Citoplasmática de esterilidad masculina:

una ventana al mundo de interacciones

mitocondriales-nuclear de la planta
La función mitocondrial depende de la acción coordinada de los genomas nucleares y
mitocondriales. La disección genética de estas interacciones presenta retos especiales
en aerobios obligados, debido a que la viabilidad de estos organismos depende de la
respiración mitocondrial. La esterilidad masculina citoplásmica planta rasgo (CMS) se
determina por el genoma mitocondrial y está asociado con un fenotipo de esterilidad
del polen que pueden ser suprimida o contrarrestado por genes nucleares conocidos
como restaurador-de-la fertilidad genes. A continuación, se revisan la naturaleza y el
origen de los genes que determinan la CMS, junto con investigaciones recientes que
han explotado CMS para proporcionar nuevos conocimientos sobre la comunicación
mitocondrial-nuclear de la planta. Estos estudios han implicado las vías de
señalización mitocondrial, incluidos los que participan en la regulación de la muerte
celular y la expresión de genes nucleares, en la elaboración de CMS. La clonación
molecular de genes nucleares que restaurar la fertilidad (es decir, restaurador-de-la
fertilidad genes) ha identificado genes que codifican proteínas pentatricopeptide-
repetición como reguladores clave de la expresión del gen mitocondrial de la planta.

Introducción
Las mitocondrias son el sitio celular de numerosas vías metabólicas que son esenciales
para la vida eucariota superior [12] La principal de estas vías son el ciclo del ácido
tricarboxílico, la transferencia de electrones respiratoria y la síntesis de ATP 123 La
adquisición de la mitocondria a través de la endosimbiosis (véase el Glosario), y la posterior
reorganización de la información genética durante la evolución, producen genomas
mitocondriales modernas, que codifican sólo un pequeño subconjunto (aproximadamente
50) de los 700 o más productos de genes que son necesarios para apoyar las funciones
mitocondriales [245] . En consecuencia, los genomas nucleares tienen un papel crucial en la
biogénesis mitocondrial y la función [36]. Se estima que un 10% de los genes nucleares
eucarióticas codifican proteínas que están dirigidos a mitocondrias siguientes síntesis en los
ribosomas citosólicos [24]. Al mismo tiempo, las vías de señalización mitocondrial influyen
en la expresión de genes nucleares (un proceso denominado regulación retrógrada) [7] y
regular otras funciones celulares, lo más notablemente de señalización de muerte celular
vías 8910.

El estudio de la esterilidad masculina citoplasmática rasgo (CMS) proporciona una manera

conveniente para diseccionar interacciones genéticas entre la mitocondria y el núcleo en las
plantas [1112]. CMS, que está determinada por el genoma mitocondrial de la planta, está
asociada con la incapacidad de producir polen funcional, y muchos genes mitocondriales
que determinan CMS se puede suprimir o contrarrestado por los productos de uno o más
genes nucleares conocidos como restaurador de la fertilidad genes ( genes restauradores
denotados aquí)11de 121314 . Aunque los genomas mitocondriales modernas de plantas y
animales de apoyo funciones comunes (por ejemplo, la respiración y la expresión de genes
mitocondriales), muestran la diversidad considerable con respecto a la organización del
genoma, el número de genes y la regulación de la expresión génica [5] ( Recuadro
1). Interacciones genoma mitocondrial-nuclear y vías de señalización mitocondriales son
también tienden a variar. Una comprensión funcional de estos procesos requiere análisis
genéticos en diversos organismos. Saccharomyces cerevisiae (levadura) es un modelo de
gran alcance para la disección genética molecular de la biogénesis y la función mitocondrial,
ya que es una anaerobio facultativo y, por lo tanto, puede sobrevivir sin respiración
mitocondrial [36]. El análisis genético de los procesos mitocondriales en aerobios obligados
plantea desafíos adicionales, debido a la interrupción de las funciones mitocondriales
resultados de letalidad o anomalías graves en el desarrollo [361315]. En la mayoría de los
casos, las plantas que muestran CMS son fenotípicamente normal en todos los aspectos
excepto en la fertilidad masculina. Por lo tanto, los genes que determinan la CMS pueden
ser explotados por los investigadores como los reporteros no esenciales de la expresión del
gen mitocondrial.

RECUADRO 1: GENOMAS MITOCONDRIALES

Las mitocondrias evolucionaron a partir de un endosymbiont relacionada con moderna α-
proteobacterias. A pesar de tener un origen evolutivo común, los genomas mitocondriales muestran
diversidad considerable con respecto al tamaño, la organización física, contenido de la codificación y
la regulación genética [4] ( Tabla I ). Los genomas de plantas mitocondriales son notables de varias
maneras [65, 66]. Son los más grandes genomas mitocondriales que se han caracterizado, que van de
200 a 2 400 kb. Este tamaño no refleja una expansión en el contenido que codifica la (Tabla I), pero,
en cambio, la incorporación de grandes cantidades de secuencia no codificante, algunos de plástido y
origen genoma nuclear. Varias líneas adicionales de evidencia indican que hay un sistema de
recombinación activo en las mitocondrias de plantas. Los mapas físicos de los genomas mitocondriales
de plantas no son colineales entre las especies o incluso dentro de una especie. Estos mapas indican
una estructura multiparte complejo que podría generarse por recombinación entre grandes
repeticiones invertidas y / o repeticiones directas. Una predicción de que se puede hacer de esta
estructura es que la complejidad de codificación se distribuye entre una población de moléculas de
ADN subgenómicos. La abundancia relativa de estos componentes del genoma y los genes que
contienen es, por lo tanto, potencialmente variable. Cuando se observa por microscopía electrónica,
los genomas mitocondriales de plantas aparecen como una población altamente diversa de lineales,
moléculas lineales circulares, en forma de σ y ramificados, que van desde más de una longitud del
genoma completo al menos de una longitud completa del genoma [65, 66]. Muchas de estas
estructuras son característicos de intermedios de recombinación, y las mitocondrias de plantas han
sido recientemente demostrado tener actividades enzimáticas que son necesarios para soportar la
recombinación [65]

