DETERMINACIÓN DE ETANOL EN UNA BEBIDA

ALCOHÓLICA POR CROMATOGRAFÍA DE GASES

Bolívar Esteban (1745103 - 3647), Randolsd Reinel (1441842-3647).

juan.esteban.bolí[email protected] ; [email protected]
Universidad del Valle
Facultad de salud
Departamento de Química; Laboratorio de Química Analítica General
Docente: Harold Díaz Segura
Fecha de práctica: 07 de mayo de 2018
Fecha de entrega: 21 de mayo de 2018

Resumen

Resumen: Se determinó el contenido de etanol en una muestra de aguardiente Blanco del valle, mediante
la utilización de un patrón interno (1-butanol), se prepararon cinco estándares para realizar la curva
de calibración y posteriormente se trató la muestra siguiendo las indicaciones de la guía. Al final se
determinó la concentración de etanol (de dos muestras diluidas de aguardiente) por el método de
cromatografía de gases, dando una concentración de 1.41 ± 0.04 % y 1.53 ± 0,04 % (V/V) con un error del
2,76% y 5.52% respectivamente.
Palabras claves: Etanol, Área, estándar interno, cromatografía.

DATOS, CÁLCULOS Y RESULTADOS

Las mediciones del volumen se realizaron con
Preparación de soluciones estándares para la pipetas volumétricas para cada caso.
curva de calibración.
Tabla 1: Volumen de etanol para cada solución
Se prepararon seis soluciones patrón con patrón preparada
concentraciones v/v de etanol, las cuales contenían
etanol en rangos que iban de 0.5 - 3.0 %, en Solución Volumen de etanol (mL)
matraces de 100 mL que fueron llevados al enrase 1 0.5 ± 0.008 mL
con agua destilada, cada solución contenía 1.00 mL 2 1.0 ± 0.012 mL
de estándar interno de 1-butanol. Los cálculos 3 1.5 ± 0.0004 mL
fueron: 4 2.0 ± 0.015 mL
5 2.5 ± 0.0005 mL
Ecu. 1 𝐶₁𝑉₁ = 𝐶₂𝑉₂
6 3.0 ± 0.01 mL
𝐶₂𝑉₂
𝑉₁ = Nota: Se le calculo la incertidumbre de la sln
𝐶₁
(solución) 3 y 5 dado a que se utilizaron las pipetas
0.5 × 100 de 0.5 y 1 mL para la tercera sln y 0.5 y 2 mL para
𝑉₁ = = 0.5 𝑚𝐿 la cuarta sln.
100
Se siguió los mismos cálculos para preparar los
otros patrones.
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A continuación se muestra en la siguiente tabla los n1+n2+n3+n4+⋯
Ecu 2 ó =
datos de las lecturas de cromatografía Ndatos totales
(cromatograma).
Reemplazando se obtiene
Tabla 1.1: Datos de CG, concentración de etanol
en solución, picos de etanol, picos de estándar = 1,8 % y = 1,24261
internos, y relación de área.
i: para promedio de porcentaje
Área de Relación i: para promedio de relación analito est.int.
Concentración Área de
est. analito/est.
% (v/v) etanol Calculo de cantidades Sxx, Syy y Sxy
Interno interno
0,5 58,927 160,22467 0,36778
Ecu 3 Sxx = ∑(Xi − x)^2
1,0 522,051 715,11786 0,73002
609,889 574,47272 1,06165 Ecu 3.1 Syy = ∑(yi − y)2
1,5
2,0 749,981 527,27661 1,42237 Ecu 3.2 Sxy = ∑(Xi − x)(yi − y)

2,5 893,152 496,38245 1,79932

Así se tiene
3,0 1816,595 875,67395 2,07451
Sxx = 4.3750
Syy = 2.0951
Así, una vez obtenida la relación del área entre el Sxy = 3.0256
etanol y el estándar interno se procede a graficar:
Así se procede a calcular la pendiente de la línea
(m) y la intercepción en y, b:

Sxy
Ecu 4 𝑚=
Sxx

Así se tiene al reemplazar

m = 0.6916

Desviación estándar de la pendiente

𝑆𝑟 2
Figura 1: Grafica de curva de calibración. Relación Ecu 5 𝑆𝑚 = √
𝑆𝑥𝑥
del área en función de la concentración de etanol.

