UNIVERSIDAD NACIONAL

FEDERICO VILLARREAL

FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y

MATEMÁTICA
(FCCNM)
ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGÍA
(EPG)

PRACTICA N° 8
ACCIÓN ENZIMATICA - BIOCATALIZADORES

INTEGRANTES:

QUISPE HUACAYCHUCO JACKELIN NELLY

PRUDENCIO RAMIREZ LUIS

MACEDO GALDO VICTOR

2017 - AGOSTO
LIMA
 ACCIÓN ENZIMÁTICA: BIOCATALIZADORES

I. INTRODUCCIÓN:

El término cinética enzimática implica el estudio de la velocidad de una

reacción catalizada por una enzima y los efectos que pueden tener factores como
los inhibidores. Uno de los principales estudios que se realizan en una enzima es
medir el efecto en la velocidad de la reacción cuando se modifican las
concentraciones del sustrato y se mantienen constantes la concentración de
enzima, el pH, la fuerza iónica del medio, la temperatura, entre otros.

Se evalúa la influencia de estos factores en la reacción catalizada por enzimas

con la finalidad de determinar los intermediarios en una reacción y el papel que
juegan en la reacción enzimática, es decir, para predecir mecanismos de reacción.
Es esencial entender estos mecanismos para desarrollar nuevas herramientas
moleculares, por ejemplo, para combatir enfermedades en las que se conoce a la
enzima que la produce. También es usual medir la actividad enzimática con
diferentes sustratos para entender su especificidad o bien, medir la actividad de la
enzima de diferentes tejidos u organismos para entender cómo las diferencias en
actividad están relacionadas con la función y/o la fisiología del organismo del que
proceden.

II. MARCO TEORICO

 Los enzimas son biomoléculas especializadas en la catálisis de las reacciones
químicas que tienen lugar en la célula. Son muy eficaces como catalizadores ya
que son capaces de aumentar la velocidad de las reacciones químicas mucho
más que cualquier catalizador artificial conocido, y además son altamente
específicos ya que cada uno de ellos induce la transformación de un sólo tipo de
sustancia y no de otras que se puedan encontrar en el medio de reacción.

FACTORES QUE AFECTAN A LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA:

Diferentes factores ambientales pueden afectar a la actividad enzimática.

Destacaremos dos: el pH y la temperatura.

 EFECTO DEL pH:

El pH es otro factor que influye en la actividad enzimática, debido a que el pH

influye en la ionización de los grupos funcionales de los aminoácidos que forman
la proteína enzimática. Cada enzima realiza su acción dentro de un determinado
intervalo de pH, dentro de este intervalo habrá un pH óptimo donde la actividad
enzimática será máxima. Por debajo del pH mínimo o por encima del pH máximo
el enzima se inactiva ya que se desnaturaliza. En la mayoría de las enzimas el pH
óptimo está próximo a la neutralidad, aunque hay excepciones.

La mayoría de los enzimas presentan un pH óptimo para el cual su actividad es

máxima; por encima o por debajo de ese pH la actividad disminuye bruscamente.
Este efecto se debe a que, al ser los enzimas de naturaleza proteica, al igual que
otras proteínas, se desnaturalizan y pierden su actividad si el pH varía más allá de
unos límites estrechos. De ahí la conocida importancia biológica de los sistemas
tampón.

En la mayor parte de los casos el pH óptimo está próximo a la neutralidad, en

consonancia con el pH intracelular, pero existen enzimas con pH óptimo muy
diverso según sea el pH del medio en el que habitualmente actúan. Por último
existen algunos enzimas a los que el pH no afecta en absoluto.
  EFECTO DE LA TEMPERATURA:

Al igual que ocurre con la mayoría de las reacciones químicas, la velocidad de

las reacciones catalizadas por enzimas se incrementa con la temperatura. La
variación de la actividad enzimática con la temperatura es diferente de unos
enzimas a otros en función de la barrera de energía de activación de la reacción
catalizada. Sin embargo, a diferencia de lo que ocurre en otras reacciones
químicas, en las reacciones catalizadas por enzimas se produce un brusco
descenso de la actividad cuando se alcanza una temperatura crítica.

