Informe Microbiologia 3

INTRODUCCIÓN:
La esterilización implica la destrucción de todos los microorganismos,

incluyendo los esporos. La desinfección supone la destrucción de los
microorganismos vegetativos que pueden causar enfermedades o en el
contexto de las industrias de alimentos, los que pueden producir alteraciones.
La desinfección no mata necesariamente a los esporos.
I.-OBJETIVOS:
- Adquirir destreza para envolver diversos materiales de laboratorio.

- Esterilizar material de laboratorio (cajas de Petri, Tubos de ensayo y
pipeta) para ser utilizados en prácticas futuras.
II.-MARCO TEORICO:
Empaquetar materiales de laboratorio: El empaquetado debe adaptarse al

método de esterilización utilizado para asegurarse de que el agente de
esterilización pueda penetrar el material del empaquetado (por ejemplo, el
vapor de agua). El empaque también brinda protección durante el transporte y
el almacenamiento. Un empaque adecuado protege los artículos esterilizados de
la contaminación micro bacteriano durante el transporte y el almacenaje. Las
unidades de empaque deben ser lo más pequeñas posibles y presentar una
etiqueta que indique su contenido, la fecha de esterilización, la fecha límite de
uso, el número de lote y el indicador de esterilización.
· ESTERILIZACION:
Los métodos utilizados corrientemente en los laboratorios microbiológicos son:
 Calor al rojo (flameado).

 Calor seco (aire caliente)
 Esterilización por calor húmedo.
 Vapor fluente o Esterilización por vapor a presión (tyndallización).
 Filtración.
Esterilización: Esterilizar un dispositivo significa eliminar totalmente
cualquier tipo de vida microbiana presente en él. El horno de esterilización y
secado trabaja con calor seco y lo que es ideal para la esterilización de
instrumental quirúrgico, dental, médico y de laboratorio. Hay varias técnicas
de esterilización, y la esterilización por calor seco más comúnmente utilizados
hoy en día. Durante el proceso de esterilización se eliminan todas las bacterias,
esporas, hongos o virus y protozoos.
Calor al rojo: Los instrumentos tales como las asas y alambres de siembra y
varillas secas se esterilizan calentándolas en la llama de un mechero bunsen
hasta que se ponen al rojo. Los microincineradores se recomiendan para
esterilizar asas de inoculación contaminadas con material muy infeccioso
(espulos tuberculosos) para evitar el riesgo de chisporrotear partículas
contaminadas sobre las zonas de alrededor.
Esterilización por calor húmedo: El calor húmedo destruye los

microorganismos por coagulación de sus proteínas celulares. El principal
método de esterilización que emplea calor húmedo es la esterilización por
vapor a presión. Existen otros métodos de descontaminación que emplean este
tipo de calor los cuales, aunque no permiten la destrucción total de los
microorganismos, disminuyen la carga microbiana que posee un material. Entre
estos métodos podemos citar:
- Tindalización (esterilización fraccionada)
- Agua hirviendo
- Pasteurización
- Olla de presión
Esterilización por vapor a presión: La esterilización por vapor a presión se

lleva a cabo en una autoclave. Estos equipos emplean vapor de agua saturado, a
una presión de 15 libras lo que permite que la cámara alcance una temperatura
de 121ºC. El tiempo de esterilización usualmente es de 15 minutos, sin embargo,
en algunas oportunidades, dadas las características del material, es necesario
variar el tiempo de esterilización.
Cuando se utiliza este método es importante controlar en la autoclave la

relación entre la temperatura, la presión y el tiempo de exposición, ya que
éstos son factores críticos en el proceso.
Sólo cuando el vapor se coloca bajo presión, es cuando su temperatura aumenta

por encima de los 100 ºC y esto permite alcanzar las temperaturas de
esterilización (121 ºC).
Entre las ventajas de este método de esterilización tenemos que no deja

residuos, las autoclaves modernas son sencillas de manejar y es un método
rápido de esterilización. Éste es el método de elección para esterilizar
materiales termoestables y no sensibles a la humedad como medios de cultivo,
cultivos de microorganismos para descartar, lencería, uniformes, instrumentos
quirúrgicos, etc.
Entre sus desventajas están que no permite la esterilización de materiales

sensibles al calor y materiales no miscibles con el agua como es el caso de
polvos, aceites y grasas.
Filtración: Las bacterias pueden eliminarse de los líquidos haciéndolos pasar a

través de filtros con poros muy pequeños que impiden el paso de las bacterias
pero, en general, no de los mycoplasmas ni virus. Se emplea este método para
esterilizar el suero para su uso en el laboratorio, las soluciones de antibióticos
y los medios de cultivo especiales que se alteran por el calor. Se utiliza también
para separar los productos solubles del crecimiento bacteriano (toxinas) de los
medios de cultivo líquidos.
III.- PROCEDIMIENTO:
Al momento de lavar los materiales:
- En un recipiente lo suficiente mente grande añadir agua.

- Después colocar detergente o lejía.
- Luego colocar los materiales de laboratorio y remojar por 15 minutos
aprox.
- Usar un cepillo o cualquier otro material para retirar impurezas de los
materiales.
- Por último sacar los materiales enjuagarlos y dejarlos secar.
Al momento de esterilizar los materiales:
- Una vez este el material seco usar papel Craft para su empaquetadura.
- Colocar la Placa Petri en medio del papel y taparlo de manera que no
presente aberturas por las que pueda ingresar el aire.
- La pipeta se envolverá enrollando el papel poco a poco y se necesitara un
poco de algodón para tapar la boquilla, luego al final nos debe de sobrar
un poco de papel para su etiquetación.
- Para los tubos de ensayo se deberá colocar algodón en cada boquilla de

cada tubo de modo que al presionar ligeramente se puedan retirar los
algodones y envolver con el papel, utilizar un pedazo de pabilo para
ajustar la envoltura.
- Por ultimo mandar a la estufa los materiales envueltos respectivamente
para que se produzca la esterilización.
IV.- CONCLUSIONES:
El material debe ser esterilizado para poder ser usado antes de cultivas
microorganismos porque de lo contrario podrían crecer otros organismos que
no son requeridos.
Aprendí el procedimiento para empacar diversos materiales de uso en

microbiología así como el procedimiento de la esterilización
V.- CUESTIONARIO:
Materiales que se emplean en la autoclave
- Crisol
- Mortero
- Pro pipeta
- Pipeta de Pasteur
- Asa de Siembra
- Jeringa de Vidrio
- Guantes de Caucho
- Torundas
- Frascos de Vidrio
- Paquete quirúrgico
Materiales que se emplean en el

horno de esterilización
- Tubo de ensayo
- Placas Petri
- Vaso de Precipitado
- Matraz de Erlenmeyer
- Pipeta
- Pinzas
- Bureta

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La esterilización implica la destrucción de todos los microorganismos,

- Adquirir destreza para envolver diversos materiales de laboratorio.

Empaquetar materiales de laboratorio: El empaquetado debe adaptarse al

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 Calor al rojo (flameado).

Esterilización por calor húmedo: El calor húmedo destruye los

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