Los cálculos para la curva mostrada en la figura 1

Sm = 0.1581 x 10-3
fueron los siguientes:

Se calcula primeramente tres cantidades Sxx, Syy y Intervalo de confianza al 95% ± t.Sm/√𝑛
Sxy. Para esto calculamos primeramente los Se tiene así 1.8 ± 0.00013
promedios de las concentraciones y las relaciones
de los picos del etanol y el est.int.

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Ecu 6 𝑏 = 𝑦 − (𝑚 . 𝑥) Se empleó la ecuación 1, los cálculos se muestran a
continuación.
Se tiene que b = 0.0324
1.45 % 𝑥 100 𝑠𝑙𝑛
𝑉(𝑑𝑒 𝑎𝑔𝑢𝑎𝑟𝑑𝑢𝑖𝑒𝑛𝑡𝑒) =
Desviación estándar del intercepto 29 % aguardiente

∑ 𝑋𝑖 2 = 5 mL de aguardiente
Ecu 7 𝑆𝑏 = 𝑆𝑟 √
𝑁 ∑ 𝑋𝑖 2 –(∑ 𝑋𝑖)2 Los datos cromatográficos se muestran en la
siguiente tabla.
Se tiene que Sb = 0.0243
Tabla 2: Datos de CG, concentración de etanol en
Se tiene intervalo de confianza al 95% así solución, picos de etanol, picos de estándar
internos, y relación de área.
1.24261 ± 0.0194
Relación
La desviación estándar de la regresión se calculo Muestra Etanol Est. Int. etanol/est.
así. int
1 366,82544 388,48599 0,94424
𝑆𝑦𝑦 − 𝑚2 𝑆𝑥𝑥 2 429,79895 418,72101 1,02645
𝑆𝑟 = √
𝑁−2
La determinación del por ciento de etanol en la
“muestra desconocida de aguardiente” se calculo
Al reemplazar y operar se obtiene así:
Sr = 0.0263 Con los datos de la curva de calibración de la
pendiente (m), el intercepto (b) y el cromatograma
A continuación se calcula el límite de detección y (se realizan dos determinaciones).
cuantificación así
Ecu. 9
Ecu. 8 y = 0.6916 x + 0.0324
LD = (k.Sb) + b k=3
LD = (k.Sb) + b k=10 Se despeja y se reemplaza, así se obtiene x0
LD = 0.1053 0.94424 + 0.0324
LD = 0.2754 𝑥1 =
0.6916
Preparación de muestra x1 = 1.4121 %
x2 = 1.5310 %
La muestra que se analizó fue aguardiente blanco el
cual contenía 29 % de alcohol; la sln que se prepara A continuación se procede a hallar su desviación
es a una concentración de 1.75% (concentración estándar así:
final 1.45%) de alcohol, para ello se mide 6.03 mL
(medición real 5.0 ± 0.045 mL) de aguardiente en
un matraz de 100 ± 0.15 mL el cual se afora con Ecu. 10
agua destilada, a cada sln se le añadió además 1.00
± 0.012 mL de 1-butanol. Se preparan dos 𝑆𝑟 1 1 (𝑦𝐶 −𝑦)2
𝑆𝑥𝑜 = √ + +
soluciones a concentración de 1.45%. 𝑚 𝑀 𝑛 𝑚2 𝑆𝑥𝑥
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 2.262
3.211 min 0.0280 0.0351
M = 1dato; n = 6datos; c1 = 0.94424 min
Se reemplaza y se obtiene .
Estos datos se promedian y se obtiene
Sx1 = desviación estándar para la primera muestra
Sx1 = desviación estándar para la segunda muestra Tabla 3.1: Datos (con los que se va a trabajar
las ecuaciones)
Sx1 = 0.0413 %
Sx2 = 0.0415 % tr W
1-
Etanol 1-Butanol Etanol
Para ambas muestras su desviación es: Butanol
2.258
M = 2; c0 = 0,98535 3.208 min 0.0257 0.0331
min
SX0 = 0.03178 %
Ecu. 12
Error relativo 𝑡 2
𝑁 = 16 ( 𝑟 )
𝑊
Ecu. 11
|𝑣𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑚𝑒𝑑𝑖𝑑𝑜−𝑣𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑡𝑒ó𝑟𝑖𝑐𝑜|
Se reemplaza y se obtiene
𝐸% = 𝑥 100
𝑣𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑡𝑒ó𝑟𝑖𝑐𝑜
Para etanol N = 123,509.855
Para 1-butanol N = 150,290.910
Valor medido Valor teórico
Se suman y se obtienen Nt
x1 = 1.4121 % x1 = 1.45 % Ntotal = 273,800.765
x2 = 1.5310 % x2 = 1.45 %
Ecu. 13 H = L/N
E%x1= -2.61% 30 𝑚𝑡𝑠
E%x2= 5.59 % 𝐻 = = 1.096 𝑥 10^ − 4
273,800.765