Este efecto no es más que un reflejo de la desnaturalización térmica del enzima

cuando se alcanza dicha temperatura. La Temperatura influye en la actividad
enzimática. En general por cada 10ºC que aumente la temperatura la velocidad de
la reacción aumenta de 2 a 4 veces. Esta regla se cumple hasta que
la temperatura alcanza un valor máximo (T° óptima) donde la actividad es
máxima. Esto se debe a que al aumentar la T° aumenta el movimiento de las
moléculas y, por tanto aumenta la probabilidad de encuentro entre el S y el E.

Si la T° aumenta por encima de la T° óptima, disminuye e incluso cesa la actividad

enzimática debido a que la enzima se desnaturaliza. Cada enzima posee una T°
óptima, en las enzimas humanas suele estar alrededor de 37ºC. Los animales
poiquilotermos debido a que carecen de mecanismos para regular la Tª corporal,
se ven obligados a hibernar en la estación fría pues la actividad de sus enzimas
debido a las bajas temperaturas es muy baja.

INHIBIDORES:

Son compuestos químicos que se unen al enzima, en distintos puntos del

mismo y disminuyen o incluso impiden su actividad. Estos compuestos pueden ser
de distintos tipos: iones, moléculas orgánicas y a veces el producto final de la
reacción. A la acción que realizan se la denomina inhibición. La inhibición puede
ser:

Inhibición irreversible: Cuando el inhibidor impide permanentemente la actividad

enzimática, bien porque se une de forma permanente con grupos funcionales
importantes del centro activo o bien porque altera su estructura. A estos
inhibidores se les denomina venenos y a la inhibición que realizan se la denomina
envenenamiento del enzima. Ej. La penicilina que inhibe las enzimas que
sintetizan la pared bacteriana. El ión cianuro actúa sobre la citocromo oxidasa
(enzima respiratorio).

Inhibición reversible: El inhibidor se une al enzima de forma temporal mediante

enlaces débiles e impide el normal funcionamiento del mismo, pero no la inutiliza
permanentemente.

III. MATERIALES Y MÉTODOS:

3.1 MATERIAL BIOLÓGICO:

  Arena
 Hígado de pollo
 Papa rallada
 Trozos de papayas

a. MATERIAL DE LABORATORIO:

 Tubos de ensayo
 Bagueta
 Astilla de ignición
 Fósforo
 Agua oxigenada
 Dióxido de manganeso

EXPERIENCIA 1:
 1. Coger dos tubos de ensayo y colocar en cada uno de ellos 2 ml de
agua oxigenada.

2. Colocar en un tubo de ensayo 1 pequeña cantidad de arena y en el

otro tubo 2 gr de Dióxido de manganeso.

3. Observar y anotar.

EXPERIENCIA 2:

1. Colocar en 2 tubos de ensayo 2 ml de agua oxigenada.

2. Luego agregar en los tubos I y II :

a. Hígado
b. Papa

3. Observar y anotar.

EXPERIENCIA 3:

1. Utilizar el liquido del tubo que contiene, el hígado de la experiencia

anterior.

2. Cortar una porción nueva en trocitos y agregar un trocito en cada

tubo.

3. Añadir en uno de los tubos H2O2.

4. Observar y anotar.

IV. RESULTADOS
 CARACTERÍSTICAS OBSERVADAS

1. EL EFECTO DE UN CATALIZADOR
Tubo de ensayo con arena(construcción) y
H2O2
Se observo efervescencia(O2)
la reacción era continua y constante.
Presencia de catalaza

Tubo de ensayo con arena(jardin) y H2O2

Se observo efervescencia (O2)
la reacción era continua y constante.
Presencia de catalaza
 Tubo de ensayo con MnO2 y H2O2
Se observo mucha efervescencia (O2)
la reacción inmediata
Precipitación del Mn

2. EFECTO DE UNA ENZIMA

Tubo de ensayo con Higado y H2O2
Mucha efervecsencia
Gran cantidad de catalaza
combustión rápida
reacción violenta
 Tubo de ensayo con papa y H2O2
poca efervescencia
Gran cantidad de catalaza
combustión lenta
reacción lenta y constante.

