers. 20 experimental units were made whit the bioplastic plus 2 control units,
incubated at a temperature of 28 oC. Gravimetric test, pH variation and lugol tests were made at 30
and 60 days of the experimental phase. It was determined that the Aspergillus niger strain had greater
degradation of the bioplastic with 20% and final pH of 3,41. On the other hand, the highest recorded
degradation of Penicillum spp was 8% with a final pH of 3,47. The results obtained by the two strains
were at 60 days of the experimental phase. By means of the lugol´s test in the bioplastics, it was
determined that there was still the presence of starch, after the time of experimentation, so that, it is
concluded that the degradation can continue.
KEY WORDS: <BIOTECNOLOGY>, <DEGRADATION>, <Aspergillus niger FUNGUS>,

<Penicillium spp FUNGUS>, <BIOPLASTIC>, <STARCH>
xiii
INTRODUCCIÓN
Identificación del Problema
La palabra plástico se refiere a ciertos tipos de materiales sintéticos obtenidos mediante fenómenos
de polimerización o multiplicación artificial de los átomos de carbono en largas cadenas moleculares
de compuestos orgánicos. En general, son derivados del petróleo, aunque algunos se pueden obtener
a partir de otras sustancias naturales. (Segura, Noguez y Espín 2007; p.361)
El aumento en la producción del plástico, así como su inadecuado manejo, se ha visto reflejado en
una mayor acumulación de este material en los mares del mundo. De acuerdo a estimaciones del
Programa de Naciones Unidades para el Medio Ambiente (PNUMA), cerca de ocho millones de
toneladas de residuos plásticos se vierten en los océanos cada año, lo que equivale a vaciar un camión
de basura cada minuto. (Programa Ambiental de las Naciones Unidades, 2018)
Al incorporarse el plástico a la vida cotidiana, una parte considerable de los desechos producidos
comenzó a acumularse en el ambiente, precisamente por la resistencia de los plásticos a la corrosión,
la intemperie y la degradación por microorganismos (biodegradación). Anualmente se producen
varios millones de toneladas de plásticos en el mundo. (Segura, Noguez y Espín 2007; p.361)
Una de las estrategias que se ha venido utilizando para deshacerse de los plásticos derivados del
petróleo es la incineración, este proceso es altamente contaminante y causa efectos negativos en el
ambiente, tales como el incremento de CO2 en la atmósfera y la liberación de compuestos químicos
muy peligrosos, como las dioxinas, el cloruro y el cianuro de hidrógeno. (Segura, Noguez y Espín 2007;
p.362)
La problemática generada por el uso indiscriminado de plásticos sintéticos y su persistencia en el

ambiente ha estimulado la investigación para el desarrollo de nuevos materiales y métodos de
producción que permitan generar plásticos que presenten las mismas propiedades pero que tengan un
periodo de degradación más corto. Se han desarrollado cuatro tipos de plásticos degradables: los
fotodegradables, los semi-biodegradables, los biodegradables sintéticos y los completamente
biodegradables naturales. (Segura, Noguez y Espín 2007; p.362)
1
El Plátano al ser una fruta muy utilizada en la vida cotidiana de las personas y ser una fruta común
en nuestro país tiene una gran producción de desechos más aun en las industrias alimenticias que
utilizan este para la fabricación de sus productos que podrían ser reutilizados en vez desecharlos a la
basura.
El plátano en Ecuador es considerado un cultivo de creciente importancia socioeconómica, pues este

país ocupa el cuarto lugar como productor de esta fruta a nivel mundial, con una producción anual de
7 931 000 toneladas.(Armendáriz, Landazuri y Taco, 2016; p.320)
La mayoría de la producción del banano del Ecuador, se destina básicamente a la exportación, el

promedio anual que se vende al exterior es del 80% del total de la producción. Es por eso que Ecuador
es considerado el primer exportador y cuarto productor de banano del mundo. Un 3,5% se destina al
consumo humano interno; otro 3,5% al consumo animal y el 3% para la industria. Existe un 10% de
volumen de biomasa considerada como desperdicio, que equivale a 662.260,852 toneladas anuales.
(Macías, 2010; p.1). La cantidad de almidón contenida en la cáscara de plátano es aproximadamente de
un 9% de su peso.
Por tal razón es necesario formularse la pregunta central ¿Existe degradación del bioplástico
elaborado a partir de cáscara de plátano con microorganismos propios del ecosistema?
2
Justificación
Los bioplásticos se pueden elaborar a partir de cultivos de poliésteres microbianos o de almidón,

celulosa. Pero la base de la elaboración del bioplástico se ha centralizado en el uso del almidón como
materia prima, debido a su alta disponibilidad, bajo costo, biodegradable y a que es económicamente
competitivo con el petróleo (Chariguamán, 2015; p.1)
El bioplástico, fabricado a partir de almidón de plátano comparte las características con los elaborados
a través de derivados de petróleo. La mayor diferencia entre el plástico que actualmente se fabrica y
el producido a partir de almidón, es que, el segundo es completamente biodegradable y no tóxico, una
vez degradado puede usarse incluso como material de compostaje (abono). Esta ventaja proviene,
precisamente, en el origen vegetal de la materia prima, lo que reduce nuestra dependencia del
petróleo, que desde décadas domina nuestra sociedad. (Castillo et al. 2015; p. 35)
En el presente se elaboró un bioplástico a partir de cáscara de plátano y se evaluó la degradación del

mismo con Aspergillus niger y Penicillium spp, se analizó la capacidad degradativa de las 2 cepas en
estudio. Un bioplástico al ser elaborado con polímeros naturales como almidón tiene una degradación
mucho más rápida que los plásticos elaborados de petróleo, ayudando a que el tiempo de degradación
de un bioplástico utilizado a diario sea mucho menor, al utilizar las cáscaras de plátano para la
elaboración de éste, es una alternativa viable para la utilización de este producto y convirtiéndole en
algo útil para la sociedad aparte de que es de fácil degradación.
Aspergillus niger y Penicillium spp al tener amilasas y poder descomponer almidones crece en
material en descomposición, por lo tanto del almidón de la cáscara de plátano obtiene su fuente de
carbono y energía y degrada el bioplástico obtenido. Esta sería una alternativa viable a la problemática
actual del mundo ya que su tiempo de degradación en el ambiente sería relativamente rápido. Se
evaluó la degradación de este bioplástico con Aspergillus niger y Penicillium spp, determinando el
porcentaje de degradación.
3
OBJETIVOS
Objetivo General
Evaluar el comportamiento de Aspergillus niger y Penicillium spp en la degradación de bioplástico

elaborado a partir de almidón de cáscara de plátano a nivel de laboratorio.
Objetivos Específicos
Elaborar un bioplástico a partir de la cáscara de Plátano a nivel de laboratorio.
Evaluar la degradación del biopolímero aplicando técnicas gravimétricas, análisis de pruebas de