Eficiencia de la columna Nota: Desde la ecuación 1 hasta la ecuación de 10

se utilizó el libro de Skoog, Fundamentos de
Para determinar la eficiencia de la columna se química analítica [1].
tiene en cuenta el número total de platos teórico
N y la altura equivalente a un plato teórico H, ANÁLISIS DE RESULTADOS
así:
La cromatografía es una técnica usada en la
separación de sustancias químicas que difieran en
Tabla 3: Datos teóricos conductas partitivas de una fase móvil y de una fase
tr W estacionaria para separar los componentes en la
1- mezcla. La muestra se transporta por medio de una
Etanol 1-Butanol Etanol corriente de gas a través de una columna empacada
Butanol
2.255 con un sólido o tal vez recubierta con una película
3.205 min 0.0234 0.0311 de un líquido. Gracias a su efectividad, su alta
min
sensibilidad y la facilidad para separar y cuantificar

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mezclas, la cromatografía es uno de los análisis más detector FID (detector de ionización en llama) el
importantes de la química. cual mezcla la muestra con hidrógeno y aire para
Su uso permea diferentes esferas en la actualidad, después quemarla y producir iones, que se
tales como la industria para el monitoreo de separarán por una diferencia de potencial, que
procesos automatizados; los servicios de acueducto será medida por el electrodo.2
y agua potable de una ciudad, en la parte clínica El cromatograma obtenido mostro dos picos para
para la detección de compuestos y su concentración cada estándar, así como para la muestra; esto se
en cuerpo etc. En química, es usualmente empleado
debe a que todos se prepararon con cierta
para la purificación de compuestos, para la
cantidad de butanol que es un compuesto con
determinación de constantes termoquímicas tales
como calores de solución y vaporización, presión características similares en composición con el
de vapor y coeficientes de actividad. etanol, con el objetivo de obtener una referencia y
evitar cualquier incertidumbre inducida por la
En el laboratorio se determinó la concentración de manera en que se inyecta la muestra. Así pues el
etanol en una muestra alcohólica, mediante un primer pico obtenido es de etanol, puesto a que
cromatógrafo de gases “HP INNOWAX”. Consiste este es de más bajo peso molecular y de mayor
en una corriente de gas inerte (Helio) como fase movilidad, mientras que el butanol es el último en
móvil. La salida del gas a unas 150-180 atm se da salir por ser más pesado.
gracias a una serie de mecanismo de mano-
reductores, que regulan lo suficiente para que la Y teniendo en cuenta los resultados obtenidos y el
presión no supere las 4 o 5 atm al llegar a la porcentaje de error, podemos decir que la práctica
siguiente pieza, el inyector. El inyector es el fue exitosa, y los datos que arrojo el análisis fueron
encargado de introducir la muestra en la columna exactos y precisos.
de gas. La columna puede ser de vidrio, pero se
confecciona más habitualmente de otros CONCLUSIONES
materiales (cobre, aluminio, acero inoxidable) con
un recubrimiento interno, el cual posee la fase  La cromatografía de gases es un método
estacionaria necesaria para realizar la separación analítico bastante sencillo y preciso en lo que se
de la mezcla, en esta práctica se uso (5% fenil)- refiere a la separación y cuantificación de
metilpolisiloxano en la que el parte de los átomos compuestos.
de silicio se encuentran enlazados con un anillo
fenilo, lo que produce una fase no polar que  Las principales fallas en este tipo de análisis, se
da en el manejo del equipo y en la inyección de
separa por interacciones tipo London; cabe
la muestra a estudiar.
resaltar que la forma correcta de inyectar la
muestra, es ejerciendo un presión continua y
 Estos tipos de análisis son bastante rápidos y
rápida para no producir picos pegados y errores en por su fácil manejo, disminuye la probabilidad
la cuantificación; La columna se encuentra dentro de verse afectado por un error humano.
de un horno, cuya función consiste en mantener la
temperatura deseada, que dependiendo del  La cromatografía cobra su importancia, por las
programa nos puede interesar que permanezca características de sus resultados (precisión,
constante, o bien que varíe de una forma u otra simplicidad de uso) y porque este análisis puede
con el tiempo. A la salida de la columna se hacerse para un gran espectro de compuestos,
encuentra el detector, que es el encargado de por lo cual permea varias ramas de la vida
medir la diferencia de potencial, usando productiva de cualquier sociedad.
electrodos de referencia específicos para
compuestos orgánicos. El detector usado fue un

