INSTITUTO TECNOLÓGICO

AMOR MISERICORDIOSO

INDUSTRIA
TEXTIL Y
CONFECCIÓN

INFORME DE LABORATORIO Nº 5
TRABAJO DE : “practica de pipeteo”

CARRERA : INDUSTRIA TEXTIL Y CONFECCION

DOCENTE : Orlando Ponce Canasa
SEMESTRE : 1er Semestre
ESTUDIANTE : Morelia Pérez Vallejos

QUILLACOLLO – COCHABAMBA – BOLIVIA

 “PRACTICA DE PIPETEO”

1. OBJETIVOS:

 Aprender a identificar y manipular correctamente las pipetas graduadas de

laboratorio con los materiales de volumen líquido y al término de la práctica
obtener los conocimientos.
 Comprobar que las mediciones en el laboratorio son susceptibles de error.
 Conocer los pasos recomendados que existen para realizar un pipeteo
correcto
 Reconocer que una fuente común de error es la inadecuada lectura de escala
o meniscos debidos al error de paralaje
 Diferenciar los conceptos de exactitud y precisión

2. ANTECEDENTES:

Los materiales de laboratorio de cristalería del grupo de las pipetas darán el

conocimiento por descubrimiento en su manejo que debe ser exacto en cada una de las
actividades prácticas al momento de utilizarlos teniendo el cuidado del equipo por el
alto grado de sensibilidad, fragilidad, y costo; así mismo el alumno se formara en el
profesional de operar materiales y equipos de laboratorio en los cuales incrustara las
competencias de control laboral NOM 166, 087 Y 005.

Exactitud y precisión

La exactitud está relacionada con la cercanía de la medición al valor real. Es una medida
inversa al error. El error absoluto (E) es la diferencia entre el valor experimental (Vexp) y el
valor real (Vreal).

E = Vreal - Vexp
El error se puede expresar relativo al tamaño de la muestra medida, en porcentaje (E%) o en
partes por millar (Eppmil).
La precisión se relaciona con la concordancia de los resultados experimentales entre sí
mismos, sin relacionarse con el valor real Vreal; se determina en función de la desviación
estándar (s o s), la desviación media o el intervalo de valores. Al igual que el error, también
se puede expresar en forma absoluta o relativa.

EXACTITUD Y PRECISIÓN.

La exactitud de una medición hace referencia a su cercanía al valor que pretende medir.

La precisión está asociada al número de cifras decimales utilizadas para expresar lo medido.

Un instrumento inexacto nos entrega resultados sesgados, "desplazados"; uno impreciso,

resultados "ambiguos", "difusos". sí, por ejemplo, una pesa es exacta si nos entrega el peso
correcto, sin agregarle ni quitarle. Asimismo, es más precisa en la medida que el aparato
usado es capaz de detectar diferencias de peso más pequeñas.

La exactitud y precisión exigibles a una medición, dependerán de los objetivos del estudio
que la utiliza.

La precisión de un resultado estadístico debe estar de acuerdo con la precisión de los datos
originales y con las exigencias propias del proyecto que los usa.

Es fácil cometer el error de responder usando más decimales que los contenidos en las
mediciones iniciales, aumentando artificialmente la precisión por la propia capacidad de
cálculo de los computadores. Por otra parte, es de suma importancia cuidar que, durante el
proceso de cálculo intermedio, no se pierda precisión innecesariamente. Es importante
mantener el máximo posible de decimales, pues esto ayuda a controlar la aparición y
propagación de errores numéricos que invaliden los resultados.

Estos son errores de precisión y exactitud ajenos al proceso de medición inicial y son
introducidos típicamente por los métodos numéricos usados y por la aritmética del
computador que tiene una precisión finita para representar interiormente a los números.

MANEJO DE LAS PIPETAS

Los resultados del pipeteo pueden verse fácilmente afectados por la técnica del usuario. Para
obtener los mejores resultados es necesario adquirir una buena técnica en el pipeteo.
Las pipetas están diseñadas para trasvasar volúmenes conocidos de un recipiente a otro. Los
tipos más comunes de pipetas son: las volumétricas (aforadas), las graduadas y las
automáticas.

• Pipetas volumétricas. Se utilizan para medir exactamente un volumen único y fijo. Estas
pipetas vienen para volúmenes desde 0.5 ml hasta 200 ml.
• Pipetas graduadas. Están calibradas en unidades adecuadas para permitir el vertido de
cualquier volumen inferior al de su capacidad máxima. Los volúmenes oscilan entre 0.1 y
25 ml.

