Silenciamiento Génico

“Año del Buen Servicio al
Ciudadano”
Facultad De Ciencias Biológicas
Escuela Profesional De Biología
ALUMNA: BENITES RUÍZ, STEFANY GERALDINE
CICLO: X- “A”
MESA: 05
TEMA: Silenciamiento génico
DOCENTES:
 Dr. Eloy López
2017
Silenciamiento génico
Los términos “silenciamiento génico” y “silenciamiento génico mediado por ARN” son
utilizados habitualmente para describir el “apagado” de un determinado gen, y es un mecanismo
general que ocurre durante la regulación de la expresión génica. La expresión génica puede ser
regulada tanto a nivel transcripcional como post transcripcional. El silenciamiento génico
transcripcional (en inglés, Transcriptional Gene Silencing o TGS) es el resultado de la
modificación del ADN o de las histonas presentes en la cromatina. Estas modificaciones crean
un ambiente de heterocromatina alrededor de un cierto gen, que impide el acceso de la
maquinaria transcripcional (factores de transcripción, ARN polimerasas, etc.) reprimiendo la
expresión de dicho gen. El silenciamiento génico post transcripcional (en inglés, Post-
Transcriptional Gene Silencing o PTGS), en cambio, es un mecanismo que implica la
degradación de un ARN mensajero específico (ARNm). La destrucción de este ARNm impide su
normal traducción y consecuentemente no se sintetiza la proteína correspondiente. Tanto el TGS
como el PTGS son mecanismos que se encuentran involucrados en la regulación de la expresión
de genes endógenos que participan en los procesos celulares, así como también en las
respuestas de las plantas a estreses bióticos y abióticos.
En un principio, el silenciamiento génico fue descrito en plantas como un mecanismo mediante
el cual la maquinaria celular desencadenaba la degradación de un ARNm determinado. Se
demostró que esta degradación era “específica de secuencia”, ya que sólo eran degradadas las
moléculas de ARN que contenían una secuencia en particular, y no otras. Posteriormente, este
fenómeno también se denominó ARN de interferencia o ARNi. El mecanismo se describió por
primera vez en petunias transgénicas, en las que se pretendía mejorar el color de las flores. Para
eso se introdujeron copias adicionales de un gen que codificaba una enzima clave para la
producción de pigmentos en los pétalos. Sorprendentemente, muchas de las plantas que tenían
copias extras de dicho gen no mostraron el color violeta o rojo intenso esperado. Por el contrario,
aparecieron flores parcialmente o completamente blancas (Fig. 1). Los investigadores notaron
que en las plantas transgénicas tanto el gen endógeno como el introducido habían sido
“apagados”, y aunque desconocían el mecanismo molecular involucrado, llamaron a este
fenómeno como “co-supresión de la expresión génica”.
Algunos años más tarde un grupo de virólogos vegetales observó un fenómeno similar. El
objetivo de su trabajo era mejorar la resistencia de las plantas al ataque de ciertos virus. En ese
tiempo ya se sabía que las plantas que expresaban proteínas virales eran más resistentes a la
infección. Dichos científicos observaron que las plantas que contenían sólo un pequeño
segmento del ARN viral, y que no codificaba ninguna proteína, eran igualmente resistentes al
ataque del virus De esta manera, concluyeron que el ARN viral producido a partir de transgenes
también podía proteger a la planta de nuevas infecciones virales. Luego realizaron el experimento
inverso: insertaron secuencias cortas de genes de la planta en el genoma del virus. Infectaron
plantas con el virus modificado y observaron que la expresión de ese gen de la planta era
suprimida. Este fenómeno se llamó “Silenciamiento Génico Inducido por Virus” (en inglés, Virus-
Induced Gene Silencing o VIGS).
Desde que se descubrió este mecanismo, diferentes trabajos científicos han demostrado las
bases moleculares que controlan la expresión de secuencias endógenas y exógenas en plantas.
En las plantas, como en otros organismos, el silenciamiento es gatillado por la presencia de
ARNdc y mediado por ARN pequeños de interferencia (si ARN). El ARNdc puede generarse por
la presencia de transgenes, la expresión de genes endógenos, por la infección de virus, o bien
por medio de la introducción exógena. Como se dijo previamente, el silenciamiento génico se
produce principalmente a nivel transcripcional y post transcripcional. Sin embargo, se han
descubierto otras vías por las cuales se puede inducir el silenciamiento génico. Una de ellas
corresponde al silenciamiento génico post transduccional, en la cual se reprime la traducción de
los ARNm. El otro mecanismo, descubierto hasta el momento en protistas, involucra la
eliminación de regiones de ADN. También las vías de silenciamiento génico se pueden clasificar
según el tipo de ARN pequeño involucrado. Las vías pueden estar mediadas por micro ARNs,
ARN pequeños de interferencia endógenos (si ARNs) o ARN pequeños derivados de virus (vi
ARNs).
Aplicaciones Biotecnológicas
Más allá de las funciones fisiológicas que se le atribuyen al silenciamiento génico, como la
defensa antiviral y la regulación de la expresión génica, este fenómeno puede ser utilizado
además como herramienta para identificar genes “blanco” para el desarrollo de nuevas drogas,
eliminar la función de un gen en particular, y hasta potencialmente eliminar la expresión de un
gen responsable de una cierta enfermedad. También es posible utilizar el silenciamiento génico
como una herramienta para generar mejores cultivos y alimentos, como, por ejemplo, plantas
resistentes a virus, mejoras en la calidad de los aceites, y otras mejoras nutricionales en granos
y tubérculos.
1. La rosa azul
La obtención de rosas azules fue anhelada durante siglos, y aunque parecía imposible
de lograr por las técnicas tradicionales de mejoramiento, las nuevas técnicas
biotecnológicas han permitido cumplir con este ambicioso objetivo. En Australia, una
organización de investigación científica e industrial (CSIRO) fue capaz de obtener
exitosamente rosas azules, en conjunto con un grupo japonés. Para hacerlo recurrieron
a la siguiente estrategia (Fig. 3): 1. “Apagaron” la producción del pigmento rojo silenciando
el gen de la enzima dihidroflavonol reductasa (DFR) original de la rosa. 2. Insertaron un
gen de la planta de pensamiento para la producción del pigmento azul (o delfinidina). 3.
Restituyeron la actividad de la enzima DFR por introducción del gen de la DFR del lirio
azul.
Figura 2: Etapas en el desarrollo para obtener una rosa azul.