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PREGUNTAS 2. Que características debe tener un
compuesto para ser analizado por
a) Con base a la información suministrada de la cromatografía gaseosa?
columna, describa y explique de que está
compuesta la fase estacionaria. Cuales R// Los compuestos que se quieran separar por
interacciones (soluto-fase estacionaria) pueden método de cromatografía de gases solo deben
darse con la muestra estudiada? Dichas tener 2 condiciones, tener un peso molecular
interacciones, explican el orden de la elución menor de 1000 a una temperatura máxima de
observado? trabajo de aproximadamente 400°C, y que la
composición tenga una estabilidad térmica
manejable.3gg
R// Usamos un recubrimiento de (5% fenil)-
metilpolisiloxano, el cual es una película REFERENCIAS
polimérica en la que el 5% de los átomos de silicio
[1] Skoog. Fundamentos de química analítica. -
se encuentran enlazados con un anillo fenilo, Novena edición. 9ed. Ma Graw – hill. 2015.
obteniéndose una fase no polar que separa por
interacciones de London.
[2] Skoog, D. Principios De Análisis Instrumental.
b) Calcular la eficiencia de la columna en
5ta Edición, McGraw-Hill, interamericana de
términos del número total de platos teóricos
(Nt) el número de platos por metro (N/L) y la España, 2001. pp. 765-766.
altura equivalente a un plato teórico (H=L/N)
30 𝑚𝑡𝑠 [3]http://www.mncn.csic.es/docs/repositorio/es_E
R// 𝐻 = = 1.096 𝑥 10^ − 4
273,800.765 S/investigacion/cromatografia/cromatografia_de_g
ases.pdf
c) ¿Qué características debe tener un patrón
interno para ser usado en una cuantificación
por cromatografía de gases?
R// El patrón interno ha de ser un compuesto de
naturaleza similar al analíto a determinar, pero que
no esté presente en la muestra.

PREGUNTAS EXTERNAS
1. Cuál es la importancia de la cromatografía
de gases aplicada a los análisis clínicos
(investigue sobre las principales
aplicaciones de esta técnica en este campo)
R// La cromatografía de gases en el campo de
análisis clínico cobra importancia por su
capacidad para separar mezclas orgánicas
complejas, compuestos organometálicos y
sistemas bioquímicos. Esta técnica se utiliza
principalmente en las pruebas de alcoholemia,,
toxicológicas, y cuadros hemáticos.

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