Yodo, comparación de pH y verificación el porcentaje de degradación de las unidades experimentales.
Comparar la degradación de las cepas microbianas en estudio.
4
CAPITULO I
1. MARCO TEÓRICO REFERENCIAL
1.1. Antecedentes de la investigación
Antes de crearse los polímeros, la madre naturaleza era la única y exclusiva fuente de materiales con
que el hombre contaba para la realización de sus herramientas, útiles y objetos de uso cotidiano. Las
propiedades que ofrecían las piedras, las maderas o los metales no satisfacían todas las demandas
existentes así que, el hombre en su innato afán de investigación y búsqueda comenzó a aplicar
sustancias que suplieran estas carencias; se manipulan los polímeros. (Garcia S. , 2009)
En la investigación “Evaluación, caracterización y optimización de un bioplástico a partir de la

combinación de almidón de maíz, yuca y glicerol en sus propiedades físicas y de barrera” El almidón
ha sido empleado en los últimos años por su capacidad para formar películas, a pesar de que pueden
actuar como barreras efectivas al transporte de gases (O2 y CO2), presentan elevada permeabilidad
al vapor de agua. Por lo que esta investigación se realizó con el fin de elaborar un bioplástico
combinando almidón de maíz, yuca y glicerol por el método casting, y evaluar su efecto en las
propiedades físicas y de barrera. Se utilizó la metodología superficie respuesta definiendo como
variables independientes la concentración de almidón de maíz respecto al almidón de yuca y
porcentaje de glicerol. Las variables dependientes o respuesta: espesura, permeabilidad al vapor de
agua, solubilidad en agua, diferencia de color, opacidad, perforación y elongación. Para las unidades
experimentales se establecieron 4 puntos factoriales, 4 axiales y 5 repeticiones de un punto central
para compararse contra una unidad control. (Muñoz, 2014)
En el artículo “Obtención de un polímero biodegradable a partir de almidón de maíz” (Garcia V. , 2015)

se plantea un método de obtención (a escala de laboratorio) de un bioplástico a partir de almidón de
maíz, que es un recurso natural renovable. Los plásticos biodegradables ofrecen una serie de ventajas
cuando se comparan con los plásticos convencionales. Estos son completamente degradados en
compuestos que no dañan el medio ambiente: agua, dióxido de carbono y humus. Tal y como se
comprobó en la parte experimental. (García, 2015)
5
En la Investigación “Optimización de las propiedades mecánicas de bioplásticos sintetizados a partir
de almidón” se elaboró un biopolímero a partir de almidón de maíz. El almidón de maíz se mezcló
con agua, modificadores químicos como el hidróxido de sodio (NaOH) y ácido clorhídrico (HCl) y
glicerina que actúa como plastificante. Se utilizó un diseño de experimentos con quince variables
donde se manipularon la cantidad de glicerina y el valor de pH, realizándose cinco repeticiones de
cada experimento. Posteriormente, se estudió la influencia de estas variables sobre las propiedades
mecánicas de los biopolímeros elaborados. Se analizaron las siguientes propiedades mecánicas:
módulo de elasticidad [MPa], esfuerzo último [MPa] y elongación [%]. Finalmente, se realizó una
comparación entre las propiedades mecánicas de los bioplásticos y las propiedades mecánicas de tres
diferentes plásticos derivados de petróleo.(Narváez, 2016)
1.2. Polímeros
Los polímeros son macromoléculas constituidas por moléculas pequeñas que se repiten a lo largo de
una misma cadena, en el cuerpo humano se encuentra gran cantidad de polímeros naturales como son
ADN, ARN, proteínas e hidratos de carbono. (Seymour & Carraher, 2002: pp. 181-183)
Según Martínez (1983), menciona que los polímeros son macromoléculas formadas por monómeros
mediante enlaces covalentes, dependiendo de la disposición espacial de las unidades estructurales,
los polímeros pueden ser lineales o ramificados. La mayoría de polímeros son orgánicos están
formados por átomos de carbono, mientras que los polímeros sintéticos están formados por átomos
de silicio. (Martínez, 1983: pp. 18-24)
En la naturaleza pueden encontrarse un sin número de polímeros, mismo que se integran por una
reacción química conocida como polimerización, tanto polímeros naturales como sintéticos sufren
este agrupamiento que da como resultado moléculas lineales o ramificadas con elevados pesos
moleculares. (Miranda, 2015:p. 4)
1.2.1. Características de los polímeros
Los polímeros poseen un sin número de características, que vuelven a estas macromoléculas
interesantes. (Gonzalez, 2015. pp: 65-67)
6
• Estabilidad térmica
• Solubilidad
• Densidad baja
• Reactividad química baja
• Dúctiles
• Punto de fusión bajos
• Aislantes térmicos y eléctricos
• Maleabilidad (Pontificia Universidad Católica de Perú 2011)
1.2.2. Clasificación de los polímeros
Los polímeros pueden clasificarse por diferentes criterios.
Tabla 1-1 Clasificación de los polímeros
Detalle Clasificación
• Homopolímeros
Composición
• Heteropolímeros
• Naturales
Origen
• Sintéticos
Polímeros • Lineales
• Ramificados
Estructura
• Entrecruzados
• Reticulados
• Termoplásticos
Comportamiento frente al calor
• Termoestables
Fuente: Yurkanis, 2008. Polímeros sintéticos
Realizado por: Marisol Erazo, 2018
1.2.3. Polímeros sintéticos
Son macromoléculas que se obtienen en el laboratorio o a nivel industrial a partir de sustancias que
pueden encontrarse en la naturaleza, son creados por el hombre para desempeñar funciones
específicas a nivel industrial y además poseen características particulares. (Textos Científicos 2013)
7
También se los considera como compuestos químicos producidos por la transformación química del
petróleo y el carbón, gran parte de éstos se los puede encontrar en polvo seco, compuestos por
poliacrilamida, éstos a su vez son usados en gran parte como floculantes para la remediación de aguas.
Los monómeros que se utilizan para realizar estos polímeros deben ser sometidos a rigurosos
controles de calidad, debido a que algunos presentan niveles de toxicidad altos, lo que evita que todos
los productos fabricados especialmente para la remediación y envasados de agua sean utilizados por
la población. (Kirchmer., Arboleda & Castro., 2011: pp. 3-4)
Este tipo de polímeros son utilizados alrededor de todo el mundo, debido a que representan grandes
ventajas tanto a nivel industrial como para el uso cotidiano, sin embargo la lenta degradación
representa una gran desventaja pues, representan grandes problemas ambientales. Entre las ventajas
se pueden mencionar:
- Bajos costes de producción