Las pipetas se llenan succionando suavemente con una pera de goma hasta unos 2 cm arriba
de la línea de aforo (en lugar de la pera de goma puede usarse una jeringa o cualquier otro
aparato de succión). Durante la operación de llenado, la punta de la pipeta se debe mantener
sumergida en el líquido. Enseguida se coloca el dedo índice en la parte superior de la pipeta
y se deja salir la solución hasta que el fondo del menisco coincida con la línea de aforo.

Las pipetas deben limpiarse si el agua destilada no resbala de manera uniforme por sus
paredes, sino que se adhiere en forma de gotitas en la superficie interna. La limpieza puede
hacerse con una solución caliente de detergente o con solución de limpieza.

Una vez se vierte el líquido, quedará un pequeño volumen en la punta de la pipeta la cual
ha sido calibrada para tomarlo en cuenta, así que no se debe soplar para sacar esta pequeña
cantidad pues de lo contrario se produce una alteración. No se debe confiar en las pipetas
con las puntas dañadas.
Micropipetas.

Los micropipeteadores son básico en el laboratorio y el rango de operación puede variar de

un modelo a otro, por lo que se dan solo las recomendaciones generales de uso:

 Nunca mueva el ajustador de volumen arriba o abajo del rango del micropipeteador.
 Nunca use el micropipeteador sin puntas.
 Nunca invierta la posición del pipeteador.
 Nunca introduzca el barril del micropipeteador en líquidos.
 Nunca flamee la punta.
 No re-utilice las puntas con diferentes soluciones.

Las mediciones y transferencias de volúmenes exactos y precisos son requisitos básicos de

la bioquímica experimental. Estos procedimientos son hechos utilizando instrumentos como
las pipetas manuales, las micropipetas, las buretas, las probetas o los balones de aforar. Cada
uno de ellos cumple una función en particular dentro del laboratorio pero en algunos casos
estas funciones pueden sobreponerse. El grado de precisión de los mismos puede variar
considerablemente así que la escogencia del instrumento a utilizar para realizar una
medición en particular es un paso crítico para obtener el resultado esperado.

Uso correcto de las pipetas.

Existen básicamente dos tipos de pipetas manuales: aquellas para contener y aquellas para
verter. Aquellas para contener deben ser enjuagadas con el solvente después de haber
dispensado la solución en cuestión. Estas pipetas contienen un volumen exacto de líquido,
el cual debe ser transferido completamente para que la medida sea precisa. Algunas pipetas
de contener de uso común en el laboratorio tienen nombres particulares como Micro-Folin,
Sahli para medición de hemoglobina, Kirk Micro, White-Black Lambda entre otros.

Estas pipetas no pueden ser utilizadas para la preparación de soluciones. Aquellas pipetas
para verter y que deben soplarse están calibradas hasta la punta por lo que deben llenarse
con el líquido a medir, dispensarse, y el líquido remanente en la punta debe soplarse. Son
también conocidas como pipetas Ostwald-Folin o pipetas serológicas. Estas pipetas pueden
ser distinguidas fácilmente ya que sus graduaciones de escala se extienden hasta la punta de
la pipeta. Además, poseen uno o dos anillos esmerilados cerca de la boquilla. El otro tipo
de pipeta para verter es aquella que no se sopla ya que está calibrada entre dos marcas que
no incluyen la punta. Por lo tanto, estas pipetas nunca deben soplarse sino que el volumen a
dispensar debe ser regulado manualmente de forma tal que el líquido a dispensar se
encuentre entre una marca y otra. Algunos nombres comunes que reciben este tipo de pipetas
son: pipeta volumétrica, tipo Mohr o bacteriológica.

Técnica de pipeteo.

El primer paso de una buena técnica de pipeteo es seleccionar la pipeta más apta para el
volumen que se desea medir. Es precisamente este volumen el que determina la pipeta a
utilizar: el volumen a pipetear debe ser lo más cercano posible a la capacidad máxima de la
pipeta. Además, debe considerarse que el volumen mínimo que una pipeta puede dispensar
con precisión es aproximadamente el 10 % de su capacidad.

Una vez seleccionada la pipeta, es necesario cerciorarse qué tipo de pipeta es, si es de soplar
o no. Durante las prácticas de laboratorio se utilizaran pipetas con capacidades máximas que
oscilan entre los 0.1 ml a los 25 ml que pueden ser de soplar o no. Es imperativo que se
familiarice con estos tipos de pipetas y sus escalas.

El siguiente paso es ajustar en la boquilla de la pipeta el dispositivo que se utilizará para

crear vacío y succión.