Tabla I: la diversidad del genoma mitocondrial moderna

Organismo El tamaño del Mapa físico codificación de refs

genoma (kb) contenido
Homo sapiens 16.6 Circular 13 proteínas [5,15]
2 rRNAs
22 ARNt
Saccharomyces 85.8 Circular 30 proteínas [4,5]
cerevisiae 2 rRNAs
24 ARNt
Arabidopsis thaliana 367 circular 32 proteínas [5,59]
multipartito 3 rRNAs
22 ARNt

Los genes mitocondriales que determinan la CMS se han descubierto en una amplia gama
de especies de plantas. Estos genes muestran una considerable diversidad de proteínas
codificadas y sus efectos fenotípicos específicos [11, 14]. Debido a que los genomas
mitocondriales se heredan por vía materna en la mayoría de las especies de plantas [16],
CMS se transmite a través de la matriz materna (es decir, el padre de semillas; Cuadro
2). Genes restauradores, en el núcleo, a menudo enmascaran la presencia de genes
mitocondriales que determinan CMS hasta que los alelos que restaurar la fertilidad se
eliminan a través de manipulaciones genéticas que producen nuevas combinaciones de
genomas nucleares y mitocondriales ( Cuadro 2 ). Cruces interespecíficos o fusiones de
células somáticas se pueden utilizar para crear plantas aloplásmica, en la que está presente
en combinación con el genoma nuclear de una especie diferente el citoplasma de una
especie de planta. Estas sustituciones citoplasmáticos a menudo resultan en la expresión
de los genes mitocondriales que determinan la CMS.

Las interacciones genéticas moleculares que dan lugar a la CMS y restauración de la

fertilidad son de interés desde varias perspectivas. Desde un punto de vista práctico, se
utilizan para la producción a escala comercial de semillas híbridas F1 en muchos
cultivos [17]. En las poblaciones naturales, CMS y restauración de la fertilidad se estudian
como la base de los sistemas reproductivos gynodioecious, que se caracterizan por la
presencia de las hembras y los individuos hermafroditas [18, 19]. Este artículo se centra en
las últimas investigaciones de la CMS y restauración de la fertilidad que proporcionan
nuevos conocimientos sobre las interacciones genéticas moleculares entre la mitocondria y
el núcleo en las plantas. Los genes mitocondriales de plantas que determinan la CMS se
consideran a la luz de las características del genoma que probablemente contribuyen al
origen y la propagación de estos genes. Una visión general de los estudios de CMS
fenotipos en los niveles moleculares y celulares, y de genes restauradores en el nivel
molecular, se presenta, junto con los puntos de vista estos estudios han proporcionado en
las vías de señalización planta mitocondriales y el papel de los genes nucleares en la
expresión génica mitocondrial planta.

RECUADRO 2: la genética de plantas cytonuclear

Función de las células de plantas depende de la acción coordinada del plasto, mitocondrial y genomas
nucleares. En la mayoría de las especies, y el plastidio genomas mitocondriales se heredan a través de
la matriz materna, pero hay muchos ejemplos interesantes de la herencia paterna o biparental de
estos genomas [16]. En especies con genomas de orgánulos de herencia materna, la sustitución
citoplásmica se logra fácilmente a través de una serie de cruces genéticos siempre hechos con el
mismo genotipo del polen fértil como el polen parental. Esta estrategia fue utilizada por Rhoades para
demostrar citoplasmática herencia (materna) de un rasgo de esterilidad masculina, como se indica
en la Tabla I [67]. Estos cruces se combinan los genomas de los orgánulos de una semilla parental de
polen estéril con el núcleo de un polen parental de polen fértil. A pesar del intercambio de material
genético nuclear, el fenotipo de polen estéril se conserva, lo que demuestra CMS, ahora se sabe están
asociados con determinados genes en el genoma de la planta mitocondrial (con algunas advertencias;
véase el párrafo siguiente). La misma estrategia se puede aplicar para crear líneas aloplásmica, la
combinación de los genomas de los orgánulos de una especie con el genoma nuclear de una especie
crosscompatible.

La demostración de la CMS mediante la sustitución citoplasmática depende de la elección del

progenitor masculino. Aunque algunos genotipos nucleares mantienen CMS, otros
contribuyen restaurador de la fertilidad (restaurador) alelos que puede revertir la CMS y restaurar la
fertilidad del polen. Estas interacciones genéticas se pueden usar para producir poblaciones uniformes
de plantas de polen estéril y luego revertir la esterilidad del polen en la siguiente generación ( Tabla II ),
proporcionando de ese modo un medio eficaz para controlar la fertilidad del polen para la creación de
semillas híbridas F1 a escala comercial [17] . Plantas fusión de células somáticas permiten sustituciones
citoplasmáticos que se lleva a cabo entre las especies de plantas que son sexualmente
incompatibles [68]. Este enfoque implica la eliminación de las paredes celulares y la fusión de las células
vegetales in vitro, seguido por la selección de los productos de fusión y la regeneración de plantas
enteras. Muchas estrategias se pueden aplicar para recuperar productos de fusión de diferente
composición genética. Fusiones asimétrico, en el que se inactiva o se elimina antes de la fusión del
núcleo de una pareja de fusión, son una forma de recuperar sustituciones citoplasmáticas. Las plantas
resultantes llevan el genoma nuclear de una pareja de fusión y, en general, un genotipo de plástidos
contribuyó por cualquiera de los compañeros de fusión. Células somáticas fusionadas llevan con
frecuencia los genomas mitocondriales que se reordenan y / o contribuciones de los dos compañeros
de fusión recombinados. Estas nuevas combinaciones de genomas mitocondriales y nucleares se
asocian frecuentemente con CMS, como se ha observado para aloplásmica de Brassica napus plantas
derivadas de fusiones entre B. napusy Arabidopsis thaliana [29].