- Acabados superficiales buenos
- Durabilidad
- Versatilidad en los procesos de producción (Textos Científicos 2013)
1.2.4. Polímeros naturales
Son moléculas que se crean por reacciones bioquímicas que se generan dentro de los organismos
vivos, la mayoría de estas moléculas no tienen una composición química definida, pues se encuentran
constituidos por varios tipos de polisacáridos como proteínas, almidón, celulosa entre otros. (Kirchmer.,
Arboleda., & Castro., 2011: p. 2)
En 1920, Hermann Staudiger, químico alemán, emplea el término de macromolécula para definir a
los materiales que son sintetizados en el interior de los seres vivos, entre los principales están el
ámbar, el hasta natural, el caucho, la seda y la laca (Mondragor, 2011: pp.1-3) (García, 2009: pp 10-15)
En los últimos diez años, las industrias han modificado la creación de productos plásticos de baja
densidad y los han combinado con biopolímeros o biomateriales que faciliten la descomposición de
los productos, entre estas materias primas se encuentra.
8
- Polímeros extraídos de la biomasa
- Polímeros producidos por microorganismos
- Monómeros derivados de la biomasa (Ballesteros, 2014: pp 5-10)
1.2.5. Almidón
Es un polisacárido que junto a la celulosa representa una gran reserva de carbohidratos del mundo,
constituye la mayor parte de hidratos de carbono digestibles y es una macromolécula que se forma
por la unión repetitiva de glucosas que a su vez forman dos tipos de cadenas, una cadena lineal de
amilosa y una cadena ramificada de amilopectina; la cantidad de estos polisacáridos varía según la
procedencia del almidón. (Gallur, 2010: pp.16-19) (Mirel, 2001: pp 2-5)
Todos los almidones existentes pueden ser utilizados como adhesivos, enturbiantes, estabilizantes de
espumas, espesante, gelificante, humectantes, tanto en la industria alimentaria como en la
farmacéutica. El almidón es un polisacárido que puede ser degradado por enzimas denominadas
amilasas, éstas se producen en las glándulas salivares y el páncreas de los mamíferos. (Hermida, 2011:
p.63-66) (Mirel, 2001: pp 2-5)
El almidón forma parte importante en la composición de algunos productos, se encuentra en

porcentajes variables dependiendo del tipo y la procedencia del producto agrícola, mientras que en
las leguminosas forma parte del 25 al 50%, en los tubérculos abarca del 60 al 90% y en las frutas que
no han alcanzado su etapa de madurez como el plátano y el mango verde el contenido de almidón es
de 70% en base seca. (Flores-Gorosquera, et. al., 2004: p.86)
Propiedades funcionales del almidón
Las propiedades dependen de la morfología
- Gelatinización. Los gránulos de almidón son insolubles en agua a temperatura ambiente,

pero puede absorber agua cuando existe calentamiento del agua al que es sometido, esto se
debe a que poseen zonas intermicelares que pueden absorber agua, a medida que se aumenta
la temperatura el almidón empieza a aumentar su volumen.
9
Cuando el almidón alcanza su volumen máximo el gránulo no puede retener más agua y la
conformación de la amilosa y amilopectina se ve afectada, pues, se dispersan en la disolución,
es decir, la gelatinización es el paso de un estado ordenado a uno desordenado cuando existe
la presencia de calor. (Guerrero, 2014: pp 10-13)
- Desestructuración. Es la insolubilización y precipitación de las moléculas de amilosa, es

decir, la transformación de las estructuras semicristalinas del almidón en una matriz amorfa
debido al rompimiento de los puentes de hidrógeno, este fenómeno puede presentarse por el
aumento de temperatura al que se encuentra sometido el almidón. (A. García, 2015: pp.16-17)
1.2.5.1. Maíz
El maíz es una de las plantas más cultivadas a nivel mundial por ser una de las plantas más fáciles de
domesticar y que ha ido evolucionando conforme al paso de los años, está compuesto por anticianinas,
antioxidantes naturales que llaman la atención en el campo médico, por lo que investigadores tratan
de aprovechar sus cualidades para crear nuevos productos.(Agama-Acevedo et al., 2005: pp. 419-421)
La cantidad de almidón presente en el maíz oscila del 50 al 70% del peso seco del cereal, y solo en el
endospermo se encuentra del 86 al 89% de almidón, estos porcentajes representan una ventaja para
la obtención de este polisacárido, sin embargo en la actualidad la FAO y los científicos buscan nuevas
alternativas para la obtención de almidón, pues el maíz en los países sudamericanos forman parte
esencial de la alimentación y anualmente se utilizan alrededor de 60 millones de toneladas para
obtener almidón. (Agama-Acevedo et al., 2005: p. 419)(Calvo 2009)
1.2.5.2. Plátano
Musa paradisíaca L. se originó en Asia hace 650 años atrás, pertenece a la familia de las Musáceas,
siendo las más reconocidas la M.cavendish y la M. paradisíaca, pues son comestibles cuando están
crudos y son plátanos que necesitan cocción respectivamente. (Espinosa, 2008: p.18-20)
Es uno de los cultivos más importantes a nivel mundial y ha sido considerado como un producto
básico y de exportación, en las regiones húmedas es el principal cultivo para la alimentación. De
acuerdo con FAO (2017), se estimó que en el período 2015-2016 la producción de plátano en Ecuador
10
fue de 7 millones de toneladas métricas. Según Zhang et al. (2005), esta fruta es una importante fuente
de empleo de los países en desarrollo. (Espinosa, 2008: p.21)
El contenido de almidón que se encuentra en esta fruta posee características diferentes al almidón de
productos convencionales como la papa, maíz y el arroz, esto se debe a que posee características de
digestibilidad y fisicoquímicas únicas, además que los investigadores están enfocados en la estructura
del gránulo pues, su capacidad antioxidante podría ser aplicada para la fabricación de productos
convencionales. (Hongxia et al. 2017)
El plátano inmaduro, plátano verde, contiene una gran cantidad de almidón que puede ser utilizado
potencialmente, tanto en la industria como en productos alimenticios, a medida que la fruta va
madurando, el almidón empieza a hidrolizarse en moléculas de glucosa, sin embargo en esta fruta, la
hidrólisis es parcial, por lo que se puede encontrar pequeñas cantidades de almidón en el plátano
maduro. (Larry & Dominique, 2016: p. 1343)
Importancia del almidón del plátano.
En las regiones cálidas del Caribe y Latinoamérica, se genera gran cantidad de residuos de esta fruta,
por lo que la búsqueda para lograr el desarrollo de nuevos materiales a partir de biomateriales
beneficiarán para disminuir el deterioro ambiental que el planeta ha sufrido en los últimos años,
además de lograr un aprovechamiento de los residuos generados, lo que permitirá reducir costes de
producción y generación de trabajo en los diferentes países en desarrollo. (Lambis et al., 2016: p. 63)
1.2.6. Bioplásticos
Los bioplásticos aparecen en el mercado en las últimas décadas, son plásticos fabricados
completamente con recursos naturales, aparecen como una solución para reducir el impacto ambiental
que se ha generado en la sociedad, pues, los bioplásticos reducen las emisiones atmosféricas porque
el CO2 que estos productos liberan, provienen de la biomasa, por lo que el carbono desprendido
regresa a su ciclo de vida natural (Ballesteros 2014), (Thielen, 2014: p.5)
Según ECOEMBES (2009), define a los bioplásticos, como plásticos con certificación de
biodegradabilidad, que se originaron por el uso de materias orgánicas, tanto animales y vegetales, que
además cumplen con la característica de ser renovables.
11
Actualmente, los países apuestan al desarrollo sostenible mediante el uso de los bioplásticos, se ha
demostrado que con el uso de biomateriales las emisiones de dióxido de carbono se reducen entre 0.8
y 3.2 toneladas comparadas con las emisiones producidas en la producción del plástico convencional,
además presenta ventajas que se mencionan en la tabla 2-1. (Castillo et al., 2015: p.35)
Tabla 2-1 Ventajas y desventajas de los bioplásticos
VENTAJAS DESVENTAJAS
No poseen sustancias químicas tóxicas para el ambiente Costo de producción más altos que los convencionales
Para reciclar no se los debe mezclar con el plástico
Son reciclables y pueden utilizarse como abonos
convencional
Se necesita menor consumo energético para su fabricación No poseen resistencia elevada al calor
No altera las propiedades de las comidas cuando son
usados como envases
Descomposición más rápida que el plástico convencional
Fuente: (Ecoinventos 2016). Bioplásticos. La única alternativa para el futuro
1.2.6.1. Clasificación
Biopolímeros
Plásticos
Bioplásticos Biodegradables de
origen petroquímico
Sintetizados a partir
Obtenidos a partir de Producidos por
de monómeros de
biomasa microorganismos
biomasa
Polisacáridos
Proteínas Ácido Láctico Polihidroxialcanoatos
Lípidos
Figura 1-1 Clasificación Biopolímeros