La pipeta se debe llenar hasta un poco más arriba del inicio de la graduación de la escala y
luego poco a poco se ajusta, frente a los ojos y en posición vertical, al punto exacto de
graduación de la escala (generalmente 0). Recuerde que para líquidos transparentes, el fondo
del menisco del líquido se ajusta a la graduación, mientras que para líquidos no
transparentes, los extremos del menisco se ajustan a la graduación de la escala. Una vez
ajustado el volumen, la pipeta conteniendo el líquido a dispensar es transferida al recipiente
donde se depositará el líquido. En este momento se presiona la pera suavemente en el punto
que permitirá la salida del líquido, manteniendo la pipeta en posición vertical y con la punta
de la misma descansando en el recipiente. Una vez dispensado el volumen, se retira la pera
y la pipeta se descarta cuidadosamente, con la punta hacia abajo en el recipiente para
descartar pipetas. Si por algún motivo debe volver a utilizar una pipeta en la misma solución
en la que fue utilizada, es recomendable dejar la pipeta en posición horizontal sobre la mesa
de trabajo, con la punta de la misma unos centímetros fuera del borde de la mesa.[13]
 Uso correcto de las micropipetas.

Las micropipetas son dispositivos que permiten medir volúmenes pequeños que van desde
1 μl hasta 1 ml o más. Al igual que las pipetas éstas pueden ser para contener o para verter
volúmenes. Durante el curso utilizaremos micropipetas para verter, ya sea un volumen fijo
o un volumen variable. En las de volumen variable, se puede seleccionar un volumen dentro
de un rango de valores determinado. La micropipeta más comúnmente usada en los
laboratorios de análisis fue introducida por la compañía Eppendorf y este nombre se adoptó
de forma genérica para estos dispositivos, aunque hoy en día existen una gran cantidad de
compañías y modelos similares que funcionan bajo un mismo principio de pistones para
operar. Por lo tanto, es aconsejable consultar las instrucciones del fabricante sobre el empleo
correcto de cada modelo. Sin embargo, todas ellas utilizan puntas o “tips” descartables
plásticos que se ajustan al extremo de la micropipeta. En estas puntas de plástico es donde
se deposita el líquido a medir.

Con respecto a la micropipeta multicanal, éstas tienen la ventaja de que se puede pipetear el
mismo volumen al mismo tiempo en varios recipientes a la vez. Estas micropipetas fueron
diseñadas principalmente para los ensayos en formato micro, donde se utiliza también un
plato de plástico de 96 pozos para trabajar esa cantidad de ensayos de forma simultánea. Las
micropipetas multicanal son dispositivos más complejos que las micropipetas unicanal ya
que básicamente pueden repetir varias veces la función que realiza esta última en un solo
momento. Para ello, poseen un solo mango, botón pulsador, etc pero un cono que permite
la inserción de 4 hasta 12 puntas al mismo tiempo.

3. PROCEDIMENTO:

ENTRADA PROCESO SALIDA

MATERIALES Manejo
-preparar las soluciones correcto de
Pipeta -realizar el pipeteo correcto varias veces de forma adecuada pipetas
4. OBSERVACIONES:

En las mediciones de laboratorio no siempre se van a obtener resultados favorables,

no los mismos resultados para una misma determinación, ya que existen distintos
tipos de errores.

En este experimento se observaron dos tipos de errores el de operación e

instrumentales, ya que tendría que haber salido los resultados muy parecido, sin en
cambio los resultados estaban muy dispersos.

Precisión se refiere al acercamiento del conjunto de valores obtenidos de mediciones

idénticas de una magnitud.
Exactitud se refiere a que tan cerca del valor real se encuentra el valor medido.

5. CONCLUSIONES:

Se puede mencionar que el objetivo ha sido cumplido pues se a aprendido a

manejar las diferente pipetas para extracción de líquidos siendo diferente el
manejo de cada pipeta conocimiento que en los siguientes niveles académicos se
utilizaran.

6. BIBLIOGRAFÍA:

[1] Juran, Joseph M. Manual de calidad. Madrid, etc.: McGraw Hill, 2001

[2]http://www.intertek-
labtest.com/services/inspection/chemical_quality_inspection/?lang=es
(27ct/07:05:30p.m.)

[3] www.cca.org.mx/dds/web/ventana/ligas/nlaboratoriom19.htm - 7k -

[4] SABATER TOBELLA, A. VILUMARA TORRALLARDONA; Buenas

Practicas de Laboratorio GLP). Ed. DÍAZ DE SANTOS.