Tabla I: Cruces genéticos que conducen a la sustitución citoplasmática demuestran

CMS a

Generación Genomas de Genoma nuclear Genoma nuclear fenotipo

orgánulos de la de la semilla de la matriz de polen
matriz original de parental original polen fértil
semilla de polen polen estéril (%) recurrente (%)
estéril (%)
F1 b 100 50.0 50.0 Estéril
BC1 c 100 25.0 75.0 Estéril
BC2 100 12.5 87.5 Estéril
BC3 100 6.20 93.8 Estéril
BC4 100 3.10 96.9 Estéril
FC5 100 1.60 98.4 Estéril
aLos datos son tomados de la referencia. [67].
bLa generación F1 se produce por cruzar un parental de semilla de polen estéril con una planta normal de polen
fértil.
cElretro cruzamiento (BC) generaciones se producen mediante el cruce de una planta de la generación anterior
(como el padre de semillas) con el genotipo de la planta de polen fértil normal utilizado en los cruces anteriores.

Tabla II: El mantenimiento o la reversión de CMS a través de cruces genéticos

semilla parental de polen polen el genotipo de la fenotipo de la

estéril parental progenie progenie
CMS a rf/rf b N c rf/rf CMS rf / rf 100% de polen
estéril
CMS rf / rf N Rf / Rf d CMS Rf / rf 100% polen fértil
acitoplasma masculino-inductor de esterilidad, que se asocia con esterilidad del polen de herencia materna.
b rf es un alelo nuclear no la fertilidad-restauración, que mantiene CMS.
c N indica citoplasma normal, que se asocia con el desarrollo normal de polen.
d Rf es un alelo nuclear de la fertilidad-restauración dominante, lo que revierte la CMS.

Los genes mitocondriales que determinan CMS

Al menos 14 genes mitocondriales que determinan CMS se han caracterizado como marcos
de lectura abiertos (ORFs) que comprende segmentos derivados de secuencias de genes
flanqueantes mitocondrial gen-codificación y a partir de secuencias de origen
desconocido [11, 12] Estos ORFs se expresan porque están fusionados directamente a
plantar secuencias promotoras mitocondriales o se co transcriben con genes mitocondriales
aguas arriba [11, 14]. Las mutaciones de pérdida de función que interrumpen la planta
mitocondrial genes respiratorias generalmente resultan en fenotipos deletéreos graves,
incluyendo retraso del crecimiento, la creación de bandas y la esterilidad femenina, además
de la esterilidad masculina. La mayoría de las plantas que llevan ORF CMS-determinantes
conservan un conjunto completo de genes mitocondriales normales respiratorias [13] Y los
ORF mitocondriales que determinan la CMS se consideran mutaciones con ganancia de
función. Eventos de recombinación en los genomas mitocondriales de plantas ( Box 1 )
probablemente favorecen la generación de estos ORFs y su colocación aguas abajo de las
secuencias que apoyan la expresión génica. Sin embargo, hay al menos dos ejemplos de
CMS que resultan de mutaciones de pérdida de función en genes respiratoria
mitocondrial. En estos casos, las mutaciones CMS-determinantes no son letales, tal vez
debido a las vías alternativas de flujo de electrones en los puntos relevantes de la vía
respiratoria mitocondrial planta [20, 21].

Después de CMS-determinación surgen mutaciones, otros eventos deben causar estos

genes mutantes para establecerse, por primera vez en una población celular y luego en una
población de plantas. Gametos de plantas desarrollan a partir de células somáticas [22], Por
lo que un gen CMS-determinación de que se establece en una célula somática podría ser
incorporado en un gameto femenino. Las células vegetales contienen ~ 200 mitocondrias,
cada uno con uno o más genomas mitocondriales [10]. Sin embargo, a veces, la población
mitocondrial de una célula puede existir como una población conectado (es decir
fusionado) [10], Lo que posiblemente explica cómo una novela CMS-determinación gen
podría extenderse por toda la población mitocondrial de una célula. Alternativamente, si la
población genoma mitocondrial planta se reduce antes de o durante la gametogénesis,
como ocurre en la línea germinal femenina de mamíferos [15], Este 'cuello de botella' podría
resultar en la selección oportunidad, amplificación y transmisión de un genoma mitocondrial
mutante. En las poblaciones naturales, gynodioecy se mantiene, en parte, a través de una
ventaja selectiva a las hembras que muestran CMS. En algunos ejemplos, las mujeres
tienen una mayor producción de semillas de hacer hermafroditas [18, 19]. Budar et
al. Proponemos que la expresión de los genes CMS-determinante en tejidos vegetativos
induce la expresión de genes nucleares que participan en la respuesta al estrés y que esto
mejora las posibilidades de supervivencia y reproducción cuando se encuentra estrés
ambiental [18], Proporcionando así una base adicional para la selección positiva y el
mantenimiento de la CMS en las poblaciones naturales.