Fuente: (ZEAplast 2012). Tipos de Bioplásticos
12
1.2.7. Biodegradación
La International Standard Organization define a la biodegradación como la transformación de

macromoléculas a moléculas más simples por acción de microorganismos, tales como bacterias,
hongos, algas y/o protozoos. (Hermida, 2011: p.32)
Es la descomposición de sustratos complejos a moléculas sencillas, agua, dióxido de carbono y

moléculas simples, por medio de vías metabólicas usadas por los microorganismos, para que las
moléculas obtenidas puedan ser asimiladas de manera más sencilla por el medio ambiente.
El grado de degradación de estos productos puede ser total o parcial, esto depende de las condiciones
ambientales a las que se encuentre sometido el bioplástico, se debe considerar, la temperatura,
humedad, composición microbiana, sustrato a utilizarse, pH y la cantidad de oxígeno disponible.
(GreenPeace, 2009:p.1)
1.2.7.1. Tipos de biodegradación
- Biodegradación aeróbica.
Los organismos responsables de este tipo de degradación utilizan el oxígeno del aire para
oxidar los compuestos orgánicos, como productos resultantes se producen dióxido de
carbono, agua, minerales y biomasa. (GreenPeace, 2009:p.1-2)
- Biodegradación anaeróbica
Es la degradación realizada por microorganismos en ausencia total de oxígeno, como

resultado se obtienen biogás, minerales y biomasa (GreenPeace, 2009:p.1-2)
1.2.8. Microorganismos
Son organismos que se encuentran en toda la naturaleza, se han reportado algunas algas, bacterias,
protozoos y hongos como degradadores de algunos plásticos, siempre y cuando el ambiente brinde
las condiciones favorables para que realicen esta acción.
13
1.2.8.1. Hongos
Son organismos quimiótrofos y heterótrofos, presentan estructuras complejas y son de mayor tamaño
que las bacterias. Poseen cromosomas que se encuentran alojados en el núcleo, se caracterizan por
reproducirse de manera sexual y asexual mediante estructuras específicas como las esporas y
conidios.(García-Morato & Sánchez, 2011: p.1) (Caballero & Cruz, 2007: p.1)
Los hongos pertenecen al Reino Eukarya, en la antigüedad se creía que estos organismos pertenecían
al reino Plantae, pues las células vegetales y la de los hongos comparten algunas semejanzas, pero la
composición en la pared celular y la ausencia de cloroplastos y clorofila, son marcadas diferencias
que permiten que los hongos se encuentren en un reino diferente al vegetal. (Aristegui, 2002: pp.1-4)
La producción de polisacáridos permite que los hongos puedan colonizar materiales de una manera
rápida y eficiente, algunos hongos excretan proteínas que forman puentes de hidrógeno y permiten
ligarse a las superficies de materiales plásticos para su posterior descomposición.
Los hongos presentan una característica importante, pueden vivir con bajas cantidades de nutrientes
presentes en el medio y a temperatura ambiente, además la distribución de las hifas y su capacidad
de penetración hacen que estos organismos cumplan un rol fundamental en el reciclaje del carbono.
(Acuña, 2017: p.21)
Por las característica mencionadas, El crecimiento de hongos en el laboratorio resulta sencillo, pues
son organismos que crecen en la mayoría de medios de cultivo que contengan fuente de carbono y
nitrógeno, la mayoría de hongos son aerobios, crecen en ambientes con temperaturas que oscilan entre
10°C y 40°C y en medios con pH que varía desde 2 a 9, es decir, son organismos poco exigentes.
(Aristegui, 2002: p.4)
La importancia de estos organismos en el medio ambiente radica en la función degradadora de materia

orgánica, es decir, transforman restos de alimentos, animales y plantas, en sales minerales y gases
que al ser devueltos a la naturaleza, pueden ser utilizados por los seres autótrofos como fuente de
alimento y energía. (Caballero & Cruz, 2007: p.1)
Estos organismos pueden presentar diferentes morfologías.

- Filamentosa.
- Levaduriforme
14
1.2.8.2. Hongos Filamentosos
Son hongos conocidos también como mohos, son microorganismos aerobios facultativos, que se
reproducen por esporas de manera sexual o asexualmente, su pared celular está compuesta por un
polisacárido rígido, quitina. Estos organismos deben absorber la comida para la alimentarse debido a
que no pueden fagocitar los alimentos como lo hacen las bacterias. (Arias & Piñeros, 2008: pp.14-16)
En su estructura poseen un micelio que está formado por hifas, éstas pueden producir células
reproductoras móviles, tanto sexuales como asexuales dependiendo de la diferenciación que exista en
las hifas de crecimiento. Las esporas, son cuerpos resistentes que se forman durante la fase de latencia
del hongo. (Arias & Piñeros, 2008: p.14)
Los hongos filamentosos pueden vivir en condiciones extremas, pueden crecer en medios con altas
concentraciones de azúcares, pues no son sensibles a la presión osmótica que se puede ejercer y
pueden resistir condiciones altas de acidez. (Arias & Piñeros, 2008: p.15)
1.2.8.3. Aspergillus niger
Es un hongo perteneciente al phylum Ascomycota, ubicuo en el ambiente y es considerado como

patógeno oportunista para los seres humanos, sin embargo es mundialmente utilizado como un
organismo fermentador, puede producir ácido cítrico de una manera eficiente, lo que implica
reducción de costos en la industria. (Baker, 2006)
Es un organismo que se encuentra comúnmente en los suelos agrícolas, cumple un rol fundamental
en el ciclo del carbono, además posee una amplia gama de enzimas hidrolíticas y oxidativas que
ayudan en la degradación de la lignocelulosa. (Baker, 2006)
Aspergillus niger, tiene apariencia filamentosa, se lo puede encontrar creciendo en algunos vegetales,
en la etapa de adaptación son de color blanco, pero al llegar a la fase estacionaria se vuelven de color
verde negruzco, el tiempo de crecimiento de este hongo es de 72 horas.(Múnera, 2014: pp.1-5)
15
Figura 2-1 Características morfológicas Aspergillus
Fuente: Pitt 1998, citado por Arias & Piñeros, 2008
1.2.8.4. Penicillium spp.
Son mohos comunes que se puede encontrar en productos gramíneos, frutas, leche y suelos, su
importancia radica en la producción de toxinas que pueden causar el deterioro de los compuestos
orgánicos en los que crecen, por lo que atraen la atención para ser estudiados (Narváez, 2016: p.61)
Es un hongo ubicuo de crecimiento rápido, las colonias son de color blanco algodonoso en la etapa
inicial, tornándose de color dependiendo de la especie, en estado de maduración tienen un aspecto
polvoriento debido a la presencia excesiva de esporas. Su principal característica es la presencia de
hifas delgadas y septadas en el micelio. (Arias & Piñeros, 2008:p.14)
Se caracteriza principalmente porque es el hongo productor de penicilina además de roquefortina y

meleagrina, sus conidios se disponen en forma de pincel, crecen en temperaturas comprendidas entre
23°C y 37°C, se encuentra en el polvo doméstico y más comúnmente en edificios húmedos causando
deterioro en los lugares húmedos. (Thom, 2002)
Figura 3-1 Características morfológicas Penicillium spp.