2. Plantas de tomates resistentes a la enfermedad de agalla de la corona
La agalla de la corona es una enfermedad causada por la bacteria del suelo
Agrobacterium tumefaciens, que tiene la habilidad de transferir su propio ADN al genoma
de la planta infectada, en un proceso conocido como “transferencia horizontal”. Una vez
que los genes bacterianos son incorporados al genoma de la planta, se expresan y
producen proteínas que desencadenan la formación de tumores. Estos tumores sirven de
hábitat y proveen alimento a las bacterias, pero a su vez dañan la planta bloqueando el
transporte de nutrientes y agua a lo largo del tallo, disminuyendo el rendimiento, la
productividad y la calidad de los frutos. Un grupo de investigadores de la Universidad de
California empleó el silenciamiento génico para bloquear la expresión de dos genes
bacterianos clave para la formación de los tumores. Mediante esta técnica, obtuvieron
plantas de tomate que eran infectadas por la bacteria, pero que no producían las
hormonas necesarias para la formación de tumores
Figura 3: Obtención de plantas de tomate resistentes a la agalla de la corona.

Tomado de Matthew et al, PNAS, 2001 vol. 98 (23) 13437–13442.
3. Papas resistentes al pardeamiento

Durante la cosecha mecánica de la papa se pierde cerca del 20% de la producción, debido a la
oxidación. Una vez que las papas se oxidan cambian su sabor y aspecto, y disminuye la cantidad
de materia aprovechable. Este problema no es solamente estético, sino también nutricional, e
inclusive pasa a ser un problema sanitario para productos derivados. Para evitar el pardeamiento,
las papas son tratadas con antioxidantes y conservantes, algunos de los cuales pueden dañar la
salud y no son aceptados en todos los países. En el Instituto de Investigaciones en Ingeniería
Genética y Biología Molecular (INGEBI – CONICET), el grupo de investigadores conformado por
Briardo Llorente, Guillermo Alonso, Fernando Bravo Almonacid, Héctor Torres y Mirtha Flawiá,
desarrolló plantas de papa que expresan un ARNi destinado a silenciar el gen de una enzima
llamada polifenol oxidasa (PPO), responsable del fenómeno de oxidación o pardeamiento. Los
tubérculos provenientes de las plantas genéticamente modificadas no sufren el “pardeamiento”
debido a la oxidación al ser cortados o golpeados. Gracias a dicha modificación estas papas se
pueden exponer al aire durante tiempos prolongados y en comparación con una papa común,
también resultan resistentes al proceso de oxidación enzimática
Figura 4: Rodajas de papas
expuestas al aire durante 0, 12, y 24
hs. Luego de 12 hs se observa
oxidación en las rodajas de papa
provenientes de plantas no
transgénicas, mientras que las rodajas
de papas transgénicas resisten más de
24 hs sin sufrir pardeamiento.
4. Planta De Café Descafeinada

El café descafeinado corresponde al 10% del total de café comercializado alrededor
del mundo. Investigadores japoneses desarrollaron una planta de café (Coffea sp.)
transgénica que expresa un ARN doble cadena correspondiente a la secuencia del gen
CaMXMT1. Dicho gen codifica una enzima que se encuentra involucrada en la vía de
biosíntesis de la cafeína. En las plantas que se transformaron con dicho ARNdc se indujo
el silenciamiento del gen CaMXMT1 provocando una disminución en los niveles de
cafeína entre un 30 y 50% respecto a los controles. Estos resultados demostraron que
esta tecnología puede ser utilizada para el desarrollo de plantas de café comerciales
descafeinadas.
Referencias Bibliográficas
 Ángel Emilio Martínez de Alba, Emilie Elvira Matelot, Hervé Vaucheret. 2013.Silencio de
genes en las plantas: una diversidad de vías. Biochimica et Biophysica Acta 1829. pág.
1300-1308.
 Fisher, A. y Merkenshlager, M. 2002. Silencio de genes, destino celular y organización
nuclear. Opinión actual en Genetics and Development 12: 193 - 197.
 Isher, S. 2010. Pequeñas vías silenciadoras de genes mediadas por ARN en C. elegans.
The International Journal of Biochemistry and Cell Biology, en prensa.
 Meehan, R., Dunican, D., Ruzov, A., Pennings, S.2005. Silenciamiento epigenético en la
embriogénesis. Experimental Cell Research 309: 241 - 249.
 Ogita, S. et al. Plant Mol. 2004.Aplicación de RNAi para confirmar theo bromine como el
intermediario principal para eficiente biosíntesis en plantas de café con potencial para la
construcción de variedades descafeinadas. Biol. pág. 54, 931-941
 S. Duharcourt, G. Lepere, E. Meyer. Trends Genet.2009. Reordenamientos del genoma
evolutivo en ciliados: una sustracción genómica natural mediada por transcripciones no
codificadas. pág. 344-350.
 Vaucheret, H. y Fagard, M. 2001. Silencio genético transcripcional en plantas: objetivos,
inductores y reguladores. TENDENCIAS en Genética 17: 29 - 36.

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