Fenotipos de CMS
Fenotipos CMS abarcan una amplia gama de anormalidades reproductivas [11, 12, 14,
23] ( Figura 1). En algunos casos, CMS resulta de los cambios homeóticos: órganos
reproductores masculinos (estambres) se convierten en pétalos, que son no reproductiva, o
en los órganos reproductores femeninos (carpelos). En otros casos, los resultados cms de
la degeneración de los estambres o componentes específicos estambre tales como la
antera o las células del tapete, que revisten el desarrollo del polen de la antera y apoyo
dentro de la antera. En algunos casos, la CMS no se produce en los órganos que producen
polen, pero en el polen en desarrollo; el polen no puede completar el desarrollo o completa
el desarrollo, pero no funciona.
Figura 1
Planta de desarrollo de los órganos florales y fenotipos florales asociados con CMS. (a) La estructura floral de una
planta dicotiledónea. - se muestran los cuatro verticilos de órganos florales - los sépalos, los pétalos, los estambres
y carpelo. Los órganos exteriores, los sépalos y los pétalos, no participan en la formación de los gametos. Los
órganos florales masculinos, los estambres, comprenden las anteras (donde se produce polen) y los filamentos
(que soportan las anteras). El órgano floral femenino, el carpelo, comprende el ovario (donde se forman los
gametos femeninos), el estigma (donde se recibe el polen) y el estilo (que conecta el estigma al ovario). (b) El
modelo ABCE de la identidad del órgano floral. Órganos florales de las plantas se representan de la espiral exterior
(izquierda) para el verticilo central (derecha). Desarrollo floral órgano se regula por combinaciones de clase-A, -B,
-C y -E genes que se expresan en el meristemo floral (el grupo de células que da lugar a una flor)[24 – 26]. Las
regiones espacialmente estampadas de la expresión de genes que son necesarios para la especificación
adecuado de los órganos se muestran debajo de los órganos florales: sépalos (A y E), los pétalos (A, B y E),
estambres (B, C y E) y carpelos (C y MI). La mayoría de clase-A, -B, -C y -E genes codifican factores de
transcripción de la familia MADS-box. En Arabidopsis thaliana, estos genes incluyen APETALA 1 (clase
A), APETALA 3 y PISTILLATA (clase B),AGAMOUS (clase C), y SEPALLATA 1 , SEPALLATA 2 , SEPALLATA
3 y SEPALLATA 4 (clase E). APETALA 2 (clase A) pertenece a una familia diferente de factores de
transcripción. Las interacciones negativas normalmente producen límites nítidos entre las regiones de clase-A y
la expresión de genes de clase-C. (c) Carpeloid estambres resultante de la pérdida de la función génica clase-
B. La pérdida de la función de genes de clase B puede ser el resultado de mutaciones en genes
nucleares 242526 o de la expresión de genes que determinan CMS- 27282930 . Los pétalos tienen características
de sépalos y estambres no producen anteras o polen, pero, en cambio, desarrollan características
carpeloid. (d) petaloides estambres resultante de los cambios en el límite entre las regiones de clase-A y la
expresión de genes de clase-C. Expansión de la clase-A región y la contracción de la región de clase C se prevé
para producir estambres y carpelos petaloides normales. Este fenotipo se observa cuando las mutaciones alteran
genes nucleares que normalmente promueven la expresión de genes de clase-C [25] y en la variante CMS
petaloide de Daucus carota [27] . (e) Degeneration of anther tissues. In some examples of CMS, floral organ
identity is unperturbed, but the anther tissues degenerate (shown in brown) by processes that have features of
PCD or necrotic cell death [3335] . Comúnmente, las células del tapete, que revisten el desarrollo de anteras y
polen de apoyo, se ven afectados, al igual que las células de polen en desarrollo. (f) La degeneración de desarrollo
de polen. En otros ejemplos de CMS, desarrollo de las anteras parece ser normal, pero el desarrollo del polen
cesa prematuramente. En el tipo CMS-S de Zea mays , polen colapsa antes de la fase de almidón-llenado. Una
micrografía de luz de yodo-manchado colapsó el polen de tipo CMS-S de Z. mays se muestra (superior izquierda),
junto con una micrografía de luz de cinco granos de polen de yodo-teñidas con citoplasma normal (inferior
derecha). Barra de escala, 100 m. Fotos en la parte f amablemente proporcionados por Karen Chamusco.

Genes que causan la transformación de estambres a pétalos (un fenotipo petaloide) o

estambres a carpelos (un fenotipo carpeloid) CMS-determinantes son homeóticos: es decir,
que resultan en la transformación de un tipo de órgano a otro. Fenotipos similares son el
resultado de mutaciones en genes nucleares que regulan la identidad de los órganos
florales [23 – 26] . Cuatro verticilos de plantas órganos florales (sépalos, pétalos, estambres
y carpelo) ( Figura 1 ) desarrollar en respuesta a los patrones espaciales establecidos por
las cuatro clases principales de genes que controlan la identidad del órgano floral,
designada A, B, C y E. La mayoría de estos genes codifican factores de transcripción de la
clase MADS-box y tienen distintos dominios de expresión en las células que dan lugar a una
flor. Estos dominios se solapan parcialmente, especificando sépalos (A y E), los pétalos (A,
B y E), estambres (B, C y E) y carpelos (C y E) ( Figura 1 ). Muchos de los genes de
identidad de órganos florales se conservan entre las dicotiledóneas ( Figura 1) y
monocotiledóneas, que han modificado las versiones de sépalos y pétalos [26] .

Investigaciones recientes [27-30] asociado carpeloid fenotipos CMS con la disminución en la

expresión de los genes nucleares que codifican factores de transcripción-B-clase de función
MADS-box, que son necesarios para especificar los pétalos y las anteras [23] . Teixeira et
al. Proponer un modelo que relaciona la disfunción mitocondrial a la pérdida de la expresión
de genes de clase B, como se observa en las plantas aloplásmica que muestran CMS y
tienen el genoma nuclear de Brassica napus (violación) y el genoma mitocondrial
de Arabidopsis thaliana [29] . Ellos sugieren que los productos de CMS-determinantes
genes provocan una reducción en la producción de ATP mitocondrial y que la falta de ATP
previene la proteólisis dependiente de ATP de la B. napusproteínas UFO (órganos florales
inusuales) y ASK1 ( Arabidopsis SKP1-like), que son reguladores negativos de la expresión
de genes de clase-B. El resultado es la regulación continua negativa de la función de clase-
B en el tercer verticilo floral y, por lo tanto, un fenotipo carpeloid ( Figura 1).

La expresión errónea de los genes de identidad de órganos florales podría explicar otros
fenotipos CMS. Geddy et al. Asociado expresión inusual, prematura de la actividad del
promotor-B-gen clase en el meristemo floral con el desarrollo de la antera anormal posterior
en B. napus [31]. Las anteras petaloides y carpelos normales observados en Daucus
carota (zanahoria) [27] indicar una expansión de la clase-A función a expensas de la función
de clase-C en el tercer verticilo floral ( Figura 1). Se observan fenotipos similares cuando las
mutaciones en los genes nucleares eliminan la actividad de
la Arabidopsis genes FLOR ( HUA ) y HUA ENHANCER ( HEN ), que codifican reguladores
positivos de genes de clase-C [25] . CMS resultante de la combinación aloplásmica del
núcleo de Nicotiana tabacum (tabaco) y el citoplasma de Nicotiana repanda se caracteriza
por anteras fusionadas con carpelos. Este fenotipo resultados no de la expresión alterada
de genes de identidad de órganos florales pero desde el fracaso para expresar el homólogo
de tabaco de la Arabidopsis gen SUPERMAN ( SUP ) [32] , La cual es necesaria para
especificar los límites de órganos florales [26] . Por lo tanto, las mutaciones que resultan en
que estudian CMS a descubierto una inesperada variedad de plantas vías de señalización
retrógradas y objetivos.