Fuente: Pitt 1998, citado por Arias & Piñeros, 2008}
16
CAPITULO II
2. MARCO METODOLÓGICO
2.1. Metodología de la investigación
2.1.1. Lugar de la investigación
Laboratorio de Microbiología, Escuela Superior Politécnica de Chimborazo ESPOCH, Cantón

Riobamba, Provincia de Chimborazo.
2.1.2. Hipótesis y especificación de las variables
Hipótesis general
La cepa microbiana Aspergillus niger degrada en mayor porcentaje que Penicillium spp el bioplástico
elaborado a partir de almidón de plátano.
Variables
• Variable independiente
Degradación de bioplástico elaborado a partir del almidón de cáscara de plátano.
• Variable dependiente
Porcentaje de degradación del bioplástico.
Aspergillus niger y Penicillium spp.
• Variables Intervinientes
Prueba de Yodo, pH, Peso.
17
2.1.3. Tipo y diseño de la investigación
Investigación experimental
Se implantó un ensayo experimental, para poder cumplir con el propósito, a fin de determinar la
relación entre las variables establecidas.
Investigación Documentada
Para la presente investigación se analizó la información escrita relacionada al efecto de degradación

del Aspergillus niger y Penicillium spp en almidones y en las problemáticas de los plásticos a nivel
ambiental, técnicas de siembra de microorganismos, alternativas de degradación de bioplástico
mediante documentos técnicos investigativos con la ayuda de información secundaria que consta en
libros, revistas científicas, tesis de grado y documentos en general, que permitirá establecer
diferencias del estado actual, respecto al problema de estudio.
Diseño de la investigación
El diseño de la investigación fue de tipo experimental aleatoria simple, se tomó al alzar las cajas para
la siembra de las diferentes cepas, se controló el crecimiento y la degradación del bioplástico
elaborado a base de cáscara de plátano a partir de las 2 cepas en estudio, en condiciones de óptimo
crecimiento.
2.1.4. Población de estudio
Bioplástico elaborado a partir de cáscara de plátano.
2.1.5. Tamaño de la muestra
22 unidades experimentales divididas de la siguiente manera: 10 cajas Petri con Agar Sabouraud +
Aspergillus niger + Bioplástico y 10 cajas Petri con Agar Sabouraud + Penicillium spp + Bioplástico,
y una caja de cada microorganismo sin bioplástico para ser la unidad de control. La cantidad de
Bioplástico que se agregó a cada unidad experimental fue de aproximadamente 1 gramo.
18
2.1.6. Selección de la muestra
Las cepas en estudio fueron obtenidas de los laboratorios de la ESPOCH y el bioplástico fue elaborado
a partir del almidón de la cáscara de Plátano.
2.1.7. Técnicas de Recolección de Datos
Se utilizaron algunos métodos y técnicas experimentales para poder observar la degradación del
bioplástico elaborado.
Técnica experimental
Los datos iniciales y finales del bioplástico se recogieron en 3 etapas, al inicio, a los 30 días y 60 días
del experimento:
Elaborado el bioplástico a partir del almidón de la cáscara del plátano, transcurrido 72 horas en la
estufa para eliminar la mayor humedad posible y que así tome consistencia, se midió el pH, se realizó
la prueba de yodo para comprobar que este tenga almidón en su composición y se pesó, se obtuvo 20
muestras de bioplástico para las diferentes unidades experimentales.
Transcurridos 30 y 60 días de haber colocado el bioplástico en las unidades experimentales se

procedió a retirar y esterilizar, se colocó 72 horas en la estufa para eliminar la mayor humedad posible
y se volvió a medir el pH de cada bioplástico, se realizó la prueba de yodo y se pesó cada uno de ellos
para observar la degradación que se obtuvo.
Técnica de observación
La técnica que se utilizó durante la fase de investigación fue de observación directa en el laboratorio.
En los 30 y 60 días que duró la fase experimental, se observó cada 3 días el crecimiento de los hongos
con el bioplástico y la unidad de control en la incubadora, se fotografió para evidenciar y observar el
crecimiento.
19
Se observó cada 3 días como el hongo se adhirió al bioplástico que se lo sembró esterilizado y empezó
a obtener su fuente de carbono y energía de éste, al transcurrir el tiempo de la investigación el hongo
invadió todo el Bioplástico.
2.2. Procedimientos realizados en el estudio
2.2.1. Proceso metodológico de Almidón de Plátano
Elaboración de Almidón de Plátano
Lavar los plátanos con abundante agua para eliminar cualquier impureza que contengan. Extraer el
jugo de las naranjas agrias para realizar una solución antipardeamiento que ayuda a prevenir la
oxidación enzimática del almidón. Se realizan cortes verticales a lo largo de la fruta, para desprender
la cáscara del plátano. Al tener la cáscara se hace la inmersión inmediata en la solución
antipardeamiento. Se rayan las cáscaras (el endocarpio) para extraer lo que queda del plátano en tiras,
que es de donde se obtendrá posteriormente el almidón. A medida que se obtienen las tiras de almidón
de las cáscaras, se van colocando en parrillas con calor, para ser deshidratadas. Se coloca en la estufa
y se dejan ahí hasta que estas se deshidraten totalmente. Una vez deshidratadas, las tiras se muelen,
para obtener una especie de polvillo y se tamiza para obtener una granulometría homogénea. Al final
se coloca unas gotas de lugol para constatar la presencia de almidón.
2.2.2. Proceso metodológico del Bioplástico.
Elaboración de Bioplástico
En un vaso de precipitación colocar 6 ml de ácido acético, 4 ml de glicerina, 12 ml de agua destilada.