3. REUTILIZACIÓN DE UNA ENZIMA

Tubo de ensayo con H2O2 reutilizado y
Hígado nuevo
Siguió habiendo reacción
Se observo efervescencia(O2)
La reacción menos violenta y constante
presencia de catalaza
 Tubo de ensayo con H2O2 nuevo y Hígado
reutilizado
Siguió habiendo reacción
Se observo efervescencia(O2)
La reacción menos violenta y constante
presencia de catalaza

4. DEGRADACIÓN DEL ALMIDON POR LA

AMILASA SALIVAL
Tubo de ensayo con saliva y Lugol
Color de la solución es marrón, propio del
Lugol, no hubo reacción ya que no cambia
a un rojo ladrillo
Tubo de ensayo con saliva y Benedict
Hubo reacción ya que el benedict está
cambiando de color a celeste tenue, pero
es lento
 V. DISCUSIÓN

1.La arena se mojaría más no ocurriría reacción, el peróxido de hidrógeno o agua

oxigenada solo reacciona con materia orgánica y la arena seca generalmente solo
contiene carbonatos (de sodio en mayor proporción) lo cual la hace
infértil.Reacción:

2 H2O2 -------> 2H2O + O2

2. Si tienes agua oxigenada(H2O2) y dióxido de manganeso(MnO2) obtienes agua

y oxígeno, ya que el Mn actúa como catalizador, por lo tanto, participa, pero no
reacciona con los otros compuestos. Esto se demuestra mediante la siguiente
ecuación:

2H2O2(aq) + 2MnO2(s) -------> 2Mn(s)+ 2H2O(aq) + 3O2(g)

3. Las moléculas de Agua oxigenada son rápidamente rotas por la enzima

catalasa, enzimas las cuales están contenidas en los peroxisomas. Convirtiendo al
agua oxigenada en compuestos no tóxicos como lo son el oxígeno que es
desprendido durante la efervescencia que seguro observaste cuando le agregaste
agua oxigenada al hígado y también se forma agua.

2H2O2 + CATALZA -------> 2H2O + CATALAZA + O2

5.Un catalizador es una sustancia que, incluso en cantidades muy pequeñas,
modifica enormemente la velocidad de una reacción química, sin que ella
misma sufra un cambio químico permanente en el proceso.

Consideremos la descomposición del peróxido de hidrógeno (agua oxigenada)

en agua y oxígeno. En ausencia de catalizador esta reacción se realiza muy
lentamente. Muchas diferentes sustancias son capaces de catalizar la reacción,
entre ellas la papa. El agua oxigenada se descompone gracias a la catalasa, una
enzima presente en la patata.

2H2O2 + CATALZA -------> 2H2O + CATALAZA + O2

6. El Lugol es un reactivo que consiste en una solución de I2(iodo)/IK que permite

identificar la presencia de almidón con un cambio de color el color azul violáceo
significa presencia de almidón. En la saliva tenemos presente una enzima que se
denomina amilasa(Ptialina) cuya acción es hidrolizar el almidón por lo tanto al
almidón en presencia de esta enzima se va a hidrolizar a glucosa y por lo tanto no
va a haber reacción positiva con el Lugol ya que el almidón ya no está más.
7. El reactivo de Benedict contiene soluciones de carbonato de sodio, sulfato de
cobre, y citrato de sodio. El Na2CO3 confiere a la solución un pH alcalino
necesario para que la reacción pueda llevarse a cabo. El citrato de sodio mantiene
al ion Cu2+ en solución ya que tiene la propiedad de formar complejos coloreados
poco ionizados con algunos de los metales pesados. Con el cobre produce un
complejo de color azul.