Helianthus annuus (girasol) plantas que llevan el Helianthus petiolari citoplasma s son un
ejemplo bien estudiado de CMS resultante de antera degeneración. Estas plantas
androestériles muestran degeneración prematura de antera tejidos que se caracterizan por
características de la muerte celular programada mitocondrias-señalado (PCD): a saber, el
citocromo c liberado de las mitocondrias, la escisión de ADN nuclear y la condensación
celular [33] . En las células animales, PCD requiere ATP, y cantidades decrecientes de ATP
(todavía suficiente para soportar PCD) puede activar la vía de PCD [8]. Esto también podría
ser el caso de CMS en girasoles: orf522 , que se asocia con CMS, se prevé para codificar
una proteína relacionada con la subunidad 8 de la ATP sintasa mitocondrial, y la
acumulación del complejo ATP-sintasa se produce en menor medida en masculino-
girasoles estériles que en girasoles machos fértiles [34] .

La muerte celular se produce por la necrosis cuando los niveles de función y de ATP
mitocondrial son insuficientes para apoyar PCD [8]. En Zea mays (maíz) plantas con el tipo
de CMS (CMS-T) de Texas, las células del tapete (que se alinean en el desarrollo de las
anteras y el polen de apoyo) muestran características de la muerte celular por
necrosis [35]. En los tejidos vegetativos de estas plantas, el producto del gen mitocondrial
que determina las funciones de CMS (conocido como URF13) como un receptor de
formación de poros para una toxina producida por el hongo Bipolaris maydis (también
conocido como Cochliobolus heterostrophus ), induciendo de este modo la susceptibilidad a
este patógeno [36] . En las células del tapete, el poro formado por URF13 podría abrir en
ausencia de este pathotoxin, lo que resulta en la hinchazón y la disfunción de las
mitocondrias y la necrosis de las células del tapete [35].

La participación de las mitocondrias en las vías de PCD animales está bien establecido [8],
Pero las funciones de las mitocondrias en planta de PCD son menos claros [9,10]. La
asociación de PCD con CMS mitocondrias mediada [33] proporcionado algunos de la
primera evidencia convincente de participación mitocondrial en la planta vías de PCD. Las
mitocondrias influir en las decisiones-vida o muerte y los mecanismos de muerte celular no
sólo a través de cambios en la producción de ATP, pero también a través de la producción
de especies reactivas de oxígeno (ROS), que aumenta en condiciones de disfunción
mitocondrial [8] . La acumulación de pruebas de la señalización mediada por ROS en
plantas vías PCD [910] indica que las ROS producidos por las mitocondrias también podría
resultar en la muerte de los órganos florales masculinos y gametos en las plantas con CMS.

Especificidad masculina
¿Por qué es la esterilidad masculina una manifestación común de la disfunción mitocondrial
planta? Diferentes mecanismos responsables de los efectos específicos de tejido de CMS-
genes determinantes. En Phaseolus vulgaris (frijol común), el ORF239 proteína asociada a
CMS se degrada en tejidos vegetativos, pero se acumula en los tejidos de la
antera [37]. Numerosas otras proteínas mitocondriales asociados con CMS se acumulan a
lo largo de la planta, pero condicionan un fenotipo solamente en tejidos reproductivos
masculinos. Warmke y Lee determinaron que el desarrollo normal de las células del tapete y
el polen se acompaña de un incremento de 20-40 veces en el número de mitocondrias por
célula [38]. Propusieron una hipótesis en la que la energía CMS-determinación de los genes
de la función mitocondrial compromiso de tal manera que las demandas energéticas del
desarrollo del polen no se pueden cumplir. Una hipótesis alternativa es que los factores de
antera específicos (es decir, metabolitos o productos de genes) que interactúan con los
productos de CMS-determinantes genes inducen disfunción mitocondrial y CMS [39].

Estos modelos de especificidad masculina pueden ser revisados a la luz de la nueva

información con respecto a los mecanismos de CMS. La hipótesis de la energía [38] podría,
en un nivel fundamental, explicar tanto homeóticos y fenotipos degenerativos CMS, si la
adecuada regulación de genes nucleares que controlan la identidad de los órganos florales
requiere la proteolisis dependiente de ATP [29], Y si la disminución de cantidades de
resultado ATP en PCD mitocondrias-señalado en antera tejidos [34] . Los factores distintos
de ATP también podrían restringir las consecuencias de CMS-determinación de la expresión
de genes a los tejidos reproductivos. En el caso de los sistemas degenerativas CMS,
reguladores positivos de la muerte de las células producidas por anteras o polen en
desarrollo [39] podría actuar de forma sinérgica con las señales de muerte celular
mitocondrial. Alternativamente, los reguladores negativos de la señalización mediada por
ROS o muerte celular pueden reprimir mitocondrial de muerte celular vías de señalización
en todos excepto en los órganos reproductivos masculinos. El gran número de mitocondrias
en los órganos reproductivos masculinos [38] podría tener el efecto de amplificar las
consecuencias de la disfunción mitocondrial que se asocian con los CMS-genes
determinantes, tales como vías de señalización retrógrada o de muerte celular.

Mecanismos que restringen los efectos de la disfunción mitocondrial durante el crecimiento

y desarrollo de las plantas son probablemente el resultado de la selección natural. Debido a
que las mitocondrias se heredan por vía materna en la mayoría de las especies de
plantas [16], Las mutaciones mitocondriales que la viabilidad compromiso planta o la
reproducción femenina serían eliminados rápidamente de la reserva genética. Por el
contrario, las mutaciones mitocondriales que afectan sólo a la fertilidad masculina se
pueden pasar a las siguientes generaciones a través de la línea germinal materna. Otras
ventajas selectivas - por ejemplo, el aumento de la producción de semillas o la tolerancia al
estrés - a continuación, mantienen genes CMS-determinante en poblaciones
naturales [18,19].