Mezclar bien estos componentes y agregar 5 gr de almidón de plátano. Esta solución homogenizar
bien por 3 minutos con una barrilla hasta que no existan grumos. Llevar a un reverbero a intensidad
media hasta que este entre en punto de ebullición y controlar que no se formen grumos ni se queme
el bioplástico. Verter la mezcla en las Cajas Petri y repartir uniformemente.
20
Al terminar este proceso, para su secado llevar la Caja Petri con la mezcla a la estufa por
aproximadamente 72 horas. Pesar la cantidad de bioplástico obtenido. Realizar la prueba de Yodo
para verificar la presencia de almidón. Medir el pH del Bioplástico.
2.2.3. Proceso metodológico de siembra Aspergillus niger y Penicillium spp con el bioplástico
elaborado.
Metodología:
Obtener las cepas Aspergillus niger y Penicillium spp. Preparar en Cajas Petri el medio Agar
Sabouraud para el óptimo crecimiento de las cepas. Sembrar en la cámara de flujo laminar cada cepa
en el medio ya preparado, de cada siembra realizar diez repeticiones. Realizar una unidad de control
para cada cepa microbiana. Llevar a la incubadora a temperatura de 28 oC hasta que las cepas lleguen
a la fase estacionaria y poder proceder a sembrar el bioplástico. Llevar las cajas a la cámara de flujo
laminar y colocar aproximadamente 1 gramo de bioplástico elaborado a base de cáscara de plátano
en cada unidad experimental y realizar una unidad de control de cada cepa sin bioplástico. Llevar a
la incubadora las unidades experimentales a la temperatura inicial y observar el crecimiento de las
cepas en estudio obteniendo su fuente de carbono y energía del bioplástico sembrado previamente.
A los 30 y 60 días de la investigación, llevar a la cámara de flujo las cajas correspondientes y retirar
cuidadosamente el bioplástico sembrado de las unidades experimentales. Cada uno de los bioplásticos
llevarlos al autoclave para su esterilización y luego a la estufa por 72 horas, para que si existe humedad
esta se elimine. Realizar la prueba de yodo, medir el pH y pesar los bioplásticos de las diferentes
unidades experimentales y realizar una comparación.
2.2.4. Medición de pH
Se toma una pequeña porción del bioplástico que fue elaborado y se lo diluye en agua destilada
agitando constantemente por 5 minutos y se lo lleva al pHmetro para medir el pH inicial.
Los bioplástico de las diferentes unidades experimentales al finalizar el experimento, al haber pasado
por el autoclave para su esterilización y por la estufa, se las tritura en un mortero y se diluye en agua
destilada, se agita por 5 minutos de manera constante para que la solución sea homogénea y se mide
el pH con el pHmetro. Se compara los valores iniciales con los finales y se observa la variación
existente en cada unidad experimental.
21
2.2.5. Prueba de Yodo
Se toma una pequeña porción del bioplástico elaborado ya seco, se le coloca una gota de tintura
de Yodo y esperamos 5 minutos. Al transcurrir este tiempo se observa si el bioplástico se torna
de color negro indica la existencia de almidón pero si este se no cambia de color este no existe.
Se toma una pequeña muestra del bioplástico de las diferentes unidades experimentales que ya
ha pasado por el autoclave y por la estufa, se coloca una gota de Yodo para observar si existe o
no almidón en su composición. Se compara los valores iniciales con los finales y se observa la
variación existente en cada unidad experimental.
2.2.6. Pruebas Gravimétricas
Al bioplástico elaborado se lo divide en 20 partes y se lo lleva a la balanza analítica, se pesa y

cada parte tenga un peso aproximado de 1 gramo para que este pueda ser sembrado dentro de las
cajas con las diferentes cepas.
Los bioplástico de las diferentes unidades experimentales ya al haber pasado por el autoclave y
por la estufa, se lo coloca uno por uno en la balanza analítica y se toma el peso. Se compara los
valores iniciales con los finales y se observa la variación existente en cada unidad experimental.
22
CAPITULO III
3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
3.1. Análisis de resultados
En este capítulo se va a analizar los datos y resultados obtenidos en la investigación, según la

metodología obtenida y los tiempos establecidos para el crecimiento de cada cepa, para realizar los
análisis respectivos de cada prueba realizada.
3.2. Resultados de degradación del bioplástico con Penicillium spp
Los resultados obtenidos de la degradación del bioplástico con la cepa Penicillium spp en las pruebas
gravimétricas, pH, porcentaje de degradación, prueba de lugol a los 30 y 60 días.
Tabla 1-3 Resultados de la degradación del bioplástico con Penicillium spp obtenidos a los 30 días.
U. Exp Peso Peso Degradación % Prueba lugol Prueba lugol pH pH

inicial Final Degradación inicial final Inicial Final
1 1,2058 1,1620 0,0438 4,38 si si 5,68 4,90
2 1,1992 1,1510 0,0482 4,82 si si 5,68 4,76
3 1,2145 1,1533 0,0612 6,12 si si 5,68 4,14
4 1,2049 1,1632 0,0417 4,17 si si 5,68 4,78
5 1,1868 1,1342 0,0526 5,26 si si 5,68 4,49
23
3.2.1. Pruebas gravimétricas del bioplástico a los 30 días
PESOS
Peso Inicial Peso Final
1,2145
1,2058
1,2049
1,1992
1,1868
1,1632
1,1620
1,1533
1,1510
1,1342
U.1 U.2 U.3 U.4 U.5
Gráfico 1-3 Pruebas Gravimétricas del bioplástico con Penicillium spp a los 30 días
En el Gráfico 1-3 se representa los pesos tomados en el bioplástico al inicio y a los 30 días, donde la
unidad experimental número 3 presenta una mayor degradación en el tiempo transcurrido, con una
diferencia de peso de 0,0612 gramos; la unidad experimental número 4 obtuvo la degradación más
baja con una diferencia de 0,0417 gramos. Todas las unidades experimentales fueron incubadas a una
temperatura de 28 grados Celsius. La primera semana se observó que el hongo empezó a invadir el
bioplástico y cada 3 días se controló su crecimiento hasta llegar al tiempo previsto.
3.2.2. Porcentaje de degradación del bioplástico a los 30 días
DEGRADACIÓN
Porcentaje de Degradación
6,12
5,26
4,82
4,38
4,17
U.1 U.2 U.3 U.4 U.5
Gráfico 2-3 Porcentaje de degradación del bioplástico con Penicillium spp a los 30 días.
24
En el Gráfico 2-3 se representa los porcentajes de degradación a los 30 días, teniendo una mayor
degradación en la unidad experimental número 3 con 6,12% y la unidad experimental número 4
presenta la menor degradación con 4,17%. El resto de las unidades experimentales oscilan en valores
parecidos en el intervalo dado.
3.2.3. Prueba de pH del bioplástico a los 30 días
PH
pHInicial pH Final
5,68
5,68
5,68
5,68
5,68
4,90
4,78
4,76
4,49
4,14
U.1 U.2 U.3 U.4 U.5
Gráfico 3-3 Resultados de pH del bioplástico con Penicillium spp a los 30 días.
En el Gráfico 3-3 se presenta la variación de pH existente a los 30 días de la fase experimental,

teniendo como pH final más bajo la unidad experimental número 3 con 4,14, ya que obtuvo la mayor
degradación en el tiempo establecido. El más alto se registró en la unidad experimental número 1 con
un pH de 4,90.
3.2.4. Prueba de lugol del bioplástico a los 30 días
En la tabla 2-3 se muestra los resultados obtenidos a los 30 días, dando positivo en todas las unidades
experimentales, esto nos indica que aún existe almidón en la composición del bioplástico.
25
Tabla 2-3 Resultados de la prueba de Lugol del bioplástico con Penicillium spp a los 30 días.
Unidad Experimental Prueba de lugol inicial Prueba de lugol a los 30 días

1 Si Si
2 Si Si
3 Si Si
4 Si Si
5 Si Si
En la siguiente tabla se muestra los resultados que se obtuvieron a los 60 días de la fase experimental
con la cepa Penicillium spp incubadas a 28 grados Celsius.
Tabla 3-3 Resultados de la degradación del bioplástico con Penicillium spp obtenidos a los 60 días.