VI. Conclusiones:
  Podemos comprender la importancia que tiene la catalasa en los
organismos vivos, protegiéndonos contra agentes infecciosos
 Las enzimas contribuyen a una acción mucho eficaz o en otros casos a
descomponer algunos compuestos moleculares, con el fin de hacerlos
asimilables, para el organismo
 Comprendemos la especificidad de las enzimas a través del sitio activo,
que bien puede encajar perfectamente o puede cambiar de forma
(adaptación inducida).

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

 Bioquímica. 2015. BIOQUIMICA: PRÁCTICA DE LABORATORIO NO. 1
HIDRÓLISIS ENZIMÁTICA DEL ALMIDÓN y PRUEBA CUALITATIVA DE
GLUCOSURIA. Disponible:
http://www.medicinaresources.com/medicinaresources_staticfiles/bioquimic
a/laboratorios/1%20lab-1-bioqui-2015.pdf
 Fq- Experimentos. 2014. 305 Agua oxigenada y patata. Disponible:
http://fq-experimentos.blogspot.pe/2014/05/305-agua-oxigenada-y-
patata.html
 Experimentos. 2016. Reacción química de descomposición del agua
oxigenada. Disponible: https://www.experimentosfaciles.com/hacer-una-
reaccion-quimica-de-descomposicion-del-agua-oxigenada/
VII. Anexos

Según los
descubrimient
os
anteriormente
demostrados,
el sitio activo
o centro
activo, tendrá
la capacidad
de encajar
(Emil Fischer -
1894) o
cambiar de
forma
( Koshland, 19

COMPLEJO ENZIMA-SUSTRATO
Uno de los
componentes básicos
de todo ser vivo, son
las proteínas estos
están conformado por
la combinación de 10
a 100 aminoácidos
unidos mediante un
enlace peptídico.
CUESTIONARIO

1. ¿Qué es el Centro activo?

El centro activo es aquella parte de la enzima que va a reaccionar en los
reactantes o productos de una reacción química. Esta se forma en base a
la estructura terciaria de las proteínas, pudiendo bien encajando o bien
cambiando de forma.

2. ¿Cómo actúa el complejo enzima – sustrato?

En toda reacción química , en la parte intermedia del proceso enzimático ,

es decir cuando la enzima se une por medio del sitio activo al sustrato
para conformar un producto , en esta etapa habrá un ordenamiento de las
moléculas, para un mejor choque entre ellas.

3. ¿Por qué fue más violenta la reacción del hígado con el peróxido de
hidrogeno? Elabore un cuadro comparativo de cada reacción.

Hígado Papa
Mínima Máxima
Cantidad
Color Consistente Transparente
Rápido Lenta
Velocidad

La reacción fue más violenta con el hígado , debido a que este por tener
mayor capacidad de reservar compuestos orgánicos , así como de tener la
función de detoxificación estos necesitaran de una mayor abundancia de
la enzima catalasa , para protegernos contra los agentes infecciosos , a
diferencia de la papa que solamente se encarga de la reserva de
alimentos.

¿Cuál es la función de la amilasa?

Una de las funciones principales de la amilasa es desdoblar la molécula de

almidón, para convertirla en una molécula de glucosa y un disacárido, con
el fin de facilitar el proceso de digestión.

4. ¿Cuál es la estructura del almidón?

El almidón está conformado por la unión de muchas moléculas de glucosa

que se disponen en forma ramificada y cuya uniones , se encuentran entre
los carbonos 1---4.
.
5. Dibuje la acción de la amilasa sobre el almidón
6. ¿Cuál es la acción del Benedict? ¿Para qué se usa en este proceso?

El benedict nos ayudará a reconocer los azucares reductores, como la

glucosa que se generara al hidrolizarse el almidón producto de la amilasa,
tornándose este de un color rojo ladrillo.