Genética de la restauración de la fertilidad

La expresión de la mayoría de genes CMS-determinantes se puede suprimir o
contrarrestado por los productos de los genes restauradores específicos, lo que permite la
fertilidad del polen. Alelos de fertilidad-restauración a menudo se revelaron después de
cruces genéticos que implican una semilla parental masculino estéril y un padre polen de un
genotipo diferente nuclear ( Cuadro 2). Sistemas de Fertilidad-restauración pueden ser
sporophytic, funcionando en la planta (que es diploide), o gametofítico, funcionando en el
polen (que es haploide). En la restauración sporophytic, todo el polen producido por una
planta que es heterocigótica para un alelo restaurador dominante (genotipo CMS Rf / rf ) es
funcional independientemente del genotipo del polen. En la restauración gametofitica, sólo
el polen que lleva el alelo restaurador funcional. Sistemas de Fertilidad-restauración a veces
requieren la acción complementaria de alelos restauradores en múltiples loci genéticos. El
sistema de restauración sporophytic de CMS-T tipo Z. mays requiere al menos un alelo
restaurador en el locus restaurador de fertility1 (RF1 ) y un alelo restaurador en el
locus RF2 para lograr la fertilidad del polen [36] . Algunos genes CMS-determinantes
pueden ser evitados mediante la acción de dos o más loci independiente restaurador [37, 40
– 43].

Genes de la fertilidad-restauración
El primer gen restaurador para ser clonado estaba en la RF2 locus de Z. mays. Un alelo
restaurador en RF2 se requiere, en combinación con un alelo restaurador en RF1 (que no
está vinculada a RF2), para configurar la fertilidad masculina en CMS-T tipo Z. mays [36]. El
alelo restaurador en RF2 codifica un aldehído deshidrogenasa mitocondrial funcional [44],
Demostrando que la restauración de la fertilidad se puede producir a través de
compensación metabólica para los efectos de un gen CMS-determinación
mitocondrial. Genes restauradores ya se han clonado a partir de Petunia
hybrida (Petunia) [45], Oryza sativa (arroz) [41-48], Raphanus sativus
(rábano) 495051 y Sorghum bicolor (sorgo) [52]. La idea importante de este cuerpo de
trabajo es que todos estos genes restauradores codifican miembros de la pentatricopeptide-
repetición (PPR) familia de proteínas [43-53].

Proteínas PPR ( Cuadro 3 ) estaban implicados en primer lugar en la función mitocondrial

por una proteína PPR que promueve la traducción de ARNm que codifica mitocondrial de
citocromo c de la subunidad oxidasa I (COX1) en S. cerevisiae [54] . Recientemente una
proteína PPR estaba implicado en la traducción y / o la estabilización de los Homo
sapiens (humano) mitocondrial mRNAs COX1 (también conocida como MT-CO1 )
y COX3 (también conocida como MT-CO3 ) [55] . Sin embargo, el número de proteínas de
PPR implicados en la biogénesis de orgánulo es mucho mayor en las
plantas [56]. La Arabidopsis genoma nuclear codifica ~450 proteínas PPR, en contraste con
las seis de H. sapiens y cinco en S. cerevisiae . La expansión de la familia PPR no es única
paraArabidopsis , porque el O. sativa genoma también se prevé para codificar varios cientos
de proteínas de PPR. El programa Predotar ( http://urgi.infobiogen.fr/predotar/predotar.html )
predice que el 19% de Arabidopsis proteínas PPR se dirigen a plástidos y que el 54% están
dirigidos a mitocondrias [56].
RECUADRO 3: PROTEÍNAS REPETITIVAS PENTATRICOPEPTÍDICAS
Pentatricopeptide-repetición (PPR) proteínas están codificadas por una familia de genes que
tiene ~450 miembros en Arabidopsis thaliana. Proteínas PPR son de naturaleza modular, que
comprende principalmente unidades de repetición degeneradas de 35 aminoácidos, y la
diversificación estructural de estas proteínas acompañó la expansión de la familia PPR en
plantas [56] ( Figura I). Proteínas PPR planta puede ser no directo o dirigido a plastidios o
mitocondria a través de un grupo amino (N) -terminal de dominio. En la mayoría
de Arabidopsis proteínas PPR, todas las repeticiones están relacionadas con una única
secuencia de consenso, denominado P. Una clase variante de las proteínas de PPR
(designado PLS) tiene repeticiones P intercalados con más largo (36 aminoácidos, L) y más
cortos (31 aminoácidos, S) repiten. L y S repeticiones tienen motivos consenso que varían de
la de clase P. La PLS de proteínas PPR es, hasta ahora, único para las plantas. Esta clase
de proteínas se distingue además porque algunos miembros tienen (C) extensiones-terminal
carboxi, que pueden contener tres tipos de dominio (E, E + y DYW) que no están relacionados
con las unidades de repetición. Estos dominios C-terminales están presentes como E solo, E
combina con E + o E combina con E + y DYW [56] ( Figura I ). La región de la proteína que
contiene repeticiones degenerados se piensa para formar una estructura helicoidal que se
une a ARN. Las unidades de repetición degenerada pueden conferir secuencia específica de
unión tal que las proteínas de PPR podrían funcionar como guías o adaptadores, que une las
enzimas del metabolismo de ARN orgánulo con sus sitios diana correctas [5657]. De acuerdo
con este modelo, la PPR CRP1 proteína dirigido al plástido (cloroplasto procesamiento del
ARN 1) se une a la región 5 'de sus ARN diana in vivo [63]. En la actualidad, las funciones de
la E específica de la planta, E + y dominios DYW no están claras.