6 1,0001 0,9421 0,0580 5,80 si si 5,68 4,71
7 1,2012 1,1485 0,0527 5,27 si si 5,68 4,48
8 1,1591 1,0769 0,0822 8,22 si si 5,68 3,47
9 1,3076 1,2542 0,0534 5,34 si si 5,68 4,92
10 1,1801 1,1175 0,0626 6,26 si si 5,68 4,03
PESOS
1,3076
1,2542
1,2012
1,1801
1,1591
1,1485
1,1175
1,0769
1,0001
0,9421
U.6 U.7 U.8 U.9 U.10
Gráfico 4-3 Pruebas Gravimétricas del bioplástico con Penicillium spp a los 60 días.
26
unidad experimental número 8 presenta una mayor degradación en el tiempo transcurrido con una
temperatura de 28 grados Celsius. La primera semana se observó que el hongo empezó a invadir el
bioplástico y cada 3 días se controló su crecimiento hasta llegar al final de la investigación.
PORCENTAJE DE DEGRADACIÓN
8,22
6,26
5,34
5,8
5,27
U.6 U.7 U.8 U.9 U.10
Gráfico 5-3 Porcentaje de degradación del bioplástico con Penicillium spp a los 60 días.
En el Gráfico 5-3 se representa los porcentajes de degradación a los 60 días, teniendo la mayor
similares.
27
3.2.7. Variación de pH del bioplástico a los 60 días.
PH
pH Inicial Ph Final
5,68
5,68
5,68
5,68
5,68
4,92
4,71
4,48
4,03
3,47
U.6 U.7 U.8 U.9 U.10
Gráfico 6-3 Resultados de pH del bioplástico con Penicillium spp a los 60 días.
En el Gráfico 6-3 se presenta la variación de pH a los 60 días de la fase experimental, teniendo como
pH final más bajo la unidad experimental número 8 con 3,47, ya que obtuvo la mayor degradación en
el tiempo establecido. El más alto se registró en la unidad experimental número 9 con un pH de 4,92.
3.2.8. Prueba de lugol del bioplástico a los 60 días.

En la tabla 4-3 se muestran los resultados obtenidos a los 60 días de la fase experimental, dando
positivo en todas las unidades experimentales. Esto nos indica que aún existe almidón en la
composición del bioplástico.
Tabla 4-3 Resultados de la prueba de Lugol del bioplástico con Penicillium spp a los 60 días.

6 Si Si
7 Si Si
8 Si Si
9 Si Si
10 Si Si
28
3.3. Resultados de la degradación con Aspergillus niger.
Los resultados obtenidos con la cepa Aspergillus niger en las pruebas gravimétricas, pH, porcentaje
de degradación, prueba de lugol a los 30 y 60 días.
Tabla 5-3 Resultados de la degradación del bioplástico con Aspergillus niger obtenidos a los 30 días

1 1,2330 1,0871 0,1459 14,59 si si 5,68 4,05
2 1,1981 1,0668 0,1313 13,13 si si 5,68 4,08
3 1,2170 1,1059 0,1111 11,11 si si 5,68 4,12
4 1,2078 1,0796 0,1282 12,82 si si 5,68 4,10
5 1,2197 1,0961 0,1236 12,36 si si 5,68 4,14
3.3.1. Pruebas gravimétricas del bioplástico a los 30 días.
PESO
1,2330
1,2197
1,2170
1,2078
1,1981
1,1059
1,0961
1,0871
1,0796
1,0668
U.1 U.2 U.3 U.4 U.5
Gráfico 7-3 Pruebas Gravimétricas del bioplástico con Aspergillus niger a los 30 días.
unidad experimental número 1 presenta una mayor degradación en el tiempo transcurrido, con una
temperatura de 28 grados Celsius, a la primera semana se observó que el hongo empezó a invadir el
bioplástico y cada 3 días se controló su crecimiento hasta llegar al tiempo previsto.
29
14,59
13,13
12,82
12,36
11,11
U.1 U.2 U.3 U.4 U.5
Gráfico 8-3 Porcentaje de degradación del bioplástico con Aspergillus niger a los 30 días.
En el Gráfico 8-3 se representan los porcentajes de degradación a los 30 días, teniendo la mayor
similares.
3.3.3. Prueba de pH del bioplástico a los 30 días
PH
pH Inicial pH Final
5,68
5,68
5,68
5,68
5,68
4,14
4,12
4,10
4,08
4,05
U.1 U.2 U.3 U.4 U.5
Gráfico 9-3 Resultados de pH del bioplástico con Aspergillus niger a los 30 días.
30

positivo en todas las unidades experimentales, lo que nos indica que aún existe almidón en la
Tabla 6-3 Resultados de la prueba de Lugol del bioplástico con Aspergillus niger a los 30 días

1 Si Si
2 Si Si
3 Si Si
4 Si Si
5 Si Si
En la siguiente tabla se muestran los resultados que se obtuvieron a los 60 días de la fase experimental
con la cepa Aspergillus niger incubadas a 28 grados Celsius.
Tabla 7-3 Resultados de la degradación del bioplástico con Aspergillus niger obtenidos a los 60 días.

6 1,2085 1,0354 0,1731 17,31 si si 5,68 3,60
7 1,2271 1,0447 0,1824 18,24 si si 5,68 3,79
8 1,2308 1,0302 0,2006 20,06 si si 5,68 3,41
9 1,2292 1,0781 0,1511 15,11 si si 5,68 4,04
10 1,2071 1,0192 0,1879 18,79 si si 5,68 3,46
31
PESO
1,2308
1,2292
1,2271
1,2085
1,2071
1,0781
1,0447
1,0354
1,0302
1,0192
U.6 U.7 U.8 U.9 U.10
Gráfico 10-3 Pruebas Gravimétricas del bioplástico con Aspergillus niger a los 60 días.
En el Gráfico 10-3 se representa los pesos tomados en el bioplástico al inicio y a los 60 días, donde
la unidad experimental número 8 presenta una mayor degradación en el tiempo transcurrido con una
temperatura de 28 grados Celsius, a la primera semana se observó que el hongo empezó a invadir el
bioplástico y cada 3 días se controló su crecimiento hasta llegar al final de la investigación.
20,06
18,79
18,24
17,31
15,11
U.6 U.7 U.8 U.9 U.10
Gráfico 11-3 Porcentaje de degradación del bioplástico con Aspergillus niger a los 60 días.
32
En el Gráfico 11-3 se representan los porcentajes de degradación a los 60 días, teniendo la mayor
similares.
3.3.4. Variación de pH a los 60 días
PH
pH Inicial pH Final
5,68
5,68
5,68
5,68
5,68
4,04
3,79
3,60
3,46
3,41
U.6 U.7 U.8 U.9 U.10
Gráfico 12-3 Resultados de pH del bioplástico con Aspergillus niger a los 60 días

positivo en todas las unidades experimentales, lo que nos indica que aún existe almidón en la
Tabla 8-3 Resultados de la prueba de Lugol del bioplástico con Aspergillus niger a los 60 días.