Figura I: Características modulares de proteínas PPR de plantas. Las características de las proteínas
de PPR planta ilustrada aquí se basan en el análisis de Arabidopsis thaliana PPR-proteína-codificación
de los genes [56]. Proteínas PPR comprenden principalmente unidades de repetición degeneradas de
35 aminoácidos, designadas P. En Arabidopsis , las proteínas que contienen sólo repeticiones P, y las
proteínas que contienen repeticiones P intercalan con variantes de largo (36 aminoácidos, L) y corta
(31 aminoácidos, S) las repeticiones P, se predice. El número de unidades de repetición varía entre
las proteínas de PPR, y el orden de la P, L y S repite varía en proteínas PPR de la clase PLS. Tres
extensiones C-terminales son exclusivos de la clase PLS. Los dominios C-terminal comprenden
subdominios designadas E, E + y DYW. Estos sólo se observan en las tres disposiciones mostradas. El
programa Predotar (http://urgi.infobiogen.fr/predotar/predotar.html) predice que el 54%
de Arabidopsis proteínas PPR están dirigidos a mitocondrias y que el 19% están dirigidos a
plastidios [56]. Los componentes de las proteínas de PPR no están dibujados a escala.

Se proponen proteínas PPR para funcionar como específicas de sitio proteínas

adaptadoras, de unión a ARN que median interacciones entre sustratos de ARN y las
enzimas que actúan sobre ellas 565758 ( Cuadro 3 ). La expresión génica en orgánulos de
plantas implica múltiples aspectos del metabolismo de ARN, incluyendo los siguientes:
procesamiento en el extremo 5 ', el extremo 3' e internamente; corte y empalme del grupo I
y del grupo II intrones; y la regulación de la traducción [5960] . plastidio vegetal y
transcripciones mitocondrial también requieren C U-a-eventos específicos de ARN de
edición de C-a-U o para codificar la secuencia de aminoácidos correcta [58] . Aunque las
proteínas de PPR mitocondrias orientada superan en número a sus homólogos plastid
orientada, el análisis funcional de las proteínas de PPR es más avanzado para aquellos
dirigidos a plastidios [5758] . Mutaciones de genes nucleares que comprometen la función
de plastidios, aunque en última instancia letal, puede ser estudiado en Z. mays plántulas,
que retienen viabilidad a corto plazo como resultado de las reservas de nutrientes en las
semillas. Además, algunos de Arabidopsis mutantes con disfunción del plástido se pueden
mantener en medio suplementado. Muchas de estas mutaciones interrumpir genes que
codifican proteínas de PPR, y las investigaciones han implicado a las proteínas fenotípicas
PPR en el procesamiento del ARN de plastidios, de intrones y la traducción [57,58]. El
requisito para las proteínas de PPR en la edición del ARN plástido se estableció mediante el
estudio de mutaciones genéticas que alteran un gen PPR-que codifica la
proteína, CHLORORESPIRATORY REDUCCIÓN 4 ( CRR4 ), y abolir de edición de las
transcripciones que codifican plastid NADH deshidrogenasa subunidad D (NDHD)
en Arabidopsis [5861] .

Mecanismos de restauración de la fertilidad

Los estudios de proteínas de PPR plastid orientada revelan funciones probables para las
proteínas de PPR mitocondrias orientada, incluyendo las codificadas por genes
restauradores. Roles en orgánulo el metabolismo del RNA son consistentes con los efectos
de restauración de la fertilidad en la expresión de genes mitocondriales que determinan
CMS ( Tabla 1 ). En la mayoría de los casos, el producto proteico de los locus CMS-
determinantes falla a acumularse en la presencia de un alelo restaurador. La abundancia
disminución de transcritos asociados-CMS, o la ocurrencia de eventos de procesamiento
internos que truncan estas transcripciones, a menudo acompaña a la pérdida de
proteínas. Se desconoce si estos efectos en las transcripciones son la base de la falta de
acumulación de proteínas o son una consecuencia secundaria de la falta de traducir o editar
correctamente una transcripción asociado por CMS en la presencia del alelo
restaurador [41, 43].

Tabla 1: Proteínas PPR Mitocondrias orientada codificadas por loci restaurador

Organismo locus Propiedades de la Efectos sobre el locus refs
restaurador proteína (número de mitocondrial CMS-
unidades de repetición, determinación
proteínas clase una , C-
terminal de dominio b )
Oryza Rf1a 18 c , P d , 70 aa e escisión interna de la [4147]
sativa transcripción
La pérdida de la
proteína ORF79
Rf1b 11, P d , ninguno Disminución de la [41]
acumulación de la
transcripción
La pérdida de la
proteína ORF79
 Petunia RF1 14, P, 48 aa e Disminución de la [45]
hybrida acumulación de la
transcripción
La pérdida de la PCF
proteína ( Petunia
coxfusión)

Raphanus rfk f 16, P, 36 aa g No hay cambios en la [51]

sativus transcripción
La pérdida de la
proteína ORF125
Río f 16, P, 36 aa g No hay cambios en la [4950]
transcripción
La pérdida de la
proteína ORF138
Sorghum RF1 14, PLS, dominio E desconocido h [52]
bicolor
auna clases de proteínas se describen en el Cuadro 3 .

b carboxi (C) -terminal dominios se describen en la caja 3 .

c Esta proteína también se ha modelado con 16 PPRs [4648] .

d La segunda y tercera repeticiones son 36 y 38 aminoácidos (aa), respectivamente.

e Estasproteínas PPR tienen 70% de similitud sobre 48 aminoácidos C-terminales y pueden ser alineados para
tener 30% de similitud con la región C-terminal del dominio E.

f Rfk y Río son idénticos, y su objetivo mitocondrial genes están relacionados [4951] .

g Estos dominios no están relacionados con la E, E + y dominios DYW.

h gen que está asociado con el La CMS-determinación bicolor S. citoplasma que induce esterilidad masculina
designado A1 no se ha identificado de manera concluyente; el alelo restaurador Rf1 se ha asociado con cambios
cualitativos en la normalidad subunidad mitocondrial NADH deshidrogenasa 1 ( nad1 ) y ATP-sintasa
transcripciones de genes de la subunidad (R. Klein, no publicado).

Loci Restaurador en varias especies de plantas están estrechamente ligado a, o idéntica a,

modificadores de transcripción mitocondrial (Mmt genes), que están asociados con el
procesamiento interno de los transcritos mitocondriales normales [11de 121443] . Además,
múltiples PPR-proteína-codificación de los genes están ligados a muchos de los loci
restaurador clonado [41454647484950 . genes restauradores que codifican proteínas PPR
podrían haber evolucionado a través de la duplicación de PPR-proteína-codificación de los
genes que son esenciales para la expresión del gen mitocondrial normal, seguido de
divergencia funcional de los genes duplicados de tal manera que el producto de un gen
actúa en las transcripciones de un CMS-determinación lugar [1253] .

Las plantas terrestres son aerobios obligados y requieren mitocondrias funcionales para la
viabilidad. Probablemente esto impone restricciones a los mecanismos de restauración de la
fertilidad; alelos restauradores que alteran la expresión de los genes CMS-determinación a
expensas de la función mitocondrial se prevé que sea letal. En las últimas etapas del
desarrollo del polen, el requisito para mantener la función mitocondrial podría ser evitado
debido a los altos niveles de la fermentación etanólica [62] . En Z. mays plantas con el tipo
USDA de CMS (CMS-S), el polen se derrumba físicamente relativamente tarde en el
desarrollo ( Figura 1 f), y restauración de la fertilidad es gametofítica. Alelos restauradoras
para CMS-S con frecuencia se recuperan como mutaciones de genes nucleares que
rescatan la función del polen haploide, pero se asocian con fenotipos letales de semillas
homocigotas [11] . Uno de tales alelo, lethal1 restaurador de la fertilidad ( rfl1 ), se asocia
con disminución de la abundancia de la subunidad 1 de la ATP sintasa
mitocondrial [42] . Por analogía con las mutaciones letales homocigotos que resultan en la
pérdida de las funciones de plastidios [57586163] , Loci restaurador para CMS-S podría
permitir la identificación de proteínas de PPR que tienen un papel central en la biogénesis
mitocondrial planta [42] .

Observaciones finales y perspectivas futuras

La naturaleza de los genes mitocondriales que determinan CMS [1112] Y la ocurrencia
común de estos genes en las poblaciones naturales [18k19], Plantea la cuestión de cómo
surgen estos genes y cómo se mantienen a lo largo de la evolución. Potenciales
contribuyentes a este resultado se incluyen los siguientes: la amplificación de subgenomes
que transportan activamente transcrito, antiguos CMS-genes determinantes; la ocurrencia
de eventos de recombinación que ponen no transcrita CMS-determinación de los genes en
la proximidad de los promotores; y la creación rápida de nuevos reordenamientos del
genoma. La importancia relativa de estos procesos se puede tratar mediante la aplicación
de ensayos moleculares para CMS-determinación de genes a las poblaciones de plantas
adecuadas. Uno de estos estudios reveló número de copias cambio de una secuencia
mitocondrial asociada CMS-en parientes silvestres de cultivo de P. vulgaris [64]; Se
necesitan estudios adicionales para evaluar la aplicabilidad general de este
hallazgo. Además de la caracterización de sistemas de recombinación mitocondrial de
plantas descrito recientemente [sesenta y cinco] debe proporcionar información sobre el
potencial de los eventos de recombinación de ADN mitocondrial para crear rápidamente
nuevos genes que determinan el CMS-o para colocar antiguos genes CMS-determinantes
en nuevos contextos en el genoma.

Las investigaciones sobre la base de fenotipos CMS han proporcionado una visión de las
vías de señalización planta mitocondriales. genes nucleares que regulan el desarrollo de
flores se han convertido en objetivos inesperados de señalización
retrógrada [142328303132 . La naturaleza de las señales mitocondriales que influyen en la
expresión de estos genes nucleares todavía requiere resolución. Una hipótesis prometedora
para la investigación en este sentido es que cantidades inadecuadas de ATP inducen
cambios en la degradación dependiente de ATP de las proteínas que regulan el desarrollo
de órganos florales [29]. Alternativamente, las mitocondrias que expresan genes asociados
a CMS potencialmente generan señales retrógradas únicas de naturaleza positiva, tal vez la
participación ROS. Independientemente de las señales, se necesitan más investigaciones
para distinguir los objetivos principales y los componentes de aguas abajo de las vías de
señalización mitocondrial asociados-CMS. Mientras que algunos fenotipos CMS alterar la
estructura floral, otros causan esterilidad masculina a través de procesos degenerativos que
implican PCD o necrosis, Implicando de ese modo la mitocondria en la muerte celular
cascadas de señalización en plantas [3334]. Los reguladores de aguas arriba, señales
mitocondriales y objetivos de abajo están bien caracterizados para las vías de muerte
celular de origen animal [8], Pero muchos de estos componentes no se conservan entre
plantas y animales [9]. CMS mitocondrias asociados planta con fenotipos de muerte celular,
proporcionando de esta manera los sistemas experimentales prometedores para la
investigación de la muerte de células vegetales mitocondrias-señalado.

La mayoría de los genes restauradores clonados codifican proteínas PPR mitocondrias

orientada [2641464749505152 ( Tabla 1 ), pero las funciones precisas de estas proteínas
en las mitocondrias son desconocidos. Los estudios funcionales de proteínas PPR plastid
orientada han revelado que tienen un papel directo en plasto edición de ARN, el
procesamiento, corte y empalme y la traducción [57586163] , Lo que indica que podría
haber muchos posibles mecanismos de restauración de la fertilidad. Otras preguntas sin
resolver implican la naturaleza y función de las proteínas que interactúan con las proteínas
de PPR y si estas proteínas que interactúan podrían constituir una clase adicional de
productos génicos restaurador. Por último, las investigaciones de los genes y los
mecanismos implicados en la restauración de la fertilidad tienen que ampliarse para mejorar
nuestra comprensión de la naturaleza y las funciones de las proteínas núcleo codificada en
la expresión de los genes mitocondriales esenciales.