6 Si Si
7 Si Si
8 Si Si
9 Si Si
10 Si Si
33
3.4. DISCUSIÓN
En la investigación realizada se observó que la cepa con mayor degradación en el bioplástico

elaborado a partir de cáscara de plátano fue Aspergillus niger, con 20% de degradación y un pH final
de 3,41 a los 60 días del experimento, al ser este microorganismo propio de la putrefacción y estar
ampliamente distribuido por la naturaleza es de fácil acceso y puede degradar fácilmente el
bioplástico. Al comparar con los resultados de otra investigación se pudo determinar que Aspergillus
niger tiene una gran capacidad degradativa con bioplásticos hechos a base de almidón y también de
polietileno de alta densidad (PEAD), teniendo como resultados un porcentaje de degradación en los
diferentes ensayos para A. niger de 10,25%, 13,83% y 19,56%, (Barrera et al. 2013), estos porcentajes
dados son valores similares de la investigación realizada. Por otro lado tenemos que al comparar la
composición del bioplástico elaborado con otra investigación realizada, donde Aspergillus niger
degrada con mayor facilidad un sustrato sólido elaborado con glucosa y glicerol (Reyes-Ocampo,
González-Brambila y López-Isunza, 2013), concuerda con la composición del bioplástico a base de almidón
de plátano, el glicerol tiene una asimilación parecida a la de la glucosa y por eso no necesita una gran
cantidad de ATP para su descomposición. Por esta razón en los resultados obtenidos en la fase
experimental con este hongo fueron favorables y obtuvo el mayor porcentaje de degradación en la
investigación realizada.
34
CONCLUSIONES
• Se elaboró un bioplástico a partir del almidón de la cáscara de plátano, con propiedades

adecuadas, con una buena dureza y elasticidad moderada, su pH inicial fue de 5,68.
• Se determinó que existió degradación con las dos cepas en estudio; se obtuvo mayor
degradación en el bioplástico con Aspergillus niger a los 60 días, en la unidad experimental
número 8 con una variación de peso de 0,2006 mg y un pH final de 3,41. Mientras que con
Penicillium spp se obtuvo una variación de peso de 0,0822 mg y un pH final de 3,47 en la
unidad experimental número 8. A través de la prueba de lugol se determinó que las diferentes
unidades experimentales aún tienen la presencia de almidón en su composición, habiendo
transcurrido el tiempo de la fase experimental.
• Se obtuvo como mejor cepa microbiana degradativa a Aspergillus niger con un 20% frente a
Penicillium spp con la que se obtuvo un 8% de degradación. Observando directamente en el
laboratorio, el bioplástico fue invadido totalmente por Aspergillus niger, su estructura fue
modificada al perder su dureza y tener una cierta viscosidad en la fase experimental,
confirmando esto en los resultados de las diferentes pruebas realizadas. Las dos cepas tienen
una capacidad degradativa alta en comparación a otras cepas utilizadas en otros estudios.
35
RECOMENDACIONES
• Se recomienda utilizar diferentes concentraciones de almidón de cáscara de plátano en el

bioplástico para comparar la degradación.
• En las pruebas de laboratorio hay que considerar estrictamente las condiciones de

esterilización y temperatura de incubación de los microorganismos
36
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ANEXOS
Bioplástico en la caja Petri Prueba de lugol en el almidón de plátano
Siembra de las cepas Toma de peso
Siembra del bioplástico en las unidades Unidades experimentales de Aspergillus

experimentales niger con el bioplástico
Unidades experimentales de Penicillium Unidad experimental de Penicillium spp con
spp el bioplástico
Bioplástico extraído de las unidades Toma de pH de los bioplásticos luego de la

experimentales de Aspergillus niger fase experimental

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ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO

“EVALUACIÓN DEL COMPORTAMIENTO DE Aspergillus niger y

Presentado para optar al grado académico de:

AUTORA: MARISOL ALEJANDRA ERAZO PÉREZ

El Tribunal de Trabajo de titulación experimental certifica que: El trabajo de investigación:

Dra. Yolanda Dolores Díaz Heredia

Ing. Carlos Alcibar Medina Serrano

1. MARCO TEÓRICO REFERENCIAL ...................................................................... 5

2. MARCO METODOLÓGICO .................................................................................. 17

3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ............................................................................... 23

Tabla 1-1 Clasificación de los polímeros ................................................................................... 7

Figura 1-1 Clasificación Biopolímeros ............................................................................................ 12

En el presente estudio se evaluó el comportamiento de Aspergillus niger y Penicillium spp en la

PALABRAS CLAVE: <BIOTECNOLOGÍA>, <DEGRADACIÓN>, <HONGO Aspergillus

KEY WORDS: <BIOTECNOLOGY>, <DEGRADATION>, <Aspergillus niger FUNGUS>,

Identificación del Problema

La problemática generada por el uso indiscriminado de plásticos sintéticos y su persistencia en el

El plátano en Ecuador es considerado un cultivo de creciente importancia socioeconómica, pues este

La mayoría de la producción del banano del Ecuador, se destina básicamente a la exportación, el

Los bioplásticos se pueden elaborar a partir de cultivos de poliésteres microbianos o de almidón,

En el presente se elaboró un bioplástico a partir de cáscara de plátano y se evaluó la degradación del

Evaluar el comportamiento de Aspergillus niger y Penicillium spp en la degradación de bioplástico

Elaborar un bioplástico a partir de la cáscara de Plátano a nivel de laboratorio.

Evaluar la degradación del biopolímero aplicando técnicas gravimétricas, análisis de pruebas de

Comparar la degradación de las cepas microbianas en estudio.

1. MARCO TEÓRICO REFERENCIAL

1.1. Antecedentes de la investigación

En la investigación “Evaluación, caracterización y optimización de un bioplástico a partir de la

En el artículo “Obtención de un polímero biodegradable a partir de almidón de maíz” (Garcia V. , 2015)

1.2.1. Características de los polímeros

1.2.2. Clasificación de los polímeros

Los polímeros pueden clasificarse por diferentes criterios.

Tabla 1-1 Clasificación de los polímeros

1.2.3. Polímeros sintéticos

- Bajos costes de producción

1.2.4. Polímeros naturales

El almidón forma parte importante en la composición de algunos productos, se encuentra en

Propiedades funcionales del almidón

Las propiedades dependen de la morfología

- Gelatinización. Los gránulos de almidón son insolubles en agua a temperatura ambiente,

- Desestructuración. Es la insolubilización y precipitación de las moléculas de amilosa, es

Importancia del almidón del plátano.

Tabla 2-1 Ventajas y desventajas de los bioplásticos

Figura 1-1 Clasificación Biopolímeros

La International Standard Organization define a la biodegradación como la transformación de

Es la descomposición de sustratos complejos a moléculas sencillas, agua, dióxido de carbono y

1.2.7.1. Tipos de biodegradación

Es la degradación realizada por microorganismos en ausencia total de oxígeno, como

La importancia de estos organismos en el medio ambiente radica en la función degradadora de materia

Estos organismos pueden presentar diferentes morfologías.

1.2.8.3. Aspergillus niger

Es un hongo perteneciente al phylum Ascomycota, ubicuo en el ambiente y es considerado como

1.2.8.4. Penicillium spp.

Se caracteriza principalmente porque es el hongo productor de penicilina además de roquefortina y

Figura 3-1 Características morfológicas Penicillium spp.

2.1. Metodología de la investigación

2.1.1. Lugar de la investigación

Laboratorio de Microbiología, Escuela Superior Politécnica de Chimborazo ESPOCH, Cantón

2.1.2. Hipótesis y especificación de las variables